CN103432084A - 胸腺五肽冻干粉针的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种胸腺五肽冻干粉针的制备方法，该方法包括以下步骤：1）将甘露醇和胸腺五肽溶于注射用水制得甘露醇和胸腺五肽混合溶液，所述混合溶液中甘露醇的浓度为8g/100ml，胸腺五肽的浓度为0.2~1g/100ml；2）将甘露醇和胸腺五肽混合溶液用pH调节剂调节pH值到6~7；3）将调节pH值后的溶液用0.22μm的滤膜或滤芯过滤；4）灌装半加塞，冷冻干燥，真空状态下全压塞，轧盖，即得。本发明制备出澄清度好、外观好、复溶性好、水分低、有关物质含量低、质量稳定的胸腺五肽冻干粉针，同时缩短了本品的生产周期，减少了能源消耗。

Description

胸腺五肽冻干粉针的制备方法

技术领域

本发明属医药技术领域，具体涉及到一种注射用胸腺五肽冻干粉针的制备方法。

技术背景

胸腺五肽 (thymopentin，TP- 5)是胸腺分泌物的一种胸腺生成素Ⅱ的有效部分，由精氨酸、赖氨酸、天门冬氨酸、缬氨酸、酪氨酸五种氨基酸组成。它具有诱导和促进T淋巴细胞及其亚群分化、成熟和活化的作用；可调节T淋巴细胞的比例，调节和增强人体细胞免疫功能的作用；能促使有丝分裂原激活后的外周血中的T淋巴细胞成熟，增加T细胞在各种抗原或致有丝分裂原激活后各种淋巴因子的分泌，增加T细胞上淋巴因子受体的水平。基于其诸多的功效，临床上胸腺五肽已经被广泛的应用到治疗各种疾病，如慢性乙型肝炎、各种原发性或继发性T细胞缺陷病（如儿童先天性免疫缺陷病）、某些自身免疫性疾病（如类风湿性关节炎，系统性红斑狼疮，儿童支气管哮喘和哮喘性支气管炎等）、各种细胞免疫功能低下的疾病（如病毒性肝炎，预防上呼吸道感染，顽固性口腔溃疡等）以及肿瘤的辅助治疗。

胸腺五肽由Arg -Lys - Asp - Val - Tyr组成，其分子链中的Asp的肽键稳定性较差，在水溶液或酸性溶液中易断裂，降解为二肽和三肽，影响产品的质量，将其制备成不含水的冻干粉针剂型能有效的解决这一问题。

但是，现有的胸腺五肽冻干粉针产品质量较差，主要表现在稳定性差，有关物质超标，复溶后的澄清度差，冻干干燥过程中易产生分层使产品外观不合格等，另外现有的胸腺五肽冻干粉针制备周期长，能耗和生产成本较高。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术不足，提供一种胸腺五肽冻干粉针的制备方法，以提高胸腺五肽冻干粉针的质量，缩短生产周期。

上述目的是通过以下技术方案实现的：

一种胸腺五肽冻干粉针的制备方法，该方法包括以下步骤：

1）将甘露醇和胸腺五肽溶于注射用水制得甘露醇和胸腺五肽混合溶液，所述混合溶液中甘露醇的浓度为8g/100ml，胸腺五肽的浓度为0.2~1g/100ml；

2）将甘露醇和胸腺五肽混合溶液用pH调节剂调节pH值为6~7；

3）将调节pH值后的溶液用0.22μm的滤膜或滤芯过滤；

4）将过滤后的溶液进行灌装半加塞，冷冻干燥，真空状态下全压塞，轧盖，即得。

优选地，所述pH调节剂为乳酸。

优选地，所述注射用水是制备后不超过12小时的新鲜注射用水，其温度为20~30℃。

优选地，所述冷冻干燥包括以下步骤：

1）预冻：将过滤后的溶液置于-30℃保温3~4小时；

2）一次升华：在真空度低于10Pa，隔板温度为-10±1℃条件下升华14~16小时；

3）再干燥：在真空度低于10Pa，隔板温度为35±2℃再干燥3~4小时。

本发明的有益效果是：本发明对影响胸腺五肽冻干粉针质量的各个环节进行了大量的试验摸索，特别是对赋形剂的种类、原料与赋形剂的比例、pH值调节剂的种类及其调节的范围、冷冻干燥各阶段的控制等关键工艺进行筛选，从而制备出澄清度好、外观好、复溶性好、水分低、有关物质含量低、质量稳定的胸腺五肽冻干粉针，同时缩短了本品的生产周期，减少了能源消耗。

与现有的注射用胸腺五肽冻干粉针相比，本发明制得的胸腺五肽冻干粉具有以下优点：1）胸腺五肽和赋形剂甘露醇的质量比为1~10∶40~80，能保证产品冻干后的成型性。2）使用弱酸乳酸为pH值调节剂能保证胸腺五肽不降解和产品有关物质更低；配液中间体控制pH值6~7，能使得产品冻干复溶后澄清度更好。3）工艺简单可控且更易于节能降耗。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明进行详细说明。

实施例1

一种胸腺五肽冻干粉针的制备方法，该方法包括以下步骤：

1）称取甘露醇40.0g，用大约300ml新鲜制备（制备后不超过12小时）的20~30℃的注射用水溶解，称取胸腺五肽1.0g，用大约200ml新鲜制备20~30℃的注射用水溶解，将上述配置的两溶液混合，补加注射用水至500ml，制得甘露醇和胸腺五肽混合溶液；

2）将甘露醇和胸腺五肽混合溶液用质量浓度为25%的乳酸调节pH值到6；

3）将调节pH值后的溶液经灭过菌的0.22μm孔径气密性合格的平板滤器过滤；

4）将所得滤液每支0.5ml分装入3ml西林瓶中，得到半成品，放入冷冻干燥机，进行冷冻干燥，步骤如下：

①预冻：将半成品置于冻干机中，使温度降至-30℃以下，并在-30℃以下保温3小时。

②一次升华：在真空度低于10Pa条件下，设定隔板温度为-10±1℃，用30min将温度均匀升至-10±1℃，并在-10±1℃下保温14小时。

③再干燥：在真空度低于10Pa条件下，设定隔板温度为35±2℃，用60min将温度均匀升至35±2℃，并在35±2℃下保温3小时。

真空状态下全压塞，轧盖，即得到胸腺五肽冻干粉针制剂。

实施例2

一种胸腺五肽冻干粉针的制备方法，该方法包括以下步骤：

1）称取甘露醇80.0g，用大约500ml新鲜制备（制备后不超过12小时）的20~30℃的注射用水溶解，称取胸腺五肽10.0g，用大约500ml新鲜制备20~30℃的注射用水溶解，将上述配置的两溶液混合，补加注射用水至1000ml，制得甘露醇和胸腺五肽混合溶液；

2）将甘露醇和胸腺五肽混合溶液用质量浓度为25%的乳酸调节pH值到7；

3）将调节pH值后的溶液经灭过菌的0.22μm孔径气密性合格的平板滤器过滤；

4）将所得滤液每支1ml分装入3ml西林瓶中，得到半成品，放入冷冻干燥机，进行冷冻干燥，步骤如下：

①预冻：将半成品置于冻干机中，使温度降至-30℃以下，并在-30℃以下保温4小时。

②一次升华：在真空度低于10Pa条件下，设定隔板温度为-10±1℃，用30min将温度均匀升至-10±1℃，并在-10±1℃下保温16小时。

③再干燥：在真空度低于10Pa条件下，设定隔板温度为35±2℃，用60min将温度均匀升至35±2℃，并在35±2℃下保温4小时。

真空状态下全压塞，轧盖，即得到胸腺五肽冻干粉针制剂。

实施例3  不同pH调节剂和pH值控制范围的效果对比

本发明通过对配料阶段pH调节剂和pH值控制范围两因素下产品澄清度的对比，及不同pH调节剂下，产品的含量、有关物质的对比，优选出最佳的pH调节剂和pH值条件，结果见表1、表2：

表1  不同pH调节剂和pH值控制范围下产品澄清度对比

注：括号中为溶液的特定编号。

表2  不同pH调节剂下产品的含量和有关物质的对比

试验证明，配料阶段用25%乳酸，调节pH值至6~7，生产出来的胸腺五肽冻干产品的澄清度更好，另以25%乳酸为pH调节剂时，产品的有关物质更低，含量更稳定。总结：配料阶段用25%乳酸为pH调节剂，pH值调到6~7，生产出来的胸腺五肽冻干产品在澄清度、有关物质、含量等质量指标上都有较大的提高。

实施例4 本发明制备的胸腺五肽冻干粉针与市场上同规格产品的质量比较

为了验证本发明制备工艺下制得的胸腺五肽冻干粉针制剂质量的稳定性和优良性，我们对在本发明的胸腺五肽冻干粉针产品Ⅰ进行稳定性考察，并与已上市同类产品Ⅱ进行比较。进行如下试验，对其相关项目进行比较。有关物质和含量的检测方法：采用高效液相色谱法（《中国药典》2010年版二部附录Ⅴ D）。

有关物质  色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；0.05mol/L磷酸盐缓冲液（pH7.0）-甲醇（90：10）为流动相；检测波长为275nm。理论板数按胸腺五肽峰计算应不低于1200。取本品，用流动相稀释成含胸腺五肽5mg/ml的溶液，摇匀，作为供试品溶液。精密量取供试品溶液1ml，置100ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀（用流动相制成0.05mg/ml），作为对照品溶液。

取对照溶液20μl，注入液相色谱仪中，调节仪器灵敏度，使主成分的峰高约为满量程的10%-20%， 再取供试品溶液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间的2.5倍。供试品溶液色谱图中如有杂质峰，单一最大杂质峰面积应不得过对照溶液主峰面积的1.2倍（1.2%），各杂质峰面积之和应不得过对照溶液峰面积的2.2倍（2.2%）。

含量测定  色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；0.05mol/L磷酸盐缓冲液（pH7.0）-甲醇（90：10）为流动相；检测波长为275nm。理论板数按胸腺五肽峰计算应不低于1200。取本品，用流动相稀释成含胸腺五肽0.5mg/ml的溶液，摇匀，作为供试品溶液。精密称取胸腺五肽对照品25mg（使用前按对照品说明书处理）置50ml量瓶中，加流动相溶解稀释至刻度，摇匀或取用工作对照品1支，稀释至相应浓度（制成含胸腺五肽0.5mg/ml的溶液），作为对照品溶液。精密量取上述对照品、供试品溶液各20μl注入液相色谱仪中，记录色谱图。按外标峰面积计算。

其他项目测定方法按照《中国药典》2010年版附录要求进行测定。

本发明产品Ⅰ，在长期条件25℃ RH60％下，分别于0、3、6、9、12、18、24、36个月检测相关项目。结果如下：

表3  本发明制备工艺下产品Ⅰ稳定性考察结果

将本发明产品Ⅰ和已上市同类规格产品Ⅱ同条件下放置的数据进行比较，结果见下表：

通过对本发明产品Ⅰ的稳定性的考察，在36个月（有限期后一年）的稳定性试验中，产品Ⅰ的各项数据都符合规定，说明产品Ⅰ的质量很稳定。通过同已上市产品Ⅱ比较，该制备工艺制备的胸腺五肽冻干粉制剂具有水分低，有关物质明显减少，质量更稳定等优点。

Claims (4)

1.一种胸腺五肽冻干粉针的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤：

1）将甘露醇和胸腺五肽溶于注射用水制得甘露醇和胸腺五肽混合溶液，所述混合溶液中甘露醇的浓度为8g/100ml，胸腺五肽的浓度为0.2~1g/100ml；

2）将甘露醇和胸腺五肽混合溶液用pH调节剂调节pH值为6~7；

3）将调节pH值后的溶液用0.22μm的滤膜或滤芯过滤；

4）灌装半加塞，冷冻干燥，真空状态下全压塞，轧盖，即得。

2.根据权利要求1所述的胸腺五肽冻干粉针的制备方法，其特征在于：所述pH调节剂为乳酸。

3.根据权利要求1所述的胸腺五肽冻干粉针的制备方法，其特征在于：所述注射用水是制备后不超过12小时的新鲜注射用水，其温度为20~30℃。

4.根据权利要求1所述的胸腺五肽冻干粉针的制备方法，其特征在于：所述冷冻干燥包括以下步骤：

1）预冻：将过滤后的溶液置于-30℃保温3~4小时；

2）一次升华：在真空度低于10Pa，隔板温度为-10±1℃条件下升华14~16小时；

3）再干燥：在真空度低于10Pa，隔板温度为35±2℃再干燥3~4小时。