CN103431244A

CN103431244A - 一种提高克氏原螯虾幼虾免疫力的维生素饲料及添加剂

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Publication number: CN103431244A
Application number: CN2013104062604A
Authority: CN
Inventors: 王玉凤; 邵光明
Original assignee: Huazhong Normal University
Current assignee: Huazhong Normal University
Priority date: 2013-09-09
Filing date: 2013-09-09
Publication date: 2013-12-11
Anticipated expiration: 2033-09-09
Also published as: CN103431244B

Abstract

本发明公开了一种提高克氏原螯虾幼虾免疫力的维生素饲料及添加剂，属于水产养殖技术领域。提高克氏原螯虾幼虾免疫力的维生素饲料，包含如下按质量百分比计的组分：小麦粉10-30%，玉米粉10-20%，矿物质1-2%，鱼粉10-30%，黄豆粉30-50%，鱼油1-3%，维生素A0.0048-0.0060%，维生素C0.02-0.08%，维生素E0.02-0.06%，余量为糊精。提高克氏原螯虾幼虾免疫力的维生素饲料添加剂包含维生素A、维生素C和维生素E。本发明的饲料及添加剂能提高克氏原螯虾幼虾的成活率、体重增长率及鳃中酚氧化酶的活性，并降低虾肝胰腺中MDA含量和SOD活性，提高其免疫力。

Description

一种提高克氏原螯虾幼虾免疫力的维生素饲料及添加剂

技术领域

本发明属于水产养殖技术领域，涉及促进克氏原螯虾健康养殖的方法，特别涉及一种提高克氏原螯虾幼虾免疫力的维生素饲料及添加剂。

背景技术

克氏原螯虾（Procambarus clarkii）属节肢动物门、甲壳纲、十足目，又名红色沼泽螯虾，俗称淡水龙虾或小龙虾。目前人们对克氏原螯虾的科学养殖方法还知之较少，加上一些宣传资料的误导，认为克氏原螯虾对环境要求低、病害少等，忽视了对其病害的防治工作，导致克氏原螯虾养殖过程中出现重大病害，使克氏原螯虾养殖业遭受巨大损失。2007年，在江苏省的盱眙、金湖、泗阳、江都、南京等地先后发生了克氏原螯虾重大病害，死亡率最高达50%（张修旺,严维辉.克氏原螯虾疾病产生原因分析及防治对策.水产养殖,2009,(7):35）。2008年，在湖北省荆州等地也发生了克氏原螯虾暴发性疾病，造成了大面积养殖克氏原螯虾的死亡（陈昌福.克氏原螯虾的病原生物与养殖方式对疾病控制的关系.渔业致富指南,2008,(21):53-60）。从发病的克氏原螯虾体内已经检测到致病的细菌和病毒，而且发现这些细菌和病毒确实具有很强的传染性。对克氏原螯虾养殖过程中出现的疾病还没有非常有效的治疗方法，病害的出现成为当前克氏原螯虾养殖业持续发展的瓶颈问题。大量渔用杀虫药和抗生素的滥用，虽然对疾病有一定的控制作用，但往往会造成致病微生物的耐药性以及药物残留等问题，甚至引起整个水体生态环境的失衡。目前对提高克氏原螯虾免疫力的维生素饲料添加剂还没有研究报道。

发明内容

本发明的首要目的在于提供一种提高克氏原螯虾幼虾免疫力的维生素饲料。

本发明的目的还在于提供一种提高克氏原螯虾幼虾免疫力的维生素饲料添加剂。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种提高克氏原螯虾幼虾免疫力的维生素饲料，包含如下按质量百分比计的组分：小麦粉10-30%，玉米粉10-20%，矿物质1-2%，鱼粉10-30%，黄豆粉30-50%，鱼油1-3%，维生素A0.0048-0.0060%，维生素C0.02-0.08%，维生素E0.02-0.06%，余量为糊精。

所述的幼虾为2-4月龄的幼虾。

所述的矿物质的组成（质量%）如下：KCl，2-5%；NaH₂PO₄，8-12%；KH₂PO₄，18-25%；Ca(H₂PO₄)₂·2H₂O，23-30%；CaCO₃，8-13%；Ca-lac（乳酸钙），14-19%；MgSO₄·7H₂O，8-12%；CoCl₂·6H₂O，0.16-0.19%；CuCl₂，0.04-0.06%；KI，0.04-0.06%；MnSO₄·4H₂O，0.13-0.15%；柠檬酸铁，0.05-0.07%；ZnSO₄·7H₂O，0.04-0.06%；AlCl·6H₂O，1-1.5%。

优选为，所述的提高克氏原螯虾幼虾免疫力的维生素饲料，包含如下按质量百分比计的组分：小麦粉15%，玉米粉15%，矿物质1.5%，鱼粉20%，黄豆粉40%，鱼油2%，维生素A0.0048-0.0060%，维生素C0.02-0.08%，维生素E0.02-0.06%，余量为糊精。更优选的，维生素A0.0060%，维生素C0.02%，维生素E0.04%；矿物质的组成（质量%）如下：KCl，2.8%；NaH₂PO₄，10%；KH₂PO₄，21.5%；Ca(H₂PO₄)₂·2H₂O，26.5%；CaCO₃，10.5%；Ca-lac，16.5%；MgSO₄·7H₂O，10%；CoCl₂·6H₂O，0.176%；CuCl₂，0.051%；KI，0.058%；MnSO₄·4H₂O，0.143%；柠檬酸铁，0.061%；ZnSO₄·7H₂O，0.511%；AlCl·6H₂O，1.2%。

一种提高克氏原螯虾幼虾免疫力的维生素饲料添加剂，包含维生素A、维生素C和维生素E，其添加量分别为饲料总质量的0.0048-0.0060%、0.02-0.08%和0.02-0.06%；优选的，维生素A添加量为0.006%，维生素C添加量为0.02%，维生素E添加量为0.04%。

本发明相对于现有技术具有如下优点和效果：提高克氏原螯虾幼虾的免疫力。

本发明揭示了维生素A、维生素C和维生素E对克氏原螯虾生长及免疫力的影响。本发明的饲料及添加剂能提高克氏原螯虾幼虾的成活率、体重增长率及鳃中酚氧化酶的活性，并降低虾肝胰腺中MDA含量和SOD活性。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

实验开始前，随机选取约2月龄大的克氏原螯虾，平均体重0.5g，体形相近，体色相似，健康活泼，将3个因子：维生素A、C、E（VA、VC、VE）各设3个水平，根据正交旋转设计L₁₈（3⁷）表设计了18种组合（表1），将其分别添加到基础饲料中，安排了18种饲料配方（表2），分别投喂18组虾（每组25只）。每日喂食二次，分别为早上8:00-9:00与傍晚17:00-18:00，喂食量以第二次喂食时略有剩余为准。每日吸去水族箱内残饵与排泄物，并换水。充氧泵持续充氧，水温19℃左右（由于要检测幼虾的免疫力，对不良环境的抵抗力，所以饲养条件偏差）。50天后测定生长指标（成活率、体重增长率）以及免疫相关指标（丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、酚氧化酶（PO）活性）。

实施例1

提高克氏原螯虾幼虾免疫力的维生素饲料配方试验

试验饲料具体配方见表2。饲料通过混合均匀，用压面机压制成长条，再切成2mm左右长的沉性颗粒状，于60℃的烘箱内烘干8小时而成，密封贮存在4℃冰箱内。饲料在实验用水中3小时内不分散。糊精用来补平差额部分。

表1 不同处理组合中维生素A、C和E的含量（%干重）

表1中括号内的1、2、3代表各因子的三个水平。

表2 饲料配方（%干重）

其中，矿物质的组成（质量%）如下：KCl，2.8%；NaH₂PO₄，10%；KH₂PO₄，21.5%；Ca(H₂PO₄)₂·2H₂O，26.5%；CaCO₃，10.5%；Ca-lac，16.5%；MgSO₄·7H₂O，10%；CoCl₂·6H₂O，0.176%；CuCl₂，0.051%；KI，0.058%；MnSO₄·4H₂O，0.143%；柠檬酸铁，0.061%；ZnSO₄·7H₂O，0.511%；AlCl.6H₂O，1.2%。

实施例2

不同维生素添加量对克氏原螯虾成活率的影响试验

表3 各因素及其水平对克氏原螯虾成活率及体重增长率的极差分析

不同维生素添加量组合下，克氏原螯虾的成活率不同。根据表3的极差可以发现，C因子（维生素E的添加量）的极差最大，说明其对克氏原螯虾的成活率的影响最大，其次是B因子（维生素C添加量）。而A因子（维生素A添加量）的极差值（4）小于空列的极差值（5.4），说明其对克氏原螯虾的成活率的影响没有达到显著水平。由表3分析可以发现，因子水平组合为A₃B₁C₂或A₃B₃C₂时成活率最高，但由于A因子对克氏原螯虾的成活率的影响没有达到显著水平，B因子在水平1和3条件下的成活率相同，考虑到成本因素，A因子和B因子都可选水平1，即：要想获得最高成活率，可选A₁B₁C₂作为最优组合方案，即A因子的水平1，B因子的水平1，C因子的水平2，也就是维生素A添加量为0.0048%，维生素C添加量为0.02%，维生素E添加量为0.04%。

实施例3

不同维生素添加量对克氏原螯虾体重增长率的影响试验

不同维生素添加量组合下，克氏原螯虾的生长情况也不同。克氏原螯虾体重增长率[(终体重-起始体重)/起始体重]的极差分析结果见表3。由表3可知，C因子（维生素E的添加量）的极差最大，说明其对克氏原螯虾的体重增长率的影响最大。其次是A因子，而B因子的极差值（5.6）小于空列的极差值（11.8），说明其对克氏原螯虾体重增长率的影响没有达到显著水平。由表3分析可以发现，因子水平组合为A₃B₂C₂时体重增长率最高。但由于B因子对克氏原螯虾体重增长率的影响没有达到显著水平，考虑到成本因素，B因子可选水平1，即可选择A₃B₁C₂作为最优组合方案，即A因子的水平3，B因子的水平1，C因子的水平2，也就是维生素A添加量为0.0060%，维生素C添加量为0.02%，维生素E添加量为0.04%。

实施例4

不同维生素添加量对克氏原螯虾肝胰腺MDA含量的影响试验

生物体内，自由基作用于脂质发生过氧化反应，丙二醛（MDA）是脂质过氧化反应的最主要的产物之一，其在体内过多积累会对细胞产生毒害。因此其在体内含量越低，说明机体免疫力越高，清除这些毒害物质的能力越强。不同维生素添加量组合下，克氏原螯虾肝胰腺中MDA含量也不同。克氏原螯虾肝胰腺中MDA含量的极差分析结果见表4。由表4可知，三个因子都对克氏原螯虾肝胰腺中MDA含量有显著影响，其中B因子影响最大，A因子影响最小。由表4分析可以发现，因子水平组合为A₂B₁C₁时（维生素A添加量为0.0054%，维生素C添加量为0.02%，维生素E添加量为0.02%），克氏原螯虾肝胰腺中MDA含量最低。

表4 各因素及其水平对克氏原螯虾免疫相关指标的极差分析

实施例5

不同维生素添加量对克氏原螯虾肝胰腺SOD活力的影响试验

超氧化物歧化酶（SOD）是生物体内重要的抗氧化酶，能够清除体内自由基，对抗与阻断因氧自由基对细胞造成的损害。现有研究发现，在虾、蟹等甲壳动物中，饲料中添加适当的维生素提高了机体的抗氧化能力，使得机体内过氧化产物较少，而较低水平的过氧化产物（如MDA）不能刺激SOD活性，所以免疫力增高时会出现MDA含量和SOD活性都比较低的现象（Wang TT,Wang MY,Wang YF.Dietary reduction of fish meal,supplementation of vitaminC and fish oil may promote ovary maturation by improving digestibility and immunity inProcambarus clarkii(Crustacea:Decapoda).Aquaculture Research，2012,43:1669-1676；艾春香香，陈立侨，刘晓玲，高露姣，温小波.维生素C对中华绒螯蟹非特异性免疫的影响.水产学报,2008,32(2):249-256）。本试验中不同维生素添加量组合下，克氏原螯虾肝胰腺中SOD活性也不同。克氏原螯虾肝胰腺中SOD活性的极差分析结果见表4。由表4可知，三个因子中只有B因子对克氏原螯虾肝胰腺中SOD活性有显著影响，而A因子和C因子对克氏原螯虾肝胰腺中SOD活性的影响都不显著。由表4分析可以发现，因子水平组合为A₂B₁C₁时，克氏原螯虾肝胰腺中SOD活性最低。但由于A因子对克氏原螯虾肝胰腺中SOD活性的影响不显著，考虑到成本因素，可以选A₁B₁C₁（维生素A添加量为0.0048%，维生素C添加量为0.02%，维生素E添加量为0.02%）作为最优组合方案。

实施例6

不同维生素添加量对克氏原螯虾鳃组织PO活性的影响试验

酚氧化酶（PO）是在氧分子存在下，能把酚类氧化成醌的酶，进而形成黑色素，在机体免疫过程中起重要作用。已有研究表明，克氏原螯虾肝胰腺中PO活性较低，而鳃组织中PO活性较强（王建国,陆宏达.硫酸锌胁迫对克氏原螯虾非特异性免疫因子的影响.江苏农业学报,2011,27(1):129-136），所以本实验测定了不同维生素添加量对克氏原螯虾鳃中PO活性的影响。结果发现，不同维生素添加量组合下，克氏原螯虾鳃中PO活性也不同。克氏原螯虾鳃中PO活性的极差分析结果见表4。由表4可知，三个因子中只有C因子对克氏原螯虾鳃中PO活性有显著影响，而A、B因子的影响都未达到显著水平。由表4分析可以发现，因子水平组合为A₃B₂C₁时，克氏原螯虾鳃中PO活性最高。但由于A、B因子的影响都未达到显著水平，考虑成本因素，可以选择A₁B₁C₁作为最优组合方案，即维生素A添加量为0.0048%，维生素C添加量为0.02%，维生素E添加量为0.02%。

上述结果表明，在这三个影响因子中，维生素E的作用最大，其次是维生素C。添加一定量的维生素E能显著提高克氏原螯虾幼虾的成活率、体重增长率及鳃中酚氧化酶的活性。添加一定量的维生素C显著降低虾肝胰腺中MDA含量和SOD活性。然而过多地添加维生素C和E对克氏原螯虾的成活、生长和免疫力都有负面影响。综合考虑成活率、体重增长率、免疫相关指标及成本因素，最终选定A₃B₁C₂（维生素A添加量为0.0060%，维生素C添加量为0.02%，维生素E添加量为0.04%）作为最优组合方案。

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种提高克氏原螯虾幼虾免疫力的维生素饲料，其特征在于包含如下按质量百分比计的组分：小麦粉10-30%，玉米粉10-20%，矿物质1-2%，鱼粉10-30%，黄豆粉30-50%，鱼油1-3%，维生素A 0.0048-0.0060%，维生素C 0.02-0.08%，维生素E 0.02-0.06%，余量为糊精；所述的矿物质的组成如下：KCl，2-5%；NaH₂PO₄，8-12%；KH₂PO₄，18-25%；Ca(H₂PO₄)₂ ^.2H₂O，23-30%；CaCO₃，8-13%；Ca-lac，14-19%；MgSO₄ ^.7H₂O，8-12%；CoCl₂ ^.6H₂O，0.16-0.19%；CuCl₂，0.04-0.06%；KI，0.04-0.06%；MnSO₄ ^.4H₂O，0.13-0.15%；柠檬酸铁，0.05-0.07%；ZnSO₄ ^.7H₂O，0.04-0.06%；AlCl^.6H₂O，1-1.5%，以上百分比为质量百分比。

2.根据权利要求1所述的提高克氏原螯虾幼虾免疫力的维生素饲料，其特征在于包含如下按质量百分比计的组分：小麦粉15%，玉米粉15%，矿物质1.5%，鱼粉20%，黄豆粉40%，鱼油2%，维生素A 0.0048-0.0060%，维生素C 0.02-0.08%，维生素E 0.02-0.06%，余量为糊精。

3.根据权利要求2所述的提高克氏原螯虾幼虾免疫力的维生素饲料，其特征在于包含如下按质量百分比计的组分：小麦粉15%，玉米粉15%，矿物质1.5%，鱼粉20%，黄豆粉40%，鱼油2%，维生素A 0.0060%，维生素C 0.02%，维生素E 0.04%，余量为糊精。

4.根据权利要求3所述的提高克氏原螯虾幼虾免疫力的维生素饲料，其特征在于：所述的矿物质的组成如下：KCl，2.8%；NaH₂PO₄，10%；KH₂PO₄，21.5%；Ca(H₂PO₄)₂ ^.2H₂O，26.5%；CaCO₃，10.5%；Ca-lac，16.5%；MgSO₄ ^.7H₂O，10%；CoCl₂ ^.6H₂O，0.176%；CuCl₂，0.051%；KI，0.058%；MnSO₄ ^.4H₂O，0.143%；柠檬酸铁，0.061%；ZnSO₄ ^.7H₂O，0.511%；AlCl^.6H₂O，1.2%。

5.一种提高克氏原螯虾幼虾免疫力的维生素饲料添加剂，其特征在于：包含维生素A、维生素C 和维生素E，其添加量分别为饲料总质量的0.0048-0.0060%、0.02-0.08%和0.02-0.06%。

6.根据权利要求5所述的提高克氏原螯虾幼虾免疫力的维生素饲料添加剂，其特征在于：维生素A添加量为0.006%，维生素C添加量为0.02%，维生素E添加量为0.04%。