CN103430768A - 猪苓密环菌三级种的育种方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开的猪苓密环菌三级种的育种方法，包括备料、浸泡、装瓶、灭菌、冷却、接种、培养七个步骤。本发明解决了现有技术培育猪苓密环菌三级种时菌种生长缓慢、培育成本高的问题。本发明的猪苓密环菌三级种的育种方法直接采用阔叶枝条切段作为基料，原料来源广，比传统采用菌棒培养成本低；并且本发明所采用的培养基料灌装方便，生产效率高；本发明的培养基可有效避免有害物质和杂菌的影响，菌种成活率可达99.9%。
Description
技术领域
本发明属于微生物育种技术领域，具体涉及一种猪苓密环菌三级种的育种方法。
背景技术
猪苓为我国常用的菌类药材，别名野猪粪、地乌桃、粉猪苓等，已有2000多年的药用历史，为常用中药材，被《中华人民共和国药典》1990年版收载，具有利尿治水肿的功效。近年来研究发现，猪苓含猪苓多糖(glucan)，具有抗癌功效，是目前肿瘤治疗药物的主要原料之一。密环菌属担子菌纲伞菌目真菌的一属，密环菌分布很广，我国的云南、河北、山西、黑龙江、吉林、浙江、福建、广西、陕西、甘肃、新疆、四川、西藏等地均有，主要见于硬木森林或针叶树混合林中。“猪苓与密环菌的关系”（真菌学报，1992，,1（2）：142～145）表明，猪苓菌核与密环菌是一种共生关系，密环菌在猪苓菌核成长过程中可促进其快速生长。
近年来，随着猪苓药用价值的提高，其市场需求量急剧增大，猪苓的人工育种栽培越来越普及，猪苓密环菌的三级种需求量也越来越大，密环菌菌丝体的培养有液体深层发酵和固体发酵两种方法。液体深层发酵常受光照、水分、透气性等因素的影响，菌种成活率较低，且菌种生长较慢；采用固体发酵是目前较为常见的栽培方法，通常采用菌棒作为培养菌材，但成本较大，或用阔叶颗粒与锯末屑混合物作为基料，再与麸皮、白糖、石膏等辅料混合而制成的培养基，其成分复杂，成本高，且这种粉末状基料在灌装时不方便，效率较低。
发明内容
本发明的目的在于提供一种猪苓密环菌三级种的育种方法，解决了现有技术培育猪苓密环菌三级种时菌种生长缓慢、培育成本高的问题。
本发明所采用的技术方案是：猪苓密环菌三级种的育种方法，包括如下步骤：
第一步，备料
采割直径为5～10mm的阔叶树枝条，将枝条切成28～32mm的小段；
第二步，浸泡
将第一步制得的树枝条小段放入容器，加入清水至没过所述树枝条小段，并浸泡23～25小时；
第三步，装瓶
将经过第二步处理的树枝条小段捞出，沥水，装入菌种瓶，装入量为菌种瓶容量的95～98%，再加清水至菌种瓶瓶口，然后旋紧菌种瓶瓶盖；
第四步，灭菌
把第三步获得的菌种瓶放入灭菌箱灭菌，灭菌箱的温度设置为105～115℃，压强0.07～0.09MPa，持续3小时；
第五步，冷却
将经过第四步处理的菌种瓶取出，放置于室温下，使得菌种瓶的温度自然冷却至25℃以下；
第六步，接种
将经过第五步处理的菌种瓶中的水倒出，至菌种瓶中的空余部分占菌种瓶容量的45～50%，然后接入猪苓密环菌原种；
第七步，培养
将接种之后的菌种瓶放置于培养箱中，培养箱的温度设置为20～25℃，培养28～32天，直至菌种瓶中长满菌丝，制得猪苓密环菌三级种。
本发明的特点还在于，
第一步中的阔叶树为椴树、桦树、枫树、栎树、柞树或榛树中的一种。
第一步中的阔叶树枝条为椴树、桦树、枫树、栎树、柞树、榛树中的至少两种树的枝条的混合。
本发明的有益效果是：本发明的猪苓密环菌三级种的育种方法直接采用阔叶枝条切段作为基料，原料来源广，比传统采用菌棒培养成本低；并且本发明所采用的原料灌装方便，生产效率高；本发明的育种方法有效地避免了有害物质和杂菌的影响，菌种成活率可达99.9%。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行详细说明。
实施例1
猪苓密环菌三级种的育种方法，包括如下步骤：
第一步，备料
采割直径为5mm的椴树枝条，将枝条切成28mm的小段；
第二步，浸泡
将第一步制得的树枝条小段放入容器，加入清水至清水没过树枝条小段，并浸泡23小时；
第三步，装瓶
将经过第二步处理的树枝条小段捞出，沥水，装入菌种瓶，装入量为菌种瓶容量的95%，再加清水至菌种瓶瓶口，然后旋紧菌种瓶瓶盖；
第四步，灭菌
把第三步获得的菌种瓶放入灭菌箱灭菌，灭菌箱的温度设置为105℃，压强0.07MPa，持续3小时；
第五步，冷却
将经过第四步处理的菌种瓶取出，放置于室温下，使得菌种瓶的温度自然冷却至23℃；
第六步，接种
将经过第五步处理的菌种瓶中的水倒出，至菌种瓶中的空余部分占菌种瓶容量的45%，然后接入猪苓密环菌原种；
第七步，培养
将接种之后的菌种瓶放置于培养箱中，培养箱的温度设置为20℃，培养28天，直至菌种瓶中长满菌丝，制得猪苓密环菌三级种。
本实施例的猪苓密环菌三级种的培育方法，培养基成本低，基料灌装方便，生产效率高，并且有效地避免了有害物质和杂菌的影响，使得菌种成活率可达99%。
实施例2
猪苓密环菌三级种的育种方法，包括如下步骤：
第一步，备料
采割直径为10mm的枫树枝条，将枝条切成32mm的小段；
第二步，浸泡
将第一步制得的树枝条小段放入容器，加入清水至清水没过树枝条小段，并浸泡25小时；
第三步，装瓶
将经过第二步处理的树枝条小段捞出，沥水，装入菌种瓶，装入量为菌种瓶容量的98%，再加清水至菌种瓶瓶口，然后旋紧菌种瓶瓶盖；
第四步，灭菌
把第三步获得的菌种瓶放入灭菌箱灭菌，灭菌箱的温度设置为115℃，压强0.09MPa，持续3小时；
第五步，冷却
将经过第四步处理的菌种瓶取出，放置于室温下，使得菌种瓶的温度自然冷却至22℃；
第六步，接种
将经过第五步处理的菌种瓶中的水倒出，至菌种瓶中的空余部分占菌种瓶容量的50%，然后接入猪苓密环菌原种；
第七步，培养
将接种之后的菌种瓶放置于培养箱中，培养箱的温度设置为25℃，培养32天，直至菌种瓶中长满菌丝，制得猪苓密环菌三级种。
本实施例的猪苓密环菌三级种的培育方法，培养基成本低，基料灌装方便，生产效率高，并且有效地避免了有害物质和杂菌的影响，使得菌种成活率可达99.2%。
实施例3
猪苓密环菌三级种的育种方法，包括如下步骤：
第一步，备料
采割直径为8mm的榛树枝条，将枝条切成30mm的小段；
第二步，浸泡
将第一步制得的树枝条小段放入容器，加入清水至清水没过树枝条小段，并浸泡24小时；
第三步，装瓶
将经过第二步处理的树枝条小段捞出，沥水，装入菌种瓶，装入量为菌种瓶容量的96%，再加清水至菌种瓶瓶口，然后旋紧菌种瓶瓶盖；
第四步，灭菌
把第三步获得的菌种瓶放入灭菌箱灭菌，灭菌箱的温度设置为110℃，压强0.08MPa，持续3小时；
第五步，冷却
将经过第四步处理的菌种瓶取出，放置于室温下，使得菌种瓶的温度自然冷却至24℃；
第六步，接种
将经过第五步处理的菌种瓶中的水倒出，至菌种瓶中的空余部分占菌种瓶容量的48%，然后接入猪苓密环菌原种；
第七步，培养
将接种之后的菌种瓶放置于培养箱中，培养箱的温度设置为23℃，培养30天，直至菌种瓶中长满菌丝，制得猪苓密环菌三级种。
本实施例的猪苓密环菌三级种的培育方法，培养基成本低，基料灌装方便，生产效率高，并且有效地避免了有害物质和杂菌的影响，使得菌种成活率可达99.5%。
实施例4
猪苓密环菌三级种的育种方法，包括如下步骤：
第一步，备料
分别采割直径为10mm的椴树和枫树的枝条，将枝条切成28mm的小段；
第二步，浸泡
将第一步制得的树枝条小段放入容器，加入清水至清水没过树枝条小段，并浸泡23小时；
第三步，装瓶
将经过第二步处理的树枝条小段捞出，沥水，装入菌种瓶，装入量为菌种瓶容量的98%，再加清水至菌种瓶瓶口，然后旋紧菌种瓶瓶盖；
第四步，灭菌
把第三步获得的菌种瓶放入灭菌箱灭菌，灭菌箱的温度设置为115℃，压强0.07MPa，持续3小时；
第五步，冷却
将经过第四步处理的菌种瓶取出，放置于室温下，使得菌种瓶的温度自然冷却至23℃；
第六步，接种
将经过第五步处理的菌种瓶中的水倒出，至菌种瓶中的空余部分占菌种瓶容量的50%，然后接入猪苓密环菌原种；
第七步，培养
将接种之后的菌种瓶放置于培养箱中，培养箱的温度设置为25℃，培养30天，直至菌种瓶中长满菌丝，制得猪苓密环菌三级种。
本实施例的猪苓密环菌三级种的培育方法，培养基成本低，基料灌装方便，生产效率高，并且有效地避免了有害物质和杂菌的影响，使得菌种成活率可达99.1%。
实施例5
猪苓密环菌三级种的育种方法，包括如下步骤：
第一步，备料
分别采割直径为8mm的枫树和柞树的枝条，将枝条切成28mm的小段；
第二步，浸泡
将第一步制得的树枝条小段放入容器，加入清水至清水没过树枝条小段，并浸泡23小时；
第三步，装瓶
将经过第二步处理的树枝条小段捞出，沥水，装入菌种瓶，装入量为菌种瓶容量的98%，再加清水至菌种瓶瓶口，然后旋紧菌种瓶瓶盖；
第四步，灭菌
把第三步获得的菌种瓶放入灭菌箱灭菌，灭菌箱的温度设置为115℃，压强0.07MPa，持续3小时；
第五步，冷却
将经过第四步处理的菌种瓶取出，放置于室温下，使得菌种瓶的温度自然冷却至23℃；
第六步，接种
将经过第五步处理的菌种瓶中的水倒出，至菌种瓶中的空余部分占菌种瓶容量的50%，然后接入猪苓密环菌原种；
第七步，培养
将接种之后的菌种瓶放置于培养箱中，培养箱的温度设置为25℃，培养30天，直至菌种瓶中长满菌丝，制得猪苓密环菌三级种。
本实施例的猪苓密环菌三级种的培育方法，培养基成本低，基料灌装方便，生产效率高，并且有效地避免了有害物质和杂菌的影响，使得菌种成活率可达99.9%。
实施例6
猪苓密环菌三级种的育种方法，包括如下步骤：
第一步，备料
分别采割直径为8mm的椴树、桦树和栎树的枝条，将枝条切成28mm的小段；
第二步，浸泡
将第一步制得的树枝条小段放入容器，加入清水至清水没过树枝条小段，并浸泡23小时；
第三步，装瓶
将经过第二步处理的树枝条小段捞出，沥水，装入菌种瓶，装入量为菌种瓶容量的98%，再加清水至菌种瓶瓶口，然后旋紧菌种瓶瓶盖；
第四步，灭菌
把第三步获得的菌种瓶放入灭菌箱灭菌，灭菌箱的温度设置为115℃，压强0.07MPa，持续3小时；
第五步，冷却
将经过第四步处理的菌种瓶取出，放置于室温下，使得菌种瓶的温度自然冷却至23℃；
第六步，接种
将经过第五步处理的菌种瓶中的水倒出，至菌种瓶中的空余部分占菌种瓶容量的50%，然后接入猪苓密环菌原种；
第七步，培养
将接种之后的菌种瓶放置于培养箱中，培养箱的温度设置为25℃，培养30天，直至菌种瓶中长满菌丝，制得猪苓密环菌三级种。
本实施例的猪苓密环菌三级种的培育方法，培养基成本低，基料灌装方便，生产效率高，并且有效地避免了有害物质和杂菌的影响，使得菌种成活率可达99.7%。
Claims (3)
1.猪苓密环菌三级种的育种方法，其特征在于，包括如下步骤：
第一步，备料
采割直径为5～10mm的阔叶树枝条，将枝条切成28～32mm的小段；
第二步，浸泡
将第一步制得的树枝条小段放入容器，加入清水至没过所述树枝条小段，并浸泡23～25小时；
第三步，装瓶
将经过第二步处理的树枝条小段捞出，沥水，装入菌种瓶，装入量为菌种瓶容量的95～98%，再加清水至菌种瓶瓶口，然后旋紧菌种瓶瓶盖；
第四步，灭菌
把第三步获得的菌种瓶放入灭菌箱灭菌，灭菌箱的温度设置为105～115℃，压强0.07～0.09MPa，持续3小时；
第五步，冷却
将经过第四步处理的菌种瓶取出，放置于室温下，使得菌种瓶的温度自然冷却至25℃以下；
第六步，接种
将经过第五步处理的菌种瓶中的水倒出，至菌种瓶中的空余部分占菌种瓶容量的45～50%，然后接入猪苓密环菌原种；
第七步，培养
将接种之后的菌种瓶放置于培养箱中，培养箱的温度设置为20～25℃，培养28～32天，直至菌种瓶中长满菌丝，制得猪苓密环菌三级种。
2.如权利要求1所述的猪苓密环菌三级种的育种方法，其特征在于，第一步中所述的阔叶树为椴树、桦树、枫树、栎树、柞树或榛树中的一种。
3.如权利要求1所述的猪苓密环菌三级种的育种方法，其特征在于，第一步中所述的阔叶树枝条为椴树、桦树、枫树、栎树、柞树、榛树中的至少两种树的枝条的混合。
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| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN103430768A (zh) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104718983A (zh) * | 2015-03-07 | 2015-06-24 | 甘肃天水岐黄药业有限责任公司 | 一种人工栽培猪苓的菌种驯化方法 |
| CN104718984A (zh) * | 2015-03-07 | 2015-06-24 | 甘肃天水岐黄药业有限责任公司 | 一种基于黄芪药渣的猪苓栽培方法 |
| CN105917919A (zh) * | 2016-04-29 | 2016-09-07 | 绥宁县博世康天麻科技开发有限责任公司 | 用木片培养密环菌及天麻快速高产栽培的方法 |
| CN107298595A (zh) * | 2017-08-16 | 2017-10-27 | 谭会平 | 一种用于猪苓种植的纯天然生态肥料及其制备方法 |
| CN107628837A (zh) * | 2017-10-11 | 2018-01-26 | 青岛农业大学 | 一种利用果树枝条和贝壳粉进行蜜环菌繁殖的栽培基质及栽培方法 |
| CN108718910A (zh) * | 2018-06-04 | 2018-11-02 | 武宣县东胜食用菌有限公司 | 一种枝条菌棒的生产方法 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20040012238A (ko) * | 2002-08-01 | 2004-02-11 | 김명곤 | 뽕나무 버섯 균사체 생산방법 및 그 배지 조성물 |
| CN101940116A (zh) * | 2010-08-11 | 2011-01-12 | 北京中医药大学 | 一种天麻林下一次成麻栽培技术方法 |
| CN102037853A (zh) * | 2009-10-21 | 2011-05-04 | 辽宁省林业科学研究院 | 猪苓人工栽培菌种和蜜环菌及猪苓菌种菌核化生产方法 |
| CN102342219A (zh) * | 2011-08-03 | 2012-02-08 | 宜昌森源食用菌有限责任公司 | 一种瓶装蜜环菌菌种的制备方法 |
-
2013
- 2013-08-02 CN CN2013103344088A patent/CN103430768A/zh active Pending
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20040012238A (ko) * | 2002-08-01 | 2004-02-11 | 김명곤 | 뽕나무 버섯 균사체 생산방법 및 그 배지 조성물 |
| CN102037853A (zh) * | 2009-10-21 | 2011-05-04 | 辽宁省林业科学研究院 | 猪苓人工栽培菌种和蜜环菌及猪苓菌种菌核化生产方法 |
| CN101940116A (zh) * | 2010-08-11 | 2011-01-12 | 北京中医药大学 | 一种天麻林下一次成麻栽培技术方法 |
| CN102342219A (zh) * | 2011-08-03 | 2012-02-08 | 宜昌森源食用菌有限责任公司 | 一种瓶装蜜环菌菌种的制备方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 傅宇泽等: "蜜环菌栽培种培养基的筛选研究", 《特产研究》, no. 02, 31 December 1994 (1994-12-31) * |
| 关良洲: "蜜环菌半固体培养基培育方法", 《食用菌》, no. 01, 15 February 1996 (1996-02-15) * |
| 陈顺方等: "蜜环菌的生产技术", 《现代农业科技》, no. 14, 31 December 2009 (2009-12-31) * |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104718983A (zh) * | 2015-03-07 | 2015-06-24 | 甘肃天水岐黄药业有限责任公司 | 一种人工栽培猪苓的菌种驯化方法 |
| CN104718984A (zh) * | 2015-03-07 | 2015-06-24 | 甘肃天水岐黄药业有限责任公司 | 一种基于黄芪药渣的猪苓栽培方法 |
| CN105917919A (zh) * | 2016-04-29 | 2016-09-07 | 绥宁县博世康天麻科技开发有限责任公司 | 用木片培养密环菌及天麻快速高产栽培的方法 |
| CN105917919B (zh) * | 2016-04-29 | 2017-05-17 | 绥宁县博世康天麻科技开发有限责任公司 | 用木片培养密环菌及天麻快速高产栽培的方法 |
| CN107298595A (zh) * | 2017-08-16 | 2017-10-27 | 谭会平 | 一种用于猪苓种植的纯天然生态肥料及其制备方法 |
| CN107628837A (zh) * | 2017-10-11 | 2018-01-26 | 青岛农业大学 | 一种利用果树枝条和贝壳粉进行蜜环菌繁殖的栽培基质及栽培方法 |
| CN108718910A (zh) * | 2018-06-04 | 2018-11-02 | 武宣县东胜食用菌有限公司 | 一种枝条菌棒的生产方法 |
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