CN103415298A - 获自猕猴桃的心脏保护剂 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及心脏保护剂。具体地,本发明涉及从猕猴桃制备的心脏保护提取物及其级分。
Description
技术领域
本发明涉及心脏保护剂。具体地,本发明涉及从猕猴桃(kiwi fruit)制备的心脏保护提取物及其级分。
背景技术
已知的是,水果和蔬菜的高消费是可以降低心血管疾病和某些营养相关癌症(包括胃癌、结肠癌、乳腺癌和前列腺癌)风险的重要预防措施。在心血管疾病和癌症的起始和发展中涉及的一个因素是,导致羟基和过氧自由基或化合物产生的异常氧化性应激过程的出现。进食水果和蔬菜的有益效果可以部分地通过已知起抑制作用的抗氧化剂来解释,所述抗氧化剂包括维生素C、维生素E和类胡萝卜素(诸如α和β类胡萝卜素)、番茄红素、叶黄素等。但是,许多新出现的资料也指示水果中的某些化合物的非抗氧化性能在不同疾病中的作用。
已经投入大量工作来鉴定可能在某些疾病的预防中起作用的、源自水果和蔬菜的生物活性化合物。已经认为水果和蔬菜有益于心血管疾病。水果和蔬菜的有益作用可以通过其中含有的抗氧化剂和生物活性的非抗氧化性组分来解释。这些化合物可以单独地或协同地起作用以保护脂蛋白和血管细胞免于氧化,或者通过其它机理(非抗氧化途径),诸如降低血浆脂质水平(LDL胆固醇、甘油三酯)和血小板聚集应答(1,2)。
需要会提供心脏保护性能和其它有益性能的、获自水果和蔬菜的其它制品。
发明内容
本发明涉及水果中的心脏保护剂。具体地,本发明涉及从猕猴桃制备的心脏保护提取物及其级分。
在某些实施方案中,本发明提供了一种组合物,其整体地或部分地包含获自猕猴桃科(family Actinidia)果实的水果提取物,所述提取物的特征在于在贮存过程中是稳定的且保留生物活性。在其它实施方案中,本发明提供了一种获自猕猴桃科果实的水果提取物或级分,所述提取物被稳定化以在贮存过程中保留生物活性。在某些实施方案中,通过热处理来稳定化所述水果提取物或级分。在某些实施方案中,所述热处理足以稳定化所述提取物的生物活性。在某些实施方案中,所述热处理包括加热至约70-120摄氏度,更优选地加热至约80-100摄氏度。在某些实施方案中,通过除去级分中的某些酶,例如通过超滤,使所述水果提取物或级分稳定化。在某些实施方案中,所述生物活性是,在体外血小板聚集测定中抑制血小板聚集。在某些实施方案中,在4摄氏度保持24天后,所述提取物或级分在体外血小板聚集测定中具有超过4%的标准化至第0天的抑制活性。在某些实施方案中,所述提取物或级分可以被进一步表征为,当在4摄氏度储存4天时,与新鲜提取物级分相比,其保留所述生物活性分子的至少80%生物活性,其中所述生物活性是在体外血小板聚集测定中抑制血小板聚集。在某些实施方案中,所述提取物或级分可以被进一步表征为,当在4摄氏度储存至少18天时,与新鲜提取物级分相比,其保留所述生物活性分子的至少80%生物活性,其中所述生物活性是在体外血小板聚集测定中抑制血小板聚集。在某些实施方案中,所述提取物或级分可以被进一步表征为,当在4摄氏度储存至少24天时,与新鲜提取物级分相比,其保留所述生物活性分子的至少80%生物活性,其中所述生物活性是在体外血小板聚集测定中抑制血小板聚集。在某些实施方案中,所述生物活性是抑制血管紧张素转化酶。
在某些实施方案中,将所述提取物或级分脱脂。在某些实施方案中,所述提取物或级分包含具有小于3000道尔顿的分子量的生物活性分子。在某些实施方案中,所述提取物或级分包含具有小于1000道尔顿的分子量的生物活性分子。在某些实施方案中,用100%流动相(A)水-甲酸(100:0.1,v/v/v)至100%(B)乙腈-甲酸(100:0.1,v/v/v)历时35分钟在Zorbax1.8μM颗粒快速解析C18柱(4.6mm×50mm,1.8μm)上对所述提取物进行液相色谱法,所述水果提取物或级分在紫外光谱扫描中表现出在大约1.30和1.81分钟处的主峰。在某些实施方案中,所述提取物或级分表现出如图6所示的主要紫外光谱峰。在某些实施方案中,用100%流动相(A)水-甲酸(100:0.1,v/v/v)至100%(B)乙腈-甲酸(100:0.1,v/v/v)历时35分钟在Zorbax1.8μM颗粒快速解析C18柱(4.6mm×50mm,1.8μm)上对所述提取物进行液相色谱法,所述水果提取物在质谱法100-1000Mw中在负模式扫描时表现出在大约1.61、30.18和30.87处的主峰。在某些实施方案中,所述提取物或级分表现出如图7所示的主要总离子流色谱图峰。
在某些实施方案中,本发明提供了一种糖浆剂或溶液,其包含如上所述的提取物或级分。在某些实施方案中,本发明提供了一种粉末,其包含如上所述的提取物或级分。在某些实施方案中,本发明提供了一种口服递送媒介物,其包含所述提取物或级分、或如上所述的其糖浆剂、溶液或粉末。在某些实施方案中,本发明提供了一种功能性食物或食品,其包含如上所述的组合物、糖浆剂、溶液或粉末。在某些实施方案中,所述功能性食物或食品选自:饮料、烘焙物、布丁、乳制品、甜点、快餐食品、冷冻甜点或小礼品(novelties)、准备好的冷冻餐、糖果、零食产品、汤、糊状食品、调味料、色拉调味汁(saladdressings)、准备好的肉制品、奶酪和酸乳。在某些实施方案中,本发明提供了一种营养补剂,其包含如上所述的组合物、糖浆剂、溶液或粉末。在某些实施方案中,所述营养补剂选自:软胶囊剂、硬壳胶囊剂、可咀嚼的胶囊剂、健康棒和补剂粉末。
在某些实施方案中,本发明提供了在受试者中预防或治疗从血小板活化和/或聚集开始或表征的疾病状态、改善或维持心脏健康、改善或维持心血管健康、改善或维持循环健康、或改善或维持血流量(bloodflow)的方法,所述方法包括:给所述受试者施用水果提取物或级分、或如上所述的糖浆剂、粉末、口服递送媒介物或营养产品。在某些实施方案中,所述施用会抑制血小板聚集。在某些实施方案中,所述施用会导致抗血栓活性。在某些实施方案中,所述施用会导致血液变稀。在某些实施方案中,所述施用会导致血压降低。
在某些实施方案中,本发明提供了所述提取物或级分、或如上所述的糖浆剂、粉末、口服递送媒介物或营养产品的下述用途:在受试者中预防或治疗从血小板活化和/或聚集开始或表征的疾病状态、改善或维持心脏健康、改善或维持心血管健康、改善或维持循环健康、或改善或维持血流量,或在受试者中改善或维持血压。在某些实施方案中,所述从血小板活化和/或聚集开始或表征的疾病状态选自:血栓形成、动脉硬化和/或斑块形成。
在某些实施方案中,本发明提供了用于生产稳定的和生物活性的猕猴桃提取物的方法,所述方法包括:生产猕猴桃提取物,和在特定条件下加热所述猕猴桃提取物,使得所述提取物在贮存期间保留生物活性。在某些实施方案中,所述加热步骤包括:将所述级分加热至约70至约100摄氏度保持大于约5分钟。在某些实施方案中,如下生产猕猴桃提取物:在加热之前或之后,沉淀猕猴桃汁或匀浆物,得到沉淀级分和上清液级分,并保留所述上清液级分,得到所述生物活性的猕猴桃提取物。在某些实施方案中,所述沉淀步骤包括在至少3000g离心。在某些实施方案中,在加热之前或之后,另外通过超滤来加工所述提取物。在某些实施方案中,所述超滤具有在1000-3000道尔顿的截止值。
在某些实施方案中,本发明提供了通过前述方法生产的稳定的和生物活性的猕猴桃提取物。在某些实施方案中,权利要求35的稳定的和生物活性的猕猴桃提取物,其中用100%流动相(A)水-甲酸(100:0.1,v/v/v)至100%(B)乙腈-甲酸(100:0.1,v/v/v)历时35分钟在Zorbax1.8μM颗粒快速解析C18柱(4.6mm×50mm,1.8μm)上对所述提取物进行液相色谱法,所述提取物在紫外光谱扫描中表现出在大约1.30和1.81分钟处的主峰,并且用100%流动相(A)水-甲酸(100:0.1,v/v/v)至100%(B)乙腈-甲酸(100:0.1,v/v/v)历时35分钟在Zorbax1.8μM颗粒快速解析C18柱(4.6mm×50mm,1.8μm)上对所述提取物进行液相色谱法,所述提取物在质谱法100-1000Mw中在负模式扫描时表现出在大约1.61、30.18和30.87的主峰,且其中所述提取物在体外血小板聚集测定中抑制血小板聚集。在某些实施方案中,上述的稳定的和生物活性的猕猴桃提取物的特征在于,当在4摄氏度储存至少24天时,与新鲜提取物级分相比,其保留所述生物活性分子的超过4%生物活性,其中所述生物活性是在体外血小板聚集测定中抑制血小板聚集。
在其它实施方案中,本发明提供了一种水果提取物级分,其中所述级分包含具有小于3000、2000或1000道尔顿的分子量的生物分子。在某些实施方案中,所述提取物被脱脂。在某些实施方案中,所述水果是猕猴桃科果实。在某些实施方案中,通过热处理将所述提取物稳定化。在某些实施方案中,所述热处理包括:加热至约70-100摄氏度。在某些实施方案中,用100%流动相(A)水-甲酸(100:0.1,v/v/v)至100%(B)乙腈-甲酸(100:0.1,v/v/v)历时35分钟在Zorbax1.8μM颗粒快速解析C18柱(4.6mm×50mm,1.8μm)上对所述提取物进行液相色谱法,所述水果提取物在紫外光谱扫描时表现出在大约1.30和1.81分钟处的主峰。在某些实施方案中,所述提取物表现出如图6所示的主要紫外光谱峰。在某些实施方案中,用100%流动相(A)水-甲酸(100:0.1,v/v/v)至100%(B)乙腈-甲酸(100:0.1,v/v/v)历时35分钟在Zorbax1.8μM颗粒快速解析C18柱(4.6mm×50mm,1.8μm)上对所述提取物进行液相色谱法,所述水果提取物在质谱法100-1000Mw中在负模式扫描时表现出在大约1.61、30.18和30.87处的主峰。在某些实施方案中,所述提取物表现出如图7所示的主要总离子流色谱图峰。
在某些实施方案中,本发明提供了一种猕猴桃提取物级分,其包含具有小于3000、2000或1000道尔顿的分子量的生物活性分子,其中用100%流动相(A)水-甲酸(100:0.1,v/v/v)至100%(B)乙腈-甲酸(100:0.1,v/v/v)历时35分钟在Zorbax1.8μM颗粒快速解析C18柱(4.6mm×50mm,1.8μm)上对所述提取物进行液相色谱法,所述提取物在紫外光谱扫描中表现出在大约1.30和1.81分钟处的主峰,并且用100%流动相(A)水-甲酸(100:0.1,v/v/v)至100%(B)乙腈-甲酸(100:0.1,v/v/v)历时35分钟在Zorbax1.8μM颗粒快速解析C18柱(4.6mm×50mm,1.8μm)上对所述提取物进行液相色谱法,所述提取物在质谱法100-1000Mw中在负模式扫描时表现出在大约1.61、30.18和30.87处的主峰,且其中所述提取物在体外血小板聚集测定中抑制血小板聚集。
在某些实施方案中,本发明提供了用于生产稳定的和生物活性的猕猴桃提取物的方法,所述方法包括:分级分离(fractionating)获自猕猴桃属果实(Actinidia fruit)的汁,以生产和提取级分,并将所述提取物级分加热至约70至约100摄氏度。在某些实施方案中,所述分级分离包括尺寸分级分离。在某些实施方案中,所述加热包括:将所述级分加热是所述约70至约100摄氏度保持大于约5分钟。在某些实施方案中,本发明提供了通过前述方法生产的稳定的和生物活性的猕猴桃提取物。在某些实施方案中,用100%流动相(A)水-甲酸(100:0.1,v/v/v)至100%(B)乙腈-甲酸(100:0.1,v/v/v)历时35分钟在Zorbax1.8μM颗粒快速解析C18柱(4.6mm×50mm,1.8μm)上对所述提取物进行液相色谱法,所述稳定的和生物活性的猕猴桃提取物在紫外光谱扫描中表现出在大约1.30和1.81分钟处的主峰,并且用100%流动相(A)水-甲酸(100:0.1,v/v/v)至100%(B)乙腈-甲酸(100:0.1,v/v/v)历时35分钟在Zorbax1.8μM颗粒快速解析C18柱(4.6mm×50mm,1.8μm)上对所述提取物进行液相色谱法,所述稳定的和生物活性的猕猴桃提取物在质谱法100-1000Mw中在负模式扫描时表现出在大约1.61、30.18和30.87处的主峰,且其中所述提取物在体外血小板聚集测定中抑制血小板聚集。
附图说明
图1显示了猕猴桃提取物的部分分级分离操作的示意图。
图2显示了所述提取物的ADP活性诱导的血小板聚集抑制。
图3显示了花生四烯酸诱导的血小板聚集的抑制。
图4显示了KFE对人血清的ACE活性的影响。
图5显示了脱脂的、超滤纯化的猕猴桃提取物级分的紫外扫描。
图6提供了本发明的猕猴桃提取物的紫外光谱200-400nm扫描的色谱图。
图7提供了本发明的猕猴桃提取物在负模式质谱扫描100-1000Mw的色谱图。
定义
本文使用的术语“级分”表示部分地纯化的提取物或从提取物纯化的化合物。
术语“纯化的”或“纯化”是指,从目标组分(诸如引起血小板聚集抑制的组分)除去一些污染物的任何过程的结果。由此增加样品中的纯化的组分的百分比。
本文使用的术语“生理上可接受的载体”表示,通常与油性药物一起使用的任何载体或赋形剂。这样的载体或赋形剂包括、但不限于:油、淀粉、蔗糖和乳糖。
本文使用的术语“口服递送媒介物”表示,口服地递送药物的任何方式,包括、但不限于,胶囊剂、丸剂、片剂和糖浆剂。
本文使用的术语“食物产品”表示,适合人类、非反刍类动物或反刍类动物消费的任何一种或多种食物。“食物产品”可以是制备的和包装的食物(例如,蛋黄酱、色拉调味汁、面包或奶酪食物)或动物饲料(例如,挤出的和丸粒化的动物饲料或粗混合饲料)。“准备好的食物产品”是指被批准用于人类消费的任何预包装食物。
本文使用的术语“食品”表示适合人类或动物消费的任何物质。
本文使用的术语“功能性食物”是指,除了供给营养物的基本营养功能以外,还被声称具有促进健康和/或预防疾病性能的任何新鲜的或经过加工的食物。功能性食物有时被称作营养制品。一般分类包括从功能性食物成分制备的或者用促进健康的添加剂增强的加工食物,如“富含维生素的”产品,以及具有附随的特定声明的新鲜食物(例如,蔬菜)。含有活培养物的发酵食物经常也被视作具有益生菌益处的功能性食物。
本文使用的术语“营养补剂”表示这样的食物产品:其被配制为要用作饮食的一部分的饮食补剂或营养补剂。
具体实施方式
本发明涉及心脏保护剂。具体地,本发明涉及从猕猴桃制备的心脏保护提取物及其级分。
猕猴桃是猕猴桃属中最众所周知的作物(3)。尽管国际市场上的猕猴桃属果实销售以单一猕猴桃品种美味猕猴桃(Actinidia deliciosa)“Hayward”为主,但是在该属中存在大量具有相差较大的形状、大小和多毛状态的品种和选择。它们也会呈现感官属性(诸如果肉颜色、风味和味道)和营养属性(诸如维生素C水平、多酚和类胡萝卜素含量)的宽泛变化(4,5)。极少经过加工的猕猴桃食物产品类型是消费者商购可得的。猕猴桃主要作为整个水果来进食。已经将猕猴桃加工成产品的少数几个例子包括速冻甜食和掺合汁,以及最近的少数天然猕猴桃饮料诸如Kiwi CrushTM(Vital Food Processors Ltd,ManukauCity,Auckland,新西兰)。含有水果营养组分和所需的生物活性物质(包括多酚、抗坏血酸和水溶性多糖(果胶多糖),它们对于功能性食物用途而言可能是有利的)的猕猴桃提取物会增加消费者可得到的猕猴桃产品的范围(3)。随着日益增长的健康意识,消费者对具有多种消费者益处(包括确定的健康益处、增加的便利和减少的添加剂)的可接受的营养食物的需求增加。
血小板牵涉动脉粥样硬化和血栓性事件的发展,因此用药物降低血小板活性会减少疾病的发病率和严重程度(1)。在本发明的实施方案的开发过程中进行的实验,在随机交叉研究中评价了消费猕猴桃是否会在健康人志愿者中调节血小板活性和血浆脂质。据报道,持续28天每天消费2个或3个猕猴桃,会使对胶原和ADP的血小板聚集应答与对照相比下降18%(6)。另外,猕猴桃消费会使血液甘油三酯水平与对照相比下降15%,但是就血浆胆固醇水平而言没有观察到这种效果。所有这些数据指示,消费猕猴桃有益于心血管疾病。用猕猴桃提取物(KFE;表示为用于制备KFE的果肉的重量)温育会抑制血小板聚集,但是这并非最佳制品,因为它需要大量果肉,并且由于果汁中的不希望的反应,甚至在4℃贮存可以丧失活性。另外,认为在种子(和在更低的程度上,毛)中的单宁类和油可以与高酸性的果肉反应,产生不希望的气味和颜色。许多猕猴桃物种具有难以从果汁除去的细毛。软制浆方法是优选的,因为认为需要避免过度细胞裂解和破碎果实组分(诸如种子)。种子可能含有有毒物质(例如杏仁)或促进果汁的异味或不希望的风味。
许多水果是酸性的,并且具有6或更低的pH的那些水果通常最可能受到影响。广泛使用的且相对廉价的蔗糖是碱性的,并且当被加入酸性果肉中时,似乎会诱导或参与其它不希望的反应。导致本发明的实施方案的研究指示,由于种子破碎或过度细胞损伤而进入果汁中的物质会促进不利地影响成功的猕猴桃汁生产的因素,诸如褐变和捕集因素(catch factor)的问题。猕猴桃的酸性高于大多数水果,具有大约3的pH。这也可能避免促进捕集(catch)、变色等的任何可能的副反应。葡萄糖和果糖常见于许多水果中。通常,这会掩蔽水果的一些不希望的性质诸如苦味或过高的酸度,且部分地由于一般人对甜味的亲和性。在某些实施方案中,果汁产品必须经过巴氏消毒,这是许多其它果汁和加工的特征。因此,由甜味剂促成的任何防腐作用将有助于延长产品的贮存期限。可能的是,由所述组合产生的pH改变可能造成不希望的副反应。此外,应当指出,在贮存下,大多数果汁的化学成分会变化。就猕猴桃而言,果汁的酸含量会下降。因此,在某些实施方案中,合适的缓冲剂或pH调节剂的添加有助于在更长的时间段内保持产品的pH。这也会延迟导致果汁褐变或变色的任何不希望的长期反应。
在某些实施方案中,水果、尤其是猕猴桃的活性级分被用于多种制剂中,并且优选地加入用于人类消费的任何基质中,这是本领域已知的。在某些优选的实施方案中,所述活性级分的特征在于,对于特定用途(诸如防止血小板聚集或附着)而言具有高效力,基本上不含有无活性物质,具有与未处理的活性级分相比增加的贮存期限。在某些实施方案中,所述级分通过特定方法来生产,在所述方法中,将果汁或果肉级分离心、过滤和脱脂,以提供高度富集的血小板抑制剂(即,与未加工的粗果汁相比,超过10、20或30倍,且至多约50倍或100倍)。该方法会生产具有增强的贮存期限且对加热稳定的活性级分。在某些优选的实施方案中,对活性级分进行热处理,以进一步增加稳定性。在其它实施方案中,提供了从如上所述的活性级分重构的(reconstituted)产品。已经为猕猴桃属的成员开发了本发明。除了果汁以外的水果产品也在本发明实施方案的范围内。这些水果通常具有低pH(3.0-3.5),在将果汁暴露于空气后会发生褐变,且具有叶绿素含量。预见到,尽管本发明的方法适用于其它水果,但是对于具有与猕猴桃共有的问题和特征(例如小于4.5的pH、显著的叶绿体水平或捕集)的水果(例如龟背竹(Monstera deliciosa)的果实)而言,可能实现最大优点。不应推断出,本发明的益处限于这些类型的水果。
本发明已经鉴别出几个问题领域(特别是对于猕猴桃而言),并解决了它们的需要。
在本发明的实施方案的开发过程中进行的实验证实,KFE在体外会表现出抑制血小板聚集的能力,并减少血管紧张素转化酶(ACE)活性。迄今为止得到的结果指示,含有KFE的组合物可用于预防心血管疾病,例如心肌梗塞和中风,并用于在已经罹患心肌梗塞、中风或不稳定型心绞痛的患者中预防其它血栓栓塞性事件。另外,这样的组合物可用于预防血管成形术和旁路手术以后的再狭窄。此外,KFE可以与溶血栓疗法联合地用于治疗由诸如心肌梗死(MI)等血栓栓塞性障碍引起的冠状动脉疾病。迄今为止得到的结果指示,具有抗血小板聚集活性的化合物是具有与脂质可溶性化合物非常不同的结构的水溶性化合物。存在许多已知的抗血小板聚集剂,它们作用于血小板生成和作用的不同阶段。阿司匹林(乙酰基水杨酸)是最广泛地使用和研究的一种。还已经使用了双嘧达莫和噻氯匹定。阿司匹林的抗血小板活性是由于血小板环加氧酶的不可逆抑制,由此阻止血栓烷A2(一种造成血小板聚集的化合物)的合成。布洛芬是血小板环加氧酶的可逆抑制剂。一些化合物是血栓烷A2合成酶的直接抑制剂,例如吡吗格雷,或者起血栓烷受体的拮抗剂的作用,例如磺曲班。
本发明不限于特定机理。实际上,对机理的理解并非实践本发明所必需的。尽管如此,本文所述的结果指示,所述水果提取物中的活性组分可能影响导致血栓烷A2产生的途径中的一个或多个步骤,所述步骤在目前可得到的阿司匹林和其它抗血小板药物的影响步骤的上游。众所周知,治疗剂量的阿司匹林经常发生不良作用;主要作用是胃肠道紊乱,诸如恶心、消化不良和呕吐。因此,预见到在水果提取物中的分离的血小板聚集抑制化合物可用作阿司匹林和其它抗血小板药物的所需替代物,用于预防血栓栓塞性事件和冠状动脉疾病。
因此,在某些实施方案中,本发明提供了一种水果提取物、其活性级分、或可从其中分离的一种或多种活性化合物,其用于预防或治疗从血小板聚集开始或表征的疾病状态。
在其它实施方案中,本发明提供了用作抗血栓剂的水果提取物或其活性级分或其可分离的一种或多种化合物。
在其它实施方案中,本发明提供了如前文定义的水果提取物或其活性级分或其可分离的一种或多种化合物,其用于制备这样的药物:所述药物用于预防或治疗从血小板聚集开始或表征的疾病状态;或用作血小板聚集抑制剂;或用作抗血栓剂。
在某些实施方案中,本发明提供了一种用于制备药物的方法,所述药物(i)用于预防或治疗从血小板聚集开始、介导或表征的疾病状态,或(ii)用作血小板聚集抑制剂,或(iii)用作抗血栓剂,所述方法的特征在于,使用如前文定义的水果或其提取物或活性级分或其可分离的一种或多种活性组分作为所述药物的必需成分。
在某些实施方案中,本发明提供了一种药物组合物,其包含源自如前文定义的水果或提取物或活性级分或其可分离的一种或多种活性化合物的活性组分和药学上可接受的载体。
在某些实施方案中,本发明提供了一种水果提取物、其活性级分、或可从其中分离的一种或多种活性化合物,其用于支持心血管健康。
在某些实施方案中,本发明提供了一种水果提取物、其活性级分、或可从其中分离的一种或多种活性化合物,其用于支持心脏健康。
在其它实施方案中,本发明提供了一种水果提取物或其活性级分或其可分离的一种或多种化合物,其用作血小板聚集抑制剂。
在其它实施方案中,本发明提供了一种水果提取物或其活性级分或其可分离的一种或多种化合物,其用于促进或维持心脏健康和/或循环健康。
在其它实施方案中,本发明提供了一种水果提取物或其活性级分或其可分离的一种或多种化合物,其用于改善、维持和/或促进血流量,尤其是平稳血流量。
优选的是,根据本发明使用的水果提取物是对人类无毒的那些,且通常所述水果是经常被认为是可食用的水果。因而,所述水果可以含有或不含有种子或果核,但是具有可食用的基本上无油的果肉。
猕猴桃是猕猴桃属中最众所周知的作物。可以如下制备本发明的实施方案的提取物:将剥皮的猕猴桃的果肉匀浆化,然后从其中除去固体,例如借助于离心。因而,所述提取物通常是水性提取物,其可以包含水果果汁或由其组成,并任选地含有在匀浆化步骤中加入的额外水。通过例如标准技术,例如在减压下蒸发,可以浓缩、富集或凝聚这样的水性提取物。浓缩物的例子是浓缩了至少2倍的那些,更常见地,浓缩了至少4倍,例如至少8倍、或至少40倍、或至少100倍、或至少200倍、或至少1000倍。
通过例如分子量过滤、或在诸如琼脂糖凝胶(就尺寸排阻色谱法而言)等适合载体上的色谱法、或通过除去脂质(通过Lipidex-1000)、或通过溶剂处理、或使用在适当处理过的二氧化硅或氧化铝(例如ODS包被的二氧化硅)上的HPLC离子交换柱、或通过溶剂提取,可以分级分离所述提取物,以分离其中的一种或多种活性级分。
对猕猴桃提取物进行的实验已经揭示,所述提取物的活性组分会穿过具有1000的分子量截止值的超滤,它是无色、水溶性的,且在煮沸时不会丧失活性。在某些实施方案中,本发明提供了一种用于生产稳定的和生物活性的猕猴桃提取物的方法,所述方法包括:分级分离获自猕猴桃果实的汁,以生产提取物级分,和将所述提取物级分加热至约70至约120摄氏度,优选80-100摄氏度,最优选加热至约95-100摄氏度。在某些实施方案中,所述加热的持续时间是约5至约30分钟,优选约10至约25分钟,最优选约20分钟,或进一步超过约5、10或15分钟。在某些实施方案中,本发明提供了一种用于生产稳定的和生物活性的猕猴桃提取物的方法,所述方法包括:分级分离获自猕猴桃果实的汁,以生产提取物级分,和对所述级分进行具有下述分子量截止值的超滤:小于10kDa,优选地小于5kDa,更优选地小于约3kDa、2kDa或1kDa。在某些实施方案中,所述稳定化的活性级分包含生物活性分子,且特征在于,当在4摄氏度储存至少4天、18天或24天、至多约30或40天时,与新鲜提取物级分相比,其保留所述生物活性分子的至少80%生物活性。在某些实施方案中,所述生物活性是在体外血小板聚集测定中抑制血小板聚集或抑制血管紧张素转化酶活性。
在某些优选的实施方案中,通过该方法生产的稳定的和生物活性的猕猴桃提取物表现出在紫外光谱色谱图上的在大约1.30和1.81分钟处的主峰和在总离子流色谱图上的在大约1.61、30.18和30.87处的主峰,且其中所述提取物在体外血小板聚集测定中抑制血小板聚集。
因此,本发明的实施方案也提供了水果提取物(例如,猕猴桃提取物)的活性级分作为抗血栓形成剂的用途、或者作为血小板聚集抑制剂的用途、或者用于预防或治疗从血小板聚集开始或表征的疾病状态的用途,所述活性级分含有基本上热稳定的、无色的或轻微淡黄色的、具有小于3000、2000或1000kDa的分子量的水溶性化合物。在某些实施方案中,所述活性级分被表征为具有生物活性。在某些实施方案中,所述生物活性是,当将活性级分与正常血清一起温育10分钟时,与对照或安慰剂物质相比,使血管紧张素转化酶(ACE)活性抑制或下降至少5%、10%或优选15%。在某些实施方案中,所述生物活性是在体外血小板聚集测定中抑制血小板聚集。在某些实施方案中,所述血小板聚集抑制被表示为,血小板聚集的已知效应物(例如胶原、ADP或花生四烯酸)的血小板聚集的抑制百分比。在某些实施方案中,与对照或安慰剂物质相比,本发明的活性级分会使这些已知效应物之一的血小板聚集抑制至少10%、20%、30%、40%或50%、至多约50%或60%。
已经发现,所述活性级分主要与猕猴桃的汁、种子周围的果肉和种子有关,或者可从它们提取。因而,从下述活性级分制备的组合物的用途代表本发明的优选实施方案:所述活性级分包含源自剥皮的猕猴桃的果肉的匀浆物或其提取物,或者基本上由其组成,或者包含果汁和/或种子周围的果肉和/或种子,或者基本上由其组成。
因此,本发明的实施方案提供了具有一项或多项下述特征的猕猴桃提取物的活性级分:
a)所述活性级分中的分子的大小小于3000kDa,优选小于2000kDa或1000kDa;
b)所述活性级分是基本上热稳定的;
c)所述活性级分是基本上无色的;
d)所述活性级分主要包含水溶性化合物;
e)所述活性级分会抑制血小板聚集;和
f)所述活性级分会抑制血管紧张素转化酶。
本发明的活性级分可以以多种形式和在多种制剂中提供。在某些实施方案中,将所述级分提供为液体、糖浆剂、粉末、糊剂、乳剂、丸粒化的组合物、造粒的组合物、包囊的组合物、混悬液、浓缩物、溶液和锭剂。所述粉末可以优选地为低压冻干、冷冻干燥或喷雾干燥的粉末,其从稳定化的猕猴桃提取物制成,含有或不含器官感觉上和/或药学上可接受的赋形剂。所述糖浆剂可以优选地是从稳定化的猕猴桃提取物制成的粘稠的浓缩水溶液,且可以包括适合的赋形剂和/或甜味剂。所述糖浆剂可以用于直接口服给药,或者作为在施用前用水重构的浓缩物。
所述级分可以通过许多途径中的任一种来提供,所述途径包括、但不限于,口服、静脉内、肌肉内、动脉内、骨髓内、鞘内、心室内、透皮、含服、皮下、腹膜内、鼻内、肠内、局部、舌下或直肠途径。关于配制和施用的技术的细节,可以参见Remington's PharmaceuticalSciences(Maack Publishing Co.,Easton,Pa.)的最新版。
在某些实施方案中,本发明提供了一种口服递送媒介物,其包含本发明的级分。所述级分可以优选地与药学上可接受的载体(例如淀粉、蔗糖或乳糖)一起配制成片剂、丸剂、糖衣丸、胶囊剂、凝胶胶囊剂、溶液、液体、浆体、混悬液和乳剂。可以用在约6.0-7.0的pH溶解的肠溶包衣包被本发明的片剂或胶囊剂。在小肠中溶解、但是在胃中不溶解的合适肠溶包衣是邻苯二甲酸乙酸纤维素。在某些实施方案中,所述口服递送媒介物包括一定量的第一组分和第二组分,所述组分可有效地在受试者中造成选自下述的效应:增加肌肉工作效率,降低工作的能量成本,增加工作达到疲惫时的时间,增加体育运动期间的耐久性,增加健康幸福,改善剧烈运动以后的肌肉酸痛,改善具有肥胖和/或代谢综合征的受试者的代谢状况,和它们的组合。改善具有肥胖和/或代谢综合征的受试者的代谢状况的例子包括、但不限于:增加葡萄糖吸收,降低氧化性应激,和它们的组合。在某些实施方案中,所述口服递送媒介物包含有效量的级分。在某些实施方案中,所述有效量包括这样的提取物的量:其含有在约1至约20个猕猴桃、优选约1至约10个猕猴桃、最优选约1-5个猕猴桃中存在的生物活性成分。在其它实施方案中,所述有效量对应于约1至约5000mg低压冻干的或喷雾干燥的稳定化级分,优选约1至约3000mg低压冻干的或喷雾干燥的稳定化级分,最优选约1mg至约1000mg低压冻干的或喷雾干燥的稳定化级分。在其它实施方案中,所述有效量对应于约500至约20000mg浓缩的(例如,作为糖浆剂)稳定化级分,优选约500至约10000mg浓缩的(例如,作为糖浆剂)稳定化级分,最优选约500mg至约2500mg浓缩的(例如,作为糖浆剂)稳定化级分。
在某些实施方案中,本发明提供了饮食补剂,其包含本发明的级分。本发明的饮食补剂的成分优选地被包含在口服消费可接受的赋形剂和/或载体中。载体的实际形式以及因而饮食补剂自身的实际形式不是至关重要的。所述载体可以是液体、凝胶、囊形片(gelcap)、胶囊、粉末、固体片剂(有包衣或无包衣)、茶等。所述饮食补剂优选地是片剂或胶囊的形式,且最优选地是软明胶胶囊的形式。在其它实施方案中,将所述补剂提供为粉末或液体,其适合由消费者加入食物或饮料中。例如,在某些实施方案中,所述饮食补剂可以以粉末的形式施用给个体,例如如下使用:例如,通过混合进饮料中,或通过搅拌进半固体食物(诸如布丁、顶部配料(topping)、调味料、浆泥、烹调过的谷类或色拉调味汁)中,或通过以其它方式加入食物中。在优选的实施方案中,所述饮食补剂包含有效量的如上所述的组分。
所述饮食补剂可以包括一种或多种惰性成分,特别是在希望限制由饮食补剂加入饮食中的热量的数目的情况下。例如,本发明的饮食补剂也可以含有任选的成分,包括、例如,草药、维生素、矿物质、增效剂、着色剂、甜味剂、调味剂、惰性成分等。例如,本发明的饮食补剂可以含有一种或多种下述物质:抗坏血酸类(抗坏血酸、无机抗坏血酸盐、玫瑰果、黄褥花果等)、脱氢表雄酮(DHEA)、绿茶(多酚)、肌醇、昆布、掌状红皮藻、生物类黄酮、麦芽糖糊精、荨麻、尼克酸(niacin)、烟酰胺、迷迭香、硒、二氧化硅(二氧化硅、硅胶、马尾草(horsetail)、木贼(Shavegrass)等)、螺旋藻、锌、二十二碳六烯酸和/或二十碳五烯酸(以任意形式提供,诸如游离脂肪酸、甘油三酯或磷脂)等。这样的任选成分可以是天然存在的形式或浓缩形式。
在某些实施方案中,所述饮食补剂另外包括维生素和矿物质,包括、但不限于,三碱价的磷酸钙或乙酸钙;磷酸氢二钾;硫酸镁或氧化镁;盐(氯化钠);氯化钾或乙酸钾;抗坏血酸;正磷酸铁;烟酰胺;硫酸锌或氧化锌;泛酸钙;葡萄糖酸铜;核黄素;β-胡萝卜素;盐酸吡多辛;单硝酸硫胺;叶酸;生物素;氯化铬或吡啶甲酸铬;碘化钾;硒酸钠;钼酸钠;叶绿醌;维生素D3;氰钴胺;亚硒酸钠;硫酸铜;维生素A;维生素C;肌醇;碘化钾。例如,通过查询美国RDA指南,可以得到维生素和矿物质的适合剂量。
在优选的实施方案中,所述饮食补剂包含有效量的如上所述的级分。本发明的饮食补剂可以每天服用1次或多次。优选地,所述饮食补剂每天口服施用1-2次。当然,施用频率取决于每个单位(胶囊或片)的剂量和期望的摄入水平。可以调节剂量水平/单位,以在合理数目的单位(例如,2个胶囊或片,每天2次)内提供每天的推荐水平的成分(例如,如上所述的有效量)。在优选的实施方案中,每天的合计剂量为每种成分的每天摄入量。在优选的实施方案中,所述饮食补剂与膳食一起或在膳食之前服用。在其它实施方案中,所述饮食补剂不与膳食一起服用。
在其它实施方案中,本发明提供了包含本发明的级分的营养补剂(例如,能量棒或膳食替代棒或饮料)。在优选的实施方案中,所述营养补剂包含有效量的如上所述的组分。所述营养补剂可以充当膳食或零食替代物,且通常会提供营养热量。优选地,所述营养补剂会提供平衡量的碳水化合物、蛋白和脂肪。所述营养补剂可以另外包含简单糖、中链长度的糖、或多糖、或它们的组合。可以针对所需的器官感觉特性来选择简单糖。未煮过的玉米淀粉是复合糖的一个例子。如果希望它维持它的高分子量结构,应当将它仅包括在不经过烹调或热加工的食物制剂或其部分中,因为热会将复合糖分解成简单糖,其中简单糖是单糖或二糖。在一个实施方案中,所述营养补剂含有3种水平的链长度(简单、中等和复杂;例如,蔗糖、麦芽糖糊精和未煮过的玉米淀粉)的碳水化合物源的组合。
要掺入本发明的营养补剂中的蛋白的来源可以是在营养制剂中使用的任意合适的蛋白,且可以包括乳清蛋白、乳清蛋白浓缩物、乳清粉、蛋、大豆粉、豆浆大豆蛋白、大豆蛋白分离物、酪蛋白酸盐(例如,酪蛋白酸钠、酪蛋白酸钙钠、酪蛋白酸钙、酪蛋白酸钾)、动物和植物蛋白及其混合物。当选择蛋白源时,应当首先考虑蛋白的生物价,最高的生物价存在于酪蛋白酸盐、乳清、乳清蛋白、卵白蛋白和全卵蛋白中。在一个优选的实施方案中,所述蛋白是乳清蛋白浓缩物和酪蛋白酸钙的组合。这些蛋白具有高生物价;也就是说,它们具有高比例的必需氨基酸。参见Modern Nutrition in Health and Disease,第8版,Lea&Febiger,publishers,1986,特别是第1卷,第30-32页。
所述营养补剂还可以含有其它成分,诸如其它维生素、矿物质、抗氧化剂、纤维和其它饮食补剂(例如,蛋白、氨基酸、胆碱、卵磷脂、其它脂肪酸)中的一种或组合。这些成分中的一种或几种的选择取决于制剂、设计、消费者偏爱和最终用户。技术人员可容易地获知加入本发明的饮食补剂中的这些成分的量。美国RDA关于儿童和成年人的剂量,可以提供对这类量的指引。可以添加的其它维生素和矿物质包括、但不限于:三碱价的磷酸钙或乙酸钙;磷酸氢二钾;硫酸镁或氧化镁;盐(氯化钠);氯化钾或乙酸钾;抗坏血酸;正磷酸铁;烟酰胺;硫酸锌或氧化锌;泛酸钙;葡萄糖酸铜;核黄素;β-胡萝卜素;盐酸吡多辛;单硝酸硫胺;叶酸;生物素;氯化铬或吡啶甲酸铬;碘化钾;硒酸钠;钼酸钠;叶绿醌;维生素D3;氰钴胺;亚硒酸钠;硫酸铜;维生素A;维生素C;肌醇;碘化钾。
可以将矫味剂、着色剂、香料、坚果等掺入产品中。调味剂可以是调味的提取物、挥发油、巧克力调味剂、花生酱调味剂、饼干碎屑、松脆米、香草或任何商购可得的调味剂的形式。有用的调味剂的例子包括、但不限于:纯的大茴香提取物、模仿香蕉提取物、模仿樱桃提取物、巧克力提取物、纯的柠檬提取物、纯的橙子提取物、纯的薄荷提取物、模仿菠萝提取物、模仿糖酒提取物、模仿草莓提取物或纯的香草提取物;或挥发油,诸如香蜂叶油、月桂油、香柠檬油、香柏油、胡桃油、樱桃油、肉桂油、丁香油或薄荷油;花生酱、巧克力调味剂、香草饼干碎屑、奶油糖果或太妃糖。在一个实施方案中,所述饮食补剂含有可可或巧克力。
为了终产品的稳定性,可以加入乳化剂。适合的乳化剂的例子包括、但不限于:卵磷脂(例如,获自卵或大豆)和/或单-和二-甘油酯。其它乳化剂是技术人员可容易地明白的,且适合的乳化剂的选择部分地取决于制剂和终产品。
也可以将防腐剂加入营养补剂中,以延长产品贮存期限。优选地,使用诸如山梨酸钾、山梨酸钠、苯甲酸钾、苯甲酸钠或乙二胺四乙酸二钠钙等防腐剂。
除了上述的碳水化合物以外,营养补剂可以含有天然的或人工的(优选低热量)甜味剂,例如,糖、环氨酸盐、天冬酰胺(aspartamine)、阿司帕坦、安赛蜜和/或山梨醇。如果营养补剂旨在被超重或肥胖的个体或患有II型糖尿病的个体(其易于患高血糖症)消费,则这类人工甜味剂是期望的。
所述营养补剂可以以多种形式和通过多种生产方法提供。在一个优选的实施方案中,为了制造健康棒,将液体成分烹调;将干燥成分与液体成分一起添加进混合器中并混合,直到获得生面团相;将生面团放进挤出机中并挤出;将挤出的生面团切成适当的长度;使产品冷却。除了本文明确列出的成分外,所述棒还可含有其它营养物和填充剂以加强味道。
在其它实施方案中,本发明提供了包含上述提取物或级分的食物产品、准备好的食物产品、或食品(即,功能性食物)。在优选的实施方案中,所述食物包含有效量的如上所述的级分。例如,在某些实施方案中,提供了包含所述提取物、级分或其衍生物的饮料和固体或半固体食物。这些形式可以包括、但不限于:饮料(例如,软饮料、奶和其它乳饮料和饮食饮料)、烘焙物、布丁、乳制品、甜点、快餐食品、或冷冻甜点或小礼品(例如,冰淇淋、奶昔)、准备好的冷冻餐、糖果、零食产品(例如,薯片)、汤、糊状食品、调味料、色拉调味汁、准备好的肉制品、奶酪和酸乳。
实验部分
提供下述实施例来证实和进一步例证本发明的某些优选实施方案和方面,不应解释为限制本发明的范围。
实施例1
猕猴桃提取物的制备:
制备了由100%猕猴桃汁组成的提取物。为了制备100%果汁,将水果剥皮,并将果肉匀浆化。将得到的匀浆物在离心机上在4℃在9000×g离心15min,此后除去上清液,并用1M氢氧化钠溶液将果汁的pH调至7.4。初次确定猕猴桃提取物(KFE)的抗血小板活性。
猕猴桃提取物的部分分级分离:
然后根据在图1中描绘的一般路线图,将猕猴桃提取物分级分离。在不同的阶段,测量所述制品的抑制血小板聚集的活性。因而,将从100%水果制备的新鲜猕猴桃汁在9000×g离心10min。离心后,将上清液冷冻干燥,并将干燥的物质的一部分溶解在磷酸盐缓冲液中,并将pH调至7.4。然后穿过具有1000道尔顿的分子量截止值的滤器,对其进行超滤。收集超滤液,并冷冻干燥和在水中重构,并将pH调至7.4。使用处于分级分离的不同阶段的提取物,测量血小板聚集。在单独的研究中,将所述提取物煮沸10min,并离心,测定煮沸的样品的抗血小板活性。
为了检查分级分离的提取物中的脂质化合物是否会引起抗血小板活性,通过使溶液穿过专门制备的Lipidex-1000柱(柱体积18ml),除去所述提取物的脂质。Lipidex-1000仅吸附所述提取物的脂质物质。然后用5柱体积的15mM磷酸盐缓冲液洗脱柱,并收集和干燥洗脱的溶液。随后用甲醇溶液洗脱结合到柱树脂上的脂质化合物,并干燥用于抗血小板活性测量。除了上述Lipidex-1000实验以外,还根据Bligh和Dyer,使用氯仿甲醇用另一种方法除去脂质。因而,将2ml超滤液与2.5ml甲醇混合,随后与1.25ml氯仿混合,以得到单相和1:2:0.8的氯仿:甲醇:水之比。没有形成沉淀物。然后加入氯仿(1.25mL)和水(1.25mL),并在轻轻混合后,允许混合物沉降成2层。除去上层(甲醇/水),并在55℃在氮下吹出甲醇。然后在调至pH7.4以后,将体积补充至2mL。将该水相的抗血小板聚集活性与作为对照的各个体积的磷酸盐缓冲液进行对比。
然后在氮下蒸发氯仿相,并再悬浮于乙醇(50μL)中。然后试验乙醇相的样品(10μL)相对于10μL乙醇对照的抗血小板聚集活性。
血小板聚集研究:
在健康志愿者中研究了水果提取物对人血小板的聚集性能的影响。从志愿者收集静脉血,所述志愿者在献血之前至少14天内没有使用任何药物。使用19G蝶式针收集血液(20ml),并如下防止凝固:以9体积份血液与1体积份酸式柠檬酸盐的比例,将血液样品与酸式柠檬酸盐(135mM)进行混合。通过将血液在180×g离心15min,从样品制备富含血小板的血浆(PRP)。将猕猴桃汁(10-30μl)(用1M氢氧化钠将其pH调至7.4)与PRP混合,以将体积补充至500μl,并在37℃温育15min,此后,添加ADP至终浓度5μM,监测水果提取物对ADP诱导的血小板聚集的影响。使用10-30μL磷酸盐缓冲液(pH7.4)替代水果提取物,平行地运行对照。使用Chrono-Log聚集(Chrono-Log,USA),在1000rpm的恒定搅拌速率,在37℃监测PRP中的血小板聚集。
为了确定KFE对体外血小板聚集的影响,将PRP(450μl)与不同浓度的KFE(以50μl体积)一起在37℃温育15min,然后加入聚集剂。通过将这些血小板与不同浓度的KFE一起温育15min,确定KFE的不同级分的IC50。用50μl磷酸盐替代水果提取物,平行地运行对照。将血小板聚集的抑制表示为曲线下面积相对于对照的下降。
KFE对血管紧张素转化酶(ACE)的抑制:
血管紧张素I-转换酶(ACE,EC3.4.15.1)(一种外肽酶)是一种参与身体的肾素-血管紧张素系统的循环酶,其介导细胞外体积(例如,血浆、淋巴和间隙液的体积)和动脉血管收缩。它由肺和肾内皮细胞分泌,并催化十肽血管紧张素I向八肽血管紧张素II的转化。ACE抑制剂会阻断血管紧张素I向血管紧张素II的转化。因此,它们会降低微动脉阻力和增加静脉容量;增加心输出量和心指数、每搏作功和每搏输出量,降低肾血管阻力,并导致增加的尿钠增多(尿中的钠排泄)。在使用ACE抑制剂时,会阻止血管紧张素II的作用,导致血压降低。使用血管紧张素转化酶测定(Angiotensin Converting EnzymeAssay)试剂盒(LABORATORIES AG,德国),测量了KFE对血清ACE活性的影响。
结果:
猕猴桃提取物的分级分离和它们对通过ADP的ADP-诱导的血小板聚集的影响
图1显示了使用不同的分级分离操作来制备猕猴桃提取物。猕猴桃提取物中的血小板聚集抑制剂存在于水溶性级分中,且它们的大小小于1000道尔顿。煮沸该级分不会破坏活性。通过Lipidex-1000对样品的脱脂证实,所述活性级分存在于水性提取物中。
血小板聚集研究
表1显示了猕猴桃提取物抑制不同试剂的血小板聚集的剂量响应。它证实了关于ADP诱导的聚集的剂量响应作用:增加猕猴桃提取物会导致血小板聚集的更大减少。分离自猕猴桃的级分对所有3种血小板聚集剂(胶原、ADP和花生四烯酸)同样有效。
图2显示了不同体积的猕猴桃提取物对ADP引起的体外血小板聚集的影响。将PRP(450ml)与不同体积(0、10、20和30ul)的KFE一起在37℃温育15min,然后加入激动剂:花生四烯酸(500μg/ml)、ADP(3mM)和胶原(1μg/ml)。KFE以剂量依赖性的方式抑制ADP诱导的聚集(表-1)。与对照相比,ADP诱导的聚集被10μl KFE抑制了45%,被20μl KFE抑制了65%,被30μl KFE抑制了95%。类似地,KFE会抑制胶原诱发的血小板聚集;对于10和20μl温育,抑制水平更低。花生四烯酸诱导的血小板聚集的抑制,表现出在试验的最高KFE水平的38%抑制和在更低的KFE浓度非常小的抑制。
表-1:
将猕猴桃提取物在100℃煮沸10min不会影响所述提取物的抗血小板聚集。
KFE对不同激动剂诱导的血小板聚集的作用的确定。图2和3显示了对花生四烯酸、胶原和ADP各自诱导的血小板聚集的抑制。实验条件如表-1所示。
分级分离的猕猴桃提取物对ADP诱导的血小板聚集的作用的确定。图4显示了分级分离的猕猴桃提取物对ADP诱导的血小板聚集的作用。实验条件如表1所示。如图1所述纯化KFE提取物。
KFE对人血清的ACE活性的影响。与对照相比,与20μl KFE一起温育血清15min会抑制超过15%活性。
图5显示了猕猴桃提取物的脱脂的、超滤纯化的活性级分的紫外扫描。
实施例2
在匀浆化剥皮的水果以后,制备猕猴桃汁,随后在9000×g离心15min,并在4℃保存用于抗血小板测定。将果汁的其它级分在90℃煮沸20min,并再次离心,将pH调至7.4,并在4℃保存至多24天。
在如表所示的不同天,测量猕猴桃汁和提取物的抑制活性,并通过PRP与果汁(在将pH调至7.4以后)或提取物一起温育15分钟,测量它们的抗血小板活性,并使用3μM ADP作为聚集剂与对照(在没有果汁或提取物存在下)对比抑制。
天数 | 猕猴桃汁 | 猕猴桃提取物 |
抑制活性 | 活性 | |
第0天 | 100 | 100 |
第4天 | 76 | 100 |
第18天 | 29 | 100 |
第24天 | 4 | 100 |
结论:果汁在1周内丧失24%活性,在18天后丧失70%活性,而煮沸的提取物保持它的100%活性。冷冻干燥提取物同样保持它的活性。
实施例3
本实施例描述了高度纯化的、热稳定的且水溶性的、含有抗血小板活性的猕猴桃提取物的UV和MS波谱。
制备猕猴桃汁,并通过在9000g离心15min,澄清果汁。然后将上清液在90℃煮沸20min。然后将冷却的提取物再次在9000×g离心15min。然后使无色上清液穿过LIPDEX-1000柱,以除去任何有关的脂质。然后对洗脱的脱脂的样品进行冷冻干燥,并穿过1000道尔顿分子截止过滤器。然后在三阶段LC-MS/MS-UV中运行滤液。负模式的质谱扫描100-1000Mw(图7)和紫外光谱200-400nm(图6)。
柱为Zorbax1.8μM颗粒快速解析C18柱(4.6mm×50mm,1.8μm)。开始100%流动相(A)水-甲酸(100:0.1,v/v/v)至100%(B)乙腈-甲酸(100:0.1,v/v/v),历时35分钟进行洗脱。
实施例4
在匀浆化剥皮的水果以后,制备猕猴桃汁,随后在9000×g离心15min,并在4℃保存用于抗血小板测定。将果汁的其它级分在90℃煮沸20min,并再次离心,将pH调至7.4,并在4℃保存至多24天。在不同天,如下测量果汁和提取物的抗血小板活性:PRP与果汁(在将pH调至7.4以后)或提取物一起温育15分钟,并使用3μM ADP作为聚集剂与对照(在没有果汁或提取物存在下)对比抑制。
天数 | 猕猴桃汁 | 猕猴桃提取物 |
抑制活性 | 活性 | |
第0天 | 100 | 100 |
第4天 | 76 | 100 |
第18天 | 29 | 100 |
第24天 | 4 | 100 |
结论:果汁在1周内丧失24%活性,在18天后丧失70%活性,而煮沸的提取物保持它的100%活性。冷冻干燥提取物同样保持它的活性。
实施例5
如前所述制备猕猴桃提取物。最终制品产量是4-5g/100g水果,且其含有45-50%的糖。这里呈现的数据使用了在特隆赫姆(Trondheim)制备的提取物。将20克KFE与200ml Tine MilkOrange汁混合用于消费。招募2种性别的6位健康成年人进行研究。受试者年龄为25-60岁,且没有严重疾病史或止血障碍。通过使用饮食和生活方式问卷调查,并通过医学筛选(在这期间评估血小板功能),评估包括进研究中的适合性。基于高血小板功能(通过对3μmol ADP/L的血小板聚集应答来确定),选择受试者。要求习惯性地消费饮食补剂(例如,鱼油)的受试者在参加研究之前暂停这些补剂最少1个月。指示受试者在参加之前10天的时段内禁用已知会影响血小板功能的药物。
从所有受试者得到书面知情同意书。该研究得到奥斯陆当局的批准。志愿者过夜禁食。在每个取样时间点(时间0)抽取约20mL的静脉血液样品,然后要求他们饮用200ml含有20g KFE的橙汁。为了测量血小板功能,将血液收集进塑料注射器中,并转移进含柠檬酸盐的血液收集管(最终柠檬酸钠浓度为13mmol/L)中。
离体血小板聚集研究。在每个时间点,测量PRP中的ADP诱导的血小板聚集程度。对次优ADP浓度的血小板应答也是感兴趣的;在这些条件下,可以观察到双相性聚集应答,这会提供关于血小板应答的性质的其它信息。标准化的r ADP浓度(3μmol/L)用于所有测量。对于离体研究,将对处理或对照干预以后观察到的血小板聚集的影响表示为,在消费提取物或安慰剂以后的聚集曲线下面积相对于基线值的变化百分比。
在这里将结果表示为抑制百分比。
志愿者 | 2小时以后的抑制百分比 |
1 | 8.1 |
2 | 12.6 |
3 | 12 |
4 | 15 |
5 | 8.2 |
参考文献:
1.Dutta-Roy AK.(2002)Dietary components and human plateletactivity.Platelets.13(2):67-75
2.Dutta-Roy,AK,Crossbi,L,and Gordon,M.J.(2001)Effects of tomato extract on human platelet aggregation in vitro,Platelets,12(4):218-27.
3.Nishiyama I.Fruits of the actinidia genus.Adv Food Nutr Res.2007;52:293-324.
4.Sun-Waterhouse D,Chen J,Chuah C,Wibisono R,Melton LD,Laing W,Ferguson LR,Skinner MA(2009).Kiwifruit-basedpolyphenols and related antioxidants for functional foods:kiwifruitextract-enhanced gluten-free bread.Int J Food Sci Nutr.60Suppl7:251-64.Epub
5.Daigo Abe,Takeshi Saito,Yasutaka Kubo,YoshimasaNakamura,Keizo Sekiya.A fraction of unripe kiwi fruit extractregulates adipocyte differentiation and function in3T3-L1cells,Biofactor vol.
6.Duttaroy,AK,andA.J.(2004)Effects of kiwi fruitconsumption on platelet aggregation and plasma lipids in healthyhuman volunteers.Platelets15,287–292,13(2):67-75.
在上面的说明书中提及的所有出版物和专利都通过引用并入本文。在不脱离本发明的范围和精神的情况下,本领域技术人员会明白本发明的所述方法和系统的各种改进和变化。尽管已经结合具体优选实施方案描述了本发明,应当理解,要求保护的发明不应当不适当地限于这样的具体实施方案。实际上,本发明领域的技术人员显而易见的、用于实现本发明的所述模式的各种改进意图落入下述权利要求的范围内。
Claims (39)
1.一种组合物,其包含获自猕猴桃科果实的水果提取物,所述提取物被表征为,在贮存期间是稳定的且保留生物活性。
2.根据权利要求1所述的组合物,其中所述水果提取物通过选自下述的方法稳定化:超滤、热处理和它们的组合。
3.根据权利要求1或2所述的组合物,其中所述热处理包括:加热至约70-120摄氏度。
4.根据权利要求1-3中的任一项所述的组合物,其中所述生物活性是在体外血小板聚集测定中抑制血小板聚集。
5.根据权利要求1-4中的任一项所述的组合物,其中在4摄氏度保持24天后,所述提取物在体外血小板聚集测定中具有超过4%的标准化至第0天的抑制活性。
6.根据权利要求1-4中的任一项所述的组合物,所述组合物进一步特征在于,当在4摄氏度储存4天时,与新鲜提取物级分相比,其保留所述生物活性分子的至少80%生物活性,其中所述生物活性是在体外血小板聚集测定中抑制血小板聚集。
7.根据权利要求1-4中的任一项所述的组合物,所述组合物进一步特征在于,当在4摄氏度储存至少18天时,与新鲜提取物级分相比,其保留所述生物活性分子的至少80%生物活性,其中所述生物活性是在体外血小板聚集测定中抑制血小板聚集。
8.根据权利要求1-4中的任一项所述的组合物,所述组合物进一步特征在于,当在4摄氏度储存至少24天时,与新鲜提取物级分相比,其保留所述生物活性分子的至少80%生物活性,其中所述生物活性是在体外血小板聚集测定中抑制血小板聚集。
9.根据权利要求1-8中的任一项所述的组合物,其中所述生物活性是抑制血管紧张素转化酶。
10.根据权利要求1-9中的任一项所述的组合物,其中所述提取物被脱脂。
11.根据权利要求1-10中的任一项所述的组合物,其中所述级分包含具有小于3000道尔顿的分子量的生物活性分子。
12.根据权利要求1-11中的任一项所述的组合物,其中所述级分包含具有小于1000道尔顿的分子量的生物活性分子。
13.根据权利要求1-12中的任一项所述的组合物,其中用100%流动相(A)水-甲酸(100:0.1,v/v/v)至100%(B)乙腈-甲酸(100:0.1,v/v/v)历时35分钟在Zorbax1.8μM颗粒快速解析C18柱(4.6mm×50mm,1.8μm)上对所述提取物进行液相色谱法,所述水果提取物在紫外光谱扫描时表现出在大约1.30和1.81分钟处的主峰。
14.根据权利要求13所述的组合物,其中所述提取物表现出如图6所示的主要紫外光谱峰。
15.根据权利要求1-14中的任一项所述的组合物,其中用100%流动相(A)水-甲酸(100:0.1,v/v/v)至100%(B)乙腈-甲酸(100:0.1,v/v/v)历时35分钟在Zorbax1.8μM颗粒快速解析C18柱(4.6mm×50mm,1.8μm)上对所述提取物进行液相色谱法,所述水果提取物在质谱法100-1000Mw中在负模式扫描时表现出在大约1.61、30.18和30.87处的主峰。
16.根据权利要求15所述的组合物,其中所述提取物表现出如图7所示的主要总离子流色谱图的峰。
17.一种糖浆剂或溶液,其包含根据权利要求1-16中的任一项所述的组合物。
18.一种粉末,其包含根据权利要求1-16中的任一项所述的组合物。
19.一种口服递送媒介物,其包含权利要求1-18中的任一项所述的组合物、糖浆剂、溶液或粉末。
20.一种功能性食物或食品,其包含权利要求1-18中的任一项所述的组合物、糖浆剂、溶液或粉末。
21.根据权利要求20所述的功能性食物或食品,其中所述功能性食物或食品选自:饮料、烘焙物、布丁、乳制品、甜点、快餐食品、冷冻甜点或小礼品、准备好的冷冻餐、糖果、零食产品、汤、糊状食品、调味料、色拉调味汁、准备好的肉制品、奶酪和酸乳。
22.一种营养补剂,其包含权利要求1-18中的任一项所述的组合物、糖浆剂、溶液或粉末。
23.根据权利要求22所述的营养补剂,其中所述营养补剂选自:软胶囊剂、硬壳胶囊剂、可咀嚼的胶囊剂、健康棒和补剂粉末。
24.一种在受试者中预防或治疗从血小板活化和/或聚集开始或表征的疾病状态、改善或维持心脏健康、改善或维持心血管健康、改善或维持循环健康、或改善或维持血流量的方法,所述方法包括:给所述受试者施用根据权利要求1-23中的任一项所述的组合物、糖浆剂、粉末、口服递送媒介物或营养补剂、功能性食物或食品。
25.根据权利要求24所述的方法,其中所述施用会抑制血小板聚集。
26.根据权利要求24所述的方法,其中所述施用会导致抗血栓活性。
27.根据权利要求24所述的方法,其中所述施用会导致血液变稀。
28.根据权利要求24所述的方法,其中所述施用会导致血压降低。
29.根据权利要求1-21中的任一项所述的组合物、糖浆剂、粉末、口服递送媒介物或营养补剂、功能性食物或食品的下述用途:在受试者中预防或治疗从血小板活化和/或聚集开始或表征的疾病状态、改善或维持心脏健康、改善或维持心血管健康、改善或维持循环健康、或改善或维持血流量,或在受试者中改善或维持血压。
30.根据权利要求29所述的用途,其中所述从血小板活化和/或聚集开始或表征的疾病状态选自:血栓形成、动脉硬化和/或斑块形成。
31.一种用于生产稳定的和生物活性的猕猴桃提取物的方法,所述方法包括:生产猕猴桃提取物,和在特定条件下加热所述猕猴桃提取物,使得所述提取物在贮存期间保留生物活性。
32.根据权利要求31中的任一项所述的方法,其中所述加热包括:将所述级分加热至约70至约100摄氏度保持大于约5分钟。
33.根据权利要求31或32所述的方法,其中如下生产猕猴桃提取物:在加热之前或之后,沉淀猕猴桃汁或匀浆物,得到沉淀级分和上清液级分,并保留所述上清液级分,得到所述生物活性的猕猴桃提取物。
34.根据权利要求33所述的方法,其中所述沉淀包括在至少3000g离心。
35.根据权利要求31-32中的任一项所述的方法,其中在加热之前或之后,另外通过超滤来加工所述提取物。
36.根据权利要求35所述的方法,其中所述超滤具有在1000-3000道尔顿的截止值。
37.通过根据权利要求31-36中的任一项所述的方法生产的稳定的和生物活性的猕猴桃提取物。
38.根据权利要求35所述的稳定的和生物活性的猕猴桃提取物,其中用100%流动相(A)水-甲酸(100:0.1,v/v/v)至100%(B)乙腈-甲酸(100:0.1,v/v/v)历时35分钟在Zorbax1.8μM颗粒快速解析C18柱(4.6mm×50mm,1.8μm)上对所述提取物进行液相色谱法,所述提取物在紫外光谱扫描中表现出在大约1.30和1.81分钟处的主峰,并且用100%流动相(A)水-甲酸(100:0.1,v/v/v)至100%(B)乙腈-甲酸(100:0.1,v/v/v)历时35分钟在Zorbax1.8μM颗粒快速解析C18柱(4.6mm×50mm,1.8μm)上对所述提取物进行液相色谱法,所述提取物在质谱法100-1000Mw中在负模式扫描时表现出在大约1.61、30.18和30.87的主峰,且其中所述提取物在体外血小板聚集测定中抑制血小板聚集。
39.根据权利要求35或36所述的稳定的和生物活性的猕猴桃提取物,其特征在于,当在4摄氏度储存至少24天时,与新鲜提取物级分相比,其保留所述生物活性分子的超过4%生物活性,其中所述生物活性是在体外血小板聚集测定中抑制血小板聚集。
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Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110496144A (zh) * | 2019-08-14 | 2019-11-26 | 右江民族医学院 | 一种猕猴桃提取物制备方法及其防治心脑血管疾病的应用 |
Families Citing this family (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AU2011338643B2 (en) | 2010-12-07 | 2016-03-03 | University Of Oslo | Cardio-protective agents from kiwifruits |
DK2773744T3 (en) * | 2011-11-02 | 2019-04-08 | Univ Texas Tech System | Media compositions to promote bacterial and fungal growth |
US11753617B2 (en) | 2011-11-02 | 2023-09-12 | Texas Tech University System | Media compositions for promoting bacterial and fungal growth |
WO2013126384A1 (en) * | 2012-02-21 | 2013-08-29 | University Of Oslo | Cardio-protective agents from kiwifruits |
EP3243902A4 (en) * | 2015-01-06 | 2018-05-30 | Luterion Co., Ltd. | Luterion and separating and culturing methods for same |
CN105136949B (zh) * | 2015-08-04 | 2017-09-01 | 宋艳 | 一种猕猴桃茎三萜类hplc指纹图谱建立及其指纹图谱 |
KR102013288B1 (ko) * | 2018-01-11 | 2019-08-23 | 안동대학교 산학협력단 | 미후등 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품 |
KR102158674B1 (ko) * | 2018-12-07 | 2020-09-22 | 안동대학교 산학협력단 | 다래 화분 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2006016728A1 (en) * | 2004-08-10 | 2006-02-16 | Helixir Co., Ltd. | Composition comprising the extract of actinidia arguta for preventing and treating baldness disorders and seborrheic skin disorders |
Family Cites Families (21)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4795742A (en) * | 1985-09-24 | 1989-01-03 | Yaguang Liu | Therapeutic composition from plant extracts |
JP3009441B2 (ja) | 1990-09-13 | 2000-02-14 | ヒガシマル醤油株式会社 | アンジオテンシン変換酵素阻害剤 |
JPH06135830A (ja) * | 1992-10-23 | 1994-05-17 | Natl Sci Council | フラボノイド誘導体を含有する抗高血圧薬組成物 |
JPH07324037A (ja) | 1993-03-01 | 1995-12-12 | Nippon Getsutou Kk | 月桃から血小板凝集抑制物質の製造法 |
US6096759A (en) * | 1997-09-19 | 2000-08-01 | Georgetown University | Method for treating essential hypertension |
US7851458B2 (en) * | 1999-06-22 | 2010-12-14 | Joint Juice, Inc. | Cartilage enhancing food supplements and methods of preparing the same |
JP2002008357A (ja) | 2000-06-23 | 2002-01-11 | Sony Corp | 電子機器 |
US6991812B2 (en) | 2000-09-05 | 2006-01-31 | Kao Corporation | Agent for preventing, improving or treating hypertension |
KR100615389B1 (ko) * | 2002-08-23 | 2006-08-25 | (주)헬릭서 | 다래 추출물을 함유하는 알러지성 질환 및 비알러지성염증 질환의 예방 및 개선용 건강 기능 식품 |
US20100111927A1 (en) | 2002-08-23 | 2010-05-06 | Sunyoung Kim | Compositions Comprising Actinidia and Methods of Use Thereof |
US20040081741A1 (en) | 2002-10-23 | 2004-04-29 | Unilever Bestfoods North America | Stabilized fruit pulp composition and a puree composition comprising the same |
NZ532254A (en) * | 2004-04-08 | 2006-03-31 | Dragon Pacific Ltd | Kiwifruit extract and a method for producing powdered kiwifruit extract |
US8394426B2 (en) * | 2004-08-10 | 2013-03-12 | Viromed Co., Ltd. | Composition comprising an extract of hardy kiwi for preventing or treating baldness disorders or seborrheic skin disorders |
US20080175888A1 (en) | 2005-02-25 | 2008-07-24 | Julie Lindemann | Combination Therapy Comprising Actinidia and Steroids and Uses Thereof |
JP5462430B2 (ja) | 2006-01-19 | 2014-04-02 | オリザ油化株式会社 | 抗炎症剤及び鎮痛剤 |
AT503521A1 (de) | 2006-05-05 | 2007-11-15 | Omnica Gmbh | Verwendung eines extraktes von kiwi-frucht |
JP2008259486A (ja) | 2007-04-13 | 2008-10-30 | Keiko Sato | 果実を用いた密封容器入り飲料の製造方法 |
US20100143319A1 (en) | 2007-05-03 | 2010-06-10 | Vital Food Processors Limited | Kiwifruit compositions |
CN101756320A (zh) * | 2008-12-24 | 2010-06-30 | 南开大学滨海学院 | 枣果果肉为主料的多味枣果果茶 |
CN101704899B (zh) * | 2009-12-15 | 2012-09-19 | 浙江中医药大学 | 一种猕猴桃根多糖提取物的制备方法 |
AU2011338643B2 (en) | 2010-12-07 | 2016-03-03 | University Of Oslo | Cardio-protective agents from kiwifruits |
-
2011
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-
2015
- 2015-09-24 JP JP2015186983A patent/JP2016040274A/ja active Pending
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2006016728A1 (en) * | 2004-08-10 | 2006-02-16 | Helixir Co., Ltd. | Composition comprising the extract of actinidia arguta for preventing and treating baldness disorders and seborrheic skin disorders |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
ASIM K. DUTTAROY, ET AL: "Effects of kiwi fruit consumption on platelet aggregation and plasma lipids in healthy human volunteers", 《PLATELETS》 * |
KYUNG-AH JUNG, ET AL.: "Cardiovascular Protective Properties of Kiwifruit Extracts in Vitro", 《BIOL. PHARM. BULL.》 * |
黄少美: "猕猴桃汁制备工艺", 《广州食品工业科技》 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110496144A (zh) * | 2019-08-14 | 2019-11-26 | 右江民族医学院 | 一种猕猴桃提取物制备方法及其防治心脑血管疾病的应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP5965916B2 (ja) | 2016-08-10 |
US20140314889A1 (en) | 2014-10-23 |
DK2648741T3 (da) | 2016-02-22 |
CA2820229C (en) | 2017-11-28 |
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WO2012078587A1 (en) | 2012-06-14 |
AU2011338643B2 (en) | 2016-03-03 |
EP2648741B1 (en) | 2015-12-02 |
US9987317B2 (en) | 2018-06-05 |
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EP2648741A1 (en) | 2013-10-16 |
ES2561086T3 (es) | 2016-02-24 |
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Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Butu et al. | Fruit and vegetable-based beverages—Nutritional properties and health benefits | |
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20131127 |
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RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |