CN103408672B - 一种低分子量金耳多糖及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种低分子量金耳多糖及其制备方法，该低分子量金耳多糖是通过水提醇沉、酸解、再醇沉的方法制备得到的。该低分子量金耳多糖的制备方法简便、适用于大规模生产，所得低分子量金耳多糖含量可达到80％以上，得率达到50％以上，并且该金耳多糖的保湿活性显著提高。

Description

一种低分子量金耳多糖及其制备方法

技术领域

本发明涉及食用真菌领域，具体的说涉及一种低分子量金耳多糖及其制备方法。

背景技术

金耳俗称脑耳、金木耳，是一种稀有珍贵食用菌。近年来食用菌在化妆品中得到越来越多的应用，特别是食用菌多糖是天然保湿剂，可有效提高化妆品的保湿能力，金耳多糖是金耳主要活性成分之一，因此开展金耳中具有保湿作用的多糖的研究具有很好的应用前景。

金耳多糖主要应用予食品和化妆品工业。近年来研究表明，金耳多糖具有比较好的生物活性，如抗肿瘤、提高免疫力、降血糖等功效，所以其在医药和保健品领域有很广的应用前景。但目前从金耳中得到的多糖大多为未降解的多糖，其分子量大、分子体积大、水溶性差，不利于生物吸收，从而影响其在人体内生物活性的表达，极大的限制了多糖的应用。

发明内容

本发明首先提供了一种低分子量金耳多糖，该金耳多糖是用如下方法制备得到的：

金耳子实体进行水提醇沉，得到大分子量金耳多糖；

大分子量金耳多糖用HCl水溶液溶解，加热降解，降解结束后用NaOH溶液中和至中性；

降解中和后的金耳多糖水溶液通过乙醇沉淀，即得到低分子量金耳多糖。

具体的说，本发明的低分子量金耳多糖是通过如下方法制备得到的：

①水提：将金耳子实体粉碎、热煮，得到金耳多糖水提液；

②醇沉：金耳多糖水提液通过乙醇(溶液中乙醇的体积浓度为60％)沉淀，烘箱80℃加热干燥后得到大分子量的金耳多糖干品；

③酸解：大分子量的金耳多糖干品用0.5NHCl水溶液溶解，80℃降解，降解结束后用NaOH溶液中和至中性；

④醇沉：降解中和后的金耳粗多糖水溶液通过乙醇(溶液中乙醇的体积浓度为80％)沉淀，洗涤，水复溶，进行冷冻干燥，即可。

本发明还提供了制备上述低分子量金耳多糖的方法，该方法为：

金耳子实体进行水提醇沉，得到大分子量金耳多糖；

大分子量金耳多糖用0.5NHCl水溶液溶解，加热降解，降解结束后用NaOH溶液中和至中性；

降解中和后的金耳多糖水溶液通过乙醇沉淀，即得到低分子量金耳多糖。

本发明使用的金耳子实体购自云南天之蕈野生食用菌有限公司。

本发明得到的低分子量金耳多糖经过HPLC分析，分子量为1.2万Da左右。

本发明提供的经过酸解的低分子量金耳多糖，制备方法简便、适用于大规模生产。所得低分子量金耳多糖含量可达到80％以上，得率达到50％以上，并且该金耳多糖的保湿活性显著提高。

附图说明

图1，实施例1的金耳多糖HPLC分析

图2，实施例2的金耳多糖HPLC分析

图3，实施例1和实施例2的金耳多糖的保湿活性比较

具体实施方式

实施例1水提醇沉法制备大分子量金耳多糖

将金耳子实体(购自云南天之蕈野生食用菌有限公司)用粉碎机粉碎成粉末，按照100g子实体加入10L水的比例加水，加热煮沸持续2h，之后用离心机离心，滤渣重复上述步骤再提取一次后离心，合并两次提取的滤液。滤液浓缩至2L后，加入3L无水乙醇沉淀，沉淀用80％乙醇洗涤三次，烘箱80℃加热烘干得金耳多糖。得率：40.10％；多糖含量：61.43％。

这里得到的金耳多糖经过HPLC分析，分子量为680万Da左右(图1)。实施例2稀酸降解金耳多糖

称取实施例1的680万Da左右的金耳多糖干品10g，用0.5NHCI水溶液1L溶解，置于80℃水浴锅中加热降解4h，降解结束后用0.5NNaOH溶液中和至中性，然后用乙醇(溶液中乙醇的体积浓度为80％)沉淀，沉淀用乙醇(溶液中乙醇的体积浓度为80％)洗三次。

将酸解后的金耳多糖沉淀用水溶解，浓缩后先放置于-20℃冷冻3h，然后置于-80摄氏度冷冻6h，之后转到冷冻干燥机中进行冷冻干燥处理，最后得到白色的低分子量金耳多糖。得率：53.78％；多糖含量：80.24％。

此低分子量金耳多糖经过HPLC分析，分子量为1.2万Da左右(图2)。实施例3低分子量金耳多糖体外保湿活性实验

1.1体外保湿活性测定方法

将由饱和(NH4)₂SO₄水溶液作为相对湿度(R.H.)为81％的干燥器和由饱和K₂CO₃水溶液作为相对湿度(R.H.)为43％的干燥器置于20℃恒温环境中。

精确称取1.0g各种样品置于直径为3cm的结晶皿中，放在相对湿度(R.H.)为81％的干燥器内，经过48h后精确称取各试样重量，由放置前后试样的重量差，由式(1)求出吸湿率，WO为试样放置前重量，Wn为放置48h后重量。

吸湿率(％)＝100(Wn-WO)/WO(1)

精确称取1.0g各种样品置于直径为3cm的结晶皿中，放在相对湿度(R.H.)为43％的干燥器内，经过24h后精确称取各试样重量，由放置前后试样的重量差，由式(2)求出保湿率，HO为试样含水重量，Hn为放置后试样含水重量。

保湿率(％)＝100Hn/HO(2)

1.2体外保湿活性实验

样品：阳性对照用分子量为70万Da左右的透明质酸，以及分子量为680万Da左右的实施例1的金耳多糖；分子量为1.2万Da左右的实施例2得到的金耳多糖。

精确称取1.0g各种样品置于直径为3cm的结晶皿中，放在相对湿度(R.H.)为81％的干燥器内，吸湿48h，然后将其转移放在相对湿度(R.H.)为43％的干燥器内，分别在4h，6h，10h，12h，24h精确称取各试样重量，计算保湿率。

1.3实验结果

由图3可知，酸解后多糖的保湿活性明显增强，24小时后保湿率大于60％，与透明质酸保湿活性相近，比大分子量金耳多糖保湿活性强。

Claims (2)

1.一种金耳多糖，其是通过如下方法制备得到的：

①水提：将金耳子实体粉碎、热煮，得到金耳多糖水提液；

②醇沉：金耳多糖水提液通过乙醇沉淀，烘箱80℃加热干燥后得到金耳多糖干品A；

③酸解：金耳多糖干品A用0.5NHCl水溶液溶解，80℃降解，降解结束后用NaOH溶液中和至中性；

④醇沉：降解中和后的金耳粗多糖水溶液通过乙醇沉淀，洗涤，水复溶，进行冷冻干燥，即得到所需的金耳多糖B。

2.一种制备权利要求1所述金耳多糖的方法，其特征在于该方法为：

①水提：将金耳子实体粉碎、热煮，得到金耳多糖水提液；

②醇沉：金耳多糖水提液通过乙醇沉淀，烘箱80℃加热干燥后得到金耳多糖干品A；

③酸解：金耳多糖干品A用0.5NHCl水溶液溶解，80℃降解，降解结束后用NaOH溶液中和至中性；

④醇沉：降解中和后的金耳粗多糖水溶液通过乙醇沉淀，洗涤，水复溶，进行冷冻干燥，即得到所需的金耳多糖B。