CN103739726A - 一种海藻多糖的提取方法 - Google Patents

Abstract

一种海藻多糖的提取方法属海洋生物医药领域。按照以下步骤进行：（1）将海藻去杂洗净，干燥后粉碎；（2）称取100g海藻粉末,加70~90%乙醇回流提取4~6小时,过滤,药渣干燥后,加水超声提取5次,每次10min过滤,合并滤液于80~90℃浓缩至比重为1.03，醇,18~24h 醇沉浓度为80%；离心过滤得沉淀物，沉淀物反复水溶醇沉至无还原糖反应，再经无水乙醇，丙酮洗涤多次后得海藻多糖粗提物；（3）粗提物经活性碳脱色,Sevage法脱蛋白,流水透析法脱小分子,醇沉,真空干燥得海藻多糖。本发明一种海藻多糖的提取方法，方法简便快速,重现性好,回收率高。

Description

一种海藻多糖的提取方法

技术领域

本发明属海洋生物医药领域，特别涉及一种海藻多糖的提取方法。

背景技术

海藻为海产藻类植物的通称。中药海藻为马尾藻科海蒿子或羊栖菜的干燥藻体,具有软坚散结, 消痰利水的功能。临床用于治疗瘿瘤, 睾丸肿痛, 痰饮水肿等症 。现代研究表明,海藻具有增强免疫能力、抑制病毒和抗肿瘤的活性等作用。这些生物活性与其所含的海藻多糖密切相关。据报道海藻多糖是自然界广泛分布的一种非还原性双糖。其分子结构独特, 化学性质稳定。海藻多糖是一类高效的生物吸附剂, 海澡多糖具有降血脂、抗氧化、免疫调节等作用, 海藻多糖衍生物可作为细胞物质的寒冷保护介质。海藻糖这些奇妙的生物学特性, 使其在医药、食品、化妆品、农业等方面具有广阔的应用前景。海藻多糖的开发已成为国际范围的研究热点。

发明内容

本发明提供一种海藻多糖的提取方法，按照以下步骤进行：

（1）将海藻去杂洗净，干燥后粉碎；

（2）称取100g 海藻粉末, 加70~90% 乙醇回流提取4~6 小时, 过滤, 药渣干燥后, 加水超声提取5 次, 每次10min 过滤, 合并滤液于80~90 ℃浓缩至比重为1.03，醇,18~24h  醇沉浓度为80%；离心过滤得沉淀物，沉淀物反复水溶醇沉至无还原糖反应，再经无水乙醇，丙酮洗涤多次后得海藻多糖粗提物；

（3）粗提物经活性碳脱色, Sevage 法脱蛋白, 流水透析法脱小分子, 醇沉, 真空干燥得海藻多糖。

海藻多糖的含量测定按照以下方法进行：

标准曲线制作: 精密称取葡萄糖标准品12.50mg 溶于100ml 的容量瓶中,得到0.1250mg/ ml 的葡萄糖标准溶液。从标准溶液中, 分别吸取0.0、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0ml, 加水至1ml。再加10% 的苯酚溶液1ml、浓硫酸5ml, 摇匀后放置5min, 置沸水浴放置15min, 取出冷却至室温。在490nm 测其吸光度。得吸光度与浓度的回归方程: A= 53186C+ 010108。( r= 019990) 。

稳定性实验称取: 取已知浓度的多糖溶液0.5ml, 加水至1ml, 迅速加1ml 10% 的苯酚溶液、5ml 浓硫酸, 摇匀后放置5min, 置沸水浴放置15min, 取出冷却至室温。在490nm 测其吸光度。实验中发现其吸光度在0~ 25min 内稳定。

回收率试验: 吸取5 份已知浓度的海藻多糖溶液, 各加标准葡萄糖溶液, 依法测定吸光度, 由回归方程计算回收率。经计算，其回收率为95%以上，海藻多糖含量提取率为4.26~4.36%。

本发明从海藻中提取海藻多糖, 并可根据其具有较强的生物吸附能力、降血脂、抗氧化、增强免疫调节活性等, 将其开发成功能食品及药品, 或制备微胶囊。海藻多糖将可能成为人类主要的药物资源。海藻多糖的含量测定采用传统的苯酚- 硫酸法, 方法简便, 回收率高, 重现性好, 数据可信。

本发明一种海藻多糖的提取方法，方法简便快速, 重现性好, 回收率高。

具体实施方式

     本发明所用海藻为浙江象山产，所用化学试剂为市购。

实施例1

一种海藻多糖的提取方法，按照以下步骤进行：

（1）将海藻去杂洗净，干燥后粉碎；

（2）称取100g 海藻粉末, 加90% 乙醇回流提取4 小时, 过滤, 药渣干燥后, 加水超声提取5 次, 每次10min 过滤, 合并滤液于80~90 ℃浓缩至比重为1.03，醇, 24h  醇沉浓度为80%；离心过滤得沉淀物，沉淀物反复水溶醇沉至无还原糖反应，再经无水乙醇，丙酮洗涤多次后得海藻多糖粗提物；

（3）粗提物经活性碳脱色, Sevage 法脱蛋白, 流水透析法脱小分子, 醇沉, 真空干燥得海藻多糖4.36g.

实施例2

一种海藻多糖的提取方法，按照以下步骤进行：

（1）将海藻去杂洗净，干燥后粉碎；

（2）称取100g 海藻粉末, 加70% 乙醇回流提取4小时, 过滤, 药渣干燥后, 加水超声提取5 次, 每次10min 过滤, 合并滤液于80 ℃浓缩至比重为1.03，醇,18~24h  醇沉浓度为80%；离心过滤得沉淀物，沉淀物反复水溶醇沉至无还原糖反应，再经无水乙醇，丙酮洗涤多次后得海藻多糖粗提物；

（3）粗提物经活性碳脱色, Sevage 法脱蛋白, 流水透析法脱小分子, 醇沉, 真空干燥得海藻多糖4.34g。

实施例3

一种海藻多糖的提取方法，按照以下步骤进行：

（1）将海藻去杂洗净，干燥后粉碎；

（2）称取100g 海藻粉末, 加80% 乙醇回流提取5 小时, 过滤, 药渣干燥后, 加水超声提取5 次, 每次10min 过滤, 合并滤液于85 ℃浓缩至比重为1.03，醇,18~24h  醇沉浓度为80%；离心过滤得沉淀物，沉淀物反复水溶醇沉至无还原糖反应，再经无水乙醇，丙酮洗涤多次后得海藻多糖粗提物；

（3）粗提物经活性碳脱色, Sevage 法脱蛋白, 流水透析法脱小分子, 醇沉, 真空干燥得海藻多糖4.26g。

Claims (1)

1.一种海藻多糖的提取方法，其特征在于按照以下步骤进行：

（1）将海藻去杂洗净，干燥后粉碎；

（2）称取100g 海藻粉末, 加70~90% 乙醇回流提取4~6 小时, 过滤, 药渣干燥后, 加水超声提取5 次, 每次10min 过滤, 合并滤液于80~90 ℃浓缩至比重为1.03，醇,18~24h  醇沉浓度为80%；离心过滤得沉淀物，沉淀物反复水溶醇沉至无还原糖反应，再经无水乙醇，丙酮洗涤多次后得海藻多糖粗提物；

（3）粗提物经活性碳脱色, Sevage 法脱蛋白, 流水透析法脱小分子, 醇沉, 真空干燥得海藻多糖。