CN103372041A - 一种具有抗凝血作用的组分及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种抗凝血作用的组分及其制备方法，该提取物是由下述方法制备得到的：取三七或人参或西洋参药材用70％甲醇提取2次，提取液减压浓缩至干，即组分A；所述的提组分A用水溶解，溶解液上大孔树脂，用水、20％、30％、40％、50％乙醇依次洗脱，分别收集30％、50％洗脱液，分别减压浓缩至干制备得到组分B和C，组分C的抗凝血学作用显著优于组分B。

Description

一种具有抗凝血作用的组分及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种医药领域，具体涉及一种三七有效组分、制备方法及在抗凝血作用。

背景技术

三七为五加科三七(Panax Notoginseng(Burk.)F.H.Chen)的干燥根，别名参三七、田七、土三七、血山草、六月淋、蝎子草、铜皮铁骨、盘龙七、金不换，具有止血，散瘀，消肿，止痛的功效。

现代药理研究三七能够缩短出血凝血时间，具有抗血小板聚集及溶栓作用；能够促进多功能造血干细胞的增值，具有造血功能；能够降低血压，减慢心率，对各种药物诱发的心律失常均有保护作用；能够降低心肌耗氧量和氧利用率，扩张脑血管，增强脑血管流量；能够提高体液免疫功能，具有镇痛、抗炎、抗衰老等作用，能够明显治疗大鼠胃黏膜的萎缩性病变，并能逆转腺上皮的不典型增生和肠上皮化生，具有预防肿瘤作用。三七主要成分为皂苷、黄酮苷、氨基酸等，三七皂苷是三七活性成分，根据其苷元的不同可以分为原人参二醇类皂苷、原人参三醇类皂苷。现有技术研究原人参二醇类皂苷和原人参三醇类皂苷具有不同的药理作用，如人参二醇类皂苷对垂体作用明显，而人参三醇类皂苷作用则不明显；人参二醇类皂苷对血管的松弛作用要强于人参三醇类皂苷等。已有文献报道用硅胶柱层析分离人参二醇类皂苷和人参三醇类皂苷，但是不适合工业产业化。大孔树脂应用于人参总皂苷的分离，富集的比较多，单独分离原人参二醇类皂苷和原人参三醇类皂苷文献报道比较少。

抗凝血药物可以用于治疗血管内栓塞或血栓形成的疾病，预防中风或其它血栓性疾病，是通过影响凝血过程中的某些凝血因子阻止凝血过程的药物。常用的抗凝血药分4类，分别为肝素：通过抗凝血酶III实现，该制剂只能静脉给药，使用不便且副作用比较大；香豆素类：常用的双香豆素、华法令和新抗凝等，通过拮抗维生素K使肝脏合成凝血酶原及凝血因子VII、IX和X减少而抗凝，适用需较长时间抗凝者，需要范围窄；抗血小板药如阿司匹林、潘生丁等：小剂量阿司匹林对血小板坏氧化酶有抑制作用，并可防止血小板环氧化酶将花生四烯酸转化成前列腺素中间体，但长久服用易造成消化道出血，患者的依从性较弱；此外蛇毒溶栓剂如去纤酶、抗栓酶和清栓酶等：可溶解已形成的血栓使血管再通。上述抗凝药还是以西药为主，副作用比较大，因此，在发病率极高的病种，寻找高效低毒的抗凝药及其抗血栓辅助药物是当前抗血栓、防止中风研究的重要课题。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种抗凝血作用的中药组分，该中药组分能有效抗凝血作用。

本发明另一个目的是提供该组分的制备方法。

本发明还有一个目的是提供含有该组分的药学上可接受的制剂。

本发明是通过以下技术方案实现的：

本发明一种抗凝血作用的组分，是由下述步骤制备得到的：

(1)、取三七药材用含水甲醇或乙醇提取，提取液减压浓缩得到组分A；

(2)、组分A用水溶解，溶解液上大孔树脂，用20-29％、30-39％、40-49％、50-59％乙醇依次洗脱，收集30-39％洗脱液和收集50-59％的乙醇洗脱液；

(3)、30-39％的乙醇洗脱液浓缩得到组分B；50-59％的乙醇洗脱液浓缩得到组分C；

所述组分A、B、C中一种或其任意组合即是有效组分。

其中，步骤1中含水甲醇或乙醇为：50-80％的甲醇或50-95％的乙醇，优选50-80％的甲醇，最优选的是70％甲醇。

上述甲醇提取方法包括但不限于：回流提取、超声提取、二氧化碳超临界萃取、微波提取等，优选超声提取法。

本发明所述的超声波提取1-3次，每次10-30min，优选提取2次，每次20min，此时三七总皂苷提取完全，回收率高。其中提取所用溶剂的量为：药材的量的5-15倍(v/w)。

其中步骤(2)优选组分A再用水溶解，溶解液上大孔树脂，用20％、30％、40％、50％、60％乙醇依次洗脱，收集30％乙醇和50％洗脱液。

本发明所述的乙醇洗脱速度为1.0-2.0ml/min，优选速度为1.5ml/min。

为了更好的纯化本发明的组分，在大孔树脂上样前，先预处理大孔树脂，方法为；干树脂通过乙醇浸泡，上柱，酸洗、碱洗。所述的酸为盐酸，所述的碱为氢氧化钠。

本发明所述大孔树脂乙醇洗脱前，先用水洗脱，弃去。

本发明所述大孔树脂型号包括但不限于：AB-8柱、D101柱、D201柱、D301柱、HPD100柱、HPD300柱、HPD600柱、NKA-9柱、DA201型、D-型、SIP系列、X-5型、GDX104型、LD605型、LD601型、CAD-40型、DM-130型、R-A型、CHA-111型、WLD型(混合型)、H107型等，优选D101型、AB-8型，最佳D101型。

其中步骤(3)中所述的浓缩包括但不限于：减压浓缩、真空浓缩、膜浓缩、水浴加热浓缩、优选减压浓缩。

本发明所述的三七药材包括但不限于三七根、三七花、三七茎、三七叶，优选三七根粉碎用药。

由于人参和西洋参含有和三七同样的成分，本发明所述的三七药材可以用人参或西洋参代替，制备方法不变，功效不变。

本发明还提供了具有抗凝血作用中药组分的制备方法，其包括如下步骤

(1)三七药材用70％甲醇提取2次，提取液减压浓缩至干，即组分A；

(2)所述的组分A用水溶解，溶解液上大孔树脂，用水、20％、30％、40％、50％乙醇依次洗脱，分别收集30％、50％洗脱液，分别减压浓缩至干制备得到组分B和C。

经过检测，本发明上述组分A中包括活性成分三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和人参皂苷Rd一种或几种；组分B中包括活性成分：三七皂苷R1、人参皂苷Rg1一种或两种；组分C中包括人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd一种或两种。其中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1代表原人参三醇类皂苷，人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd代表原人参二醇类皂苷。以上组分A，组分B，组分C中一种或其任意组合都属于本发明的抗凝血作用的有效组分。

本发明还提供具有抗凝血作用的中药组分制成药学上可接受的制剂或作为药物组合物的有效组分。该组分在制剂中所占重量百分比可以是0.1～99.9％，其余为药物可接受的载体，按照制剂常规方法制备。

本发明的组分，其药物制剂形式可以是任何口服制剂或注射剂。其中口服制剂包括但不限于：片剂，糖衣片剂，薄膜衣片剂，肠溶衣片剂，胶囊剂，硬胶囊剂、软胶囊剂、口服液、口含片、口崩片、颗粒剂。冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、滴丸剂，微丸剂、栓剂、霜剂、喷雾剂等；注射剂包括但不限于：静脉注射剂，粉针剂、皮下注射剂等。

本发明的组分，在制备成药剂时可选择性的加入适合的药物可接受的载体，所述药物可接受的载体选自：甘露醇、山梨醇、焦亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、盐酸半胱氨酸、巯基乙酸、蛋氨酸、维生素C、EDTA二钠、EDTA钙钠，一价碱金属的碳酸盐、醋酸盐、磷酸盐或其水溶液、盐酸、醋酸、硫酸、磷酸、氨基酸、氯化钠、氯化钾、乳酸钠、木糖醇、麦芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纤维素及其衍生物、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、土温80、琼脂、碳酸钙、碳酸氢钙、表面活性剂、聚乙二醇、环糊精、β-环糊精、磷脂类材料、高岭土、滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁等。

本发明还提供了该组分具有抗凝血方面的功效，能够预防和治疗血栓或中风方面的疾病。

为了更好的了解本发明的有益效果，通过下述试验例加以说明。

试验例1本发明原人参二醇类皂苷和原人参三醇类皂苷的含量测定方法

1.供试品制备：取实施例一的提取物A 96mg、提取物B 450mg、提取物C594mg，用色谱甲醇溶解，置50mL容量瓶中定容，过0.22μm滤膜过滤，备用；

2、对照品的制备：取三七皂苷R1：6.20mg，人参皂苷Rg1：30.81mg，人参皂苷Rb1：29.45mg，人参皂苷Rd：7.34mg，用色谱甲醇溶解，置50mL容量瓶中定容。

3.色谱条件与系统适用性试验；超高效液相色谱仪Waters UPLC，柱子型号：AcquityBEH C₁₈ 1.7μm*2.1*100mm，检测波长：203nm，流速0.4ml/min，柱温45℃，自动进样器温度15℃，洗脱条件为：水-乙腈，见表1

表1 洗脱条件

时间(min)

溶液A水(％)

溶液B乙腈(％)

0-0.2	98	2
			0.2-2.0	75	25
2.0-2.5	75	25
			2.5-4.0	65	35
4.0-5.7	40	60
			5.7-7.5	20	80
7.5-9.3	10	90
			9.3-10.5	2	98
10.5-11.0	98	2
			11.0-13.0	98	2

4、测定方法，取供试品溶液及对照品溶液按照上述色谱条件，进样体积2微升，测定，见附图1-5。

试验例2本发明大孔树脂洗脱溶剂的选择

本发明的技术方案中大孔树脂洗脱溶剂是发明人经过创造性劳动获得，发明人选择多个梯度的洗脱浓度及洗脱剂用量进行筛选得出本发明的制备方法，该方法回收率高，生产成分低，易于操作，适合产业化。

取实施例1的组分A，用200ml水溶解，上样。分别用200ml 20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、95％乙醇溶液洗脱，每个浓度收集200mL洗脱液，每收集50mL洗脱液，为一个样品。每个样品用0.22μm滤膜过滤，按照试验例1的UPLC分析。

本发明中以三七皂苷R1、人参皂苷Rg1的含量代表三七中的原人参三醇类皂苷(PTS)的含量；以人参皂苷Rb1的含量代表三七中的原人参二醇类皂苷(PDS)的含量。结果见表2-9.

表2 20％乙醇洗脱的含量

	20-1(50ml)	20-2(100ml)	20-3(150ml)	20-4(200ml)
					R1	0.6483842	1.046505	0.694121	0.530187
Rg1	1.7118522	3.168609	2.399386	1.92515
					Rb1	0	0	0	0

表3 30％乙醇洗脱的含量

表4 40％乙醇洗脱的含量

	40-1(450ml)	40-2(500ml)	40-3(550ml)	40-4(600ml)
					R1	0.306688	0.109699	0	0
Rg1	3.863984	2.0097	0.393142	0.107996
					Rb1	0.668441	2.567641	2.348869	2.074277

表5 50％乙醇洗脱的含量

	50-1(650ml)	50-2(700ml)	50-3(750ml)	50-4(800ml)
					R1	0	0	0	0
Rg1	0	0	0	0
					Rb1	8.491547	8.2437	3.278045	1.546842

表6 60％乙醇洗脱的含量

	60-1(850ml)	60-2(900ml)	60-3(950ml)	60-4(1000ml)
					R1	0	0	0	0
Rg1	0	0	0	0
					Rb1	0.77417	0.163286	0.020118	-0.00731

表7 70％乙醇洗脱的含量

	70-1(1050ml)	70-2(1100ml)	70-3(1150ml)	70-4(1200ml)
					R1	0	0	0	0
Rg1	0	0	0	0
					Rb1	-0.00681	0	0	0

表8 80％乙醇洗脱的含量

	80-1(1250ml)	80-2(1300ml)	80-3(1350ml)	80-4(1400ml)
					R1	0	0	0	0
Rg1	0	0	0	0
					Rb1	0	0	0	0

表9 95％乙醇洗脱的含量

	95-1(1450ml)	95-2(1500ml)	95-3(1550ml)	95-4(1600ml)
					R1	0	0	0	0
Rg1	0	0	0	0
					Rb1	0	0	0	0

从上表2-9可见，原人参三醇类皂苷(R1，Rg1)在洗脱液600ml(40％乙醇)之前被洗脱下来，且200ml-400ml(30％乙醇)洗脱液的浓度较高。40％乙醇之后，对于二醇类皂苷(Rb1)，从400ml(40％乙醇)时开始被洗脱下来，在600ml-800ml(50％乙醇)洗脱时，浓度达到最大，而当洗脱溶剂达到60％乙醇时，二醇类皂苷含量明显减少可忽略不计。当洗脱溶剂达到70％以上，洗脱液中不存在原人参三醇类皂苷和原人参二醇类皂苷的含量。

试验例3本发明的有效组份具有抗凝血作用

1方法

1.1试验样品制备

试验用药：取实施例1的组分A、B、C用PBS缓冲液配制成梯度浓度样品(5mg/ml，10mg/ml，15mg/ml，20mg/ml，25mg/ml，30mg/ml，40mg/ml)。

阳性对照组：华法林钠(5mg/ml，PBS缓冲液溶解)

空白对照组：PBS溶液

制备血浆样品：用纯化水对冻干混合人血浆(Ci-Trol level 1)进行重新配制，现用现配。在测定PT之前，将200μl血浆与100μl试样(PBS溶解)混合形成血浆混合物。

PBS缓冲液配制：称取氯化钾(KCl)0.2g，磷酸二氢钾(KH2PO4)0.2g，氯化钠(NaCl)8.0g，12水合磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)3.58g，溶于1L纯化水，调pH值于7.2-7.4。

1.2凝血酶原时间(PT)测定

仪器材料：LG-PABER-I凝血分析仪，移液枪(100μl，50μl各一把)，枪头若干，测试杯、测试珠若干。

将PT试剂按照规定剂量用缓冲溶液复溶，轻轻混匀后置于仪器的37℃试剂预温孔内，预温时间大于10min，使用前摇匀。

在测试杯中加入测试珠，然后将50μl待测血浆混合物加入测试杯中。于37℃预温区准确预温180s。

将预温后的37℃PT试剂100μl加入上述测试杯，同时启动仪器，进行自动测试，记录结果并换算INR值

2、结果

2.1凝血酶原时间(PT)测定实验结果见表10及图5

表10PT实验原始数据

阳性对照PT值(5mg/mL华法林钠，s)：13.95

空白对照(PBS缓冲液，s)：13.25

从表10、图5可见本发明的组分A、B、C都具有抗凝血的功效，具体为：

1、组分C(原人参二醇类皂苷)延长PT时间的作用在最小浓度的时候都大于组分B(原人参三醇类皂苷)最大浓度时候的作用，其组分C的有效使用量是组分B有效使用量的8倍。

2、另外在高浓度时组分A延长PT时间的作用大于组分C(原人参二醇类皂苷)的作用

3、组分C(原人参二醇类皂苷)在浓度为20mg/mL时延长PT时间作用基本达到最大值。

4、组分C的抗凝血效果呈剂量依赖性上升趋势，而组分B没有明显呈剂量线性趋势，且

组分C在浓度为5mg/ml时的PT值就为组分B在浓度为40mg/ml的PT值，可见组分C的抗凝血作用显著优于组分B。

本发明的提取物具有预防或缓解因凝血作用而导致的血栓或中风的作用。

本发明的原人参二醇类皂苷和原人参三醇类皂苷还可以通过现有技术制备得到，用化学合成，例如(《原人参二醇和三醇的制备》北京师范大学学报(自然科学版)2011，0447(2)，168-169)公开的制备方法制备得原人参二醇和原人参三醇具有与本发明相同的功效，原人参二醇类皂苷类比原人参三醇皂苷类抗凝血效果好。

本发明的所有实施例都具有同实施例1相同的功效及作用。

附图说明

图1、对照品图谱；

图2、组分A(上柱样品)图谱；

图3、组分CB(30％乙醇)洗脱下来的是人参三醇类皂苷；

图4、组分C(50％乙醇)洗脱下来的是人参二醇类皂苷；

图5、以组分为基准PT实验结果图，其中30％醇洗提取物即组分B，50％醇洗提取物即组分C，410提取物即组分A.

具体实施方式

通过下面具体实施方式解释本发明的内容，并不是对本发明保护范围的进一步限定。

实施例1、

1、称取三七主根粉末70.07g，700mL70％甲醇超声提取20min，重复提取1次，过滤，合并滤液，减压蒸馏至干得组分A，用350ml纯化水溶解，备用；

1.2大孔吸附树脂分离三七根中人参三醇类皂苷和人参二醇类皂苷

树脂预处理：15g干树脂D101通过乙醇浸泡，上柱，酸洗(115ml 5％盐酸)和碱洗(100ml 5％氢氧化钠)。

上样：350mL水溶液3000rpm离心30min，过滤，备用。上样200mL，流速1mL/min，弃去前10mL流出液，收集之后的流出液，共200M1，0.22μm滤膜过滤，进行UPLC分析。

洗脱：配制20％、30％、40％和50％乙醇溶液各300ml。先用200ml纯化水对大孔树脂柱进行洗脱，然后依次用200ml 20％乙醇、200ml 30％乙醇、200ml 40％乙醇和200ml 50％乙醇洗脱，流速为1.5ml/min。分别收集30％乙醇、50％乙醇洗脱液，减压浓缩干燥即得本发明组分B、C。

实施例2

称取人参主根粉末70g，70％甲醇超声提取2次，每次10min过滤，合并滤液，减压蒸馏至干得组分A，用350ml纯化水溶解，备用，

上样：350mL水溶液3000rpm离心30min，过滤，备用，上样200mL，流速1mL/min，弃去前10mL流出液，收集之后的流出液，共200mL。

洗脱：配制20％、30％、40％和50％乙醇溶液各300ml，先用200ml纯化水对大孔树脂柱AB-8进行洗脱，然后依次用200ml 20％乙醇、200ml 30％乙醇、200ml 40％乙醇和200ml 50％乙醇洗脱，流速为1.5ml/min。分别收集30％乙醇、50％乙醇洗脱液，减压浓缩干燥即得本发明组分B、C。

实施例3

称取西洋参主根粉末70g，70％乙醇超声提取3次，每次10min过滤，合并滤液，减压蒸馏至干得组分A，用溶解，备用，

上样：水溶液离心30min，过滤，备用，上样200mL，流速1mL/min，弃去前10mL流出液，收集之后的流出液，共200mL。

洗脱：配制20％、30％、40％和50％乙醇溶液各300ml。先用200ml纯化水对大孔树脂柱进行洗脱，然后依次用200ml 20％乙醇、200ml 30％乙醇、200ml 40％乙醇和200ml 50％乙醇洗脱，流速为1.8ml/min。分别收集30％乙醇、50％乙醇洗脱液，减压浓缩干燥即得本发明组分B、C。

实施例4

称取三七根粉末70g，80％乙醇回流提取3次，每次30min过滤，合并滤液，减压蒸馏至干得组分A，用纯化水溶解，备用，

上样：350mL水溶液3000rpm离心30min，过滤，备用。上样200mL，流速1.5mL/min，弃去前10mL流出液，收集之后的流出液，共200mL。

洗脱：配制20％、30％、40％和50％乙醇溶液各300ml。先用200ml纯化水对大孔树脂柱进行洗脱，然后依次用200ml 20％乙醇、200ml 30％乙醇、200ml 40％乙醇和200ml 50％乙醇洗脱，流速为2.0ml/min。分别收集30％乙醇、50％乙醇洗脱液，减压浓缩干燥即得本发明组分B、C。

实施例5

称取三七花粉末70g，80％乙醇微波萃取2次，每次20min过滤，合并滤液，减压蒸馏至干得组分A，用纯化水溶解，备用，

洗脱：配制20％、30％、40％和50％乙醇溶液各300ml。先用200ml纯化水对大孔树脂柱进行洗脱，然后依次用200ml 20％乙醇、200ml 30％乙醇、200ml 40％乙醇和200ml 50％乙醇洗脱，流速为1.0ml/min。分别收集30％乙醇、50％乙醇洗脱液，减压浓缩干燥即得本发明组分B、C。

实施例6、颗粒剂

取实施例1-5任意组分A或B或C或其组合100g，分别加入1.5倍量的糊精，0.5％蔗糖，1.5％微晶纤维素，用适量乙醇溶解制成软材，制粒，60℃鼓风干燥，制粒，整粒，即得颗粒剂。

实施例7、滴丸

取实施例1-5任意组分A或B或C或其组合100g，加入1000g的聚乙二醇，混合均匀，熔融，上滴丸机，制成滴丸。

实施例8、口腔崩解片

取实施例1-5任意组分A或B或C或其组合100g，加入5％交联聚维酮，0.1％的硬脂酸镁，50％的微晶纤维素，用适量乙醇溶液制成软材，制粒，60℃鼓风干燥，制粒，整粒，压制成片，即得口腔崩解片。

实施例9、粉针剂

取实施例1-5任意组分A或B或C或其组合0.5g，葡萄糖4.5g、硫代硫酸钠0.9g和蒸馏水1ml，上述组分混合均匀后，冷冻干燥，分装500支，即得粉针剂。

实施例10、胶囊剂

取实施例1-5任意组分A或B或C或其组合100g，加入等量淀粉，蔗糖和硬脂酸镁，制粒，装入胶囊，即得胶囊剂。

实施例11、片剂

取实施例1-5任意组分A或B或C或其组合100g，与淀粉，羧甲基纤维素钠、滑石粉混合均匀，制粒，压片即得片剂。

实施例12、口服液

取实施例1-5任意组分A或B或C或其组合2g，与糖浆4g、溶于100ml的纯净水中，均质，过滤，经过高温瞬时灭菌(135℃，4s)。无菌灌装、分装。制得口服液。

上述实施例及说明书范围内的组分量可以根据生产需要同时扩大或缩小比例。

Claims (11)

1.一种抗凝血作用的组分，其特征在于，是由下述步骤制备得到的：

(1)、取三七药材用含水甲醇或乙醇提取，提取液减压浓缩得到组分A；

(2)、组分A用水溶解，溶解液上大孔树脂，用20-29％、30-39％、40-49％、50-59％乙醇依次洗脱，收集30-39％乙醇洗脱液和收集50-59％的乙醇洗脱液；

(3)、30-39％的乙醇洗脱液浓缩得到组分B；50-59％的乙醇洗脱液浓缩得到组分C；

所述组分A、B、C中一种或其任意组合即是有效组分。

2.如权利要求1所述的组分，其特征在于：所述步骤(1)三七药材用50-80％甲醇或50-95％的乙醇提取，提取液减压浓缩至干得组分A；步骤(2)组分A再用水溶解，溶解液上大孔树脂，用20％、30％、40％、50％、60％乙醇依次洗脱，收集30％乙醇和50％洗脱液。

3.如权利要求1或2所述的组分，其特征在于：步骤(1)中所述的提取为回流提取、超声提取、二氧化碳超临界萃取或微波提取，提取1-3次，每次10-30min。

4.如权利要求1中所述的组分，其特征在于：步骤(1)中所述的三七还可以用人参或西洋参替代。

5.权利要求1所述的组分，其特征在于：所述大孔树脂乙醇洗脱前，先预处理大孔树脂，再用水洗脱，弃去。

6.权利要求1-4任意一项所述的组分制成药学上可接受的制剂或作为药物组合物的有效组分。

7.一种抗凝血作用的组分制备方法，其特征在于，包括如下步骤；

(1)三七或人参或西洋参药材用70％甲醇提取2次，提取液减压浓缩至干，即组分A；

(2)所述的组分A用水溶解，溶解液上大孔树脂，用水、20％、30％、40％、50％乙醇依次洗脱，分别收集30％、50％洗脱液，分别减压浓缩至干制备得到组分B和C；

所述组分A、B、C中一种或其任意组合即是有效组分。

8.权利要求1-4任意一项所述的组分在制备治疗抗凝血或抗血栓或抗中风药物中的应用。

9.如权利要求8中所述的应用，其特征在于：所述的组分C的抗凝血作用强于组分B抗凝血作用。

10.如权利要求9所述的应用，其特征在于：所述的组分C的抗凝血作用有效浓度不低于组分B抗凝血作用的有效浓度的8倍。

11.如权利要求9或10所述的应用，其特征在于：所述的组分C为原人参二醇类皂苷，所述组分B为原人参三醇类皂苷。

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