CN103340149A - 种间杂交枇杷的砧木筛选方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种种间杂交枇杷的砧木筛选方法，通过从种间杂种的群体中选出优良的株系，从这些杂种后代中选择3个根系最好作为候选砧木，通过培养和筛选，每年每个芽可繁殖1万株以上。通过本发明的方法可以获得根系深的砧木，克服栽培枇杷根系浅的毛病，可以获得嫁接亲和性比野生枇杷更好的砧木材料，克服嫁接不亲和现象。

Description

种间杂交枇杷的砧木筛选方法

技术领域

本发明属于农业技术领域，具体而言，涉及一种种间杂交枇杷的砧木筛选方法。 

背景技术

枇杷(Eriobotrya japonica Lindl.)是一种原产我国的亚热带特色果树，全国种植超过200万亩，耗劳力较多，产值也较高，产值超过100亿元，以四川种植最多，福建次之。枇杷叶还是传统止咳中草药。 

枇杷的繁殖传统上采用实生繁殖，即用种子播种繁殖。这种繁殖方法使得后代变异较多，整个枇杷园的枇杷生长不整齐，是落后的繁殖方式。我国自上世纪七十年代开始，逐渐采用嫁接繁殖，至本世纪全国多数的枇杷园都是采用嫁接苗。枇杷像其他果树一样，嫁接繁殖需要选择好的砧木材料。目前，我国和日本、印度等亚洲国家种植枇杷95％以上用本砧，即用栽培枇杷的种子播种出来的实生苗作为砧木；另一方面，在地中海沿岸国家，例如以色列、土耳其、西班牙等，采用近缘属果树例如火棘(Pyracantha fortuneana Roem)和榅桲(Cydonia oblonga Mill)作为砧木，我国的苏州历史上也有用近缘属植物石楠作为砧木的(详见现有技术二的技术方案)，现在很少使用。 

枇杷和榅桲、火棘、石楠都属于蔷薇科苹果亚科，它们之间可以嫁接成活，甚至也可以杂交获得后代。枇杷也是一个属，这个属全世界有30多个种，中国有20个种，但作为果树栽培只有普通枇杷一个种。即全世界有几百个品种，都是普通枇杷，普通枇杷嫁接繁殖所用的砧木如前所述。 

但是，在枇杷属中还有不少种的野生枇杷，例如栎叶枇杷、椭圆枇杷、广西枇杷等，果实也是可食的。因此，能否用普通枇杷与野生枇杷嫁接、甚至杂交，引起枇杷学界的关注。 

普通枇杷是枇杷属中目前全球唯一的一个栽培种，在全球至少有上百个栽培品种，但所有这些品种在一些性状的表现上很类似，例如：根系浅、种子大而多。栎叶枇杷是普通枇杷的近缘种，也是秋冬季开花、春天至初夏果实成熟，但果实很小，没有直接进行果树栽培利用的价值，但其根系比例较普通枇杷大。除了栎叶枇杷本种，还有大渡河变种和老挝变种。具备一定的遗传多样性。 

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的缺陷，提供一种种间杂交枇杷的砧木筛选方法。为了实现本发明的目的，拟采用如下技术方案： 

本发明一方面涉及一种种间杂交枇杷的砧木筛选方法，所述的方法包括如下步骤： 

1在进行种间杂交后代选择阶段，在选出优良的株系后，不要抛弃没选上的杂种后代材料； 

2在种间杂交的后代中，根系大小会各有不同，选择根系较为强大者，培育实生苗，一年时洗净根系所带的土，比较根长(分别占50分)和根的总鲜重(分别占50分)，即以根最长或最重者为50分，根据比例对实生苗根长和总鲜重进行打分，选出总得分最高的头三 名，作为砧木的候选实生苗； 

3将头三名砧木候选者进行茎尖培养离体繁殖： 

3.1取茎尖按常规消毒灭菌，选用的消毒剂种类及其方法是：75％乙醇30秒过一下，0.1％升汞消毒5分钟，消毒后，用无菌水冲洗3～5次，接种于MS+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+GA30.5mg/L的培养基上，一个月后无菌芽萌发； 

3.2茎尖在培养基中抽枝，每个芽可繁殖4-10个新芽； 

3.3将上述的每个芽分开，转移进MS+IBA100毫克/升的培养基中培养一个月； 

3.4将长根的苗移到盆钵里，让它充分生长，为嫁接做准备。 

4将三组砧木候选者均培养强壮后，剪去顶端，采用普通的切接法进行嫁接试验，每个组嫁接30株以上，2个月后，挑选成活率高，而且嫁接口表现亲和特征的砧木作为最佳砧木； 

5对最佳砧木进行大量的茎尖培养离体繁殖，每个芽每年繁殖1万株以上，作为杂交品种的砧木。 

在本发明的一个优选实施方式中，所述的种间杂交是指栽培枇杷和栎叶枇杷的杂交。 

通过本发明的方法可以获得根系深的砧木，克服栽培枇杷根系浅的毛病。野生枇杷的根系普遍比栽培枇杷深，栽培枇杷与野生枇杷的种间杂种后代的根系通常会广泛分离，但大多数表现“趋中变异”，即为两者的折中，或者接近平均值，通过本发明的筛选，能够获得根系最深的株系，作为砧木。 

本发明可以获得嫁接亲和性比野生枇杷更好的砧木材料，克服嫁接不亲和现象。野生枇杷根系深，但用它作为栽培枇杷的砧木，可能会出现嫁接不亲和现象。采用杂种后代做材料，可能亲和性会比本砧差些，但一般会比野生枇杷好些。关键是我们经过嫁接试验(2.2.4)，选出亲和性较佳者作为砧木，兼顾了根系深和嫁接亲和性好。 

本发明利用离体繁殖获得的无性系作为砧木材料，它们在遗传上是一致的。这要比直接采用野生枇杷种子播种获得的实生苗作砧木，具有整齐一致的优点。 

具体实施方式

下面通过实施例详细叙述本发明的技术内容，分步介绍如下： 

1在进行种间杂交(栽培枇杷X栎叶枇杷)后代选择阶段，在选出优良的株系后，不要抛弃没选上的杂种后代材料，尤其不能抛弃尚不了解其根系大小的材料。 

2在栽培枇杷X栎叶枇杷等枇杷属的种间杂交的后代中，根系大小会各有不同，选择根系较为强大者，培育实生苗，一年时洗净根系所带的土，比较根长(分别占50分)和根的总鲜重(分别占50分)，即以根最长者为50分，根据比例对实生苗根长和总鲜重进行打分，选出总得分最高的头三名，作为砧木的候选实生苗。 

3将头三名砧木候选者进行茎尖培养离体繁殖： 

3.1取茎尖按常规消毒灭菌(选用的消毒剂种类及其方法是：75％乙醇30秒过一下，0.1％升汞消毒5分钟)，消毒后，用无菌水冲洗3～5次，接种于MS+BA(6苄基腺嘌呤)0.5mg/L+NAA(萘乙酸)0.1mg/L+GA3(赤霉素)0.5mg/L的培养基上，一个月后无菌芽萌发。 

3.2茎尖在“增殖”培养基中抽枝，每个芽可繁殖4-10个新芽； 

3.3将上述的每个芽分开，转移进MS+IBA100毫克/升的培养基中培养一个月，每个芽苗都会长处旺盛的根。 

3.4将长根的苗移到盆钵里，让它充分生长(半年左右)，为嫁接做准备。 

4将三组砧木候选者均培养强壮后，剪去顶端，采用普通的切接法进行嫁接试验，每个 组嫁接30株以上，2个月后嫁接成活率基本稳定(成活率90％以上)，挑选成活率最高者，而且嫁接口表现亲和特征(即上下大小均匀)的砧木作为最佳砧木。 

5对最佳砧木进行大量的茎尖培养离体繁殖，每个芽每年可繁殖1万株以上，作为杂交品种的砧木，平均根系鲜重约等于地上部的重量2/3，最高的个体接近地上部的重量，最低的也超过地上部重量的一半；野生种较佳的根系鲜重可接近地上部的重量；栽培枇杷根系鲜重通常低于地上部的一半，砧木的嫁接成活率通常在90％以上，而且成活者嫁接口均表现亲和特征，没有出现明显的上大下小和上小下大的不亲和特征)。 

上述实施例的技术方案重复实施5次，都能够得到相似的效果，说明采用本发明的方案能够有效获得根深且亲和性强的砧木。 

以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何不经过创造性劳动想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应该以权利要求书所限定的保护范围为准。 

Claims (2)

1.一种种间杂交枇杷的砧木筛选方法，所述的方法包括如下步骤：

(1)在进行种间杂交后代选择阶段，在选出优良的株系后，不要抛弃没选上的杂种后代材料；

(2)在种间杂交的后代中，根系大小会各有不同，选择根系较为强大者，培育实生苗，一年时洗净根系所带的土，比较根长(分别占50分)和根的总鲜重(分别占50分)，即以根最长或最重者为50分，根据比例对实生苗根长和总鲜重进行打分，选出总得分最高的头三名，作为砧木的候选实生苗；

(3)将头三名砧木候选者进行茎尖培养离体繁殖：

3.1取茎尖按常规消毒灭菌，选用的消毒剂种类及其方法是：75％乙醇30秒过一下，0.1％升汞消毒5分钟，消毒后，用无菌水冲洗3～5次，接种于MS+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+GA30.5mg/L的培养基上，一个月后无菌芽萌发；

3.2茎尖在培养基中抽枝，每个芽可繁殖4-10个新芽；

3.3将上述的每个芽分开，转移进MS+IBA100毫克/升的培养基中培养一个月；

3.4将长根的苗移到盆钵里，让它充分生长，为嫁接做准备。

(4)将三组砧木候选者均培养强壮后，剪去顶端，采用普通的切接法进行嫁接试验，每个组嫁接30株以上，2个月后，挑选成活率高，而且嫁接口表现亲和特征的砧木作为最佳砧木；

(5)对最佳砧木进行大量的茎尖培养离体繁殖，每个芽每年繁殖1万株以上，作为杂交品种的砧木。

2.根据权利要求1所述的筛选方法，所述的种间杂交是指栽培枇杷和栎叶枇杷的杂交。