CN103330001A - 一种鼠李糖乳杆菌发酵豆乳的制备方法 - Google Patents

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王玉华
朴春红
于寒松
刘俊梅
代伟长
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Abstract

本发明公开了一种鼠李糖乳杆菌发酵豆乳的制备方法，该制备方法包括以下步骤：按普通豆乳加工方式制备豆乳；接种鼠李糖乳杆菌工作发酵剂；恒温发酵、搅拌、冷却；冷藏包装成品。本发明提供的鼠李糖乳杆菌发酵豆乳可以用于预防和缓解酒精性肝损伤，无其它毒副作用，不会对肝脏造成二次损伤，可以直接饮用；此外，本发明提供的鼠李糖乳杆菌发酵豆乳的制备方法成本低，操作简单，具有良好的发展前景。

Description

一种鼠李糖乳杆菌发酵豆乳的制备方法
技术领域
本发明属于食品、保健食品技术领域，尤其涉及一种鼠李糖乳杆菌发酵豆乳的制备方法。
背景技术
酒精性肝损伤属于化学性肝损伤，长期大量饮酒引起的酒精性脂肪肝，能够导致炎症、纤维化、肝硬化甚至肝癌。
研究表明，来源于肠道内G-细菌细胞壁的内毒素是促成酒精性肝损伤的关键因素之一。研究人员发现酒精性肝损伤患者的血浆内毒素水平明显高于正常人，酒精、内毒素和肝损伤之间的关系日趋明显。由于肠上皮屏障功能，来源于肠道内G-细菌细胞壁的内毒素通常极微量的存在于血液中。然而，在一些病理条件下，内毒素的泄露会增加。大量研究表明，酒精会引起肠上皮屏障功能损伤，肠道通透性与正常相比会显著提高。
益生菌能够耐受动物消化道环境，具有能够在人和动物肠道内定植，起到调节肠道菌群、预防和治疗腹泻、排除毒素和提高机体免疫力等功能特性，目前已被应用于发酵乳制品、婴儿食品、果汁、果汁饮料以及药品等领域，并得到了广大消费者和医疗工作者的认可。临床研究表明，酒精性肝损伤患者服用益生菌后，肝脏功能得到明显改善。另外有研究表明，益生菌能够调节肠道上皮细胞间的连接，改善肠上皮细胞的物理屏障功能，对肠道通透性具有调节作用。
益生菌修复酒精引起的肠上皮屏障功能损伤对酒精性肝损伤起到保护和治疗作用的产品目前尚未发现。
发明内容
本发明实施例的目的在于提供一种鼠李糖乳杆菌发酵豆乳的制备方法，旨在解决目前预防和缓解酒精性肝损伤的食品、保健品缺乏的问题。
本发明实施例是这样实现的，一种鼠李糖乳杆菌发酵豆乳的制备方法，该制备方法包括以下步骤：
按普通豆乳加工方式制备豆乳；
接种鼠李糖乳杆菌工作发酵剂；
恒温发酵、搅拌、冷却；
冷藏包装成品。
进一步、制备豆乳的具体方法为：挑选大豆，清洗干净后浸泡，磨浆获得豆浆。
进一步、豆乳可以采用牛奶与豆乳混合物代替。
进一步、鼠李糖乳杆菌工作发酵剂包括鼠李糖乳杆菌、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌。
进一步、鼠李糖乳杆菌工作发酵剂中鼠李糖乳杆菌、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌的比例为1～3∶1∶1∶1。
进一步、制备鼠李糖乳杆菌工作发酵剂的方法为：鼠李糖乳杆菌、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌活化，然后按比例混匀。
进一步、豆乳恒温发酵的温度为37～42℃，发酵时间为2～6小时。
进一步、豆乳发酵后置于4℃进行后发酵，时间为12小时。
鼠李糖乳杆菌发酵豆乳口服剂量为每天109～1012CFU。
本发明提供的鼠李糖乳杆菌发酵豆乳可以用于预防和缓解酒精性肝损伤，无其它毒副作用，不会对肝脏造成二次损伤，可以直接饮用；此外，本发明提供的鼠李糖乳杆菌发酵豆乳的制备方法成本低，操作简单，具有良好的发展前景。
附图说明
图1是本发明实施例提供的鼠李糖乳杆菌发酵豆乳的制备方法流程图。
图2是本发明实施例提供的LS对酒精性肝损伤作用H&E染色的示意图；图中PF为对照组，AF为酒精组，AF+LS为LS处理组。
图3是本发明实施例提供的LS对酒精性肝损伤作用的血清中内毒素LPS水平示意图。
图4是本发明实施例提供的LS对酒精性肝损伤作用的肝脏中转氨酶ALT水平示意图。
图5是本发明实施例提供的鼠李糖乳杆菌发酵豆乳对酒精引起的小鼠肝脏MPO升高的修复作用示意图。
图6是本发明实施例提供的鼠李糖乳杆菌发酵豆乳对酒精引起的小鼠肝脏TNF-α的修复作用示意图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
图1示出了本发明提供的鼠李糖乳杆菌发酵豆乳的制备方法的流程。为了便于说明，仅仅示出了与本发明相关的部分。
如图1所示，本发明的实施例提供的鼠李糖乳杆菌发酵豆乳的制备方法包括以下步骤：
按普通豆乳加工方式制备豆乳；
接种鼠李糖乳杆菌工作发酵剂；
恒温发酵、搅拌、冷却；
冷藏包装成品。
作为本发明实施例的一优化方案，制备豆乳的具体方法为：挑选大豆，清洗干净后浸泡，磨浆获得豆浆。
作为本发明实施例的一优化方案，豆乳可以采用牛奶与豆乳混合物代替。
作为本发明实施例的一优化方案，鼠李糖乳杆菌工作发酵剂包括鼠李糖乳杆菌、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌。
作为本发明实施例的一优化方案，鼠李糖乳杆菌工作发酵剂中鼠李糖乳杆菌、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌的比例为1～3∶1∶1∶1。
作为本发明实施例的一优化方案，制备鼠李糖乳杆菌工作发酵剂的方法为：鼠李糖乳杆菌、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌按比例混匀，活化。
作为本发明实施例的一优化方案，恒温发酵的温度为37～42℃，发酵时间为2～6小时。
作为本发明实施例的一优化方案，发酵后冷藏温度为4℃，冷藏时间为12小时。
下面结合附图及具体实施例对本发明的应用原理作进一步描述。
本发明实施例提供的鼠李糖乳杆菌发酵豆乳的制备方法包括以下步骤：
S101：按普通豆乳加工方式制备豆乳；
S102：接种鼠李糖乳杆菌工作发酵剂；
S103：恒温发酵、搅拌、冷却；
S104：冷藏包装成品。
本发明实施例提供的鼠李糖乳杆菌发酵豆乳的制备方法具体实施例如下：
实施例一
鼠李糖乳杆菌、保加利亚乳杆菌、丁二酮链球菌和嗜热链球菌活化、混匀、获得工作发酵剂；
挑选大豆，进行清洗、灭酶处理后浸泡，经打浆机打浆、胶体磨磨浆、过筛获得粗浆，离心处理后得到豆浆；
豆浆中加入白砂糖，混合、加热、均质、杀菌，降温至发酵温度。
接种工作发酵剂进行发酵，并搅拌使之冷却，包装低温冷藏成品。
实施例二
鼠李糖乳杆菌、保加利亚乳杆菌、丁二酮链球菌和嗜热链球菌经过活化、混匀、获得工作发酵剂；
挑选大豆，进行清洗、灭酶处理，浸泡后打浆机打浆、胶体磨磨浆、过筛获得粗浆，离心处理后得到豆浆；
豆浆与鲜牛奶、白砂糖混合、加热，经均质杀菌处理，降温至发酵温度后接种发酵并搅拌，冷却后包装，低温冷藏。
实施例三
鼠李糖乳杆菌发酵豆乳缓解酒精性肝损伤的动物实验
动物试验设计
酒精性肝损伤小鼠模型，取C57BL/6小鼠60只，体重18～22g，按体重随机分为4组，分组见表1。采用Lieber-DeCarli液体饲料(40％脂肪，5％酒精或等能量麦芽糖)饲喂，取鼠李糖乳杆菌发酵豆乳按108CFU/小鼠/天用量与Liber DiCarli酒精饲料混合均匀。第1组，与第2组摄食量等量喂养(以等能量麦芽糖代替酒精)；第2-3组，任意摄食；每天测定小鼠的食物摄入量，每周测体重一次，喂养8周后，处死，收集血液和组织。为了观察鼠李糖乳杆菌发酵豆乳是否具有预防和改善酒精肝损伤功能，第3组动物酒精刺激6周后，再进行鼠李糖乳杆菌发酵豆乳干预。
表1动物分组
Figure BSA00000905955500051
Figure BSA00000905955500061
3.1鼠李糖乳杆菌发酵豆乳对酒精性肝损伤的改善作用
C57Bl/6小鼠采用Liber DeCarli高脂食品包括5％酒精(w/w，AF)或用等热量的麦芽糊精(PF)作为对照，喂养8周。鼠李糖乳杆菌发酵豆乳处理组(AF+LS)，酒精刺激同模型组，处死前2周进行鼠李糖乳杆菌发酵豆乳干预。肝脏组织收获后，采用H&E染色(结果见图2)，结果表明慢性酒精引起脂肪堆积和炎症反应。同时对血清中脂多糖(LPS，内毒素)和肝脏中转氨酶(ALT)分析结果表明(图3和图4)，酒精导致血清中的LPS和肝脏中ALT明显升高(p＜0.05)。然而，在小鼠处死前2周添加LGG后，肝脏脂肪显著减少，炎症反应消失，血清中LPS和肝脏中ALT明显下降(p＜0.05)。
3.2鼠李糖乳杆菌发酵豆乳对酒精引起的MPO升高的抑制作用
对肝脏中MPO分析结果表明(图5)，酒精导致肝脏中MPO明显升高(p＜0.05％)。然而，添加鼠李糖乳杆菌发酵豆乳后，肝脏中MPO明显下降(p＜0.05％)。
3.3鼠李糖乳杆菌发酵豆乳对酒精引起的小鼠肝脏TNF-αmRNA和蛋白表达的影响
Real-time PCR和ELISA分析结果表明8周酒精喂养导致了小鼠肝脏中TNF-α在mRNA和蛋白质水平表达显著升高(p＜0.05％)，而鼠李糖乳杆菌的添加使其表达得到明显修复(p＜0.05％)(图6)。
动物实验结果表明，鼠李糖乳杆菌发酵豆乳有效修复了酒精引起的肠道屏障功能障碍，改善了酒精性肝损伤。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (8)

1.一种鼠李糖乳杆菌发酵豆乳的制备方法，其特征在于，该制备方法包括以下步骤：
按普通豆乳加工方式制备豆乳；
接种鼠李糖乳杆菌工作发酵剂；
恒温发酵、搅拌、冷却；
冷藏包装成品。
2.如权利要求1所述的鼠李糖乳杆菌发酵豆乳的制备方法，其特征在于，制备豆乳的具体方法为：挑选大豆，清洗干净后浸泡，磨浆获得豆浆。
3.如权利要求1所述的鼠李糖乳杆菌发酵豆乳的制备方法，其特征在于，豆乳可以采用牛奶与豆乳混合物代替。
4.如权利要求1所述的鼠李糖乳杆菌发酵豆乳的制备方法，其特征在于，鼠李糖乳杆菌工作发酵剂包括鼠李糖乳杆菌、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌。
5.如权利要求1所述的鼠李糖乳杆菌发酵豆乳的制备方法，其特征在于，鼠李糖乳杆菌工作发酵剂中鼠李糖乳杆菌、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌的比例为1～3∶1∶1∶1。
6.如权利要求1所述的鼠李糖乳杆菌发酵豆乳的制备方法，其特征在于，制备鼠李糖乳杆菌工作发酵剂的方法为：鼠李糖乳杆菌、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌分别活化，然后按比例混匀。
7.如权利要求1所述的鼠李糖乳杆菌发酵豆乳的制备方法，其特征在于，豆乳恒温发酵的温度为37～42℃，发酵时间为2～6小时。
8.如权利要求1所述的鼠李糖乳杆菌发酵豆乳的制备方法，其特征在于，豆乳发酵结束后置于4℃条件下进行后发酵，时间为12小时。
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