CN103328506A

CN103328506A - 用于改善肺功能的疗法

Info

Publication number: CN103328506A
Application number: CN2011800498365A
Authority: CN
Inventors: R·法奇奥尼; R·梅; C·凯尔; N·摩尔菲诺; L·罗什科斯
Original assignee: MedImmune Vaccines Inc
Current assignee: MedImmune LLC; MedImmune Vaccines Inc
Priority date: 2010-10-15
Filing date: 2011-10-14
Publication date: 2013-09-25
Also published as: EP2627673A1; DK2627673T3; US20130281876A1; PL2627673T3; ES2645368T3; HUE034005T2; EP2627673B1; WO2012049278A1; AU2011315499A1; CA2814431A1; BR112013009055A2; JP2013544235A; NO2627673T3; RU2013122123A; MX2013004212A

Abstract

本披露涉及IL-13拮抗剂、尤其是抗人IL-13抗体和其人IL-13结合片段，以及它们在具有受损的肺功能的受试者中用于改善、维持肺功能或降低其下降速率的用途，这种肺功能受损可以与哮喘、COPD或IPF相关。

Description

用于改善肺功能的疗法

发明领域

本发明涉及一种IL-13拮抗剂、尤其是一种抗IL-13抗体用于改善、维持肺功能或降低其下降速率的用途，如通过呼吸量测定法评定的。本发明进一步涉及一种IL-13拮抗剂用于治疗在受试者中的哮喘的用途，该受试者在痰液中具有可检测的IL-13。本发明进一步涉及一种用于鉴定患有哮喘的、有可能受益于用IL-13拮抗剂治疗的受试者的方法，所述受试者在痰液中具有可检测的IL-13。

发明背景

呼吸障碍（如哮喘、慢性阻塞性肺病（COPD）以及特发性肺纤维化）与肺功能下降相关，肺功能的这种损伤可以通过呼吸量测定法来测量。肺功能的测量提供了以下评定：在疾病如哮喘、COPD、IPF以及支气管扩张中气流受限的严重性、它的可逆性以及它的变异性，这些疾病中的肺功能的重要度量是FEV₁（第一秒用力呼气量），它是在深呼吸之后的一秒内可以用力呼出的气体量；以及FVC（用力肺活量）。

哮喘是一种慢性气道病症，它的特征在于可变且可逆的气道阻塞、气道炎症、粘液产生过多，以及导致哮鸣、气喘、胸部紧迫感以及咳嗽的发作的气道高反应性（AHR）。进行性病理性气道重塑和瘢痕形成可以发生在持续性哮喘中，从而导致部分可逆或不可逆的气道阻塞。

气道高反应性（AHR）是气道针对非特异性刺激（如冷空气）的过度收缩（exaggerated constriction）。AHR与粘液过度产生两者都被认为是造成可变性气道阻塞的原因，可变性气道阻塞导致哮喘发作（加重）的呼吸急促特征并且是造成与该疾病相关的死亡率（在英国每年有大约2000例死亡）的原因。

现代英国胸科协会（BTS）和全球哮喘防治创议（GINA）指南提议了一种治疗哮喘的阶梯方案。大多数患有哮喘的患者患有目前通过“标准护理”疗法控制的轻度至中度疾病，这些疗法为：吸入性皮质类固醇联合β2-肾上腺素受体激动剂或白三烯抑制剂。然而，患者可能不依从治疗方案，这降低了治疗的有效性。在更严重的疾病中，可能需要用口服皮质类固醇进行长期治疗，但长期治疗与副作用如骨质疏松症、糖尿病以及口腔念珠菌病相关。

虽然常规疗法减轻了在许多患者中的轻度至中度疾病，在哮喘患者的子集中（大致25%的中度至中毒群体），尽管有充分的治疗，但在进行性的症状、频繁加重、持续性及可变性气道阻塞、以及频繁需要β₂激动剂方面，哮喘仍然控制不良。这导致了对生活质量的相当大的影响、健康护理资源的不成比例使用、以及来自常规的全身性类固醇使用的不良作用。代表大约6%的UK哮喘群体的这些患者由于严重加重而住院占哮喘对健康护理机构造成重大经济负担的大部分。因此，对于用于哮喘的新治疗显然存在着需要，尤其是在患有更严重的哮喘疾病的受试者中，根据哮喘指南推荐的较高剂量的吸入或口服皮质类固醇，这些患者常常获得很有限的益处。另外，对于用于患有哮喘的儿童的新治疗存在着需要，因为用高剂量皮质类固醇进行治疗与降低的生长速率相关。

哮喘的病理被认为是由进行性的Th2淋巴细胞介导的炎症引起，该炎症是起因于免疫系统对无害抗原的不当应答。白细胞介素-13（IL-13）已经显现为一种关键的多效性Th2细胞因子，它促成了哮喘表型的各个方面的发展和维持。人白细胞介素（IL）-13是一种114个氨基酸的蛋白质，它具有一个未修改的大致12kDa的分子质量。IL-13与IL-4最密切相关，它在氨基酸水平上与IL-4共享30%的序列相似性。IL-13与白细胞介素4（IL-4）共享多种受体组分和许多生物学特性。IL-13受体（IL-13Rα1和IL-4Rα的异源二聚体）表达于被认为在哮喘中有关的白细胞亚群（嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、B细胞、NKT细胞）和结构细胞（上皮细胞、成纤维细胞、平滑肌）上。IL-13对这些细胞的作用是刺激以下过程：这些过程促进气道高反应性、炎症、以及潜在的气道结构变化，这些变化包括作为哮喘的主要特征的纤维化和粘液分泌过多（Hershey,2003）。

与对照受试者相比，IL-13mRNA或蛋白质水平在来自哮喘患者的支气管活组织检查、痰液、以及BAL液中升高（Humbert等人，1997；Kotsimbos等人，1996；Komai-Koma等人，2001；Naseer等人，1997）并且在来自变应原激发的哮喘患者的BAL样品中进一步增加（Huang等人，1995；Kroegel等人，1996）。IL-13蛋白在肺中的表达还与哮喘严重性和控制两者相关。与“正常状态”相比，轻度的初次接受类固醇的哮喘患者在痰液中具有上调的IL-13，就如同尽管适于并且包括口服皮质类固醇的标准护理仍具有不良控制的重度哮喘患者一样；中度哮喘患者（通过吸入性皮质类固醇得到良好控制）未被报告具有上调的IL-13表达（Saha等人，2008）。

IL-13途径的遗传多态性也与特应性和哮喘两者相关；IL-13Q130R已经与哮喘、特应性、以及升高的血清IgE相关（Heinzmann等人，2000；Liu等人，2000；Kauppi等人，2001），与野生型IL-13相比，它更有效地活化信号转导IL-13受体（Rα1）和下游功能，而同时较不有效地结合至诱捕受体（Ra2）（Vladich等人，2005）。在IL-13启动子（Howard等人，2001和van der Pouw Kraan等人，1999)、IL4Rα（Howard等人，2002）以及在IL-13受体下游的关键信号转导分子——STAT6（Tamura等人，2003）中已经观察到与特应性和哮喘风险相关的相似多态性。IL-13变异体（Q130R）和这种变异体的抗体论述于WO01/62933中。

来自模拟人哮喘的多个方面的模型的动物模型数据支持以下假设：IL13是哮喘表型的发展和维持中的关键介质。向初次接触变应原的小鼠的气道给予重组IL13导致AHR、气道炎症、以及粘液产生（Wills-Karp等人，1998；Grunig等人，1998；Venkayya等人，2002）。在转基因小鼠中观察到相似的病理，其中IL-13在肺中选择性地过度表达，虽然长期暴露于IL-13还导致纤维化（Zhu等人，1999）。在致敏小鼠中在变应原激发之后出现相同的“哮喘”表型，并且该表型也与IL-13相关。可溶性IL-13Rα2，即一种有效的IL-13中和剂，已经显示抑制AHR、粘液分泌过多、以及肺部炎症（Wills-Karp等人，1998；Grunig等人，1998）。NHP分段式抗原激发研究也已经显示一种针对IL-13中和抗体的抗炎作用（Bree等人，2007）。

考虑到在哮喘中涉及的已知IL-13起作用的细胞的范围、以及归因于这种白细胞介素的病理学功能，可以预期IL-13在哮喘中的重要作用。与患者中的在IL-13表达与疾病严重性之间的一种关系的证据相结合（Saha等人，2008），IL-13的中和是一种治疗哮喘的可信的方法。

慢性阻塞性肺病（COPD）包括患有不同程度的慢性支气管炎、小气道疾病以及肺气肿的患者群体，并且其特征在于进行性的不可逆的肺功能下降，这种肺功能下降对当前基于哮喘的疗法反应不良。COPD的发病率在近年来急剧上升，以致变成了全世界第四大致死病因（世界卫生组织）。因此，COPD代表巨大的未满足的医疗需要。COPD的潜在病因仍然了解不足。已经提出存在着一种对COPD和哮喘的共同易感性，并且因此相似的机制可以促成两种病症的发病。

已经证明IL-13在小鼠肺中的过度表达引起肺气肿、升高的粘液产生以及炎症，它们反映了人COPD的多个方面。此外，已经显示AHR（在过敏性炎症的小鼠模型中的一种IL-13依赖性应答）对于吸烟者中的肺功能下降是预测性的。也已经在IL-13启动子多态性与产生COPD的易感性之间确立了一种联系。

因此，迹象是IL-13在COPD的发病中起重要作用，尤其是在具有哮喘样特征的患者中，这些特征包括AHR和嗜酸性粒细胞增多症。已经显示当与来自没有报告的肺病的受试者的肺样品相比较时，IL-13的mRNA水平在来自具有COPD病史的受试者的尸检组织样品中更高。在另一个研究中，通过免疫组织化学证明了在来自COPD患者的外周肺切片中的IL-13水平的升高。

IL-13已经与其他纤维化病症相关。已经在患有系统性硬化的患者的血清和来自受其他形式的肺纤维化影响的患者的BAL样品中测量到增加的IL-13水平。相应地，IL-13在小鼠肺中的过度表达已经被报告导致显著的纤维化。已经在寄生虫诱导的肝纤维化的小鼠模型中广泛研究了IL-13在除了肺以外的组织中促成了纤维化。

川隆单抗（tralokinumab，一种IgG4单克隆抗体）是一种高度有效且特异的IL-13中和抗体，它对人IL-13具有165pM的亲和力，以近似相等的效力中和人和食蟹猴IL-13，但是不中和小鼠IL-13，也不中和IL-13、IL-4的大多数同源细胞因子。CAT-354还中和与特应性和哮喘相关的变体IL-13（Q130R）以及内源性（哺乳动物糖基化的）人IL-13。川隆单抗（BAK502G9）被描述于国际专利申请公开号WO2005/007699中，通过引用将该专利结合在此。

本发明的一个目标是提供IL-13拮抗剂，尤其是抗IL-13抗体如川隆单抗、或其IL-13中和片段，以用于尤其是如通过FEV₁或FVC评定的在具有受损的肺功能的受试者中改善、维持肺功能或减缓其下降，该受损的肺功能可能是由于哮喘、COPD或肺纤维化所致。本发明的另一个目标是提供一种IL-13拮抗剂，该拮抗剂用于治疗在受试者中的哮喘，其中例如基于在痰液中可检测的IL-13，所述受试者具有上调的气道IL-13。本发明的另一个目标是提供一种用于鉴定患有哮喘的、有可能受益于用IL-13拮抗剂治疗的受试者的方法，其中例如基于在痰液中可检测的IL-13，所述受试者具有上调的气道IL-13。

发明声明

本发明提供了一种IL-13拮抗剂，用于在具有受损的肺功能的受试者中改善、维持肺功能或降低其下降速率。

本发明提供了一种治疗具有受损的肺功能的受试者的方法，所述方法包括按足以改善、维持肺功能或降低其下降速率的一个量向所述受试者给予一种IL-13拮抗剂。

本发明提供了一种IL-13拮抗剂在制造用于治疗受损的肺功能以便在对其有需要的受试者中改善、维持肺功能或降低其下降速率的药剂中的用途。

本发明提供了一种在具有受损的肺功能的受试者中改善、维持肺功能或降低其下降速率的方法，所述方法包括向所述受试者给予一种IL-13拮抗剂。

另外，本发明提供了一种用于治疗受损的肺功能以便在具有受损的肺功能的受试者中改善、维持肺功能或降低其下降速率的组合物，所述组合物包含一种IL-13拮抗剂和一种药学上可接受的赋形剂。

本发明提供了一种IL-13拮抗剂，该拮抗剂用于治疗在受试者中的哮喘，其中例如基于在痰液中可检测的IL-13，所述受试者具有上调的气道IL-13。

本发明提供了一种治疗在受试者中的哮喘的方法，其中所述受试者在痰液中具有可检测的IL-13，所述方法包括按足以缓解哮喘症状的一个量向所述受试者给予一种IL-13拮抗剂。

本发明提供了一种IL-13拮抗剂在制造用于治疗在受试者中的哮喘的药剂中的用途，其中所述受试者在痰液中具有可检测的IL-13。

本发明提供了一种用于鉴定患有哮喘的、有可能受益于用IL-13拮抗剂治疗的受试者的方法，所述方法包括测试IL-13在来自所述受试者的痰液样品中的存在，其中在痰液中具有可检测的IL-13的受试者有可能受益于用IL-13拮抗剂治疗。

对哮喘治疗的有益反应可以通过考虑哮喘症状（例如通过一种ACQ法如ACQ-6、和/或通过如在此所描述的呼吸量测定评定）来进行评定。受益于用IL-13拮抗剂治疗的受试者经历他们的哮喘症状的缓解。如在此所描述的，患有哮喘的、在痰液中具有可检测的IL-13的受试者在用IL-13拮抗剂治疗之后经历哮喘症状的缓解。在此描述的治疗方法和用途可以包括在用IL-13拮抗剂治疗受试者之前执行的一个步骤，借此测试来自受试者的痰液样品中IL-13的存在。发明人已经发现IL-13在痰液中的存在定义了一个哮喘患者子集，其中如在此所描述，IL-13拮抗剂疗法是特别有益的。

本发明提供了一种用于治疗在受试者中的哮喘的组合物，其中所述受试者在痰液中具有可检测的IL-13，所述组合物包含一种IL-13拮抗剂和一种药学上可接受的赋形剂。

因此，根据本发明并且用于根据本发明使用的药用组合物除了活性成分以外，还可以包含一种药学上可接受的赋形剂、载体、缓冲剂、稳定剂或本领域技术人员熟知的其他材料。这类材料应当无毒并且应当不干扰活性成分的疗效。载体或其他材料的确切性质将取决于给药途径，该途径可以是口服、或通过注射，例如静脉内。对于注射，活性成分将呈肠胃外可接受的水溶液形式，该溶液不含热原质并且具有适合的pH、等渗性以及稳定性。根据需要，可以包括防腐剂、稳定剂、缓冲剂、抗氧化剂和/或其他添加剂。

本发明的组合物可以配制成液体或固体形式。在通过静脉内或皮下注射给予之前，或对于吸入来说，可以提供固体形式用于复原。所采用的组合物将取决于分子的物理化学特性和递送途径。配制品可以包含赋形剂、或赋形剂的组合，这些赋形剂例如：糖类、氨基酸以及表面活性剂。液体配制品可以包含广泛范围的抗体浓度和pH。可以通过例如冻干、喷雾干燥、或通过超临界流体技术进行干燥来产生固体配制品。配制品将取决于预期的递送途径：例如，用于肺部递送的配制品可以由颗粒组成，这些颗粒具有确保在吸入后渗透到肺深部中的多种物理性质。

在一个特别优选的实施例中，川隆单抗被以150mg/mL配制在50mM乙酸钠、85mM氯化钠、0.01%（w/v）植物源聚山梨酯80（pH5.5）中。

根据本发明的组合物可以单独地或与其他治疗组合地同时或连续给予，这取决于有待治疗的病症。

治疗可以通过注射（例如皮下、或静脉内）、或通过吸入给予。预期治疗将不局限于在临床中使用。因此，预期使用给药装置进行皮下注射。

因此，本发明还提供了一种给药装置，它用于治疗受损的肺功能以便在对其有需要的受试者中改善、维持肺功能或降低其下降速率，所述装置包含一种IL-13拮抗剂。一种给药装置可以包含用于治疗受损的肺功能以便在对其有需要的受试者中改善、维持肺功能或降低其下降速率的一种组合物，所述组合物包含一种IL-13拮抗剂和一种药学上可接受的赋形剂。

本发明还提供了一种用于治疗在受试者中的哮喘的给药装置，其中所述受试者在痰液中具有可检测的IL-13，所述装置包含一种IL-13拮抗剂。一种给药装置可以包含用于治疗在受试者中的哮喘的组合物，其中所述受试者在痰液中具有可检测的IL-13，所述组合物包含一种IL-13拮抗剂和一种药学上可接受的赋形剂。

在本发明的一些实施例中，在痰液中可检测水平的IL-13可以按≥1pg/mL的IL-13而存在。可以使用一种ELISA法检测IL-13在痰液中的存在。使用ELISA法的定量限是大约1pg/mL，因此在痰液中具有浓度<1pg/的IL-13的受试者可以被认为在痰液中不具有可检测的IL-13。适合于检测痰液中的IL-13的方法包括：蛋白质印迹法；蛋白质组技术如质谱法、MALDI-TOF以及2D-DIGE；基于抗体或受体的蛋白质鉴定技术，这些技术包括基于xMAP技术（多分析物谱珠粒）的测定（美国德克萨斯州奥斯汀（Austin,TX,USA）的路明克斯公司（LuminexCorp.））形式的ELISA，xMAP技术使得能够同时检测和定量多种RNA或蛋白质靶标，xMAP系统将流式细胞仪、荧光染色的微球体（珠粒）、激光以及数字信号处理进行组合，以便有效地允许将多达100个独特测定在单个样品之内多路复用并且呈

细胞因子测定（Meso ScaleDiscovery，美国马里兰州盖瑟斯堡（Gaithersburg,MD,USA））的形式，这些细胞因子测定采用电化学发光检测；鉴定痰液中的IL-13的痰液驱动的基于细胞的测定，如用IL-13中和试剂阻断的TF1增殖、或STAT-6磷酸化、以及下游介质的测量，这些介质例如嗜酸性粒细胞趋化因子、TARC、MCP4。相应于痰液中的可检测水平的IL-13的量可以由于本领域中已知的方法（如以上所述的那些方法中的任何一种）的已知定量限而变化，或可以基于本领域中已知的方法（如以上所述的那些方法）的定量限的提高或适合于检测分子如IL-13的水平的其他方法而进一步改进。

根据本发明的给药装置可以选自一个预填充注射器和一个自动注射装置，该注射器和自动注射装置用于皮下给药，其可以被设计成允许“在家”给药。

在呼吸性疾病如哮喘、COPD、以及IPF中，肺功能测试（PFT）被用来评定肺功能并将肺损伤的量进行定量；PFT还可以用来评定肺疾病的进展和治疗的有效性。呼吸量测定法测试在所有肺功能测试中是最常用的。它是一种便利的非侵袭性程序、通常用一个手持呼吸量计来执行。当尝试诊断呼吸问题时，它通常是临床医生的首选。呼吸量测定法要求患者在排出所有的气体之后进行深吸气，然后在这之后快速呼气，使得所有气体从肺中排出。呼吸量测定法测试的结果可变，但是基于一个标准化的、健康群体的预测值。

呼吸量测定法测试中的通用术语如下：

VC——肺活量，这是在完全吸气之后，可以从肺中用力呼出的气体的量。

FVC——用力肺活量，这是在可能的最深呼吸之后，可以从肺中用力呼出的气体的量。

FEV₁——第一秒用力呼气量，这是在用力呼出的第一秒内可以从肺中用力呼出的气体的量。

FEV₁/FVC，表示为分数的FEV₁与FVC的比（以前这个值被表示为百分率），这指示在用力呼出的第一秒内从肺中呼出的气体的总量的分数。

PEF，呼气流量峰值，这被用作用来确定治疗是否在改善气道疾病中、尤其是在哮喘和COPD中有效的一个度量。

FEF，用力呼气流量，这是可以从肺中呼出多少气体的一个度量；它是较大气道阻塞的一个指示。

MVV，最大通气量，通过使患者在12秒内尽可能快和完全地吸气和呼气来确定它的一个值。结果反映了用于呼吸的肌肉的状态、肺的僵硬程度、以及当呼吸时在气道内是否有任何阻力。这个测试告知、指示了手术之前患者的肺的强健程度。如果在这个测试上患者表现出不良的表现，表明在手术之后可能发生呼吸系并发症。

在哮喘中，使用呼吸量测定法测量肺功能、尤其是测量FEV₁和/或呼气流量峰值被用在诊断和监测中，以便证实气流受限、并且证明在给予支气管扩张剂之后肺功能异常的可逆性。指示哮喘的诊断的第一秒用力呼气量（FEV₁）的可逆性程度通常被接受为比支气管扩张剂之前的值≥12%和≥200mL。由于许多肺疾病可以导致降低的FEV₁，在哮喘中气流受限的一个有用评定是FEV₁与用力肺活量（FVC）的比。FEV₁/FVC比通常>0.75-0.80，并且在儿童中可能>0.90。较低的值表明气流受限。使用峰值流量计进行的PEF测量对于哮喘的诊断和监测也是一个有用的辅助。术语“可逆性”和“可变性”是指伴有气流受限的变化的症状的变化，这些变化自发发生或对治疗做出反应而发生。术语可逆性通常应用于在吸入速效支气管扩张剂之后（例如在200-400μg的舒喘灵（沙丁胺醇）之后）在数分钟之内测量的FEV₁（或PEF）的快速改善，或在引入有效控制剂治疗（如吸入性糖皮质类固醇）之后在数天或数周期间的更加持续的改善。可变性是指随时间的推移而发生的症状和肺功能的改善或恶化。可变性可以在1天的过程中（当它被称为日可变性时）、一天天地、一月月地、或季节性地经历。

根据本发明，特别优选的是通过呼吸量测定法，例如通过使用本领域的标准方法测量FEV₁（哮喘）和/或FVC（COPD/IPF）来评定肺功能。

可以使用

CT呼吸量计使用按照ATS/ERS推荐2005（欧洲呼吸杂志（Eur Respir J）;26:319-338）的一个方案来测量FEV₁。FEV₁是在用力呼气的第一秒内从一个完全吸气的位置呼出的最大气体量，在BTPS（体温（即37°C）、环境压力、用水蒸气饱和）下以升表示。FVC是用最大用力从一个最大吸气呼出的最大气体体积，即用一个最大用力呼气力执行的肺活量，在体温和用水蒸气饱和的环境压力下以升表示。

在哮喘中，根据本发明的IL-13拮抗剂可以用来治疗受损的肺功能，以便改善肺功能。当通过FEV₁来评定时，改善可以表示为FEV₁从基线的平均百分比变化，优选地在从5%至18%的范围内，例如5%、6%、7%、8%、9%、10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%，如至少5%、6%、7%、8%、9%、10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%。

在COPD或IPF中，根据本发明的IL-13拮抗剂可以用来治疗受损的肺功能，以便维持肺功能或减缓其下降速率。

在本发明的某些实施例中，哮喘在受试者中的缓解是通过一种或多种哮喘症状的复合量度来评定的，该一种或多种哮喘症状选自下组，该组由以下各项组成：夜间苏醒、苏醒时的症状、活动受限、呼吸急促、哮鸣、以及短效β₂激动剂的使用。.哮喘在受试者中的缓解可以通过哮喘控制问卷（参见Juniper EF,O’Byrne PM,Guyatt GH,Ferrie PJ,King DR，测量哮喘控制的问卷的开发和验证（Development and validation of aquestionnaire to measure asthma control），《欧洲呼吸杂志》1999;14:902-7，该文献的全部内容是通过引用结合在此）来进行评定。哮喘在受试者中的缓解可以通过与在给予IL-13拮抗剂之前的基线ACQ-6得分相比的ACQ-6得分的降低来评定。相对于基线得分≥0·5的平均ACQ-6得分的降低被认为指示了在临床上有意义的哮喘缓解，而≥1·5的得分指示哮喘未控制。

在本发明的优选实施例中，IL-13拮抗剂是一种抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段。优选地，该抗IL-13拮抗剂是一种抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段，该抗体或片段选自：

(a)川隆单抗（BAK502G9，CAT-354）抗体；

(b)川隆单抗的人IL-13结合片段，该片段包含一个抗体抗原结合位点，该位点由一个人抗体VH结构域（SEQ ID NO:15）和一个人抗体VL结构域（SEQ ID NO:16）构成，并且包含一组CDR的HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2以及LCDR3，其中该VH结构域包含HCDR1、HCDR2以及HCDR3，并且该VL结构域包含LCDR1、LCDR2以及LCDR3，其中该HCDR1具有SEQ ID NO:7的氨基酸序列，该HCDR2具有SEQ ID NO:8的氨基酸序列，该HCDR3具有SEQ ID NO:9的氨基酸序列，该LCDR1具有SEQ ID NO:10的氨基酸序列，该LCDR2具有SEQ ID NO:11的氨基酸序列，并且该LCDR3具有SEQ ID NO:12的氨基酸序列；

(c)川隆单抗的人IL-13结合片段，该片段包含一个抗体抗原结合位点，该位点由一个人抗体VH结构域和一个人抗体VL结构域构成，包含一组CDR的HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2以及LCDR3，其中该VH结构域包含HCDR1、HCDR2以及HCDR3，并且该VL结构域包含LCDR1、LCDR2以及LCDR3，其中该HCDR1具有SEQ ID NO:7的氨基酸序列，该HCDR2具有SEQ ID NO:8的氨基酸序列，该HCDR3具有SEQ ID NO:9的氨基酸序列，该LCDR1具有SEQ ID NO:10的氨基酸序列，该LCDR2具有SEQ ID NO:11的氨基酸序列，并且该LCDR3具有SEQ ID NO:12的氨基酸序列；

(d)一种抗IL-13抗体或它的人IL-13结合片段，该抗体或片段包含一个抗体抗原结合位点，该位点由一个人抗体VH结构域（SEQ ID NO:15）和/或一个人抗体VL结构域（SEQ ID NO:16）构成；

(e)一种抗体或它的IL-13结合片段，该抗体或片段与川隆单抗竞争结合人IL-13；

(f)一种抗体或它的IL-13结合片段，该抗体或片段能够结合从人IL-13蛋白的99位的天冬氨酸到132位的C末端天冬酰胺的人IL-13氨基酸序列内的一个表位（FSSLHVRDTKIEVAQFVKDLLLHLKKLFREGRFN）、或能够结合从人IL-13蛋白的106位的天冬氨酸到132位的C末端天冬酰胺的人IL-13序列内的一个表位（DTKIEVAQFVKDLLLHLKKLFREGRFN）；以及

(g)一种抗体或它的IL-13结合片段，该抗体或片段与川隆单抗共有一个、两个、三个、四个、五个、或六个CDR（SEQ ID NO:7、8、9、10、11、12）。

在以上所述的抗人IL-13抗体或它的人IL-13结合片段的一个优选方面，全抗体是IgG4。

根据本发明，抗人IL-13抗体或它的人IL-13结合片段可以包含一个或多个CDR，或一组全部6个CDR（HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2、LCDR3），选自以下的CDR：

BAK278D6（SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6）；

BAK1183H4（SEQ ID NO:97、98、99、100、101、102）；

BAK1167F02（SEQ ID NO:64、65、66、67、68、69）；

BAKllllD10（SEQ ID NO:91、92、93、94、95、96）

BAK1166G02（SEQ ID NO:67、68、69、70、71、72）；

BAK1167F04（SEQ ID NO:85、86、87、88、89、90）；

BAK1184C8（SEQ ID NO:73、74、75、76、77、78）；

BAK1185E1（SEQ ID NO:79、80、81、82、83、84）；以及

BAK1185F8（SEQ ID NO:103、104、105、106、107、108）。

本发明的方法、用途、组合物或装置可以包含一种抗人IL-13抗体或它的人IL-13结合片段，该抗体或片段包含含有一组CDR的一个VH结构域和/或含有一组CDR的一个VL结构域，这些CDR选自BAK278D6、BAK1183H4、BAK1167F02、BAKllllD10、BAK1166G02、BAK1167F04、BAK1184C8、BAK1185E1以及BAK1185F8的HCDR组和/或LCDR组。

一种抗人IL-13抗体或它的人IL-13结合片段可以包含选自以下的一个克隆的VH和VL：

BAK278D6（VH SEQ ID NO:13；VL SEQ ID NO:14）；

BAK1183H4（VH SEQ ID NO:37；VL SEQ ID NO:38）；

BAK1167F02（VH SEQ ID NO:35；VL SEQ ID NO:36）；_0}

BAKllllD10（VH SEQ ID NO:41；VL SEQ ID NO:42）；

BAK1166G02（VH SEQ ID NO:53；VL SEQ ID NO:54）；

BAK1167F04（VH SEQ ID NO:43；VL SEQ ID NO:44）；_0}

BAK1184C8（VH SEQ ID NO:45；VL SEQ ID NO:46）；

BAK1185E1（VH SEQ ID NO:47；VL SEQ ID NO:48）；以及

BAK1185F8（VH SEQ ID NO:49；VL SEQ ID NO:50）。

一种抗人IL-13抗体或它的人IL-13结合片段可以具有处于一个种系框架（germ-line framework）内的VH结构域的HCDR1、HCDR2以及HCDR3和/或处于一个种系框架内的VL结构域的LCDR1、LCDR2以及LCDR3。该VH种系框架可以是VH1DP14。该VL种系框架可以是VLγ33H。

一种抗人IL-13抗体或它的人IL-13结合片段可以结合其中在130位的精氨酸被谷氨酰胺替换的一种人IL-13变异体。一种抗人IL-13抗体或它的人IL-13结合片段可以结合一种非人灵长类IL-13，如恒河猴或食蟹猴IL-13。

根据本发明可以采用的其他IL-13拮抗剂包括：

(a)抗人IL-13抗体，如来金珠单抗（MILR1444A/RG3637，罗氏（Roche）/基因泰克公司（Roche））、ABT-308（阿伯特公司（Abbott））、GSK679586（葛兰素史克公司（GlaxoSmithkline））、QAX576（诺华公司（Novartis））；

(b)抗人IL-13Rα1抗体，如默克公司（Merck）的MK6105；

(c)IL-13-毒素结合物，如IL-13PE38QQR；

(d)IL-4突变蛋白，如Aerovant^TM（Aerovance）（修饰的IL-4）；

(e)抗IL-4Rα抗体，如Regeneron-668（Regeneron）；

(f)核酸类，如AIR645（针对IL-4Rα的一种双链寡核苷酸）；以及

(g)IL-4/IL-13双特异性抗体，如多曼提斯有限公司（Domantis）的09/10和DOM-1000P。

在本发明的一些方面，优选的是该抗IL-13拮抗剂也不是IL-4与IL4Rα之间的相互作用的拮抗剂，优选地该IL-13拮抗剂不是一种抗IL-4Rα抗体，如AMG317（安进公司（Amgen））。

优选地，该抗IL-13拮抗剂是一种抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段。

优选地，在本发明中采用的抗体或其结合片段选自下组，该组由以下各项组成：免疫球蛋白分子、单克隆抗体、嵌合抗体、CDR移植抗体、人化抗体、Fab、Fab'、F(ab')2、Fv、二硫键连接的Fv、scFv、单域抗体、双抗体、多特异性抗体、双重特异性抗体、以及双特异性抗体。

根据本发明有待治疗的受试者可以具有与哮喘、COPD、或特发性肺纤维化（IPF）相关的受损的肺功能。哮喘可以被分类为特应性哮喘、非特应性哮喘、中度至重度哮喘、通过吸入性或口服皮质类固醇不能控制的中度至重度哮喘以及GINA得分为5、4、3、2、或1的哮喘。受试者患有哮喘并且可能正在经历用一种或多种其他治疗剂进行同步治疗，该一种或多种其他治疗剂选自吸入性皮质类固醇、长效β2拮抗剂（LABA）、茶碱、白三烯拮抗剂、以及口服皮质类固醇。

受损的肺功能可能与COPD相关，如由GOLD分类II、II以及IV所定义的中度至重度COPD。用于COPD诊断所需要的呼吸量测定法标准是在支气管扩张剂之后低于0.7的FEV1/FVC比）。用于COPD严重性的GOLD呼吸量测定法标准如下

患有COPD的受试者可以正在经历用一种或多种其他治疗剂进行同步治疗，该一种或多种其他治疗剂选自吸入性皮质类固醇、LABA、茶碱、口服皮质类固醇、噻托溴铵以及罗氟司特。

受损的肺功能可能与特发性肺纤维化相关；患有IPF的受试者可能正在经历用一种或多种其他治疗剂进行同步治疗，该一种或多种其他治疗剂选自吸入性皮质类固醇、LABA、茶碱、白三烯拮抗剂、口服皮质类固醇以及吡非尼酮。

因此，如在此所描述的IL-13拮抗剂或包含IL-13拮抗剂的组合物可以单独地或与其他治疗组合地同时或连续给予，这取决于有待治疗的病症。

在本发明的一些方面，具有受损的肺功能的受试者初次接受类固醇。

在优选实施例中，IL-13拮抗剂是一种抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段，它以范围从100至800mg的一个剂量、优选地以范围从100至600mg的一个剂量皮下给予；或以范围从100至1800mg的一个剂量、优选地以范围从200至1600mg的一个剂量、最优选地以大约1500mg静脉内给予。优选地，抗人IL-13抗体是如在此所述的川隆单抗或其变异体或其人IL-13结合片段。用于皮下给药的适合的单位剂量可以选自150、300、以及600mg，优选地以2或4周的间隔给予。用于静脉内给药的适合的单位剂量可以选自1000、1200、1400、1500、1600、1700以及1800mg，优选地以2或4周的间隔、最优选地以4周的间隔给予。优选地，该IL-13拮抗剂是一种抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段，更优选地该抗人IL-13抗体是如在此所述的川隆单抗或其变异体或其人IL-13结合片段，它以范围从1mg/Kg至30mg/Kg的一个mg/kg剂量给予。

受试者可以是成人或年轻人（12-18岁）；然而，本发明还可以用来在年龄小于12岁的儿科受试者中改善、维持肺功能或降低其下降速率。

IL-13拮抗剂、优选地抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段、更优选地抗人IL-13抗体是如在此所述的川隆单抗、或其变异体、或其人IL-13结合片段，可以根据本发明以选自每1、2、3、4、6、8、10以及12周的频率给予，优选的给药间隔是每两周或每四周。

通常，可以根据本发明在起始治疗之后达15天时检测哮喘受试者的肺功能的改善。

令人惊讶地，发明人发现如借助于呼吸量测定法通过测量中度至重度哮喘患者（GINA4或5）中的FEV₁而评定的肺功能改善，其中已经通过皮下给药以150mg、300mg或600mg的剂量以2周的给药间隔向这些患者给予川隆单抗。到目前为止，人们认为抗人IL-13抗体还未被报道用来改善哮喘患者的肺功能。在用川隆单抗治疗的哮喘受试者中观察到如通过FEV₁评定的肺功能改善的早期开始，其中FEV₁得分的改善在第一次给予川隆单抗之后达15天时可检测到。此外，发现FEV₁得分的改善与所给予的川隆单抗的剂量相关。FEV₁得分相对于在起始治疗之前所取的基线测量值的平均改善在150mg治疗组中是8%、在300mg治疗组中是13.3%、并且在600mg治疗组中是15.2%。合并的所有川隆单抗治疗组的FEV₁的平均改善是12.2%。

因此，发明人已经发现如通过呼吸量测定法，例如通过测量FEV1评定的肺功能的改善可以用作受试者对哮喘的治疗的反应的指示，该治疗使用一种抗IL-13拮抗剂、优选地使用一种抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段，例如，如在此所述的川隆单抗或其变异体或其人IL-13结合片段。

因此，本发明进一步提供了一种用于检测受试者在哮喘中对IL-13拮抗剂治疗的反应的方法，该方法包括：

(a)在治疗之前，通过一种呼吸量测定法来评定肺功能；

(b)在治疗之后，通过一种呼吸量测定法来评定肺功能；

(c)其中肺功能的改善指示对治疗的有益反应。

优选的是通过测量FEV₁和/或PEF来评定肺功能。优选地，在治疗之后对肺功能的评定是在起始治疗至少15天之后进行的。

在本发明的优选方面，该IL-13拮抗剂是一种抗人IL-13抗体，更优选地该抗人IL-13抗体是如在此所述的川隆单抗或其变异体或其人IL-13结合片段，它优选地通过皮下给药而给予，优选剂量是150mg、300mg或600mg，优选给药间隔是2或4周。优选地，与基线相比较，治疗之后肺功能的改善是在从8%至16%的范围内，在起始治疗至少15天之后和/或在停止治疗长达12周之后测量。

优选地，以两周间隔在皮下给予150mg的如在此所述的川隆单抗或其变异体或其人IL-13结合片段之后，如通过FEV₁测量评定的从基线的肺功能改善是在从大约6%至大约10%的范围内，例如大约8%。优选地，在治疗之后对肺功能的评定是在起始治疗至少15天之后和/或在停止治疗长达12周之后进行的。

优选地，以两周间隔在皮下给予300mg的如在此所述的川隆单抗或其变异体或其人IL-13结合片段之后，如通过FEV₁测量评定的从基线的肺功能改善是在从大约12%至大约14%的范围内，例如大约13.3%。优选地，在治疗之后对肺功能的评定是在起始治疗至少15天之后和/或在停止治疗长达12周之后进行的。

优选地，以两周间隔在皮下给予600mg的如在此所述的川隆单抗或其变异体或其人IL-13结合片段之后，如通过FEV₁测量评定的从基线的肺功能改善是在从大约14%至大约16%的范围内，例如大约15.2%。优选地，在治疗之后对肺功能的评定是在起始治疗至少15天之后和/或在停止治疗长达12周之后进行的。

在最后一个剂量的川隆单抗之后，所有受试者都被随访12周，并且在第127天和第169天经历呼吸量测定法测试。令人惊讶地，在川隆单抗治疗的受试者中在第92天观察到的FEV₁的增加在这些给药后时间点均被维持。在第169天FEV₁从基线的平均变化在安慰剂组中为0.101L并且在联合皮下川隆单抗治疗组中为0.218L（p=0.096）。在第92天观察到的FVC和PEF的数值增加也被维持至第169天。这些发现表明川隆单抗对肺功能的有益作用在停止治疗之后可以持续至少12周的一个延长的时间段。

对FEV₁的这种持续作用允许本发明的一个给药方案，该给药方案提供一个初始“负荷”第一给药期，之后是一个后续“维持”第二给药期。在负荷第一给药期中，可以按比第二维持期更高的一个剂量给予该剂量。在负荷第一给药期中，可以比维持第二给药期中更频繁地给予该剂量。因此，本发明提供了一种给药方案，其中按以下方式给予该IL-13拮抗剂（它优选地是一种抗人IL-13抗体，更优选地该抗人IL-13抗体是如在此所述的川隆单抗或其变异体或其人IL-13结合片段）：

(a)以第一剂量以第一给药间隔持续第一段时间，然后以该第一剂量以第二给药间隔（它比第一给药间隔更长）持续第二段时间，例如每两周一次（Q2W）以300mg持续8、9、10、11、12、13、14、15或16周皮下给药，之后每3、4、5或6周一次（Q4W）以300mg皮下给药；优选地每两周一次（Q2W）以300mg持续12周，之后每4周一次（Q4W）以300mg皮下给药；或

(b)以第一剂量以第一给药间隔持续第一段时间，然后以第二剂量（它比该第一剂量更低）以该第一给药间隔，例如每两周一次（Q2W）以300mg持续8、9、10、11、12、13、14、15或16周皮下给药，之后每两周一次（Q2W）以150mg皮下给药；优选地每两周一次（Q2W）以300mg持续12周，之后每2周一次（Q2W）以150mg皮下给药；

(c)以第一剂量以第一给药间隔，然后以第二剂量（它比该第一剂量更低）以第二给药间隔（它比第一给药间隔更长），例如每两周一次（Q2W）以300mg持续8、9、10、11、12、13、14、15或16周皮下给药，之后每3、4、5或6周一次以150mg皮下给药；优选地每两周一次（Q2W）以300mg持续12周，之后每4周一次（Q4W）以150mg皮下给药。

当该IL-13拮抗剂是川隆单抗或其变异体或其人IL-13结合片段时，该给药方案可以是使得它以300mg给予（例如以每2周一次（Q2W）2x150mg皮下注射持续12周，之后是每4周一次（Q4W）。在此描述了适合用于在这些给药方案中使用的川隆单抗的配制品。

图例

图1：研究流程图：2a期、随机化、双盲安慰剂对照的、平行组研究，以评估川隆单抗（CAT-354）在患有未被控制的、中度至重度持续性哮喘的成人受试者中的三种皮下治疗方案的疗效和安全性。

图2a：FEV₁从基线（可评估群体）的平均变化。针对合并的川隆单抗组和安慰剂组的在支气管扩张剂之前的FEV₁从基线至研究第92天的变化。

图2b：FEV₁从基线的变化。针对单独的川隆单抗治疗组（每2周一次皮下给予150mg、300mg、或600mg）和安慰剂的在支气管扩张剂之前的FEV₁从基线至研究第92天的变化。

图3：在研究第92天的在支气管扩张剂之前的FEV₁（L）从基线的变化。

图4：在研究第92天的在基线分类为特应性的受试者中在支气管扩张剂之前的FEV₁（L）从基线的变化。

图5：在研究第92天的在基线分类为非特应性的受试者中在支气管扩张剂之前的FEV₁（L）从基线的变化。

图6：在研究第92天的在预测的支气管扩张剂之前的FEV₁（L）（%）从基线的变化。

图7：显示在支气管扩张剂之前的FEV₁从基线大于或等于10%的变化的受试者的百分比。

图8：在研究第92天的FVC从基线的变化。

图9：在研究第92天的SABA使用从基线的下降。每日吸入的短效β激动剂（补救治疗）的“喷吸”平均次数的变化。

图10a：FEV₁从基线的平均变化（可评估群体），针对联合川隆单抗组（每2周一次皮下给予150mg、300mg或600mg）和安慰剂的在支气管扩张剂之前的FEV₁从基线至研究第169天的变化。

图10b：FEV₁从基线的变化，针对单独的川隆单抗治疗组（每2周一次皮下给予150mg、300mg、或600mg）和安慰剂的在支气管扩张剂之前的FEV₁从基线至研究第169天的变化。

图11：ACQ-6得分随时间的推移从基线的平均（SD）变化（可评估群体），ACQ-6=哮喘控制问卷，6个单独的项目得分的平均值。

图12：在支气管扩张剂之前的FEV₁随时间的推移从基线的平均（SD）变化（可评估群体），FEV₁=第1秒用力呼气量。

图13：在基线提供痰液样品的亚群（n=56）中的ACQ-6得分随时间的推移从基线的平均（SD）变化（可评估群体）。安慰剂（痰液：全部）组是用安慰剂治疗的受试者（n=17）。川隆单抗（痰液：全部）组是用川隆单抗治疗的受试者（n=39）。川隆单抗治疗组（n=39）被细分成没有可测量的IL-13[川隆单抗（痰液IL-13<1pg/mL）]的那些和有可测量的IL-13[川隆单抗（痰液IL-13≥1pg/mL）]的那些。ACQ-6=哮喘控制问卷，6个单独的项目得分的平均值。

图14：在基线提供痰液样品的亚群（n=56）中的在支气管扩张剂之前的FEV₁随时间的推移从基线的平均（SD）变化（可评估群体）。安慰剂（痰液：全部）组是用安慰剂治疗的受试者（n=17）。川隆单抗（痰液：全部）组是用川隆单抗治疗的受试者（n=39）。川隆单抗治疗组（n=39）被细分成没有可测量的IL-13[川隆单抗（痰液IL-13<1pg/mL）]的那些和有可测量的IL-13[川隆单抗（痰液IL-13≥1pg/mL）]的那些。FEV₁=第1秒用力呼气量。

实例

实例1：

研究设计

提出IL-13阻断可以在哮喘未被控制的、中度至重度的、并且为持续性的患者（尽管在GINA步骤4或5的最大量疗法）中减缓加重并改善疾病控制（如通过与挽救用药需要降低相结合的哮喘症状的改善所定义的）。

进行一个2a期、随机化、双盲、安慰剂对照、平行组研究，以评估川隆单抗（一种针对白细胞介素13（IL-13）的重组人单克隆抗体）在患有未被控制的、中度至重度的持续性哮喘的成人受试者中的三种皮下（SC）治疗方案的疗效和安全性。该研究包括一个2周导入期、一个12周治疗期、以及一个12周随访期。给药方案和治疗持续时间的选择是基于药物动力学建模和使用来自先前临床研究的数据进行的模拟。这项研究是以ClinicalTrials.gov编号NCT00873860进行登记的。

计划总计192位受试者被随机化。在随机化之前，根据特应性哮喘状态、使用变应原过筛测试（Laboratoire Pasteur Cerba，法国；用于针对最常见的空气变应原（螨、霉菌、动物、草地、杂草、以及树木）的变应原特异性免疫球蛋白E（IgE）的荧光酶免疫测定（FEIA），它确定针对多种吸入的变应原的特异性IgE抗体的存在）将受试者分层。在每一个层中，根据一个计算机产生的随机化列表（1:1:1）将受试者随机化到三个组（150mg川隆单抗或安慰剂、300mg川隆单抗或安慰剂、600mg川隆单抗或安慰剂）之一中。然后在每一个组中，根据一个计算机产生的随机化列表将受试者随机化到活性治疗组或安慰剂组中（3:1）。研究治疗是通过在大腿前内侧进行SC注射每2周一次给予。受试者在12周内的7次就诊中接受川隆单抗的一次、两次或四次SC注射（每次注射150mg/1mL）。在最后一个剂量的研究产品（研究第169天）之后，所有受试者均被随访12周。由未以其他方式包括在研究中的非盲人员进行研究用药的分配和给予。受试者在该研究期间继续他们的研究前哮喘控制剂疗法（如由他们的医生所开出的处方）。受试者和医生始终对治疗分配是不知情的。

本研究的一个目标是评估在研究第92天川隆单抗的三种（SC）治疗方案相对于安慰剂在患有未被控制的、中度至重度、持续性哮喘的成人中对哮喘控制的作用。该研究的主要终点是哮喘控制问卷（ACQ-6）（Juniper等人，(1999)。肺功能的量度、挽救用药的使用、哮喘加重速率、患者报告结局（PRO）、以及安全性是次要终点。次要目标包括使用参数第1秒用力呼气量（FEV₁）和呼气流量峰值（PEF）评估SC川隆单抗对气流阻塞的可变性的作用。

主要纳入标准

男性或女性受试者

筛选时的年龄是18至65岁。

受试者必须具有介于18与40kg/m²之间的身体质量指数（BMI）。

在进行任何方案相关程序（包括筛选评估）之前，从受试者获得书面知情同意。

需要用适当的哮喘控制药物进行治疗的、医生诊断的中度至重度、持续性哮喘。

显示支气管扩张剂之后的FEV₁可逆性≥12%并且≥200mL，或在去年的先前测试中已经显示这样的值，或在去年具有阳性气道高反应性（AHR）测试结果。

在第1次和第3次就诊时的支气管扩张剂之前的FEV₁值≥个体预测值的40%。

符合专家小组报告（EPR）-3的未被控制的哮喘。在筛选就诊之前的2至4周，受试者应当具有以下各项中的一种或多种病史：

白天哮喘症状≥2天/周

夜间苏醒≥1晚/周

沙丁胺醇使用≥2天/周

在第1次和第3次就诊时的ACQ得分≥1.5

在过去的一年发生至少一次需要计划外的医疗帮助（unscheduledmedical encounter）的哮喘加重。

有怀孕可能的女性（除非手术绝育（包括输卵管结扎）和/或绝经后至少2年）在第一个剂量的研究产品之前必须具有阴性妊娠试验，并且从筛选直到研究第169天必须同意使用2种有效的避孕方法（包括口服、可注射、经皮、或植入式避孕药、宫内节育器、具有杀精子剂的女用避孕套、具有杀精子剂的子宫帽、宫颈帽、由男性性伴侣使用的避孕套）；或禁欲或不育性伴侣。有怀孕可能的女性在研究过程中和在研究结束后至少2个月必须继续实行生育控制。

男性（除非手术绝育）必须同样实行2种有效的生育控制方法（具有杀精子剂的避孕套），并且从研究第1天直到研究第169天必须使用这样的预防措施。

另外，通过那个年龄组的医疗史和体格检查证明是健康的。

在前12个月内的胸部X线检查没有发现表明除了哮喘以外的急性或慢性呼吸系统病状。

如方案所要求，完成随访期直到研究第169天的能力和意愿。

主要排除标准

对研究产品配制品的任何组分过敏或有反应的已知病史。

在研究开始时，除了哮喘以外的急性病。

在筛选之前4周内的活动性感染史，或临床显著的活动性感染的证据，包括进行性的慢性感染。

在已知感染有寄生虫的一个地点摄入未处理的水，从而导致急性或慢性腹泻病史；或在筛选之前6个月内的寄生虫感染诊断。

在随机化到研究中之前30天内使用免疫抑制药剂（除了多达10mg/天的口服泼尼龙和吸入型与局部用皮质类固醇以外）。

在随机化到研究中之前30天内接受免疫球蛋白或血液产品。

在本研究中的第一个剂量的研究产品之前6个月内，或在研究药剂或生物制品的5个半衰期之内（以较长者为准），接受任何研究药物疗法或使用任何生物制品，包括奥马珠单抗。

任何已知的免疫缺陷症史。

阳性乙型肝炎表面抗原或丙型肝炎病毒抗体，如通过医疗史和/或受试者的口头报告所确定的。

阳性人免疫缺陷病毒测试或正在服用抗逆转录病毒药剂，如通过医疗史和/或受试者的口头报告所确定的。

在筛选之前4周内接受活的或减毒疫苗接种。

可以损害受试者在研究中的安全性的并发疾病的先前医疗史或证据。

按照研究人员的观点，心电图（ECG）在临床上显著异常的病史。

哺乳（女性）。

在过去的一年内有酒精滥用或药物滥用治疗史。

表明慢性阻塞性肺病（COPD）和吸烟≥10包年的历史。

体格检查发现任何全身性疾病的证据。

癌症史（除了在研究第1天之前用≤1年的治愈性疗法明显成功治疗的宫颈基底细胞癌或原位癌、或在进入之前用≤5年的治愈性疗法明显成功治疗的其他恶性肿瘤之外）。

对吸入性职业剂或烟尘的已知暴露。

按照研究人员的观点，将干扰研究产品的评估或研究结果的解释的任何病症（例如囊性纤维化[CF]或COPD）。

在法律上被收容的个体。

临床研究场所的雇员或涉及进行该研究的任何其他个体，或这些个体的家庭成员。

目标患者群体

本研究中的受试者是成年男性和女性受试者，年龄在18至65岁，患有未被控制的、中度至重度、持续性哮喘。

主要终点

每周使用电子日记（eDiary）完成ACQ-6，哮喘症状（夜间苏醒、苏醒时的症状、活动受限、呼吸急促、哮鸣、以及短效β₂激动剂的使用）的复合度量。主要终点是平均ACQ-6得分从基线至第13周的变化。≥0·5的平均ACQ-6得分的降低被认为是在临床上有意义的，而≥1·5的得分指示未被控制的哮喘（Juniper等人，(2006)）。

次要终点

在每次研究就诊时在早晨进行呼吸量测定法；测量支气管扩张剂之前的FEV₁、用力肺活量（FVC）以及呼气流量峰值（PEF）。受试者还每天早晨在家进行峰值流量测试。

出于本研究的目的，哮喘加重被定义为需要给予全身性皮质类固醇激增的恶化；确切地说，在一个更详细的定义中，出于本研究的目的，哮喘加重（复发或重新开始）被定义为哮喘症状（咳嗽、哮鸣、胸部紧迫感、和/或呼吸急促）的进行性增加或呼气流量峰值（PEF）或第1秒用力呼气量（FEV₁）从基线降低≥20%，在起始挽救用药之后，所述进行性增加或降低并没有消退并导致由研究人员或健康护理提供者给予全身性皮质类固醇。对于接受维持口服皮质类固醇（OCS）以用于控制哮喘的那些，如果起始OCS激增疗法或静脉内皮质类固醇，则定义为发生哮喘加重。在每次研究就诊时报告哮喘加重（如果有的话）。

记录的PRO包括4个项目的每日哮喘症状得分和具有标准化活动的哮喘生活质量问卷（AQLQ(S)）。

在每次研究就诊时记录不良事件（AE）（如果有的话）；在筛选时、在第一个、第三个以及第五个剂量之后，并且在第13周和第24周进行常规实验室评估。

在基线、和第8周与第14周在所选择的研究中心诱导并收集痰液。使用ELISA系统（

公司）评定痰液IL-13含量。

药物代谢动力学评价

在每个剂量之前并且在随访期过程中收集血液样品用于药物代谢动力学评价。使用在Gyrolab测定平台上进行的检测游离川隆单抗的免疫测定法来测定川隆单抗的谷血清浓度（C_min）。这种方法在血清中具有0·300μg/mL的定量下限，并且展现出相对误差的绝对值<25%的准确度和CV（变异系数）<20%的精度。

基于在12周治疗期期间观察到的谷血清浓度，对川隆单抗的暴露大致随着在150-600mg范围内的剂量成比例增加。对于150、300、以及600mg的川隆单抗，在第13周的平均（SD）血清浓度分别为42·0(16·3)、86·8(33·1)、以及156(46·6)μg/mL。在每一个剂量组内，血清浓度在第2周与第10周之间增加大致两倍，这与中度积累相一致。在第10周和第12周观察到可比较的血清浓度，指示到第10周已经达到稳态。

免疫原性

在第一个剂量之前并且在第13周和第24周收集血液样品，用于使用确认的均质桥联免疫测定、通过电化学发光检测来测量血清抗药物抗体。在研究过程中未检测到血清抗药物抗体。

研究产品、剂量

计划总计192位受试者被随机化到本研究中，其中有144位受试者接受川隆单抗的SC给药，并且有48位受试者接受安慰剂。川隆单抗被以150mg/mL配制在50mM乙酸钠、85mM氯化钠、0.01%（w/v）植物源聚山梨酯80（pH5.5）中。

治疗组1：150mg川隆单抗（n=48）或1mL安慰剂（n=16），每2周一次，在研究第1、15、29、43、57、71、以及85天SC；

治疗组2：300mg川隆单抗（n=48）或2mL安慰剂（n=16），每2周一次，在研究第1、15、29、43、57、71、以及85天给予；

治疗组3：600mg川隆单抗（n=48）或4mL安慰剂（n=16），每2周一次，在研究第1、15、29、43、57、71、以及85天给予。

研究流程图显示在图1中。在本研究中5位受试者群体被分析如下。

1.意向治疗（ITT）群体包括被随机化到研究中的所有受试者。

2.可评估群体包括接受至少4个剂量的研究产品的所有受试者，以及接受至少一个剂量的研究产品、但由于安全原因在接受4个剂量之前中断治疗的受试者。主要疗效分析是基于可评估的群体。

3.根据方案（ATP）群体包括接受所有剂量的研究产品并且在研究第92天具有ACQ得分的所有受试者。

4.安全性群体包括接受至少一个剂量的研究产品的所有受试者。

5.PK群体包括在安全性群体中接受SC川隆单抗并且具有足够数量的血清浓度测量值的所有受试者。

表1受试者群体的总结

ATP=根据方案；ITT=意向治疗；PK=药物代谢动力学。

使用CT肺呼吸量计、使用用ATS/ERS推荐2005（欧洲呼吸杂志;26:319-338）的一个方案来测量FEV₁。

统计方法

使用统计软件nQuery

6·01进行基于主要终点的样本大小计算。对于安慰剂和合并的川隆单抗（150、300、以及600mg）组，在第13周的平均ACQ-6得分从基线的变化分别被认为是-0·5和-1·0，具有共同的SD为0·9。需要144的样本大小，以便在具有80%效能的0·05的显著性水平检测在合并的川隆单抗组与安慰剂组之间的统计学显著差异。为了允许退出，计划将192位受试者进行随机化。

可评估群体包括接受至少四个剂量的研究药剂的所有受试者，和接受至少一个剂量、但由于安全原因在接受四个剂量之前中断的那些；所报告的疗效分析是基于这个群体的。意向治疗（ITT）群体被定义为所有随机化的受试者；对这个群体进行确认性疗效分析。安全性群体包括接受至少一个剂量的研究药剂的所有受试者。

主要终点是使用方差分析来比较在合并的川隆单抗组（即150、300、以及600mg）与安慰剂之间的平均ACQ-6得分从基线至第13周的变化。在所有受试者都已完成第13周的就诊之后，在期中分析时进行主要疗效分析。使用双样本t检验来比较治疗组之间的在研究就诊期间测量的呼吸量测定法参数从基线至第13周的变化。收集疗效终点直到第24周，并且如上所述还对这些终点进行分析（研究组与场所均保持盲化直到第24周）。进行探索性疗效分析以便比较每一个川隆单抗剂量与安慰剂，并且不进行多重比较调整。在合并的川隆单抗组中并且针对与安慰剂相比较的每一个剂量（双样本t检验），对挽救β₂激动剂的使用从基线至第13周和第24周的变化进行事后分析。对FEV₁从基线至第13周的变化进行由特应性哮喘状态所定义的事后亚组分析

在具有在基线获得的痰液样品的受试者的一个亚组中进行ACQ-6和FEV₁从基线的变化的描述性事后分析；根据可检测的痰液IL-13的存在或不存在来分析受试者。

在所有受试者已经完成研究之后使用安全性群体来进行安全性分析。以描述方式总结所有安全性参数。

结果

该研究在2009年6月与2010年8月之间进行。194位受试者在欧洲的27个研究中心被随机化。大多数受试者接受所有七个剂量的研究药剂（安慰剂95·7%；川隆单抗93·8%）。

受试者的处置

在本研究中，总计194位受试者在欧盟的27个场所被随机化；10个场所在罗马尼亚（n=77）、6个场所在保加利亚（n=52）、6个场所在波兰（n=37）、4个场所在德国（n=21）、以及1个场所在英国（n=7）。

在研究中被随机化的194位受试者中，48位受试者被随机化到安慰剂组中，并且146位受试者被随机化到三个SC川隆单抗治疗组（47位受试者在150mg SC川隆单抗治疗组中、51位受试者在300mg SC川隆单抗治疗组中、并且48位受试者在600mg SC川隆单抗治疗组中）之一中。

人口统计学和其他基线特征

基线人口统计学特征被总结在表2基线人口统计学特征（ITT群体）中。受试者群体的平均年龄是47.3岁（18-65岁），其中在安慰剂和SC川隆单抗治疗组中可见相似的平均年龄（43.4-49.8岁）。大多数受试者是女性（59.8%），除了150mg SC川隆单抗治疗组（40.4%）之外。大多数受试者是白人（91.8%）。平均BMI是27.082kg/m²（18.52-35.29kg/m²），其中在安慰剂和SC川隆单抗治疗组中可见相似的平均BMI（26.548-27.536kg/m²）。

表2基线人口统计学特征（ITT群体）

BMI=身体质量指数；ITT=意向治疗;Max=最大值;Min=最小值;SD=标准偏差。

在本研究中将患有经过医生诊断的中度至重度、持续性哮喘（需要用适当的哮喘控制药物治疗）的受试者随机化。基线疾病特征和哮喘用药史分别总结于表3和表4中。

在基线，研究群体患有未被完全控制的中度至重度哮喘（总平均FEV₁：2·00L[预测的61·2%]；FVC3·26L；ACQ-6得分2·66）。预测的总平均FEV₁为61.2%（41%-103%），在安慰剂组和SC川隆单抗治疗组中是一致的。平均哮喘症状得分是4.42（0.0-8.1），其中大多数（59.8%）受试者（59.8%）具有每周>2晚的平均苏醒时间。受试者的大多数（61.9%）在过去的12个月内还具有需要口服皮质类固醇（OCS）的至少一次哮喘加重。分层指示47.9%的受试者没有非特应性哮喘，而52.1%的受试者被分类为特应性的（由筛选就诊时变应原特异性免疫球蛋白E的存在所定义的）。平均ACQ得分是2.66，与未被控制的哮喘群体一致。

在基线，受试者服用一系列的哮喘控制药物，并且在安慰剂组和SC川隆单抗治疗组中的平均吸入性皮质类固醇（ICS）剂量（表示为二丙酸倍氯米松（BDP）当量）在每天1058.9-1254.3mcg的范围内，中值每日ICS剂量（表示为二丙酸倍氯米松当量）为1000μg/天，32%的受试者接受高剂量ICS（按照GINA指南2009）和/或定期每日剂量的口服皮质类固醇。大多数受试者需要挽救β2激动剂（平均2.5次喷/天）和短效β激动剂（有90.7%使用SABA达每周至少三天）。

表3基线疾病特征（ITT群体）

ACQ=哮喘控制问卷；FEV₁=第1秒用力呼气量；Max=最大值；Min=最小值；N=数量；NA=不适用；SD=标准偏差。

表4哮喘用药史总结（ITT群体）

ICS=吸入性皮质类固醇；Max=最大值；Min=最小值；N=数量；NA=不适用；OCS=口服皮质类固醇；SABA=短效β激动剂；SD=标准偏差。

疗效评估

这项研究是一个2a期研究，被设计成确立SC川隆单抗对IL-13的阻断是否在患有未被控制的、中度至重度、持续性哮喘的受试者中产生改善的哮喘控制。报告可评估群体的疗效结果，基于ITT群体的结果与可评估群体的结果是一致的。

使用一种2阶段方法来分析数据。分析的阶段1（研究第92天）相应于由方案规定的期中分析，即在所有受试者均完成研究第92天的就诊之后，进行主要终点的分析，其中包括选择的次要终点。阶段2（研究第169天）相应于方案中规定的最终分析，即总研究安全性终点连同其余疗效终点的分析。

呼吸量测定法

在每次就诊过程中在研究场所进行呼吸量测定法。针对每个呼吸量测定法期间进行多次用力呼气努力（至少3次，但不超过8次）。使用所有接受努力的最高FEV₁和FVC用于分析。另外，将与FEV₁的最大努力相关的PEF用于分析。评定研究过程中的气流阻塞（在场所的FEV₁和FVC与在家的PEF）的变化。

表5总结了呼吸量测定法参数从基线至研究第92天的变化。在第92天FEV₁从基线的平均变化在安慰剂组中是0.061L，并且在合并的SC川隆单抗治疗组中是0.204L；这个差异是统计显著性的（p=0.044）。这个结果被图示于图2中。与安慰剂相比较，在早至开始给药之后的第15天就在合并的SC川隆单抗治疗组中观察到FEV1的增加，在这个时间点，FEV₁从基线的平均变化在安慰剂组中是0.019L并且在合并的SC川隆单抗治疗组中是0.124L。在第92天，在SC川隆单抗治疗组中观察到一个剂量反应（分别为0.155、0.210以及0.246L）。在研究第92天FEV₁从基线的平均百分比变化对于安慰剂组是4.1%、对于150mg SC川隆单抗治疗组是8.0%、对于300mg SC川隆单抗治疗组是13.3%、对于600mg SC川隆单抗治疗组是15.2%、并且对于合并的SC川隆单抗治疗组是12.2%。

进行亚组分析以便检查川隆单抗在研究中对亚群中的FEV₁的作用（表6）。在合并的SC川隆单抗治疗组中FEV₁从基线的平均变化的量值在受试者中是相似的，而不考虑他们在基线的特应性状态。对于患有非特应性哮喘的受试者，FEV₁从基线的平均变化在合并的SC川隆单抗治疗组中是0.197L（与安慰剂组相比，这个差异是统计显著性的（p=0.002）。对于患有特应性哮喘的受试者，FEV₁从基线的平均变化在合并的SC川隆单抗治疗组中是0.210L（与安慰剂组相比，这个差异不是统计显著性的）。

表5来自基线诊所就诊的可评估群体的呼吸量测定法参数从基线的变化的总结

在合并的SC川隆单抗治疗组中，在接受高剂量的吸入性皮质类固醇和/或口服皮质类固醇作为背景哮喘控制剂疗法的受试者中，与总研究群体相比，FEV₁从基线的平均变化的0.186L的量值是相似的（与安慰剂组相比，这个差异不是统计显著性的）。

与安慰剂相比，支气管扩张剂之前的FEV₁、FVC、以及PEF在所有川隆单抗组中在12周治疗期内均得以改善（表8）。川隆单抗相对于安慰剂，FEV₁（12·5%[20·7%]相对于4·3%[29·4%]）和FVC（7·1%[16·8%]相对于1·5%[21·0%]）从基线至第13周的平均[SD]百分比增加是更大的。在第2周时对FEV₁的作用是明显的，并且该作用持续直到第24周（图12）。在第13周时，剂量反应是明显的，但在最后6周的治疗过程中在川隆单抗300和600mg组中观察到定性相似的FEV₁增加。在第13周时在接受川隆单抗的患有特应性（12·9%[21·2%]）和非特应性（12·2%[20·2%]）哮喘的受试者中观察到FEV₁的相似的平均[SD]百分比增加。

在通过IL-13的存在或不存在来分层的、在基线提供痰液样品的那些受试者中，FEV₁的变化被呈现在图14中。在第13周，痰液IL-13阳性（≥1pg/mL）川隆单抗组（9.9[11.4]%n=11）中的平均[SD]改善值大于安慰剂（3.9[9.0]%n=15）或痰液IL-13阴性（<1pg/mL）川隆单抗组（2.9[8.9]%n=26）。

挽救β2激动剂的使用

表7总结了挽救β2激动剂的使用和无缓解剂日的比例，比较了在安慰剂和SC川隆单抗治疗组中在基线之前的那一周和在研究第92天之前的那一周。在安慰剂组中，挽救β2激动剂喷吸的平均次数在两个时间点处是相似的（在基线有2.58次喷吸，并且在研究第92天有2.5次喷吸）。相比之下，在合并的SC川隆单抗治疗组中，挽救β2激动剂喷吸的平均次数与基线相比较在研究第92天时更低（在基线有2.48次喷吸，并且在研究第92天有1.8次喷吸）。

在安慰剂组中，一周内无缓解剂日的平均比例在基线是13.2%，并且在研究第92天是22.0%，差异为8.8%。在合并的SC川隆单抗治疗组中，一周内无缓解剂日的平均比例在基线是17.4%，并且在研究第92天是38.7%，差异为21.3%。

与安慰剂相比，在第13周（-0·68[1·45]相对于-0·10[1·49]次喷吸/天；p=0·020）和第24周（-0·73[1·57]相对于-0·05[1·87]次喷吸/天；p=0·025）时，在合并的川隆单抗组中的受试者显示β₂激动剂的使用的显著更大的平均[SD]降低。相对于安慰剂组，在研究过程中的无缓解剂日/周的平均比例在合并的川隆单抗中增加（在基线、第13周、第24周分别为17·4%相对于13·2%、38·7%相对于22·0%、38·6%相对于28·6%）。

表7挽救β2激动剂的使用和在基线与研究第92天时（可评估群体）的无缓解剂日的总结

Max=最大值；Min=最小数；N=数量；PEF=呼气流量峰值；SD=标准偏差。

疗效结论

与安慰剂相比，在研究第92天时在合并的SC川隆单抗治疗组中观察到FEV₁从基线的统计显著性增加。这个变化的量值（0.204L或12.2%）在临床上是重要的，因为它是在除了当前可用的哮喘控制药物之外而观察到的。不考虑特应性状态并且同样在接受高剂量的吸入性皮质类固醇和/或口服类固醇的受试者中观察到治疗效果。

FEV₁的增加表现出剂量依赖性，其中在600和300mg的SC川隆单抗治疗组中观察到最大增加。

还在合并的SC川隆单抗治疗组中观察到PEF和FVC从基线的增加。

在合并的SC川隆单抗治疗组中观察到对另外的短效β2激动剂的使用的需要的降低，该降低与以上所述的FEV₁的改善相一致。

主要终点——ACQ-6得分从基线至第13周的变化

平均ACQ-6得分在所有治疗组中从基线至第13周均有所改善（表8；图11），其中84/144（58·3%）的川隆单抗和24/46（52·2%）的安慰剂受试者显示≥0·5的改善。在第13周时，合并的川隆单抗组中的平均[SD]降低值（-0·76[1·04]）与安慰剂（-0·61[0·90]；p=0·375）没有不同。治疗组之间的从基线的变化的差异（95%CI）是-0·15（-0·49，0·19）。在两个组中，ACQ-6得分的降低被维持直至第24周，但在川隆单抗（-0·79[0·98]）与安慰剂（-0·60[1·00]；p=0·256）组之间的平均值[SD]没有差异。

然而，在通过IL-13的存在或不存在分层的、在基线提供痰液样品的那些受试者中观察到ACQ-6得分的差异，这个差异被呈现在图13中；在第13周，在痰液IL-13阳性（≥1pg/mL）的川隆单抗组（-0·97[0.98]n=11）中的ACQ-6的平均降低值[SD]大于安慰剂（-0·43[0·70]n=17）或痰液IL-13阴性（<1pg/mL）的川隆单抗组（-0.62[0.85]n=28）。

表8在第13周在诊所就诊时（可评估群体）的平均ACQ-6得分和呼吸量测定法参数从基线的变化的总结

安全性和耐受性结论

大多数的受试者接受所有7个剂量的研究产品，并且有较低的受试者退出研究的发生率。以隔周一次150、300、以及600mg的剂量持续12周以SC注射给予的川隆单抗总体上被良好耐受。没有鉴定出重大安全问题。

治疗后随访

在最后一个剂量的研究产品之后，所有受试者都被随访12周，并且在第127天和第169天经历呼吸量测定法。在川隆单抗治疗的受试者中在第92天观察到的FEV₁的增加在这两个给药后的时间点均得以维持。在第169天FEV₁从基线的平均变化在安慰剂组中为0.101L并且在合并的SC川隆单抗治疗组中为0.218L（p=0.096）。在第92天观察到的FVC和PEF的数值增加也被维持至第169天。这个发现表明，在停止治疗之后，川隆单抗对肺功能的有益作用可以持续一个延长的时期（参见图10a&10b）。

总结

在将川隆单抗添加到标准哮喘药物中之后，在患有未被控制的中度至重度、持续性哮喘的受试者中观察到临床效果的证据。最令入注目的信号是FEV₁在第92天的统计显著性增加，这个增加还得到FVC、PEF的改善以及短效β2激动剂的使用减少的支持。在早至随机化后第15天就观察到气流阻塞的改善。关于川隆单抗的剂量之间的差异，在600mg的SC川隆单抗治疗组中观察到最大治疗效果，但也在300mg的SC川隆单抗治疗组中观察到FEV₁在临床上重要的变化。在川隆单抗治疗组中的FEV₁的改善在12周的治疗后随访期中得以维持。被分层到痰液IL-13阳性或阴性的受试者的子集证明了IL-13在痰液中的存在与通过ACQ-6评定的对川隆单抗的反应之间的关联。

越来越多的证据暗示IL-13在哮喘的发展和维持中作为一种关键介质。本研究研究了川隆单抗（一种有效并且特异性的中和IL-13的人IgG4单克隆抗体）在患有未被控制的中度至重度哮喘的受试者中对当前可用的哮喘控制剂疗法的加性效应。在川隆单抗治疗的受试者中，FEV₁和FVC的增加与短效β₂激动剂的使用减少指示了一种治疗效果。FEV₁增加的量值接近10%的最小重要差异（雷德尔（Reddel）等人，(2009)），表明这种抗体能够递送临床上重要的益处。

川隆单抗的使用使得对“挽救”短效β激动剂（SABA）的需要降低，该降低与所观察到的FEV₁的改善相一致。在600mg治疗组中观察到了最大作用大小。不考虑在基线的特应性状态并且还在接受高剂量的吸入性皮质类固醇和/或口服类固醇的受试者中观察到对FEV₁的有益作用，并且该作用在最后治疗之后持续12周。

由于哮喘是一种异质性疾病，在用通过设计、靶向特异性机制的生物治疗剂递送最佳益处中，患者亚组或个体患者/疾病特征的鉴定是重要的。我们推测具有上调的气道IL-13的受试者可能最受益于用IL-13中和疗法进行的治疗。在我们的研究中，我们通过检查提供基线痰液样品的56位受试者探究了这一理念。当受试者被分层到痰液IL-13阳性或阴性中时，在IL-13的存在与对川隆单抗的反应之间存在一种关联（图13和14）。总之，这些数据证明，具有上调的肺IL-13的受试者受到了IL-13中和疗法如川隆单抗的最大临床益处。

实例2：测量痰液中的IL-3

测定描述

使用Luminex技术（马萨诸塞州比尔里卡（Billerica,MA）的默克密理博公司（Millipore））测量了游离的IL-13。在测定试剂盒中提供了必要的试剂，所有步骤均在室温下进行，将测定板密封并放置在一个板震荡器上，适度的震荡用于所有孵育步骤。简单地说，用200μl/孔的测定缓冲液将孔预先润湿≥10分钟。在珠粒稀释缓冲液中制备抗IL-13抗体结合的珠粒，并且以25μl/孔将珠粒添加到测定板中；施加真空以去除珠粒稀释缓冲液。以25μl/孔将制备在测定缓冲液中的参考标准品（RS）、质量控制品（QC）、以及阴性对照品（NC）添加到测定板中。以25μl/孔添加测试样品（纯净血清）。将测定板孵育60±10分钟。通过用1x洗涤缓冲液将板洗涤两次去除未结合的分析物。为了检测结合的分析物，添加生物素结合的抗IL-13检测抗体，并且将测定板孵育60±10分钟。然后，以25μl/孔添加PE结合的链霉亲和素染料（SA-PE），并且将测定板孵育30±5分钟。通过用1x洗涤缓冲液将板洗涤两次去除过多的检测抗体和染料。以150μl/孔添加Luminex鞘液，并且将板放置在一个板震荡器上持续≥5分钟，然后读取。在Luminex200板读取器中测量的荧光强度与样品中的IL-13浓度成比例。在来自患有哮喘的受试者的痰液中≥1pg/ml IL-13的存在指示受试者在痰液中具有可检测的IL-13（“痰液IL-13阳性”）。在痰液中<1pg/ml IL-13的一个值指示受试者在痰液中不具有可检测的IL-13，并且因此该受试者是“痰液IL-13阴性”。

试剂

1.MPXHCYTO-60K（Luminex试剂盒，目录号MPXHCYTO-60K）：

过滤测定板：目录号MX-PLATE

抗IL-13抗体结合的珠粒：目录号MXHIL-13，珠粒区：50，50x贮备液参考标准品rh IL-13：目录号MXH8060

质量控制品1#&2#：MXH6060&MXH6060-2

生物素结合的抗IL-13检测抗体：目录号MXH1060-1，1x贮备液

链霉亲和素-藻红蛋白检测染料：目录号L-SAPE9，1x贮备液

缓冲液：测定缓冲液（1x）、珠粒稀释缓冲液（1x）、洗涤缓冲液（25x）

2.Luminex鞘液目录号40-50000

测定方案

将测定试剂平衡至室温。将200μl测定缓冲液的一个等分部分转移至96孔过滤测定板的每一个孔中，将板密封并且在一个板震荡器上孵育≥10分钟。通过在测定缓冲液中稀释重组人IL-13参考标准品来制备八个水平的参考标准品（RS）。使用以下浓度：2500.0、833.3、277.8、92.6、30.9、10.3、3.4以及1.1pg/ml。制备在测定缓冲液中的三（3）个水平的质量控制样品（QC）。使用以下浓度：1000.0，10.0pg/ml。用测定缓冲液制备阴性对照品（NC）（0.0ng/ml）。将测试血清样品在冰上解冻，并且简短地涡旋。将抗IL-13抗体结合的珠粒以1:50稀释在珠粒稀释缓冲液中。施加真空以便去除缓冲液，板的底部在吸水纸上留下印迹（blotted）。将25μl/孔的稀释的珠粒溶液的一个等分部分转移至板上。如上，将真空施加于该板上。将25μl/孔的RS、QC、NC、以及血清样品的等分部分转移至板上，然后将板密封并且在一个旋转的平台上、在适度的震荡下孵育60±10分钟。从25X洗涤缓冲贮备液制备1X洗涤缓冲液。用200μl/孔的1X洗涤缓冲液将板洗涤2次。将25μl/孔的生物素结合的抗IL-13检测抗体的一个等分部分转移至板上，将板密封并且在一个旋转的平台上、在适度的震荡下孵育60±10分钟。将25μl/孔的链霉亲和素染料（SA-PE）的一个等分部分转移至板上，将板密封并且在一个旋转的平台上、在适度的震荡下孵育30±5分钟。用200μl/孔的1X洗涤缓冲液将板洗涤2次。将150μl/孔的Luminex鞘液的一个等分部分转移至板上，并且将板在一个板震荡器上震荡≥5分钟。在Luminex200板读取器上读取该板。

实例3

这是一个2b期、随机化、双盲、安慰剂对照的平行组多中心研究，以评估川隆单抗在患有未被控制的重度哮喘（需要高剂量的ICS和LABA，其中有或没有另外的控制药物）的成人受试者中的两种SC治疗方案的疗效和安全性（高剂量的ICS被定义为总日剂量>500μg氟替卡松干粉吸入剂[DPI]，或>440μg计量吸入剂[MDI]；GINA,2009；美国国家心脏、肺和血液研究所，2007）。受试者将以1:1的比率被随机化到2个同期组群的一个中（同期组群1或同期组群2）。在各同期组群之中，受试者将以2:1的比率被随机化，以便接受川隆单抗（300mg）或安慰剂如下：

同期组群1：川隆单抗300mg（n=130）或安慰剂（n=65），以每2周一次（Q2W）SC注射，持续50周，总计有26个剂量。

同期组群2：川隆单抗300mg（n=130）或安慰剂（n=65），以Q2W2次SC注射，持续12周，接着是每4周一次（Q4W）持续38周，总计有16个剂量。

在筛选时将根据在过去的12个月中哮喘加重的次数（2次相对于>2次但≤6次加重）和长期口服皮质类固醇（OCS）的使用（存在相对于不存在）对受试者进行分层。

在研究产品给予之前，将有一个5周的筛选/导入期（第-5周至第-1周[第-1天）。从第4周（第28天）开始，受试者将接受一个固定剂量的氟替卡松/沙美特罗组合产品，该组合产品为以2吸每日两次的剂量的MDI（230μg/21μg）或为以1吸每日两次的剂量的DPI（500μg/50μg）。如果被批准并且可用于在其国家使用的话，多个场所/受试者将被允许使用氟替卡松/沙美特罗的任一种呈现形式。如果受试者还服用另外的哮喘控制药物（包括白三烯调节剂、茶碱、克米罗、或OCS，≤20mg/天），在筛选/导入期期间，这些药物应当以稳定剂量继续。在研究过程中，受试者可以在如需要的基础上（如在他们的个性化哮喘行动计划中所记录的）使用吸入性缓解剂疗法（例如，短效β2激动剂或短效抗胆碱能剂）。

在治疗期期间并且直至第53周，受试者将以稳定剂量继续接受相同的固定剂量的氟替卡松/沙美特罗的组合产品，其中有或没有另外的哮喘控制药物。在治疗期期间经历一次哮喘加重的受试者将因此被治疗并且将保留在研究中。在第53周，受试者将返回诊所，以便评定疗效终点。受试者将在第59、67、以及75周具有3次另外的随访就诊。在第53周的就诊之后，当研究人员认为必要时，可以改变背景药物。作为研究的一部分，所选择的场所将参与到子研究中，该子研究使用HRCT扫描，以便测量潜在的气道壁结构变化，包括气道壁厚度。将根据他们的能力和进行扫描的意愿来选择场所。参与此项子研究对于所选择场所的受试者来说是任选的。将鉴定足够数量的场所，以便实现目标：将大致40名受试者募集到用于HRCT子研究的2个同期组群中的每一个中。受试者将在研究中持续79周，包括一个5周的筛选/导入期（第-5周至第-1周）、一个48周或50周的治疗期（对于同期组群1是第1-51周，并且对于同期组群2是第1-49周）、以及一个24周的随访期（第51-75周）。

受试者群体

本研究中的受试者将为年龄为18-75岁、患有未被控制的重度哮喘（需要高剂量的ICS和LABA，其中有或没有另外的控制药物）的成人。

治疗方案

总计390位受试者将按1:1的比率被随机化到2个同期组群之一中。在每一个组群中，受试者将按2:1的比率被随机化，以接受SC川隆单抗（300mg）或安慰剂。将以1mL Q2W2次SC注射、持续50周，总计26个剂量（同期组群1），或Q2W持续12周，之后Q4W持续38周，总计16个剂量（同期组群2）给予研究产品（川隆单抗或安慰剂）。

参考文献

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序列表信息

川隆单抗（BAK502G9、CAT-354）：

SEQ ID NO:7是HCDR1；

SEQ ID NO:8是HCDR2；

SEQ ID NO:9是HCDR3；

SEQ ID NO:10是LCDR1；

SEQ ID NO:11是LCDR2；并且

SEQ ID NO:12是LCDR3。

SEQ ID NO:15是VH片段

SEQ ID NO:16是VL片段

川隆单抗的变异体（HCDR1、2、3，LCDR1、2、3）

BAK278D6（SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6）；

BAK1183H4（SEQ ID NO:97、98、99、100、101、102）；

BAK1167F02（SEQ ID NO:64、65、66、67、68、69）；

BAKllllD10（SEQ ID NO:91、92、93、94、95、96）

BAK1166G02（SEQ ID NO:67、68、69、70、71、72）；

BAK1167F04（SEQ ID NO:85、86、87、88、89、90）；

BAK1184C8（SEQ ID NO:73、74、75、76、77、78）；

BAK1185E1（SEQ ID NO:79、80、81、82、83、84）；以及

BAK1185F8（SEQ ID NO:103、104、105、106、107、108）。

川隆单抗的变异体（VH、VL）

BAK278D6（VH SEQ ID NO:13；VL SEQ ID NO:14）；

BAK1183H4（VH SEQ ID NO:37；VL SEQ ID NO:38）；

BAK1167F02（VH SEQ ID NO:35；VL SEQ ID NO:36）；_0}

BAKllllD10（VH SEQ ID NO:41；VL SEQ ID NO:42）；

BAK1166G02（VH SEQ ID NO:53；VL SEQ ID NO:54）；

BAK1167F04（VH SEQ ID NO:43；VL SEQ ID NO:44）；_0}

BAK1184C8（VH SEQ ID NO:45；VL SEQ ID NO:46）；

BAK1185E1（VH SEQ ID NO:47；VL SEQ ID NO:48）；以及

BAK1185F8（VH SEQ ID NO:49；VL SEQ ID NO:50）。

BAK278D6

重链

CDR1-SEQ ID NO1:NYGLS

CDR2-SEQ ID NO2:WISANNGDTNYGQEFQG

CDR3-SEQ ID NO3:DSSSNWARWFFDL

BAK278D6

轻链

CDR1-SEQ ID NO4：GGNNIGSKLVH

CDR2-SEQ ID NO5：DDGDRPS

CDR3-SEQ ID NO6：QVWDTGSDPVV

BAK502G9

重链

CDR1-SEQ ID NO7：NYGLS

CDR2-SEQ ID NO8：WISANNGDTNYGQEFQG

CDR3-SEQ ID NO9：DSSSSWARWFFDL

轻链

CDR1-SEQ ID NO10：GGNIIGSKLVH

CDR2-SEQ ID NO11：DDGDRPS

CDR3-SEQ ID NO12：QVWDTGSDPVV

BAK278D6

重链结构域

SEQ ID NO13：

EVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFRNYGLSWVRQAPGQGLE

WMGWISANNGDTNYGQEFQGRITMTTETSTNTAHMELRSLRSDDTAV

YYCVRDSSSNWARWFFDLWGKGTMVTVSS

BAK278D6

轻链结构域

SEQ ID NO14：

SYVLTQPPSVSVAPGQTARIPCGGNNIGSKLVHWYQQKPGQAPVLVVY

DDGDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISRIDAGDEADYYCQVWDTGSDPV

VFGGGTKLTVL

BAK502G9

重链结构域

SEQ ID NO15：

QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYGLSWVRQAPGQGLE

WMGWISANNGDTNYGQEFQGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAV

YYCARDSSSSWARWFFDLWGRGTLVTVSS

BAK502G9

轻链结构域

SEQ ID NO16：

SYVLTQPPSVSVAPGKTARITCGGNIIGSKLVHWYQQKPGQAPVLVIYD

DGDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDTGSDPVV

FGGGTKLTVL

BAK278D6

重链

FR1-SEQ ID NO17：EVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFR

FR2-SEQ ID NO18：WVRQAPGQGLEWMG

FR3-SEQ ID NO19：RITMTTETSTNTAHMELRSLRSDDTAVYYCVR

BAK278D6

轻链

FR1-SEQ ID NO20：SYVLTQPPSVSVAPGQTARIPC

FR2-SEQ ID NO21：WYQQKPGQAPVLVVY

FR3-SEQ ID NO22：GIPERFSGSNSGNTATLTISRIDAGDEADYYC

BAK167A11

重链结构域

SEQ ID NO 23 ：

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWV

SAISGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCA

RVGAAGEGYYGYWGRGTLVTVSS

BAK167A11

轻链结构域

SEQ ID NO24：

NFMLTQPHSVSESPGKTVTISCTRSSGSIASNYVQWYQQRPGSAPTTVIY

DDNQRPSGVPDRFSGSIDSSSNSASLTISGLKTEDEADYYCQSYDSNND

VFGGGTKVTVL

BAK209B11

重链结构域

SEQ ID NO25：

QVQLQESGGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYGMSWVRQAPGKGLE

WVSSISASGDSTFYADSVKGRFTISRDNNKNMVFLQVNSLRADDTAVYF

CAKDWSQWLVGDAFDVWGRGTTVTVSS

BAK209B11

轻链结构域

SEQ ID NO26：

DIQLTQSPSTLSASVGDRVTITCRASQSVSLWVAWYQQRPGKAPKLLIY

DGSTLQSGVPARFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQYKTFSTFGQ

GTKVEIKRA

BAK502G9

重链

FR1-SEQ ID NO27：QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFT

FR2-SEQ ID NO28：WYRQAPGQGLEWMG

FR3-SEQ ID NO29：RVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCAR

BAK502G9

轻链

FR1-SEQ ID NO30：SYVLTQPPSVSVAPGKTARITC

FR2-SEQ ID NO31：WYQQKPGQAPVLVIY

FR3-SEQ ID NO32：GIPERFSGSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYC

BAK615E3

重链结构域

SEQ ID NO33：

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWV

SAISGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCA

RVGKATTEEGYYGYWGRGTLVTVSS

BAK615E3

轻链结构域

SEQ ID NO34：

NFMLTQPHSVSESPGKTVTISCTRSSGSIASNYVQWYQQRPGSAPTTVIY

DDNQRPSGVPDRFSGSIDSSSNSASLTISGLKTEDEADYYCQSYDSNND

VFGGGTKVTVL

BAK1167F2

重链结构域

SEQ ID NO35：

QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFEQTGVSWVRQAPGQGLE

WMGWISANNGDTNYGQEFQGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAV

YYCARDSSSSWARWFFDLWGRGTLVTVSS

BAK1167F2

轻链结构域

SEQ ID NO36：

SYVLTQPPSVSVAPGKTARITCGGNIIGSKLVHWYQQKPGQAPVLVIYD

DGDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDTGSDPVV

FGGGTKLTVL

BAK1183H4

重链结构域

SEQ ID NO37：

QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYGLSWVRQAPGQGLE

WMGWINYDGGNTQYGQEFQGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAV

YYCARDSSSSWARWFFDLWGRGTLVTVSS

BAK1183H4

轻链结构域

SEQ ID NO38：

SYVLTQPPSVSVAPGKTARITCGGNIIGSKLVHWYQQKPGQAPVLVIYD

DGDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDTGSDPVV

FGGGTKLTVL

BAK1105H3

重链结构域

SEQ ID NO39：

QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYGLSWVRQAPGQGLE

WMGWISGLNGETLYGQEFQGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVY

YCARDSSSSWARWFFDLWGRGTLVTVSS

BAK1105H3

轻链结构域

SEQ ID NO40：

SYVLTQPPSVSVAPGKTARITCGGNIIGSKLVHWYQQKPGQAPVLVIYD

DGDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDTGSDPVV

FGGGTKLTVL

BAK1111D10

重链结构域

SEQ ID NO41：

QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYGLSWVRQAPGQGLE

WMGWIATPDGQTSYGQEFQGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVY

YCARDSNSSWARWFFDLWGRGTLVTVSS

BAK1111D10

轻链结构域

SEQ ID NO42：

SYVLTQPPSVSVAPGKTARITCGGNIIGSKLVHWYQQKPGQAPVLVIYD

DGDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDTGSDPVV

FGGGTKLTVL

BAK1167F4

重链结构域

SEQ ID NO43：

QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFIDTGVSWVRQAPGQGLEW

MGWISANNGDTNYGQEFQGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVY

YCARDSSSSWARWFFDLWGRGTLVTVSS

BAK1167F4

轻链结构域

SEQ ID NO44：

SYVLTQPPSVSVAPGKTARITCGGNIIGSKLVHWYQQKPGQAPVLVIYD

DGDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDTGSDPVV

FGGGTKLTVL

BAK1184C8

重链结构域

SEQ ID NO45：

QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYGLSWVRQAPGQGLE

WMGWISGSNGYTSYGQEFQGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVY

YCARDSSSSWARWFFDLWGRGTLVTVSS

BAK1184C8

轻链结构域

SEQ ID NO46：

SYVLTQPPSVSVAPGKTARITCGGNIIGSKLVHWYQQKPGQAPVLVIYD

DGDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDTGSDPVV

FGGGTKLTVL

BAK1185E1

重链结构域

SEQ ID NO47：

QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYGLSWVRQAPGQGLE

WMGWINDATGDTQYGQEFQGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAV

YYCARDSSSSWARWFFDLWGRGTLVTVSS

BAK1185E1

轻链结构域

SEQ ID NO48：

SYVLTQPPSVSVAPGKTARITCGGNIIGSKLVHWYQQKPGQAPVLVIYD

DGDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDTGSDPVV

FGGGTKLTVL

BAK1185F8

重链结构域

SEQ ID NO49：

QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYGLSWVRQAPGQGLE

WMGWIRNIDGYTIYGQEFQGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVY

YCARDSSSSWARWFFDLWGRGTLVTVSS

BAK1185F8

轻链结构域

SEQ ID NO50：

SYVLTQPPSVSVAPGKTARITCGGNIIGSKLVHWYQQKPGQAPVLVIYD

DGDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDTGSDPVV

FGGGTKLTVL

BAK1187B4

重链结构域

SEQ ID NO51：

QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYGLSWVRQAPGQGLE

WMGWIDDDSGTTIYGQEFQGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVY

YCARDSSSSWARWFFDLWGRGTLVTVSS

BAK1187B4

轻链结构域

SEQ ID NO52：

SYVLTQPPSVSVAPGKTARITCGGNIIGSKLVHWYQQKPGQAPVLVIYD

DGDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDTGSDPVV

FGGGTKLTVL

BAK1166G2

重链结构域

SEQ ID NO53：

QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFANTGISWVRQAPGQGLEW

MGWISANNGDTNYGQEFQGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVY

YCARDSSSSWARWFFDLWGRGTLVTVSS

BAK1166G2

轻链结构域

SEQ ID NO54：

SYVLTQPPSVSVAPGKTARITCGGNIIGSKLVHWYQQKPGQAPVLVIYD

DGDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDTGSDPVV

FGGGTKLTVL

BAK167A11

重链

CDR1-SEQ ID NO55：SYAMS

CDR2-SEQ ID NO56：AISGSGGSTYYADSVKG

CDR3-SEQ ID NO57：VGAAGEGYYGY

BAK167A11

轻链

CDR1-SEQ ID NO58：TRSSGSIASNYVQ

CDR2-SEQ ID NO59：DDNQRPS

CDR3-SEQ ID NO60：QSYDSNNDV

BAK1167F2

重链

CDR1-SEQ ID NO61：QTGVS

CDR2-SEQ ID NO62：WISANNGDTNYGQEFQG

CDR3-SEQ ID NO63：DSSSSWARWFFDL

BAK1167F2

轻链

CDR1-SEQ ID NO64：GGNIIGSKLVH

CDR2-SEQ ID NO65：DDGDRPS

CDR3-SEQ ID NO66：QVWDTGSDPVV

BAK1166G2

重链

CDR1-SEQ ID NO67：NTGIS

CDR2-SEQ ID NO68：WISANNGDTNYGQEFQG

CDR3-SEQ ID NO69：DSSSSWARWFFDL

BAK1166G2

轻链

CDR1-SEQ ID NO70：GGNIIGSKLVH

CDR2-SEQ ID NO71：DDGDRPS

CDR3-SEQ ID NO72：QVWDTGSDPVV

BAK1184C8

重链

CDR1-SEQ ID NO73：NYGLS

CDR2-SEQ ID NO74：WISGSNGYTSYGQEFQG

CDR3-SEQ ID NO75：DSSSSWARWFFDL

BAK1184C8

轻链

CDR1-SEQ ID NO76：GGNIIGSKLVH

CDR2-SEQ ID NO77：DDGDRPS

CDR3-SEQ ID NO78：QVWDTGSDPVV

BAK1185E1

重链

CDR1-SEQ ID NO79：NYGLS

CDR2-SEQ ID NO80：WINDATGDTQYGQEFQG

CDR3-SEQ ID NO81：DSSSSWARWFFDL

BAK1185E1

轻链

CDR1-SEQ ID NO82：GGNIIGSKLVH

CDR2-SEQ ID NO83：DDGDRPS

CDR3-SEQ ID NO84：QVWDTGSDPVV

BAK1167F4

重链

CDR1-SEQ ID NO85：DTGVS

CDR2-SEQ ID NO86：WISANNGDTNYGQEFQG

CDR3-SEQ ID NO87：DSSSSWARWFFDL

BAK1167F4

轻链

CDR1-SEQ ID NO88：GGNIIGSKLVH

CDR2-SEQ ID NO89：DDGDRPS

CDR3-SEQ ID NO90：QVWDTGSDPVV

BAK1111D10

重链

CDR1-SEQ ID NO91：NYGLS

CDR2-SEQ ID NO92：WIATPDGQTSYGQEFQG

CDR3-SEQ ID NO93：DSNSSWARWFFDL

BAK1111D10

轻链

CDR1-SEQ ID NO94：GGNIIGSKLVH

CDR2-SEQ ID NO95：DDGDRPS

CDR3-SEQ ID NO96：QVWDTGSDPVV

BAK1183H4

重链

CDR1-SEQ ID NO97：NYGLS

CDR2-SEQ ID NO98：WINYDGGNTQYGQEFQG

CDR3-SEQ ID NO99：DSSSSWARWFFDL

BAK1183H4

轻链

CDR1-SEQ ID NO100：GGNIIGSKLVH

CDR2-SEQ ID NO101：DDGDRPS

CDR3-SEQ ID NO102：QVWDTGSDPVV

BAK1185H8

重链

CDR1-SEQ ID NO103：DYGLS

CDR2-SEQ ID NO104：WRINDGYTIYGQEFQG

CDR3-SEQ ID NO105：DSSSSWARWFFDL

BAK1185H8

轻链

CDR1-SEQ ID NO106：GGNIIGSKLVH

CDR2-SEQ ID NO107：DDGDRPS

CDR3-SEQ ID NO108：QVWDTGSDPVV

BAK278D6

重链-SEQ ID NO:109

CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGTTACACCTTTACAAATTATGGTCTCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAGCGCTAATAATGGCGACACAAATTATGGACAGGAATTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCACAGATACATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGTTGAGGAGCCTGAGATCTGACGACACGGCCGTTTATTACTGTGCGAGAGACTCCAGCAGCAACTGGGCCCGCTGGTTTTTCGATCTCTGGGGCCGGGGGACACTGGTCACCGTCTCCTCA

BAK278D6

轻链-SEQ ID NO:110

TCCTATGTGCTGACTCAGCCACCCTCGGTGTCAGTGGCCCCAGGTAAGACGGCCAGGATTACCTGTGGGGGAAACAACATTGGAAGTAAACTTGTACACTGGTACCAGCAGAAGCCAGGCCAGGCCCCTGTGCTGGTCATCTATGATGATGGCGACCGGCCCTCAGGGATCCCTGAGCGATTCTCTGGCTCCAACTCTGGGAACACGGCCACCCTGACCATCAGCAGGGTCGAGGCCGGGGATGAGGCCGACTATTATTGTCAGGTGTGGGATACTGGTAGTGATCCCGTGGTATTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTAGGT

BAK502G9

重链-SEQ ID NO:111

CAGGTCCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGTTACACCTTTACAAATTATGGTCTCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAGCGCTAATAATGGCGACACAAATTATGGACAGGAATTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCACAGATACATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGTTGAGGAGCCTGAGATCTGACGACACGGCCGTTTATTACTGTGCGAGAGACTCCAGCAGCAGCTGGGCCCGCTGGTTTTTCGATCTCTGGGGCCGGGGGACACTGGTCACCGTCTCCTCA

BAK502G9

轻链-SEQ ID NO:112

TCCTATGTGCTGACTCAGCCACCCTCGGTGTCAGTGGCCCCAGGAAAGACGGCCAGGATTACCTGTGGGGGAAACATCATTGGAAGTAAACTTGTACACTGGTACCAGCAGAAGCCAGGCCAGGCCCCTGTGCTGGTCATCTATGATGATGGCGACCGGCCCTCAGGGATCCCTGAGCGATTCTCTGGCTCCAACTCTGGGAACACGGCCACCCTGACCATCAGCAGGGTCGAGGCCGGGGATGAGGCCGACTATTATTGTCAGGTGTGGGATACTGGTAGTGATCCCGTGGTATTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTAGGT

BAK1105H03

重链-SEQ ID NO:113

CAGGTCCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGTTACACCTTTACAAATTATGGTCTCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCTCCGGCTTGAACGGCGAGACATTGTATGGACAGGAATTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCACAGATACATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGTTGAGGAGCCTGAGATCTGACGACACGGCCGTTTATTACTGTGCGAGAGACTCCAGCAGCAGCTGGGCCCGCTGGTTTTTCGATCTCTGGGGCCGGGGGACACTGGTCACCGTCTCCTCA

BAK1105H03

轻链-SEQ ID NO:114

BAK1111D10

重链-SEQ ID NO:115

CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGTTACACCTTTACAAATTATGGTCTCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCGCAACCCCAGACGGCCAGACAAGCTATGGACAGGAATTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCACAGATACATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGTTGAGGAGCCTGAGATCTGACGACACGGCCGTTTATTACTGTGCGAGAGACTCCAACAGCAGCTGGGCCCGCTGGTTTTTCGATCTCTGGGGCCGGGGGACACTGGTCACCGTCTCCTCA

BAK1111D10

轻链-SEQ ID NO:116

BAK1167F2

重链-SEQ ID NO:117

CAAGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGTTACACCTTTGAGCAGACCGGCGTCTCCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAGCGCTAATAATGGCGACACAAATTATGGACAGGAATTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCACAGATACATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGTTGAGGAGCCTGAGATCTGACGACACGGCCGTTTATTACTGTGCGAGAGACTCCAGCAGCAGCTGGGCCCGCTGGTTTTTCGATCTCTGGGGCCGGGGGACACTGGTCACCGTCTCCTCA

BAK1167F2

轻链-SEQ ID NO:118

BAK1167F04

重链-SEQ ID NO:119

CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGTTACACCTTTATCGACACCGGGGTCTCCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAGCGCTAATAATGGCGACACAAATTATGGACAGGAATTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCACAGATACATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGTTGAGGAGCCTGAGATCTGACGACACGGCCGTTTATTACTGTGCGAGAGACTCCAGCAGCAGCTGGGCCCGCTGGTTTTTCGATCTCTGGGGCCGGGGGACACTGGTCACCGTCTCCTCA

BAK1167F04

轻链-SEQ ID NO:120

BAK1183H4

重链-SEQ ID NO:121

CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGTTACACCTTTACAAATTATGGTCTCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAACTACGACGGCGGCAACACACAGTATGGACAGGAATTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCACAGATACATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGTTGAGGAGCCTGAGATCTGACGACACGGCCGTTTATTACTGTGCGAGAGACTCCAGCAGCAGCTGGGCCCGCTGGTTTTTCGATCTCTGGGGCCGGGGGACACTGGTCACCGTCTCCTCA

BAK1183H4

轻链-SEQ ID NO:122

BAK1184C8

重链-SEQ ID NO:123

CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGTTACACCTTTACAAATTATGGTCTCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAGCGGGAGCAACGGCTACACATCTTATGGACAGGAATTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCACAGATACGTCCACGAGCACAGCCTACATGGAGTTGAGGAGCCTGAGATCTGACGACACGGCCGTTTATTACTGTGCGAGAGACTCCAGCAGCAGCTGGGCCCGCTGGTTTTTCGATCTCTGGGGCCGGGGGACACTGGTCACCGTCTCCTCA

BAK1184C8

轻链-SEQ ID NO:124

BAK1185E1

重链-SEQ ID NO:125

CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGTTACACCTTTACAAATTATGGTCTCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAACGACGCCACCGGCGACACACAGTATGGACAGGAATTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCACAGATACATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGTTGAGGAGCCTGAGATCTGACGACACGGCCGTTTATTACTGTGCGAGAGACTCCAGCAGCAGCTGGGCCCGCTGGTTTTTCGATCTCTGGGGCCGGGGGACACTGGTCACCGTCTCCTCA

BAK1185E1

轻链-SEQ ID NO:126

BAK1185F8

重链-SEQ ID NO:127

CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGTTACACCTTTACAGATTATGGTCTCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTAGAGTGGATGGGATGGATCCGCAACATCGACGGCTACACAATTTATGGACAGGAATTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCACAGATACATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGTTGAGGAGCCTGAGATCTGACGACACGGCCGTTTATTACTGTGCGAGAGACTCCAGCAGCAGCTGGGCCCGCTGGTTTTTCGATCTCTGGGGCCGGGGGACACTGGTCACCGTCTCCTCA

BAK1185F8

轻链-SEQ ID NO:128

BAK1187B4

重链-SEQ ID NO:129

CAGGTCCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGTTACACCTTTACAAATTATGGTCTCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCGACGACGACAGCGGCACGACAATATATGGACAGGAATTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCACAGATACATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGTTGAGGAGCCTGAGATCTGACGACACGGCCGTTTATTACTGTGCGAGAGACTCCAGCAGCAGCTGGGCCCGCTGGTTTTTCGATCTCTGGGGCCGGGGGACACTGGTCACCGTCTCCTCA

BAK1187B4

轻链-SEQ ID NO:130

BAK1166G02

重链-SEQ ID NO:131

CAAGTGCAGTTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGTTACACCTTTGCGAACACCGGGATCTCGTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAGCGCTAATAATGGCGACACAAATTATGGACAGGAATTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCACAGATACATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGTTGAGGAGCCTGAGATCTGACGACACGGCCGTTTATTACTGTGCGAGAGACTCCAGCAGCAGCTGGGCCCGCTGGTTTTTCGATCTCTGGGGTCGGGGGACACTGGTCACCGTCTCCTCA

BAK1166G02

轻链-SEQ ID NO:132

BAK165E7

重链-SEQ ID NO:133

EVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYGLSWVRQAPGQGLEWMGWISANNGETNYGQEFQGRVTMTTETPTNTAHMELRSLTSDDTAVYYCVRDSSSNWARWYFDLWGQGTLVTVSS

BAK165E7

轻链-SEQ ID NO:134

SYVLTQPPSVSVAPGQTARIPCGGNNIGSKLVHWYQQKPGQAPVLVVYDDGDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISRIDAGDEADYYCQVWDTGSDPVVFGGGTKLTVLG

BAK165E7

重链

SEQ ID NO:135NYGLS

SEQ ID NO:136WISANNGETNYGQEFQG

SEQ ID NO:137DSSSNWARWYFDL

BAK165E7

轻链

CDR1-SEQ ID NO:138GGNNIGSKLVH

CDR2-SEQ ID NO:139DDGDRPS

CDR3-SEQ ID NO:140QVWDTGSDPVV

BAK582F7

重链

CDR1-SEQ ID NO141:SYAMS

CDR2-SEQ ID NO142:AISGSGGSTYYADSVKG

CDR3-SEQ ID NO143:VGAAGEGYYGY

BAK582F7

轻链

CDR1-SEQ ID NO144:TRSSGSIASNYVE

CDR2-SEQ ID NO145:DDNQRPS

CDR3-SEQ ID NO146:QSYDSNNDV

BAK612B5

重链

CDR1-SEQ ID NO147:SYAMS

CDR2-SEQ ID NO148:AISGSGGSTYYADSVKG

CDR3-SEQ ID NO149:VGRATTDEGYYGY

BAK612B5

轻链

CDR1-SEQ ID NO150:TRSSGSIASNYVQ

CDR2-SEQ ID NO151:DDNQRPS

CDR3-SEQ ID NO152:QSYDSNNDV

BAK615E3

重链

CDR1-SEQ ID NO153:SYAMS

CDR2-SEQ ID NO154:AISGSGGSTYYADSVKG

CDR3-SEQ ID NO155:VGKATTEEGYY

BAK615E3

轻链

CDR1-SEQ ID NO156:TRSSGSIASNYVQ

CDR2-SEQ ID NO157:DDNQRPS

CDR3-SEQ ID NO158:QSYDSNNDV

BAK0278D6

重链

CDR1-SEQ ID NO159:AATTATGGTCTCAGC

CDR2- SEQ ID NO

160:TGGATCAGCGCTAATAATGGCGACACAAATTATGGACAGGAATTC

CAGGGC

CDR3- SEQ ID NO

161:GACTCCAGCAGCAACTGGGCCCGCTGGTTTTTCGATCTC

BAK278D6

轻链

CDR1- SEQ ID NO

162:GGGGGAAACAACATTGGAAGTAAACTTGTACAC

CDR2-SEQ ID NO163:GATGATGGCGACCGGCCCTCA

CDR3- SEQ ID NO

164:CAGGTGTGGGATACTGGTAGTGATCCCGTGGTA

BAK502G9

重链

CDR1-SEQ ID NO165:AATTATGGTCTCAGC

CDR2- SEQ ID NO

166:TGGATCAGCGCTAATAATGGCGACACAAATTATGGACAGGAATTC

CAGGGC

CDR3- SEQ ID NO

167:GACTCCAGCAGCAGCTGGGCCCGCTGGTTTTTCGATCTC

BAK502G9

轻链

CDR1- SEQ ID NO

168:GGGGGAAACATCATTGGAAGTAAACTTGTACAC

CDR2-SEQ ID NO169:GATGATGGCGACCGGCCCTCA

CDR3- SEQ ID NO

170:CAGGTGTGGGATACTGGTAGTGATCCCGTGGTA

CH结构域-SEQ ID NO:171

ASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK

CL结构域-SEQ ID NO:172

QPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS

Claims

1.一种IL-13拮抗剂，用于在具有受损的肺功能的受试者中改善、维持肺功能或降低其下降速率。

2.一种治疗具有受损的肺功能的受试者的方法，所述方法包括按足以改善、维持肺功能或降低其下降速率的一个量向所述受试者给予一种IL-13拮抗剂。

3.IL-13拮抗剂在制造用于治疗受损的肺功能以便在对其有需要的受试者中改善、维持肺功能或降低其下降速率的药剂中的用途。

4.一种在具有受损的肺功能的受试者中改善、维持肺功能或降低其下降速率的方法，所述方法包括向所述受试者给予一种IL-13拮抗剂。

5.一种用于治疗受损的肺功能以便在具有受损的肺功能的受试者中改善、维持肺功能或降低其下降速率的组合物，所述组合物包含一种IL-13拮抗剂和一种药学上可接受的赋形剂。

6.一种用于治疗受损的肺功能以便在对其有需要的受试者中改善、维持肺功能或降低其下降速率的给药装置，所述装置包含一种IL-13拮抗剂。

7.一种包含用于治疗受损的肺功能以便在对其有需要的受试者中改善、维持肺功能或降低其下降速率的一种组合物的给药装置，所述组合物包含一种IL-13拮抗剂和一种药学上可接受的赋形剂。

8.根据权利要求6或7所述的给药装置，选自用于皮下给药的一个预填充注射器和一个自动注射装置。

9.根据以上权利要求中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中肺功能是通过呼吸量测定法来评定的。

10.根据以上权利要求中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中肺功能是通过测量FEV1、PEF或FVC来评定的。

11.根据以上权利要求中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该拮抗剂是一种抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段。

12.根据以上权利要求中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该抗IL-13拮抗剂是一种抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段，该抗体或片段选自：

(a)川隆单抗（BAK502G9，CAT-354）抗体；

(b)川隆单抗的人IL-13结合片段，该片段包含一个抗体抗原结合位点，该位点由一个人抗体VH结构域（SEQ ID NO:15）和一个人抗体VL结构域（SEQ ID NO:16）构成，并且包含一组CDR的HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2以及LCDR3，其中该VH结构域包含HCDR1、HCDR2以及HCDR3，并且该VL结构域包含LCDR1、LCDR2以及LCDR3，其中该HCDR1具有SEQ ID NO:7的氨基酸序列，该HCDR2具有SEQ ID NO:8的氨基酸序列，该HCDR3具有SEQ ID NO:9的氨基酸序列，该LCDR1具有SEQ ID NO:10的氨基酸序列，该LCDR2具有SEQ ID NO:11的氨基酸序列，并且该LCDR3具有SEQ IDNO:12的氨基酸序列；

(c)川隆单抗的人IL-13结合片段，该片段包含一个抗体抗原结合位点，该位点由一个人抗体VH结构域和一个人抗体VL结构域构成，包含一组CDR的HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2以及LCDR3，其中该VH结构域包含HCDR1、HCDR2以及HCDR3，并且该VL结构域包含LCDR1、LCDR2以及LCDR3，其中该HCDR1具有SEQID NO:7的氨基酸序列，该HCDR2具有SEQ ID NO:8的氨基酸序列，该HCDR3具有SEQ ID NO:9的氨基酸序列，该LCDR1具有SEQ ID NO:10的氨基酸序列，该LCDR2具有SEQ ID NO:11的氨基酸序列，并且该LCDR3具有SEQ ID NO:12的氨基酸序列；

(d)一种抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段，该抗体或片段包含一个抗体抗原结合位点，该位点由一个人抗体VH结构域（SEQ IDNO:15）和/或一个人抗体VL结构域（SEQ ID NO:16）构成；

(e)一种抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段，该抗体或片段与川隆单抗竞争结合人IL-13；

(f)一种抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段，该抗体或片段能够结合从人IL-13蛋白的99位的天冬氨酸到132位的C末端天冬酰胺的人IL-13氨基酸序列内的一个表位（FSSLHVRDTKIEVAQFVKDLLLHLKKLFREGRFN）、或能够结合从人IL-13蛋白的106位的天冬氨酸到132位的C末端天冬酰胺的人IL-13序列内的一个表位（DTKIEVAQFVKDLLLHLKKLFREGRFN）；以及

(g)一种抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段，该抗体或片段与川隆单抗共有一个、两个、三个、四个、五个、或六个CDR（SEQ IDNO:7、8、9、10、11、12）。

13.根据以上权利要求中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，包含根据权利要求12所述的抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段，其中全抗体是IgG4。

14.根据以上权利要求中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，包含根据权利要求12所述的抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段，该抗体或片段包含一个或多个CDR，或一组全部6个CDR，这些CDR选自：

BAK278D6（SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6）；

BAK1183H4（SEQ ID NO:97、98、99、100、101、102）；

BAK1167F02（SEQ ID NO:64、65、66、67、68、69）；

BAKllllD10（SEQ ID NO:91、92、93、94、95、96）

BAK1166G02（SEQ ID NO:67、68、69、70、71、72）；

BAK1167F04（SEQ ID NO:85、86、87、88、89、90）；

BAK1184C8（SEQ ID NO:73、74、75、76、77、78）；

BAK1185E1（SEQ ID NO:79、80、81、82、83、84）；以及

BAK1185F8（SEQ ID NO:103、104、105、106、107、108）。

15.根据以上权利要求中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，包含根据权利要求12所述的抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段，该抗体或片段包含含有一组CDR的一个VH结构域和/或含有一组CDR的一个VL结构域，这些CDR选自BAK278D6、BAK1183H4、BAK1167F02、BAKllllD10、BAK1166G02、BAK1167F04、BAK1184C8、BAK1185E1、以及BAK1185F8的该HCDR组和/或LCDR组。

16.根据以上权利要求中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，包含根据权利要求12所述的抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段，该抗体或片段包含选自以下的一种克隆的一个VH和VL：

BAK278D6（VH SEQ ID NO:13；VL SEQ ID NO:14）；

BAK1183H4（VH SEQ ID NO:37；VL SEQ ID NO:38）；

BAK1167F02（VH SEQ ID NO:35；VL SEQ ID NO:36）；

BAKllllD10（VH SEQ ID NO:41；VL SEQ ID NO:42）；

BAK1166G02（VH SEQ ID NO:53；VL SEQ ID NO:54）；

BAK1167F04（VH SEQ ID NO:43；VL SEQ ID NO:44）；

BAK1184C8（VH SEQ ID NO:45；VL SEQ ID NO:46）；

BAK1185E1（VH SEQ ID NO:47；VL SEQ ID NO:48）；以及

BAK1185F8（VH SEQ ID NO:49；VL SEQ ID NO:50）。

17.根据以上权利要求中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，包含根据权利要求12所述的抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段，其中该VH结构域的HCDR1、HCDR2以及HCDR3处于一个种系框架内和/或该VL结构域的LCDR1、LCDR2以及LCDR3处于一个种系框架内。

18.根据权利要求12至17中任一项所述的包含抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该VH结构域的HCDR1、HCDR2以及HCDR3处于种系框架VH1DP14内。

19.根据权利要求12至19中任一项所述的包含抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该VL结构域的LCDR1、LCDR2以及LCDR3处于种系框架VLγ33H内。

20.根据权利要求12至19中任一项所述的包含抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，该抗体或片段结合其中在130位的精氨酸被谷氨酰胺替换的人IL-13变异体。

21.根据权利要求12至20中任一项所述的包含抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，该抗体或片段结合非人灵长类IL-13，如恒河猴或食蟹猴。

22.根据权利要求12至21中任一项所述的包含抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中所述抗体或其人IL-13结合片段选自下组，该组由以下各项组成：免疫球蛋白分子、单克隆抗体、嵌合抗体、CDR移植抗体、人化抗体、Fab、Fab'、F(ab')2、Fv、二硫键连接的Fv、scFv、单域抗体、双抗体、多特异性抗体、双重特异性抗体、以及双特异性抗体。

23.根据以上权利要求中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该受试者具有与哮喘、COPD、或特发性肺纤维化相关的受损的肺功能。

24.根据以上权利要求中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该受试者具有与选自以下的哮喘相关的受损的肺功能：特应性哮喘、非特应性哮喘、中度至重度哮喘、通过吸入性或口服皮质类固醇未被控制的中度至重度哮喘以及GINA得分为5、4、3、2、或1的哮喘。

25.根据以上权利要求中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该受试者具有与哮喘相关的受损的肺功能，并且正在经历用一种或多种其他治疗剂进行同步治疗，该一种或多种其他治疗剂选自吸入性皮质类固醇、长效β2拮抗剂（LABA）、茶碱、白三烯拮抗剂、口服皮质类固醇。

26.根据权利要求1至23中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该受试者具有与选自以下的COPD相关的受损的肺功能：由GOLD分类II、II以及IV定义的中度至重度COPD。

27.根据权利要求26所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该受试者具有与COPD相关的受损的肺功能，并且正在经历用一种或多种其他治疗剂进行同步治疗，该一种或多种其他治疗剂选自吸入性皮质类固醇、LABA、茶碱、口服皮质类固醇、噻托溴铵以及罗氟司特。

28.根据权利要求1至23中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该受试者具有与特发性肺纤维化相关的受损的肺功能。

29.根据权利要求1至23中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该受试者具有与特发性肺纤维化相关的受损的肺功能，并且正在经历用一种或多种其他治疗剂进行同步治疗，该一种或多种其他治疗剂选自吸入性皮质类固醇、LABA、茶碱、白三烯拮抗剂、口服皮质类固醇以及吡非尼酮。

30.根据权利要求1至23中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该受试者初次接受类固醇。

31.根据权利要求1至29中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该IL-13拮抗剂是一种抗体或其IL-13结合片段，它以范围从100至800mg的一个剂量皮下给予。

32.根据权利要求1至29中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该IL-13拮抗剂是一种抗体或其IL-13结合片段，它以范围从100至600mg的一个剂量皮下给予。

33.根据以上权利要求中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该IL-13拮抗剂是一种抗体或其IL-13结合片段，其中该剂量选自皮下给予的150、300、以及600mg。

34.根据以上权利要求中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该IL-13拮抗剂是一种抗体或其IL-13结合片段，它以范围从100至1800mg、或200至1600mg例如1500mg的一个剂量静脉内给予。

35.根据以上权利要求中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该IL-13拮抗剂是一种抗体或其IL-13结合片段，它以选自每1、2、3、4、6、8、10以及12周的一个频率给予。

36.根据以上权利要求中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该IL-13拮抗剂是一种抗体或其IL-13结合片段，它以范围从1mg/Kg至30mg/Kg的一个mg/kg剂量给予。

37.根据以上权利要求中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该IL-13拮抗剂是一种抗体或其IL-13结合片段，其中该受试者是成年人、或年轻人（12-18岁）、或年龄小于12岁的儿科受试者。

38.根据以上权利要求中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该IL-13拮抗剂是一种抗体或其IL-13结合片段，其中哮喘受试者的肺功能的改善可以在初始治疗之后达15天时进行检测。

39.根据以上权利要求中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中哮喘受试者的肺功能的改善可以在停止治疗之后至少12周进行检测。

40.根据权利要求36所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该IL-13拮抗剂是根据权利要求12至22中任一项所述的抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段，并且其中该哮喘是中度至重度哮喘（GINA4或5）。

41.根据以上权利要求中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该IL-13拮抗剂是根据权利要求12至22中任一项所述的抗人IL-13抗体，它通过皮下给予以150mg的一个剂量以2周或4周的给药间隔给予。

42.根据权利要求41所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该肺功能改善是通过FEV1来评定的，并且FEV1得分相对于在起始治疗之前所取的基线测量值的改善是在从5%至12%的范围内，例如8%。

43.根据权利要求1至40中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该IL-13拮抗剂是根据权利要求12至22中任一项所述的抗人IL-13抗体，它通过皮下给予以300mg的一个剂量以2周或4周的给药间隔下给予。

44.根据权利要求43所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中FEV₁得分相对于在起始治疗之前所取的基线测量值的平均改善是在从10%至16%的范围内，例如13.3%。

45.根据权利要求1至40中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该IL-13拮抗剂是根据权利要求12至22中任一项所述的抗人IL-13抗体，它通过皮下给予以300mg的一个剂量以2周或4周的给药间隔下给予。

46.根据权利要求43所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中FEV₁得分相对于在起始治疗之前所取的基线测量值的平均改善是在从12%至18%的范围内，例如15.2%。

47.一种用于检测受试者对用IL-13拮抗剂治疗哮喘的反应的方法，该方法包括：

(a)在治疗之前通过一种呼吸量测定法来评定肺功能；

(b)在治疗之后通过一种呼吸量测定法来评定肺功能；

(c)其中肺功能的改善指示对治疗的有益反应。

48.根据权利要求47所述的方法，其中肺功能是通过测量FEV1或PEF来评定的。

49.根据权利要求47或权利要求48所述的方法，其中在治疗之后的肺功能的评定是在起始治疗之后至少15天进行的。

50.根据权利要求47至49中任一项所述的方法，其中在治疗之后的肺功能的评定是在停止治疗之后长达和/或超过12周进行的。

51.根据以上权利要求中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该IL-13拮抗剂是tralukinumab或其一种变异体或其人IL-13结合片段，它通过皮下给予以选自150mg、300mg以及600mg的一个剂量、或通过静脉内给予以1500mg的一个剂量给予。

52.根据权利要求51所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该剂量是以2周或4周的一个给药间隔给予的。

53.一种用于治疗在受试者中的哮喘的IL-13拮抗剂，其中所述受试者在痰液中具有可检测的IL-13。

54.一种治疗在受试者中的哮喘的方法，其中所述受试者在痰液中具有可检测的IL-13，所述方法包括按足以缓解哮喘症状的一个量向所述受试者给予一种IL-13拮抗剂。

55.IL-13拮抗剂在制造用于治疗在受试者中的哮喘的药剂中的用途，其中所述受试者在痰液中具有可检测的IL-13。

56.一种用于鉴定患有哮喘的、有可能受益于IL-13拮抗剂治疗的受试者的方法，所述方法包括测试IL-13在来自所述受试者的痰液的一个样品中的存在，其中在痰液中具有可检测的IL-13的受试者有可能受益于用所述IL-13拮抗剂治疗。

57.一种用于治疗在受试者中的哮喘的组合物，其中所述受试者在痰液中具有可检测的IL-13，所述组合物包含一种IL-13拮抗剂和一种药学上可接受的赋形剂。

58.一种用于治疗在受试者中的哮喘的给药装置，其中所述受试者在痰液中具有可检测的IL-13，所述装置包含一种IL-13拮抗剂。

59.一种给药装置，包含用于治疗在受试者中的哮喘的组合物，其中所述受试者在痰液中具有可检测的IL-13，所述组合物包含一种IL-13拮抗剂和一种药学上可接受的赋形剂。

60.根据权利要求58或59所述的给药装置，选自用于皮下给药的一个预填充注射器和一个自动注射装置。

61.根据权利要求54至60中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中在所述受试者中的哮喘的缓解是通过一种或多种哮喘症状的一个复合度量来评定的，该一种或多种哮喘症状选自下组，该组由以下各项组成：夜间苏醒、苏醒时的症状、活动受限、呼吸急促、哮鸣、以及短效β₂激动剂的使用。

62.根据权利要求54至61中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中在所述受试者中的哮喘的缓解是通过一种ACQ法如ACQ-6来评定的。

63.根据权利要求54至62中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中在所述受试者中的哮喘的缓解是通过与在给予IL-13拮抗剂之前的基线ACQ得分相比较的ACQ得分的降低，例如通过与在给予IL-13拮抗剂之前的基线ACQ-6得分相比较的ACQ-6得分的降低来评定的。

64.根据权利要求54至63中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中在所述受试者中的哮喘的缓解是通过ACQ-6来评定的，其中相对于基线得分≥0·5的平均ACQ-6得分的降低被认为是在临床上有意义的哮喘缓解，并且其中≥1·5的一个得分指示未被控制的哮喘。

65.根据权利要求54至64中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中在痰液中≥1pg/mL的IL-13的存在指示所述受试者在痰液中具有可检测的IL-13。

66.根据权利要求54至65中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中IL-13在痰液中的存在是使用一种ELISA法检测的。

67.根据权利要求54至66中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该拮抗剂是一种抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段。

68.根据权利要求54至67中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该抗IL-13拮抗剂是一种抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段，该抗体或片段选自：

(a)川隆单抗（BAK502G9，CAT-354）抗体；

69.根据权利要求54至68中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，包含根据权利要求68所述的抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段，其中全抗体是IgG4。

70.根据权利要求68至69中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，包含根据权利要求68所述的抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段，该抗体或片段包含一个或多个CDR，或一组全部6个CDR，这些CDR选自：

BAK278D6（SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6）；

BAK1183H4（SEQ ID NO:97、98、99、100、101、102）；

BAK1167F02（SEQ ID NO:64、65、66、67、68、69）；

BAKllllD10（SEQ ID NO:91、92、93、94、95、96）

BAK1166G02（SEQ ID NO:67、68、69、70、71、72）；

BAK1167F04（SEQ ID NO:85、86、87、88、89、90）；

BAK1184C8（SEQ ID NO:73、74、75、76、77、78）；

BAK1185E1（SEQ ID NO:79、80、81、82、83、84）；以及

BAK1185F8（SEQ ID NO:103、104、105、106、107、108）。

71.根据权利要求68至70中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，包含根据权利要求68所述的抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段，该抗体或片段包含含有一组CDR的一个VH结构域和/或含有一组CDR的一个VL结构域，这些CDR选自BAK278D6、BAK1183H4、BAK1167F02、BAKllllD10、BAK1166G02、BAK1167F04、BAK1184C8、BAK1185E1、以及BAK1185F8的HCDR组和/或LCDR组。

72.根据权利要求68至71中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，包含根据权利要求68所述的抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段，该抗体或片段包含选自以下的一种克隆的一个VH和VL：

BAK278D6（VH SEQ ID NO:13；VL SEQ ID NO:14）；

BAK1183H4（VH SEQ ID NO:37；VL SEQ ID NO:38）；

BAK1167F02（VH SEQ ID NO:35；VL SEQ ID NO:36）；0}

BAKllllD10（VH SEQ ID NO:41；VL SEQ ID NO:42）；

BAK1166G02（VH SEQ ID NO:53；VL SEQ ID NO:54）；

BAK1167F04（VH SEQ ID NO:43；VL SEQ ID NO:44）；0}

BAK1184C8（VH SEQ ID NO:45；VL SEQ ID NO:46）；

BAK1185E1（VH SEQ ID NO:47；VL SEQ ID NO:48）；以及

BAK1185F8（VH SEQ ID NO:49；VL SEQ ID NO:50）。

73.根据权利要求68至72中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，包含根据权利要求68所述的抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段，其中该VH结构域的HCDR1、HCDR2以及HCDR3处于一个种系框架内和/或该VL结构域的LCDR1、LCDR2以及LCDR3处于一个种系框架内。

74.根据权利要求68至73中任一项所述的包含抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该VH结构域的HCDR1、HCDR2以及HCDR3处于种系框架VH1DP14内。

75.根据权利要求68至74中任一项所述的包含抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该VL结构域的LCDR1、LCDR2以及LCDR3处于种系框架VLγ33H内。

76.根据权利要求67至75中任一项所述的包含抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，该抗体或片段结合其中在130位的精氨酸被谷氨酰胺替换的人IL-13变异体。

77.根据权利要求67至76中任一项所述的包含抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，该抗体或片段结合非人灵长类IL-13，如恒河猴或食蟹猴。

78.根据权利要求67至77中任一项所述的包含抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中所述抗体或其人IL-13结合片段选自下组，该组由以下各项组成：免疫球蛋白分子、单克隆抗体、嵌合抗体、CDR移植抗体、人化抗体、Fab、Fab'、F(ab')2、Fv、二硫键连接的Fv、scFv、单域抗体、双抗体、多特异性抗体、双重特异性抗体、以及双特异性抗体。

79.根据权利要求54至78中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该受试者患有选自下组的哮喘，该组由以下各项组成：特应性哮喘、非特应性哮喘、中度至重度哮喘、通过吸入性或口服皮质类固醇未被控制的中度至重度哮喘以及GINA得分为5、4、3、2、或1的哮喘。

80.根据权利要求54至79中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该受试者患有哮喘，并且正在经历用一种或多种其他治疗剂进行同步治疗，该一种或多种其他治疗剂选自吸入性皮质类固醇、长效β2拮抗剂（LABA）、茶碱、白三烯拮抗剂、口服皮质类固醇。

81.根据权利要求54至79中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该受试者初次接受类固醇。

82.根据权利要求54至81中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该IL-13拮抗剂是一种抗体或其IL-13结合片段，它以范围从100至800mg的一个剂量皮下给予。

83.根据权利要求54至82中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该IL-13拮抗剂是一种抗体或其IL-13结合片段，它以范围从100至600mg的一个剂量皮下给予。

84.根据权利要求54至83中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该IL-13拮抗剂是一种抗体或其IL-13结合片段，并且其中该剂量选自皮下给予的150、300、以及600mg。

85.根据权利要求54至84中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该IL-13拮抗剂是一种抗体或其IL-13结合片段，它以范围从100至1800mg、或200至1600mg例如1500mg的一个剂量静脉内给予。

86.根据权利要求54至85中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该IL-13拮抗剂是一种抗体或其IL-13结合片段，它以选自每1、2、3、4、6、8、10以及12周的一个频率给予。

87.根据权利要求54至86中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该IL-13拮抗剂是一种抗体或其IL-13结合片段，它以范围从1mg/Kg至30mg/Kg的一个mg/kg剂量给予。

88.根据权利要求54至87中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该IL-13拮抗剂是一种抗体或其IL-13结合片段，其中该受试者是成年人、或年轻人（12-18岁）、或年龄小于12岁的儿科受试者。

89.根据权利要求54至88中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该IL-13拮抗剂是一种抗体或其IL-13结合片段，其中在所述受试者中的哮喘的缓解可以在初始治疗之后达15天时检测。

90.根据权利要求54至89中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中在所述受试者中的哮喘的缓解可以在停止治疗之后至少12周检测。

91.根据权利要求54至90中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该IL-13拮抗剂是根据权利要求11至22中任一项所述的抗人IL-13抗体或其人IL-13结合片段，并且其中该哮喘是中度至重度哮喘（GINA4或5）。

92.根据权利要求54至91中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该IL-13拮抗剂是根据权利要求67至78中任一项所述的抗人IL-13抗体，它通过皮下给予以150mg的一个剂量以2周或4周的一个给药间隔给予。

93.根据权利要求53至65中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该IL-13拮抗剂是根据权利要求67至78中任一项所述的抗人IL-13抗体，它通过皮下给予以300mg的一个剂量以2周或4周的一个给药间隔给予。

94.根据权利要求53至66中任一项所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该IL-13拮抗剂是川隆单抗或其一种变异体或其人IL-13结合片段，它通过皮下给予以选自150mg、300mg以及600mg的一个剂量、或通过静脉内给予以1500mg的一个剂量给予。

95.根据权利要求94所述的IL-13拮抗剂、方法、用途、组合物或装置，其中该剂量是以2周或4周的一个给药间隔给予的。