ES2645368T3 - Terapias para mejorar la función pulmonar - Google Patents

Abstract

Un antagonista de IL-13 para su uso en la mejora de la función pulmonar en un sujeto con función pulmonar alterada, en el que el antagonista de IL-13 es un anticuerpo anti-IL-13 humana o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, seleccionado del grupo que consiste en: (a) un anticuerpo anti-IL-13 humana o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, que comprende un dominio VH que comprende la HCDR1, HCDR2 y HCDR3 y un dominio VL que comprende la LCDR1, LCDR2 y LCDR3, en el que la HCDR1 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 7, la HCDR2 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 8, la HCDR3 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 9, la LCDR1 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 10, la LCDR2 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 11 y la LCDR3 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 12; (b) un anticuerpo anti-IL-13 humana, o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, que comprende un dominio VH que tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 15 y un dominio VL que tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 16; y (c) un anticuerpo anti-IL-13 humana o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo de acuerdo con (a) o (b), que comprende adicionalmente un dominio constante de IgG4 humana; en el que la mejora en la función pulmonar es una mejora en la puntuación del volumen espiratorio forzado en un segundo (FEV1) de entre 5 % y 18 % con respecto a una medición FEV1 de referencia tomada antes de la administración del anticuerpo anti-IL-13 humana o de un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, y en el que el anticuerpo anti-IL-13 o el fragmento de unión a IL-13 del mismo, se administra por vía subcutánea a una dosis entre 100 y 600 mg.

Description

DESCRIPCIÓN

Terapias para mejorar la función pulmonar

Campo de la invención

La invención se refiere al uso de un antagonista de IL-13, en particular un anticuerpo de IL-13, para mejorar, mantener o reducir la tasa de disminución de la función pulmonar, tal como se evalúa mediante un método 5 espirométrico. La invención además se refiere al uso de un antagonista de IL-13 para el tratamiento del asma en un sujeto con IL-13 detectable en esputo. La invención se refiere además a un método para identificación de un sujeto con asma con probabilidad de beneficiarse del tratamiento con un antagonista de IL-13, teniendo dicho sujeto IL-13 detectable en esputo.

Antecedentes de la invención 10

Los trastornos respiratorios, tales como el asma, la enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC) y la fibrosis pulmonar idiopática, están asociados con una disminución de la función pulmonar. Esta alteración de la función pulmonar puede medirse mediante espirometría. La medición de la función pulmonar proporciona una evaluación de la gravedad de la limitación de las vías respiratorias, su reversibilidad y su variabilidad en enfermedades tales como asma, EPOC, FPI y bronquiectasia. Son importantes mediciones de la función pulmonar en estas enfermedades el 15 VEF1 (volumen espiratorio forzado en el primer segundo), es decir, el volumen de aire que puede ser exhalado en un segundo después de respirar hondo, y CVF (capacidad vital forzada).

El asma es un trastorno crónico de las vías respiratorias que se caracteriza por una obstrucción variable y reversible de las vías respiratorias, inflamación de las vías respiratorias, producción excesiva de moco e hiperreactividad de las vías respiratorias (HVR) que produce episodios de sibilancia, falta de aire, pecho apretado y tos. Puede ocurrir una 20 remodelación y formación de cicatrices patológica y progresiva de las vías respiratorias en el asma persistente que resultan en una obstrucción parcialmente reversible o irreversible de las vías respiratorias.

La hiperreactividad de las vías respiratorias (HVR) es la constricción exagerada de las vías respiratorias ante estímulos no específicos tales como aire frío. Se cree que tanto la HVR como la superproducción de moco son responsables de la obstrucción variable de las vías respiratorias que conduce a la dificultad para respirar 25 característica de los ataques de asma (exacerbaciones) y que es responsable de la mortalidad asociada con esta disminución (aproximadamente 2000 muertes/año en el Reino Unido).

Los lineamientos actuales de la Sociedad Torácica Británica (BTS) y la Iniciativa Global para el Asma (GINA) sugieren un abordaje paso a paso del tratamiento del asma. La mayoría de los pacientes con asma tienen una enfermedad leve a moderada que es controlada actualmente por terapias de “estándar de atención”: corticosteroides 30 inhalados combinados con agonistas del adrenoceptor β2 o inhibidores de leucotrieno. Sin embargo, los pacientes pueden no cumplir con el régimen de tratamiento, lo que reduce la efectividad del tratamiento. En una enfermedad más grave, puede ser necesario un tratamiento a largo plazo con corticosteroides orales, pero está asociado con efectos secundarios tales como la osteoporosis, la diabetes y la candidiasis oral.

A pesar de que las terapias convencionales alivian la enfermedad leve a moderada en muchos pacientes, en un 35 subconjunto de pacientes asmáticos (aproximadamente 25% de la población moderada a grave), el asma continúa siendo poco controlado en términos de los síntomas en desarrollo, las exacerbaciones frecuentes, la obstrucción persistente y variable de las vías respiratorias y la necesidad frecuente de agonistas de β2, a pesar de un tratamiento adecuado. Esto resulta en un impacto considerable en la calidad de vida, en un uso desproporcionado de los recursos de atención médica y en efectos adversos del uso regular de esteroides sistémicos. La hospitalización de 40 estos pacientes, que representan aproximadamente 6% de la población con asma del Reino Unido, como resultado de exacerbaciones severas, representa la mayor parte del alto gasto económico del asma para las autoridades sanitarias. De esta forma, existe una clara necesidad de nuevos tratamientos para el asma, particularmente en sujetos con enfermedad asmática más grave, quienes a menudo obtienen un beneficio limitado de las dosis más altas de corticoides inhalados u orales recomendados por los lineamientos para el asma. Asimismo, existe una 45 necesidad de tratamientos nuevos para niños con asma, dado que el tratamiento con altas dosis de corticosteroides está asociado con tasas más bajas de crecimiento.

Se cree que la patología del asma es causada por una inflamación constante mediada por linfocitos Th2 que resulta de respuestas inapropiadas del sistema inmune a antígenos inofensivos. La interleuquina-13 (IL-13) ha surgido como una citocina Th2 pleiotrópica clave que contribuye al desarrollo y mantenimiento de todos los aspectos del fenotipo 50 del asma. La interleuquina humana (IL) -13 es una proteína de 114 aminoácidos con una masa molecular sin modificar de aproximadamente 12 kDa. La IL-13 está más relacionada con la IL-4, con la que comparte 30% de identidad de secuencia a nivel de los aminoácidos. La IL-13 comparte componentes de receptores y muchas propiedades biológicas con la interleuquina 4 (IL-4). Los receptores de IL-13 (heterodímeros de IL-13Rα1 e IL-4Rα) se expresan en los subconjuntos de leucocitos (eosinófilos, neutrófilos, células B, células NKT) y células 55 estructurales (células epiteliales, fibroblastos, músculo liso) consideradas relevantes en el asma. La acción de la IL-13 en estas células es estimular los procesos que promueven la hiperreactividad de las vías respiratorias, la inflamación y los cambios subyacentes en las vías respiratorias, incluida fibrosis e hipersecreción de moco, que son características fundamentales del asma (Hershey, 2003).

Los niveles de ARNm de IL-13 o de proteínas son elevados en biopsias bronquiales, esputo y fluido BAL de asmáticos en comparación con sujetos testigo (Humbert et al., 1997; Kotsimbos et al., 1996; Komai-Koma et al., 2001; Naseer et al., 1997) y más elevados en muestras BAL de asmáticos desafiados con alérgenos (Huang et al., 5 1995; Kroegel et al., 1996). La expresión de la proteína IL-13 en el pulmón también se correlaciona con la gravedad y el control del asma. Los asmáticos leves sin tratamiento previo con esteroides tienen IL-13 regulada hacia arriba en el esputo en comparación con los individuos “normales”, al igual que los asmáticos graves que tienen un bajo control a pesar del estándar de cuidado que incluye corticosteroides orales; no se ha informado que los asmáticos moderados (bien controlados mediante corticosteroides inhalados) tengan una expresión de IL-13 regulada hacia 10 arriba (Saha et al., 2008).

Los polimorfismos genéticos en la vía de IL-13 también están asociados con la atopía y el asma; se ha asociado la Q130R de IL-13 con el asma, la atopía y un aumento de IgE en suero (Heinzmann et al., 2000; Liu et al., 2000; Kauppi et al., 2001) que activa el receptor de IL-13 de señalización (Rα1) y las funciones corriente abajo de forma más eficiente, uniéndose al mismo tiempo al receptor señuelo (Ra2) de manera menos eficiente que la IL-13 tipo 15 salvaje (Vladich et al., 2005). Se han observado polimorfismos similares asociados con el riesgo de atopía y asma en el promotor de IL-13 (Howard et al., 2001 y van der Pouw Kraan et al., 1999), IL4Rα (Howard et al., 2002) y en la molécula de señalización clave corriente abajo del receptor de IL-13 - STAT6 (Tamura et al., 2003). La variante de IL-13 (Q130R) y los anticuerpos contra esta variante se describen en el documento WO 01/62933.

Los datos de modelos animales que imitan los aspectos del asma humano respaldan la hipótesis de que la IL 3 es 20 un mediador clave en el desarrollo y mantenimiento del fenotipo del asma. La administración de IL-13 recombinante a las vías respiratorias a ratones sin tratamiento con alérgenos resulta en HVR, inflamación de las vías respiratorias y producción de moco (Wills-Karp et al., 1998; Grunig et al., 1998; Venkayya et al., 2002). Se observan patologías similares en ratones transgénicos en los cuales la IL-13 se sobreexpresa de forma selectiva en el pulmón, aunque una exposición a largo plazo a la IL-13 también resulta en fibrosis (Zhu et al., 1999). El mismo fenotipo 'asmático' 25 ocurre luego del desafío con alérgenos en ratones sensibilizados y también se asocia con IL-13. Se ha observado que IL-13Rα2 soluble, un potente neutralizador de la IL-13, inhibe la HVR, la hipersecreción de moco y la inflamación pulmonar (Wills-Karp et al., 1998; Grunig et al., 1998). Estudios de desafío con antígenos segmentales de NHP también han demostrado un efecto antiinflamatorio para un anticuerpo neutralizador de IL-13 (Bree et al., 2007).

Debido a la variedad de células implicadas en el asma sobre las cuales se sabe que la IL-13 actúa, y las funciones 30 patogénicas atribuidas a esta interleuquina, puede esperarse un rol importante para la IL-13 en el asma. Junto con las pruebas de una relación entre la expresión de IL-13 y la gravedad de la enfermedad en pacientes (Saha et al., 2008), la neutralización de la IL-13 constituye un abordaje confiable del tratamiento del asma.

La enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC) incluye poblaciones de pacientes con grados variados de bronquitis, enfermedad de vías respiratorias pequeñas y enfisema, y se caracteriza por una disminución de la 35 función pulmonar irreversible progresiva que no responde bien a las terapias actuales para el asma. La incidencia de la EPOC ha aumentado notoriamente en los últimos años hasta convertirse en la cuarta causa principal de muerte en el mundo (Organización Mundial de la Salud). Por lo tanto, la EPOC constituye una gran necesidad médica que no ha sido satisfecha. Las causas subyacentes de la EPOC siguen sin comprenderse. Se ha propuesto que hay una susceptibilidad común a la EPOC y el asma y, por lo tanto, que mecanismos similares pueden contribuir a la 40 patogénesis de ambos trastornos.

Se ha demostrado que la sobreexpresión de IL-13 en el pulmón de ratón provoca enfisema, producción elevada de moco e inflamación, lo que refleja aspectos de la EPOC humana. Asimismo, se ha demostrado que la HVR, una respuesta dependiente de IL-13 en modelos de murinos de inflamación alérgica, es predictiva de la disminución de la función pulmonar en fumadores. También se ha establecido un vínculo entre un polimorfismo del promotor de IL-13 y 45 la susceptibilidad a desarrollar EPOC.

Los signos son, por lo tanto, que la IL-13 juega un papel importante en la patogénesis de la EPOC, particularmente en pacientes con características similares al asma, incluida HVR y eosinofilia. Se ha demostrado que los niveles de ARNm de IL-13 son más altos en muestras de tejidos de autopsias de sujetos con antecedentes de EPOC cuando se comparan con las muestras de pulmón de sujetos sin enfermedad pulmonar reportada. En otro estudio, se 50 demostraron niveles elevados de IL-13 mediante inmunohistoquímica en secciones de pulmón periféricas de pacientes con EPOC.

Se ha asociado a la IL-13 con otras afecciones fibróticas. Se han medido niveles más altos de IL-13 en suero de pacientes con esclerosis sistémica y en muestras BAL de pacientes afectados con otras formas de fibrosis pulmonar. Por lo tanto, se ha informado que la sobreexpresión de IL-13 en el pulmón de ratón resulta en una fibrosis 55 pronunciada. El aporte de la IL-13 a la fibrosis en tejidos que no son de pulmón se ha estudiado de forma exhaustiva en un modelo de ratón de fibrosis de hígado inducida por parásitos.

El tralokinumab (un anticuerpo monoclonal de IgG4) es un anticuerpo neutralizador de IL-13 específico y muy potente, con una afinidad de 165pM para IL-13 humana, que neutraliza la IL-13 humana y de cynomolgus con una potencia casi equivalente, pero no neutraliza la IL-13 de ratón ni la citoquina más homóloga a IL-13, la IL-4. CAT-354 también neutraliza la variante de IL-13, Q130R, que se ha asociado con la atopía y el asma, así como la IL-13 humana endógena (glicolisada de mamífero). El tralokinumab (BAK502G9) se describe en la Publicación de la 5 Solicitud de Patente Internacional No. WO 2005/007699.

Blease (2008) describe el bloqueo de IL-13 para el tratamiento de la inflamación pulmonar y remodelación de las vías respiratorias.

Los documentos WO 2006/055638, WO 2007/080174 y GB 2403952 describen diferentes anticuerpos anti-IL-13 para el tratamiento de diversos trastornos pulmonares. 10

Singh et al. (2010) describen un estudio en fase 1 del anticuerpo anti-IL-13, CAT-354, en sujetos con asma.

Un estudio multicéntrico en fase 2a, aleatorizado, con ocultación doble, controlado con placebo, con grupos en paralelo, número NCT00873860 (2010.08.24, p. 1-5), pretendía evaluar la eficacia y la seguridad de CAT-354 sobre el control del asma en adultos (disponible en el sitio web clinical trials.gov).

Es un objeto de la invención proporcionar antagonistas de IL-13, en particular anticuerpos anti-IL-13 tales como 15 tralokinumab, o fragmentos neturalizadores de IL-13 de los mismos, para la mejora, el mantenimiento o la reducción de la disminución de la función pulmonar, en particular tal como se evalúa mediante VEF1, o CVF, en sujetos con función pulmonar alterada, que puede ser debido a asma, EPOC o fibrosis pulmonar. La invención también tiene por objeto proporcionar un antagonista de IL-13 para el tratamiento del asma en un sujeto, en donde dicho sujeto tiene IL-13 de las vías respiratorias regulada hacia arriba, por ejemplo, en base a IL-13 detectable en esputo. La invención 20 también tiene por objeto proporcionar un método para identificar un sujeto con asma con probabilidad de beneficiarse del tratamiento con un antagonista de IL-13, en donde dicho sujeto tiene IL-13 de las vías respiratorias regulada hacia arriba, por ejemplo, en base a IL-13 detectable en esputo.

Declaración de invención

La invención proporciona un antagonista de IL-13 para su uso en la mejora de la función pulmonar en un sujeto con 25 función pulmonar alterada.

Un objeto de la invención es un antagonista de IL-13 para su uso en la mejora de la función pulmonar en un sujeto con función pulmonar alterada, en el que el antagonista de IL-13 es un anticuerpo anti-IL-13 humana o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, seleccionado del grupo que consiste en:

(a) un anticuerpo anti-IL-13 humana o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, que comprende un dominio 30 VH que comprende la HCDR1, HCDR2 y HCDR3 y un dominio VL que comprende la LCDR1, LCDR2 y LCDR3, en el que la HCDR1 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 7, la HCDR2 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 8, la HCDR3 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 9, la LCDR1 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 10, la LCDR2 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 11 y la LCDR3 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 12; 35

(b) un anticuerpo anti-IL-13 humana, o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, que comprende un dominio VH que tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 15 y un dominio VL que tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 16; y

(c) un anticuerpo anti-IL-13 humana o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, de acuerdo con (a) o (b), que adicionalmente comprende un dominio constante de IgG4 humana; 40

en el que la mejora de la función pulmonar es una mejora en la puntuación del volumen espiratorio forzado en un segundo (FEV1) de entre 5 % y 18 % con respecto a una medición de referencia de FEV1 tomada antes de la administración del anticuerpo anti-IL-13 humana o de un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, y en el que el anticuerpo anti-IL-13 o fragmento de unión a IL-13 del mismo, se administra por vía subcutánea a una dosis de entre 100 y 600 mg. 45

También se proporciona el antagonista de IL-13 para su uso de acuerdo con la invención, en el que dicho antagonista se selecciona del grupo que consiste en: una molécula de inmunoglobulina, un anticuerpo monoclonal, un anticuerpo quimérico, un anticuerpo con injerto de CDR, un anticuerpo humanizado, un Fab , un Fab’, un F(ab’)2, un Fv, un Fv enlazado a disulfuro, un scFv, un anticuerpo de dominio único, un diacuerpo, un anticuerpo multiespecífico, un anticuerpo específico dual y un anticuerpo biespecífico. 50

También se proporciona el antagonista de IL-13 para su uso de acuerdo con la invención, en el que el sujeto tiene función pulmonar alterada asociada con asma, EPOC o fibrosis pulmonar idiopática.

En el presente documento se proporciona el antagonista de IL-13 para uso de acuerdo con la invención, en el que el sujeto tiene función pulmonar alterada asociada con asma seleccionada de asma atópica, asma no atópica, asma moderada a grave, asma moderada a grave no controlada por corticoesteroides inhalados u orales y asma con una puntuación GINA de 5, 4, 3, 2 o 1.

La invención también proporciona el antagonista de IL-13 para su uso de acuerdo con la invención, en el que el sujeto tiene función pulmonar alterada asociada con asma y se está sometiendo a terapia concomitante con uno o más agentes terapéuticos adicionales seleccionados de un corticoesteroide inhalado, un antagonista beta2 de larga 5 acción (LABA), teofilina, un antagonista de leucotrienos y un corticoesteroide oral.

También se proporciona el antagonista de IL-13 para uso de acuerdo con la invención, en el que el anticuerpo anti-IL-13 o fragmento de unión a IL-13 del mismo, se administra por vía subcutánea a una dosis seleccionada del grupo que consiste en 150, 300 y 600 mg.

También se proporciona el antagonista de IL-13 para su uso de acuerdo con la invención, en el que el anticuerpo 10 anti-IL-13 o fragmento de unión a IL-13 del mismo, se administra a una frecuencia seleccionada de cada 1, 2, 3, 4, 6, 8, 10 y 12 semanas.

En el presente documento se proporciona el antagonista de IL-13 para su uso de acuerdo con la invención, en el que una mejora en la función pulmonar en sujetos con asma puede detectarse 15 días después de iniciarse el tratamiento. 15

Una realización de la invención proporciona el antagonista de IL-13 para su uso de acuerdo con la invención, en el que una mejora en la función pulmonar en sujetos con asma puede detectarse al menos 12 semanas después de finalizar el tratamiento.

En el presente documento también se proporciona el antagonista de IL-13 para su uso de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones precedentes de la invención, en el que el anticuerpo anti-IL-13 o fragmento de unión 20 a IL-13 del mismo, se administra por administración subcutánea a una dosis de 300 mg y a intervalos de dosificación de 2 o 4 semanas.

La invención también proporciona el antagonista de IL-13 para su uso de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones precedentes de la invención, en el que la mejora en la función pulmonar es una mejora en la puntuación FEV1 de entre 8 % y 16 % con respecto a una medición FEV1 de referencia tomada antes de la 25 administración por vía subcutánea del anticuerpo anti-IL-13 humana o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, a intervalos de dos o cuatro semanas.

En el presente documento también se proporciona el antagonista de IL-13 para su uso de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones precedentes de la invención, en el que la mejora en la función pulmonar es una mejora en la puntuación FEV1 de entre 12 % y 18 % con respecto a una medición FEV1 de referencia tomada antes 30 de la administración del anticuerpo anti-IL-13 humana o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo.

En el presente documento se proporciona el antagonista de IL-13 para su uso de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones precedentes de la invención, en el que la mejora en la función pulmonar es una mejora en la puntuación FEV1 de 8 % con respecto a una medición FEV1 de referencia tomada antes de la administración por vía subcutánea de 150 mg del anticuerpo anti-IL-13 humana o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, a 35 intervalos de dos semanas; o

en el que la mejora en la función pulmonar es una mejora en la puntuación FEV1 de 13,3 % con respecto a una medición FEV1 de referencia tomada antes de la administración por vía subcutánea de 300 mg del anticuerpo anti-IL-13 humana o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, a intervalos de dos semanas ; o

en el que la mejora en la función pulmonar es una mejora en la puntuación FEV1 de 15,2 % con respecto a una 40 medición FEV1 de referencia tomada antes de la administración por vía subcutánea de 600 mg del anticuerpo anti-IL-13 humana o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, a intervalos de dos semanas.

En el presente documento se proporciona el antagonista de IL-13 para su uso de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones precedentes de la invención, en el que el antagonista de IL-13 es un anticuerpo anti-IL-13 humana o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, que comprende un dominio VH que comprende la HCDR1, HCDR2 y 45 HCDR3 y un dominio VL que comprende la LCDR1, LCDR2 y LCDR3, en el que la HCDR1 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 7, la HCDR2 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 8, la HCDR3 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 9, la LCDR1 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 10, la LCDR2 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 11, y la LCDR3 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 12. 50

En el presente documento también se proporciona el antagonista de IL-13 para su uso de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones precedentes de la invención, en el que el antagonista de IL-13 es un anticuerpo anti-IL-13 humana o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, que comprende un dominio VH que tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 15 y un dominio VL que tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 16. 55

En el presente documento también se proporciona el antagonista de IL-13 para su uso de acuerdo con una cualquiera de las realizaciones precedentes de la invención, en el que la mejora en la función pulmonar es una mejora en la puntuación FEV1 de entre 5 % y 12 % con respecto a una medición FEV1 de referencia tomada antes de la administración del anticuerpo anti-IL-13 humana o de un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo.

En la presente se divulga un método para tratar a un sujeto con función pulmonar alterada, comprendiendo dicho 5 método administrar a dicho sujeto un antagonista de IL-13 en una cantidad suficiente para mejorar, mantener o reducir la tasa de disminución de la función pulmonar.

En la presente se divulga el uso de un antagonista de IL-13 en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de la función pulmonar alterada para mejorar, mantener o reducir la tasa de disminución de la función pulmonar en un sujeto que lo necesita. 10

En la presente se divulga un método para mejorar, mantener o reducir la tasa de disminución de la función pulmonar en un sujeto con función pulmonar alterada, comprendiendo dicho método administrar a dicho sujeto un antagonista de IL-13.

Adicionalmente, en la presente se divulga una composición para el tratamiento de la función pulmonar alterada para mejorar, mantener o reducir la tasa de disminución de la función pulmonar en un sujeto con función pulmonar 15 alterada, comprendiendo dicha composición un antagonista de IL-13 y un excipiente farmacéuticamente aceptable.

La invención proporciona un antagonista de IL-13 para el uso en el tratamiento del asma en un sujeto, en donde dicho sujeto tiene IL-13 de las vías respiratorias regulada hacia arriba, por ejemplo, en base a IL-13 detectable en esputo.

En la presente se divulga un método para tratar el asma en un sujeto, en donde dicho sujeto tiene IL-13 detectable 20 en esputo, comprendiendo dicho método administrar a dicho sujeto un antagonista de IL-13 en una cantidad suficiente para mejorar los síntomas del asma.

Se divulga el uso de un antagonista de IL-13 en la fabricación de un medicamento para el tratamiento del asma en un sujeto, en donde dicho sujeto tiene IL-13 detectable en esputo.

En la presente se divulga también un método para la identificación de un sujeto con asma con probabilidad de 25 beneficiarse del tratamiento con un antagonista de IL-13, comprendiendo dicho método evaluar la presencia de IL-13 en una muestra de esputo de dicho sujeto, en donde un sujeto con IL-13 detectable en esputo tiene probabilidad de beneficiarse del tratamiento con un antagonista de IL-13.

Una respuesta beneficiosa al tratamiento del asma puede evaluarse mediante consideración de los síntomas del asma, por ejemplo, mediante un método de ACQ, tal como ACQ-6, y/o mediante evaluaciones espirométricas, tal 30 como se describe en la presente. Los sujetos que se benefician del tratamiento con un antagonista de IL-13 experimentan una mejora de sus síntomas de asma. Tal como se describe en la presente, los sujetos con asma que tenían IL-13 detectable en su esputo experimentaron una mejora de los síntomas del asma después del tratamiento con un antagonista de IL-13. Los métodos de tratamiento y usos descritos en la presente pueden comprender una etapa, que se realiza antes del tratamiento de un sujeto con un antagonista de IL-13, en la cual se evalúa una 35 muestra de esputo del sujeto en búsqueda de la presencia de IL-13. Los inventores han encontrado que la presencia de IL-13 en el esputo define una subconjunto de asmáticos en los cuales la terapia con antagonistas de IL-13 es particularmente ventajosa, tal como se describe en la presente.

En la presente se divulga una composición para el tratamiento del asma en un sujeto, en donde dicho sujeto tiene IL-13 detectable en esputo, comprendiendo dicha composición un antagonista de IL-13 y un excipiente 40 farmacéuticamente aceptable.

De esta forma, las composiciones farmacéuticas divulgadas en la presente, y para su uso de acuerdo con la presente invención, pueden comprender, además de ingrediente activo, un excipiente, un portador, una solución amortiguadora, un estabilizador u otros materiales farmacéuticamente aceptables bien conocidos por los expertos en la técnica. Dichos materiales deberían ser no tóxicos y no deberían interferir en la eficacia del ingrediente activo. La 45 naturaleza precisa del portador u otro material dependería de la vía de administración, que puede ser oral o por inyección, por ejemplo, intravenosa. Para inyección, el ingrediente activo estará en forma de una solución acuosa parenteralmente aceptable que está libre de pirógenos y tiene pH, isotonicidad y estabilidad adecuados. Pueden incluirse conservantes, estabilizadores, soluciones amortiguadoras, antioxidantes y/u otros aditivos, según sea necesario. 50

Dichas composiciones pueden formularse en formas líquidas o sólidas. Pueden proporcionarse formas sólidas para reconstitución antes de la administración por inyección intravenosa o subcutánea, o por inhalación. La composición empleada dependerá de las propiedades fisicoquímicas de la molécula y de la vía de administración. Las formulaciones pueden incluir excipientes, o combinaciones de excipientes, por ejemplo: azúcares, aminoácidos y tensioactivos. Las formulaciones líquidas pueden incluir una amplia gama de concentraciones de anticuerpos y pH. 55 Las formulaciones sólidas pueden producirse, por ejemplo, mediante liofilización, secado por aspersión o secado mediante tecnología de fluidos supercríticos. Las formulaciones dependerán de la vía de administración pretendida: por ejemplo, las formulaciones para administración pulmonar pueden consistir en partículas con propiedades físicas que aseguran la penetración en el pulmón profundo tras la inhalación.

En una realización particularmente preferida, se formula tralokinumab en 150 mg/ml en 50 mM de acetato de sodio, 85 mM de cloruro de sodio, 0.01% (p/v) de polisorbato 80 derivado de planta en un pH de 5.5. 5

Una composición para el uso de acuerdo con la invención puede administrarse sola o en combinación con otros tratamientos, simultánea o secuencialmente, dependiendo de la afección que se debe tratar.

El tratamiento puede realizarse por inyección, por ejemplo, por vía subcutánea o intravenosa, o por inhalación. Se prevé que el tratamiento no estará limitado a su uso en la clínica. Por lo tanto, se prevé una inyección subcutánea usando un dispositivo de administración. 10

Por lo tanto, en la presente se divulga también proporciona un dispositivo de administración para el tratamiento de la función pulmonar alterada para mejorar, mantener o reducir la tasa de disminución de la función pulmonar en un sujeto que lo necesita, comprendiendo dicho dispositivo un antagonista de IL-13. Un dispositivo de administración puede comprender una composición para el tratamiento de la función pulmonar alterada para mejorar, mantener o reducir la tasa de disminución de la función pulmonar en un sujeto que lo necesita, comprendiendo dicha 15 composición un antagonista de IL-13 y un excipiente farmacéuticamente aceptable.

En la presente se divulga también proporciona un dispositivo de administración para el tratamiento del asma en un sujeto, en donde dicho sujeto tiene IL-13 detectable en esputo, comprendiendo dicho dispositivo un antagonista de IL-13. Un dispositivo de administración puede comprender una composición para el tratamiento del asma en un sujeto, en donde dicho sujeto tiene IL-13 detectable en el esputo, comprendiendo dicha composición un antagonista 20 de IL-13 y un excipiente farmacéuticamente aceptable.

Un nivel detectable de IL-13 en esputo puede ser la presencia de ≥1pg/mL de IL-13. La presencia de IL-13 en esputo puede detectarse utilizando un método ELISA. El límite de cuantificación usando métodos ELISA es aproximadamente 1pg/mL. Por lo tanto, puede considerarse que los sujetos con una concentración de IL-13 en esputo que sea <1 pg/ no tienen IL-13 detectable en esputo. Los métodos adecuados para la detección de IL-13 en 25 esputo incluyen: western blot, técnicas proteómicas tales como espectrometría de masas, MALDI-TOF y 2D-DIGE; técnicas de identificación de proteínas basadas en anticuerpos o receptores, que incluyen ELISA en el formato de ensayos Luminex® (Luminex Corp., Austin, TX, Estados Unidos) en base a la tecnología xMAP (perlas de perfilado de multianalitos) que permite la detección y cuantificación múltiples ARN o proteínas objetivo simultáneamente; el sistema xMAP combina un citómetro de flujo, microesferas con tinte fluorescente (perlas), láseres y procesamiento 30 de señales digitales para permitir de forma eficiente la multiplexación de hasta 100 ensayos únicos dentro de una única muestra y en el formato de ensayos de citoquina MSD® (Meso Scale Discovery, Gaithersburg, MD, Estados Unidos) que emplean detección electroquimioluminiscente; ensayos basados en células impulsados por esputo para identificar IL-13 en esputo, tal como proliferación de TF1 bloqueada con un reactivo de neutralización de IL-13 o fosforilación de STAT-6 y medición de mediadores corriente abajo, por ejemplo, eotaxina, TARC, MCP4. La cantidad 35 correspondiente a un nivel detectable de IL-13 en esputo puede variar debido al límite conocido de cuantificación de un método conocido en la técnica, tal como cualquiera de los que se describieron anteriormente, o puede refinarse adicionalmente en base a una mejora de los límites de cuantificación de métodos conocidos en la técnica, tales como los que se describieron anteriormente, u otros métodos adecuados para detectar los niveles de una molécula tal como IL-13. 40

Un dispositivo de administración de acuerdo con la invención puede seleccionarse de una jeringa precargada y un dispositivo autoinyector para administración subcutánea, que puede diseñarse para permitir una administración en el hogar.

En enfermedades respiratorias tales como asma, EPOC y FPI, se utilizan pruebas de función pulmonar (PFP) para evaluar la función de los pulmones y cuantificar la cantidad de daño de los pulmones; también pueden utilizarse PFP 45 para evaluar el avance de la enfermedad pulmonar y la efectividad del tratamiento. Las pruebas de espirometría son las que se utilizan más comúnmente para todas las pruebas de la función pulmonar. Es un procedimiento no invasivo conveniente, realizado generalmente con un espirómetro portátil. Normalmente es la primera elección del facultativo cuando intenta diagnosticar un problema respiratorio. La espirometría requiere que el paciente, después de que haya expulsado todo al aire, inhale profundamente; luego debe realizar una exhalación rápida, para que todo el aire sea 50 expulsado de los pulmones. Los resultados de las pruebas de espirometría varían, pero se basan en resultados previstos de una población saludable estandarizada.

La terminología común en las pruebas de espirometría es la siguiente:

CV-Capacidad vital: es la cantidad de aire que puede ser exhalada por la fuerza de los pulmones después de una inhalación completa. 55

CVF-Capacidad vital forzada: es la cantidad de aire que puede ser exhalada por la fuerza de los pulmones después de tomar la mayor cantidad de aire posible.

VEF1-Volumen espiratorio forzado en un segundo: es la cantidad de aire que puede ser exhalado por la fuerza de los pulmones en el primer segundo de una exhalación forzada.

VEF1/CVF: es la relación entre VEF1 y CVF expresada como una fracción (anteriormente esto se expresó como un porcentaje). Esto indica qué fracción de la cantidad total de aire es exhalado de los pulmones durante el primer segundo de exhalación forzada. 5

FEP-Flujo espiratorio pico: se utiliza como una medida para determinar si el tratamiento es efectivo para mejorar las enfermedades de las vías respiratorias, en particular en asma y EPOC.

FEF- Flujo espiratorio forzado: es una medida de cuánto aire puede ser exhalado de los pulmones; es un indicador de obstrucción de las vías respiratorias mayores.

VVM-Ventilación voluntaria máxima: un valor para esto se determina haciendo que el paciente inhale y exhale tan 10 rápido como sea posible en 12 segundos. Los resultados reflejan el estado de los músculos utilizados para respirar, cuán rígidos están los pulmones y si existe resistencia en las vías respiratorias al respirar. Esta prueba indica cuán fuertes están los pulmones de un paciente antes de la cirugía. Un bajo desempeño en esta prueba por parte del paciente sugiere que pueden ocurrir complicaciones respiratorias después de la cirugía.

En el asma, la medición de la función de los pulmones utilizando espirometría, en particular la medición de VEF1 y/o 15 flujo espiratorio pico se utiliza en ambos diagnósticos y monitoreos para confirmar la limitación de las vías respiratorias y para demostrar la reversibilidad de las anormalidades de la función pulmonar luego de la administración de un broncodilatador. El grado de reversibilidad en el volumen espiratorio forzado en un segundo (VEF1) indicativo de un diagnóstico de asma normalmente es aceptado como ≥12% y ≥200 mL del valor del pre-broncodilatador. Dado que muchas enfermedades pulmonares pueden resultar en un VEF1 reducido, una evaluación 20 útil de la limitación de las vías respiratorias en el asma es la relación entre VEF1 y capacidad vital forzada (CVF). La relación entre VEF1/CVF es normalmente >0.75–0.80, y posiblemente >0.90 en niños. Valores inferiores sugieren una limitación de las vías respiratorias. Las mediciones de FEP se realizan usando un medidor de flujo pico y también son una ayuda útil para el diagnóstico y monitoreo del asma. Los términos “reversibilidad” y “variabilidad” se refieren a cambios en los síntomas acompañados por cambios en la limitación de las vías respiratorias que ocurren 25 de forma espontánea o en respuesta al tratamiento. El término reversibilidad generalmente se aplica a mejoras rápidas en el VEF1 (o FEP) medidas unos minutos luego de inhalación de un broncodilatador de acción rápida, por ejemplo, después de 200–400 μg de salbutamol (albuterol), o mejora más sostenida en días o semanas después de la introducción de un tratamiento controlador efectivo, tal como glucocorticosteroides inhalados. La variabilidad se refiere a la mejora o el deterioro de los síntomas y la función pulmonar que ocurre con el tiempo. Puede 30 experimentarse variabilidad con el transcurso del día 1 (cuando se denomina variabilidad diurna), día a día, mes a mes o por estación.

De acuerdo con la invención, particularmente se prefiere que la función pulmonar sea evaluada por espirometría, por ejemplo, midiendo el VEF1 (asma) y/o CVF (EPOC / FPI), utilizando métodos estándar en la técnica.

El VEF1 puede medirse usando el Espirómetro Masterscope® CT usando un protocolo que siga las 35 recomendaciones de ATS / ERS 2005 (Eur Respir J; 26: 319–338). VEF1 es el volumen máximo de aire exhalado en el primer segundo de una espiración forzada de una posición de inspiración completa, expresada en litros en BTPS (Temperatura corporal (es decir, 37°C), presión ambiente, saturada con vapor de agua). La CVF es el volumen máximo de aire exhalado con un esfuerzo forzado al máximo de una inspiración máxima, es decir, capacidad vital lograda con un esfuerzo espiratorio forzado al máximo, expresado en litros en temperatura corporal y presión 40 ambiente saturada con vapor de agua.

En el asma, un antagonista de IL-13 de acuerdo con la invención puede emplearse para tratar una función pulmonar alterada para mejorar la función pulmonar. Cuando se evalúa mediante VEF1, la mejora puede expresarse como un cambio porcentual de la media en VEF1 desde el valor de referencia, preferiblemente en el rango de 5% a 18%; por ejemplo, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18%; tal como al menos 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 45 17, 18%.

En EPOC o FPI, un antagonista de IL-13 de acuerdo con la invención puede emplearse para tratar la función pulmonar alterada para mantener o retrasar la tasa de disminución de la función pulmonar.

En ciertas realizaciones de la invención, la mejora del asma en un sujeto se evalúa mediante una medición compuesta de uno o más síntomas del asma seleccionadas del grupo que consiste en: despertarse a mitad de la 50 noche, síntomas al despertar, limitación de la actividad, falta de aire, sibilancia y uso de agonistas de β2 de corta acción. La mejora del asma en un sujeto puede evaluarse mediante el cuestionario de control del asma ACQ-6 (ver Juniper EF, O'Byrne PM, Guyatt GH, Ferrie PJ, King DR. Development and validation of a questionnaire to measure asthma control. Eur Respir J 1999; 14: 902–7). La mejora del asma en un sujeto puede evaluarse mediante reducción del puntaje del ACQ-6 en comparación con el puntaje del ACQ-6 de referencia antes de la administración 55 del antagonista de IL-13. Una reducción del puntaje del ACQ-6 medio de ≥0·5 con respecto al puntaje de referencia se considera que es indicativo de una mejora clínicamente significativa del asma, mientras que un puntaje de ≥1·5 indica asma no controlada.

En realizaciones preferidas de la invención, el antagonista de IL-13 es un anticuerpo anti-IL-13 humana o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo. Preferiblemente, el antagonista anti-IL-13 es un anticuerpo anti-IL-13 humana o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, seleccionado entre:

(a) anticuerpo tralokinumab (BAK502G9, CAT-354);

(b) un fragmento de unión a IL-13 humana de tralokinumab que comprende un sitio de unión a antígenos de 5 anticuerpos que está compuesto por un dominio VH de anticuerpo humano (SEQ ID NO: 15) y un dominio VL de anticuerpo humano (SEQ ID NO:16) y que comprende un conjunto de CDR, HCDR1, HCDR2, HCDR3, LCDR1, LCDR2 y LCDR3 en donde el dominio VH comprende HCDR1, HCDR2 y HCDR3 y el dominio VL comprende LCDR1, LCDR2 y LCDR3, en donde la HCDR1 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 7, la HCDR2 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 8, la HCDR3 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 9, la 10 LCDR1 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 10, la LCDR2 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 11, y la LCDR3 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 12;

(c) un fragmento de unión a IL-13 humana de tralokinumab que comprende un sitio de unión a antígenos de anticuerpos que está compuesto por un dominio VH de anticuerpo humano y un dominio VL de anticuerpo humano que comprende un conjunto de CDR, HCDR1, HCDR2, HCDR3, LCDR1, LCDR2 y LCDR3, en donde el dominio VH 15 comprende HCDR1, HCDR2 y HCDR3 y el dominio VL comprende LCDR1, LCDR2 y LCDR3, en donde la HCDR1 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 7, la HCDR2 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 8, la HCDR3 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 9, la LCDR1 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 10, la LCDR2 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 11, y la LCDR3 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 12; 20

(d) un anticuerpo anti-IL-13, o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo que comprende un sitio de unión a antígenos de anticuerpos que está compuesto por un dominio VH de anticuerpo humano (SEQ ID NO: 15) y/o un dominio VL de anticuerpo humano (SEQ ID NO:16);

En la presente se divulga también un anticuerpo anti-IL-13 humana o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, seleccionado entre: 25

(a) un anticuerpo o un fragmento de unión a IL-13 del mismo que compite con tralokinumab por unión a IL-13 humana;

(b) un anticuerpo o un fragmento de unión a IL-13 del mismo capaz de unirse a un epítopo dentro de la secuencia de aminoácidos de IL-13 humana de ácido aspártico en la posición 99 a la asparagina del extremo terminal C en la posición 132 (FSSLHVRDTKIEVAQFVKDLLLHLKKLFREGRFN) de proteína IL-13 humana, o capaz de unirse a un 30 epítopo dentro de la secuencia de IL-13 humana de ácido aspártico en la posición 106 a asparagina del extremo terminal C en la posición 132 (DTKIEVAQFVKDLLLHLKKLFREGRFN) de proteína IL-13 humana; y

(c) un anticuerpo o un fragmento de unión a IL-13 del mismo que tiene uno, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR (SEQ ID NOs: 7, 8, 9, 10, 11, 12) en común con tralokinumab.

En un aspecto preferido de un anticuerpo anti-IL-13 humana o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo 35 descrito anteriormente, todo el anticuerpo es una IgG4.

En la presente se divulga un anticuerpo anti-IL-13 humana o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo que puede comprender una o más CDR, o un conjunto de las 6 CDR (HCDR1, HCDR2, HCDR3, LCDR1, LCDR2, LCDR3), seleccionadas de las CDR de:

BAK278D6 (SEQ ID NOS: 1, 2, 3, 4, 5, 6), 40

BAK1183H4 (SEQ ID NOS: 97, 98, 99, 100, 101, 102),

BAK1167F02 (SEQ ID NOS: 64, 65, 66, 67, 68, 69),

BAKllllD10 (SEQ ID NOS: 91, 92, 93, 94, 95, 96),

BAK1166G02 (SEQ ID NOS: 67, 68, 69, 70, 71, 72),

BAK1167F04 (SEQ ID NOS: 85, 86, 87, 88, 89, 90), 45

BAK1184C8 (SEQ ID NOS: 73, 74, 75, 76, 77, 78),

BAK1185E1 (SEQ ID NOS: 79, 80, 81, 82, 83, 84), y

BAK1185F8 (SEQ ID NOS: 103, 104, 105, 106, 107, 108).

Un método, uso, composición o dispositivo de la invención puede comprender un anticuerpo anti-IL-13 humana o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo que comprende un dominio VH que comprende un conjunto de CDR, 50 y/o un dominio VL que comprende un conjunto de CDR, seleccionadas del conjunto de HCDR y/o conjunto de LCDR de BAK278D6, BAK1183H4, BAK1167F02, BAKllllD10, BAK1166G02, BAK1167F04, BAK1184C8, BAK1185E1 y BAK1185F8.

Un anticuerpo anti-IL-13 humana o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo puede comprender un VH y VL de un clon seleccionado entre: 5

BAK278D6 (VH SEQ ID NO: 13, VL SEQ ID NO: 14),

BAK1183H4 (VH SEQ ID NO: 37, VL SEQ ID NO: 38),

BAK1167F02 (VH SEQ ID NO: 35, VL SEQ ID NO: 36),

BAKllllD10 (VH SEQ ID NO: 41, VL SEQ ID NO: 42),

BAK1166G02 (VH SEQ ID NO: 53, VL SEQ ID NO: 54), 10

BAK1167F04 (VH SEQ ID NO: 43, VL SEQ ID NO: 44),

BAK1184C8 (VH SEQ ID NO: 45, VL SEQ ID NO: 46),

BAK1185E1 (VH SEQ ID NO: 47, VL SEQ ID NO: 48), y

BAK1185F8 (VH SEQ ID NO: 49, VL SEQ ID NO: 50).

Un anticuerpo anti-IL-13 humana o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo puede tener HCDR1, HCDR2 y 15 HCDR3 del dominio VH dentro de un marco de línea germinal y/o LCDR1, LCDR2 y LCDR3 del dominio VL dentro de un marco de línea germinal. El marco de línea germinal VH puede ser VH1 DP14. El marco de línea germinal VL puede ser VL γ3 3H.

Un anticuerpo anti-IL-13 humana o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo puede unirse a una variante de IL-13 humana en la cual la arginina en la posición 130 es reemplazada por glutamina. Un anticuerpo anti-IL-13 20 humana o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo puede unirse a una IL-13 de primate no humana, tal como IL-13 de rhesus o cynomolgus.

Otros antagonistas de IL-13 que pueden emplearse de acuerdo con la invención incluyen:

(a) Anticuerpos anti-IL-13 humana tales como Lebrikizumab (MILR1444A / RG3637, Roche / Genentech), ABT-308 (Abbott), GSK679586 (GlaxoSmithkline); QAX576 (Novartis), 25

(b) Anticuerpos anti-IL-13Ra1 humana tal como Merck MK6105;

(c) Conjugados de toxina IL-13, tal como IL-13 PE38QQR ;

(d) muteínas IL-4, tal como Aerovant ™ (Aerovance) (IL-4 modificada);

(e) anticuerpos anti-IL-4Rα, tal como Regeneron-668 (Regeneron);

(f) ácidos nucleicos tales como AIR645 (un oligonucléotido de doble hebra dirigido contra IL-4Rα); y, 30

(g) anticuerpos biespecíficos de IL-4 / IL-13, tales como Domantis’ 09/10 y DOM-1000P.

En algunos aspectos de la invención, se prefiere que el antagonista anti-IL-13 no sea un antagonista de la interacción entre IL-4 y IL4Rα, preferiblemente el antagonista de IL-13 no es un anticuerpo anti-IL-4Rα, tal como AMG317 (Amgen).

Preferiblemente, el antagonista anti-IL-13 es un anticuerpo anti-IL-13 humana o un fragmento de unión a IL-13 35 humana del mismo.

Preferiblemente, un anticuerpo o un fragmento de unión del mismo empleado en la invención es seleccionado del grupo que consiste en: una molécula de inmunoglobulina, un anticuerpo monoclonal, un anticuerpo antiquimérico, un anticuerpo con injerto de CDR, un anticuerpo humanizado, un Fab, un Fab', un F(ab')2, un Fv, un Fv enlazado a disulfuro, un scFv, un anticuerpo de dominio único, un diacuerpo, un anticuerpo multiespecífico, un anticuerpo 40 específico dual y un anticuerpo biespecífico.

El sujeto que debe tratarse de acuerdo con la invención puede tener función pulmonar alterada asociada con asma, EPOC o fibrosis pulmonar idiopática (FPI). El asma puede clasificarse como asma atópica, asma no atópica, asma moderada a grave, asma moderada a grave no controlada por corticosteroides inhalados u orales y asma con una puntuación de GINA 5, 4, 3, 2, o 1. Los sujetos con asma pueden estar sometiéndose a terapia concomitante con 45 uno o más agentes terapéuticos adicionales seleccionados de un corticosteroide inhalado, antagonista beta2 de larga acción (LABA), teofilina, un antagonista de leucotrienos y un corticosteroide oral.

La función pulmonar alterada puede asociarse con EPOC, tal como EPOC moderada a grave definida por la clasificación GOLD II, II y IV. El criterio espirométrico necesario para un diagnóstico de EPOC es una relación entre VEF1/CVF por debajo de 0.7 después de Broncodilatador). Los criterios espirométricos GOLD para gravedad de 5 EPOC son los siguientes:

I: EPOC leve

VEF1/CVF < 0.7 VEF1 ≥ 80% prevista En esta etapa, el paciente puede no saber que su función pulmonar es anormal.

II: EPOC moderada

VEF1/CVF < 0.7 50% ≤ VEF1 < 80% prevista Los síntomas normalmente avanzan en esta etapa, desarrollando normalmente falta de aire tras esfuerzo.

III: EPOC grave

VEF1/CVF < 0.7 30% ≤ VEF1 < 50% prevista La falta de aire normalmente empeora en esta etapa y a menudo limita las actividades diarias de los pacientes. Se observa que las exacerbaciones comienzan especialmente en esta etapa.

IV: EPOC muy grave

VEF1/CVF < 0.7 VEF1 < 30% previsto o VEF1 < 50% previsto más falla respiratoria crónica En esta etapa, la calidad de vida se ve muy alterada y las exacerbaciones pueden ser mortales.

Los sujetos con EPOC pueden estar sometiéndose a terapia concomitante con uno o más agentes terapéuticos adicionales seleccionados de un corticosteroide inhalado, LABA, teofilina, un corticosteroide oral, tiotropio y roflumilast.

Una función pulmonar alterada puede asociarse con fibrosis pulmonar idiopática; los sujetos con FPI pueden estar 10 sometiéndose a terapia concomitante con uno o más agentes terapéuticos adicionales seleccionados de un corticosteroide inhalado, LABA, terofilina, un antagonista de leucotrienos, un corticosteroide oral y pirfenidona.

Por lo tanto, un antagonista de IL-13 o composición que comprende un antagonista de IL-13 tal como se describe en la presente puede administrarse solo o en combinación con otros tratamientos, ya sea de forma simultánea o secuencial dependiendo de la afección que debe tratarse. 15

En algún aspecto de la invención, el sujeto con función pulmonar alterada no ha recibido tratamiento de esteroides.

En realizaciones preferidas, el antagonista de IL-13, que es un anticuerpo anti-IL-13 humana o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, se administra por vía subcutánea en una dosis en el rango de 100 a 600mg. También puede ser administrado por vía intravenosa a una dosis en el rango de 100 a 1800mg, o a una dosis en el rango de 200 a 1600mg, o a aproximadamente 1500mg. Preferiblemente, el anticuerpo anti IL-13 humana es 20 tralokinumab o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, tal como se describe en la presente. Dosis unitarias adecuadas para administración subcutánea pueden seleccionarse de 150, 300 y 600 mg, preferiblemente administradas en intervalos de 2 o 4 semanas. Dosis unitarias adecuadas para administración intravenosa pueden seleccionarse de 1000, 1200, 1400, 1500, 1600, 1700 y 1800 mg, preferiblemente administradas en intervalos de 2 o 4 semanas, más preferiblemente administradas en intervalos de 4 semanas. Preferiblemente, el antagonista de IL-13 25 es un anticuerpo anti-IL-13 humana o fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, más preferiblemente el anticuerpo anti IL-13 humana es tralokinumab o un fragmento de unión a IL-13 humana, tal como se describe en la presente, administrados a una dosis de mg/kg en el rango de 1 mg / Kg a 30 mg /Kg.

El sujeto puede ser un adulto o un adulto joven (12 – 18 años de edad). Sin embargo la invención también puede emplease para mejorar, mantener o reducir la tasa de disminución de la función pulmonar en sujetos pediátricos, menores de 12 años.

Un antagonista de IL-13, preferiblemente un anticuerpo anti-IL13 humana o fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, más preferiblemente el anticuerpo anti-IL-13 humana es tralokinumab o un fragmento de unión a IL-13 5 humana, tal como se describe en la presente, puede administrarse de acuerdo con la invención a una frecuencia seleccionada de cada 1, 2, 3, 4, 6, 8, 10 y 12 semanas, prefiriéndose intervalos de dosificación de cada dos o cada cuatro semanas.

Generalmente, una mejora de la función pulmonar en sujetos con asma puede detectarse 15 días después de iniciar el tratamiento de acuerdo con la invención. 10

Sorpresivamente, los inventores encontraron una mejora en la función pulmonar, tal como se evalúa mediante espirometría midiendo el VEF1 en pacientes con asma moderada a grave (GINA 4 o 5) a los cuales se les ha administrado tralokinumab por administración subcutánea, en dosis de 150 mg, 300 mg o 600 mg, en intervalos de dosificación de 2 semanas. Se cree que hasta ahora anticuerpos anti IL-13 humana no han reportado una mejora de la función pulmonar en pacientes asmáticos. Un inicio temprano de la mejora de la función pulmonar, tal como se 15 evalúa mediante VEF1 se observó en los sujetos asmáticos con tralokinumab, con una mejora del puntaje de VEF1 detectable 15 días después de la primera administración de tralokinumab. Asimismo, se encontró que la mejora del puntaje de VEF1 se correlacionó con la dosis del tralokinumab que se administró. La mejora promedio en el puntaje de VEF1 con respecto a la medición de referencia tomada antes de iniciar el tratamiento fue 8% en el grupo de tratamiento de 150 mg, 13.3% en el grupo de tratamiento de 300 mg y 15.2 % en el grupo de tratamiento de 600 mg. 20 La mejora media en VEF1 para todos los grupos de tratamiento de tralokinumab combinado fue 12.2%.

Por lo tanto, los inventores han encontrado que una mejora de la función pulmonar, tal como se evalúa mediante espirometría, por ejemplo, midiendo el VEF1, puede utilizarse como indicador de la respuesta de un sujeto al tratamiento del asma usando un antagonista anti-IL-13 humana, preferiblemente usando un anticuerpo anti-IL-13 humana o fragmento de unión a IL-13 humana, por ejemplo, tralokinumab o un fragmento de unión a IL-13 humana 25 del mismo tal como se describe en la presente.

De esta forma, en la presente se divulga también un método para detectar la respuesta de un sujeto a un tratamiento con antagonista de IL-13 en asma, que comprende:

(a) evaluar la función pulmonar mediante un método espirométrico antes del tratamiento,

(b) evaluar la función pulmonar mediante un método espirométrico después del tratamiento, 30

(c) en donde una mejora en la función pulmonar es indicativa de una respuesta beneficiosa al tratamiento.

La función pulmonar puede ser evaluada midiendo el VEF1 y/o FEP. La evaluación de la función pulmonar después del tratamiento puede ser realizada al menos 15 días luego de iniciar el tratamiento.

En aspectos preferidos de la invención el antagonista de IL-13 es un anticuerpo anti-IL-13 humana, más preferiblemente el anticuerpo anti-IL-13 humana es tralukinumab o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, 35 tal como se describe en la presente, preferiblemente administrado por administración subcutánea, siendo preferidas dosis de 150 mg, 300 mg o 600 mg, y siendo preferido el intervalo de dosificación de 2 o 4 semanas. Preferiblemente, la mejora de la función pulmonar luego de tratamiento en comparación con el valor de referencia está en el rango de 8% a 16%, medida al menos 15 días después de iniciar el tratamiento y/o hasta 12 semanas después de acabar el tratamiento. 40

Preferiblemente, la mejora de la función pulmonar desde el valor de referencia, tal como se evalúa mediante VEF1, tras administración subcutánea en intervalos de dos semanas de 150 mg de tralokinumab o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, tal como se describe en la presente, está en el rango de aproximadamente 6 a aproximadamente 10%, por ejemplo, aproximadamente 8%. Preferiblemente, la evaluación de la función pulmonar después del tratamiento se realiza al menos 15 días después de comenzar el tratamiento y/o hasta 12 semanas 45 después de finalizar el tratamiento.

Preferiblemente, la mejora de la función pulmonar desde el valor de referencia, tal como se evalúa mediante VEF1, tras administración subcutánea en intervalos de dos semanas de 300 mg de tralokinumab o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, tal como se describe en la presente, está en el rango de aproximadamente 12 a aproximadamente 14%, por ejemplo, aproximadamente 13.3%. Preferiblemente, la evaluación de la función 50 pulmonar después del tratamiento se realiza al menos 15 días después de comenzar el tratamiento y/o hasta 12 semanas después de finalizar el tratamiento.

Preferiblemente, la mejora de la función pulmonar desde el valor de referencia, tal como se evalúa mediante VEF1, tras administración subcutánea en intervalos de dos semanas de 600 mg de tralokinumab o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, tal como se describe en la presente, está en el rango de aproximadamente 14 a 55 aproximadamente 16%, por ejemplo, aproximadamente 15.2%. Preferiblemente, la evaluación de la función pulmonar después del tratamiento se realiza al menos 15 días después de comenzar el tratamiento y/o hasta 12 semanas después de finalizar el tratamiento.

Se siguió a todos los sujetos durante 12 semanas después de la última dosis de tralokinumab y se sometieron a pruebas de espirometría los días 127 y 169. Sorpresivamente, los aumentos en el VEF1 que se observaron en 5 sujetos tratados con tralokinumab el día 92 se mantuvieron en estos dos puntos de tiempo post-dosificación. El cambio medio desde el valor de referencia en VEF1 el día 169 fue de 0.101 L en el grupo placebo y 0.218 L en el grupo de tratamiento combinado de tralokinumab subcutáneo (p = 0.096). Los aumentos numéricos en CVF y FEP observados el día 92 también se mantuvieron hasta el día 169. Este hallazgo sugiere que los efectos beneficiosos del tralokinumab en la función pulmonar pueden ser sostenidos durante un período prolongado de al menos 12 10 semanas después de finalizar el tratamiento.

Este efecto sostenido en VEF1 permite un régimen de dosificación de la invención que proporciona un primer período de dosificación de “carga” inicial, y posteriormente un segundo período de dosificación de “mantenimiento”. En el primer período de dosificación de carga la dosis puede administrarse a una dosis más alta que en el segundo período de mantenimiento. En el primer período de dosificación de carga la dosis puede administrarse más 15 frecuentemente que en el segundo período de dosificación de mantenimiento. Por lo tanto, la invención proporciona un régimen de dosificación en donde se administra el antagonista de IL-13 (que es preferiblemente un anticuerpo anti-IL-13 humana, más preferiblemente el anticuerpo anti-IL-13 humana es tralukinumab o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, tal como se describe en la presente):

(a) en una primera dosis en un primer intervalo de dosificación durante un primer período de tiempo, luego en la 20 primera dosis para un segundo intervalo de dosificación (que es más largo que el primer intervalo de dosificación) durante un segundo período de tiempo, por ejemplo, mediante administración subcutánea a 300 mg cada dos semanas (Q2W) durante 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 o 16 semanas después de la administración subcutánea a 300 mg cada 3, 4, 5 o 6 semanas (Q4W); preferiblemente a 300 mg cada dos semanas (Q2W) durante 12 semanas y posteriormente administración subcutánea a 300 mg cada 4 semanas (Q4W); o, 25

(b) en una primera dosis en un primer intervalo de dosificación durante un primer período de tiempo, luego en una segunda dosis (que es más baja que la primera dosis) en el primer intervalo de dosificación, por ejemplo mediante administración subcutánea a 300 mg cada dos semanas (Q2W) durante 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 o 16 semanas después de la administración subcutánea a 150 mg cada 2 semanas (Q2W); preferiblemente a 300 mg cada dos semanas (Q2W) durante 12 semanas y posteriormente administración subcutánea a 150 mg cada 2 semanas (Q2W); 30

(c) en una primera dosis en un primer intervalo de dosificación, luego en una segunda dosis (más baja que la primera dosis) para un segundo intervalo de dosificación (que es más largo que el primer intervalo de dosificación), por ejemplo mediante administración subcutánea a 300 mg cada dos semanas (Q2W) durante 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 o 16 semanas después de la administración subcutánea a 150 mg cada 3, 4, 5 o 6 semanas; preferiblemente a 300 mg cada dos semanas (Q2W) durante 12 semanas y posteriormente administración subcutánea a 150 mg 35 cada 4 semanas (Q4W).

Cuando el antagonista de IL-13 es Tralokinumab o una variante del mismo o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, el régimen de dosificación puede ser tal que sea administrada a 300 mg (por ejemplo, 2 x inyecciones subcutáneas de 150 mg cada 2 semanas (Q2W) durante 12 semanas y posteriormente cada 4 semanas (Q4W). Las formulaciones de Tralokinumab adecuadas para utilizar en dichos regímenes de dosificación se describen en la 40 presente.

Leyendas de las figuras

Figura 1: Diagrama de flujo de estudio: Un estudio de Fase 2a, aleatorizado, controlado por placebo, doble ciego, de brazos paralelos para evaluar la eficacia y seguridad de los tres regímenes de tratamiento subcutáneo de tralokinumab (CAT-354) en sujetos adultos con asma persistente moderada a grave no controlada. 45

Figura 2a: Cambio medio desde el valor de referencia en VEF1 (Población evaluable). Cambio desde el valor de referencia en VEF1 pre-broncodilatador para el día 92 del estudio para el grupo de tralokinumab combinado y para placebo.

Figura 2b: Cambio desde el valor de referencia en VEF1. Cambio desde el valor de referencia en VEF1 pre-broncodilatador para el día 92 del estudio para grupos de tratamiento de tralokinumab individual (150 mg, 300 mg o 50 600 mg administrados por vía subcutánea cada 2 semanas) y placebo.

Figura 3: Cambio desde el valor de referencia en VEF1 (L) pre-broncodilatador en el día 92 del estudio.

Figura 4: Cambio desde el valor de referencia en VEF1 (L) pre-broncodilatador en el día 92 del estudio en sujetos clasificados como atópicos en el valor de referencia.

Figura 5: Cambio desde el valor de referencia en VEF1 pre-broncodilatador el día 92 del estudio en sujetos clasificados como no atópicos en el valor de referencia.

Figura 6: Cambio desde el valor de referencia en % previsto de VEF1 (L) pre-broncodilatador el día 92 del estudio.

Figura 7: Porcentaje de sujetos que demuestran un cambio mayor o igual a 10% del valor de referencia en VEF1 pre-broncodilatador. 5

Figura 8: Cambio desde el valor de referencia en CVF en el día 92 del estudio.

Figura 9: Disminución desde el valor de referencia en el uso de SABA el día 92 del estudio. Cambio en el número medio de “disparos” de agonista beta de acción corta (tratamiento de rescate) tomados a diario comparando

Figura 10a: Cambio medio desde el valor de referencia en VEF1 (Población evaluable), cambio desde el valor de referencia en VEF1 pre-broncodilatador el día 169 del estudio para el grupo tralokinumab combinado (150 mg, 300 10 mg o 600 mg administrado por vía subcutánea cada 2 semanas) y para placebo.

Figura 10b: Cambio desde el valor de referencia en VEF1, cambio desde el valor de referencia en VEF1 pre-broncodilatador el día 169 del estudio para grupos de tratamiento de tralokinumab individual (150 mg, 300 mg o 600 mg administrado por vía subcutánea cada 2 semanas) y placebo.

Figura 11: Cambio medio (DE) desde el valor de referencia en el puntaje del ACQ-6 con el transcurso del tiempo 15 (población evaluable) ACQ-6=Cuestionario de Control del Asma, media de 6 puntajes individuales.

Figura 12: Cambio medio (DE) desde el valor de referencia en VEF1 pre-broncodilatador con el transcurso del tiempo (población evaluable) VEF1=volumen espiratorio forzado en 1 s.

Figura 13: Cambio medio (DE) desde el valor de referencia en el puntaje del ACQ-6 con el transcurso del tiempo (población evaluable) en la subpoblación (n=56) que proporcionó una muestra de esputo en el valor de referencia. 20 Placebo (esputo: todo) son los sujetos son tratados con placebo (n=17). Tralokinumab (esputo: todo) son los sujetos son tratados con tralokinumab (n=39). El grupo tratado con tralokinumab (n=39) se subdivide en aquellos sin IL-13 pasible de medición [tralokinumab (IL-13 de esputo <1 pg/mL)] y aquellos con IL-13 pasible de medición [tralokinumab (IL-13 de esputo ≥1 pg/mL)]. ACQ-6=Cuestionario de control del asma, media de 6 puntajes individuales. 25

Figura 14: Cambio medio (DE) desde el valor de referencia en VEF1 pre-broncodilatador con el transcurso del tiempo (población evaluable) en la subpoblación (n=56) que proporcionó una muestra de esputo en el valor de referencia. Placebo (esputo: todo) son los sujetos son tratados con placebo (n=17). Tralokinumab (esputo: todo) son los sujetos son tratados con tralokinumab (n=39). El grupo tratado con tralokinumab (n=39) se subdivide en aquellos sin IL-13 pasible de medición [tralokinumab (IL-13 de esputo <1 pg/mL)] y aquellos con IL-13 pasible de medición 30 [tralokinumab (IL-13 de esputo ≥1 pg/mL)]. VEF1=volumen espiratorio forzado en 1 s.

Ejemplos

Ejemplo 1:

Diseño del estudio

Se propuso que el bloqueo de IL-13 puede reducir exacerbaciones y mejorar el control de la enfermedad (como se 35 define por las mejoras en los síntomas del asma junto con la necesidad reducida de medicamentos de rescate) en pacientes cuya asma es descontrolada, moderada a grave, y persistente a pesar de la terapia máxima en el paso 4 o 5 de GINA.

Se realizó un estudio de fase 2a, aleatorizado, doble ciego, controlado con placebo, de brazos paralelos para evaluar la eficacia y seguridad de tres regímenes de tratamiento subcutáneo (SC) de tralokinumab, un anticuerpo 40 monoclonal humano recombinante dirigido contra la interleuquina 13 (IL-13), en sujetos adultos con asma descontrolada, moderada a grave y persistente. El estudio comprendió un periodo inicial de 2 semanas, un periodo de tratamiento de 12 semanas, y un periodo de seguimiento de 12 semanas. La selección del régimen de dosis y duración del tratamiento se basó en un modelado y simulaciones farmacocinéticos utilizando datos de estudios clínicos previos. Este estudio está registrado en ClinicalTrials.gov, número NCT00873860. 45

Se previó un total de 192 sujetos para ser aleatorizados. Previo a ser aleatorizados, los sujetos se estratificaron de acuerdo con el estado de asma atópica utilizando la prueba Phadiatop (Laboratoire Pasteur Cerba, Francia, un inmunoensayo de enzimas fluorescentes (FEIA) para inmunoglobulina E (IgE) específica del alérgeno a los aero-alérgenos más frecuentes (ácaros, moho, animales, arbustos, malezas y árboles) que determina la presencia de anticuerpos de IgE específicos a múltiples alérgenos inhalados). Dentro de cada estrato, los sujetos se 50 seleccionaron de manera aleatoria de acuerdo con una lista de asignación aleatoria (1:1:1) a uno de tres brazos (tralokinumab o placebo de 150 mg, tralokinumab o placebo de 300 mg, tralokinumab o placebo de 600 mg). Dentro de cada brazo, los sujetos fueron aleatorizados de acuerdo con una lista de asignación aleatoria generada por computadora para tratamiento activo o de placebo (3:1). El tratamiento del estudio se administró cada 2 semanas mediante una inyección SC en el muslo anterior. Los sujetos recibieron una, dos o cuatro inyecciones SC (150 mg/1 mL por inyección) de tralokinumab en 7 visitas en 12 semanas. A todos los sujetos se les dio seguimiento por 12 semanas después de la última dosis del producto en fase de investigación (día 169 del estudio). El medicamento del estudio se dispensó y administró por personal no ciego, y no involucrado de otra forma en el estudio. Los sujetos computadora para tratamiento activo o de placebo (3:1). El tratamiento del estudio se administró cada 2 semanas mediante una inyección SC en el muslo anterior. Los sujetos recibieron una, dos o cuatro inyecciones SC (150 mg/1 mL por inyección) de tralokinumab en 7 visitas en 12 semanas. A todos los sujetos se les dio seguimiento por 12 semanas después de la última dosis del producto en fase de investigación (día 169 del estudio). El medicamento del estudio se dispensó y administró por personal no ciego, y no involucrado de otra forma en el estudio. Los sujetos computadora para tratamiento activo o de placebo (3:1). El tratamiento del estudio se administró cada 2 semanas mediante una inyección SC en el muslo anterior. Los sujetos recibieron una, dos o cuatro inyecciones SC (150 mg/1 mL por inyección) de tralokinumab en 7 visitas en 12 semanas. A todos los sujetos se les dio seguimiento por 12 semanas después de la última dosis del producto en fase de investigación (día 169 del estudio). El medicamento del estudio se dispensó y administró por personal no ciego, y no involucrado de otra forma en el estudio. Los sujetos

Un objetivo de este estudio era evaluar el efecto de los tres regímenes de tratamiento de tralokinumab (SC) en el control del asma el día 92 del estudio con respecto al placebo en adultos con asma descontrolada, moderada a grave y persistente. El criterio de valoración primario del estudio fue el Cuestionario de Control del Asma (ACQ-6) 10 (Juniper et al. (1999). Los criterios de valoración secundarios fueron las medidas de función pulmonar, el uso de medicamento de rescate, la tasa de exacerbación del asma, los resultados informados por los pacientes (PRO), y la seguridad. Los objetivos secundarios incluyeron evaluar el efecto del tralokinumab SC en la variabilidad de obstrucción de flujo de aire, utilizando los parámetros de volumen espiratorio forzado dentro de 1 segundo (VEF1) y flujo espiratorio pico (FEP). 15

Criterios de inclusión principales

Sujetos masculinos o femeninos.

Edad de 18 a 65 años al momento de la selección.

Los sujetos deben tener un índice de masa corporal (IMC) de entre 18 y 40 kg/m2.

Consentimiento informado por escrito obtenido del sujeto previo a realizar cualquier procedimiento relacionado con el 20 protocolo, incluyendo las evaluaciones de selección.

Asma diagnosticada por el médico, moderada a grave y persistente que requiere tratamiento con un medicamento controlador del asma apropiado.

Muestra una reversibilidad de VEF1 después del broncodilatador de ≥ 12% y ≥ 200 mL o ha mostrado dichos valores en una prueba previa dentro del último año, o tiene un resultado de prueba de hiperreactividad de las vías 25 respiratorias (HVR) positivo en el último año.

Un valor VEF1 previo al broncodilatador ≥ 40% deL valor previsto individual en las visitas 1 y 3.

Asma descontrolada coherente con el Informe del Panel de Expertos (EPR)-3. En las semanas 2 a 4 antes de la visita de selección, los sujetos deben tener un antecedente de una o más de las siguientes:

Síntomas de asma diurna ≥ 2 días/semana 30

Despertar nocturno ≥ 1 noche/semana

Uso de salbutamol ≥ 2 días/semana.

Una puntuación en ACQ de ≥ 1.5 en las visitas 1 y 3.

Al menos un episodio de exacerbación del asma en el último año que requirió atención médica no programada.

Mujeres fértiles, a menos que sean estériles quirúrgicamente (incluyendo ligado de trompas) y/o al menos 2 años 35 postmenopáusicas deben tener una prueba de embarazo negativa previo a la primera dosis del producto en fase de investigación, y deben acordar usar 2 métodos efectivos para evitar el embarazo (incluyendo anticonceptivos orales, inyectables, transdérmicos, o implantados, dispositivo intrauterino, condón femenino con espermicida, diafragma con espermicida, capuchón cervical, uso del condón por la pareja sexual masculina); o abstinencia o pareja sexual estéril desde la selección al día 169 del estudio. Las mujeres estériles deben continuar utilizando anticonceptivos durante el 40 estudio y por al menos 2 meses después de completado el estudio.

Los hombres, a menos que sean estériles quirúrgicamente, deben practicar del mismo modo 2 métodos anticonceptivos efectivos (condón con espermicida) y deben tomar dichas precauciones desde el día 1 del estudio al día 169 del estudio.

Aparte debe ser saludable por medio de antecedentes médicos y exámenes físicos para ese grupo etario. 45

Rayos X de tórax dentro de los 12 meses previos sin hallazgos que sugieran patología respiratoria aguda o crónica que no sea asma.

Capacidad y voluntad para completar el periodo de seguimiento hasta el día 169 del estudio como requiere el protocolo.

Criterios de exclusión principales

Antecedentes conocidos de alergia o reacción a cualquier componente de la formulación del producto en fase de investigación.

Enfermedad aguda que no sea asma al comienzo del estudio.

Antecedente de una infección activa dentro de 4 semanas previas a la selección, o evidencia de infección activa 5 clínicamente significativa, incluyendo infección crónica en curso.

Antecedente de ingestión de agua sin tratar en una ubicación que se conoce está infectada con parásitos, lo que resulta en diarrea aguda o crónica; o un diagnóstico de infección parasitaria dentro de los 6 meses previos a la selección.

El uso de medicamento inmunosupresor (excepto prednisona oral hasta 10 mg/día y corticosteroides inhalados y 10 tópicos) dentro de los 30 días previos a la aleatorización para el estudio.

Recibir inmunoglobulina o productos sanguíneos dentro de los 30 días previos a la aleatorización para el estudio.

Recibir cualquier terapia de fármacos en fase de investigación o uso de cualquier producto biológico, incluyendo omalizumab dentro de los 6 meses previos a la primera dosis del producto en fase de investigación en este estudio o dentro de 5 semividas de un agente en fase de investigación o biológico, el que sea más largo. 15

Antecedente de cualquier trastorno de inmunodeficiencia conocido.

Un antígeno de superficie de hepatitis B positivo, o anticuerpo del virus de hepatitis C, determinado mediante el antecedente médico y/o informe verbal del sujeto.

Una prueba de virus de inmunodeficiencia humana positivo o que está tomando medicamentos antirretrovirales, determinado mediante el antecedente médico y/o informe verbal del sujeto. 20

Una vacuna viva o atenuada recibida dentro de las 4 semanas previas a la selección.

Antecedente médico previo, o evidencia, de una enfermedad intercurrente que pueda comprometer la seguridad del sujeto en el estudio.

Antecedente de una anormalidad clínicamente significativa en un electrocardiograma (ECG) según la opinión del investigador. 25

Lactancia (mujeres).

Antecedente de tratamiento de alcoholismo o drogadicción dentro del último año.

Antecedente sugestivo de enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC) y de fumar cigarrillos ≥ 10 cajas al año.

Evidencia de cualquier enfermedad sistémica en el examen físico.

Antecedente de cáncer, con excepción de carcinoma de célula basal o carcinoma in situ de cuello de útero tratado 30 con éxito aparente con terapia curativa ≤ 1 año previo al día 1 del estudio u otras malignidades tratadas con éxito aparente con terapia curativa ≤ 5 años previos al ingreso.

Exposición conocida a agentes o gases ocupacionales inhalados.

Cualquier afección (por ejemplo, fibrosis quística [FC] o EPOC) que según la opinión del investigador, interferiría con la evaluación del producto en fase de investigación o en la interpretación de los resultados del estudio. 35

Individuos legalmente institucionalizados.

Empleados del sitio de estudio clínico o cualquier otro individuo involucrado con la realización del estudio, o familiares de dichos individuos.

Población de paciente objetivo

Los sujetos en este estudio fueron sujetos adultos masculinos y femeninos, 18 a 65 años de edad, con asma 40 descontrolada, moderada a grave y persistente.

Criterio de valoración primario

El ACQ-6, una medida compuesta de síntomas de asma (despertares nocturnos, síntomas al caminar, limitación de la actividad, falta de aire, sibilancia, y uso de agonista β2 de acción corta), se completó semanalmente utilizando un diario electrónico (eDiary). El criterio de valoración primario fue el cambio desde el valor de referencia a la semana 45 13 en puntuación media de ACQ-6. Las reducciones en la puntuación media de ACQ-6 de ≥0·5 son consideradas como clínicamente significativas mientras que una puntuación de ≥1·5 indica un asma descontrolada (Juniper et al. (2006)).

Criterios de valoración secundarios

Se realizó una espirometría en cada visita del estudio en la mañana; se midieron el VEF1 antes del broncodilatador, 5 la capacidad vital forzada (CVF) y el flujo espiratorio pico (FEP). Los sujetos también realizaron una evaluación de flujo pico cada mañana en su hogar.

A efectos del estudio, se definió una exacerbación del asma como un deterioro que requiere la administración de una dosis alta de corticosteroides sistémica; específicamente en una definición más detallada a los efectos de este estudio una exacerbación del asma (recaída o de novo) se definió como un aumento progresivo de síntomas de 10 asma (tos, sibilancia, opresión en el pecho, y/o falta de aire) o una reducción de ≥20% en el flujo espiratorio pico (FEP) o volumen espiratorio forzado en 1 s (VEF1) desde el valor de referencia que no se resolvió después de la iniciación de medicamentos de rescate y resultó en una administración de corticosteroides sistémicos por el investigador o profesional de la salud. Para aquellos que recibieron corticosteroides orales para el mantenimiento (OCS) para el control del asma, se definió que una exacerbación del asma ocurría si se había iniciado la terapia de 15 altas dosis de OCS o corticosteroides intravenosos. Las exacerbaciones del asma, si existieron, se informaron en cada visita del estudio.

Los PRO registrados incluyeron una puntuación de síntomas de asma diario de 4 ítems y el Cuestionario de calidad de vida relacionado con el asma con actividades estandarizadas (AQLQ(S)).

Los acontecimientos adversos (AE), si los hubiese, se registraron en cada visita del estudio; las evaluaciones de 20 laboratorio de rutina se realizaron en la selección, después de la primera, tercera y quinta dosis, y en las semanas 13 y 24.

El esputo se indujo y se recogió en centros de estudio seleccionados en el valor de referencia y en las semanas 8 y 14. El contenido de IL-13 en esputo se evaluó utilizando un sistema ELISA (Luminex® Corp).

Evaluaciones farmacocinéticas 25

Las muestras de sangre se recogieron antes de cada dosis y durante el periodo de seguimiento para una evaluación farmacocinética. Se determinaron concentraciones de suero (Cmin) de tralokinumab mínimas utilizando un inmunoensayo realizado en la plataforma de ensayo Gyrolab que detecta tralokinumab libre. Este método tiene un límite más bajo de cuantificación en suero de 0·300 µg/mL, y exhibe una precisión de <25% de error relativo absoluto y precisión de <20% de CV (coeficiente de variación). 30

Basado en las concentraciones de suero mínimas observadas durante el periodo de tratamiento de 12 semanas, la exposición a tralokinumab aumentó aproximadamente de manera proporcional a una dosis sobre el rango de 150-600 mg. Las concentraciones de suero medias (DE) a la semana 13 fueron de 42·0 (16·3), 86·8 (33·1), y 156 (46·6) µg/mL para tralokinumab de 150, 300, y 600 mg, respectivamente. Dentro de cada grupo de dosis, las concentraciones de suero aumentaron aproximadamente al doble entre las semanas 2 y 10, coherente con la 35 acumulación moderada. Se observaron concentraciones de suero comparables en las semanas 10 y 12, lo que indica que el estado estacionario se obtuvo en la semana 10.

Inmunogenicidad

Las muestras de sangre se recogieron antes de la primera dosis y en las semanas 13 y 24 para medir los anticuerpos anti-fármaco en suero utilizando inmunoensayos complementarios homogéneos validados con detección 40 por electroquimioluminiscencia. No se detectaron anticuerpos anti-fármaco en suero durante el curso del estudio.

Producto en fase de investigación, dosificación

Se previó un total de 192 sujetos para ser aleatorizados en este estudio, con 144 sujetos para recibir una administración SC de Tralokinumab y 48 sujetos para recibir placebo. El Tralokinumab se formuló a 150 mg/ mL en 50 mM de acetato de sodio, 85 mM de cloruro de sodio, 0.01% (p/v) de polisorbato derivado de plantas 80 en pH 45 5.5).

Brazo del tratamiento 1: Tralokinumab SC de 150 mg (n=48) o 1 mL de placebo (n=16) una vez cada 2 semanas en los días 1, 15, 29, 43, 57, 71 y 85 del estudio.

Brazo del tratamiento 2: Tralokinumab de 300 mg (n=48) o 2 mL de placebo (n=16) una vez cada 2 semanas en los días 1, 15, 29, 43, 57, 71 y 85 del estudio. 50

Brazo del tratamiento 3: Tralokinumab de 600 mg (n=48) o 4 mL de placebo (n=16) una vez cada 2 semanas en los días 1, 15, 29, 43, 57, 71 y 85 del estudio.

En la Figura 1 se muestra el diagrama de flujo del estudio. Se analizaron cinco poblaciones de sujetos en este estudio de la siguiente manera.

1. La población por intención de tratar (ITT) incluyó a todos los sujetos que fueron aleatorizados en el estudio.

2. La población evaluable incluyó a todos los sujetos que recibieron al menos 4 dosis del producto en fase de investigación así como sujetos que recibieron al menos una dosis del producto en fase de investigación pero en 5 tratamiento descontinuado previo a recibir 4 dosis debido a razones de seguridad. El análisis de eficacia primario se basó en la Población evaluable.

3. La población de acuerdo con el protocolo (ATP) incluyó todos los sujetos que recibieron todas las dosis del producto en fase de investigación y que tenían una puntuación ACQ el día 92 del estudio.

4. La población de seguridad incluyó todos los sujetos que recibieron al menos una dosis del producto en fase de 10 investigación.

5. La población PK incluyó todos los sujetos en la Población de seguridad que recibieron tralokinumab SC y que tuvieron una cantidad suficiente de mediciones de concentración de suero.

Tabla 1 Resumen de las poblaciones de sujetos

Poblaciones de sujetos

Placebo TRALOKINUMAB SC Total

150 mg

300 mg 600 mg Combinado

Todos los sujetos aleatorizados

48 47 51 48 146 194

Población ITT

48 47 51 48 146 194

Población evaluable

46 46 51 47 144 190

Población ATP

44 45 47 44 136 180

Población de seguridad

47 47 51 48 146 193

Población FC

47 47 51 48 146 193

ATP = de acuerdo al protocolo; ITT = intención de tratar; FC = farmacocinética. 15

El VEF1 se midió utilizando el Espirómetro Masterscope® CT utilizando un protocolo que sigue las recomendaciones ATS/ ERS 2005 (Eur Respir J; 26: 319–338).

Métodos estadísticos

Se llevaron a cabo cálculos de tamaño de muestra basados en el criterio de valoración primario utilizando el software estadístico nQuery Advisor® 6·01. El cambio desde el valor de referencia en puntuación media de ACQ-6 en la 20 semana 13 se supuso sería de –0·5 y –1·0 para los grupos de placebo y de tralokinumab combinados (150, 300, y 600 mg), respectivamente, con una DE común de 0·9. Se requirió un tamaño de muestra de 144 para detectar una diferencia estadísticamente significativa entre los grupos de tralokinumab combinados y de placebo en un nivel de importancia 0·05 con 80% de potencia. Para permitir deserciones se planeó seleccionar de manera aleatoria 192 sujetos. 25

La población evaluable incluía todos los sujetos que recibieron al menos cuatro dosis del medicamento del estudio y aquellos que recibieron al menos una dosis pero de manera interrumpida previo a recibir cuatro dosis por razones de seguridad; los análisis de eficacia indicados están basados en esta población. La población por intención de tratar (ITT) se definió como todos los sujetos seleccionados de manera aleatoria; los análisis de eficacia confirmadores se llevaron a cabo sobre esta población. La población de seguridad comprendía todos los sujetos que recibieron al 30 menos una dosis del medicamento del estudio.

El criterio de valoración primario fue la comparación del cambio desde el valor de referencia a la semana 13 en la puntuación media de ACQ-6 entre el grupo de tralokinumab combinado (es decir 150, 300 y 600 mg) y de placebo utilizando un análisis de varianza. El análisis de eficacia primario se llevó a cabo en un análisis interino después de que todos los sujetos completaron la visita de la semana 13. Se utilizaron pruebas t de dos muestras para comparar 35 entre los cambios del grupo de tratamiento desde el valor de referencia a la semana 13 en los parámetros de espirometría medidos durante las visitas de estudio. Los criterios de valoración de eficacia se llevaron a cabo hasta la semana 24 y también se analizaron como se describió anteriormente (tanto el grupo de estudio como los sitios permanecieron desconocidos hasta la semana 24). Se llevaron a cabo análisis de eficacia exploratorio para comparar cada dosis de tralokinumab con placebo y no se realizó ningún ajuste de comparación múltiple. Los análisis post hoc se llevaron a cabo en el cambio desde el valor de referencia a las semanas 13 y 24 en el uso de agonista β2 de rescate en el grupo de tralokinumab y para cada dosis comparada con placebo (prueba t de dos muestras).

Se llevó a cabo un análisis post-hoc descriptivo del cambio desde el valor de referencia en ACQ-6 y VEF1 en un subgrupo de sujetos con muestras de esputo obtenidas en el valor de referencia; se analizaron sujetos de acuerdo con la presencia o ausencia de IL-13 detectable en esputo.

Se llevó a cabo un análisis de seguridad después de que todos los sujetos completaron el estudio utilizando la población de seguridad. Todos los parámetros de seguridad se resumieron de manera descriptiva. 10

Resultados

El estudio se llevó a cabo entre junio de 2009 y agosto de 2010. Se aleatorizaron 194 sujetos en 27 centros de estudio en Europa. La mayoría de los sujetos recibió las siete dosis del medicamento del estudio (placebo 95·7%; tralokinumab 93·8%).

Disposición de los sujetos 15

Un total de 194 sujetos fueron aleatorizados en este estudio en 27 sitios en la Unión Europea; 10 sitios en Rumania (n = 77), 6 sitios en Bulgaria (n = 52), 6 sitios en Polonia (n = 37), 4 sitios en Alemania (n = 21), y un sitio en el Reino Unido (n = 7).

De los 194 sujetos aleatorizados en el estudio, 48 sujetos fueron aleatorizados al grupo de placebo y 146 sujetos fueron aleatorizados a uno de tres grupos de tratamiento de tralokinumab SC (47 sujetos en el grupo de tratamiento 20 de tralokinumab SC de 150 mg, 51 sujetos en el grupo de tratamiento de tralokinumab SC de 300 mg, y 48 sujetos en el grupo de tratamiento de tralokinumab SC de 600 mg).

Características demográficas y otras características de referencia

Las características demográficas de referencia están resumidas en la Tabla 2. La edad media de la población de sujetos fue de 47.3 años (18-65 años), con edades medias similares (43.4-49.8 años) en los grupos de placebo y de 25 tratamiento de tralokinumab SC. La mayoría de los sujetos fueron femeninos (59.8%), con excepción del grupo de tratamiento de tralokinumab SC de 150 mg (40.4%). La mayoría de los sujetos eran blancos (91.8%). El IMC medio fue de 27.082 kg/m2 (18.52-35.29 kg/m2), con un IMC medio similar (26.548-27.536 kg/m2) en los grupos de placebo y de tratamiento de tralokinumab SC.

Tabla 2 Características demográficas de referencia (Población ITT) 30

20

Parámetros

Placebo (N=48) TRALOKINUMAB SC Total (N=194)

150 mg (N=47)

300 mg (N=51) 600 mg (N=48) Combinado (N=146)

Edad (años)

Media

47.2 43.4 48.7 49.8 47.4 47.3

DE

9.8 11.1 11 10.4 11.1 10.8

Mediana

48 46 51 52 50 50

Mín-Máx

(23 - 65) (18 - 64) (19 - 65) (25 - 65) (18 - 65) (18 - 65)

Género

Masculino

15 (31.3%) 28 (59.6%) 15 (29.4%) 20 (41.7%) 63 (43.2%) 78 (40.2%)

Femenino

33 (68.8%) 19 (40.4%) 36 (70.6%) 28 (58.3%) 83 (56.8%) 116 (59.8%)

Etnicidad

Hispana o Latina

1 (2.1%) 4 (8.5%) 0 (0.0%) 1 (2.1%) 5 (3.4%) 6 (3.1%)

Ni Hispana ni Latina

47 (97.9%) 43 (91.5%) 51 (100%) 47 (97.9%) 141 (96.6%) 188 (96.9%)

Raza

Asiática

1 (2.1%) 0 (0.0%) 1 (2.0%) 0 (0.0%) 1 (0.7%) 2 (1.0%)

Blanca

42 (87.5%) 46 (97.9%) 46 (90.2%) 44 (91.7%) 136 (93.2%) 178 (91.8%)

Otra

5 (10.4%) 1 (2.1%) 4 (7.8%) 4 (8.3%) 9 (6.2%) 14 (7.2%)

Parámetros

Placebo (N=48) TRALOKINUMAB SC Total (N=194)

150 mg (N=47)

300 mg (N=51) 600 mg (N=48) Combinado (N=146)

IMC (kg/m2)

Media

26.983 26.548 27.536 27.22 27.114 27.082

DE

4.001 3.777 4.181 3.876 3.949 3.952

Mediana

27.29 26.43 27.44 27.43 27.175 27.2

Mín-Máx

(18.87 - 34.81) (18.87 - 35.29) (18.52 - 34.89) (19.20 - 34.63) (18.52 - 35.29) (18.52 - 35.29)

IMC = índice de masa corporal; ITT = intento de tratar; Máx = máximo; Mín = mínimo; DE = desviación estándar.

En este estudio fueron aleatorizados sujetos con asma diagnosticada por un médico, moderada a grave y persistente que requiere tratamiento con un medicamento controlador del asma apropiado. Las características de la enfermedad de referencia y el antecedente médico de asma se resumen en la Tabla 3 y Tabla 4, respectivamente.

En el valor de referencia, la población del estudio tenía asma moderada a grave que no se controló completamente (VEF1 medio general 2·00 L [61·2% previsto]; CVF 3·26 L; puntuación ACQ-6 2·66). En general, el VEF1 medio fue 5 de 61.2% (41%-103%) previsto, que fue coherente con los grupos de placebo y tratamiento de tralokinumab SC. La puntuación de síntomas de asma media fue de 4.42 (0.0-8.1), con la mayoría (59.8%) de los sujetos (59.8%) con un promedio de > 2 despertares nocturnos por semana. La mayoría (61.9%) de los sujetos también tenían al menos una exacerbación de asma que requería corticosteroides orales (OCS) en los últimos 12 meses. La estratificación indicó que el 47.9% de los sujetos tenían asma no atópica, mientras que el 52.1% de los sujetos fueron clasificados como 10 atópicos (definidos por la presencia de inmunoglobulina E específica del alérgeno en la visita de selección). La puntuación media ACQ fue de 2.66, que es coherente con una población con asma descontrolada.

Los sujetos estaban tomando un rango de medicamentos controladores del asma en el valor de referencia y la dosis de corticosteroides inhalados (ICS), expresados como equivalentes de dipropionato de beclometasona (DPB), en un rango de 1058.9-1254.3 mcg por día en los grupos de placebo y de tratamiento de tralokinumab SC, la dosis de ICS 15 diaria mediana, expresada como equivalente de dipropionato de beclometasona, fue de 1000 μg/día, 32% de los sujetos recibieron ICS de dosis alta (por guía GINA 2009) y/o una dosis diaria regular de corticosteroide oral. La mayoría de los sujetos requirieron agonistas β2 de rescate (medio 2.5 disparos/día) y agonistas beta de acción corta (90.7% utilizando SABA al menos 3 días por semana).

Tabla 3 Características de la enfermedad de referencia (Población ITT) 20

Parámetros

Placebo (N=48) TRALOKINUMAB SC Total (N=194)

150 mg (N=47)

300 mg (N=51) 600 mg (N=48) Combinado (N=146)

Espirometría de consultorio (% de VEF1 previsto)

N

47 47 51 48 146 193

Media

61.4 61.9 61.1 60.5 61.2 61.2

DE

12.3 12.7 12.6 11.8 12.3 12.3

Mediana

63.0 61.0 62.0 59.5 61.0 61.0

Mín-Máx

(41 - 90) (42 - 94) (43 - 98) (43 - 103) (42 - 103) (41 - 103)

VEF1, L, media (DE)

1·94 (0·48)* 2·20 (0·67) 1·90 (0·59) 1·96 (0·66) 2·01 (0·65)

CVF1, L, media (DE)

3·25 (0·80)* 3·56 (0·95) 3·08 (1·01) 3·15 (1·04) 3·26 (1·02)

Estado de asma

No atópica

25 (52.1%) 22 (46.8%) 24 (47.1%) 22 (45.8%) 68 (46.6%) 93 (47.9%)

Atópica

23 (47.9%) 25 (53.2%) 27 (52.9%) 26 (54.2%) 78 (53.4%) 101 (52.1%)

Exacerbaciones del asma que requirieron OCS en los últimos 12 meses

0

18 (37.5%) 18 (38.3%) 23 (45.1%) 15 (31.3%) 56 (38.4%) 74 (38.1%)

1

23 (47.9%) 24 (51.1%) 23 (45.1%) 23 (47.9%) 70 (47.9%) 93 (47.9%)

2

6 (12.5%) 4 (8.5%) 3 (5.9%) 6 (12.5%) 13 (8.9%) 19 (9.8%)

Parámetros

Placebo (N=48) TRALOKINUMAB SC Total (N=194)

150 mg (N=47)

300 mg (N=51) 600 mg (N=48) Combinado (N=146)

3

1 (2.1%) 1 (2.1%) 1 (2.0%) 2 (4.2%) 4 (2.7%) 5 (2.6%)

5

0 (0.0%) 0 (0.0%) 0 (0.0%) 1 (2.1%) 1 (0.7%) 1 (0.5%)

FEP, L, medio (DE)

284·9 (79·6)* 341·2 (118·6) 290·5 (97·0) 309·9 (117·5) 313·2 (112·3)

Uso de agonista β2 de rescate, disparos/día, media (DE)

2·60 (1·68)* 2·80 (2·03) 2·04 (1·51) 2·60 (1·95) 2·47 (1·85)

Puntuación media (DE) ACQ-6

2·60 (0·54)* 2·68 (0·62) 2·63 (0·50) 2·72 (0·75) 2·68 (0·63)

Puntuación general AQLQ(S), media (DE)

4·15 (0·83)† 3·90 (0·88)‡ 4·15 (0·80)‡ 4·16 (0·94)† 4·07 (0·87)§

ACQ = Cuestionario de Control del Asma; VEF1 = Volumen espiratorio forzado en 1 segundo; Máx = máximo; Mín = mínimo; N = número; NC = no corresponde; DE = desviación estándar.

Tabla 4 Resumen del antecedente médico de asma (Población ITT)

Parámetros

Placebo (N=48) TRALOKINUMAB SC Total (N=194)

150 mg (N=47)

300 mg (N=51) 600 mg (N=48) Combinado (N=146)

Dosis de ICS (μg/día)

N

45 46 50 48 144 189

Media

1058.9 1254.3 1112.0 1254.2 1204.9 1170.1

DE

729.7 785.6 799.7 866.9 815.4 796.4

Mediana

1000.0 1000.0 1000.0 1000.0 1000.0 1000.0

Mín -Máx

(200-4000) (200-4000) (100-4000) (200-4000) (100-4000) (100-4000)

Sujetos que recibieron dosis alta de ICS/OCS

11 (22.9%) 18 (38.3%) 15 (29.4%) 18 (37.5%) 51 (34.9%) 62 (32.0%)

Uso de agonista β2 de rescate (Número promedio de inhalaciones/día)

N

47 47 51 48 146 193

Media

2.60 2.80 2.04 2.60 2.47 2.50

DE

1.68 2.03 1.51 1.95 1.85 1.81

Mediana

2.14 2.00 1.86 2.00 2.00 2.00

Mín -Máx

(0.0 - 7.4) (0.0 - 7.7) (0.0 - 6.6) (0.0 - 9.1) (0.0 - 9.1) (0.0 - 9.1)

Uso de SABA en los últimos 3 meses

0-2 Días/Semana

5 (10.4%) 3 (6.4%) 5 (9.8%) 4 (8.3%) 12 (8.2%) 17 (8.8%)

3-6 Días/Semana

28 26 28 29 (60.4%) 83 (56.8%) 111 (57.2%)

Parámetros

Placebo (N=48) TRALOKINUMAB SC Total (N=194)

150 mg (N=47)

300 mg (N=51) 600 mg (N=48) Combinado (N=146)

(58.3%)

(55.3%) (54.9%)

7 Días/Semana

15 (31.3%) 18 (38.3%) 17 (33.3%) 15 (31.3%) 50 (34.2%) 65 (33.5%)

NC

0 (0.0%) 0 (0.0%) 1 (2.0%) 0 (0.0%) 1 (0.7%) 1 (0.5%)

ICS = corticosteroides inhalados; Máx = máximo; Mín = mínimo; N = número; NC = no corresponde; OCS = corticosteroides orales; SABA = agonista beta de acción corta; DE = desviación estándar.

Evaluación de eficacia

Este estudio fue un estudio de fase 2a diseñado para establecer si un bloqueo del IL-13 por medio de tralokinumab SC resultaba en un mejor control del asma en sujetos con asma descontrolada, moderada a grave y persistente. Los resultados de eficacia están indicados para la población evaluable; los resultados basados en la población ITT fueron coherentes con aquellos para la población evaluable. 5

Se utilizó un abordaje de 2 etapas para analizar los datos. La etapa 1 (día 92 del estudio) del análisis correspondió al análisis interino especificado por el protocolo, es decir, el análisis del criterio de valoración primario se llevó a cabo después de que los sujetos completaran la visita del día 92 del estudio, con criterios de valoración secundarios seleccionados incluidos. La etapa 2 (día 169 del estudio) correspondió al análisis final especificado en el protocolo, es decir, el análisis de los criterios generales de valoración de seguridad del estudio junto con los criterios de 10 valoración de eficacia restantes.

Espirometría

La espirometría se realizó en el sitio de estudio durante cada visita. Se realizaron múltiples esfuerzos espiratorios forzados (al menos 3, pero no más de 8) por cada sesión de espirometría. Se utilizaron para el análisis los VEF1 y CVF más altos de todos los esfuerzos aceptados. Además, se utilizó el FEP asociado con el mejor esfuerzo de VEF1 15 para el análisis. Durante el estudio se evaluaron los cambios en la obstrucción del flujo de aire (VEF1 y CVF en el sitio y FEP en el hogar).

La Tabla 5 resume el cambio desde el valor de referencia en parámetros de espirometría al día 92 del estudio. El cambio de la media desde el valor de referencia en VEF1 el día 92 fue de 0.061 L en el grupo de placebo y 0.204 L en el grupo de tratamiento de tralokinumab SC combinado; esta diferencia fue estadísticamente significativa (p = 20 0.044). Esto se muestra gráficamente en la Figura 2. Los aumentos en VEF1 en el grupo de tratamiento de tralokinumab SC en comparación con el placebo se observaron tan pronto como el día 15 después de comenzar la dosificación; en este punto de tiempo, el cambio medio del valor de referencia en VEF1 fue de 0.019 L en el grupo de placebo y 0.124 L en el grupo de tratamiento de tralokinumab SC. El día 92, se vio una respuesta a la dosis en los grupos de tratamiento de tralokinumab SC (0.155, 0.210, y 0.246 L, respectivamente). Los cambios de porcentaje de 25 la media en VEF1 desde el valor de referencia el día 92 del estudio fue 4.1% para el grupo de placebo, 8.0% para el grupo de tratamiento de tralokinumab SC de 150 mg, 13.3% para el grupo de tratamiento de tralokinumab SC de 300 mg, 15.2% para el grupo de tratamiento de tralokinumab SC de 600 mg, y 12.2% para el grupo de tratamiento de tralokinumab SC combinado.

Se llevaron a cabo sub-análisis para examinar el efecto de tralokinumab en VEF1 en sub-poblaciones en el estudio 30 (Tabla 6). La magnitud del cambio de la media desde el valor de referencia en VEF1 en el grupo de tratamiento de tralokinumab SC combinado fue similar en sujetos independientemente de su estado atópico en el valor de referencia. Para sujetos con asma no atópica, el cambio de la media desde el valor de referencia en VEF1 fue de 0.197 L en el grupo de tratamiento de tralokinumab SC combinado (esta diferencia fue estadísticamente significativa en comparación con el grupo de placebo (p = 0.002). Para sujetos con asma atópica, el cambio de la media desde el 35 valor de referencia en VEF1 fue de 0.210 L en el grupo de tratamiento de tralokinumab SC combinado; (esta diferencia no fue estadísticamente significativa en comparación con el grupo de placebo).

Tabla 5 Resumen del cambio desde el valor de referencia en parámetros de espirometría desde el valor de referencia de la población evaluable en visita al consultorio

Continuación de Tabla 5

Continuación de Tabla 5

Continuación de Tabla 5

La magnitud del cambio de la media desde el valor de referencia en VEF1 de 0.186 L en sujetos que recibieron altas dosis de corticosteroides inhalados y/o corticosteroides orales como terapia de base para el control del asma en el grupo de tratamiento de tralokinumab SC combinado fue similar en comparación con la población de estudio general (esta diferencia no fue estadísticamente significativa en comparación con el grupo de placebo).

VEF1, CVF y FEP antes del broncodilatador mejoraron en todos los grupos de tralokinumab en el periodo de 5 tratamiento de 12 semanas en comparación con el placebo (tabla 8). Los aumentos en el porcentaje de la media [DE] desde el valor de referencia a la semana 13 en VEF1 (12·5% [20·7%] vs 4·3% [29·4%]) y CVF (7·1% [16·8%] vs 1·5% [21·0%]) fueron mayores para el tralokinumab con respecto al placebo. El efecto en VEF1 fue evidente en 2 semanas y persistió hasta la semana 24 (figura 12). En la semana 13 una respuesta a la dosis fue evidente, aunque se observaron aumentos en VEF1 cualitativamente similares en los grupos de tralokinumab de 300 y 600 mg durante 10 las últimas 6 semanas del tratamiento. Se vieron aumentos en porcentaje de la media similares [DE] de VEF1 en la semana 13 en sujetos con asma atópica (12·9% [21·2%]) y no atópica (12·2% [20·2%]) que recibieron tralokinumab.

En la figura 14 se presentan los cambios en VEF1 en aquellos sujetos que proporcionaron una muestra de esputo en el valor de referencia, estratificados por la presencia o ausencia de IL-13. En la semana 13 la mejora en la media [DE] en el IL-13 en esputo positivo (≥1pg/mL) del grupo de tralokinumab (9.9 [11.4] % n=11) fue mayor que el 15 placebo (3.9 [9.0] % n=15) o IL-13 en esputo negativo (<1 pg/mL) del grupo de tralokinumab (2.9 [8.9] % n=26).

Uso del agonista β2 de rescate

La Tabla 7 resume el uso del agonista beta2 de rescate y la proporción de días sin medicación de alivio en comparación con la semana precedente al valor de referencia y la semana precedente al día 92 del estudio en los grupos de placebo y tralokinumab SC. El número medio de disparos con agonista beta2 de rescate fue similar en 20 ambos puntos de tiempo en el grupo de placebo (2.58 disparos en el valor de referencia y 2.5 disparos el día 92 del estudio). En contraste, el número medio de disparos con agonista beta2 de rescate fue menor el día 92 del estudio en comparación con el valor de referencia en el grupo de tratamiento de tralokinumab SC (2.48 disparos en el valor de referencia y 1.8 disparos el día 92 del estudio).

La proporción media de los días sin medicación de alivio en una semana en el grupo de placebo fue de 13.2% en el 25 valor de referencia y 22.0% el día 92 del estudio por una diferencia de 8.8%. En el grupo de tratamiento de tralokinumab SC combinado, la proporción media de los días sin medicación de alivio en una semana fue de 17.4% en el valor de referencia y 38.7% el día 92 del estudio por una diferencia de 21.3%.

Los sujetos en el grupo de tralokinumab combinado mostraron una reducción en la media [DE] significativamente mayor en el uso de agonista β2 en comparación con el placebo en la semana 13 (–0·68 [1·45] vs –0·10 [1·49] 30 disparos/día; p=0·020) y semana 24 (–0·73 [1·57] vs –0·05 [1·87] disparos/día; p=0·025). La proporción media de los días/semana sin medicación de alivio aumentó durante el estudio en los grupos de tralokinumab combinado con respecto al placebo (17·4% vs 13·2%, 38·7% vs 22·0%, 38·6% vs 28·6% en el valor de referencia, semana 13, semana 24, respectivamente).

Tabla 7 Resumen del uso de Agonista Beta2 de Rescate y los días sin medicación de alivio en el valor de referencia 35 y día 92 del estudio (Población evaluable)

Parámetro

Placebo (N=46) TRALOKINUMAB SC

150 mg (N=46)

300 mg (N=51) 600 mg (N=47) Combinado (N=144)

Uso de agonista Beta2 de rescate (Número promedio de disparos)

Valor de referencia

N

46 46 51 47 144

Media

2.58 2.84 2.04 2.62 2.48

DE

1.70 2.03 1.51 1.96 1.86

Mediana

2.14 2.07 1.86 2.00 2.00

Mín-Máx

(0.0-7.4) (0.0-7.7) (0.0-6.6) (0.0-9.1) (0.0-9.1)

Días 86-92 del estudio

Parámetro

Placebo (N=46) TRALOKINUMAB SC

150 mg (N=46)

300 mg (N=51) 600 mg (N=47) Combinado (N=144)

N

46 46 50 47 143

Media

2.5 2.0 1.8 1.7 1.8

DE

2.3 2.1 2.0 1.7 2.0

Mediana

2.0 1.8 1.3 1.7 1.4

Mín-Máx

(0-8) (0-8) (0-10) (0-6) (0-10)

Proporción de días sin medicación de alivio en una semana (%)

Valor de referencia

N

46 46 51 47 144

Media

13.2 12.1 24.1 15.3 17.4

DE

24.8 25.5 34.6 28.1 30.1

Mediana

0.0 0.0 0.0 0.0 0.0

Mín-Máx

(0-100) (0-100) (0-100) (0-100) (0-100)

Días 86-92 del estudio

N

46 46 50 47 143

Media

22.0 37.3 40.6 38.0 38.7

DE

36.5 43.3 43.6 45.2 43.8

Mediana

0.0 0.0 28.6 0.0 0.0

Mín-Máx

(0-100) (0-100) (0-100) (0-100) (0-100)

Máx = máximo; Mín = mínimo; N = número; FEP = flujo espiratorio pico; DE = desviación estándar.

Conclusiones sobre la eficacia

Se vio un aumento estadísticamente significativo en VEF1 desde el valor de referencia en el grupo de tratamiento de tralokinumab SC combinado en comparación con el placebo el día 92 del estudio. La magnitud de este cambio (0.204 L o 12.2%) es clínicamente importante, particularmente dado que se observó además de los medicamentos 5 controladores del asma actualmente disponibles. Se observó el efecto del tratamiento independientemente del estado atópica y también en sujetos que recibieron altas dosis de corticosteroides y/o esteroides orales.

Se cree que el aumento en VEF1 depende de la dosis, con los mayores aumentos vistos en los grupos de tratamiento de tralokinumab SC de 600 y 300 mg.

También se observaron aumentos del valor de referencia en FEP y CVF en el grupo de tratamiento de tralokinumab 10 SC combinado.

Se observó una reducción en el requisito para el uso de agonista beta2 de acción corta adicional en el grupo de tratamiento de tralokinumab SC combinado que es coherente con la mejora en VEF1 descrita anteriormente.

Criterio de valoración primario - cambio en la puntuación ACQ-6 desde el valor de referencia a la semana 13

La puntuación media de ACQ-6 mejoró desde el valor de referencia a la semana 13 en todos los grupos de 15 tratamiento (tabla 8; figura 11), con 84/ 144 (58·3%) de tralokinumab y 24/ 46 (52·2%) de placebo mostrando los sujetos una mejora de ≥0·5. La reducción de la media [DE] en el grupo tralokinumab combinado (–0·76 [1·04]) en la semana 13 no fue diferente del placebo (–0·61 [0·90]; p=0·375). La diferencia (95% IC) entre los grupos de

tratamiento en cambio desde el valor de referencia fue –0·15 (–0·49, 0·19). Las reducciones en la puntuación ACQ-6 se mantuvieron en la semana 24 en ambos grupos aunque no hubo diferencia en la media [DE] entre los grupos de tralokinumab (–0·79 [0·98]) y de placebo (–0·60 [1·00]; p=0·256).

Sin embargo, se observó una diferencia en la puntuación ACQ-6 en aquellos sujetos que proporcionaron una muestra de esputo en el valor de referencia, estratificados por la presencia o ausencia de IL-13, esto se presenta en 5 la figura 13; la reducción de la media [DE] de la semana 13 en ACQ-6 en el IL-13 en esputo positivo (≥1pg/mL) del grupo de tralokinumab (–0·97 [0.98] n=11) fue mayor que la del placebo (–0·43 [0·70] n=17) o IL-13 en esputo negativo (<1pg/mL) del grupo tralokinumab (–0.62 [0.85] n=28).

Tabla 8. Resumen del cambio desde el valor de referencia en la puntuación media de ACQ-6 y los parámetros de espirometría en las visitas de consultorio en la semana 13 (población evaluable).10

Placebo Tralokinumab

150 mg

300 mg 600 mg Tralokinumab combinado

Cambio de la puntuación media de ACQ-6 de referencia

n

46 46 51 47 144

Media (DE)

–0·61 (0·90) –0·73 (1·12) –0·70 (0·93) –0·86 (1·09) –0·76 (1·04)

Diferencia (95% IC)*

- –0·12 (–0·54, 0·30) –0·09 (–0·46, 0·28) –0·25 (–0·66, 0·16) –0·15 (–0·49, 0·19)

Valor P †

- 0·573 0·640 0·224 0·375

Cambio de VEF1 (L) del valor de referencia

n

42 44 49 44 137

Media (DE)

0·06 (0·48) 0·16 (0·35) 0·21 (0·37) 0·26 (0·41) 0·21 (0·38)

Diferencia (95% IC)*

- 0·09 (–0·09, 0·27) 0·15 (–0·03, 0·32) 0·20 (0·01, 0·39) 0·15 (–0·01, 0·31)

Valor P †

- 0·299 0·102 0·041 0·072

Cambio de % de la media (DE)§

4·3 (29·4) 8·1 (17·5) 13·3 (21·8) 16·1 (22·0) 12·5 (20·7)

Cambio de CVF (L) del valor de referencia

n

42 44 49 44 137

Media (DE)

0·00 (0·55) 0·18 (0·45) 0·12 (0·46) 0·21 (0·54) 0·17 (0·48)

Diferencia (95% IC)*

- 0·18 (–0·04, 0·39) 0·12 (–0·09, 0·33) 0·21 (–0·03, 0·44) 0·17 (-0·01, 0·34)

Valor P †

- 0·100 0·261 0·082 0·059

Cambio de % de la media (DE)§

1·5 (21·0) 6·4 (15·0) 5·5 (16·4) 9·6 (18·8) 7·1 (16·8)

Cambio de FEP (L/min) del valor de referencia

n

42 44 49 44 137

Media (DE)

14·2 (60·1) 27·5 (61·1) 30·0 (61·5) 38·2 (64·3) 31·8 (62·0)

Diferencia (95% IC)*

- 13·3 (–12·7, 39·3) 15·8 (–9·7, 41·2) 24·0 (–2·7, 50·7) 17·6 (–3·8, 39.0)

Valor P †

- 0·313 0·222 0·078 0·107

Cambio de % de la media (DE)§

5·4 (23·6) 11·0 (23·6) 14·1 (27·5) 16·5 (25·7) 13·9 (25·6)

ACQ-6 = Cuestionario de Control del Asma, media de puntuaciones de 6 ítems individuales. IC = intervalo de confianza. VEF1 = volumen espiratorio forzado en 1 s. CVF = capacidad vital forzada. FEP = flujo espiratorio pico. DE = desviación estándar. *Diferencia en el cambio de la media desde el valor de referencia: tralokinumab–placebo. Los valores p † se basaron en el análisis de la varianza. ‡Los valores p se calcularon utilizando una prueba t de 2 muestras. §Cambio desde el valor de referencia: valor de la visita actual - valor de referencia

Conclusiones de seguridad y tolerabilidad

La mayoría de los sujetos recibió las 7 dosis del producto en fase de investigación y existió una baja incidencia de sujetos que abandonaron el estudio. El tralokinumab administrado como una inyección SC en dosis de 150, 300 y 600 mg semana por medio durante 12 semanas fue generalmente bien tolerado. No se identificaron mayores cuestiones de seguridad. 5

Seguimiento después del tratamiento

A todos los sujetos se les dio seguimiento durante 12 semanas después de la última dosis del producto en fase de investigación y se llevó a cabo una espirometría el día 127 y día 169. Los aumentos en VEF1 que se observaron en sujetos tratados con tralokinumab el día 92 se mantuvieron a ambos puntos de tiempo después de realizado. El cambio de la media desde el valor de referencia en VEF1 el día 169 fue de 0.101 L en el grupo de placebo y 0.218 L 10 en el grupo de tratamiento de tralokinumab SC combinado (p = 0.096). Los aumentos numéricos en CVF y FEP observados el día 92 también se mantuvieron al día 169. Este hallazgo sugiere que los efectos beneficiosos de tralokinumab en la función de los pulmones pueden ser sostenidos por un periodo prolongado después de finalizado el tratamiento (ver figuras 10a y 10b).

Resumen 15

Se observó evidencia de un efecto clínico después de la adición de tralokinumab a los medicamentos para el asma estándares en sujetos con asma descontrolada, moderada a grave y persistente. La señal más convincente fue el aumento estadísticamente significativo en VEF1 el día 92 que también fue confirmado por las mejoras en CVF, FEP y la reducción en el uso de agonista beta2 de acción corta. La mejora en la obstrucción de flujo de aire se observó tan pronto como el día 15 después de la asignación aleatoria. En lo que respecta a la diferenciación entre las dosis 20 de tralokinumab, los efectos del tratamiento más grandes se observaron en un grupo de tratamiento de tralokinumab SC de 600 mg pero los cambios clínicamente importantes en VEF1 también se observaron en el grupo de tratamiento de tralokinumab SC de 300 mg. La mejora en VEF1 en el grupo de tratamiento de tralokinumab se mantuvo en el periodo de seguimiento de 12 semanas después del tratamiento. Un subconjunto de sujetos estratificados en IL-13 en esputo positivo o negativo demostró una asociación entre la presencia de IL-13 en esputo 25 y la respuesta a tralokinumab evaluada por ACQ-6.

Un cuerpo de evidencia en crecimiento implica IL-13 como un mediador fundamental en el desarrollo y mantenimiento del asma. Este estudio investigó el efecto aditivo de tralokinumab, un anticuerpo monoclonal de IgG4 humana que neutraliza IL-13 potente y específico, en la terapia controladora del asma actualmente disponible, en sujetos con asma descontrolada moderada a grave. Los aumentos en VEF1 y CVF y la reducción en el uso de 30 agonistas β2 de acción corta en sujetos tratados con tralokinumab son indicativos de un efecto del tratamiento. La magnitud del aumento en VEF1 se aproxima a la diferencia importante mínima de 10% (Reddel et al., (2009)) que sugiere que este anticuerpo es capaz de administrar un beneficio clínicamente importante.

El uso de tralokinumab resultó en una reducción en la necesidad de agonistas β de acción corta de "rescate" (SABA) que es coherente con la mejora observada en VEF1. El mayor tamaño de efecto se observó en el grupo de 35 tratamiento de 600 mg. El efecto beneficioso en VEF1 se observó independientemente de un estado atópica en el valor de referencia y también en sujetos que recibieron altas dosis de corticosteroides inhalados y/o esteroides orales y persistieron durante 12 semanas después del último tratamiento.

Debido a que el asma es una enfermedad heterogénea, es importante la identificación de subgrupos de pacientes o características individuales de paciente/enfermedad al proporcionar un beneficio óptimo con productos 40 bioterapéuticos que, por diseño, se dirigen a mecanismos específicos. Postulamos que los sujetos que tienen IL-13 de las vías respiratorias regulada hacia arriba pueden beneficiarse mejor del tratamiento con la terapia neutralizante de IL-13. Exploramos este concepto en nuestro estudio al examinar 56 sujetos que suministraron una muestra de esputo de referencia. Cuando los sujetos se estratificaron en IL-13 en esputo positivo o negativo existió una asociación entre la presencia de IL-13 y la respuesta a tralokinumab (figuras 13 y 14). Todos estos datos 45 demuestran que los sujetos con IL-13 de pulmón regulada hacia arriba reciben los mayores beneficios clínicos de las terapias que neutralizan IL-13 tales como tralokinumab.

Ejemplo 2: Medición de IL-13 en esputo

Descripción del ensayo Se midió el IL-13 libre utilizando la tecnología Luminex (Millipore, Billerica, MA). Se suministraron reactivos 50 necesarios en el kit de ensayo, todos los pasos se llevaron a cabo a temperatura ambiente, y la placa de ensayo se selló y se ubicó en un agitador de placas con agitación moderada para todos los pasos de incubación. Brevemente, los pocillos se pre-humedecieron con un 200µl/pocillo en solución amortiguadora de ensayo durante ≥ 10 minutos. Se preparó una perla conjugada por anticuerpos anti-IL-13 en solución amortiguadora de disolución de perlas y se agregó a la placa de ensayo a 25µl/pocillo; se aplicó un vacío para retirar la solución amortiguadora de disolución de 55 perlas. Los estándares de referencia (ER), controles de calidad (CC), y control negativo (CN) preparados en la solución amortiguadora del ensayo se agregaron a la placa de ensayo a 25µl/pocillo. Se agregaron muestras de prueba (suero puro) a 25µl/pocillo. La placa de ensayo se incubó durante 60 ± 10 minutos. Se retiraron analitos no unidos mediante el lavado de la placa dos veces con solución amortiguadora de lavado 1x. Para detectar el analito unido, se agregó el anticuerpo de detección anti-IL-13 conjugado por biotina y se incubó la placa de ensayo durante 60 ± 10 minutos. Luego se agregó tinción de Estreptavidina conjugada por PE (SA-PE) en 25µl/pocillo y la placa de ensayo se incubó durante 30 ± 5 minutos adicionales. Se retiró la tinción y el anticuerpo de detección en exceso 5 mediante el lavado de la placa dos veces con solución amortiguadora de lavado 1x. Se agregó fluido de vaina Luminex a 150µl/pocillo y la placa se ubicó en un agitador de placas durante ≥ 5 minutos antes de las lecturas. La intensidad fluorescente, medida en el lector de placas Luminex200, fue proporcional a la concentración de IL-13 en la muestra. La presencia de ≥1pg/ml IL-13 en esputo de un sujeto con asma fue indicativo que el sujeto tenía IL-13 detectable en esputo ("IL-13 en esputo positivo"). Un valor de <1 pg/ml IL-13 en esputo fue indicativo que el sujeto 10 no tenía IL-13 detectable en esputo y de este modo el sujeto fue "IL-13 en esputo negativo". Reactivos 1. MPXHCYTO-60K (Luminex Kit Cat# MPXHCYTO-60K): Placa de ensayo de filtro: Cat# MX-PLATE Perlas conjugadas con anticuerpos anti-IL-13: Cat# MXHIL-13, región de perlas 50, 50x solución 15 concentrada Estándares de referencia, rh IL-13: Cat# MXH8060 Control de calidad N°1 y N°2: MXH6060 y MXH6060-2 Anticuerpo de detección anti-IL-13 conjugado con biotina: Cat# MXH1060-1, 1x solución concentrada Tinción de detección de Estreptavidina-Ficoeritrina: Cat# L-SAPE9, 1x solución concentrada 20 Soluciones amortiguadoras: Solución amortiguadora de ensayo (1x), Solución amortiguadora de disolución de perlas (1x), Solución amortiguadora de lavado (25x) 2. Fluido de vaina Luminex Cat# 40-50000

Protocolo del ensayo

Los reactivos del ensayo se equilibraron a temperatura ambiente. Una alícuota de 200µl de la solución 25 amortiguadora de ensayo se transfirió a cada pocillo de una placa de filtro de 96 pocillos, la placa se selló e incubó en una agitadora de placas durante ≥ 10 minutos. Se prepararon ocho niveles de estándar de referencia (ER) mediante la disolución de los estándares de referencia IL-3 humano recombinante en solución amortiguadora de ensayo. Se utilizaron las siguientes concentraciones: 2500.0, 833.3, 277.8, 92.6, 30.9, 10.3, 3.4 y 1.1 pg/ml. Se prepararon 3 niveles de control de calidad (CC) en solución amortiguadora de ensayo. Se utilizaron las siguientes 30 concentraciones: 1000.0, 10.0 pg/ml. El control negativo (CN) (0.0 ng/ml) se preparó con la solución amortiguadora de ensayo. Las muestras de suero de prueba se descongelaron sobre hielo y se sometieron a agitación vertical brevemente. La perla conjugada por anticuerpos anti-IL-13 se diluyó 1:50 en solución amortiguadora de disolución de perlas. Se aplicó un vacío para retirar la solución amortiguadora, el fondo de la placa se transfirió en papel absorbente. Una alícuota de 25µl/pocillo de la solución de perla diluida se transfirió a la placa. Se aplicó vacío a la 35 placa como se mencionó anteriormente. Las alícuotas de 25µl/pocillo de las muestras de ER, CC, CN, y suero se transfirieron a la placa; la cual luego se selló e incubó durante 60 ± 10 minutos en una plataforma rotatoria con agitación moderada. La solución amortiguadora de lavado 1X se preparó a partir de stock de solución amortiguadora de lavado 25X. La placa se lavó dos veces con 200µl/pocillo de solución amortiguadora de lavado 1X. Una alícuota de 25µl/pocillo del anticuerpo de detección anti-IL-13 conjugado por biotina se transfirió a la placa; la placa se selló e 40 incubó durante 60 ± 10 minutos en una plataforma rotatoria con agitación moderada. Una alícuota de 25µl/pocillo de la tinción de Estreptavidina se transfirió a la placa; la placa se selló e incubó durante 30 ± 5 minutos en una plataforma rotatoria con agitación moderada. La placa se lavó dos veces con 200µl/pocillo de solución amortiguadora de lavado 1X. Una alícuota de 150µl/pocillo del fluido de vaina Luminex se transfirió a la placa y la placa se agitó en un agitador de placas durante ≥ 5 minutos. La placa se leyó en la lectora de placas Luminex200 45 Plate.

Ejemplo 3

Este es un estudio de fase 2b, aleatorizado, doble ciego, controlado con placebo, de brazos paralelos, multicéntrico para evaluar la eficacia y seguridad de dos regímenes de tratamiento SC de tralokinumab en sujetos adultos con asma descontrolada y grave que requieren una dosis alta de ICS y LABA con o sin medicamentos controladores 50 adicionales (dosis alta de ICS definida como una dosis diaria total > 500 μg de inhalador de polvo seco [DPI] de fluticasona o > 440 μg de inhalador de dosis medida [MDI]; GINA, 2009; Instituto Nacional del Corazón, Pulmón y Sangre, 2007). Los sujetos serán aleatorizados en una relación 1:1 con uno de 2 cohortes (Cohorte 1 o Cohorte 2).

Dentro de cada cohorte, los sujetos serán aleatorizados en una relación 2:1 para recibir tralokinumab (300 mg) o placebo de la siguiente manera:

Cohorte 1: Tralokinumab 300 mg (n = 130) o Placebo (n = 65) como 2 inyecciones SC cada 2 semanas (Q2W) durante 50 semanas por un total de 26 dosis

Cohorte 2: Tralokinumab 300 mg (n = 130) o Placebo (n = 65) como 2 inyecciones SC Q2W durante 12 semanas 5 seguido por cada 4 semanas (Q4W) durante 38 semanas por un total de 16 dosis

Los sujetos se estratificaron en la selección según el número de exacerbaciones de asma en los últimos 12 meses (2 con respecto a > 2 pero ≤ 6 exacerbaciones) y mediante el uso de corticosteroides orales crónicos (OCS) (presencia con respecto a ausencia).

Un periodo de selección/inicial de 5 semanas (Semana -5 a -1 [Día -1] precederá a la administración del producto en 10 fase de investigación. Comenzando en la Semana -4 (Día -28), los sujetos recibirán un producto de combinación de dosis fija de fluticasona/salmeterol, ya sea como un MDI (230μg/21 μg) en una dosis de 2 inhalaciones dos veces por día o como una DPI (500 μg/50 μg) en una dosis de una inhalación dos veces por día. A los sitios/sujetos se les permitirá usar cualquiera de las presentaciones de fluticasona/salmeterol si está aprobado y disponible para su uso en su país. Si el sujeto también está tomando medicamentos controladores del asma adicionales (incluyendo 15 modificadores de leucotrieno, teofilia, cromones, o OCS ≤ 20 mg/día), luego estos medicamentos deben continuarse en una dosis estable durante el periodo de selección/inicial. Durante el estudio, los sujetos pueden usar una terapia de analgésicos inhalados (por ejemplo, agonista β2 de acción corta o anticolinérgico de acción corta) en una base a lo requerido como se documentó en su Plan de Acción para el Asma Personalizado.

Los sujetos continuarán recibiendo el mismo producto de combinación de dosis fija de fluticasona/salmeterol con o 20 sin medicamentos controladores del asma adicionales en una dosis estable durante el periodo de tratamiento y en la semana 53. Los sujetos que experimenten una exacerbación del asma durante el periodo de tratamiento serán tratados adecuadamente y permanecerán en el estudio. Los sujetos regresarán a la clínica en la semana 53 para una evaluación de los criterios de valoración de eficacia. Los sujetos tendrán 3 visitas de seguimiento adicionales en las semanas 59, 67 y 75. Después de la visita de la semana 53, los medicamentos de base pueden cambiarse como 25 se considere necesario por el investigador. Como parte del estudio, sitios seleccionados tomarán parte en un sub-estudio utilizando un escáner CT para medir los cambios estructurales de la pared de flujo de aire potenciales incluyendo el grosor de la pared de flujo de aire. Los sitios se seleccionarán según su capacidad y voluntad de llevar a cabo los escaneos. La participación en este sub-estudio es opcional para sujetos en los sitios seleccionados. Un número adecuado de sitios se identificarán con el fin de dirigir el reclutamiento de aproximadamente 40 sujetos en 30 cada uno de los 2 cohortes para el sub-estudio CT. Los sujetos estarán en el estudio durante 79 semanas, incluyendo un periodo de selección/inicial de 5 semanas (Semana -5 a Semana -1), un periodo de tratamiento de 48- o 50- semanas (Semanas 1-51 para el Cohorte 1 y Semanas 1-49 para el Cohorte 2), y un periodo de seguimiento de 24 semanas (Semanas 51-75).

Población de sujetos 35

Los sujetos en este estudio serán adultos con 18-75 años de edad con asma descontrolada y grave que requieren una dosis alta de ICS y LABA con o sin medicamentos controladores adicionales.

Régimen de tratamiento

Un total de 390 sujetos serán aleatorizados en una relación 1:1 con uno de los 2 cohortes. Dentro de cada cohorte, los sujetos serán aleatorizados en una relación 2:1 para recibir tralokinumab SC (300 mg) o placebo. El producto en 40 fase de investigación (tralokinumab o placebo) se administrará como 2 inyecciones SC de 1 mL ya sea de Q2W durante 50 semanas por un total de 26 dosis (Cohorte 1) o Q2W durante 12 semanas seguido de Q4W durante 38 semanas por un total de 16 dosis (Cohorte 2).

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Información del listado de secuencias

Tralokinumab (BAK502G9, CAT-354):

SEQ ID NO: 7 es HCDR1;

SEQ ID NO: 8 es HCDR2; 15

SEQ ID NO: 9 es HCDR3;

SEQ ID NO: 10 es LCDR1;

SEQ ID NO: 11 es LCDR2; y

SEQ ID NO: 12 es LCDR3.

SEQ ID NO: 15 es fragmento VH 20

SEQ ID NO: 16 es fragmento VL

Variantes de Tralokinumab (HCDR1, 2, 3, LCDR1, 2, 3)

BAK278D6 (SEQ ID NOS: 1, 2, 3, 4, 5, 6)

BAK1183H4 (SEQ ID NOS: 97, 98, 99, 100, 101, 102),

BAK1167F02 (SEQ ID NOS: 64, 65, 66, 67, 68, 69), 25

BAKllllD10 (SEQ ID NOS: 91, 92, 93, 94, 95, 96),

BAK1166G02 (SEQ ID NOS: 67, 68, 69, 70, 71, 72),

BAK1167F04 (SEQ ID NOS: 85, 86, 87, 88, 89, 90),

BAK1184C8 (SEQ ID NOS: 73, 74, 75, 76, 77, 78),

BAK1185E1 (SEQ ID NOS: 79, 80, 81, 82, 83, 84), y 30

BAK1185F8(SEQ ID NOS: 103, 104, 105, 106, 107, 108).

Variantes de tralokinumab (VH, VL)

BAK278D6 (VH SEQ ID NO: 13, VL SEQ ID NO; 14)

BAK1183H4 (VH SEQ ID NO: 37, VL SEQ ID NO: 38),

BAK1167F02 (VH SEQ ID NO: 35, VL SEQ ID NO: 36), 35

BAKllllD10 (VH SEQ ID NO: 41, VL SEQ ID NO: 42),

BAK1166G02 (VH SEQ ID NO: 53, VL SEQ ID NO: 54),

BAK1167F04 (VH SEQ ID NO: 43, VL SEQ ID NO: 44),

BAK1184C8 (VH SEQ ID NO: 45, VL SEQ ID NO: 46),

BAK1185E1 (VH SEQ ID NO: 47, VL SEQ ID NO: 48),

BAK1185F8 (VH SEQ ID NO: 49, VL SEQ ID NO: 50).

BAK278D6

CADENA PESADA

CDR1- SEQ ID NO 1: NYGLS 5

CDR2- SEQ ID NO 2: WISANNGDTNYGQEFQG

CDR3- SEQ ID NO 3: DSSSNWARWFFDL

BAK278D6

CADENA LIVIANA

CDR1- SEQ ID NO 4: GGNNIGSKLVH 10

CDR2- SEQ ID NO 5: DDGDRPS

CDR3- SEQ ID NO 6: QVWDTGSDPVV

BAK502G9

CADENA PESADA

CDR1-SEQ ID NO 7: NYGLS 15

CDR2-SEQ ID NO 8: WISANNGDTNYGQEFQG

CDR3-SEQ ID NO 9: DSSSSWARWFFDL

CADENA LIVIANA

CDR1-SEQ ID NO 10: GGNIIGSKLVH

CDR2-SEQ ID NO 11: DDGDRPS 20

CDR3-SEQ ID NO 12: QVWDTGSDPVV

BAK278D6

DOMINIO DE CADENA PESADA

SEQ ID NO 13:

EVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFRNYGLSWVRQAPGQGLEWMGWISANNGDTNYGQEFQGRITMTTETS25 TNTAHMELRSLRSDDTAVYYCVRDSSSNWARWFFDLWGKGTMVTVSS

BAK278D6

DOMINIO DE CADENA LIVIANA

SEQ ID NO 14:

SYVLTQPPSVSVAPGQTARIPCGGNNIGSKLVHWYQQKPGQAPVLVVYDDGDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISRID30 AGDEADYYCQVWDTGSDPVVFGGGTKLTVL

BAK502G9

DOMINIO DE CADENA PESADA

SEQ ID NO 15:

QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYGLSWVRQAPGQGLEWMGWISANNGDTNYGQEFQGRVTMTTDT35 STSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARDSSSSWARWFFDLWGRGTLVTVSS

BAK502G9

DOMINIO DE CADENA LIVIANA

SEQ ID NO 16:

SYVLTQPPSVSVAPGKTARITCGGNIIGSKLVHWYQQKPGQAPVLVIYDDGDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDTGSDPVVFGGGTKLTVL 5

BAK278D6

CADENA PESADA

FR1- SEQ ID NO 17: EVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFR

FR2- SEQ ID NO 18: WVRQAPGQGLEWMG

FR3- SEQ ID NO 19: RITMTTETSTNTAHMELRSLRSDDTAVYYCVR 10

BAK278D6

CADENA LIVIANA

FR1- SEQ ID NO 20: SYVLTQPPSVSVAPGQTARIPC

FR2- SEQ ID NO 21: WYQQKPGQAPVLVVY

FR3- SEQ ID NO 22: GIPERFSGSNSGNTATLTISRIDAGDEADYYC 15

BAK167A11

DOMINIO DE CADENA PESADA

SEQ ID NO 23: EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARVGAAGEGYYGYWGRGTLVTVSS 20

BAK167A11

DOMINIO DE CADENA LIVIANA

SEQ ID NO 24:

NFMLTQPHSVSESPGKTVTISCTRSSGSIASNYVQWYQQRPGSAPTTVIYDDNQRPSGVPDRFSGSIDSSSNSASLTISGLKTEDEADYYCQSYDSNNDVFGGGTKVTVL 25

BAK209B11

DOMINIO DE CADENA PESADA

SEQ ID NO 25:

QVQLQESGGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYGMSWVRQAPGKGLEWVSSISASGDSTFYADSVKGRFTISRDNNKNMVFLQVNSLRADDTAVYFCAKDWSQWLVGDAFDVWGRGTTVTVSS 30

BAK209B11

DOMINIO DE CADENA LIVIANA

SEQ ID NO 26:

DIQLTQSPSTLSASVGDRVTITCRASQSVSLWVAWYQQRPGKAPKLLIYDGSTLQSGVPARFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQYKTFSTFGQGTKVEIKRA 35

BAK502G9

CADENA PESADA

FR1- SEQ ID NO 27: QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFT

FR2- SEQ ID NO 28: WYRQAPGQGLEWMG

FR3- SEQ ID NO 29: RVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCAR

BAK502G9

CADENA LIVIANA

FR1- SEQ ID NO 30: SYVLTQPPSVSVAPGKTARITC

FR2- SEQ ID NO 31: WYQQKPGQAPVLVIY 5

FR3- SEQ ID NO 32: GIPERFSGSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYC

BAK615E3

DOMINIO DE CADENA PESADA

SEQ ID NO 33:

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSK10 NTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARVGKATTEEGYYGYWGRGTLVTVSS

BAK615E3

DOMINIO DE CADENA LIVIANA

SEQ ID NO 34:

NFMLTQPHSVSESPGKTVTISCTRSSGSIASNYVQWYQQRPGSAPTTVIYDDNQRPSGVPDRFSGSIDSSSNSASLTI15 SGLKTEDEADYYCQSYDSNNDVFGGGTKVTVL

BAK1167F2

DOMINIO DE CADENA PESADA

SEQ ID NO 35:

QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFEQTGVSWVRQAPGQGLEWMGWISANNGDTNYGQEFQGRVTMTTDT20 STSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARDSSSSWARWFFDLWGRGTLVTVSS

BAK1167F2

DOMINIO DE CADENA LIVIANA

SEQ ID NO 36:

SYVLTQPPSVSVAPGKTARITCGGNIIGSKLVHWYQQKPGQAPVLVIYDDGDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISRVEA25 GDEADYYCQVWDTGSDPVVFGGGTKLTVL

BAK1183H4

DOMINIO DE CADENA PESADA

SEQ ID NO 37:

QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYGLSWVRQAPGQGLEWMGWINYDGGNTQYGQEFQGRVTMTTDT30 STSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARDSSSSWARWFFDLWGRGTLVTVSS

BAK1183H4

DOMINIO DE CADENA LIVIANA

SEQ ID NO 38:

SYVLTQPPSVSVAPGKTARITCGGNIIGSKLVHWYQQKPGQAPVLVIYDDGDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISRVEA35 GDEADYYCQVWDTGSDPVVFGGGTKLTVL

BAK1105H3

DOMINIO DE CADENA PESADA

SEQ ID NO 39:

QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYGLSWVRQAPGQGLEWMGWISGLNGETLYGQEFQGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARDSSSSWARWFFDLWGRGTLVTVSS

BAK1105H3

DOMINIO DE CADENA LIVIANA

SEQ ID NO 40: 5

SYVLTQPPSVSVAPGKTARITCGGNIIGSKLVHWYQQKPGQAPVLVIYDDGDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDTGSDPVVFGGGTKLTVL

BAK1111D10

DOMINIO DE CADENA PESADA

SEQ ID NO 41: 10

QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYGLSWVRQAPGQGLEWMGWIATPDGQTSYGQEFQGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARDSNSSWARWFFDLWGRGTLVTVSS

BAK1111D10

DOMINIO DE CADENA LIVIANA

SEQ ID NO 42: 15

SYVLTQPPSVSVAPGKTARITCGGNIIGSKLVHWYQQKPGQAPVLVIYDDGDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDTGSDPVVFGGGTKLTVL

BAK1167F4

DOMINIO DE CADENA PESADA

SEQ ID NO 43: 20

QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFIDTGVSWVRQAPGQGLEWMGWISANNGDTNYGQEFQGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARDSSSSWARWFFDLWGRGTLVTVSS

BAK1167F4

DOMINIO DE CADENA LIVIANA

SEQ ID NO 44: 25

SYVLTQPPSVSVAPGKTARITCGGNIIGSKLVHWYQQKPGQAPVLVIYDDGDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDTGSDPVVFGGGTKLTVL

BAK1184C8

DOMINIO DE CADENA PESADA

SEQ ID NO 45: 30

QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYGLSWVRQAPGQGLEWMGWISGSNGYTSYGQEFQGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARDSSSSWARWFFDLWGRGTLVTVSS

BAK1184C8

DOMINIO DE CADENA LIVIANA

SEQ ID NO 46: 35

SYVLTQPPSVSVAPGKTARITCGGNIIGSKLVHWYQQKPGQAPVLVIYDDGDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDTGSDPVVFGGGTKLTVL

BAK1185E1

DOMINIO DE CADENA PESADA

SEQ ID NO 47: 40

QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYGLSWVRQAPGQGLEWMGWINDATGDTQYGQEFQGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARDSSSSWARWFFDLWGRGTLVTVSS

BAK1185E1

DOMINIO DE CADENA LIVIANA

SEQ ID NO 48: 5

SYVLTQPPSVSVAPGKTARITCGGNIIGSKLVHWYQQKPGQAPVLVIYDDGDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDTGSDPVVFGGGTKLTVL

BAK1185F8

DOMINIO DE CADENA PESADA

SEQ ID NO 49: 10

QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYGLSWVRQAPGQGLEWMGWIRNIDGYTIYGQEFQGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARDSSSSWARWFFDLWGRGTLVTVSS

BAK1185F8

DOMINIO DE CADENA LIVIANA

SEQ ID NO 50: 15

SYVLTQPPSVSVAPGKTARITCGGNIIGSKLVHWYQQKPGQAPVLVIYDDGDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDTGSDPVVFGGGTKLTVL

BAK1187B4

DOMINIO DE CADENA PESADA

SEQ ID NO 51: 20

QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYGLSWVRQAPGQGLEWMGWIDDDSGTTIYGQEFQGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARDSSSSWARWFFDLWGRGTLVTVSS

BAK1187B4

DOMINIO DE CADENA LIVIANA

SEQ ID NO 52: 25

SYVLTQPPSVSVAPGKTARITCGGNIIGSKLVHWYQQKPGQAPVLVIYDDGDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDTGSDPVVFGGGTKLTVL

BAK1166G2

DOMINIO DE CADENA PESADA

SEQ ID NO 53: 30

QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFANTGISWVRQAPGQGLEWMGWISANNGDTNYGQEFQGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARDSSSSWARWFFDLWGRGTLVTVSS

BAK1166G2

DOMINIO DE CADENA LIVIANA

SEQ ID NO 54: 35

SYVLTQPPSVSVAPGKTARITCGGNIIGSKLVHWYQQKPGQAPVLVIYDDGDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDTGSDPVVFGGGTKLTVL

BAK167A11

CADENA PESADA

CDR1- SEQ ID NO 55: SYAMS 40

CDR2- SEQ ID NO 56: AISGSGGSTYYADSVKG

CDR3- SEQ ID NO 57: VGAAGEGYYGY

BAK167A11

CADENA LIVIANA

CDR1- SEQ ID NO 58: TRSSGSIASNYVQ 5

CDR2- SEQ ID NO 59: DDNQRPS

CDR3- SEQ ID NO 60: QSYDSNNDV

BAK1167F2

CADENA PESADA

CDR1- SEQ ID NO 61: QTGVS 10

CDR2- SEQ ID NO 62: WISANNGDTNYGQEFQG

CDR3- SEQ ID NO 63: DSSSSWARWFFDL

BAK1167F2

CADENA LIVIANA

CDR1- SEQ ID NO 64: GGNIIGSKLVH 15

CDR2- SEQ ID NO 65: DDGDRPS

CDR3- SEQ ID NO 66: QVWDTGSDPVV

BAK1166G2

CADENA PESADA

CDR1- SEQ ID NO 67: NTGIS 20

CDR2- SEQ ID NO 68: WISANNGDTNYGQEFQG

CDR3- SEQ ID NO 69: DSSSSWARWFFDL

BAK1166G2

CADENA LIVIANA

CDR1- SEQ ID NO 70: GGNIIGSKLVH 25

CDR2- SEQ ID NO 71: DDGDRPS

CDR3- SEQ ID NO 72: QVWDTGSDPVV

BAK1184C8

CADENA PESADA

CDR1- SEQ ID NO 73: NYGLS 30

CDR2- SEQ ID NO 74: WISGSNGYTSYGQEFQG

CDR3- SEQ ID NO 75: DSSSSWARWFFDL

BAK1184C8

CADENA LIVIANA

CDR1- SEQ ID NO 76: GGNIIGSKLVH 35

CDR2- SEQ ID NO 77: DDGDRPS

CDR3- SEQ ID NO 78: QVWDTGSDPVV

BAK1185E1

CADENA PESADA

CDR1- SEQ ID NO 79: NYGLS

CDR2- SEQ ID NO 80: WINDATGDTQYGQEFQG 5

CDR3- SEQ ID NO 81: DSSSSWARWFFDL

BAK1185E1

CADENA LIVIANA

CDR1- SEQ ID NO 82: GGNIIGSKLVH

CDR2- SEQ ID NO 83: DDGDRPS 10

CDR3- SEQ ID NO 84: QVWDTGSDPVV

BAK1167F4

CADENA PESADA

CDR1- SEQ ID NO 85: DTGVS

CDR2- SEQ ID NO 86: WISANNGDTNYGQEFQG 15

CDR3- SEQ ID NO 87: DSSSSWARWFFDL

BAK1167F4

CADENA LIVIANA

CDR1- SEQ ID NO 88: GGNIIGSKLVH

CDR2- SEQ ID NO 89: DDGDRPS 20

CDR3- SEQ ID NO 90: QVWDTGSDPVV

BAK1111D10

CADENA PESADA

CDR1- SEQ ID NO 91: NYGLS

CDR2- SEQ ID NO 92: WIATPDGQTSYGQEFQG 25

CDR3- SEQ ID NO 93: DSNSSWARWFFDL

BAK1111D10

CADENA LIVIANA

CDR1- SEQ ID NO 94: GGNIIGSKLVH

CDR2- SEQ ID NO 95: DDGDRPS 30

CDR3- SEQ ID NO 96: QVWDTGSDPVV

BAK1183H4

CADENA PESADA

CDR1- SEQ ID NO 97: NYGLS

CDR2- SEQ ID NO 98: WINYDGGNTQYGQEFQG 35

CDR3- SEQ ID NO 99: DSSSSWARWFFDL

BAK1183H4

CADENA LIVIANA

CDR1- SEQ ID NO 100: GGNIIGSKLVH

CDR2- SEQ ID NO 101: DDGDRPS

CDR3- SEQ ID NO 102: QVWDTGSDPVV 5

BAK1185H8

CADENA PESADA

CDR1- SEQ ID NO 103: DYGLS

CDR2- SEQ ID NO 104: WRINDGYTIYGQEFQG

CDR3- SEQ ID NO 105: DSSSSWARWFFDL 10

BAK1185H8

CADENA LIVIANA

CDR1- SEQ ID NO 106: GGNIIGSKLVH

CDR2- SEQ ID NO 107: DDGDRPS

CDR3- SEQ ID NO 108: QVWDTGSDPVV 15

BAK278D6

CADENA PESADA- SEQ ID NO: 109

CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGTTACACCTTTACAAATTATGGTCTCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAGCGCTAATAATGGCGACACAAATTATGGACAGGAATTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCACAGATAC20 ATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGTTGAGGAGCCTGAGATCTGACGACACGGCCGTTTATTACTGTGCGAGAGACTCCAGCAGCAACTGGGCCCGCTGGTTTTTCGATCTCTGGGGCCGGGGGACACTGGTCACCGTCTCCTCA

BAK278D6

CADENA LIVIANA- SEQ ID NO:110

TCCTATGTGCTGACTCAGCCACCCTCGGTGTCAGTGGCCCCAGGTAAGACGGCCAGGATTACCTGTGGGGGAA25 ACAACATTGGAAGTAAACTTGTACACTGGTACCAGCAGAAGCCAGGCCAGGCCCCTGTGCTGGTCATCTATGATGATGGCGACCGGCCCTCAGGGATCCCTGAGCGATTCTCTGGCTCCAACTCTGGGAACACGGCCACCCTGACCATCAGCAGGGTCGAGGCCGGGGATGAGGCCGACTATTATTGTCAGGTGTGGGATACTGGTAGTGATCCCGTGGTATTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTAGGT

BAK502G9 30

CADENA PESADA- SEQ ID NO:111

CAGGTCCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGTTACACCTTTACAAATTATGGTCTCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAGCGCTAATAATGGCGACACAAATTATGGACAGGAATTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCACAGATACATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGTTGAGGAGCCTGAGATCTGACGACACGGCCGTTTATTACTGTGCGAGAG35 ACTCCAGCAGCAGCTGGGCCCGCTGGTTTTTCGATCTCTGGGGCCGGGGGACACTGGTCACCGTCTCCTCA

BAK502G9

CADENA LIVIANA- SEQ ID NO:112

TCCTATGTGCTGACTCAGCCACCCTCGGTGTCAGTGGCCCCAGGAAAGACGGCCAGGATTACCTGTGGGGGAAACATCATTGGAAGTAAACTTGTACACTGGTACCAGCAGAAGCCAGGCCAGGCCCCTGTGCTGGTCATCTATGAT40 GATGGCGACCGGCCCTCAGGGATCCCTGAGCGATTCTCTGGCTCCAACTCTGGGAACACGGCCACCCTGACCATCAGCAGGGTCGAGGCCGGGGATGAGGCCGACTATTATTGTCAGGTGTGGGATACTGGTAGTGATCCCGTGGTATTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTAGGT

BAK1105H03

CADENA PESADA- SEQ ID NO: 113

CAGGTCCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGTTACACCTTTACAAATTATGGTCTCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCTCCGGCTTGAACGGCGAGACATTGTATGGACAGGAATTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCACAGATAC5 ATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGTTGAGGAGCCTGAGATCTGACGACACGGCCGTTTATTACTGTGCGAGAGACTCCAGCAGCAGCTGGGCCCGCTGGTTTTTCGATCTCTGGGGCCGGGGGACACTGGTCACCGTCTCCTCA

BAK1105H03

CADENA LIVIANA- SEQ ID NO: 114

TCCTATGTGCTGACTCAGCCACCCTCGGTGTCAGTGGCCCCAGGAAAGACGGCCAGGATTACCTGTGGGGGAA10 ACATCATTGGAAGTAAACTTGTACACTGGTACCAGCAGAAGCCAGGCCAGGCCCCTGTGCTGGTCATCTATGATGATGGCGACCGGCCCTCAGGGATCCCTGAGCGATTCTCTGGCTCCAACTCTGGGAACACGGCCACCCTGACCATCAGCAGGGTCGAGGCCGGGGATGAGGCCGACTATTATTGTCAGGTGTGGGATACTGGTAGTGATCCCGTGGTATTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTAGGT

BAK1111D10 15

CADENA PESADA- SEQ ID NO:115

CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGTTACACCTTTACAAATTATGGTCTCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCGCAACCCCAGACGGCCAGACAAGCTATGGACAGGAATTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCACAGATACATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGTTGAGGAGCCTGAGATCTGACGACACGGCCGTTTATTACTGTGCGAGA20 GACTCCAACAGCAGCTGGGCCCGCTGGTTTTTCGATCTCTGGGGCCGGGGGACACTGGTCACCGTCTCCTCA

BAK1111D10

CADENA LIVIANA- SEQ ID NO:116

TCCTATGTGCTGACTCAGCCACCCTCGGTGTCAGTGGCCCCAGGAAAGACGGCCAGGATTACCTGTGGGGGAAACATCATTGGAAGTAAACTTGTACACTGGTACCAGCAGAAGCCAGGCCAGGCCCCTGTGCTGGTCATCTATGAT25 GATGGCGACCGGCCCTCAGGGATCCCTGAGCGATTCTCTGGCTCCAACTCTGGGAACACGGCCACCCTGACCATCAGCAGGGTCGAGGCCGGGGATGAGGCCGACTATTATTGTCAGGTGTGGGATACTGGTAGTGATCCCGTGGTATTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTAGGT

BAK 1167F2

CADENA PESADA- SEQ ID NO: 117 30

CAAGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGTTACACCTTTGAGCAGACCGGCGTCTCCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAGCGCTAATAATGGCGACACAAATTATGGACAGGAATTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCACAGATACATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGTTGAGGAGCCTGAGATCTGACGACACGGCCGTTTATTACTGTGCGAGAGACTCCAGCAGCAGCTGGGCCCGCTGGTTTTTCGATCTCTGGGGCCGGGGGACACTGGTCACCGTCTCCTCA 35

BAK 1167F2

CADENA LIVIANA- SEQ ID NO:118

TCCTATGTGCTGACTCAGCCACCCTCGGTGTCAGTGGCCCCAGGAAAGACGGCCAGGATTACCTGTGGGGGAAACATCATTGGAAGTAAACTTGTACACTGGTACCAGCAGAAGCCAGGCCAGGCCCCTGTGCTGGTCATCTATGATGATGGCGACCGGCCCTCAGGGATCCCTGAGCGATTCTCTGGCTCCAACTCTGGGAACACGGCCACCCTGACCA40 TCAGCAGGGTCGAGGCCGGGGATGAGGCCGACTATTATTGTCAGGTGTGGGATACTGGTAGTGATCCCGTGGTATTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTAGGT

BAK 1167F04

CADENA PESADA- SEQ ID NO:119

CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTT45 CTGGTTACACCTTTATCGACACCGGGGTCTCCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAGCGCTAATAATGGCGACACAAATTATGGACAGGAATTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCACAGATACATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGTTGAGGAGCCTGAGATCTGACGACACGGCCGTTTATTACTGTGCGAGAGACTCCAGCAGCAGCTGGGCCCGCTGGTTTTTCGATCTCTGGGGCCGGGGGACACTGGTCACCGTCTCCTCA

BAK 1167F04

CADENA LIVIANA- SEQ ID NO:120

TCCTATGTGCTGACTCAGCCACCCTCGGTGTCAGTGGCCCCAGGAAAGACGGCCAGGATTACCTGTGGGGGAAACATCATTGGAAGTAAACTTGTACACTGGTACCAGCAGAAGCCAGGCCAGGCCCCTGTGCTGGTCATCTATGATGATGGCGACCGGCCCTCAGGGATCCCTGAGCGATTCTCTGGCTCCAACTCTGGGAACACGGCCACCCTGACCA5 TCAGCAGGGTCGAGGCCGGGGATGAGGCCGACTATTATTGTCAGGTGTGGGATACTGGTAGTGATCCCGTGGTATTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTAGGT

BAK 1183H4

CADENA PESADA- SEQ ID NO:121

CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTT10 CTGGTTACACCTTTACAAATTATGGTCTCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAACTACGACGGCGGCAACACACAGTATGGACAGGAATTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCACAGATACATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGTTGAGGAGCCTGAGATCTGACGACACGGCCGTTTATTACTGTGCGAGAGACTCCAGCAGCAGCTGGGCCCGCTGGTTTTTCGATCTCTGGGGCCGGGGGACACTGGTCACCGTCTCCTCA

BAK 1183H4 15

CADENA LIVIANA- SEQ ID NO:122

TCCTATGTGCTGACTCAGCCACCCTCGGTGTCAGTGGCCCCAGGAAAGACGGCCAGGATTACCTGTGGGGGAAACATCATTGGAAGTAAACTTGTACACTGGTACCAGCAGAAGCCAGGCCAGGCCCCTGTGCTGGTCATCTATGATGATGGCGACCGGCCCTCAGGGATCCCTGAGCGATTCTCTGGCTCCAACTCTGGGAACACGGCCACCCTGACCATCAGCAGGGTCGAGGCCGGGGATGAGGCCGACTATTATTGTCAGGTGTGGGATACTGGTAGTGATCCCGTGGT20 ATTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTAGGT

BAK1184C8

CADENA PESADA- SEQ ID NO:123

CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGTTACACCTTTACAAATTATGGTCTCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGA25 TGGATCAGCGGGAGCAACGGCTACACATCTTATGGACAGGAATTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCACAGATACGTCCACGAGCACAGCCTACATGGAGTTGAGGAGCCTGAGATCTGACGACACGGCCGTTTATTACTGTGCGAGAGACTCCAGCAGCAGCTGGGCCCGCTGGTTTTTCGATCTCTGGGGCCGGGGGACACTGGTCACCGTCTCCTCA

BAK1184C8

CADENA LIVIANA- SEQ ID NO:124 30

TCCTATGTGCTGACTCAGCCACCCTCGGTGTCAGTGGCCCCAGGAAAGACGGCCAGGATTACCTGTGGGGGAAACATCATTGGAAGTAAACTTGTACACTGGTACCAGCAGAAGCCAGGCCAGGCCCCTGTGCTGGTCATCTATGATGATGGCGACCGGCCCTCAGGGATCCCTGAGCGATTCTCTGGCTCCAACTCTGGGAACACGGCCACCCTGACCATCAGCAGGGTCGAGGCCGGGGATGAGGCCGACTATTATTGTCAGGTGTGGGATACTGGTAGTGATCCCGTGGTATTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTAGGT 35

BAK1185E1

CADENA PESADA- SEQ ID NO:125

CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGTTACACCTTTACAAATTATGGTCTCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAACGACGCCACCGGCGACACACAGTATGGACAGGAATTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCACAGATA40 CATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGTTGAGGAGCCTGAGATCTGACGACACGGCCGTTTATTACTGTGCGAGAGACTCCAGCAGCAGCTGGGCCCGCTGGTTTTTCGATCTCTGGGGCCGGGGGACACTGGTCACCGTCTCCTCA

BAK1185E1

CADENA LIVIANA- SEQ ID NO:126

TCCTATGTGCTGACTCAGCCACCCTCGGTGTCAGTGGCCCCAGGAAAGACGGCCAGGATTACCTGTGGGGGAA45 ACATCATTGGAAGTAAACTTGTACACTGGTACCAGCAGAAGCCAGGCCAGGCCCCTGTGCTGGTCATCTATGATGATGGCGACCGGCCCTCAGGGATCCCTGAGCGATTCTCTGGCTCCAACTCTGGGAACACGGCCACCCTGACCATCAGCAGGGTCGAGGCCGGGGATGAGGCCGACTATTATTGTCAGGTGTGGGATACTGGTAGTGATCCCGTGGTATTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTAGGT

BAK1185F8

CADENA PESADA- SEQ ID NO:127

CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGTTACACCTTTACAGATTATGGTCTCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTAGAGTGGATGGGATGGATCCGCAACATCGACGGCTACACAATTTATGGACAGGAATTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCACAGATA5 CATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGTTGAGGAGCCTGAGATCTGACGACACGGCCGTTTATTACTGTGCGAGAGACTCCAGCAGCAGCTGGGCCCGCTGGTTTTTCGATCTCTGGGGCCGGGGGACACTGGTCACCGTCTCCTCA

BAK1185F8

CADENA LIVIANA- SEQ ID NO:128

TCCTATGTGCTGACTCAGCCACCCTCGGTGTCAGTGGCCCCAGGAAAGACGGCCAGGATTACCTGTGGGGGAA10 ACATCATTGGAAGTAAACTTGTACACTGGTACCAGCAGAAGCCAGGCCAGGCCCCTGTGCTGGTCATCTATGATGATGGCGACCGGCCCTCAGGGATCCCTGAGCGATTCTCTGGCTCCAACTCTGGGAACACGGCCACCCTGACCATCAGCAGGGTCGAGGCCGGGGATGAGGCCGACTATTATTGTCAGGTGTGGGATACTGGTAGTGATCCCGTGGTATTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTAGGT

BAK1187B4 15

CADENA PESADA- SEQ ID NO:129

CAGGTCCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGTTACACCTTTACAAATTATGGTCTCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCGACGACGACAGCGGCACGACAATATATGGACAGGAATTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCACAGATACATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGTTGAGGAGCCTGAGATCTGACGACACGGCCGTTTATTACTGTGCGAGA20 GACTCCAGCAGCAGCTGGGCCCGCTGGTTTTTCGATCTCTGGGGCCGGGGGACACTGGTCACCGTCTCCTCA

BAK1187B4

CADENA LIVIANA- SEQ ID NO:130

TCCTATGTGCTGACTCAGCCACCCTCGGTGTCAGTGGCCCCAGGAAAGACGGCCAGGATTACCTGTGGGGGAAACATCATTGGAAGTAAACTTGTACACTGGTACCAGCAGAAGCCAGGCCAGGCCCCTGTGCTGGTCATCTATGAT25 GATGGCGACCGGCCCTCAGGGATCCCTGAGCGATTCTCTGGCTCCAACTCTGGGAACACGGCCACCCTGACCATCAGCAGGGTCGAGGCCGGGGATGAGGCCGACTATTATTGTCAGGTGTGGGATACTGGTAGTGATCCCGTGGTATTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTAGGT

BAK1166G02

CADENA PESADA- SEQ ID NO: 131 30

CAAGTGCAGTTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGTTACACCTTTGCGAACACCGGGATCTCGTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAGCGCTAATAATGGCGACACAAATTATGGACAGGAATTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCACAGATACATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGTTGAGGAGCCTGAGATCTGACGACACGGCCGTTTATTACTGTGCGAGAGACTCCAGCAGCAGCTGGGCCCGCTGGTTTTTCGATCTCTGGGGTCGGGGGACACTGGTCACCGTCTCCTCA 35

BAK1166G02

CADENA LIVIANA- SEQ ID NO:132

TCCTATGTGCTGACTCAGCCACCCTCGGTGTCAGTGGCCCCAGGAAAGACGGCCAGGATTACCTGTGGGGGAAACATCATTGGAAGTAAACTTGTACACTGGTACCAGCAGAAGCCAGGCCAGGCCCCTGTGCTGGTCATCTATGATGATGGCGACCGGCCCTCAGGGATCCCTGAGCGATTCTCTGGCTCCAACTCTGGGAACACGGCCACCCTGACCA40 TCAGCAGGGTCGAGGCCGGGGATGAGGCCGACTATTATTGTCAGGTGTGGGATACTGGTAGTGATCCCGTGGTATTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTAGGT

BAK165E7

CADENA PESADA- SEQ ID NO: 133

EVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYGLSWVRQAPGQGLEWMGWISANNGETNYGQEFQGRVTMTTET45 PTNTAHMELRSLTSDDTAVYYCVRDSSSNWARWYFDLWGQGTLVTVSS

BAK165E7

CADENA LIVIANA- SEQ ID NO: 134

SYVLTQPPSVSVAPGQTARIPCGGNNIGSKLVHWYQQKPGQAPVLVVYDDGDRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISRIDAGDEADYYCQVWDTGSDPVVFGGGTKLTVLG

BAK165E7 5

CADENA PESADA

CDR1- SEQ ID NO:135 NYGLS

CDR2- SEQ ID NO:136 WISANNGETNYGQEFQG

CDR3- SEQ ID NO:137 DSSSNWARWYFDL

BAK165E7 10

CADENA LIVIANA

CDR1- SEQ ID NO:138 GGNNIGSKLVH

CDR2- SEQ ID NO:139 DDGDRPS

CDR3- SEQ ID NO:140 QVWDTGSDPVV

BAK582F7 15

CADENA PESADA

CDR1- SEQ ID NO 141: SYAMS

CDR2- SEQ ID NO 142: AISGSGGSTYYADSVKG

CDR3- SEQ ID NO 143: VGAAGEGYYGY

BAK582F7 20

CADENA LIVIANA

CDR1-SEQ ID NO 144: TRSSGSIASNYVE

CDR2-SEQ ID NO 145: DDNQRPS

CDR3-SEQ ID NO 146: QSYDSNNDV

BAK612B5 25

CADENA PESADA

CDR1- SEQ ID NO 147: SYAMS

CDR2- SEQ ID NO 148: AISGSGGSTYYADSVKG

CDR3- SEQ ID NO 149: VGRATTDEGYYGY

BAK612B5 30

CADENA LIVIANA

CDR1- SEQ ID NO 150: TRSSGSIASNYVQ

CDR2- SEQ ID NO 151: DDNQRPS

CDR3- SEQ ID NO 152: QSYDSNNDV

BAK615E3 35

CADENA PESADA

CDR1- SEQ ID NO 153: SYAMS

CDR2- SEQ ID NO 154: AISGSGGSTYYADSVKG

CDR3- SEQ ID NO 155: VGKATTEEGYY

BAK615E3

CADENA LIVIANA

CDR1- SEQ ID NO 156: TRSSGSIASNYVQ 5

CDR2- SEQ ID NO 157: DDNQRPS

CDR3- SEQ ID NO 158: QSYDSNNDV

BAK0278D6

CADENA PESADA

CDR1- SEQ ID NO 159: AATTATGGTCTCAGC 10

CDR2- SEQ ID NO 160: TGGATCAGCGCTAATAATGGCGACACAAATTATGGACAGGAATTCCAGGGC

CDR3- SEQ ID NO 161: GACTCCAGCAGCAACTGGGCCCGCTGGTTTTTCGATCTC

BAK278D6

CADENA LIVIANA

CDR1- SEQ ID NO 162: GGGGGAAACAACATTGGAAGTAAACTTGTACAC 15

CDR2- SEQ ID NO 163: GATGATGGCGACCGGCCCTCA

CDR3- SEQ ID NO 164: CAGGTGTGGGATACTGGTAGTGATCCCGTGGTA

BAK502G9

CADENA PESADA

CDR1- SEQ ID NO 165: AATTATGGTCTCAGC 20

CDR2- SEQ ID NO 166: TGGATCAGCGCTAATAATGGCGACACAAATTATGGACAGGAATTCCAGGGC

CDR3- SEQ ID NO 167: GACTCCAGCAGCAGCTGGGCCCGCTGGTTTTTCGATCTC

BAK502G9

CADENA LIVIANA

CDR1- SEQ ID NO 168: GGGGGAAACATCATTGGAAGTAAACTTGTACAC 25

CDR2- SEQ ID NO 169: GATGATGGCGACCGGCCCTCA

CDR3- SEQ ID NO 170: CAGGTGTGGGATACTGGTAGTGATCCCGTGGTA

Dominios CH - SEQ ID NO: 171

ASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQF30 NWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK

Dominio CL - SEQ ID NO: 172

QPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQ35 WKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS

Claims (16)

1. REIVINDICACIONES

   1. Un antagonista de IL-13 para su uso en la mejora de la función pulmonar en un sujeto con función pulmonar alterada, en el que el antagonista de IL-13 es un anticuerpo anti-IL-13 humana o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, seleccionado del grupo que consiste en:

   (a) un anticuerpo anti-IL-13 humana o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, que comprende un dominio 5 VH que comprende la HCDR1, HCDR2 y HCDR3 y un dominio VL que comprende la LCDR1, LCDR2 y LCDR3, en el que la HCDR1 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 7, la HCDR2 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 8, la HCDR3 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 9, la LCDR1 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 10, la LCDR2 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 11 y la LCDR3 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 12; 10

   (b) un anticuerpo anti-IL-13 humana, o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, que comprende un dominio VH que tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 15 y un dominio VL que tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 16; y

   (c) un anticuerpo anti-IL-13 humana o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo de acuerdo con (a) o (b), que comprende adicionalmente un dominio constante de IgG4 humana; 15

   en el que la mejora en la función pulmonar es una mejora en la puntuación del volumen espiratorio forzado en un segundo (FEV1) de entre 5 % y 18 % con respecto a una medición FEV1 de referencia tomada antes de la administración del anticuerpo anti-IL-13 humana o de un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, y en el que el anticuerpo anti-IL-13 o el fragmento de unión a IL-13 del mismo, se administra por vía subcutánea a una dosis entre 100 y 600 mg. 20
2. 2. El antagonista de IL-13 para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, en el que dicho antagonista se selecciona del grupo que consiste en; una molécula de inmunoglobulina, un anticuerpo monoclonal, un anticuerpo quimérico, un anticuerpo con injerto de CDR, un anticuerpo humanizado, un Fab, un Fab’, un F(ab’)2, un Fv, un Fv enlazado a disulfuro, un scFv, un diacuerpo, un anticuerpo multiespecífico, un anticuerpo dual específico, y un anticuerpo biespecífico. 25
3. 3. El antagonista de IL-13 para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el sujeto tiene función pulmonar alterada asociada con asma, EPOC o fibrosis pulmonar idiopática.
4. 4. El antagonista de IL-13 para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el sujeto tiene función pulmonar alterada asociada con asma seleccionada de asma atópica, asma no atópica, asma moderada a grave, asma moderada a grave no controlada por corticoesteroides inhalados u orales y asma con una 30 puntuación GINA de 5, 4, 3, 2 o 1.
5. 5. El antagonista de IL-13 para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el sujeto tiene función pulmonar alterada asociada con asma y se está sometiendo a terapia concomitante con uno o más agentes terapéuticos adicionales seleccionados de un corticoesteroide inhalado, un antagonista beta2 de larga acción (LABA), teofilina, un antagonista de leucotrienos y un corticoesteroide oral. 35
6. 6. El antagonista de IL-13 para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el anticuerpo anti-IL-13 o fragmento de unión a IL-13 del mismo, se administra por vía subcutánea a una dosis seleccionada del grupo que consiste en 150, 300 y 600 mg.
7. 7. El antagonista de IL-13 para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el anticuerpo anti IL-13 o fragmento de unión a IL-13 del mismo, se administra a una frecuencia seleccionada de 40 cada 1, 2, 3, 4, 6, 8, 10 y 12 semanas.
8. 8. El antagonista de IL-13 para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que una mejora en la función pulmonar en sujetos con asma puede detectarse 15 días después de iniciarse el tratamiento.
9. 9. El antagonista de IL-13 para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que 45 una mejora en la función pulmonar en sujetos con asma puede detectarse al menos 12 semanas de finalizar el tratamiento.
10. 10. El antagonista de IL-13 para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en el que el anticuerpo anti-IL-13 o fragmento de unión a IL-13 del mismo, se administra por administración subcutánea, a una dosis de 300 mg y a intervalos de dosificación de 2 o 4 semanas. 50
11. 11. El antagonista de IL-13 para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en el que la mejora en la función pulmonar es una mejora en la puntuación FEV1 de entre 8 % y 16 % con respecto a una

    medición FEV1 de referencia tomada antes de la administración por vía subcutánea del anticuerpo anti-IL-13 humana o de un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo a intervalos de dos semanas o cuatro semanas.
12. 12. El antagonista de IL-13 para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en el que la mejora en la función pulmonar es una mejora en la puntuación FEV1 de entre 12 % y 18 % con respecto a una medición FEV1 de referencia tomada antes de la administración del anticuerpo anti-IL-13 humana o de un fragmento 5 de unión a IL-13 humana del mismo.
13. 13. El antagonista de IL-13 para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en el que la mejora en la función pulmonar es una mejora en la puntuación FEV1 de 8 % con respecto a una medición FEV1 de referencia tomada antes de la administración por vía subcutánea de 150 mg del anticuerpo anti-IL-13 humana o de un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, a intervalos de dos semanas; o 10

    en el que la mejora en la función pulmonar es una mejora en la puntuación FEV1 de 13,3 % con respecto a una medición FEV1 de referencia tomada antes de la administración por vía subcutánea de 300 mg del anticuerpo anti-IL-13 humana o de un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, a intervalos de dos semanas; o

    en el que la mejora en la función pulmonar es una mejora en la puntuación FEV1 de 15,2 % con respecto a una medición FEV1 de referencia tomada antes de la administración por vía subcutánea de 600 mg del anticuerpo anti-15 IL-13 humana o de un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, a intervalos de dos semanas.
14. 14. El antagonista de IL-13 para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el antagonista de IL-13 es un anticuerpo anti-IL-13 humana o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, que comprende un dominio VH que comprende la HCDR1 , HCDR2 y HCDR3 y un dominio VL que comprende la LCDR1, LCDR2 y LCDR3, en el que la HCDR1 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 7, la HCDR2 tiene 20 la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 8, la HCDR3 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 9, la LCDR1 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 10, la LCDR2 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 11, y la LCDR3 tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 12.
15. 15. El antagonista de IL-13 para uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el antagonista de IL-13 es un anticuerpo anti-IL-13 humana o un fragmento de unión a IL-13 humana del mismo, que 25 comprende un dominio VH que tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 15 y un dominio VL que tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 16.
16. 16. El antagonista de IL-13 para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que la mejora en la función pulmonar es una mejora en la puntuación FEV1 de entre 5 % y 12 % con respecto a una medición FEV1 de referencia tomada antes de la administración del anticuerpo anti-IL-13 humana o de un fragmento 30 de unión a IL-13 humana del mismo.