CN103267756B - 一种检测鼻咽部渗液游离血红素的方法 - Google Patents

一种检测鼻咽部渗液游离血红素的方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种检测鼻咽部渗液游离血红素的方法，包括在鼻咽部取样，稀释样液，按比例加入检测试剂，根据颜色变化判断是否含有血红素，本发明同时提供了一种检测鼻咽部渗液游离血红素的专用检测盒，可专用来盛放检测过程中用到的器皿和试剂，本试剂盒结构简单，只需一个试剂盒便能完成整个检测步骤，节省空间和试剂，同时也减轻操作者劳动负担。

Description

一种检测鼻咽部渗液游离血红素的方法
技术领域
 本发明涉及一种检测方法，具体涉及一种检测鼻咽部渗液游离血红素的方法，同时本发明还涉及一种检测鼻咽部渗液游离血红素的专用检测盒。 
背景技术
鼻咽部渗液中的游离血红素往往是由组织肿瘤细胞的细胞色素、氧感受器和FixL跨膜蛋白的游离血红素释放、析出或肿瘤组织微循环渗出引起的，其游离血红素的含量极少，肉眼不可得见，一般需借助先进的仪器和分析化学方法进行检测，费用高，周期长，所以发明一种操作简单，成本低廉的检测方法快速的确定鼻咽部渗液中是否含有游离血红素，成为一个亟需解决的问题。 
发明内容
 为了解决现有技术中检测鼻咽部渗液中游离血红素的方法费用高、周期长的问题，本发明提供了一种检测鼻咽部渗液游离血红素的方法，本发明提供的方法其灵敏度高，成本低廉，可快速的检测鼻咽部渗液中的游离血红素；同时本发明还提供了一种检测鼻咽部渗液中游离血红素的专用检测盒。 
本发明的技术方案如下： 
本发明提供的检测鼻咽部渗液中游离血红素的方法，包括以下检测步骤：
 1) 打开检测盒的外包装盒，从盒体内取出取样器，带上乳胶手套，取样器由鼻腔置入，沿下鼻道直达鼻咽，左、右各旋转180度，再按顺序在鼻咽后壁、咽鼓管咽口、咽鼓管园枕和咽隐管处擦拭获取渗液；其中，渗液量为0.5-1 ml；
 2) 从取样器的折断部折断取样器，把带有渗液的采集头放入样品杯内，样品杯内预装有三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液，缓冲液的量为3ml，混匀，得样品液；优选的，三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液的PH值为7.4 ；
3） 在测试池内顺序加入样品液1ml，试剂A 0.5ml，试剂B 0.5ml，混匀，2分钟内观察颜色变化，与比色板比对记录检测结果；
所述试剂A的配制方法如下：取3,3',5,5'-四甲基联苯胺 50mg溶于PH为7.4柠檬酸缓冲液100ml混匀而成；
所述试剂B为3%的过氧化氢溶液。
检测结果判定如下： 
若不显色则为阴性，说明渗液中无游离血红素；若显示浅绿蓝色至浅蓝色，可能含有游离血红素，需定期进行复查；若显示蓝色至深蓝色则说明渗液中含有游离血红素。若即刻显示深蓝色且瞬间转为深黄色或棕红色，预示有肿瘤组织出血，亦应视为强阳性。
实验资料
分别取检测为不显色、显示浅绿蓝色至浅蓝色、蓝色至深蓝色的样品各三例，用质谱分析仪进行血红素的检测，检测结果如下：不显色均未测及血红素；浅绿色至浅蓝色为：0.5 ng/L ，1.7ng/L 、4.3 ng/L；蓝色至深蓝色为  20ng/L、2.5 μg/L、52μg/L 。
通过以上数据可以看出，对游离血红素含量在0.5ng/L以上的渗液本检测方法就可以初步的判断，游离血红素含量在20ng/L以上的渗液本检测方法就可以确定为渗液中含有游离血红素，所以本检测方法的灵敏度高。 
本发明同时提供了一种检测鼻咽部渗液游离血红素的检测盒，包括盒体和盒体外的外包装盒，所述外包装盒的外表面设有比色板，所述盒体设有向内凹陷成的镊子存放区、样品杯存放区、滴管存放区、测试池和取样器存放区。 
    进一步的，所述取样器存放区设于盒体上方，内装有取样器，所述取样器全长14.5cm，包括采集头和与之连接的柄杆。 
    进一步的，所述的采集头材质为尼龙植绒拭子。 
    进一步的，所述柄杆为塑料杆，中间设有使柄杆折叠的折叠结构，采集头与柄杆连接处设有脆性塑料材质制成的折断部。 
    进一步的，所述测试池设于测试盒中上方，直径1.8cm，深度1.2cm。 
    进一步的，所述滴管存放区设于测试池两侧。 
    进一步的，所述样品杯存放区设于测试池左侧。 
    进一步的，所述镊子存放区设于样品杯存放区左侧。 
    进一步的，所述滴管存放区内设有滴管，滴管上带有刻度。 
    进一步的，所述样品杯存放区内设有样品杯，所述样品杯设有密封盖，样品杯的杯体呈圆筒状。 
    进一步的，所述镊子存放区内设有镊子，所述镊子为塑料镊。 
    本发明提供的检测方法，简单实用，成本低廉，可快速的筛查出鼻咽部渗液中不含游离血红素的样本、含游离血红素的样本和可能含有游离血红素的样本，为进一步检查做准备；本发明可检测出的最低游离血红素浓度可达0.5ng/L,，灵敏度高；同时本发明还提供了一种取样器，可专用在鼻咽部位沾取渗液；同时本发明还提供了一种检测盒，可专用来盛放检测过程中用到的器皿和试剂，本试剂盒结构简单，只需一个试剂盒便能完成整个检测步骤，节省空间和试剂，同时也减轻操作者劳动负担。 
附图说明
图1为外包装盒的结构示意图。 
图2为盒体的结构示意图。 
图3为取样器的结构示意图。 
图中，1.外包装盒；2.比色板；3.盒体；4.取样器存放区；5.镊子存放区；6.样品杯存放区；7.滴管存放区；8.测试池；9.采集头；10.折叠结构；11.柄杆；12.折断部。 
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的说明。 
实施例1
鼻咽部渗液游离血红素的检测：打开检测盒的外包装盒1，从盒体3内取出取样器，带上乳胶手套，用取样器由鼻腔置入，沿下鼻道直达鼻咽，左、右各旋转180度，再按顺序在鼻咽后壁、咽鼓管咽口、咽鼓管园枕和咽隐管处擦拭获取渗液；其中，渗液量为0.5-1 ml；取样品杯放置区6的样品杯内预装有PH值为7.4的三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液3 ml，把取样器折断，再把取样器上带有渗液的采集头9放入样品杯中，混匀；从滴管存放区7内取出两支滴管，两支滴管分别预装有试剂A和试剂B，在测试池8内顺序加入样品液1ml，试剂A 0.5ml，试剂B 0.5ml，混匀，2分钟内观察颜色变化，与检测盒外包装的比色板2比对记录检测结果；所述试剂A的配制方法如下：取3,3',5,5'-四甲基联苯胺 50mg溶于PH4.4柠檬酸缓冲液100ml混匀而成；所述试剂B为3%的过氧化氢溶液。
检测结果判定如下： 
若不显色则为阴性，说明渗液中无游离血红素；若显示浅绿蓝色至浅蓝色，可能含有游离血红素，需定期进行复查；若显示蓝色至深蓝色则说明渗液中含有游离血红素。若即刻显示深蓝色且瞬间转为深黄色或棕红色，预示有肿瘤组织出血，亦应视为强阳性。
实施例2
一种检测鼻咽部渗液游离血红素的检测盒，包括盒体3和盒体3外的外包装盒1，所述外包装盒1的外表面设有比色板2，所述盒体3设有向内凹陷成的镊子存放区5、样品杯存放区6、滴管存放区7、测试池8和取样器存放区4，所述取样器存放区7设于盒体3上方，内装有取样器，所述取样器全长14.5cm，包括采集头9和与之连接的柄杆11；所述的采集头9材质为尼龙植绒拭子；所述柄杆11为塑料杆，中间设有使柄杆11折叠的折叠结构10，采集头9与柄杆11连接处设有脆性塑料材质制成的折断部12；所述测试池8设于测试盒中上方，直径1.8cm，深度1.2cm；所述滴管存放区7设于测试池8两侧；所述样品杯存放区6设于测试池8左侧；所述镊子存放区5区设于样品杯存放区6左侧；所述滴管存放区7内设有滴管，滴管上带有刻度；所述样品杯存放区6内设有样品杯，所述样品杯设有密封盖，样品杯的杯体呈圆筒状；所述镊子存放区5内设有镊子，所述镊子为塑料镊。 

Claims (2)

1.检测鼻咽部渗液中游离血红素的方法，其特征在于，包括以下检测步骤：
 1) 取鼻咽部渗液0.5-1 ml；
 2) 从取样器的折断部折断取样器，把带有渗液的采集头放入样品杯内，样品杯内预装有三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液，缓冲液的量为3ml，混匀，得样品液；
3） 在测试池内顺序加入样品液1ml，试剂A 0.5ml，试剂B 0.5ml，混匀，2分钟内观察颜色变化，与比色板比对记录检测结果；
所述试剂A的配制方法如下：取3,3',5,5'-四甲基联苯胺 50mg溶于PH为4.4柠檬酸缓冲液100ml混匀而成；
所述试剂B为3%的过氧化氢溶液。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（2）中三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液的PH值为7.4。
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