CN112858269A - 鼻咽粘膜细胞游离血红素的检测试剂制备方法及使用方法 - Google Patents

鼻咽粘膜细胞游离血红素的检测试剂制备方法及使用方法 Download PDF

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Abstract

公开了鼻咽粘膜细胞游离血红素的检测试剂制备方法及使用方法,操作简单，成本低，检测周期短，而且无需去医院，避免了交叉感染。该鼻咽粘膜细胞游离血红素的检测试剂包括试剂I、试剂II、试剂III；每份试剂I由0.01g鲁米诺、0.2g四甲基联苯胺、3ml二甲基亚砜、1.6g柠檬酸、0.6g乙二胺四乙酸钠、997ml纯化水组成；每份试剂II由200ml过氧化氢、0.2g苄基三甲基溴化铵、2.4g乙酸钠、10g柠檬酸、800ml纯化水组成；每份试剂III由10g氯化钠、2g柠檬酸、1000ml纯化水组成。

Description

鼻咽粘膜细胞游离血红素的检测试剂制备方法及使用方法
技术领域
本发明属于医疗器械的技术领域，具体地涉及一种鼻咽粘膜细胞游离血红素的检测试剂制备方法，以及该检测试剂的使用方法。
背景技术
目前对于鼻咽部位疾病的检测费用高，周期长，操作不便，需要借助仪器进行检测。而医院中使用的仪器由于消毒不到位等很容易造成交叉感染，给鼻咽病人雪上加霜。
发明内容
本发明的技术解决问题是：克服现有技术的不足，提供一种鼻咽粘膜细胞游离血红素的检测试剂制备方法,其操作简单，成本低，检测周期短，而且无需去医院，避免了交叉感染。
本发明的技术解决方案是：这种鼻咽粘膜细胞游离血红素的检测试剂制备方法，该鼻咽粘膜细胞游离血红素的检测试剂包括试剂I、试剂II、试剂III；
每份试剂I由0.01g鲁米诺、0.2g四甲基联苯胺、3ml二甲基亚砜、
1.6g柠檬酸、0.6g乙二胺四乙酸钠、997ml纯化水组成；
每份试剂II由200ml过氧化氢、0.2g苄基三甲基溴化铵、2.4g乙酸钠、10g柠檬酸、800ml纯化水组成；
每份试剂III由10g氯化钠、2g柠檬酸、1000ml纯化水组成。
本发明通过由试剂Ⅰ和试剂Ⅱ与含有标的物的试剂Ⅲ的氧化还原反应，对含有标的物的细胞进行染色，从而检测出鼻咽粘膜细胞内的游离血红素，采用该检测试剂，个人就能操作，操作简单，成本低，检测周期短，而且无需去医院，避免了交叉感染。
还提供了该鼻咽粘膜细胞游离血红素的检测试剂的使用方法，该方法包括以下步骤：
(1)取样；
(2)样品处理；
(3)取试剂Ⅰ，将试剂Ⅰ倒入盒托上的测试池内；
(4)用塑料吸管吸取已经全部溶解混合好的样品处理液1-2ml滴入测试池内；
(5)取试剂Ⅱ，把试剂Ⅱ倒入盒托上的测试池内；
(6)180秒内将测试池内的显色与比色板进行对比，获取结果；
(7)结果判断：不变色为阴性，变为浅蓝色、蓝色、绿色、蓝绿色为阳性。
附图说明
图1示出了根据本发明的鼻咽粘膜细胞游离血红素的检测试剂工作原理的示意图。
图2示出了根据本发明的鼻咽粘膜细胞游离血红素的检测试剂使用方法的流程图。
具体实施方式
广泛存在于细胞内的亚铁原卟啉参与多种酶的构成，正常生理状态下，其通常以结合蛋白的形式发挥作用。当致病因子使细胞稳定性失调，鼻咽粘膜细胞内稳定结构被破坏，代谢紊乱，细胞内蛋白构象发生改变，使某类亲脂性物质进入含亚铁原卟啉蛋白的疏水核内，导致亚铁原卟啉脱落为游离状态，鼻咽粘膜细胞内游离的亚铁原卟啉增高。亚铁离子作为血红素加氧酶催化血红素的第三大代谢产物，不仅是一种营养物质，促进细胞生长、增殖，而且由于其多价位性赋予自身捕获电子和释放电子的能力，可通过Fenton反应产生过量的ROS，继而破坏DNA、脂质及蛋白质，以引起细胞异常凋亡、基因突变导致肿瘤发生。同时，肿瘤细胞对铁的调节也为自我生长提供便利，促进自身的生长及耐药。最近研究发现，铁调节蛋白可以促使DNA及组蛋白调控蛋白的外在修饰，如Jumonj idomain-containingprotein 2A(JMJD2A)，而这种异常改变可被铁螯合剂逆转；有研究报道，在细胞分裂过程中，核糖核酸酶、脱氧核糖核酸酶的合成都依赖铁的参与，通过影响核糖核酸酶的活性，缺铁最终导致细胞分裂活动的终止。此外，铁代谢水平可调节与细胞周期、DNA损伤相关的其它蛋白，如Mdm2、GADD45、p21及WAF1等。
如图1所示，椭圆代表亚铁血红素(铁原子和原卟啉组成)，化合物I和II代表铁中间体。
化合物Ⅰ被还原成铁的稳定态,是通过两个连续的从过氧化物酶到底物一电子转移过程或是从铁氧基转移到底物的两电子氧化过程而实现的,反应过程所产生的自由基通常不通过酶催化而通过各自的底物途径(耦合或歧化等)转变成非自由基产品。
过氧化物还原所需要的两个电子,一个来源于FeⅢ,另一个来源于卟啉,产生一个卟啉自由基阳离子,Fe失去一个电子后,变为FeⅣ,它以FeⅣ＝O的结构存在。在铁氧离子中,铁呈低自旋d4构型,其中铁的形式氧化数为4。化合物和化合物的形式氧化态都是FeⅣ,其中的铁呈FeⅣ＝O结构。化合物的一电子还原产生化合物。在这个过程中,FeⅣ＝O保持不变,卟啉被还原。
正是根据以上原理，制备了鼻咽粘膜细胞游离血红素的检测试剂。该鼻咽粘膜细胞游离血红素的检测试剂包括试剂I、试剂II、试剂III；
每份试剂I由0.01g鲁米诺、0.2g四甲基联苯胺、3ml二甲基亚砜、
1.6g柠檬酸、0.6g乙二胺四乙酸钠、997ml纯化水组成；
每份试剂II由200ml过氧化氢、0.2g苄基三甲基溴化铵、2.4g乙酸钠、10g柠檬酸、800ml纯化水组成；
每份试剂III由10g氯化钠、2g柠檬酸、1000ml纯化水组成。
本发明通过由试剂Ⅰ和试剂Ⅱ与含有标的物的试剂Ⅲ的氧化还原反应，对含有标的物的细胞进行染色，从而检测出鼻咽粘膜细胞内的游离血红素，采用该检测试剂，个人就能操作，操作简单，成本低，检测周期短，而且无需去医院，避免了交叉感染。
对应的产品由试剂Ⅰ、试剂Ⅱ、试剂Ⅲ、塑料吸管、盒托、采样器、比色卡、包装盒组成。
如图2所示，还提供了该鼻咽粘膜细胞游离血红素的检测试剂的使用方法，该方法包括以下步骤：
(1)取样；
(2)样品处理；
(3)取试剂Ⅰ，将试剂Ⅰ倒入盒托上的测试池内；
(4)用塑料吸管吸取已经全部溶解混合好的样品处理液1-2ml滴入测试池内；
(5)取试剂Ⅱ，把试剂Ⅱ倒入盒托上的测试池内；
(6)180秒内将测试池内的显色与比色板进行对比，获取结果；
(7)结果判断：不变色为阴性，变为浅蓝色、蓝色、绿色、蓝绿色为阳性。
优选地，所述步骤(1)中，鼻咽部渗液采样器由鼻腔置入，沿下鼻道直达鼻咽，左、右各旋转180度，再按顺序在鼻咽后壁、咽鼓管咽口、咽鼓管园枕和咽隐窝处擦拭获取带有鼻咽粘膜细胞的渗液，按照以上路径，分别用不同的拭子在左右鼻咽部取样。
优选地，所述步骤(2)中，把鼻咽部渗液取样器头部放入样本瓶内搅动不少于十次，使鼻咽部渗液与样本保存液混匀。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例，并非对本发明作任何形式上的限制，凡是依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属本发明技术方案的保护范围。

Claims (4)

1.鼻咽粘膜细胞游离血红素的检测试剂制备方法，其特征在于：该鼻咽粘膜细胞游离血红素的检测试剂包括试剂I、试剂II、试剂III；
每份试剂I由0.01g鲁米诺、0.2g四甲基联苯胺、3ml二甲基亚砜、
1.6g柠檬酸、0.6g乙二胺四乙酸钠、997ml纯化水组成；
每份试剂II由200ml过氧化氢、0.2g苄基三甲基溴化铵、2.4g乙酸钠、10g柠檬酸、800ml纯化水组成；
每份试剂III由10g氯化钠、2g柠檬酸、1000ml纯化水组成。
2.鼻咽粘膜细胞游离血红素的检测试剂使用方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：
(1)取样；
(2)样品处理；
(3)取试剂Ⅰ，将试剂Ⅰ倒入盒托上的测试池内；
(4)用塑料吸管吸取已经全部溶解混合好的样品处理液1-2ml滴入测试池内；
(5)取试剂Ⅱ，把试剂Ⅱ倒入盒托上的测试池内；
(6)180秒内将测试池内的显色与比色板进行对比，获取结果；
(7)结果判断：不变色为阴性，变为浅蓝色、蓝色、绿色、蓝绿色为阳性。
3.根据权利要求2所述的鼻咽粘膜细胞游离血红素的检测试剂使用方法，其特征在于：所述步骤(1)中，鼻咽部渗液采样器由鼻腔置入，沿下鼻道直达鼻咽，左、右各旋转180度，再按顺序在鼻咽后壁、咽鼓管咽口、咽鼓管园枕和咽隐窝处擦拭获取带有鼻咽粘膜细胞的渗液，按照以上路径，分别用不同的拭子在左右鼻咽部取样。
4.根据权利要求3所述的鼻咽粘膜细胞游离血红素的检测试剂使用方法，其特征在于：所述步骤(2)中，把鼻咽部渗液取样器头部放入样本瓶内搅动不少于十次，使鼻咽部渗液与样本保存液混匀。
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Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4942132A (en) * 1984-12-11 1990-07-17 Litmus Concepts, Inc. Reagent composition for fecal occult blood tests
WO2011123776A2 (en) * 2010-04-01 2011-10-06 Guthery B Eugene Method for detecting occult blood
CN102539420A (zh) * 2012-02-10 2012-07-04 侯巍 一种液体蛋白质浓度检测方法
CN103267756A (zh) * 2012-12-19 2013-08-28 青岛贝尔奥生物科技有限公司 一种检测鼻咽部渗液游离血红素的方法及检测盒
CN104990914A (zh) * 2015-06-02 2015-10-21 蒋春亮 一种肿瘤组织细胞原血红素定量检测试剂及其制备方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4942132A (en) * 1984-12-11 1990-07-17 Litmus Concepts, Inc. Reagent composition for fecal occult blood tests
WO2011123776A2 (en) * 2010-04-01 2011-10-06 Guthery B Eugene Method for detecting occult blood
CN102539420A (zh) * 2012-02-10 2012-07-04 侯巍 一种液体蛋白质浓度检测方法
CN103267756A (zh) * 2012-12-19 2013-08-28 青岛贝尔奥生物科技有限公司 一种检测鼻咽部渗液游离血红素的方法及检测盒
CN104990914A (zh) * 2015-06-02 2015-10-21 蒋春亮 一种肿瘤组织细胞原血红素定量检测试剂及其制备方法

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