CN103263460A - 一种制备复方石淋通片的新方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种制备复方石淋通片的新方法。将处方中的广金钱草采用50％乙醇热回流提取的方法进行提取。新的工艺既节约生产的成本，降低有效成分的损失，更提高了产品的疗效。

Description

一种制备复方石淋通片的新方法

技术领域

本发明涉及中医药制剂领域，是一种制备中药的新工艺。

背景技术

复方石淋通片是吉林万通药业梅河药业股份有限公司生产的产品，具有清热利湿，通淋排石的功效。其制法采用的是部颁标准第十二册所收载的标准号为：WS3-B-2373-97的标准。原处方及制法如下：

【处方】

广金钱草1500g      石韦500g      海金沙   500g

滑石粉25g          忍冬藤500g

【制法】

以上五味，除滑石粉外，其余广金钱草等四味，分别加水煎煮二次，每次2小时，滤过，合并滤液，浓缩至适量。广金钱草浓缩液加5倍量85％乙醇，海金沙、忍冬藤、石韦浓缩液加5倍量70％乙醇，搅匀，静置，滤过，回收乙醇，浓缩成稠膏。合并上述稠膏，加入滑石粉及适量辅料，混匀，制成颗粒，干燥，压制成1000片，包糖衣，即得。

其中，广金钱草为君药，清热去湿，利尿通淋，起到排除结石的功效，原方法采用的是水提醇沉法提取广金钱草，根据近年的研究表明：广金钱草中主要药效成分是黄酮类成分，而黄酮类成分易溶于乙醇。

发明内容

本发明提供了一种制备复方石淋通片的新方法，期积极有益效果在于，一是增加了有效成分的提取量，二是提高了复方石淋通片的疗效。

【处方】

广金钱草1500g        石韦500g       海金沙    500g

滑石粉25g            忍冬藤500g

【制法】

取海金沙、忍冬藤、石韦分别加水煎煮二次，每次1.5-3小时，过滤，滤液合并，浓缩至适量，加入4-7倍量的70％乙醇，搅匀，静置，滤过，回收乙醇，浓缩成稠膏，备用；广金钱草加50％乙醇回流提取3次，每次1-2小时，滤过，回收乙醇，浓缩成稠膏，备用；合并上述稠膏，加入滑石粉及适量辅料，混匀，制成颗粒，压片，包衣，即得。

本发明所述的制剂，包括各种类型的丸剂、片剂、胶囊剂以及在临床上适宜的其他剂型。

本发明药物的提取试验资料

1仪器与试药

7520紫外分光光度计(上海分析仪器厂)；芦丁对照品(购于中国药品生物制品检定所，批号：0080-9705)，水为蒸馏水，其它均为分析纯；广金钱草药材(市售)，经鉴定符合药典法定标准。

2、方法与结果

2.1试验方法的确定及水平的选择

广金钱草含有黄酮类、皂苷类、鞣质和生物碱等效成分。根据其化学性质及参考有关文献，确定乙醇浓度、加醇量、提取时间、提取次数4个影响有效成分提取量的因素，正交设计试验采用L9(34)表进行试验，因素水平见表1，试验设计见表2。

表1提取工艺因素水平表

2.2试验方法及考察指标

称取广金钱草，共计9份，每份重量为100g。根据正交试验表2安排试验，进行回流提取，得乙醇提取液，回收乙醇，提取液浓缩，减压干燥，得干膏，备用。采用紫外-比色法测定广金钱草总黄酮提取量，以其作为考察指标，结果列入表2。方差分析结果见表3。广金钱草总黄酮含量测定方法[2]如下。

(1)对照品溶液的制备：精密称取经120℃干燥至恒重的芦丁对照品13.13mg，置50mL容量瓶中，加60％乙醇适量，水浴微热使溶，放冷，用60％乙醇稀释至刻度，摇匀，得0.2626mg/mL的标准溶液。

(2)标准曲线的制备：精密吸取标准液1.0、2.0、3.0、5.0、7.0mL分别置25mL容量瓶中，各加水5mL，加入5％亚硝酸钠溶液1.0mL后，静置6min，加10％硝酸铝溶液1.0mL，摇匀，放置10min后，再加入氢氧化钠试液10mL，分别用水定容至刻度，摇匀，放置10min，以相应的溶液为空白，照紫外-可见分光光度法(《中华人民共和国药典》2005版一部附录V A)，在272nm处测定吸收度值(n＝3)，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。此标准曲线在0.010504～0.73528mg/mL范围内线性关系良好，标准曲线为A＝0.1104C+0.000179，r＝0.9999。

(3)测定法：分别取各试验项下的干膏1g，精密称定，置25mL量瓶内，加稀乙醇20mL，密塞，超声处理20min，放至室温，加稀乙醇至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液1mL，置25mL量瓶中，照标准曲线的制备项下的方法，自“加水5mL”起，制备供试品溶液，依法测定吸收度，依标准曲线计算供试品溶液的浓度，计算广金钱草总黄酮提取量，即得。

表2正交表L9(34)试验安排和试验结果

表3方差分析结果

注：F_0.05(2，2)＝19.00，F_0.01(2.2)＝99.00。

2.3结果

通过直观分析表2，方差分析表3可知，各因素对试验结果的影响顺序为D＞A＞C＞B，从试验结果的方差分析表3得出，除D、A因素外，各因素影响均不显著。从直观分析中可看出，影响本试验的主要因素依次是提取次数、乙醇浓度、提取时间、溶媒量，最佳条件为A2B1C2D3。确定最佳工艺为A2B1C2D3：即以50％乙醇为溶媒，提取3次，溶媒为12、10、10倍量，每次1.5h。

通过以上试验可以确定复方石淋通片的提取工艺为：取海金沙、忍冬藤、石韦分别加水煎煮二次，每次1.5-3小时，过滤，滤液合并，浓缩至适量，加入4-7倍量的70％乙醇，搅匀，静置，滤过，回收乙醇，浓缩成稠膏，备用；广金钱草加50％乙醇回流提取3次，每次1-2小时，滤过，回收乙醇，浓缩成稠膏，备用；合并上述稠膏，加入滑石粉及适量辅料，混匀，制成颗粒，压片，包衣，即得。

本发明药物的药效学试验资料

按照本发明的新方法制成的复方石淋通片进行药效学试验。

方法：采用乙二醇、氯化铵所致大鼠肾结石、葡萄糖盐水所致大鼠水负荷、巴豆油所致小鼠耳壳肿胀及角叉菜胶所致大鼠胸腔白细胞游走、醋酸所致小鼠疼痛等模型，观察复方石淋通片新老工艺的药效学作用。

结果：新工艺的复方石淋通片的利尿、抗炎及镇痛作用优于原工艺。

1材料

1.1动物 昆明小鼠，普通级。

1.2复方石淋通片稠膏批号：060101。

2方法

2.1复方石淋通片对大鼠肾结石的影响   选取体重190～240g♂性大鼠72只，随机分为4组，每组18只。给药剂量见表1。每天灌胃1次，连续30d。在此期间，除空白对照组外，其余3个组喂加有2％乙二醇、1％氯化铵的基础饲料(每100g饲料中加入乙二醇2g。氯化铵1g)，并于每周肌肉注射维生素D3一次，3万单位/kg，造成肾结石模型。实验结束时处死动物，剖腹观察双肾外形，取出双肾，纵向剖开，用解剖镜观察肾剖面有无明显结晶沉淀物及游离结石或钙化斑作为判断结石的标准。结果见表1。

表1复方石淋通片对大鼠肾结石的影响

t检验，X²检验，与模型对照组比较，*P＜0.05；**P＜0.01。与空白对照组比较，△△P＜0.01。

结果表明，新工艺的复方石淋通片防止乙二醇、氯化铵诱发的肾结石形成的能力高于原工艺，并使大鼠结石形成率降低.

2.2复方石淋通片对大鼠的利尿作用Wistar大鼠20只，♂性，体重180～240g，均分为3组，每组10只。禁食不禁水15h后，每鼠灌胃给予水负荷5％葡萄糖盐水3mL/100g30min后，然后灌胃给药，给药剂量同前实验。给药后压迫大鼠下腹，排尽余尿，然后置代谢笼中收集5h尿液，最后同法压迫大鼠下腹，分别测量各鼠尿液，并将给药组与对照组进行比较。结果见表2。

表2复方石淋通片对大鼠的利尿作用(x±s)

组别	动物数/只	剂量(g/kg)	尿量/(ml/5h)
				空白对照组	10		1.96±1.04
原工艺组	10	27.2	3.14±1.19*
				新工艺组	10	27.2	3.88±1.47**

t检验，与对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。

结果表明，新工艺的复方石淋通片利尿作用优于原工艺。

2.3复方石淋通片对巴豆油所致小鼠耳肿胀的影响小鼠30只，♂性，体重24～28g，随机分为3组，每组10只。然后灌胃给药，给药剂量见表3。药后1h，各鼠左耳用2％巴豆油合剂0.05mL/耳致炎，右耳作对照。4h后将小鼠拉断颈椎处死，剪下两耳，用直径9mm打孔器分别在同一部位打下耳片，以分析天平称取小鼠左右耳重量，以其差值作为炎性肿胀程度，并计算肿胀抑制百分率。结果见表3。

表3复方石淋通片对巴豆油所致小鼠耳肿胀的影响

t检验，与对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。

结果表明，新工艺的复方石淋通片对巴豆油所致小鼠耳肿胀的抑制作用优于原工艺。

2.4复方石淋通片对大鼠胸腔白细胞游走的影响  选取体重230～300g大鼠30只，随机分为3组，每组10只，♀、♂各半。然后灌胃给药，给药剂量见表4。于实验前48、24、1h灌胃给药3次，末次给药后1h，将大鼠用乙醚浅麻醉，仰位固定于手术台上。在大鼠右侧胸腔注入0.5％角叉菜胶0.5mL，5h后断头处死大鼠，在横隔周边部打开胸腔，用吸管吸出胸腔液，记录渗出液和白细胞数/只鼠(四个大方格白细胞数×50/μL×胸腔渗出液(mL×1000L))。结果见表4。

表4复方石淋通片对大鼠白细胞游走的影响(x±s)

t检验，与对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。

结果表明，新工艺的复方石淋通片抑制大鼠白细胞游走的效果优于原工艺。

2.5复方石淋通片对醋酸所致小鼠扭体反应的影响  选取体重18～22g小鼠30只，随机分为3组，每组10只，♀♂各半。然后灌胃给药，给药剂量见表5。药后1h，各鼠分别腹腔注射0.6％醋酸溶液0.2mL/只，观察注射后20min内出现的扭体反应，以及计算镇痛百分率。结果见表5。

表5复方石淋通片对醋酸所致小鼠扭体反应的影响

t检验，与对照组比较，P＜0.01。

结果表明，新工艺的复方石淋通片对醋酸所致小鼠扭体反应的抑制作用优于原工艺。

Claims (1)

1.一种制备复方石淋通片的方法，其原料药剂制备方法如下：

【处方】

广金钱草1500g        石韦500g      海金沙    500g

滑石粉25g            忍冬藤500g

【制备方法】

取海金沙、忍冬藤、石韦分别加水煎煮二次，每次1.5-3小时，过滤，滤液合并，浓缩至适量，加入4-7倍量的70％乙醇，搅匀，静置，滤过，回收乙醇，浓缩成稠膏，备用；广金钱草加50％乙醇回流提取3次，每次1-2小时，滤过，回收乙醇，浓缩成稠膏，备用；合并上述稠膏，加入滑石粉及适量辅料，混匀，制成颗粒，压片，包衣，即得。