CN103230408B

CN103230408B - 一种根皮素的制备方法

Info

Publication number: CN103230408B
Application number: CN201310152063.4A
Authority: CN
Inventors: 周金林; 黄宝华; 卢宇靖
Original assignee: FOSHAN JINJUNKANG HEALTH SCIENCE AND TECHNOLOGY Co Ltd
Current assignee: GOLDEN HEALTH BIOTECHNOLOGY Co.,Ltd.; Meizhou jinyoukang Health Technology Co., Ltd
Priority date: 2013-04-27
Filing date: 2013-04-27
Publication date: 2014-10-22
Anticipated expiration: 2033-04-27
Also published as: CN103230408A

Abstract

本发明提供一种根皮素的制备方法，包括如下步骤：使用柚苷二氢查尔酮在稀酸作用下加热水解，纯化得到根皮素。上述柚苷二氢查尔酮采用如下方法制得：柚苷在碱液和稀有金属催化剂的存在下，用氢气在中压以及常温或加热下进行催化氢化，然后从反应体系中收集柚苷二氢查尔酮。本方法操作简单，成本低，产品质量高，可以很好的满足根皮素在医药、食品和化妆品方面的大规模使用。

Description

一种根皮素的制备方法

技术领域

本发明涉及一种根皮素的制备方法。

背景技术

根皮素为二氢查尔酮类化合物，是存在于苹果、梨等水果及多种蔬菜中的天然活性物质，因在这些植物中的根茎或根皮中含量较为集中而得名，具有弱的雌激素样活性。二氢查尔酮类化合物具有独特的生物活性，国外研究者很早就开始研究它们在医疗保健、食品添加剂和功能性化妆品等方面的作用，并通过研究化合物结构与疗效之间的关系来研制开发新的药物，而研究其在生物体内的作用机理和代谢过程也在进行之中。

Setala Kai等的专利中描述了根皮素能激活蜂窝蛋白激酶，对细胞无序增生有疗效，是食品中的抗诱变因子，可用于皮肤癌及其他肿瘤的治疗（US4565806 Composition and method for rational treatment of cancer）。张凯等人研究了根皮素的抗肿瘤活性，发现对谷胱甘肽S－转移酶(GST)有一定的抑制作用（Biochem Pharmacol 1994(47):2063-2068）。GST是在人体解毒过程中有重要作用的多功能酶，可催化外源亲电性物质与谷胱甘肽发生亲核性作用，某些肿瘤细胞中含有的GST活性很高，使具有亲电作用的抗肿瘤药的药效降低。

Limasser B等的研究表明根皮素有极强的抗氧性，对油脂的抗氧化浓度在10～30PPm 之间，可清除皮肤内的自由基（Biochem Pharmacol 1993, 46(7):1257-1271）；外用能阻止糖类成分进入表皮细胞，从而抑制皮腺的过度分泌，治疗分泌旺盛型粉刺；另外还有抗糖尿病、抗帕金森病等作用。

根皮素在功能性化妆品中有着更为广泛的应用。国内外研究表明，根皮素能抑制黑色素细胞，对各种皮肤色斑有作用，与同类天然成分熊果苷、曲酸相比，同等浓度的根皮素的酪氨酸酶抑制效果最好，并且当与熊果苷和曲酸复配时，可以大大提高产品对酪氨酸酶的抑制效果。 Kitayama Takashi日本公开特许公报[P]93,213,729研究表明，根皮素具有抑制黑色素细胞活性，对各种皮肤色斑有淡化作用；其对于酪氨酸酶的抑制率优于熊果苷，等同于曲酸，但没有曲酸的副作用，是一种非常安全有效的祛斑美白剂。根皮素具有非常好的保湿作用，能吸收本身重量的4－5倍水分。根皮素是一种非常安全有效的透皮促渗剂，能促进配方中其他功能因子的吸收利用，使其发挥出更好的功效。Duranton等的研究表明，大豆脂肪氧合酶（LOX）抑制剂可以抑制毛发过早进入衰老而脱落，研究又表明根皮素具有良好的 LOX 抑制效果（US19995928654, 1999-7-27）。因此，根皮素又是一个良好的防脱发剂。

根皮素自然存在形态多是以糖苷形式存在即根皮苷，根皮苷可溶于水。现有的根皮素生产工艺，多是通过对根皮苷的酸水解、酶解。如将根皮苷质量含量为10-80％的根皮苷原料溶于去离子水中，加入活化的sino-β水解酶，酶解反应，固液分离，固体经干燥，得根皮素。由于根皮苷价格昂贵，导致这些方法的成本高，并且由于工艺复杂，工艺路线太长，导致不明杂质种类多，含量不易控制，非常不利于工业化的广泛应用。

发明内容

柚苷富含于柚果中，含量在5%左右，价格仅为根皮苷的二十分之一左右。柚苷是一种二氢黄酮的葡萄糖、鼠李糖苷，与根皮素的二氢查尔酮结构差异很大，因此，人们并没有认识到柚苷能用于根皮素的制备。本工艺中，将柚苷的二氢黄酮结构高效转化为具有二氢查尔酮结构的根皮素，出人意料地开发出来一条工业化制备根皮素的一种可行途径。

基于此，本发明的目的是提供一种产品含量高、环境友好、操作简单、周期短、成本低的根皮素的生产工艺。

具体的，本发明提供如下产品：

一种组合物，其中含有根皮素，特征杂质A——柚苷二氢查尔酮，特征杂质B——柚皮素-7-葡萄糖苷。由于本发明的方法完全不同于现有技术，故现有技术所生产的根皮素不含有上述特征杂质，凡含有上述特征杂质的，均是利用本专利方法所生产的，其可以作为鉴别是否采用本方法的重要标志。

上述组合物中根皮素含量为70％-99.9％，特征杂质A含量为0.05％-29％，特征杂质B含量为0.5％-29％。

由于本发明做得到的根皮素中特征杂质种类确定含量可控，使得本发明所制的的根皮素可以用于现有技术根皮素不能应用的领域，可以达到药品级和化妆品级。

本发明还提供如下方法：

一种根皮素的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

使用柚苷二氢查尔酮在稀酸作用下加热水解，纯化得到根皮素。

上述柚苷二氢查尔酮采用如下方法制得：

柚苷在碱液和稀有金属催化剂的存在下，用氢气在中压以及常温或加热下进行催化氢化，然后从反应体系中收集柚苷二氢查尔酮。

上述根皮素的制备方法，其反应条件可以是：所述的稀有金属催化剂指瑞尼镍和/或Pd/C；和/或反应压力为0.1～3MPa，反应温度为0～200℃；和/或所述的稀酸包括但不限于稀盐酸、稀硫酸、稀甲酸、稀乙酸，以及它们的混合酸；和/或所述的加热水解温度为60-100℃；和/或所述纯化方法是经醇溶液重结晶，所述的醇溶液为任意比例的乙醇、甲醇水溶液。

本发明还提供前述方法所制的产品。

前述任一种产品在制备用于抗肿瘤、抗糖尿病、抗帕金森病、防脱发剂、美白抗衰老等产品中的用途。

本方法操作简单，成本低，产品质量高，可以很好的满足根皮素在医药、食品和化妆品方面的大规模使用。

具体实施方式

下面将结合具体实施例对本发明进行进一步说明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施例。

实施例1

20克柚苷，室温下溶于200ml 10%NaOH水溶液中，加入3克商品化的瑞尼镍作为催化剂，抽真空后换入氮气，反复3次后通入氢气，氢气压力为1个大气压。后室温氢化20小时。过滤，滤液用10%的盐酸调至中性，过滤收集固体，得到湿的柚苷二氢查尔酮26克，水分含量20%，产率92%。M.P.: 170～171℃;1H NMR (D2O-d6, 300 Hz 7.07 (d, J = 6, 2H), 6.75 (d, J = 6, 2H), 6.01 (s, 1H), 5.17 (d, J = 6.0, 1H ), 5.07 (s, 1H), 3.86 (d, J = 8.4, 1H), 3.34 (m, 10H), 3.22 (t, 2H), 2.87 (t, 2H),; ESI-MS m/z 581 [M-H]-。

实施例2

20克柚苷二氢查尔酮，10%的稀盐酸250ml，加热回流3小时。冷却，过滤收集固体。固体用30%的乙醇重结晶，得到8克纯的根皮素，产率90%，含量99.2%。 M.P.: 257～258℃; 1H NMR (CD3Cl, 300 Hz ): 6.97 (d, J = 6.0, 2H ), 6.56 (d, J = 7.0, 2H), 5.84 (s, 2H), 3.21 (t, J = 6.0, 2H), 2.73 (d, J = 6.0, 2H), ESI-MS m/z 273 [M-H]-。特征杂质A，含量0.3% M.P.: 170～171℃;1H NMR (D2O-d6, 300 Hz 7.07 (d, J = 6, 2H), 6.75 (d, J = 6, 2H), 6.01 (s, 1H), 5.17 (d, J = 6.0, 1H ), 5.07 (s, 1H), 3.86 (d, J = 8.4, 1H), 3.34 (m, 10H), 3.22 (t, 2H), 2.87 (t, 2H),; ESI-MS m/z 581 [M-H]-。特征杂质B，含量0.2%，ESI-MS m/z 434 [M-H]-。

实施例3

其他条件同实施例1 ，仅将催化剂换成5%的Pd/C。产率95%。

实施例4

其他条件同实施例2，将10%的稀盐酸换成5%的稀硫酸。其中根皮素，产率93%，含量98.5%。M.P.: 257～258℃;

1H NMR (CD3Cl, 300 Hz ): 6.97 (d, J = 6.0, 2H ), 6.56 (d, J = 7.0, 2H), 5.84 (s,

2H), 3.21 (t, J = 6.0, 2H), 2.L73 (d, J = 6.0, 2H), ESI-MS m/z 273 [M-H]-。特征杂质A，含量0.7% M.P.: 170～171℃;1H NMR (D2O-d6, 300 Hz 7.07 (d, J = 6, 2H), 6.75 (d, J = 6, 2H), 6.01 (s, 1H), 5.17 (d, J = 6.0, 1H ), 5.07 (s, 1H), 3.86 (d, J = 8.4, 1H), 3.34 (m, 10H), 3.22 (t, 2H), 2.87 (t, 2H),; ESI-MS m/z 581 [M-H]-。特征杂质B，含量0.4%，ESI-MS m/z 433 [M-H]-。

实施例5

其他条件同实施例2，将30%的乙醇溶液换成10%的甲醇溶液。得到根皮素，产率88%，含量99.5%。M.P.: 257～258℃; 1H NMR (CD3Cl, 300 Hz ): 6.97 (d, J = 6.0, 2H ), 6.56 (d, J = 7.0,

2H), 5.84 (s, 2H), 3.21 (t, J = 6.0, 2H), 2.73 (d, J = 6.0, 2H), ESI-MS m/z 273 [M-H]-。特征杂质A，含量0.2% M.P.: 170～171℃;1H NMR (D2O-d6, 300 Hz 7.07 (d, J = 6, 2H), 6.75 (d, J = 6, 2H), 6.01 (s, 1H), 5.17 (d, J = 6.0, 1H ), 5.07 (s, 1H), 3.86 (d, J = 8.4, 1H), 3.34 (m, 10H), 3.22 (t, 2H), 2.87 (t, 2H),; ESI-MS m/z 581 [M-H]-。特征杂质B，含量0.3%，ESI-MS m/z 433[M-H]-。

Claims

1.一种根皮素的制备方法，其特征在于：

采用下述方法制得柚苷二氢查尔酮：柚苷在碱液和稀有金属催化剂的存在下，用氢气在中压以及常温或加热下进行催化氢化，然后从反应体系中收集柚苷二氢查尔酮；

然后，使用柚苷二氢查尔酮在稀酸作用下加热水解，纯化得到根皮素；

该根皮素产物中含有特征杂质A，即柚苷二氢查尔酮，和特征杂质B，即柚皮素-7-葡萄糖苷。

2.根据权利要求1所述的方法，其产物中根皮素含量为70％-99.9％，特征杂质A含量为0.05％-29％，特征杂质B含量为0.05％-29％。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：

稀有金属催化剂指瑞尼镍和/或Pd/C；

和/或

反应压力为0.1～3MPa，反应温度为0～200℃；

和/或

稀酸包括但不限于稀盐酸、稀硫酸、稀甲酸、稀乙酸，以及它们的混合酸；

和/或

加热水解温度为60-100℃；

和/或

纯化方法是经醇溶液重结晶，所述的醇溶液为任意比例的乙醇、甲醇水溶液。