CN103203032A - 锝[99Tc]亚甲基二膦酸盐制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及药物化学领域，具体公开了一种锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐制剂及其制备方法。本发明的锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐制剂为冻干粉针剂，单位制剂中含有：高锝[⁹⁹Tc]酸钠0.05μg～1μg(以⁹⁹Tc计)，亚甲基二膦酸5mg～100mg，氯化亚锡0.5mg～5mg。本发明进一步公开了锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐冻干粉针剂的制备方法。本发明的锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐冻干粉针剂有效提高了⁹⁹Tc与亚甲基二膦酸的络合率，提高了锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐制剂的稳定性和有效性，避免了临床前配制染菌的风险，降低了生产成本。

Description

锝[99Tc]亚甲基二膦酸盐制剂及其制备方法

技术领域

本发明属于药物化学技术领域，特别涉及一种锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐制剂及其制备方法。

背景技术

锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸注射液(简称“⁹⁹Tc-MDP”)是用于类风湿性关节炎及骨科疾病治疗的药物。⁹⁹Tc-MDP通过微量元素⁹⁹Tc的失电子和价态的变化可清除体内的自由基，保证体内的SOD(超氧化物歧化酶)活力，抑制免疫复合物的产生；⁹⁹Tc-MDP中的MDP(亚甲基二膦酸盐)成分通过螫合金属离子可降低基质金属蛋白酶的活性，从而抑制胶原酶对关节软骨的破坏；同时，MDP具有良好透膜作用，将⁹⁹Tc载入关节腔，使其能在很近距离对病变部位发挥长期治疗作用。⁹⁹Tc-MDP具有抑制前列腺素合成和组胺的释放，可以产生消炎镇痛的作用，是一种新型的、毒副作用低的类风湿性关节炎的治疗药物(刘晓梅等，⁹⁹Tc-MDP在免疫性疾病及顾客疾病中的临床应用进展，河北医药2008(30)10：1588～1561)。

中国专利CN1046095C(公告日1999年11月3日)公开了一种用于治疗类风湿性疾病的药物，含有有效成分和药学中允许的还原剂，所述有效成分的重量份组成为：高锝酸钠0.04～0.3(以锝含量计)，药学中允许的膦酸盐4000～10000，其中锝为锝[⁹⁹Tc^m]的衰变产物锝[⁹⁹Tc]，药学中允许的膦酸盐可以为亚甲基二膦酸盐、羟基亚甲基二膦酸盐、羟基乙叉二膦酸盐、乙二胺四甲撑膦酸盐、二乙撑三胺五甲撑膦酸盐中的至少一种，且所说各膦酸盐均不包括5000重量份在内。锝[⁹⁹Tc]为锝[⁹⁹Tc^m]的衰变产物，⁹⁹Tc半衰期为2.14×10⁵a，⁹⁹Tc^m半衰期为6.02h。锝[⁹⁹Tc^m]亚甲基二膦酸盐注射液在前述专利申请日前即已载入中国药典(1990年版)。由于锝[⁹⁹Tc^m]的半衰期较短，因此中国药典中记载，锝[⁹⁹Tc^m]亚甲基二膦酸盐注射液的制法为：临用前，在无菌操作条件下，依高锝[⁹⁹Tc^m]酸钠注射液(一般称为A剂，注射液)的放射性浓度，取4～6ml，注入注射用亚锡亚甲基二膦酸盐(一般称为B剂，冻干粉)瓶中，充分振摇，使冻干物溶解，静置5分钟，即得。鉴于中国药典已就锝[⁹⁹Tc^m]亚甲基二膦酸盐注射液制法作出了技术指导，且由于本领域普遍存在锝[⁹⁹Tc]在生产过程中被还原为四价后在临床使用前可能被氧化的担心，因此中国专利CN1046095C对前述“治疗类风湿性疾病的药物”的制备方法仍采用前述中国药典所记载的方法，“锝[⁹⁹Tc^m]亚甲基二膦酸盐注射液已载入中国药典，因此本发明药物的制备可采用现有的各种已知方法而并无其他特殊要求：在还原条件下(如还原剂)将高锝[⁹⁹Tc]酸钠与膦酸盐混合即成”(说明书第3页倒数第6行至倒数第4行)。因此，前述混合，同样也是中国药典所记载的临用前将A剂与B剂混合的方法(这一方法，同样也被记载在中华人民共和国2010版药典《临床用药须知》中的化学药和生物制品卷，中国医药科技出版社，国家药典委员会主编，1298页)；前述治疗类风湿性疾病的药物，是高锝[⁹⁹Tc]酸钠制剂与膦酸盐制剂的组合制剂形式，而并非单一制剂形式。中国专利CN1141145C进一步明确了锝[⁹⁹Tc]膦酸盐静脉注射液的制备方法：先分别制备高锝[⁹⁹Tc]酸钠注射液(A剂)与亚锡亚甲基二膦酸盐(B剂)，临用前按无菌操作要求，将A剂注入B剂，充分振动反应，生成锝[⁹⁹Tc]膦酸盐络合物(说明书第3页第6页至15页)。

综上，作为现有的锝[⁹⁹Tc]膦酸盐注射液，是一种高锝[⁹⁹Tc]酸钠注射液(A剂)与亚锡亚甲基二膦酸盐冻干粉针剂(B剂)的组合制剂。其制备方法是：临床使用前将A剂与B剂混合，B剂中的SnCl₂与A剂中的Na⁹⁹TcO₄反应，将正七价的⁹⁹Tc(VII)还原成正四价的⁹⁹Tc(IV)，还原态的⁹⁹Tc(IV)与溶液中的MDP反应生成络合物(⁹⁹Tc-MDP)。要保证锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸注射液的治疗效果，必须保证临床使用时进入到患者体内的药物中⁹⁹Tc主要以⁹⁹Tc-MDP络合物的形式存在。而⁹⁹Tc只有正四价的价态在酸性溶液中才与MDP生成络合物，而正七价的锝不能与MDP形成络合物。因此，为了保证⁹⁹Tc与MDP有比较高的络合率，必须控制其络合条件及还原条件。由于现有的锝[⁹⁹Tc]膦酸盐注射液在使用前才进行室温混合，而我国是地大广袤的国家，南北温差较大，而各医疗单位场所具备的条件不一样，难以保证药剂的配制场所温度达到25℃，如果注射液配制时的温度较低，将会降低⁹⁹Tc与MDP的络合率，并降低治疗效果。此外，将A剂注入到B剂瓶中，充分摇震的过程中，如果临床操作人员摇震的程度不一样，也会造成⁹⁹Tc与MDP络合的程度不一样，如果⁹⁹Tc与MDP络合不充分，同样将降低药品的治疗效果。另外，由于临床使用前须进行混合，因此增加了临床人员的操作工作量和混合过程中药品染菌的风险。

因此，有必要寻找一种能有效提高⁹⁹Tc与MDP的络合率的药物剂型及其制法，使之既能有效提高锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐中⁹⁹Tc与MDP的络合率，保证疗效，又能减少临床操作工作量，有效避免制剂被污染。

发明内容

本发明的主要目的是针对上述现有技术中存在的⁹⁹Tc与MDP的络合率低，影响药物疗效，临床操作中制剂易被污染的问题，提供一种能有效提高⁹⁹Tc与MDP络合率的锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐制剂。进一步，本发明提供前述锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐制剂的制备方法。

为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：

锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐制剂，所述制剂为冻干粉针剂，单位制剂中含有：

高锝[⁹⁹Tc]酸钠    0.05μg～1μg(以⁹⁹Tc计)

亚甲基二膦酸      5mg～100mg

氯化亚锡          0.5mg～5mg。

本发明的发明人摒弃了现有技术普遍存在的关于将锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐制成单一制剂可能导致⁹⁹Tc被氧化从而影响⁹⁹Tc与MDP络合率的技术偏见，成功得到了锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐冻干粉针剂，不仅克服了还原态⁹⁹Tc(IV)被氧化的倾向，而且有效提高⁹⁹Tc与MDP的络合率，大大增强了锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐的治疗效果，并且由于将锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐制成了单一剂型，因此避免了制剂在临床使用前被污染，减少了临床操作工作量。

作为优选，前述锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐制剂，所述高锝[⁹⁹Tc]酸钠的含量为0.05～0.2μg(以⁹⁹Tc计)，所述亚甲基二膦酸的含量为5mg～20mg，所述氯化亚锡的含量为0.5～2mg。

作为进一步优选，前述锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐制剂，所述高锝[⁹⁹Tc]酸钠的含量为0.05μg(以⁹⁹Tc计)，所述亚甲基二膦酸的含量为5mg，所述氯化亚锡的含量为0.5mg。通过前述优选，本发明得到的锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐冻干粉针剂，⁹⁹Tc与MDP的络合率高，品质安全。

作为优选，前述锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐制剂，所述单位制剂还含有抗氧化剂0.1～10mg。作为进一步优选，前述锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐制剂，所述抗氧化剂选自抗坏血酸或龙胆酸的任一种。通过增加抗氧化剂并筛选抗氧化剂的含量，能进一步提高本发明锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐冻干粉针剂的稳定性。

作为优选，前述锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐制剂，所述单位制剂还含有赋形剂0.1～50mg。作为进一步优选，前述锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐制剂，所述赋形剂优选氯化钠。作为更进一步的优选，前述锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐制剂，所述高锝[⁹⁹Tc]酸钠的含量为0.05μg(以⁹⁹Tc计)，所述亚甲基二膦酸的含量为5mg，所述氯化亚锡的含量为0.5mg，所述氯化钠的含量为5mg。通过进一步增加赋形剂并筛选赋形剂的含量，本发明得到的锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐冻干粉针剂成形效果更好。

作为本发明的第二个目的，本发明提供前述锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐制剂的制备方法。前述锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐制剂的制备方法，包括步骤：无菌环境，20℃～30℃下将配方量组成成分混合，氢氧化钠或盐酸调节溶液pH＝4～8，注射用水定容；配制好的药品溶液除菌过滤；无菌条件下分装在西林瓶中；冷冻干燥，即得。

作为进一步优选，前述锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐制剂的制备方法，所述冷冻干燥，包括如下步骤：

(1)冻结：所述药品溶液预冻，温度为-40℃～-55℃，时间为3h～10h；

(2)升华：所述药品溶液冻结后，开启冷凝器，当冷凝器温度达-45℃～-55℃时，开启真空系统，升温使所述药品的温度保持-30℃±10℃，时间4h～36h；

(3)干燥：所述药品逐渐升温至25℃±10℃，真空干燥1h～6h；压塞，放入无菌空气。

作为更进一步优选，前述锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐冻干粉针剂的制备方法，步骤(1)所述温度为-50℃。步骤(2)所述冷凝器温度为-45℃，步骤(2)所述升温使药品温度保持-25℃±5℃，步骤(2)所述时间为6h。步骤(3)所述升温至30℃，所述真空干燥6h。通过更进一步优选前述冻干工艺参数，本发明得到的锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐冻干粉针剂中⁹⁹Tc与MDP的络合率最高，药物最稳定，因此得到的药物疗效最好。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

一、本发明的锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐冻干粉针剂的⁹⁹Tc与MDP的络合率高，有效提高了产品的质量及稳定性，保证了产品的治疗效果；

二、本发明的锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐冻干粉针剂为单一制剂，与现有技术中需要在临床前将高锝[⁹⁹Tc]酸钠注射液(A剂)与亚锡亚甲基二膦酸盐(B剂)进行混合相比，降低了生产成本，方便使用，并且消除了现有技术的组合制剂在使用过程中容易染菌的风险。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明的上述发明内容作进一步的详细描述。

但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于下述实施例。在不脱离本发明上述技术思想情况下，根据本领域普通技术知识和惯用手段，做出各种替换和变更，均应包括在本发明的范围内。

实施例1

本实施例列举的锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐冻干粉针剂，组成如下：7mL西林瓶中，含有高锝[⁹⁹Tc]酸钠0.05μg(以⁹⁹Tc计)，亚甲基二膦酸5mg，SnCl₂ 0.5mg。

制备方法：

在无菌环境25℃下，将配方量高锝[⁹⁹Tc]酸钠溶液、亚甲基二膦酸的水溶液和SnCl₂的盐酸溶液混合，氢氧化钠调节溶液pH值至5.0，再加注射用水定容，使得每毫升溶液中⁹⁹Tc为0.05μg，亚甲基二膦酸5mg，SnCl₂ 0.5mg。配制好的药品溶液进行除菌过滤，并迅速分装在西林瓶中，每个7mL西林瓶中药品溶液体积为1mL，装有药品溶液的西林瓶放入冻干箱，冷冻干燥形成冻干粉针剂。

冷冻干燥过程如下：

(1)冻结：将装有药品溶液的西林瓶放入冻干箱预冻，温度为-45℃，时间为4h；

(2)升华：药品溶液冻结后，开启冷凝器，当冷凝器温度达-45℃时，开启真空系统，给药品升温使得药品温度保持在-25℃±5℃，时间6h；

(3)干燥：将药品逐渐升温至30℃，保持真空干燥6h；最后经压塞，关机，放入无菌空气，出箱。

实施例2

本实施例列举的锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐冻干粉针剂，组成如下：7mL西林瓶中，含有高锝[⁹⁹Tc]酸钠0.2μg(以⁹⁹Tc计)，亚甲基二膦酸20mg，SnCl₂ 2mg。

制备方法：

在无菌环境20℃下，将高锝[⁹⁹Tc]酸钠溶液、亚甲基二膦酸的水溶液和SnCl₂的盐酸溶液混合，氢氧化钠调节溶液pH值5.4，再加注射用水定容，使得每毫升溶液中⁹⁹Tc含量为0.2μg，亚甲基二膦酸为20mg，SnCl₂为2mg。配制好的药品溶液进行除菌过滤，并迅速分装在西林瓶中，每个7mL西林瓶中药品溶液体积为1mL，装有药品溶液的西林瓶放入冻干箱，冷冻干燥形成冻干粉针剂。

冷冻干燥过程如下：

(1)冻结：将装有药品溶液的西林瓶放入冻干箱预冻，温度为-50℃，时间为3h；

(2)升华：药品溶液冻结后，开启冷凝器，当冷凝器温度达-50℃时，开启真空系统，给药品升温使得药品温度保持在-25℃±4℃，时间9h。

(3)干燥：将药品逐渐升温至35℃，保持真空干燥1h；最后经压塞，关机，放入无菌空气，出箱。

实施例3

本实施例列举的锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐冻干粉针剂，组成如下：7mL西林瓶中，含有高锝[⁹⁹Tc]酸钠1μg(以⁹⁹Tc计)，亚甲基二膦酸100mg，SnCl₂ 5mg。

制备方法：

在无菌环境30℃下，将配方量高锝[⁹⁹Tc]酸钠溶液、亚甲基二膦酸的水溶液和SnCl₂的盐酸溶液混合，氢氧化钠调节溶液pH值至5.2，再加注射用水定容，使得每毫升溶液中⁹⁹Tc含量为1μg，亚甲基二膦酸为100mg，SnCl₂为5mg。配制好的药品溶液进行除菌过滤，并迅速分装在西林瓶中，每个7mL西林瓶中药品溶液体积为1mL，装有药品溶液的西林瓶放入冻干箱，冷冻干燥形成冻干粉针剂。

冷冻干燥过程如下：

(1)冻结：将装有药品溶液的西林瓶放入冻干箱预冻，温度为-55℃，时间为6h；

(2)升华：药品溶液冻结后，开启冷凝器，当冷凝器温度达-55℃时，开启真空系统，给药品升温使得药品温度保持在-35℃±5℃，时间20h；

(3)干燥：将药品逐渐升温至15℃，保持真空干燥6h；最后经压塞，关机，放入无菌空气，出箱。

实施例4

本实施例列举的锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐冻干粉针剂，组成如下：高锝[⁹⁹Tc]酸钠0.05μg(以⁹⁹Tc计)，亚甲基二膦酸5mg，SnCl₂ 2mg，抗坏血酸0.1mg。

制备方法：

在无菌环境25℃下，将配方量高锝[⁹⁹Tc]酸钠溶液、亚甲基二膦酸的水溶液、SnCl₂的盐酸溶液和抗坏血酸溶液混合，氢氧化钠调节溶液pH值至4.5，再加注射用水定容，使得每毫升溶液中⁹⁹Tc含量为0.05μg，亚甲基二膦酸为5mg，SnCl₂为2mg，抗坏血酸为0.1mg。配制好的药品溶液进行除菌过滤，并迅速分装在西林瓶中，每个7mL西林瓶中药品溶液体积为1mL，装有药品溶液的西林瓶放入冻干箱，冷冻干燥形成冻干粉针剂。

冷冻干燥过程如下：

(1)冻结：将装有药品溶液的西林瓶放入冻干箱预冻，温度为-50℃，时间为8h；

(2)升华：药品溶液冻结后，开启冷凝器，当冷凝器温度达-50℃时，开启真空系统，给药品升温使得药品温度保持在-35℃±5℃，时间24h；

(3)干燥：将药品逐渐升温至30℃，保持真空干燥4h；最后经压塞，关机，放入无菌空气，出箱。

实施例5

本实施例列举的锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐冻干粉针剂，组成如下：7mL西林瓶中，含有高锝[⁹⁹Tc]酸钠1μg(以⁹⁹Tc计)，亚甲基二膦酸50mg，SnCl₂ 5mg，龙胆酸10mg，氯化钠0.1mg。

制备方法：

在无菌环境25℃下，将配方量氯化钠、高锝[⁹⁹Tc]酸钠溶液、亚甲基二膦酸的水溶液、SnCl₂的盐酸溶液和龙胆酸溶液混合，氢氧化钠调节溶液pH值至6.0，再加注射用水定容，使得每毫升溶液中⁹⁹Tc含量为1μg，亚甲基二膦酸为50mg，SnCl₂为5mg，龙胆酸为10mg，氯化钠为0.1mg。配制好的药品溶液进行除菌过滤，并迅速分装在西林瓶中，每个7mL西林瓶中药品溶液体积为1mL，装有药品溶液的西林瓶放入冻干箱，冷冻干燥形成冻干粉针剂。

冷冻干燥过程如下：

(1)冻结：将装有药品溶液的西林瓶放入冻干箱预冻，温度为-40℃，时间为10h；

(2)升华：药品溶液冻结后，开启冷凝器，当冷凝器温度达-50℃时，开启真空系统，给药品升温使得药品温度保持在-35℃±5℃，时间36h；

(3)干燥：将药品逐渐升温至30℃，保持真空干燥3h；最后经压塞，关机，放入无菌空气，出箱。

实施例6

本实施例列举的锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐冻干粉针剂，组成如下：7mL西林瓶中，含有高锝[⁹⁹Tc]酸钠1μg(以⁹⁹Tc计)，亚甲基二膦酸100mg，SnCl₂ 5mg，氯化钠20mg。

制备方法：

在无菌环境25℃下，将配方量氯化钠、高锝[⁹⁹Tc]酸钠溶液、亚甲基二膦酸的水溶液、SnCl₂的盐酸溶液混合，氢氧化钠调节溶液pH值至8.0，再加注射用水定容，使得每毫升溶液中⁹⁹Tc含量为1μg，亚甲基二膦酸为100mg，SnCl₂为5mg，氯化钠为20mg。配制好的药品溶液进行除菌过滤，并迅速分装在西林瓶中，每个7mL西林瓶中药品溶液体积为1mL，装有药品溶液的西林瓶放入冻干箱，冷冻干燥形成冻干粉针剂。

冷冻干燥过程如下：

(1)冻结：将装有药品溶液的西林瓶放入冻干箱预冻，温度为-50℃，时间为4h；

(2)升华：药品溶液冻结后，开启冷凝器，当冷凝器温度达-50℃时，开启真空系统，给药品升温使得药品温度保持在-25℃±5℃，时间6h；

(3)干燥：将药品逐渐升温至30℃，保持真空干燥6h；最后经压塞，关机，放入无菌空气，出箱。

实施例7

本实施例列举的锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐冻干粉针剂，组成如下：7mL西林瓶中，含有高锝[⁹⁹Tc]酸钠0.05μg(以⁹⁹Tc计)，亚甲基二膦酸5mg，SnCl₂ 0.5mg，氯化钠5mg。

制备方法：

在无菌环境25℃下，将配方量氯化钠、高锝[⁹⁹Tc]酸钠溶液、亚甲基二膦酸的水溶液和SnCl₂的盐酸溶液混合，氢氧化钠调节溶液pH值至5.0，再加注射用水定容，使得每毫升溶液中⁹⁹Tc的含量为0.05μg，亚甲基二膦酸为5mg，SnCl₂为0.5mg，NaCl为5mg。配制好的药品溶液进行除菌过滤，并迅速分装在西林瓶中，每个7mL西林瓶中药品溶液体积为1mL，装有药品溶液的西林瓶放入冻干箱，冷冻干燥形成冻干粉针剂。

冷冻干燥过程如下：

(1)冻结：将装有药品溶液的西林瓶放入冻干箱预冻，温度为-50℃，时间为4h；

(2)升华：药品溶液冻结后，开启冷凝器，当冷凝器温度达-50℃时，开启真空系统，给药品升温使得药品温度保持在-25℃±5℃，时间6h；

(3)干燥：将药品逐渐升温至30℃，保持真空干燥6h；最后经压塞，关机，放入无菌空气，出箱。

试验例1

本试验例，是对本发明锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐注射液冻干粉针剂与现有技术的锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐注射液络合率的比较。

本试验例中，锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐注射液冻干粉针剂1的组成如下：7mL西林瓶中含高锝[⁹⁹Tc]酸钠0.05μg(以⁹⁹Tc计)，亚甲基二膦酸5mg，SnCl₂0.5mg。制备方法同实施例1。锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸注射液冻干粉针剂2的组成如下：7mL西林瓶中含高锝[⁹⁹Tc]酸钠0.05μg(以⁹⁹Tc计)，亚甲基二膦酸5mg，SnCl₂ 0.5mg，抗坏血酸1mg。前述锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐注射液冻干粉针剂的制备方法同实施例4。

对照品：取已经上市的锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐注射液的A剂和B剂，A剂为高锝[⁹⁹Tc]酸钠注射液，含有高锝[⁹⁹Tc]酸钠0.05μg(以⁹⁹Tc计)；B剂为注射用亚锡亚甲基二膦酸盐冻干粉，含有亚甲基二膦酸5mg，SnCl₂ 0.5mg。

取锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐冻干粉针剂1、锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐冻干粉针剂2、和对照用锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐注射液的A剂和B剂，分别在0℃、10℃、20℃和30℃下分别络合1min、5min和10min。其中对照用锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐注射液将A剂注入到B剂放置不同时间后测定，锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐冻干粉针剂分别在0℃、10℃、20℃和30℃下直接加入5mL生理盐水溶解后放置不同时间再测定。

测定条件为：Beckman反相C8柱(5μm，

流动相为0.03mol/L乙酸-乙酸钠缓冲液(pH＝4.5)，流速1mL/min，紫外检测波长254nm(刘宁，抗类风湿药物锝克湿A剂中高锝酸盐的高效液相色谱测定，四川大学学报(自然科学版)1995，32(4)：406～411)。游离态的⁹⁹Tc能够被仪器检出，络合态的⁹⁹Tc不能被仪器检测，通过高效液相检测溶液中游离态⁹⁹Tc的含量，再将游离态的⁹⁹Tc含量与溶液中⁹⁹Tc的总量相比较，计算⁹⁹Tc与MDP的络合率，见表1。

表1.锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐制剂在不同温度下反应不同时间的络合率

由表1的数据可知，高锝[⁹⁹Tc]酸钠注射液与注射用亚锡亚甲基二膦酸盐冻干粉在0℃及10℃下络合1～10min后的络合率为83.6％～94.1％，而只有温度达到20℃和30℃后络合率提高且相对稳定，络合为95.9％～98.7％。而本发明的锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐冻干粉针剂在0℃～30℃络合1min～10min后，⁹⁹Tc与MDP的络合率均高于98％，⁹⁹Tc与MDP的络合率较高并且比较稳定，不受络合温度和络合时间的影响。

由此可见，本发明的锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐冻干粉针剂，⁹⁹Tc与MDP络合率高且稳定，不会因为使用地区温度的差异和医生操作的差异而造成⁹⁹Tc与MDP有不同的络合率。同时，本发明的锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐冻干粉针剂只需要制备一瓶冻干粉针剂，与原有剂型相比，具有生产工艺简单、生产成本低的优点。此外，由于临床使用减少了水针剂与粉针剂混溶的过程，因此也消除了在混溶过程中药品可能染菌的风险。

试验例2

取已上市锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐注射液的A剂和B剂，分别在0℃、10℃、20℃时将A剂加入到B剂进行溶解，并络合5min后，立即给予受试动物相应的药物，同时取实施例1所制备的锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐注射液冻干粉针剂在20℃下用生理盐水溶解后，立即给予受试动物进行试验。阳性对照药：地塞米松膦酸钠注射液1ml∶5mg，上海医药(集团)有限公司华联制药厂生产。

取昆明种雄性小鼠60只，体重18～22g。按体重随机分成6组，每组10只，按照锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐注射液的A剂和B剂0℃络合(I组)、10℃络合(II组)、20℃络合组(III组)，实施例1制备的新型锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐注射液冻干粉针剂组(IV组，简称新型制剂组)，地塞米松组(V组)，生理盐水组(VI组)作为空白对照。给予小鼠尾静脉注射给药，给药量见表2所示，每天给药1次，连续给药3天，于末次给药后30min时，用微量注射器于右耳内外两侧涂抹20μl二甲苯致炎，致炎后20min脱颈处死。用1cm打孔器沿耳缘取下小鼠左、右耳片，用电子天平称重，以左右耳片重量之差表示肿胀程度，研究对二甲苯诱发的小鼠耳肿胀的影响。

表2.对二甲苯诱发的小鼠耳肿胀的影响

与生理盐水组比较：*P＜0.05，**P＜0.01；与0℃组比较：△P＜0.05，△△P＜0.01。

由表2的结果可知，受试药物与生理盐水组比较，皆能抑制由二甲苯诱导的小鼠耳肿胀；通过表2还可见，随着络合温度的升高，其抑制耳肿胀作用越强，且以本发明的新型制剂组抑制作用最强。由此可见，⁹⁹Tc与MDP络合率与络合温度密切相关；⁹⁹Tc与MDP络合率越高，其抑制炎症作用越强；本发明的因有较高的络合率，能保持其抑制炎症作用最高且抑制作用稳定。

试验例3

同样取昆明种雄性小鼠60只，体重18～22g。按体重随机分成6组，每组10只，按照锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸注射液的A剂和B剂0℃络合(I组)、10℃络合(II组)、20℃络合组(III组)，以上三组可统称为原制剂组；实施例1制备的锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐注射液冻干粉针剂组(IV组，新型制剂组)；盐酸吗啡组(V组)，生理盐水组(VI组)作为空白对照。

盐酸吗啡组从皮下给药，其它5组尾静脉给药，给药后30min腹腔注入0.7％醋酸，每只给予0.2ml，观察各组小鼠在20min内扭体次数。

表3.对小鼠腹腔注射醋酸所致扭体反应的影响

组别编号	药物组成	剂量(μg/kg)	20min内扭体次数
				VI	生理盐水	--	43.1±15.1
I	原制剂0℃络合	1.0×10-3	25.7±10.2**
				II	原制剂10℃络合	1.0×10-3	22.4±7.7*
III	原制剂20℃络合	1.0×10-3	19.3±8.6**
				IV	新型制剂	1.0×10-3	19.1±7.2**
V	盐酸吗啡	2.0(mg/Kg)	10.2±3.5**

与生理盐水组比较：*P＜0.05，**P＜0.01。

由表3的实验结果可知，受试药物与生理盐水组比较，皆能抑制因醋酸产生的化学刺激的小鼠扭体次数，且随着⁹⁹Tc与MDP络合稳定升高其20min内扭体次数也随之减少，在新型制剂组中小鼠在20min内扭体次数最少。由此表明，新型制剂组其镇痛作用明显强于原制剂组的阵痛作用。

通过前述试验例可见，本发明的锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐注射液冻干粉针剂有效提高了⁹⁹Tc与MDP的络合率，显著提高了锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸制剂的稳定性和有效性，并避免了临床前配制的染菌风险，降低了生产成本。

Claims (10)

1.锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐制剂，其特征在于，所述制剂为冻干粉针剂，单位制剂中含有：

高锝[⁹⁹Tc]酸钠    0.05μg～1μg(以⁹⁹Tc计)

亚甲基二膦酸      5mg～100mg

氯化亚锡          0.5mg～5mg。

2.根据权利要求1所述的锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐制剂，其特征在于，所述高锝[⁹⁹Tc]酸钠的含量为0.05～0.2μg(以⁹⁹Tc计)，所述亚甲基二膦酸的含量为5mg～20mg，所述氯化亚锡的含量为0.5～2mg。

3.根据权利要求2所述的锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐制剂，其特征在于，所述高锝[⁹⁹Tc]酸钠的含量为0.05μg(以⁹⁹Tc计)，所述亚甲基二膦酸的含量为5mg，所述氯化亚锡的含量为0.5mg。

4.根据权利要求1所述的锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐制剂，其特征在于，所述单位制剂还含有抗氧化剂0.1～10mg。

5.根据权利要求4所述的锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐制剂，其特征在于，所述抗氧化剂选自抗坏血酸或龙胆酸的任一种。

6.根据权利要求1所述的锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐制剂，其特征在于，所述单位制剂还含有赋形剂0.1～50mg。

7.根据权利要求6所述的锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐制剂，其特征在于，所述赋形剂为氯化钠。

8.根据权利要求7所述的锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐制剂，其特征在于，所述高锝[⁹⁹Tc]酸钠的含量为0.05μg(以⁹⁹Tc计)，所述亚甲基二膦酸的含量为5mg，所述氯化亚锡的含量为0.5mg，所述氯化钠的含量为5mg。

9.权利要求1至8任一项所述的锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐制剂的制备方法，其特征在于，包括步骤：无菌环境，20℃～30℃下将配方量组成成分混合，氢氧化钠或盐酸调节溶液pH＝4～8，注射用水定容；配制好的药品溶液除菌过滤；无菌条件下分装在西林瓶中；冷冻干燥，即得。

10.根据权利要求9所述的锝[⁹⁹Tc]亚甲基二膦酸盐制剂的制备方法，其特征在于，所述冷冻干燥，包括如下步骤：

(1)冻结：所述药品溶液预冻，温度为-40℃～-55℃，时间为3h～10h；

(2)升华：所述药品溶液冻结后，开启冷凝器，当冷凝器温度达-45℃～-55℃时，开启真空系统，升温使所述药品的温度保持-30℃±10℃，时间4h～36h；

(3)干燥：所述药品逐渐升温至25℃±10℃，真空干燥1h～6h；压塞，放入无菌空气。