CN103191191B - 一种治疗晚期非小细胞肺癌的中药组合物的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗晚期非小细胞肺癌的中药组合物的制备方法，该方法为：一、取乌骨藤、半枝莲、黄芪、三七、桔梗；二、三七除杂，洗净，干燥，粉碎，过筛，灭菌；半枝莲除杂，洗净，切段；乌骨藤、黄芪和桔梗除杂，洗净，润透，切片；三、将半枝莲、乌骨藤、黄芪和桔梗合并后加水浸泡，煎煮，过滤；四、药渣中加水，煎煮，过滤，合并滤液，减压浓缩至稠膏；五、向稠膏中加入三七，混合均匀后减压干燥，粉碎，过筛，得干膏粉；六、干膏粉装胶囊，得到胶囊；或向干膏粉中加入糊精和硬脂酸镁，混匀，制粒，减压干燥，压片，包糖衣，得到片剂。本发明的制备方法将中药材中的抗癌有效成分充分提取出来，抗癌有效成分转移率皆在90%以上。

Description

一种治疗晚期非小细胞肺癌的中药组合物的制备方法

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种治疗晚期非小细胞肺癌的中药组合物的制备方法。

背景技术

产生肺癌的根本原因是人体正气不足，感受邪毒，邪毒内侵入肺，气机受阻，痰浊内生，血脉壅滞，久而形成肿块，发为此病。其病机多属本虚标实证，标实以热毒、痰阻、血瘀为主，本虚以气血不足为主。目前肺癌大多以化疗为主，毒副作用大且疗效差，水煎药物的有效成分转移率低，疗效差，服用不方便。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于针对上述现有技术中的不足，提供一种治疗晚期非小细胞肺癌的中药组合物的制备方法。该方法将中药材中的抗癌有效成分充分提取出来，抗癌有效成分转移率皆在90%以上（目前国内中药制剂产品转移率在30%～60%），制备的中药组合物治疗晚期非小细胞肺癌有较好的临床疗效，可改善患者的生存质量，延长生存时间，缩小瘤体，增强免疫功能，毒副反应比较轻，患者均可以耐受；制备的中药组合物联合化疗治疗非小细胞肺癌（热毒壅肺，痰瘀互结，气虚血瘀证）有较好疗效，能有效改善临床症状，提高免疫功能，能明显提高治疗效果，并对化疗药物有明显的增效减毒作用。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：一种治疗晚期非小细胞肺癌的中药组合物的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

步骤一、取按重量份计的乌骨藤900份、半枝莲400份、黄芪300份、三七120份、桔梗100份；

步骤二、将步骤一中所述三七除去杂质，洗净，干燥，粉碎，过100目筛，灭菌后备用；将步骤一中所述半枝莲除去杂质，洗净，切段；将步骤一中所述乌骨藤、黄芪和桔梗除去杂质，洗净，润透，切片；

步骤三、将步骤二中切段的半枝莲与切片的乌骨藤、黄芪和桔梗合并后加水浸泡2小时，然后在95℃条件下煎煮2小时，再用350目滤布趁热过滤，得到滤液和药渣；所述浸泡的加水量为半枝莲、乌骨藤、黄芪和桔梗生药总重量的10倍；

步骤四、向步骤三中所述药渣中加水，加水量为半枝莲、乌骨藤、黄芪和桔梗生药总重量的10倍，在95℃条件下煎煮2小时，然后用350目滤布趁热过滤，将过滤后的滤液与步骤三中所述滤液合并后减压浓缩至60℃测得相对密度为1.30的稠膏；

步骤五、向步骤四中所述稠膏中加入步骤二中灭菌后的三七，混合均匀后减压干燥，粉碎，过65目筛，得到干膏粉;

步骤六、将步骤五中所述干膏粉装入胶囊中，得到用于治疗晚期非小细胞肺癌的胶囊；或向步骤五中所述干膏粉中加入糊精和硬脂酸镁，混匀，制粒，减压干燥，压片，包糖衣，得到用于治疗晚期非小细胞肺癌的片剂，其中糊精和硬脂酸镁的加入量均为干膏粉质量的1%。

上述的一种治疗晚期非小细胞肺癌的中药组合物的制备方法，步骤二中所述灭菌采用6KGy钴⁶⁰辐照灭菌。

上述的一种治疗晚期非小细胞肺癌的中药组合物的制备方法，步骤二中所述切段的长度为10mm。

上述的一种治疗晚期非小细胞肺癌的中药组合物的制备方法，步骤二中所述切片的厚度为2mm。

上述的一种治疗晚期非小细胞肺癌的中药组合物的制备方法，步骤四中所述减压浓缩的温度为60℃，压力为-0.08MPa。

上述的一种治疗晚期非小细胞肺癌的中药组合物的制备方法，步骤五中所述减压干燥的温度为60℃，压力为-0.08MPa。

上述的一种治疗晚期非小细胞肺癌的中药组合物的制备方法，步骤六中所述减压干燥的温度为60℃，压力为-0.08MPa。

所述重量份可以为克、两、斤、公斤、吨等重量计量单位。

所述的五味药材均为市售的经过检验符合法定标准的中药材。

本发明选用的原料药材具有以下功效：乌骨藤具有清热解毒、散结止痛之功，清热解毒可除癌积热毒，软坚散结，消肿止痛，以消有形之癥结，一药三用，恰中病机，《抗癌治验本草》谓其“败毒抗癌，用于癌瘤积毒”，故以之为君；半枝莲具有清热解毒，化瘀利尿之功，用为臣药。君臣相配，清热解毒，软坚散结，消肿止痛以除毒邪。黄芪味甘，微温，归肺、脾经，具有补气固表，利尿托毒之功效，补脾肺气以固本，与君药相配以扶正驱邪；三七散瘀止血，消肿定痛，以增强君药的散结止痛之功，与黄芪共为佐药。桔梗苦、辛，平，归肺经，具有宣肺，利咽，祛痰，排脓之功效，并引诸药达于肺，有靶向定位给药之功效，用为使药。全方正邪兼顾，补泻同施，使热毒得清，瘀血得去，癥结得散，扶助正气而诸证向愈，共奏益气扶正，清热解毒，活血消癥之功效。

现代科学研究证明：乌骨藤所含C₂₁甾体苷类和多糖具有抗癌活性，对多种恶性肿瘤细胞有明显抑制作用，癌细胞抑制率为70.4%；绿原酸具有较强的抑制突变能力，可以抑制黄曲霉素引发的突变，并能有效地降低γ-射线引起的骨髓红细胞突变，可以通过降低致癌物的利用率及其在肝脏中运输，达到防癌抗癌的效果。半枝莲能明显地治疗恶性胸腔积液和癌性腹水，水煎剂对培养稳定宫颈癌细胞株分离的Hela细胞有破坏作用。黄芪的免疫有效成分为黄芪多糖和黄芪皂苷，是具有双向调节的免疫调节剂，它可以通过影响巨噬细胞来增强细胞的免疫作用。黄芪多糖和皂苷均可诱生干扰素。桔梗水提物对脂多糖诱导的人肺腺癌细胞中NF-KBp⁶⁵转位有抑制作用，桔梗皂苷D有明显的镇痛作用。桔梗水提物可显著刺激小鼠腹腔巨噬细胞增生，抑制肿瘤细胞增殖，剂量依赖性的促进一氧化氮、肿瘤坏死因子的产生，同时对白介素也有升高作用。桔梗多糖有免疫增强作用，能显著提高多克隆抗体的产生和β细胞的增殖，能提高β细胞中LgM抗体的产生。三七皂苷可通过直接杀伤肿瘤细胞、抑制肿瘤细胞生长或转移、诱导肿瘤细胞凋亡或诱导肿瘤细胞分化使其逆转、增强和刺激机体免疫功能等多种方式起到抗肿瘤作用。三七单体Rb₁、Rb₂、Rc通过对抗肿瘤坏死因子引起的恶病质而对肿瘤感染患者具有保护作用，可较完全地阻止TNF引起的脂肪细胞形态学变化。三七中人参皂苷Rg₃能抑制前列腺癌细胞的增殖，对肺癌的生长也有明显抑制作用。三七中所含的多糖，对小鼠肉瘤-180有极明显的抑制效果，三七对癌症患者因气血不通引起的疼痛有明显镇疼效果。

本发明对制备工艺进行了以下研究：

1、灭菌方法的确定

处方中直接投入生药原粉则采用⁶⁰Co辐照灭菌法灭菌，按照卫生部“关于发布《⁶⁰Co辐照中药灭菌剂量标准》（内部试行）的通知”（卫发药[1997]第38号）规定，辐照剂量为6KGy，辐照时间为3小时。将三七除去杂质，洗净、干燥、粉碎，过100目筛后的粉末在室温下进行⁶⁰Co辐照灭菌后再投料使用。实验研究表明，当辐照时间为2小时后，样品中仍有细菌和霉菌生长，当辐照时间为3小时，样品中的细菌、霉菌及致病菌可全部灭活。

2、收粉率的确定

将三七除去杂质，洗净、干燥，精密称取三份，每份2公斤，粉碎并过100目筛后，再分别精密称取该三份细粉的重量，收粉率分别为97.5%、97.6%、97.9%，平均收粉率为97.7%。

3、浸润时间及吸水率的考察

干燥的中药材，因失水而发生皱缩，成分固结于细胞中，细胞的半透性在干燥后被破坏，药材中的有效成分不能被浸出溶媒溶解浸出。在煎煮法中因药材表面蛋白质受热而凝固，淀粉受热而糊化，妨碍水分渗入药材内部，影响有效成分煎出，故在提取前应加适量溶剂浸泡后再进行提取较为有利；第一次煎煮的水用量，不仅要大于药材的吸水量，而且要超过溶解度所需要的量。因此，必须进行浸润时间及吸水率的考察。由于药材粒径是影响中药提取率的重要条件，粉碎的愈细，粉粒表面积愈大，愈有利于浸出，药材粉粒过细时虽能提高浸出效率，但浸液不易滤过，反而造成制品的损失。经多次预示结果，半枝莲10mm切段，其余三味2mm切片为宜。按处方比例称取乌骨藤2mm饮片90g，半枝莲10mm切段40g，黄芪2mm饮片30g，桔梗2mm饮片10g，加850mL（5倍量）水浸泡，每隔30分钟观察一次浸润程度，待药物完全浸透后，滤去多余水，称重，记录药材吸水后的重量，测得吸水率为175%，浸透时间为120分钟，故采用煎煮前先浸泡2小时的办法。

4、乌骨藤、半枝莲、黄芪、桔梗四味中药材水煎提取条件考察

以加水量，煎煮时间，煎煮次数为考查因素，进行L₉（3⁴）正交试验，并以煎煮出的水浸出物、正丁醇提取物、总糖含量在四味中药材中所占的百分比例为评价指标，筛选最佳水煎工艺条件（水提取物、正丁醇浸出物、总糖权重系数分别为0.2，0.4，0.4）。由于水提取物与皂苷、绿原酸和多糖含量呈正相关，正丁醇浸出物与皂苷和绿原酸含量呈正相关，总糖含量与多糖含量呈正相关，故将其作为设计权重系数的依据，并以综合评分作为提取效果的衡量指标。

实验方法：本试验各药材用量分别为处方量的1/10，四味药材总量分别为170g，半枝莲除杂，洗净，切成10mm段，其余三味除杂，洗净，润透，切成2mm片，混合后加水浸泡2小时，按正交条件进行水提，药液用350目滤布滤过，滤液浓缩至相对密度为1.30（60℃）的稠膏，60℃减压干燥、粉碎过65目筛，得干膏粉，精密称取干膏粉3g，加水定容至50mL。

水提取物：精密吸取药液20mL，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小时，置干燥器冷却30分钟，迅速精密称定重量，以干燥品计算药材中煎出水提取物的百分含量。

正丁醇浸出物：精密吸取药液10mL，置250mL锥形瓶中，水浴上蒸干、精密加入正丁醇100mL，塞紧，称定重量，静置1小时后，加热回流至沸，并保持微沸1小时。取出，放冷，密塞，用正丁醇补足减失的重量，摇匀，用干燥滤器滤过，精密量取续滤液25mL，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小时，移置干燥器中，冷却30分钟，迅速精密称定重量，计算出药材中煎煮出正丁醇浸出物的百分含量。

总糖测定：对照品溶液的制备取经105℃干燥至恒重的无水葡萄糖对照品适量，精密称定，加水制成每1mL中约含0.1mg的无水葡萄糖。

供试品溶液的制备精密吸取药液5mL，置100mL量瓶中，加水至刻度摇匀，精密吸取5mL，置100mL量瓶中，加水约80mL，超声处理（功率250W，频率40KHz）20分钟，放冷，用水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

标准曲线的制备精密量取对照品溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL，分别置具塞试管中，各加水至2.0mL，再分别精密加5%苯酚溶液1.0mL，摇匀，迅速精密加入硫酸5mL，摇匀，放冷至室温，以0管为空白，照紫外-可见分光光度法（中国药典2010年版一部附录ⅤA），在490nm的波长处测定吸光度，以吸收光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

测定法精密量取供试品溶液1.0mL，照标准曲线制备项下自“再加5%苯酚溶液1.0mL”起，依法操作，以标准曲线0管为空白，在490nm的波长处测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中含葡萄糖的重量（mg），计算出药材中煎出总糖的百分含量。试验结果分别见表1、表2和表3。

表1水煎提取正交试验因素水平表

表2水煎提取正交实验表

注:水提正交试验三个评价指标，采用综合评分法进行数据分析，水提取物，正丁醇浸出物，总糖含量权重系数分别为0.2、0.4、0.4。

水提取物评分=水提取物百分含量/最大水提取物百分含量×0.2×100

正丁醇浸出物评分=正丁醇浸出物百分含量/最大正丁醇浸出物百分含量×0.4×100

总糖评分=总糖百分含量/最大总糖百分含量×0.4×100

综合评分=水提取物评分+正丁醇浸出物评分+总糖评分

表3水煎提取正交试验结果

从表3中极差R值大小显示，各因素对提取效果的影响大小顺序为C>B>A，再从各因素水平来看（K值分析），因素A为K₂>K₃>K₁，因素B为K₂>K₃>K₁，因素C为K₃>K₂>K₁。从以上直观分析，最佳水提条件为A₁B₂C₂。考虑到大生产实际情况，所以有必要对各因素下水平的显著性进行方差分析，结果见表4。

表4水煎提取效果方差分析

方差来源	平方和	自由度	F值	P值
					A	77.95	2	7.80	>0.05
B	83.49	2	8.35	>0.05
					C	279.5	2	27.96	<0.05
D	10.0	2

注：方差分析计算公式

$s^2=\frac{1}{n}\underset{i=1}{\overset{n}{\mathrm{\Σ}}}{(x_i-\stackrel{\‾}{x})}^2$     （平方和）

$M=\frac{S^2}{n-1}$     （均方）

   M_误=M_D（F值）

查Ｆ分布临界值表，得Ｆ_0.05(2，2)=19.00，Ｆ_0.01(2，2)=99.00。

从表4方差分析结果表明，因素C（提取次数）对提取效果有显著影响，结合表2的直观分析，最佳水提条件定为A₁B₂C₂，即每次加水量为原药材的10倍，加热煎煮2次，每次2小时。据此条件验证三批，结果见表5。

表5水煎提取条件验证试验结果

如表5所示，验证试验结果与正交最佳水提条件试验结果一致。因此，由实验结果，确定乌骨藤、半枝莲、黄芪、桔梗等水煎条件为：每次加10倍量水，煎煮2次，每次2小时。

5、煎煮温度的考察

温度越高，越有利于提取。温度高，杀死微生物，利于产品稳定，但是因温度高杂质则混入较多，对热不稳定的成分易受损失，故应对煎煮温度进行考察。

本试验各药材取用量分别为处方量的1/10，四味煎煮药材的总量分别为170g，乌骨藤、半枝莲除杂，洗净，切成10mm片，其余三味除杂，洗净，润透，切成2mm片，混合后加10倍量水，浸泡2小时，煎煮2小时，350目滤布过滤；药渣加10倍量的水，煎煮2小时，350目滤布过滤，合并滤液，浓缩至相对密度为1.30（60℃）的稠膏，60℃减压干燥，粉碎过65目筛，得干膏粉，并以药材中水提取物、正丁醇浸出物、总糖含量为评价指标，筛选最佳煎煮温度。精密称取该干膏粉3g，加水定容至50mL。

水提取物、正丁醇浸出物、总糖含量测定方法同上，其权权重系数分别为0.2，0.4，0.4，将其作为设计权重系数的依据同上，并以综合评分作为提取效果的衡量指标。实验结果见表6。

表6煎煮温度对提取效果的影响

试验结果表明：95℃为最佳煎煮温度。

6、浓缩温度的考察

本试验各药材取用量分别为处方量的1/10，乌骨藤、半枝莲、黄芪、桔梗四味药材总量分别为170g，半枝莲除杂，洗净，切成10mm段，其余三味除杂，洗净，润透，切成2mm片，混合后加10倍量水，浸泡2小时，95℃煎煮2小时，350目滤布过滤；药渣加10倍量水，95℃煎煮2小时，350目滤布过滤，为提高浓缩速度，一律采用减压浓缩的方法，滤液采用不同温度浓缩成相对密度为1.30（60℃）的稠膏，60℃减压干燥，粉碎过65目筛，得干膏粉，并以药材中水提取物、正丁醇浸出物、总糖含量为评价指标，筛选最佳浓缩温度。精密称取该干膏粉3g，加水定容至50mL。

水提取物、正丁醇浸出物、总糖含量测定方法皆同上，水提取物、正丁醇浸出物、总糖含量的权重系数分别为0.2，0.4，0.4，并以综合评分作为评价最佳浓缩温度的指标。实验结果见表7。

表7浓缩温度考察表

试验结果表明，60℃（-0.08Mpa）为最佳浓缩温度。

7、干燥温度的考察

本试验各药材取用量分别为处方量的1/10，上述四味药材总量分别为170g，提取方法同上，滤液采用减压浓缩（60℃，-0.08MPa）成相对密度为1.30（60℃）的稠膏。采用不同温度减压干燥，粉碎成细粉，并以药材中水提干膏粉、正丁醇浸出物、总糖含量（权重系数分别为0.2，0.4，0.4）为评价指标，筛选最佳干燥温度。精密称取该干膏粉3g，加水定容至50mL。正丁醇浸出物、总糖含量测定方法同上，干膏粉以实际精确称量为准。实验结果见表8。

表8干燥温度考察表

试验结果表明，60℃（压力为-0.08Mpa）为最佳干燥温度。

8、成型工艺研究及加速潮解试验

（1）颗粒休止角的测定

胶囊剂的填充分装，要求物料具有良好的流动性，以保证分剂量的准确。流动性可用测定休止角的方法进行控制。休止角的测定采用固定漏斗法，即将三个漏斗串联并固定于水平放置的坐标纸上适宜高度处，使漏斗下口距坐标纸的距离为H，将粉碎过不同筛网的物料倒入最上面的漏斗中，直到最下面漏斗形成的药粉的圆锥体尖端接触漏斗口为止，此时由坐标纸测出圆锥体底部直径，计算出休止角（tgα=H/R）。一般要求胶囊剂填充物料的休止角控制在35°以下，测定结果见表9。

表9通过不同筛网的颗粒剂流动性试验

序号	筛网（目）	H（cm）	R（cm）	tgα	α
						1	50	5.0	7.62	0.656	33.25°
2	65	5.0	7.84	0.638	32.54°
						3	80	5.0	7.19	0.695	34.78°

休止角3>1>2，休止角愈小，流动性愈好。故在装胶囊前粉碎，过65目筛为宜。

9、中试用药材的含量测定结果及含量测定成分的转移率

（1）中试用药材的含量测定结果

产地为云南临仓的乌骨藤按干燥品计算，含绿原酸为0.018%；产地为安徽的半枝莲按干燥品计算，含总黄酮3.17%，含野黄芩苷为0.37%；产地为内蒙古的蒙古黄芪按干燥品计算，含黄芪甲苷为0.085%；产地为云南的三七按干燥品计算，含人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₁和三七皂苷R₁的总量为7.8%；产地为安徽的桔梗，含总皂苷为10.1%。

（2）含量测定成分的转移率

批号为080801、080805、080808的三批中试样品绿原酸的平均测得值为0.15mg/粒，含量测定成分绿原酸的转移率为92.6%；三批中试样品野黄芩苷的平均测得值为1.4mg/粒；含量测定成分野黄芩苷的转移率为94.6%；三批中试样品黄芪甲苷的平均测得值为0.23mg/粒，含量测定成分黄芪甲苷的转移率为90.2%；三批中试样品人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₁和三七皂苷R₁的总量平均测得值为9.0mg/粒，含量测定成分的转移率为96.2%，各含量测定成分的转移率皆在90%以上，进一步证明了该工艺的合理性。

10、工艺评价

本发明的处方组成虽与经验方相同，但发明人通过对乌骨藤、半枝莲、黄芪和桔梗四味药材的有效成分——皂苷类、多糖类和绿原酸的研究发现，这些有效成分的化学性质相互无明显不良影响，且四味药材中含有的皂苷、高级脂肪醇、甾醇等具有表面活性的两性物质在共煎中可能形成胶团，能增加药物有效成分的溶出而发挥其增溶作用，因此以水作为溶媒进行群药混提。并设计最佳提取参数，通过中试样品含量测定成分的转移率皆在90%以上，进一步证明了其水煎提取的合理性。

去包装湿度加速实验表明，本品在25℃，相对湿度为75%、92.5%的环境下放置10天，未见明显吸潮，水分含量较稳定，说明本品无明显引湿性。三批中试样品验证结果，成品率分别为98.5%、98.4%、98.3%，含量测定成分的转移率皆在90%以上，进一步证明了本工艺切实可行。

总之，本发明的中药组合物同原经验方的水煎剂比较，提取更完全，使用更卫生，服用更方便，剂量更准确，便于携带和储藏，疗效更确切，使用更安全。

本发明与现有技术相比具有以下优点：

1、本发明的中药组合物组成既符合中医理论，达到标本兼治，又符合现代科学研究成果，既具有确切疗效的可靠性，又具有临床用药的安全性，打破了以往抗癌药物以毒攻毒的理论。

2、本发明的制备方法将中药材中的抗癌有效成分充分提取出来，抗癌有效成分转移率皆在90%以上（目前国内中药制剂产品转移率在30%～60%）。

3、本发明制备的复方乌骨藤胶囊/片治疗晚期非小细胞肺癌有较好的临床疗效，可改善患者的生存质量，延长生存时间，毒副反应比较轻，患者均可以耐受；复方乌骨藤胶囊/片联合化疗治疗非小细胞肺癌（热毒壅肺，痰瘀互结，气虚血瘀证）有较好疗效，能有效改善临床症状，提高免疫功能，能明显提高复方乌骨藤胶囊/片的治疗效果，并对化疗药物有明显的增效减毒作用。

4、本发明制备的中药组合物掩盖了中药不良气味，外观精美，容易吞服，提高了疗效，并易被患者接受。

5、本发明的制备方法提高了药物稳定性，防止药物的氧化、光分解。

6、本发明制备的中药组合物服用方便，剂量准确，便于保存。

下面通过实施例对本发明的技术方案做进一步的详细描述。

具体实施方式

实施例1

步骤一、取乌骨藤900g、半枝莲400g、黄芪300g、三七120g、桔梗100g；

步骤二、将步骤一中所述三七除去杂质，洗净，干燥，粉碎，过100目筛，采用6KGy钴⁶⁰辐照灭菌后备用；将步骤一中所述半枝莲除去杂质，洗净，按10mm长度切段；将步骤一中所述乌骨藤、黄芪和桔梗除去杂质，洗净，润透，按2mm厚度切片；

步骤三、将步骤二中切段的半枝莲与切片的乌骨藤、黄芪和桔梗合并后加17kg纯化水浸泡2小时，然后在95℃条件下煎煮2小时，再用350目滤布趁热过滤，得到滤液和药渣；

步骤四、向步骤三中所述药渣中加17kg纯化水，在95℃条件下煎煮2小时，然后用350目滤布趁热过滤，将过滤后的滤液与步骤三中所述滤液合并后减压浓缩（60℃，-0.08MPa）至60℃测得相对密度为1.30的稠膏；

步骤五、向步骤四中所述稠膏中加入步骤二中灭菌后的三七，混合均匀后减压干燥（60℃，-0.08MPa），粉碎，过65目筛，得到干膏粉;

步骤六、将步骤五中所述干膏粉装入胶囊中，每粒装0.45g（相当于原药材1.82g），得到用于治疗晚期非小细胞肺癌的胶囊—复方乌骨藤胶囊。

本实施例胶囊中绿原酸的转移率为91.7%，野黄芩苷的转移率为93.2%，黄芪甲苷的转移率为91.3%，人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₁和三七皂苷R₁总量转移率为97.1%。

实施例2

步骤一、取乌骨藤900kg、半枝莲400kg、黄芪300kg、三七120kg、桔梗100kg；

步骤二、将步骤一中所述三七除去杂质，洗净，干燥，粉碎，过100目筛，采用6KGy钴⁶⁰辐照灭菌后备用；将步骤一中所述半枝莲除去杂质，洗净，按10mm长度切段；将步骤一中所述乌骨藤、黄芪和桔梗除去杂质，洗净，润透，按2mm厚度切片；

步骤三、将步骤二中切段的半枝莲与切片的乌骨藤、黄芪和桔梗合并后加17000kg纯化水浸泡2小时，然后在95℃条件下煎煮2小时，再用350目滤布趁热过滤，得到滤液和药渣；

步骤四、向步骤三中所述药渣中加17000kg纯化水，在95℃条件下煎煮2小时，然后用350目滤布趁热过滤，将过滤后的滤液与步骤三中所述滤液合并后减压浓缩（60℃，-0.08MPa）至60℃测得相对密度为1.30的稠膏；

步骤五、向步骤四中所述稠膏中加入步骤二中灭菌后的三七，混合均匀后减压干燥（60℃，-0.08MPa），粉碎，过65目筛，得到干膏粉;

步骤六、将步骤五中所述干膏粉装入胶囊中，每粒装0.45g（相当于原药材1.82g），得到用于治疗晚期非小细胞肺癌的胶囊—复方乌骨藤胶囊。

本实施例胶囊中绿原酸的转移率为92.1%，野黄芩苷的转移率为92.7%，黄芪甲苷的转移率为91.8%，人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₁和三七皂苷R₁总量转移率为96.9%。

实施例3

步骤一、取按重量份计的乌骨藤900g、半枝莲400g、黄芪300g、三七120g、桔梗100g；

步骤二、将步骤一中所述三七除去杂质，洗净，干燥，粉碎，过100目筛，采用6KGy钴⁶⁰辐照灭菌后备用；将步骤一中所述半枝莲除去杂质，洗净，按10mm长度切段；将步骤一中所述乌骨藤、黄芪和桔梗除去杂质，洗净，润透，按2mm厚度切片；

步骤三、将步骤二中切段的半枝莲与切片的乌骨藤、黄芪和桔梗合并后加17kg纯化水浸泡2小时，然后在95℃条件下煎煮2小时，再用350目滤布趁热过滤，得到滤液和药渣；

步骤四、向步骤三中所述药渣中加17kg纯化水，在95℃条件下煎煮2小时，然后用350目滤布趁热过滤，将过滤后的滤液与步骤三中所述滤液合并后减压浓缩（60℃，-0.08MPa）至60℃测得相对密度为1.30的稠膏；

步骤五、向步骤四中所述稠膏中加入步骤二中灭菌后的三七，混合均匀后减压干燥（60℃，-0.08MPa），粉碎，过65目筛，得到干膏粉;

步骤六、向步骤五中所述干膏粉中加入糊精和硬脂酸镁，混匀，制粒，减压干燥（60℃，-0.08MPa），压片，包糖衣，得到用于治疗晚期非小细胞肺癌的片剂—复方乌骨藤片，每素片重0.45g（相当于原药材1.82g），其中糊精和硬脂酸镁的加入量均为干膏粉质量的1%。

本实施例片剂中绿原酸的转移率为92.3%，野黄芩苷的转移率为93.5%，黄芪甲苷的转移率为92.4%，人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₁和三七皂苷R₁总量转移率为97.3%。

本发明用法用量：口服，一次4粒（片），一日3次，四周为一疗程。

一般临床资料：84例经病理组织学检查确诊的晚期非小细胞肺癌患者，均口服复方乌骨藤胶囊，每日三次，每次四粒，四周为一疗程，共治疗两个疗程。结果：84例患者均可评价，完全缓解（CR）16例，部分缓解（PR）31例，病变稳定（SD）24例，病变进展（PD）13例，患者的近期有效率56.0%，中位疾病进展（TTP）5.4个月，中位生存期11.2个月，1年生存率71.4%。主要毒副反应为个别患者血红蛋白减少，血小板减少和心电图异常，但均可以耐受。结论：复方乌骨藤胶囊治疗晚期非小细胞肺癌有较好的临床疗效，可改善患者的生存质量，延长生存时间，毒副反应比较轻，患者均可以耐受。

将非小细胞肺癌（热毒雍肺，痰瘀互结，气虚血瘀证）患者108例分为复方乌骨藤胶囊联合化疗组38例、单纯化疗组36例及单纯复方乌藤胶囊组34例。对复方乌骨藤胶囊联合化疗组患者口服复方乌骨藤胶囊，一日三次，每次四粒，四周为一个疗程，共服用两个疗程，同时采用NP化疗方案；对单纯化疗组患者采用NP化疗方案，治疗两个疗程（八周）；对单纯复方乌藤胶囊组患者口服复方乌骨藤胶囊，一日三次，每次四粒，四周为一个疗程，共服用两个疗程，并采用随机、平行安慰剂对照和双盲法。疗效分析结果，复方乌骨藤胶囊联合化疗组有效28例，有效率73.7%，单纯化疗组有效15例，有效率41.7%，单纯复方乌藤胶囊组有效16例，有效率47.1%，可见复方乌骨藤胶囊联合化疗组的有效率明显高于单纯化疗组和单纯复方乌骨藤胶囊组；复方乌骨藤胶囊联合化疗组在中医分型疗效分析、体重变化及生活质量等方面疗效均明显优于化疗组，但同单纯复方乌骨藤胶囊组比较均无明显差异。复方乌骨藤胶囊联合化疗可明显提高NK细胞活性及CD4/CD8比值，对患者的毒副反应明显低于单纯化疗组。复方乌骨藤胶囊联合化疗治疗非小细胞肺癌（热毒壅肺，痰瘀互结，气虚血瘀证）有较好疗效，能有效改善临床症状，提高免疫功能，能明显提高复方乌骨藤胶囊的治疗效果，并对化疗药物有明显的增效减毒作用。

该处方组成，既符合中医理论，又符合现代科学研究成果并被临床观察所证实，说明该处方组成是合理的。

复方乌骨藤胶囊和复方乌骨藤片常温库存条件下放置36个月，各项检测指标皆符合质量标准，说明本品质量稳定。

本发明对复方乌骨藤胶囊进行了系统的药理毒理研究，研究发现：复方乌骨藤胶囊对小鼠移植性S-180肉瘤、移植性Lewis肺癌具有明显的抑制作用。延长腹水癌小鼠的生存时间。增强小鼠脾脏TNF、NK细胞活性，增强荷瘤小鼠网状内皮系统的吞噬功能，促进荷瘤小鼠溶血素抗体生成。增强荷瘤小鼠的耐疲劳能力。与钴⁶⁰照射联合用于肿瘤治疗有增效作用，与环磷酰胺或5-FU联合应用于肿瘤治疗，具有协同增效作用。与治疗量环磷酰胺联合应用于肿瘤治疗有一定的减毒作用。

急性毒性试验：复方乌骨藤胶囊给ICR品系小鼠灌胃未测出LD₅₀，24小时内给药2次，观察14天，小鼠无死亡，其最大受试药物量为44.8g/kg，相当180.99g生药/kg，约为临床人拟用量的398.2倍。在此剂量下未观察到复方乌骨藤胶囊的毒性反应。

六个月长期毒性试验：给药期间每周称体重一次，每日称食量，无死亡或濒死动物，结果大鼠毛色光洁，行为活动、腺体分泌、呼吸、粪便性状均正常。体重检查提示，本品大剂量可减缓雄性大鼠体重增长。血常规提示，本品长期服用可提高白细胞以及红细胞、网织红细胞、血红蛋白、红细胞容积等。血液生化提示，本品大剂量服用6个月个别动物可引起丙氨酸氨基转换酶升高，停药后可恢复。病理检查提示，对各种脏器无明显药物所致病理改变。

Claims (7)

1.一种治疗晚期非小细胞肺癌的中药组合物的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

步骤一、取按重量份计的乌骨藤900份，半枝莲400份，黄芪300份，三七120份，桔梗100份；

步骤二、将步骤一中所述三七除去杂质，洗净，干燥，粉碎，过100目筛，灭菌后备用；将步骤一中所述半枝莲除去杂质，洗净，切段；将步骤一中所述乌骨藤、黄芪和桔梗除去杂质，洗净，润透，切片；

步骤三、将步骤二中切段的半枝莲与切片的乌骨藤、黄芪和桔梗合并后加水浸泡2小时，然后在95℃条件下煎煮2小时，再用350目滤布趁热过滤，得到滤液和药渣；所述浸泡的加水量为半枝莲、乌骨藤、黄芪和桔梗生药总重量的10倍；

步骤四、向步骤三中所述药渣中加水，加水量为半枝莲、乌骨藤、黄芪和桔梗生药总重量的10倍，在95℃条件下煎煮2小时，然后用350目滤布趁热过滤，将过滤后的滤液与步骤三中所述滤液合并后减压浓缩至60℃测得相对密度为1.30的稠膏；

步骤五、向步骤四中所述稠膏中加入步骤二中灭菌后的三七，混合均匀后减压干燥，粉碎，过65目筛，得到干膏粉;

步骤六、将步骤五中所述干膏粉装入胶囊中，得到用于治疗晚期非小细胞肺癌的胶囊；或向步骤五中所述干膏粉中加入糊精和硬脂酸镁，混匀，制粒，减压干燥，压片，包糖衣，得到用于治疗晚期非小细胞肺癌的片剂，其中糊精和硬脂酸镁的加入量均为干膏粉质量的1%。

2.根据权利要求1所述的一种治疗晚期非小细胞肺癌的中药组合物的制备方法，其特征在于，步骤二中所述灭菌采用6KGy钴⁶⁰辐照灭菌。

3.根据权利要求1所述的一种治疗晚期非小细胞肺癌的中药组合物的制备方法，其特征在于，步骤二中所述切段的长度为10mm。

4.根据权利要求1所述的一种治疗晚期非小细胞肺癌的中药组合物的制备方法，其特征在于，步骤二中所述切片的厚度为2mm。

5.根据权利要求1所述的一种治疗晚期非小细胞肺癌的中药组合物的制备方法，其特征在于，步骤四中所述减压浓缩的温度为60℃，压力为-0.08MPa。

6.根据权利要求1所述的一种治疗晚期非小细胞肺癌的中药组合物的制备方法，其特征在于，步骤五中所述减压干燥的温度为60℃，压力为-0.08MPa。

7.根据权利要求1所述的一种治疗晚期非小细胞肺癌的中药组合物的制备方法，其特征在于，步骤六中所述减压干燥的温度为60℃，压力为-0.08MPa。