CN103119155A

CN103119155A - 用于竹微繁殖的培养基、试剂盒、系统和方法

Info

Publication number: CN103119155A
Application number: CN2011800192843A
Authority: CN
Inventors: R·W·伯尔; J·海因里克
Original assignee: RED TRIANGLE LCC
Current assignee: RED TRIANGLE LCC
Priority date: 2010-02-15
Filing date: 2011-02-15
Publication date: 2013-05-22
Also published as: AR080186A1; US20120220036A1; US8435789B2; EP2536822A4; MX2012009454A; JP2013519393A; US20120264216A1; WO2011100762A1; CA2789852A1; US8822220B2; BR112012020450A2; AU2011216219A1; EP2536822A1

Abstract

本发明公开了以商业上相关的规模实现竹的微繁殖的培养基、试剂盒、系统和方法。

Description

用于竹微繁殖的培养基、试剂盒、系统和方法

对相关申请的交叉引用

本申请要求2010年2月15日提交的美国临时专利申请No.61/304,681的优先权，其全部公开内容作为参考而引用。

技术领域

本文公开了用于竹微繁殖的培养基、试剂盒、系统和方法。

背景技术

竹亚科(Bambusoideae)(属于禾本科(Poaceae))，包括木本和草本竹。目前确认了大约120个属的温带和热带木本竹。竹是具有许多不同用途的多功能植物。据估计全世界大约22亿人一定程度上使用竹，而在1985年估计可由竹带来的收入是大约45亿美元。竹的市场也在扩展。竹笋是亚洲人烹饪的主要原料，并且在多种产品中也可以找到竹，包括牙签、扫帚、葡萄栽培和树木栽培的支架、景观美化材料(landscaping material)、拼花地板(parquetflooring)、层压材料、家具、手工艺品和其他家用物品。此外，竹正成为一种作为纸张生产成分的织物材料的重要来源，和结构木料的来源。

竹被认为是环境友好型“绿色”产品。使竹享有绿色盛名的特征之一是其极为快速的生长速率。竹是世界上生长最快的木本植物，其生长速率可超过每天3英尺。它达到这样的生长速率部分因为它能为苗的生长提供大量能量的根茎系统。

尽管竹具有高生长速率，它的其他特性仍使得它是一种难以驾驭的作物。也许最大的困难来自于以下事实：许多商业上重要的竹仅以长达60-130年的间隔开花。与这种长开花周期的困难相伴随的事实是：许多竹表现为大规模(或群体性的)开花，种群中的所有植物同时开花。例如，桂竹(Phyllostachysbambusoides)以130年的间隔开花，并且在这个种中所有相同品系(same stock)的植物都同时开花，与地理位置或气候条件的差异无关。开花后竹就死亡。

竹的开花间隔长并且倾向于大规模开花使得难以获得种子以供繁殖。与该问题同时存在的是如下事实：竹的种子，即使在可以获得时，只能保持最多3-6个月的活力。

由于通过种子进行的竹的繁殖存在这些困难，竹通常通过无性技术进行繁殖，例如丛生分株(clump division)和扦插。但是，这些无性繁殖技术不足以满足预计的世界需求，这是由于其进行大规模生产的能力和实际的效率太低。此外许多无性繁殖方法的不足之处在于无法清除亲本植株中的病原体。

迫切需要一种实现竹的大规模生产的方法。微繁殖(也称为组织培养，此处这两个术语可以互换使用)，是一种实现此目的的极好方法。

微繁殖并没有不同于从插条培养植株。但是，与从插条培养出的植株不同的是，微繁殖的植株生长于体外的无菌培养基中。通常，所述培养基包含琼脂，添加不同的化合物，例如营养物、无机盐、生长调节剂、糖、维生素和其他化合物。

组织培养植株的一个益处是植株可以在无菌环境生长，它们因此保持没有疾病。其他益处包括在小空间培养非常大量的植株的能力，微繁殖植株降低的对水和营养物的需求，组织的快速增殖可继而被用于生产更多的组织培养材料。此外微繁殖是非常灵活并且可以迅速放大规模(可以由任意基因型在1年内生产将近一百万株植株)。如此短暂的期间和巨大的数量是任何常规方法不可匹敌的。组织培养也提供用于生产高质量的植株，其易于运输和递送。

已经发表的一些文章解决了竹的组织培养。但是，在实践中(即，对于竹的大规模或巨大规模繁殖)，这些文章中描述的方法并未转变为商业可行的繁殖系统。

组织培养竹面临的困难是内源或表面污染和褐变的高发生率，与休眠或部位效应(topophysis)有关的因素和超度含水性(hyperhydricity)。本公开提供克服这些困难的培养基、系统和方法，使商业规模的无性生产竹成为可能。

发明概述

本发明通过为组织培养竹提供有效的培养基、系统和方法，克服了竹的商业规模无性生产中面临的困难。

此处公开的一个实施方案是用于微繁殖竹的培养基，其中所述培养基包含Meta-topolin或苯基噻二唑脲(thidiazuron)。在另一个实施方案中，所述培养基包含Meta-topolin和苯基噻二唑脲。在另一个实施方案中，所述培养基是b-9-i培养基、b-9-ii培养基、b-9-iii培养基、b-9-iv培养基、b-9-v培养基、CW2-i培养基、CW2-ii培养基、CW2-iii培养基、CW2-iv培养基、CW2-v培养基、b-10-i培养基、b-10-ii培养基、b-10-iii培养基、b-10-iv培养基、b-10-v培养基、b-11-i培养基、b-11-ii培养基、b-11-iii培养基、b-11-iv培养基、b-11-v培养基、b-12c-i培养基、b-12c-ii培养基、b-12c-iii培养基、b-12c-iv培养基、b-12c-v培养基、b-1-i培养基、b-1-ii培养基、b-1-iii培养基、b-1-iv培养基、b-1-v培养基、b-4-i培养基、b-4-ii培养基、b-4-iii培养基、b-4-iv培养基、b-4-v培养基、b-6-i培养基、b-6-ii培养基、b-6-iii培养基、b-6-iv培养基、b-6-v培养基、CW1-i培养基、CW1-ii培养基、CW1-iii培养基、CW1-iv培养基、CW1-v培养基、CW3-i培养基、CW3-ii培养基、CW3-iii培养基、CW3-iv培养基、CW3-v培养基、CW4-i培养基、CW4-ii培养基、CW4-iii培养基、CW4-iv培养基、CW4-v培养基、CW5-i培养基、CW5-ii培养基、CW5-iii培养基、CW5-iv培养基、CW5-v培养基、CW6-i培养基、CW6-ii培养基、CW6-iii培养基、CW6-iv培养基和/或CW6-v培养基。

此处公开的实施方案也包括用于竹的微繁殖的系统。在一个实施方案中，所述系统包括一种试剂盒，该试剂盒包括包含Meta-topolin或苯基噻二唑脲的培养基。在另一个实施方案中，Meta-topolin和苯基噻二唑脲存在于同一培养基中或存在于单独的培养基中。在另一个实施方案中，所述培养基是b-9-i培养基、b-9-ii培养基、b-9-iii培养基、b-9-iv培养基、b-9-v培养基、CW2-i培养基、CW2-ii培养基、CW2-iii培养基、CW2-iv培养基、CW2-v培养基、b-10-i培养基、b-10-ii培养基、b-10-iii培养基、b-10-iv培养基、b-10-v培养基、b-11-i培养基、b-11-ii培养基、b-11-iii培养基、b-11-iv培养基、b-11-v培养基、b-12c-i培养基、b-12c-ii培养基、b-12c-iii培养基、b-12c-iv培养基、b-12c-v培养基、b-1-i培养基、b-1-ii培养基、b-1-iii培养基、b-1-iv培养基、b-1-v培养基、b-4-i培养基、b-4-ii培养基、b-4-iii培养基、b-4-iv培养基、b-4-v培养基、b-6-i培养基、b-6-ii培养基、b-6-iii培养基、b-6-iv培养基、b-6-v培养基、CW1-i培养基、CW1-ii培养基、CW1-iii培养基、CW1-iv培养基、CW1-v培养基、CW3-i培养基、CW3-ii培养基、CW3-iii培养基、CW3-iv培养基、CW3-v培养基、CW4-i培养基、CW4-ii培养基、CW4-iii培养基、CW4-iv培养基、CW4-v培养基、CW5-i培养基、CW5-ii培养基、CW5-iii培养基、CW5-iv培养基、CW5-v培养基、CW6-i培养基、CW6-ii培养基、CW6-iii培养基、CW6-iv培养基和/或CW6-v培养基。

此处公开的实施方案也包括微繁殖竹的方法。在一个实施方案中，该方法包括在包含Meta-topolin和/或苯基噻二唑脲的培养基中培养竹外植体、培养物和/或苗。在另一个实施方案中，Meta-topolin和苯基噻二唑脲存在于相同的培养基中或存在于单独的培养基中。在另一个实施方案中，所述培养基是b-9-i培养基、b-9-ii培养基、b-9-iii培养基、b-9-iv培养基、b-9-v培养基、CW2-i培养基、CW2-ii培养基、CW2-iii培养基、CW2-iv培养基、CW2-v培养基、b-10-i培养基、b-10-ii培养基、b-10-iii培养基、b-10-iv培养基、b-10-v培养基、b-11-i培养基、b-11-ii培养基、b-11-iii培养基、b-11-iv培养基、b-11-v培养基、b-12c-i培养基、b-12c-ii培养基、b-12c-iii培养基、b-12c-iv培养基、b-12c-v培养基、b-1-i培养基、b-1-ii培养基、b-1-iii培养基、b-1-iv培养基、b-1-v培养基、b-4-i培养基、b-4-ii培养基、b-4-iii培养基、b-4-iv培养基、b-4-v培养基、b-6-i培养基、b-6-ii培养基、b-6-iii培养基、b-6-iv培养基、b-6-v培养基、CW1-i培养基、CW1-ii培养基、CW1-iii培养基、CW1-iv培养基、CW1-v培养基、CW3-i培养基、CW3-ii培养基、CW3-iii培养基、CW3-iv培养基、CW3-v培养基、CW4-i培养基、CW4-ii培养基、CW4-iii培养基、CW4-iv培养基、CW4-v培养基、CW5-i培养基、CW5-ii培养基、CW5-iii培养基、CW5-iv培养基、CW5-v培养基、CW6-i培养基、CW6-ii培养基、CW6-iii培养基、CW6-iv培养基和/或CW6-v培养基。

实施方案包括，但不限于：

1.一种培养基，其包含、基本上的组成是或组成是：

或者

2.一种微繁殖竹的方法，包括将竹外植体暴露于实施方案1的培养基。

3.根据实施方案2的方法，进一步包括将竹苗暴露于b-9-i培养基、b-9-ii培养基、b-9-iii培养基、b-9-iv培养基、b-9-v培养基、CW2-i培养基、CW2-ii培养基、CW2-iii培养基、CW2-iv培养基、CW2-v培养基、b-10-i培养基、b-10-ii培养基、b-10-iii培养基、b-10-iv培养基、b-10-v培养基、b-11-i培养基、b-11-ii培养基、b-11-iii培养基、b-11-iv培养基、b-11-v培养基、b-12c-i培养基、b-12c-ii培养基、b-12c-iii培养基、b-12c-iv培养基、b-12c-v培养基、b-1-i培养基、b-1-ii培养基、b-1-iii培养基、b-1-iv培养基、b-1-v培养基、b-4-i培养基、b-4-ii培养基、b-4-iii培养基、b-4-iv培养基、b-4-v培养基、b-6-i培养基、b-6-ii培养基、b-6-iii培养基、b-6-iv培养基、b-6-v培养基、CW1-i培养基、CW1-ii培养基、CW1-iii培养基、CW1-iv培养基、CW1-v培养基、CW3-i培养基、CW3-ii培养基、CW3-iii培养基、CW3-iv培养基、CW3-v培养基、CW4-i培养基、CW4-ii培养基、CW4-iii培养基、CW4-iv培养基、CW4-v培养基、CW5-i培养基、CW5-ii培养基、CW5-iii培养基、CW5-iv培养基、CW5-v培养基、CW6-i培养基、CW6-ii培养基、CW6-iii培养基、CW6-iv培养基和/或CW6-v培养基中。

4.根据实施方案3的方法，进一步包括将竹苗暴露于支持转换到试管外条件(ex vitro conditions)的培养基。

5.根据实施方案3的方法，其中所述方法由一个外植体产生100,000个竹苗。

6.根据实施方案2、3、4或5的方法，其中所述方法进一步包括获得外植体。

7.根据实施方案6的方法，其中所述外植体是从竹茎干底部起的第三节。

8.一种试剂盒，包含由以下组成的培养基：

或者

9.根据实施方案8的试剂盒，进一步包含b-9-i培养基、b-9-ii培养基、b-9-iii培养基、b-9-iv培养基、b-9-v培养基、CW2-i培养基、CW2-ii培养基、CW2-iii培养基、CW2-iv培养基、CW2-v培养基、b-10-i培养基、b-10-ii培养基、b-10-iii培养基、b-10-iv培养基、b-10-v培养基、b-11-i培养基、b-11-ii培养基、b-11-iii培养基、b-11-iv培养基、b-11-v培养基、b-12c-i培养基、b-12c-ii培养基、b-12c-iii培养基、b-12c-iv培养基、b-12c-v培养基、b-1-i培养基、b-1-ii培养基、b-1-iii培养基、b-1-iv培养基、b-1-v培养基、b-4-i培养基、b-4-ii培养基、b-4-iii培养基、b-4-iv培养基、b-4-v培养基、b-6-i培养基、b-6-ii培养基、b-6-iii培养基、b-6-iv培养基、b-6-v培养基、CW1-i培养基、CW1-ii培养基、CW1-iii培养基、CW1-iv培养基、CW1-v培养基、CW3-i培养基、CW3-ii培养基、CW3-iii培养基、CW3-iv培养基、CW3-v培养基、CW4-i培养基、CW4-ii培养基、CW4-iii培养基、CW4-iv培养基、CW4-v培养基、CW5-i培养基、CW5-ii培养基、CW5-iii培养基、CW5-iv培养基、CW5-v培养基、CW6-i培养基、CW6-ii培养基、CW6-iii培养基、CW6-iv培养基和/或CW6-v培养基。

10.根据实施方案8或9的试剂盒，进一步包含支持转换到试管外条件的培养基。

11.根据实施方案8、9或10的试剂盒，进一步包含外植体。

12.一种微繁殖竹的方法，包括将竹外植体暴露于包含Meta-topolin和/或苯基噻二唑脲的培养基。

13.根据实施方案12的方法，其中所述培养基包括b-9-i培养基、b-9-ii培养基、b-9-iii培养基、b-9-iv培养基、b-9-v培养基、CW2-i培养基、CW2-ii培养基、CW2-iii培养基、CW2-iv培养基、CW2-v培养基、b-10-i培养基、b-10-ii培养基、b-10-iii培养基、b-10-iv培养基、b-10-v培养基、b-11-i培养基、b-11-ii培养基、b-11-iii培养基、b-11-iv培养基、b-11-v培养基、b-12c-i培养基、b-12c-ii培养基、b-12c-iii培养基、b-12c-iv培养基、b-12c-v培养基、b-1-i培养基、b-1-ii培养基、b-1-iii培养基、b-1-iv培养基、b-1-v培养基、b-4-i培养基、b-4-ii培养基、b-4-iii培养基、b-4-iv培养基、b-4-v培养基、b-6-i培养基、b-6-ii培养基、b-6-iii培养基、b-6-iv培养基、b-6-v培养基、CW1-i培养基、CW1-ii培养基、CW1-iii培养基、CW1-iv培养基、CW1-v培养基、CW3-i培养基、CW3-ii培养基、CW3-iii培养基、CW3-iv培养基、CW3-v培养基、CW4-i培养基、CW4-ii培养基、CW4-iii培养基、CW4-iv培养基、CW4-v培养基、CW5-i培养基、CW5-ii培养基、CW5-iii培养基、CW5-iv培养基、CW5-v培养基、CW6-i培养基、CW6-ii培养基、CW6-iii培养基、CW6-iv培养基和/或CW6-v培养基。

14.根据实施方案12的方法，其中所述外植体是从竹茎干底部起的第三节。

15.一种培养基，包括b-9-i培养基、b-9-ii培养基、b-9-iii培养基、b-9-iv培养基、b-9-v培养基、CW2-i培养基、CW2-ii培养基、CW2-iii培养基、CW2-iv培养基、CW2-V培养基、b-10-i培养基、b-10-ii培养基、b-10-iii培养基、b-10-iv培养基、b-10-v培养基、b-11-i培养基、b-11-ii培养基、b-11-iii培养基、b-11-iv培养基、b-11-v培养基、b-12c-i培养基、b-12c-ii培养基、b-12c-iii培养基、b-12c-iv培养基、b-12c-v培养基、b-1-i培养基、b-1-ii培养基、b-1-iii培养基、b-1-iv培养基、b-1-v培养基、b-4-i培养基、b-4-ii培养基、b-4-iii培养基、b-4-iv培养基、b-4-v培养基、b-6-i培养基、b-6-ii培养基、b-6-iii培养基、b-6-iv培养基、b-6-v培养基、CW1-i培养基、CW1-ii培养基、CW1-iii培养基、CW1-iv培养基、CW1-v培养基、CW3-i培养基、CW3-ii培养基、CW3-iii培养基、CW3-iv培养基、CW3-v培养基、CW4-i培养基、CW4-ii培养基、CW4-iii培养基、CW4-iv培养基、CW4-v培养基、CW5-i培养基、CW5-ii培养基、CW5-iii培养基、CW5-iv培养基、CW5-v培养基、CW6-i培养基、CW6-ii培养基、CW6-iii培养基、CW6-iv培养基和/或CW6-v培养基。

16.一种培养基，基本上由以下组成：b-9-i培养基、b-9-ii培养基、b-9-iii培养基、b-9-iv培养基、b-9-v培养基、CW2-i培养基、CW2-ii培养基、CW2-iii培养基、CW2-iv培养基、CW2-V培养基、b-10-i培养基、b-10-ii培养基、b-10-iii培养基、b-10-iv培养基、b-10-v培养基、b-11-i培养基、b-11-ii培养基、b-11-iii培养基、b-11-iv培养基、b-11-v培养基、b-12c-i培养基、b-12c-ii培养基、b-12c-iii培养基、b-12c-iv培养基、b-12c-v培养基、b-1-i培养基、b-1-ii培养基、b-1-iii培养基、b-1-iv培养基、b-1-v培养基、b-4-i培养基、b-4-ii培养基、b-4-iii培养基、b-4-iv培养基、b-4-v培养基、b-6-i培养基、b-6-ii培养基、b-6-iii培养基、b-6-iv培养基、b-6-v培养基、CW1-i培养基、CW1-ii培养基、CW1-iii培养基、CW1-iv培养基、CW1-v培养基、CW3-i培养基、CW3-ii培养基、CW3-iii培养基、CW3-iv培养基、CW3-v培养基、CW4-i培养基、CW4-ii培养基、CW4-iii培养基、CW4-iv培养基、CW4-v培养基、CW5-i培养基、CW5-ii培养基、CW5-iii培养基、CW5-iv培养基、CW5-v培养基、CW6-i培养基、CW6-ii培养基、CW6-iii培养基、CW6-iv培养基和/或CW6-v培养基。

17.一种培养基，由以下组成：b-9-i培养基、b-9-ii培养基、b-9-iii培养基、b-9-iv培养基、b-9-v培养基、CW2-i培养基、CW2-ii培养基、CW2-iii培养基、CW2-iv培养基、CW2-V培养基、b-10-i培养基、b-10-ii培养基、b-10-iii培养基、b-10-iv培养基、b-10-v培养基、b-11-i培养基、b-11-ii培养基、b-11-iii培养基、b-11-iv培养基、b-11-v培养基、b-12c-i培养基、b-12c-ii培养基、b-12c-iii培养基、b-12c-iv培养基、b-12c-v培养基、b-1-i培养基、b-1-ii培养基、b-1-iii培养基、b-1-iv培养基、b-1-v培养基、b-4-i培养基、b-4-ii培养基、b-4-iii培养基、b-4-iv培养基、b-4-v培养基、b-6-i培养基、b-6-ii培养基、b-6-iii培养基、b-6-iv培养基、b-6-v培养基、CW1-i培养基、CW1-ii培养基、CW1-iii培养基、CW1-iv培养基、CW1-v培养基、CW3-i培养基、CW3-ii培养基、CW3-iii培养基、CW3-iv培养基、CW3-v培养基、CW4-i培养基、CW4-ii培养基、CW4-iii培养基、CW4-iv培养基、CW4-v培养基、CW5-i培养基、CW5-ii培养基、CW5-iii培养基、CW5-iv培养基、CW5-v培养基、CW6-i培养基、CW6-ii培养基、CW6-iii培养基、CW6-iv培养基和/或CW6-v培养基。

18.一种试剂盒，包含根据实施方案15、16或17的培养基。

19.一种微繁殖竹的方法，使用根据实施方案1、15、16或17的培养基。

20.一种微繁殖竹的方法，使用根据实施方案8、9、10、11或18的试剂盒。

更多的实施方案包括：

21.一种培养基，包含、基本上的组成是或组成是：

或者

其中细胞分裂素A是Meta-topolin或者此处所描述的Meta-topolin类似物，并且细胞分裂素B是苯基噻二唑脲或者此处所描述的苯基噻二唑脲类似物。

22.一种微繁殖竹的方法，包括将竹外植体暴露于实施方案21的培养基。

23.根据实施方案22的方法，进一步包括将竹苗暴露于b-9-i培养基、b-9-ii培养基、b-9-iii培养基、b-9-iv培养基、b-9-v培养基、CW2-i培养基、CW2-ii培养基、CW2-iii培养基、CW2-iv培养基、CW2-v培养基、b-10-i培养基、b-10-ii培养基、b-10-iii培养基、b-10-iv培养基、b-10-v培养基、b-11-i培养基、b-11-ii培养基、b-11-iii培养基、b-11-iv培养基、b-11-v培养基、b-12c-i培养基、b-12c-ii培养基、b-12c-iii培养基、b-12c-iv培养基、b-12c-v培养基、b-1-i培养基、b-1-ii培养基、b-1-iii培养基、b-1-iv培养基、b-1-v培养基、b-4-i培养基、b-4-ii培养基、b-4-iii培养基、b-4-iv培养基、b-4-v培养基、b-6-i培养基、b-6-ii培养基、b-6-iii培养基、b-6-iv培养基、b-6-v培养基、CW1-i培养基、CW1-ii培养基、CW1-iii培养基、CW1-iv培养基、CW1-v培养基、CW3-i培养基、CW3-ii培养基、CW3-iii培养基、CW3-iv培养基、CW3-v培养基、CW4-i培养基、CW4-ii培养基、CW4-iii培养基、CW4-iv培养基、CW4-v培养基、CW5-i培养基、CW5-ii培养基、CW5-iii培养基、CW5-iv培养基、CW5-v培养基、CW6-i培养基、CW6-ii培养基、CW6-iii培养基、CW6-iv培养基和/或CW6-v培养基。

24.根据实施方案23的方法，进一步包括将竹苗暴露于支持转换到试管外条件的培养基。

25.根据实施方案23的方法，其中所述方法由一个外植体产生100,000个竹苗。

26.根据实施方案22、23、24或25中任一项的方法，其中所述方法进一步包括获得外植体。

27.根据实施方案26的方法，其中所述外植体是从竹茎干底部起的第三节。

28.一种试剂盒，包含培养基，所述培养基包含、基本上的组成是或组成是：

或者

29.根据实施方案28的试剂盒，进一步包含b-9-i培养基、b-9-ii培养基、b-9-iii培养基、b-9-iv培养基、b-9-v培养基、CW2-i培养基、CW2-ii培养基、CW2-iii培养基、CW2-iv培养基、CW2-v培养基、b-10-i培养基、b-10-ii培养基、b-10-iii培养基、b-10-iv培养基、b-10-v培养基、b-11-i培养基、b-11-ii培养基、b-11-iii培养基、b-11-iv培养基、b-11-v培养基、b-12c-i培养基、b-12c-ii培养基、b-12c-iii培养基、b-12c-iv培养基、b-12c-v培养基、b-1-i培养基、b-1-ii培养基、b-1-iii培养基、b-1-iv培养基、b-1-v培养基、b-4-i培养基、b-4-ii培养基、b-4-iii培养基、b-4-iv培养基、b-4-v培养基、b-6-i培养基、b-6-ii培养基、b-6-iii培养基、b-6-iv培养基、b-6-v培养基、CW1-i培养基、CW1-ii培养基、CW1-iii培养基、CW1-iv培养基、CW1-v培养基、CW3-i培养基、CW3-ii培养基、CW3-iii培养基、CW3-iv培养基、CW3-v培养基、CW4-i培养基、CW4-ii培养基、CW4-iii培养基、CW4-iv培养基、CW4-v培养基、CW5-i培养基、CW5-ii培养基、CW5-iii培养基、CW5-iv培养基、CW5-v培养基、CW6-i培养基、CW6-ii培养基、CW6-iii培养基、CW6-iv培养基和/或CW6-v培养基。

30.根据实施方案28或29的试剂盒，进一步包含支持转换到试管外条件的培养基。

31.根据实施方案28、29或30的试剂盒，进一步包含外植体。

32.一种微繁殖竹的方法，包括将竹外植体暴露于培养基，所述培养基包含Meta-topolin或者此处所描述的Meta-topolin类似物和/或苯基噻二唑脲或者此处所描述的苯基噻二唑脲类似物。

33.根据实施方案32的方法，其中所述培养基包含b-9-i培养基、b-9-ii培养基、b-9-iii培养基、b-9-iv培养基、b-9-v培养基、CW2-i培养基、CW2-ii培养基、CW2-iii培养基、CW2-iv培养基、CW2-v培养基、b-10-i培养基、b-10-ii培养基、b-10-iii培养基、b-10-iv培养基、b-10-v培养基、b-11-i培养基、b-11-ii培养基、b-11-iii培养基、b-11-iv培养基、b-11-v培养基、b-12c-i培养基、b-12c-ii培养基、b-12c-iii培养基、b-12c-iv培养基、b-12c-v培养基、b-1-i培养基、b-1-ii培养基、b-1-iii培养基、b-1-iv培养基、b-1-v培养基、b-4-i培养基、b-4-ii培养基、b-4-iii培养基、b-4-iv培养基、b-4-v培养基、b-6-i培养基、b-6-ii培养基、b-6-iii培养基、b-6-iv培养基、b-6-v培养基、CW1-i培养基、CW1-ii培养基、CW1-iii培养基、CW1-iv培养基、CW1-v培养基、CW3-i培养基、CW3-ii培养基、CW3-iii培养基、CW3-iv培养基、CW3-v培养基、CW4-i培养基、CW4-ii培养基、CW4-iii培养基、CW4-iv培养基、CW4-v培养基、CW5-i培养基、CW5-ii培养基、CW5-iii培养基、CW5-iv培养基、CW5-v培养基、CW6-i培养基、CW6-ii培养基、CW6-iii培养基、CW6-iv培养基和/或CW6-v培养基。

34.根据实施方案32的方法，其中外植体是从竹茎干底部起的第三节。

35.一种培养基，包括b-9-i培养基、b-9-ii培养基、b-9-iii培养基、b-9-iv培养基、b-9-v培养基、CW2-i培养基、CW2-ii培养基、CW2-iii培养基、CW2-iv培养基、CW2-v培养基、b-10-i培养基、b-10-ii培养基、b-10-iii培养基、b-10-iv培养基、b-10-v培养基、b-11-i培养基、b-11-ii培养基、b-11-iii培养基、b-11-iv培养基、b-11-v培养基、b-12c-i培养基、b-12c-ii培养基、b-12c-iii培养基、b-12c-iv培养基、b-12c-v培养基、b-1-i培养基、b-1-ii培养基、b-1-iii培养基、b-1-iv培养基、b-1-v培养基、b-4-i培养基、b-4-ii培养基、b-4-iii培养基、b-4-iv培养基、b-4-v培养基、b-6-i培养基、b-6-ii培养基、b-6-iii培养基、b-6-iv培养基、b-6-v培养基、CW1-i培养基、CW1-ii培养基、CW1-iii培养基、CW1-iv培养基、CW1-v培养基、CW3-i培养基、CW3-ii培养基、CW3-iii培养基、CW3-iv培养基、CW3-v培养基、CW4-i培养基、CW4-ii培养基、CW4-iii培养基、CW4-iv培养基、CW4-v培养基、CW5-i培养基、CW5-ii培养基、CW5-iii培养基、CW5-iv培养基、CW5-v培养基、CW6-i培养基、CW6-ii培养基、CW6-iii培养基、CW6-iv培养基和/或CW6-v培养基。

36.一种培养基，基本上由以下组成：b-9-i培养基、b-9-ii培养基、b-9-iii培养基、b-9-iv培养基、b-9-v培养基、CW2-i培养基、CW2-ii培养基、CW2-iii培养基、CW2-iv培养基、CW2-v培养基、b-10-i培养基、b-10-ii培养基、b-10-iii培养基、b-10-iv培养基、b-10-v培养基、b-11-i培养基、b-11-ii培养基、b-11-iii培养基、b-11-iv培养基、b-11-v培养基、b-12c-i培养基、b-12c-ii培养基、b-12c-iii培养基、b-12c-iv培养基、b-12c-v培养基、b-1-i培养基、b-1-ii培养基、b-1-iii培养基、b-1-iv培养基、b-1-v培养基、b-4-i培养基、b-4-ii培养基、b-4-iii培养基、b-4-iv培养基、b-4-v培养基、b-6-i培养基、b-6-ii培养基、b-6-iii培养基、b-6-iv培养基、b-6-v培养基、CW1-i培养基、CW1-ii培养基、CW1-iii培养基、CW1-iv培养基、CW1-v培养基、CW3-i培养基、CW3-ii培养基、CW3-iii培养基、CW3-iv培养基、CW3-v培养基、CW4-i培养基、CW4-ii培养基、CW4-iii培养基、CW4-iv培养基、CW4-v培养基、CW5-i培养基、CW5-ii培养基、CW5-iii培养基、CW5-iv培养基、CW5-v培养基、CW6-i培养基、CW6-ii培养基、CW6-iii培养基、CW6-iv培养基和/或CW6-v培养基。

37.一种培养基，由以下组成：b-9-i培养基、b-9-ii培养基、b-9-iii培养基、b-9-iv培养基、b-9-v培养基、CW2-i培养基、CW2-ii培养基、CW2-iii培养基、CW2-iv培养基、CW2-v培养基、b-10-i培养基、b-10-ii培养基、b-10-iii培养基、b-10-iv培养基、b-10-v培养基、b-11-i培养基、b-11-ii培养基、b-11-iii培养基、b-11-iv培养基、b-11-v培养基、b-12c-i培养基、b-12c-ii培养基、b-12c-iii培养基、b-12c-iv培养基、b-12c-v培养基、b-1-i培养基、b-1-ii培养基、b-1-iii培养基、b-1-iv培养基、b-1-v培养基、b-4-i培养基、b-4-ii培养基、b-4-iii培养基、b-4-iv培养基、b-4-v培养基、b-6-i培养基、b-6-ii培养基、b-6-iii培养基、b-6-iv培养基、b-6-v培养基、CW1-i培养基、CW1-ii培养基、CW1-iii培养基、CW1-iv培养基、CW1-v培养基、CW3-i培养基、CW3-ii培养基、CW3-iii培养基、CW3-iv培养基、CW3-v培养基、CW4-i培养基、CW4-ii培养基、CW4-iii培养基、CW4-iv培养基、CW4-v培养基、CW5-i培养基、CW5-ii培养基、CW5-iii培养基、CW5-iv培养基、CW5-v培养基、CW6-i培养基、CW6-ii培养基、CW6-iii培养基、CW6-iv培养基和/或CW6-v培养基。

38.一种试剂盒，包含根据实施方案35、36或37的培养基。

39.一种微繁殖竹的方法，使用根据实施方案21、35、36或37的培养基。

40.一种微繁殖竹的方法，使用根据实施方案28，29、30、31或38的试剂盒。

41.一种用于微繁殖竹的培养基，其中所述培养基使10-120天的增殖周期维持至少1个月，至少3个月，至少6个月，至少9个月，至少12个月，至少15个月，至少18个月，至少21个月，至少24个月，或者至少36个月。

42.根据实施方案41的培养基，其中所述培养基包含、基本上的组成是或组成是：b-9-i培养基、b-9-ii培养基、b-9-iii培养基、b-9-iv培养基、b-9-v培养基、CW2-i培养基、CW2-ii培养基、CW2-iii培养基、CW2-iv培养基、CW2-v培养基、b-10-i培养基、b-10-ii培养基、b-10-iii培养基、b-10-iv培养基、b-10-v培养基、b-11-i培养基、b-11-ii培养基、b-11-iii培养基、b-11-iv培养基、b-11-v培养基、b-12c-i培养基、b-12c-ii培养基、b-12c-iii培养基、b-12c-iv培养基、b-12c-v培养基、b-1-i培养基、b-1-ii培养基、b-1-iii培养基、b-1-iv培养基、b-1-v培养基、b-4-i培养基、b-4-ii培养基、b-4-iii培养基、b-4-iv培养基、b-4-v培养基、b-6-i培养基、b-6-ii培养基、b-6-iii培养基、b-6-iv培养基、b-6-v培养基、CW1-i培养基、CW1-ii培养基、CW1-iii培养基、CW1-iv培养基、CW1-v培养基、CW3-i培养基、CW3-ii培养基、CW3-iii培养基、CW3-iv培养基、CW3-v培养基、CW4-i培养基、CW4-ii培养基、CW4-iii培养基、CW4-iv培养基、CW4-v培养基、CW5-i培养基、CW5-ii培养基、CW5-iii培养基、CW5-iv培养基、CW5-v培养基、CW6-i培养基、CW6-ii培养基、CW6-iii培养基、CW6-iv培养基和/或CW6-v培养基。

更多的实施方案包括：

43.一种微繁殖竹的培养基，其中所述培养基包含Meta-topolin或其类似物，并且使10-120天的增殖周期维持至少6个月。

44.根据实施方案43的培养基，其中所述培养基使10-120天的增殖周期维持至少一年。

45.根据实施方案43或44的培养基，其中所述Meta-topolin或其类似物以0.0125mg/mL-10mg/mL的量存在。

46.根据实施方案43、44或45的培养基，其中所述培养基进一步包含苯基噻二唑脲或其类似物。

47.根据实施方案43、44、45或46的培养基，其中所述培养基进一步包含NAA、BAP、2ip和/或IBA。

48.一种微繁殖竹的方法，包括在实施方案43、44、45、46或47的培养基中培养竹外植体和/或苗。

49.根据实施方案48的微繁殖竹的方法，其中所述竹是蓉城竹(Phyllostachys bissetti)；缺苞箭竹(Fargesia denudata)；云锦苦竹(Pleioblastusfortunei)；Sasa Veitchii；Pleioblastus viridistriatus；Thamnocalamus crassinodus；Chusquea Culeo″Cana Prieta″；绿竹(Bambusa Old Hamii)；毛竹(PhyllostachysMoso)；乌芽竹(Phyllostachys Atrovaginata)；马来甜龙竹(DendrocalamusAsper)；或狭叶瓜多竹(Guadua Angustifolia)。

50.一种用于将苗转换到试管外条件的培养基，其中培养基包含、基本上的组成是或组成是Br-2-i培养基、Br-2-ii培养基、Br-2-iii培养基、Br-2-iv培养基、Br-2-v培养基、Ech-i培养基、Ech-ii培养基、Ech-iii培养基、Ech-iv、Ech-v培养基、Amel-i培养基、Amel-ii培养基、Amel-iii培养基、Amel-iv培养基或Amel-v培养基。

51.一种用于微繁殖竹的培养基，其中所述培养基包含苯基噻二唑脲或其类似物，并且使10-120天的增殖周期维持至少6个月。

52.根据实施方案51的培养基，其中所述培养基使10-120天的增殖周期维持至少一年。

53.根据实施方案51或52的培养基，其中所述苯基噻二唑脲或其类似物以0.0001mg/mL-5mg/mL的量存在。

54.根据实施方案51、52或53的培养基，其中所述培养基进一步包含Meta-topolin或其类似物、NAA、BAP、2ip和/或IBA。

55.根据实施方案54的培养基，其中所述Meta-topolin或其类似物以0.0125mg/mL-10mg/mL的量存在。

56.根据实施方案43、44、45、46、47、51、52、53、54或55的培养基，其中所述培养基包含、基本上的组成是或组成是：b-9-i培养基、b-9-ii培养基、b-9-iii培养基、b-9-iv培养基、b-9-v培养基、CW2-i培养基、CW2-ii培养基、CW2-iii培养基、CW2-iv培养基、CW2-v培养基、b-10-i培养基、b-10-ii培养基、b-10-iii培养基、b-10-iv培养基、b-10-v培养基、b-11-i培养基、b-11-ii培养基、b-11-iii培养基、b-11-iv培养基、b-11-v培养基、b-12c-i培养基、b-12c-ii培养基、b-12c-iii培养基、b-12c-iv培养基、b-12c-v培养基、b-1-i培养基、b-1-ii培养基、b-1-iii培养基、b-1-iv培养基、b-1-v培养基、b-4-i培养基、b-4-ii培养基、b-4-iii培养基、b-4-iv培养基、b-4-v培养基、b-6-i培养基、b-6-ii培养基、b-6-iii培养基、b-6-iv培养基、b-6-v培养基、CW1-i培养基、CW1-ii培养基、CW1-iii培养基、CW1-iv培养基、CW1-v培养基、CW3-i培养基、CW3-ii培养基、CW3-iii培养基、CW3-iv培养基、CW3-v培养基、CW4-i培养基、CW4-ii培养基、CW4-iii培养基、CW4-iv培养基、CW4-v培养基、CW5-i培养基、CW5-ii培养基、CW5-iii培养基、CW5-iv培养基、CW5-v培养基、CW6-i培养基、CW6-ii培养基、CW6-iii培养基、CW6-iv培养基和/或CW6-v培养基。

57.一种微繁殖竹的方法，包括在实施方案51、52、53、54或55的培养基中培养竹外植体和/或苗。

58.根据实施方案57的微繁殖竹的方法，其中所述竹是蓉城竹(Phyllostachys bissetti)；缺苞箭竹(Fargesia denudata)；云锦苦竹(Pleioblastusfortunei)；Sasa Veitchii；Pleioblastus viridistriatus；Thamnocalamus crassinodus；Chusquea Culeo″Cana Prieta″；绿竹(Bambusa Old Hamii)；毛竹(PhyllostachysMoso)；乌芽竹(Phyllostachys Atrovaginata)；马来甜龙竹(DendrocalamusAsper)；或狭叶瓜多竹(Guadua Angustifolia)。

59.一种试剂盒，包含根据实施方案43、44、45、46、47、50、51、52、53、54、55或56中任一项的培养基。

实施方案也包括以上提供的所有实施方案，其中进行微繁殖的竹是Arundinaria gigantea；Bambusa balcoa；龙头竹(Bambusa vulgaris)；龙头竹′Vitatta′(Bambusa vulgaris′Vitatta′)；绿竹(Bambusa Oldhamii)；马甲竹(Bambusatulda)；勃氏甜龙竹(endrocalamus brandesii)；马来甜龙竹(Dendrocalamus Asper)；版纳甜龙竹(Dendrocalamus hamiltoni)；龙竹(Dendrocalamus giganteus)；黄竹(Dendrocalamus membranaceus)；牡竹(Dendrocalamus strictus)；Gigantochloaaspera；Gigantochloa scortechini；瓜多竹(Guadua culeata)；瓜多竹′尼加拉瓜′；Guadua amplexifolia；狭叶瓜多竹(Guadua angustifolia)；Guadua angustofoliabi-color；从瓜多竹(Guadua paniculata)；Melocanna bambusoides；eohouzeauadullooa(长穗竹属)；Ochlandra travancorica；毛竹(Phyllostachys edulis)′毛竹′“Moso”；紫竹(Phyllostachysnigra)；毛金竹(Phyllostachys nigra′Henon′)；或Schizostachyum lumampao。

发明详述

竹是具有多种不同用途的多功能植物。它们是是亚洲人烹饪的主要原料，并且在多种产品中也可以找到竹，包括牙签、扫帚、葡萄栽培和树木栽培的支架、景观美化材料、拼花地板、层压材料、家具、手工艺品和其他家用物品。此外，竹正成为一种作为纸张生产成分的织物材料的重要来源，和结构木料的来源。

竹被认为是环境友好型“绿色”产品。使竹享有绿色盛名的特征之一是其极为快速的生长速率。但是，尽管竹具有高生长速率，它的其他特性仍使得它是一种难以驾驭的作物，这些特性包括其长开花周期和表现出大规模(或群体性的)开花的倾向。

本发明公开的实施方案提供用于以商业规模进行的竹的微繁殖或组织培养(这些术语在本发明中可以互换使用)。

微繁殖的植株在体外在无菌培养基中生长。该无菌培养基可以是液体、半固体或固体，并且培养基的物理状态可以通过加入一种或多种胶凝剂而变化。可以使用本技术领域已知的植物组织培养用培养基中适宜使用的任何胶凝剂。为达到该目的，最常使用的是琼脂。这样的琼脂的例子包括A、E或M型琼脂和Bacto^TM琼脂。其他示例性琼脂包括角叉菜胶、吉兰糖胶(可以作为PhytaGel^TM、Gelrite

和Gelzan^TM以商业途径获得)、藻酸及其盐和琼脂糖。也可以使用这些试剂的混合物，例如两种或更多种的琼脂、角叉菜胶、吉兰糖胶、琼脂糖和藻酸或其盐。通常，该培养基包含琼脂，并加入不同的化合物，例如营养物、无机盐、生长调节剂、糖、维生素和其他化合物。其他培养基添加剂可以包括，但不限于，氨基酸、大量元素、铁、微量元素、肌醇和不确定性培养基组分(undefined media components)例如酪蛋白水解物或酵母提取物。例如，所述培养基可以包括任意组合的NH₄NO₃；KNO₃；Ca(NO₃)₂，K₂SO₄；MgSO₄；MnSO₄；ZnSO₄；CuSO₄；CaCl₂；Kl；CoCI₂；H₃BO₃；Na₂MoO₄；KH₂PO₄；FeSO₄；Na₂EDTA；Na₂H₂PO₄；肌醇；硫胺素；吡哆醇；烟酸；甘氨酸；核黄素；抗坏血酸；硅标准溶液；β-萘氧乙酸(NAA)；吲哚丁酸(IBA)；3-吲哚乙酸(IAA)；苄氨基嘌呤(BAP)；6-γ-γ-(二甲基烯丙基氨基)-嘌呤(2-ip)；糖；琼脂；角叉菜胶和炭。植物生长调节剂的例子包括植物生长素和具有植物生长素样活性的化合物、细胞分裂素和具有细胞分裂素样活性的化合物。示例性植物生长素包括2，4-二氯苯氧乙酸、IBA、落叶素及其组合。示例性细胞分裂素，除Meta-topolin和苯基噻二唑脲外，还包括半硫酸腺嘌呤、苄基腺嘌呤、二甲基烯丙基腺嘌呤、激动素、玉米素及其组合。该培养基中可以包含赤霉酸。糖可以包含在培养基中并且可以作为碳源。这样的糖是本领域普通技术人员所知的。示例性糖包括蔗糖、葡萄糖、麦芽糖、半乳糖和山梨醇或其组合。

本发明公开了专门的培养基、系统和方法，容许以商业规模成功地组织培养竹。本发明描述的特定培养基包括细胞分裂素Meta-topolin和/或苯基噻二唑脲。虽然特定的实施方案中使用如下特定化合物所限定的Meta-topolin和/或苯基噻二唑脲，但是其他相关的化合物也可以成功使用。

根据本公开的有用的化合物包括具有以下通式的Meta-topolin类似物：

其中W是芳基或杂环芳基；

R¹是取代的或未被取代的烷基，其烷基中的任何C可被O、N或S取代；

每个R²是独立的H、OH、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烯基、C₁-C₆炔基、卤素、氰基、C₁-C₆烷氧基、芳基或杂环芳基，每一种均可任选地被C₁-C₆烷基、SH、NHR³、CO₂R³或者卤素取代；

R³是H、OH、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烯基、C₁-C₆炔基、卤素、羧基、酯基、醛基或氰基；

r是0到8。

在一个实施方案中，W是

其中虚线代表存在或不存在键；

X¹-X⁷各自独立地选自C、N、O、S，前提是将环连接到N的X是C。

在另外一个实施方案中，该化合物具有如下结构：

其中虚线代表存在或不存在键。

在另外一个实施方案中，该化合物具有如下结构：

其中虚线代表存在或不存在键；

X⁸-X¹²各自独立地选自C、N、O、S；

每个R⁴是独立的H、OH、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烯基、C₁-C₆炔基(alkylyl)、卤素、氰基、C₁-C₆烷氧基、芳基或杂环芳基，每一种均可任选地被C₁-C₆烷基、SH、NHR³、CO₂R³或者卤素取代；

p是0到5；且

q是0到6。

在另一个实施方案中，该化合物具有如下结构：

在又一个实施方案中，该化合物具有如下结构：

进一步的，化合物可以具有选自如下的结构：

在一个实施方案中，R⁴是OH。

在另一个实施方案中，化合物具有选自如下的结构：

在又一个实施方案中，该化合物具有如下结构：

其中虚线代表存在或不存在键。

在又一个实施方案中，该化合物具有如下结构：

其中虚线代表存在或不存在键；

X⁸-X¹²各自独立地选自C、N、O、S；

每个R⁴是独立的H、OH、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烯基、C₁-C₆炔基、卤素、氰基、C₁-C₆烷氧基、芳基或杂环芳基，每一种均可任选地被C₁-C₆烷基、SH、NHR³、CO₂R³或者卤素取代；

p是0到5；且

q是0到6。

在其他实施方案中，该化合物具有如下结构：

在又一个实施方案中，该化合物具有如下结构：

在一个实施方案中，该化合物是Meta-topolin，也被称作6-(3-羟苄基氨基)-嘌呤，并缩写为mT，其具有分子式为C₁₂H₁₀N₅OH，分子量为241.25，和如下结构式：

其中所述Meta-topolin是柳树或白杨树的衍生物。

根据本公开的有用的化合物包括具有如下通式的苯基噻二唑脲类似物：

其中V是芳基或杂环芳基；

每种R⁵和R⁶是各自独立的H、OH、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烯基、C₁-C₆炔基、卤素、氰基、C₁-C₆烷氧基、芳基或杂环芳基，每一种均可任选地被C₁-C₆烷基或卤素取代；

n是0到4；

o是0到5

X¹³-X¹⁶各自独立地选自C、N、O、S；

Z¹和Z²各自独立地是NH、O、SH或CH，或者Z¹和Z²可以被组合以形成取代的或未被取代的芳基或杂环芳基；并且

Y¹是O或S。

在另一个实施方案中，该化合物具有如下结构：

其中X¹⁷-X²¹中的每一个独立地选自C、N、O、S。

在其他实施方案中，化合物包括

在一个实施方案中，所述化合物是苯基噻二唑脲，也称为1-苯基-3-(1，2，3-噻二唑-5-基)脲和5-苯基氨甲酰氨基-1，2，3-噻二唑，具有的分子式为C₉H₈N₄OS，分子量是220.25，并且具有如下结构式：

如果在培养基中存在，每种细胞分裂素可以以从0.001mg/L到100mg/L的量和两者之间的所有量存在。在某些实施方案中，Meta-topolin和/或其类似物可以以0.001mg/L、0.01、0.1、1、2、3、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99或100mg/L存在。在特定实施方案中，苯基噻二唑脲和/或其类似物可以以0.001mg/L、0.01、0.025、0.05、0.075、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45、0.5、0.55、0.6、0.65、0.7、0.75、0.8、0.85、0.9、0.95、1.0、1.25、1.50、1.75、2..25、2.5、2.75、3.5、4.5、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99或100mg/L存在。

当使用二者时，Meta-topolin和/或其类似物以及苯基噻二唑脲和/或其类似物可以按照比例包括在内。例如，Meta-topolin和/或其类似物的量与苯基噻二唑脲和/或其类似物的比可以是100∶1、95∶1、90∶1、85∶1、80∶1、75∶1、70∶1、65∶1、60∶1、55∶1、50∶1、45∶1、40∶1、35∶1、30∶1、29∶1、28∶1、27∶1、26∶1、25∶1、24∶1、23∶1、22∶1、21∶1、20∶1、19∶1、18∶1、17∶1、16∶1、15∶1、14∶1、13∶1、12∶1、11∶1、10∶1；9∶1、8∶1、7∶1、6.9∶1、6.8∶1、6.7∶1、6.6∶1、6.5∶1、6.4∶1、6.3∶1、6.2∶1、6.1∶1、6∶1、5.9∶1、5.8∶1、5.7∶1、5.6∶1、5.5∶1、5.4∶1、5.3∶1、5.2∶1、5.1∶1、5∶1；4∶1、3∶1、2∶1、1∶1、0.75∶1、0.5∶1、0.25∶1、0.1∶1、0.075∶1、0.05∶1、0.025∶1或0.001∶1。当使用Meta-topolin和苯基噻二唑脲二者时，它们可以存在于相同或不同的培养基中。

类似的，NAA、BAP、2ip和/或IBA可以以0.001mg/L、0.01、0.1、1、2、3、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99或100mg/L或0.001mg/L、0.01、0.025、0.05、0.075、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45、0.5、0.55、0.6、0.65、0.7、0.75、0.8、0.85、0.9、0.95、1.0、1.25、1.50、1.75、2..25、2.5、2.75、3.5、4.5、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99或100mg/L存在。

上文已经提供了多种化合物的结构或结构式，包括Meta-topolin和苯基噻二唑脲。本领域普通技术人员将理解当提到一种化合物时，应当被广义的解释为包括具有所描述的结构或化学名称的化学实体的药学上可接受的盐、前体药物、互变异构体、可替换的固体形式、非共价络合物、类似物、衍生物及其组合。

药学上可接受的盐是适用于此处公开的方法的母体化合物的任何盐。药学上可接受的盐也指任何这样的盐，其可以作为施用酸、另外的盐或转化成酸或盐的前体药物的结果形成。盐包括该化合物的一种或多种离子形式，例如共轭酸或碱，伴随着一种或多种相应的反离子。盐可以形成自或者整合入一种或多种去质子化酸性基团(例如，羧酸)，一种或多种质子化碱性基团(例如，胺)，或同时具有两者(例如，两性离子)。

本申请并不意图受到上述化合物的任何限制，上述化合物的不同互变异构体都是可行的。如此处所用的，“互变异构体”是指质子在相邻单键或双键之间的迁移。互变异构过程是可逆的。当所述化合物包括，例如但不限于，烯醇、酮、丙氨酸(lactamin)、酰胺、亚胺酸、胺、和亚胺基团时，其他互变异构体是可能的。互变异构体通常会达到在两个键长之间共振共享双键的平衡状态。

除非立体化学被明确的描述，预期一种结构包括每种可能的立体异构体，包括纯的或任何可能的混合物二者。

可替换的固体形式是与通过实施此处描述的程序获得的那些不同的固体形式。例如，可替换的固体形式可以是多晶型物，不同种类的无定型固体形式、玻璃体等等。

非共价络合物是在化合物和一种或多种其他化学物质之间形成的络合物，其在该化合物和所述其他化学物质之间不涉及共价键合相互作用。化合物和其他化学物质之间可以具有或不具有特定比例。实例可以包括溶剂化物、水合物、电荷转移络合物等等。

总的来说，在典型的微繁殖中，植物被置于不同的培养基中，该培养基刺激植株进行的和/或在植株内的生理过程如生长和增殖。一般来说，所述过程包括3个步骤(在外植体的制备和灭菌以后，在下文讨论)：(1)外植体在培养基中体外生长和/或增殖的开始；(2)进一步在阶段2培养基中的体外增殖；和(3)转换到试管外条件。不是每一种组织培养过程都需要所有步骤，但是，在某些过程中，可以组合或者跳过步骤。例如，虽然在第1和2步之间培养基的类型常常有变化，在某些实施方案中，不包括培养基的变化。在其他过程中，植株可能不需要一个特定的促进向试管外条件转换的步骤，而是仍在相同的维持增殖的培养基中完成过程。相应的，如本文所公开的，培养基被限定为阶段1培养基(过程中的第一种培养基)；阶段2培养基(过程中的第二种培养基)；阶段3培养基(过程中的第三种培养基)；等等。特定的培养基可以根据特定过程中的步骤数改变阶段，并且其中特定培养基保留它们的顺序。

要开始过程，可以获得或制备阶段1培养基。阶段1培养基具有通常对于植物来说适宜的pH(典型的是4.0-7.0或4.5-6.5)。随后将阶段1培养基置入试管或其他合适的容器(包括罐、箱、缸、杯等，其中当没有具体指明时均称作“试管”)中。这些试管是有盖的或者是覆盖的，并且高压灭菌以对试管和培养基进行灭菌。在另一个实施方案中，灭菌通过在5-25磅压力psi在200℉-200℉的温度下高压灭菌10-25分钟实现。在另一个实施方案中，灭菌通过在15磅压力psi在250℉的温度下高压灭菌15-18分钟实现。无菌度可以通过每百个试管中可接受的被污染试管数来评价，例如并不限于，每百个试管中0个污染试管，每百个试管中不超过1个污染试管，每百个试管中不超过2个污染试管，每百个试管中不超过3个污染试管，每百个试管中不超过4个污染试管，每百个试管中不超过5个污染试管，每百个试管中不超过6个污染试管，每百个试管中不超过7个污染试管，每百个试管中不超过8个污染试管，每百个试管中不超过9个污染试管，每百个试管中不超过10个污染试管，等等。

在包含胶凝剂，例如琼脂、琼脂糖、吉兰糖胶、角叉菜胶或其组合的培养基中，培养基冷却后固化并用于向微繁殖的植物组织提供支持、营养物、生长调节剂、水和其他如下所述的化合物。通常，试管和罐包含15-25ml的培养基，而箱包含40-50ml培养基。杯包含30-40ml，而缸通常包含大于50ml培养基。

微繁殖的植物以一块选择的植物组织(称为“外植体”或者“母本植物”)开始。该外植体是组织培养过程中要发育的细胞的来源。外植体可以是任何区段或细胞的集合，其来自顶端分生组织、腋芽、形成层、侧生分生组织、苗端、茎的区段、茎的未成熟节段、侧生的苗、幼苗或叶节。在一个实施方案中，外植体取自1岁龄竹植株。在另一个实施方案中，外植体取自2岁龄竹植株。在另一个实施方案中，外植体取自5岁龄或时间更短的竹植株。在另一个实施方案中，外植体取自4岁龄或时间更短的竹植株。在另一个实施方案中，外植体取自3岁龄或时间更短的竹植株。在另一个实施方案中，外植体取自2岁龄或时间更短的竹植株。在另一个实施方案中，外植体取自1岁龄或时间更短的竹植株。在另一个实施方案中，外植体取自6月龄或时间更短的竹植株。在另一个实施方案中，外植体取自3月龄或时间更短的竹植株。获得外植体的竹可以在任何合适的耕作条件下生长，包括但不限于在生长室中生长，在温室或田间生长。

为本领域普通技术人员所理解，根据本公开可以使用多种合适的外植体。在某些实施方案中，根据本公开，可以使用茎的未成熟节段作为外植体材料。在一个实施方案中，外植体可以是新生长的茎干，其侧生苗恰好在节(node)的部位突出鞘。新生长的茎干包括那些由本季度或当年的植物获得的，其中该新生长的茎干可以获自植株上的任何节。在一个特定的实施方案中，外植体材料包括或限于从茎干底部起的第3节。

节部位可被切成3-5、1-10、2-9、3-8、4-6、3-6或2-7毫米的部分，并且使苗完整，灭菌以除去外植体外部的病原体。可以使用本领域中所知晓的任何灭菌方法。示例性灭菌方法包括使用灭菌剂，例如选自漂白剂(钠和/或钾和/或钙的次氯酸盐)、醇(如乙醇、异丙醇)、臭氧、氯气、碘溶液或抗生素或抗真菌溶液或其组合的灭菌剂，或将外植体暴露的表面置于紫外光下或置于-20℃或更低的温度、或高于40℃或50℃的温度下一段时间。在某些实施方案中，可以向灭菌溶液中加入少量(几滴)的Tween 20。

初始的灭菌之后，外鞘可以剥去并丢弃，并将剩余的块放入商业漂白剂的大约1％、5％、10％、15％、20％、25％或30％溶液中或类似的灭菌溶液中。灭菌溶液中的剥出的外植体可以被放在振动台上，例如，实验室用旋转器-可调速的巴恩斯特德/Lab line定轨摇床(型号KS260)，运行10分钟、20分钟、30分钟、60分钟、90分钟、120分钟、150分钟、180分钟或210分钟，每分钟6-9转或1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12、13、14或15转。在另一个实施方案中，剥出的外植体可以随后被放入漂白剂的大约1％溶液或类似的灭菌溶液中，并放回振动台上30分钟。在另一个实施方案中，该1％的漂白剂或类似的灭菌溶液的步骤可以重复。在另一个实施方案中，这些描述的步骤是渐进的并包括于整个的灭菌过程。如本领域普通技术人员所理解，可以根据本公开的内容使用多种适当的灭菌方法。

一旦灭过菌，外植体可以置于试管中的阶段1培养基上，而试管可被放入受调节的生长室。按此处所用，“生长室”可以包括许多构造和尺寸，包括桌面箱、独立室、柜、小室、大室，等等。如本领域普通技术人员所理解，在这样的生长室中可以适当控制如光照或温度等变量。组织培养竹的适当范围包括65℉-70℉、60℉-75℉或55℉-80℉，200-500、150-550或100-600英尺烛光。光照可以是全谱的，尽管也可以依照本公开使用替换的光照系统。

在生长室中的阶段1培养基上时，使外植体能够自己在试管内建立起来。在更为常见的3阶段组织培养中，一旦建立起来(即，生长并且没有明显污染)，由外植体生长而来的细胞培养物被转入第二种，即阶段2培养基中。或者，一旦建立起来，细胞培养物也可以保留在阶段1培养基中。在这个阶段在组织培养过程中，大量植株可在一个相对较短的时期内建立起来，这是由于每个细胞培养物能够发育出多个苗且每个苗均可被分出并放入单独的试管中，在其中它会发育出更多的苗以供分离和增殖。

不将培养基限制在一个特定的阶段，通常可充当阶段1和/或阶段2培养基的培养基的非限制性例子包括：

培养基b-12c(i-v)：

培养基CW2(i-v)：

组分	CW2-i	CW2-ii	CW2-iii	CW2-iv	CW2-v
						NH₄NO₃	825-2475	1237-2063	1485-1815	1650	1650±2
KNO₃	950-2850	1425-2375	1710-2090	1900	1900±2
						Ca(NO₃)₂	225-775	410-690	495-605	550	550±2
MgSO₄	185-555	275-465	330-410	370	370±2
						MnSO₄	8.0-26.0	12.0-22.0	15.0-19.0	16.9	16.9±0.2
ZnSO₄	4.0-12.0	6.0-10.0	8.0-9.0	8.6	8.6±0.2
						CuSO₄	0.012-0.378	0.020-0.030	0.022-0.028	0.025	0.025±.002
CaCl₂	220-660	330-350	400-480	440	440±2
						Kl	0.40-1.25	0.60-1.05	0.75-0.90	0.83	0.83±.02
CoCl₂	0.012-0.378	0.020-0.030	0.022-0.028	0.025	0.025±.002
						H₃BO₃	3.0-9.0	4.0-8.0	5.0-7.0	6.2	6.2±0.2
Na₂MoO₄	0.12-0.36	0.18-0.31	.22-.28	0.25	0.25±.02
						KH₂PO₄	85-255	120-210	150-190	170	170±2
FeSO₄	27.0-84.0	40.0-70.0	50.0-60.0	55.7	55.7±0.2
						Na₂EDTA	37.0-112.0	55.0-94.0	67.0-82.0	74.6	74.6±0.2
Na₂H₂PO₄	85-255	120-210	150-190	170	170±2
						肌醇	50-150	75-125	90-110	100	100±2
硫胺	0.2-0.6	0.3-0.5	0.36-0.44	0.4	0.4±0.2
						NAA	0.02-0.08	0.03-0.07	0.04-0.06	0.05	0.05±.02
BAP	0.5-1.5	0.7-1.3	0.9-1.1	1	1±0.2
						Meta-topolin	2.5-7.5	3.7-6.2	4.5-5.5	5	5±2
糖g/L	15-45	22-37	27-33	30	30±2
						琼脂g/L	2.7-8.2	4.1-6.8	4.9-6.1	5.5	5.5±0.2

培养基CW3(i-v)：

组分	CW3-i	CW3-ii	CW3-iii	CW3-iv	CW3-v
						NH₄NO₃	825-2475	1237-2063	1485-1815	1650	1650±2
KNO₃	950-2850	1425-2375	1710-2090	1900	1900±2
						Ca(NO₃)₂	225-775	410-690	495-605	550	550±2
MgSO₄	185-555	275-465	330-410	370	370±2
						MnSO₄	8.0-26.0	12.0-22.0	15.0-19.0	16.9	16.9±0.2
ZnSO₄	4.0-12.0	6.0-10.0	8.0-9.0	8.6	8.6±0.2
						CuSO₄	0.012-0.378	0.020-0.030	0.022-0.028	0.025	0.025±.002
CaCl₂	220-660	330-350	400-480	440	440±2
						Kl	0.40-1.25	0.60-1.05	0.75-0.90	0.83	0.83±.02
CoCl₂	0.012-0.378	0.020-0.030	0.022-0.028	0.025	0.025±.002
						H₃BO₃	3.0-9.0	4.0-8.0	5.0-7.0	6.2	6.2±0.2
Na₂MoO₄	0.12-0.36	0.18-0.31	.22-.28	0.25	0.25±.02
						KH₂PO₄	85-255	120-210	150-190	170	170±2
FeSO₄	27.0-84.0	40.0-70.0	50.0-60.0	55.7	55.7±0.2
						Na₂EDTA	37.0-112.0	55.0-94.0	67.0-82.0	74.6	74.6±0.2
Na₂H₂PO₄	85-255	120-210	150-190	170	170±2
						肌醇	50-150	75-125	90-110	100	100±2
硫胺	0.2-0.6	0.3-0.5	0.36-0.44	0.4	0.4±0.2
						NAA	0.05-0.15	0.07-0.12	0.09-0.11	0.1	0.1±0.02
BAP	0.5-1.5	0.7-1.3	0.9-1.1	1	1±0.2
						IBA	0.1-0.3	0.15-0.25	0.17-0.22	0.2	0.2±0.1
Meta-topolin	2.5-7.5	3.7-6.2	4.5-5.5	5	5±2
						糖g/L	15-45	22-37	27-33	30	30±2
琼脂g/L	2.7-8.2	4.1-6.8	4.9-6.1	5.5	5.5±0.2

培养基b-9(i-v)

组分	b-9-i	b-9-ii	b-9-iii	b-9-iv	b-9-v
						NH₄NO₃	825-2475	1237-2063	1485-1815	1650	1650±2
KNO₃	950-2850	1425-2375	1710-2090	1900	1900±2
						MgSO₄	185-555	275-465	330-410	370	370±2
MnSO₄	8.0-26.0	12.0-22.0	15.0-19.0	16.9	16.9±0.2
						ZnSO₄	4.0-12.0	6.0-10.0	8.0-9.0	8.6	8.6±0.2
CuSO₄	0.012-0.378	0.020-0.030	0.022-0.028	0.025	0.025±.002
						CaCl₂	220-660	330-350	400-480	440	440±2
Kl	0.40-1.25	0.60-1.05	0.75-0.90	0.83	0.83±.02
						CoCl₂	0.012-0.378	0.020-0.030	0.022-0.028	0.025	0.025±.002
H₃BO₃	3.0-9.0	4.0-8.0	5.0-7.0	6.2	6.2±0.2
						Na₂MoO₄	0.12-0.36	0.18-0.31	.22-.28	0.25	0.25±.02
KH₂PO₄	85-255	120-210	150-190	170	170±2
						FeSO₄	27.0-84.0	40.0-70.0	50.0-60.0	55.7	55.7±0.2
Na₂EDTA	37.0-112.0	55.0-94.0	67.0-82.0	74.6	74.6±0.2
						Na₂H₂PO₄	85-255	120-210	150-190	170	170±2
肌醇	50-150	75-125	90-110	100	100±2

培养基CW4(i-v)：

培养基CW1(i-v)：

组分	CW1-i	CW1-ii	CW1-iii	CW1-iv	CW1-v
						NH₄NO₃	825-2475	1237-2063	1485-1815	1650	1650±2
KNO₃	950-2850	1425-2375	1710-2090	1900	1900±2
						MgSO₄	185-555	275-465	330-410	370	370±2
MnSO₄	8.0-26.0	12.0-22.0	15.0-19.0	16.9	16.9±0.2

组分	CW1-i	CW1-ii	CW1-iii	CW1-iv	CW1-v
						ZnSO₄	4.0-12.0	6.0-10.0	8.0-9.0	8.6	8.6±0.2
CuSO₄	0.012-0.378	0.020-0.030	0.022-0.028	0.025	0.025±.002
						CaCl₂	220-660	330-350	400-480	440	440±2
Kl	0.40-1.25	0.60-1.05	0.75-0.90	0.83	0.83±.02
						CoCl₂	0.012-0.378	0.020-0.030	0.022-0.028	0.025	0.025±.002
H₃BO₃	3.0-9.0	4.0-8.0	5.0-7.0	6.2	6.2±0.2
						Na₂MoO₄	0.12-0.36	0.18-0.31	.22-.28	0.25	0.25±.02
KH₂PO₄	85-255	120-210	150-190	170	170±2
						FeSO₄	27.0-84.0	40.0-70.0	50.0-60.0	55.7	55.7±0.2
Na₂EDTA	37.0-112.0	55.0-94.0	67.0-82.0	74.6	74.6±0.2
						Na₂H₂PO₄	85-255	120-210	150-190	170	170±2
肌醇	50-150	75-125	90-110	100	100±2
						硫胺	0.2-0.6	0.3-0.5	0.36-0.44	0.4	0.4±0.2
NAA	0.02-0.08	0.03-0.07	0.04-0.06	0.05	0.05±.02
						BAP	0.5-1.5	0.7-1.3	0.9-1.1	1	1±0.2
Meta-topolin	2.5-7.5	3.7-6.2	4.5-5.5	5	5±2
						糖g/L	15-45	22-37	27-33	30	30±2
琼脂g/L	2.7-8.2	4.1-6.8	4.9-6.1	5.5	5.5±0.2
						硅溶液mL	0.5-1.5	0.7-1.3	0.9-1.1	1	1±0.2

培养基CW5(i-v)：

组分	CW5-i	CW5-ii	CW5-iii	CW5-iv	CW5-v
						NH₄NO₃	825-2475	1237-2063	1485-1815	1650	1650±2
KNO₃	950-2850	1425-2375	1710-2090	1900	1900±2
						MgSO₄	185-555	275-465	330-410	370	370±2
MnSO₄	8.0-26.0	12.0-22.0	15.0-19.0	16.9	16.9±0.2
						ZnSO₄	4.0-12.0	6.0-10.0	8.0-9.0	8.6	8.6±0.2
CuSO₄	0.012-0.378	0.020-0.030	0.022-0.028	0.025	0.025±.002
						CaCl₂	220-660	330-350	400-480	440	440±2
Kl	0.40-1.25	0.60-1.05	0.75-0.90	0.83	0.83±.02
						CoCl₂	0.012-0.378	0.020-0.030	0.022-0.028	0.025	0.025±.002
H₃BO₃	3.0-9.0	4.0-8.0	5.0-7.0	6.2	6.2±0.2
						Na₂MoO₄	0.12-0.36	0.18-0.31	.22-.28	0.25	0.25±.02
KH₂PO₄	85-255	120-210	150-190	170	170±2
						FeSO₄	27.0-84.0	40.0-70.0	50.0-60.0	55.7	55.7±0.2
Na₂EDTA	37.0-112.0	55.0-94.0	67.0-82.0	74.6	74.6±0.2
						Na₂H₂PO₄	85-255	120-210	150-190	170	170±2
肌醇	50-150	75-125	90-110	100	100±2
						硫胺	0.2-0.6	0.3-0.5	0.36-0.44	0.4	0.4±0.2
NAA	0.02-0.08	0.03-0.07	0.04-0.06	0.05	0.05±.02
						BAP	0.5-1.5	0.7-1.3	0.9-1.1	1	1±0.2
IBA	0.1-0.3	0.15-0.25	0.17-0.22	0.2	0.2±0.1
						Meta-topolin	2.5-7.5	3.7-6.2	4.5-5.5	5	5±2
糖g/L	15-45	22-37	27-33	30	30±2
						琼脂g/L	2.7-8.2	4.1-6.8	4.9-6.1	5.5	5.5±0.2

组分	CW5-i	CW5-ii	CW5-iii	CW5-iv	CW5-v
						硅溶液mL	0.5-1.5	0.7-1.3	0.9-1.1	1	1±0.2

培养基CW6(i-v)：

培养基b-10(i-v)：

组分	b-10-i	b-10-ii	b-10-iii	b-10-iv	b-10-v
						NH₄NO₃	825-2475	1237-2063	1485-1815	1650	1650±2
KNO₃	950-2850	1425-2375	1710-2090	1900	1900±2
						MgSO₄	185-555	275-465	330-410	370	370±2
MnSO₄	8.0-26.0	12.0-22.0	15.0-19.0	16.9	16.9±0.2
						ZnSO₄	4.0-12.0	6.0-10.0	8.0-9.0	8.6	8.6±0.2
CuSO₄	0.012-0.378	0.020-0.030	0.022-0.028	0.025	0.025±.002
						CaCl₂	220-660	330-350	400-480	440	440±2
Kl	0.40-1125	0.60-1.05	0.75-0.90	0.83	0.83±.02
						COCl₂	0.012-0.378	0.020-0.030	0.022-0.028	0.025	0.025±.002
H₃BO₃	3.0-9.0	4.0-8.0	5.0-7.0	6.2	6.2±0.2

组分	b-10-i	b-10-ii	b-10-iii	b-10-iv	b-10-v
						Na₂MoO₄	0.12-0.36	0.18-0.31	.22-.28	0.25	0.25±.02
KH₂PO₄	85-255	120-210	150-190	170	170±2
						FeSO₄	27.0-84.0	40.0-70.0	50.0-60.0	55.7	55.7±0.2
Na₂EDTA	37.0-112.0	55.0-94.0	67.0-82.0	74.6	74.6±0.2
						Na₂H₂PO₄	85-255	120-210	150-190	170	170±2
肌醇	50-150	75-125	90-110	100	100±2
						硫胺	0.2-0.6	0.3-0.5	0.36-0.44	0.4	0.4±0.2
NAA	0.02-0.08	0.03-0.07	0.04-0.06	0.05	0.05±.02
						BAP	0.5-1.5	0.7-1.3	0.9-1.1	1	1±0.2
Meta-topolin	2.5-7.5	3.7-6.2	4.5-5.5	5	5±2
						糖g/L	15-45	22-37	27-33	30	30±2
琼脂g/L	2.5-7.5	3.7-6.2	4.5-5.5	5	5±2

培养基b-11(i-v)：

培养基b-1(i-v)

组分	b-1-i	b-1-ii	b-1-iii	b-1-iv	b-1-v
						NH₄NO₃	600-1800	900-1500	1080-1320	1200	1200±2
Ca(NO₃)₂	838-2515	1257-2096	1510-1844	1677	1677±2
						K₂SO₄	121-363	181-302	218-266	242	242±2

培养基b-4(i-v)：

组分	b-4-i	b-4-ii	b-4-iii	b-4-iv	b-4-v
						NH₄NO₃	600-1800	900-1500	1080-1320	1200	1200±2
Ca(NO₃)₂	838-2515	1257-2096	1510-1844	1677	1677±2
						K₂SO₄	121-363	181-302	218-266	242	242±2
MgSO₄	270-830	410-690	500-610	555	555±2
						MnSO₄	12.60-38.00	19.00-31.70	22.80-27.80	25.35	25.35±.02
ZnSO₄	6.4-19.5	9.6-16.2	11.5-14.0	12.9	12.9±0.2
						CuSO₄	0.018-0.055	0.027-0.046	0.033-0.041	0.037	0.037±.002
CaCl₂	48-144	72-120	85-105	96	96±2
						H₃BO₃	3.0-9.0	4.0-8.0	5.0-7.0	6.2	6.2±0.2
Na₂MoO₄	0.12-0.36	0.18-0.31	.22-.28	0.25	0.25±.02
						KH₂PO₄	85-255	120-210	150-190	170	170±2
FeSO₄	27.0-84.0	40.0-70.0	50.0-60.0	55.7	55.7±0.2
						Na₂EDTA	37.0-112.0	55.0-94.0	67.0-82.0	74.6	74.6±0.2
Na₂H₂PO₄	42-128	63-106	75-95	85	85±2
						肌醇	100-300	150-250	180-220	200	200±2
硫胺	0.4-1.4	0.6-1.1	0.8-1.0	0.9	0.9±0.2
						吡哆醇	0.2-0.8	0.3-0.7	0.4-0.6	0.5	0.5±0.2
烟酸	0.2-0.8	0.3-0.7	0.4-0.6	0.5	0.5±0.2
						甘氨酸	1-3	1.5-2.5	1.75-2.25	2	2±1

培养基b-6(i-v)：

需要注意的是，对于这些培养基中的每一种，提供的均为其固体形式。每种培养基均可通过省略琼脂或角叉菜胶的方式转换为液体培养基，并且这些培养基的液体形式及其用途清楚的包含在本公开的范围内。

预期的苗数量在组织培养过程的不同阶段会有所不同，并且也可取决于竹的种。但是，通常来说，在过程开始时，增殖为1.0-2.0、1.0-3.0或2.0-3.0倍。一旦建立起来，增殖可取决于所选的容器。例如，增殖的范围可为每试管1-10或2-6棵植株；每罐1-15或4-9棵植株；每箱1-20或9-17棵植株；或者每缸1-50或20-35棵植株，但不限于此。数值1也包括在内，由于特定的种或特定的细胞培养物在增殖开始前需要更多的在阶段1或阶段2培养基中的时间。但是，通过使它们经历整个过程，即使不是所有，大多数也会在几个周期内就开始增殖。例如，一些细胞培养物只会在培养的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17或18个月后开始增殖。

本发明所公开的方法可以由单个外植体产生如下非限制性数量的苗：100、500、1,000；5,000；10,000、20,000、50,000、100,000、250,000、500,000、750,000、1,000,000或更多。

通过培养和传代培养进行的增殖之后，特定的植株苗可被选择用于转换到试管外条件。通常的，支持转换为试管外条件的培养基表现为阶段2、阶段3、阶段4或阶段5培养基。这种培养基的非限制性例子包括：

培养基Ech(i-v)：

组分	Ech-i	Ech-ii	Ech-iii	Ech-iv	Ech-v
						NH₄NO₃	825-2475	1237-2063	1485-1815	1650	1650±2
KNO₃	950-2850	1425-2375	1710-2090	1900	1900±2
						MgSO₄	185-555	275-465	330-410	370	370±2
MnSO₄	8.0-26.0	12.0-22.0	15.0-19.0	16.9	16.9±0.2
						ZnSO₄	4.0-12.0	6.0-10.0	8.0-9.0	8.6	8.6±0.2
CuSO₄	0.012-0.378	0.020-0.030	0.022-0.028	0.025	0.025±.002
						CaCl₂	220-660	330-350	400-480	440	440±2
Kl	0.40-1.25	0.60-1.05	0.75-0.90	0.83	0.83±.02
						CoCl₂	0.012-0.378	0.020-0.030	0.022-0.028	0.025	0.025±.002
H₃BO₃	3.0-9.0	4.0-8.0	5.0-7.0	6.2	6.2±0.2
						Na₂MoO₄	0.12-0.36	0.18-0.31	.22-.28	0.25	0.25±.02
KH₂PO₄	85-255	120-210	150-190	170	170±2
						FeSO₄	13.0-42.0	20.8-34.7	25.1-30.5	27.8	27.8±0.2
Na₂EDTA	18.6-56.0	28.0-46.6	33.6-41.0	37.3	37.3±0.2
						肌醇	50-150	75-125	90-110	100	100±2
硫胺	0.2-0.6	0.3-0.5	0.35-0.45	0.4	0.4±0.2
						吡哆醇	0.2-0.8	0.3-0.7	0.4-0.6	0.5	0.5±0.2
烟酸	0.2-0.8	0.3-0.7	0.4-0.6	0.5	0.5±0.2
						甘氨酸	1-3	1.5-2.5	1.75-2.25	2	2±1
NAA	0.05-0.15	0.07-0.12	0.09-0.11	0.1	0.1±0.02
						IAA	0.02-0.08	0.03-0.07	0.04-0.06	0.05	0.05±.02
糖g/L	15-45	22-37	27-33	30	30±2

组分	Ech-i	Ech-ii	Ech-iii	Ech-iv	Ech-v
						琼脂g/L	2.7-8.2	4.1-6.8	4.9-6.1	5.5	5.5±0.2

培养基BR-2(i-v)：

组分	BR-2-i	BR-2-ii	BR-2-iii	BR-2-iv	BR-2-v
						NH₄NO₃	700-2100	1050-1750	1260-1540	1400	1400±2
Ca(NO₃)₂	973-2919	1459-2433	1752-2140	1946	1946±2
						K₂SO₄	606.3-1818.8	909.4-1515.6	1091.5-1333.5	1212.5	1212.5±0.2
MgSO₄	370-1110	555-925	665-815	740	740±2
						MnSO₄	16.9-50.7	25.4-42.3	30.5-37.1	33.8	33.8±0.2
ZnSO₄	8.6-25.8	12.9-21.5	15.5-18.0	17.2	17.2±0.2
						CuSO₄	0.02-0.08	0.03-0.07	0.04-0.06	0.05	0.05±.02
CaCl₂	72-216	108-180	130-158	144	144±2
						H₃BO₃	3.0-9.0	4.0-8.0	5.0-7.0	6.2	6.2±0.2
Na₂MoO₄	0.12-0.36	0.18-0.31	.22-.28	0.25	0.25±.02
						KH₂PO₄	72-342	202-338	243-297	270	270±2
FeSO₄	16.68-50.04	25.02-41.70	30.06-36.66	33.36	33.36±.02
						Na₂EDTA	22.38-67.14	33.57-55.95	40.36-49.16	44.76	44.76±.02
肌醇	100-300	150-250	180-220	200	200±2
						硫胺	0.4-1.4	0.6-1.2	0.8-1.0	0.9	0.9±0.2
吡哆醇	0.2-0.8	0.3-0.7	0.4-0.6	0.5	0.5±0.2
						烟酸	0.2-0.8	0.3-0.7	0.4-0.6	0.5	0.5±0.2
甘氨酸	1-3	1.5-2.5	1.75-2.25	2	2±1
						核黄素	10-30	15-25	18-22	20	20±2
抗坏血酸	50-150	75-125	90-110	100	100±2
						NAA	0.2-0.8	0.3-0.7	0.4-0.6	0.5	0.5±0.2
糖g/L	15-45	22-37	27-33	30	30±2
						角叉菜胶g/L	4-12	6-10	7-9	8	8±2
炭g/L	150-450	220-370	270-330	300	300±2

培养基Amel(i-v)：

组分	Amel-i	Amel-ii	Amel-iii	Amel-iv	Amel-v
											±.002
KH₂PO₄	40-130	60-110	75-95	85	85±2
						FeSO₄	6.8-20.9	10.4-17.5	12.5-15.5	13.9	13.9±0.2
Na₂EDTA	9.32-27.98	13.95-23.35	16.85-20.45	18.65	18.65±.02
						Na₂H₂PO₄	40-130	60-110	75-95	85	85±2
肌醇	50-150	75-125	90-110	100	100±2
						硫胺	0.2-0.6	0.3-0.5	0.36-0.44	0.4	0.4±.2
吡哆醇	0.2-0.8	0.3-0.7	0.4-0.6	0.5	0.5±0.2
						烟酸	1-3	1.5-2.5	1.75-2.25	2	2±1
核黄素	2.5-7.5	3.7-6.2	4.5-5.5	5	5±2
						NAA	0.2-0.8	0.3-0.7	0.4-0.6	0.5	0.5±0.2
IBA	0.5-1.5	0.7-1.3	0.9-1.1	1	1±0.5
						糖g/L	15-45	22-37	27-33	30	30±2
琼脂g/L	1.5-4.5	2.0-4.0	2.5-3.5	3	3±2
						角叉菜胶g/L	2.5-7.5	3.7-6.2	4.5-5.5	5	5±2
炭g/L	2.5-7.5	3.7-6.2	4.5-5.5	5	5±2

在转换为试管外条件的过程中，苗和培养基可被放在可流入空气或不可流入空气的容器中。

在此处描述的方法、系统或试剂盒中，此处描述的每种培养基均可与各种其他培养基组合使用。此外，培养基可以以多于两种组合来组合(例如，一种试剂盒可包括2种不同的此处提供的培养基，或者包括3种不同的此处提供的培养基，或者包括多于3种不同的此处提供的培养基)。虽然本发明未详细描述每一种可能的组合，本领域普通技术人员应该理解本公开支持所有可能的组合。

转换为试管外条件之后，但在植株被放入土壤之前，或者暴露于不那么受到调节的培养条件之前，该植株可以经受处理，这些处理经设计以使其适应未经调节的生长环境。这是因为有些植物，在微培养时，并没有发育出足够的防御性结构，例如保护其免受普通环境条件影响的蜡状角质层。植物在被放入未经调节的环境之前所接受的处理可以包括，但不限于，使其适应湿度，使其适应温度的变化，以及使其适应风压。这些适应因素可以被逐渐引入和/或以交错的方式(staggered fashion)引入。

本发明所公开的适于使用的竹代表性属包括：酸竹属(Acidosasa)；悬竹属(Ampelocalamus)；青篱竹属(Arundinaria)；蓬莱竹属(Bambusa)；冷箭竹属(Bashania)；北风竹属(Borinda)；短穗竹属(Brachystachyum)；空竹属(Cephalostachyum)；寒竹属(Chimonobambusa)；香竹属(Chimonocalamus)；丘斯夸竹属(Chusquea)；慈竹属(Dendrocalamus)；藤竹属(Dinochloa)；镰序竹属(Drepanostachyum)；Eremitis；箭竹属(Fargesia)；贡山竹属(Gaoligongshania)；巨草竹属(Gigantochloa)；瓜多竹属(Guadua)；阴阳竹属(Hibanobambusa)；喜马拉雅筱竹属(Himalayacalamus)；箬竹属(Indocalamus)；大节竹属(Indosasa)；Lithachne；藤梨竹属(Melocalamus)；梨竹属(Melocanna)；月月竹属(Menstruocalamus)；狭叶竹属(Nastus)；新越竹属(Neohouzeaua)；Neololeba；群蕊竹属(Ochlandra)；少穗竹属(Oligostachyum)；欧美卡竹属(Olmeca)；墨西哥竹属(Otatea)；滇竹属(Oxytenanthera)；毛竹属(Phyllostachys)；大名竹属(Pleioblastus)；矢竹属(Pseudosasa)；Raddia；扇枝竹属(Rhipidocladum)；Sarocalamus；赤竹属(Sasa)；支笹属(Sasaella)；华箬竹属(Sasamorpha)；莎勒竹属(Schizostachyum)；业平竹属(Semiarundinaria)；倭竹属(Shibataea)；唐竹属(Sinobambusa )；筱竹属(Thamnocalamus)；廉序竹属(Thyrsostachys)；和玉山竹属(Yushania)

这些属中的种的非限制性的例子包括：

酸竹属：Edulis

悬竹属：Scandens

青篱竹属：Arundinaria appalachiana；Arundinaria funghomii；Arundinariagigantea；Arundinaria gigantea′Macon′；和Arundinaria Tecta

蓬莱竹属：arnhemica；balcooa；bam bos；basihirsuta；beecheyana；beecheyana var pubescens；blumeana；boniopsis；burmanica；chungii；chungiivar.Barbelatta；cornigera；dissimulator；dissimulator ′Albinodia′；distegia；dolichoclada；dolichoclada ′Stripe′；dolichomerithalla ′Green stripe′；dolichomerithalla ′Slverstripe′；emeiensis ′Chrysotrichus′；emeiensis′Flavidovirens′；emeiensis ′Viridiflavus′；eutuldoides；eutuldoides ′Viridivittata′；gibba；glaucophylla；intermedia；lako；lapidea；longispiculata；maculata；malingensis；multiplex；multiplex ′Alphonse Karr′；multiplex ′Fernleaf Stripestem′；multiplex ′Fernleaf；multiplex′Golden Goddess′；multiplex′Goldstripe′；multiplex′Midori Green′；multiplex′Riviereorum′；multiplex′Silverstripe′；multiplex′TinyFern Striped′；multiplex′Tiny Fern′；multiplex′Willowy′；nutans；odashimae；odashimae X B.Tuldoides；oldhamii；oliveriana；pachinensis；pervariabilis；pervariabilis′Viridistriatus′；rigida；rutila；sinospinosa；sp′Hirose′；sp.′CloneX′；sp.′Nana′；sp.′Polymorpha′；sp.′Richard Waldron′；stenostachya；suberecta；textilis；textilis′Dwarf；textilis′Kanapaha′；textilis′Maculata′；textilis′Mutabilis′；textilis′Scranton′；textilis var.Albostriata；textilis var.Glabra；textilis var.Gracilis；tulda；tulda′Striata′；Tuldoides；variostriata；ventricosa；ventricosa′Kimmei′；vulgaris；vulgaris′Vittata′；vulgaris′Wamin Striata′；和vulgaris′Wamin′

冷箭竹属：Fargesii；和Qingchengshanensis

北风竹属：KR 5288；Albocerea；Angustissima；Contracta；Frigidorum；Fungosa；fungosa′White Cloud′；Lushuiensis；Macclureana；Nujiangensis；Papyrifera；Perlonga；sp.′Muliensis′；和Yulongshanensis

短穗竹属：densiflorum ；和densiflorum var.villosum

空竹属：Pergracile；和Virgatum

寒竹属：macrophylla ′Intermedia′；Marmorea；marmorea′Variegata′；Quadrangularis；quadrangularis′Joseph de Jussieu′；quadrangularis′Suow′；quadrangularis′Yellow Groove′；Szechuanensis；和Tumidissinoda

香竹属：Pallens

丘斯夸竹属：Andina；Circinata；circinata′Chiapas′Coronalis；Culeou；culeou ′Argentina′；culeou′Caha Prieta′；culeou ′Hillier′s Form′；Cumingii；Delicatula；Foliosa；Galeottiana；Gigantea；Glauca；Liebmannii；Macrostachya；mimosa ssp.Australis；Montana；Muelleri；Pittieri；Simpliciflora；sp.′Chiconquiaco′；sp.′Las Vigas′；Subtilis；Sulcata；Tomentosa；Uliginosa；Valdiviensis；和Virgata

慈竹属：Asper；asper′Betung Hitam′；Brandisii；brandisii′Black′；brandisii(variegated)；Calostachyus；Giganteus；giganteus(Quail Clone)；giganteus(variegated)；Hamiltonii；Jianshuiensis；jianshuiensis(variegated)；Latiflorus；latiflorus′Mei-nung′；Membranaceus；Minor；minor′Amoenus′；Sikkimensis；Sinicus；sp.′Maroochy′；sp.′Parker′s Giant′；Strictus；Validus；和Yunnanicus

藤竹属：Malayana；和Scandens

镰序竹属：falcatum var.sengteeanum；和Khasianum

Eremitis：Eremitis

箭竹属：Adpressa；Apircirubens；apircirubens′White Dragon′；Denudata；dracocephala ′Rufa′；Murieliae；murieliae′SABE 939′；murieliae′Vampire′；murieliae(next generation seedlings)；Nitida；nitid′Jiuzhaigou′；Robusta；robusta′Campbell′；robusta′Wolong′；sp.′Scabrida′；和Utilis

贡山竹属：Gaoligongshania and Megalothyrsa

巨草竹属：Hitam Hijau；Albociliata；Apus；Atroviolacea；Atter；Hasskarliana；Levis；Luteostriata；Maxima；Pseudoarundinacea；Ridleyi；Robusta；sp′Rachel Carson′；sp.′Bali White Stripe′；sp.′Sumatra 3751′；sp.′Widjaja 3827′；和Wrayii

瓜多竹属：Amplexifolia；Angustifolia；angustifolia′Bicolor′；angustifolia′Less Thorny′；Chacoensis；Longifolia；Paniculata；sp.′Aureocaulis′；和Velutina

阴阳竹属：Tranquillans；和tranquillans′Shiroshima′

喜马拉雅筱竹属：Falconeri；falconeri′Damarapa′；Hookerianus；Planatus；和Porcatus

箬竹属：Cordatus；Latifolius；latifolius′Hopei′；Longiauritus；sp.′Hamadae′；sp.′Solidus′；Tessellatus；和Victorialis

大节竹属：Crassiflora；和Gigantea

Lithachne：Humilis

藤梨竹属：Arrectus

梨竹属：Baccifera

月月竹属：Sichuanensis

狭叶竹属：Elatus

新越竹属：Mekongensis

Neololeba：Atra

群蕊竹属：Stridula

少穗竹属：Glabrescens

欧美卡竹属：Recta

墨西哥竹属：acuminata′Michoacan′；acuminata ssp.Acuminata；acuminatassp.Aztecorum；acuminata ssp.aztecorum′Dwarf；Fimbriata；和glauca′MayanSilver′

滇竹属：Abyssinica；和Braunii

毛竹属：Acuta；Angusta；Arcana；arcana′Luteosulcata′；Atrovaginata；Aurea；aurea′Albovariegata′；aurea′Dr Don′；aurea′Flavescens-inversa′；aurea′Holochrysa′；aurea′Koi′；aurea′Takemurai′；Aureosulcata；aureosulcata″Alata′；aureosulcata′Aureocaulis′；aureosulcata′Harbin Inversa′；aureosulcata′Harbin′；aureosulcata′Pekinensis′；aureosulcata′Spectabilis′；Aurita；Bambusoides；bambusoides′Alovariegata′；bambusoides′Castillon Inversa′；bambusoides′Castillon′；bambusoides′Golden Dwarf；bambusoides ′Job′s Spot′；bambusoides′Kawadana′；bambusoides ′Marliac′；bambusoides′Rib Leaf；bambusoides′Richard Haubrich′；bambusoides′Slender Crookstem′；bambusoides′Subvariegata′；bambusoides′Tanakae′；bambusoides′White Crookstem′；Bissetii；bissetii′Dwarf；Dulcis；Edulis；edulis′Anderson′；edulis′Bicolor′；edulis′Goldstripe′；edulis′Heterocycla′；Elegans；Flexuosa；flexuosa′Kimmei′；Glauca；glauca ′Notso′；glauca ′Yunzhu′；Heteroclada；heteroclada′Purpurata′；heteroclada′Solidstem′；Hispida；Humilis；Incarnata；Iridescens；Kwangsiensis；Lithophila；Lofushanensis；Makinoi；mannii′Decora′；mannii′Mannii′；Meyeri；Nidularia；nidularia′Farcta′；nidularia′Smoothsheath′；Nigra；nigra′Bory′；nigra′Daikokuchiku′；nigra ′Hale′；nigra′Henon′；nigra′Megurochiku′；nigra′Mejiro′；nigra′Muchisasa′；nigra′Othello′；nigra′Punctata′；nigra′Shimadake′；nigra Tosaensis′；Nuda；nuda′Localis′；Parvifolia；Platyglossa；Praecox；praecox′Prevernalis′；praecox′Viridisulcata′；Prominens；Propinqua；propinqua′Beijing′；Robustiramea ；Rubromarginata；Stimulosa；Varioauriculata；Violascens；Viridiglaucescens；Viridis；viridis ′Houzeau′；viridis′Robert Young′；Vivax；vivax′Aureocaulis′；vivax′Black Spot′；vivax′Huangwenzhu Inversa′；和vivax′Huangwenzhu′

大名竹属：Akebono；Amarus；Argenteostriatus；Chino；chino′Angustifolia′；chino′Elegantissimus′；chino′Kimmei′；chino′Murakamiansus′；chino′VaginatusVariegatus′；Distichus；distichus′Mini′；Fortunei；Gauntlettii；Gramineus；gramineus′Monstrispiralis′；Hindsii；Humilis；humilis′Albovariegatus′；humilis′Variegatus′；Juxianensis；Kodzumae；Kongosanensis；kongosanensis′Akibensis′；kongosanensis′Aureostriatus′；Linearis；linearis′Nana′；Nagashima；Oleosus；Pygmaeus；pygmaeus′Greenstripe′；pygmaeus′Ramosissimus′；shibuyanus′Tsuboi′；Simonii ；simonii′Variegatus′；Viridistriatus；viridistriatus′Chrysophyllus′；和Xestrophyllus

矢竹属：Amabilis；Cantori；Guanxianensis；Japonica；japonica′Akebono′；japonica′Akebono-suji′；japonica′Pleioblastoides′；japonica′Tsutsumiana′；japonica′Variegata′；Longiligula；Owatarii；Usawai；和ViridulaRaddia：Brasiliensis；和Distichophylla

扇枝竹属：Pittieri；和Racem

Sarocalamus：Faberi；和Fangianus

赤竹属：Cernua；Gracillima；Hayatae；Kagamiana；kagamiana ssp.Yoshinoi；Kurilensis；kurilensis′Shimofuri′；Megalophylla；Nagimontana；nipponica(hort.)；Oshidensis；Palmata；Senanensis；Shimidzuana；sp.Tsuboiana；和Veitchii

支笹属：Bitchuensis；hidaensis′muraii′；Masamuneana；masamuneana′Albostriata′；masamuneana′Aureostriata′；Ramosa；Sasakiana；和Shiobarensis

华箬竹属：Borealis

莎勒竹属：Brachycladum；brachycladum′Bali Kuning′；Caudatum；Glaucifolium；Jaculans；Lima；和sp.′Murray Island′

业平竹属：Fastuosa；fastuosa′Viridis′；Fortis；Kagamiana；Lubrica；Makinoi；Okuboi；sp.Maruyamana；sp.′Korea′；Yashadake；yashadake′Kimmei′；和yashadake′kimmei inversa′

倭竹属：Chinensis；Kumasaca；kumasaca′Albostriata′；kumasaca′Aureostriata′；Lancifolia；和Nanpingensis

唐竹属：Gigantea；Intermedia；Tootsik；和tootsik′Albostriata′

筱竹属：aristatus′Aristatus hort.US′；Crassinodus；crassinodus′KewBeauty′；crassinodus ′Mendocino′；crassinodus′Merlyn′；nepalensis′Nyalam′；Spathiflorus；和Tessellatus

廉序竹属：Oliveri；和Siamensis

玉山竹属：Alpina；Anceps；anceps ′Pitt White ′；Boliana；Brevipaniculata；Exilis；Maculata；和maling

尤其有用的种包括：edulis；scandens；ArundinariaGigantea；ArundinariaTecta；BambusaBalcooa；BambusaBambos；绿竹(BambusaOldhamii)；青皮竹(BambusaTextilis)；马甲竹(BambusaTulda)；BashaniaFargesii；Brachystachyum Densiflorum；Chusquea Gigantea；马来甜龙竹(DendrocalamusAsper)；甜龙竹(Dendrocalamus Brandisii)；龙竹(Dendrocalamus Giganteus)；版纳甜龙竹(Dendrocalamus Hamiltonii)；Dendrocalamus Strictus；缺苞箭竹(Fargesia Denudata)；Fargesiadracocephala′Rula′；Fargesia Murieliae；华西箭竹(Fargesia Nitida)；拐棍竹(Fargesia Robusta)；拐棍竹′卧龙′；Fargesiasp.′Scabrida′；GuaduaAmplexifolia；从瓜多竹(Guadua Paniculata)；Himalayacalamus Falconeri；箬竹(Indocalamus Tessellatus)；Ochlandra Stridula；Otatea acuminata ssp.Aztecorum；乌芽竹(Phyllostachys Atrovaginata)；人面竹(Phyllostachys Aurea)；桂竹(Phyllostachys Bambusoides)；蓉城竹(PhyllostachysBissetii)；毛竹(Phyllostachys Edulis)；Phyllostachys edulis ′Heterocycla′；淡竹(Phyllostachys Glauca)；红哺鸡竹(Phyllostachys Iridescens)；假毛竹(Phyllostachys Kwangsiensis)；篌竹(Phyllostachys Nidularia)；紫竹(Phyllostachys Nigra)；毛金竹(Phyllostachys nigra ′Henon′)；灰竹(PhyllostachysNuda)；安吉金竹(Phyllostachys Parvifolia)；早竹(Phyllostachys Praecox)；早园竹(Phyllostachys Propinqua)；刚竹(Phyllostachys Viridis)；乌哺鸡竹(Phyllostachys Vivax)；Pleioblastus Distichus；云锦苦竹(Pleioblastus Fortunei)；Pleioblastus Linearis；下矢竹(Pseudosasa Japonica)；Sasa Kurilensis；SasaVeitchii；Sasaella Masamuneana；Sasamorpha Borealis；SchizostachyumBrachycladum；Schizostachyum brachycladum′Bali Kuning′；SchizostachyumCaudatum；Schizostachyum Glaucifolium；Schizostachyum Jaculans；Schizostachyum Lima；Schizostachyum sp.′Murray Island′；SemiarundinariaFastuosa；Semiarundinaria Yashadake；Shibataea Kumasaca；SinobambusaGigantea；Thamnocalamus Crassinodus；Thamnocalamus Tessellatus；YushaniaAlpina；和Yushania maling.

为本领域技术人员所理解，竹的许多物种具有不同的常用名。相应的，提供如下的命名法和语言对照。

中文名称和日文名称

英文名

通过本发明描述和公开的培养基、系统和方法，本领域技术人员能够实现竹的滚动组织培养。如此处所使用，“滚动组织培养”意思是：通过持续分离并增殖苗，增殖过程可以基本上无限继续下去。在一个实施方案中，一个苗放入一个试管中，该苗增殖为许多额外的苗。增殖后，分离每个苗或者苗的亚群，并各自置入后续的试管中用于进一步增殖。该过程可以继续进行不同的次数，一些或所有的苗可以由增殖过程中移出，并转换为试管外条件。通过无限制的持续进行，这意味着可以重复进行5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45等等天数的增殖循环而无需启用新的外植体，持续至少1个月、至少3个月、至少6个月、至少9个月、至少12个月、至少15个月、至少18个月、至少21个月、至少24个月或至少36个月。增殖周期中的特定天数范围包括：10-120天；10-100天；10-80天；10-60天；10-42天；10-40天；10-20天；14-120天；14-90天；14-70天；14-50；14-42天；14-30天；14-21天；12-42天；20-60天；10-15天；14-20天；14-18天等。

这些培养基系统和方法可以被包装成和/或描述成各种试剂盒。试剂盒可以包括，但不限于，在包装或容器中以下的一种或多种：(1)一种或多种培养基；和(2)一个或多个来自竹的一个或多个种的外植体。在某些非限制性的实施方案中，该培养基可以是b-9-i培养基、b-9-ii培养基、b-9-iii培养基、b-9-iv培养基、b-9-v培养基、CW2-i培养基、CW2-ii培养基、CW2-iii培养基、CW2-iv培养基、CW2-v培养基、b-10-i培养基、b-10-ii培养基、b-10-iii培养基、b-10-iv培养基、b-10-v培养基、b-11-i培养基、b-11-ii培养基、b-11-iii培养基、b-11-iv培养基、b-11-v培养基、b-12c-i培养基、b-12c-ii培养基、b-12c-iii培养基、b-12c-iv培养基、b-12c-v培养基、b-1-i培养基、b-1-ii培养基、b-1-iii培养基、b-1-iv培养基、b-1-v培养基、b-4-i培养基、b-4-ii培养基、b-4-iii培养基、b-4-iv培养基、b-4-v培养基、b-6-i培养基、b-6-ii培养基、b-6-iii培养基、b-6-iv培养基、b-6-v培养基、CW1-i培养基、CW1-ii培养基、CW1-iii培养基、CW1-iv培养基、CW1-v培养基、CW3-i培养基、CW3-ii培养基、CW3-iii培养基、CW3-iv培养基、CW3-v培养基、CW4-i培养基、CW4-ii培养基、CW4-iii培养基、CW4-iv培养基、CW4-v培养基、CW5-i培养基、CW5-ii培养基、CW5-iii培养基、CW5-iv培养基、CW5-v培养基、CW6-i培养基、CW6-ii培养基、CW6-iii培养基、CW6-iv培养基、CW6-v培养基、Br-2-i培养基、Br-2-ii培养基、Br-2-iii培养基、Br-2-iv培养基、Ech-i培养基、Ech-ii培养基、Ech-iii培养基、Ech-iv、Amel-i培养基、Amel-ii培养基、Amel-iii培养基、Amel-iv培养基或Amel-v。在另一个实施方案中，该试剂盒可以包含用于组织培养过程的一个或多个容器，包括但不限于，试管、罐、箱或缸。在另一个实施方案中，该试剂盒包含竹组织培养用说明书。在另一个实施方案中，该试剂盒包含上述的组合。试剂盒中的组分可以存在于相同或不同的容器中。此外，当提供一种试剂盒时，不同的培养基组分可以包装在单独的容器中，并在使用前立即混合。这样分开包装组分可以允许长期贮存而不丧失活性组分的功能。或者，培养基也可以以预先混合的方式提供。

在试剂盒中包括的成分可以提供在任何种类的容器中，以便使得不同成分的活性得以保留，并且不被容器的材料所吸附或改变。例如，密封玻璃安瓿可以包含已经在中性、不反应气体(例如氮气)中包装的成分。安瓿可以由任何合适的材料组成，例如玻璃，有机聚合物，如聚碳酸酯、聚苯乙烯等，陶瓷、金属或通常用于盛放类似成分的任何其他材料。其他合适容器的例子包括：可以由与安瓿相似的物质制成的简易瓶，和可以包含衬以金属薄片的内层(例如铝或合金)的封套。其他容器包括试管、小瓶、烧瓶、瓶、注射器或类似的。容器可具有无菌的入口，例如具有可以插入的塞子的瓶。其他容器可具有通过可容易地移除的膜隔开的两个隔室，移除膜之后能够使成分混合。可移除的膜包括玻璃、塑料、橡胶等等。

如文所示，试剂盒可与说明材料一起提供。说明书可打印到纸上或其他基底上，和/或可以作为电子可读介质的形式提供，例如软盘、CD光盘、DVD光盘、Zip盘、录像带、录音带等。详细的说明书不一定要与试剂盒在物理上相关联；取而代之，用户可被指引到由该试剂盒的生产商或销售商指定的互联网站，或者作为电子邮件提供。

公开的实施方案的优点之一在于：该方法与先前的方法相比更加鲁棒，生产植物不需要使用现有技术的方法生产的那些所需要的特殊处理。例如，本发明公开的方法不需要使用种子或花序来启动种植；不需要挑选有疾病的起始植株(例如那些表现为扫帚病或小叶病症状的植株)；不需要使用体细胞胚胎发生且不利用假小穗。为了成功进行组织培养后的生长，生产的植株不需要直接在盆上浇水，而是通过在顶部浇水就能保持茁壮，并且不需要在转移到温室或其他种植条件之前对光照强度和湿度条件进行多次调整。这些相对于已有方法的改进提供了与所生产的植物的健康和生长加工效率有关的更进一步的好处。

本发明的公开所涵盖的非限制性实施方案包括(阶段1、阶段2、阶段3等培养基在本文他处定义)：

I.下列物种：Arundinaria gigantea；Bambusa balcoa；龙头竹(Bambusavulgaris)；龙头竹′Vitatta′；绿竹(Bambusa Oldhamii)；马甲竹(Bambusa tulda)；勃氏甜龙竹(endrocalamus brandesii)；马来甜龙竹(Dendrocalamus asper)；版纳甜龙竹(Dendrocalamus hamiltoni)；龙竹(Dendrocalamus giganteus)；黄竹(Dendrocalamus membranaceus)；牡竹(Dendrocalamus strictus)；Gigantochloaaspera；Gigantochloa scortechini；瓜多竹(Guadua culeata)；瓜多竹′尼加拉瓜′；Guadua amplexifolia；狭叶瓜多竹(Guadua angustifolia)；Guadua angustofoliabi-color；从瓜多竹(Guadua paniculata)；Melocanna bambusoides；eohouzeauadullooa(长穗竹属(Teinostachyum))；Ochlandra travancorica；毛竹(Phyllostachysedulis)′毛竹′；紫竹(Phyllostachys nigra)；毛金竹；Schizostachyum lumampao。

II.阶段1培养基：培养基b-12-c-v培养基或b-10-v培养基；

III.阶段2培养基：CW1-v培养基；CW2-v培养基；CW3-v培养基；CW4-v培养基；CW5-v培养基；或CW6-v培养基，10-120天的周期；和

IV.阶段3培养基：Br-2-v培养基；Ech-v培养基或Amel-v培养基。

更为特别的，可以使用下列实施方案(阶段1、阶段2、阶段3等培养基在本文他处定义)：

由一株3月龄到3岁龄的竹植株开始，可以用茎干上侧生苗刚刚突破鞘的节(node)作为外植体。每个节部分可被切割成3-5毫米的部分并保持苗的完整。外鞘可以剥去并丢弃，并将剩余的节部分的块放入10％的漂白溶液中，终浓度为0.6％氢氯化钠。漂白溶液中的外植体可被放到实验室用旋转器-可调速的巴恩斯特德/Lab line定轨摇床(型号KS260)振动台上1小时，每分钟6-9转。外植体可随后放入1％漂白溶液中，终浓度为0.6％氢氯化钠，随后放回到振动台上30分钟。然后可以重复该1％漂白溶液步骤。

单独的外植体可随后被放到试管中的阶段1培养基(15-25ml)上，试管可被放入可调节的洁净的生长室中，以65℉-70℉的温度和200-500英尺烛光的全谱光水平。初始阶段1培养基可以是pH为5.7的b-12c-iv。外植体可随后每10-120天(通常是每21天)被转移至新鲜的b-12c-iv培养基中，其间丢弃被污染的试管。被污染的试管可通过琼脂的细菌性变色或通过可见的表面污染来鉴别。这些外植体可以在b-12c-iv培养基上放置3-4个10-120天的周期(通常是21天的周期)。如果发生了增殖，外植体随后可在第三个周期后被取出培养基。如果不发生增殖或增殖未达到显著的程度，外植体可以留在培养基上进行第四个周期。

活的苗随后可被转移到阶段2培养基上，例如b-9、CW1、CW2、CW3、CW4、CW5、CW6或b-6，pH为5.7。培养物可留在该阶段2培养基上直到通过分离到新的试管中并进一步扩增而获得了预期数量的苗。通常，时间范围包括10-120天的周期(通常14-21天的周期)，其间培养物被用来在阶段2培养基中进行另一轮的增殖或转换到阶段3培养基中进行进一步增殖，阶段3培养基例如，b-10-iv或b-11-iv，pH是5.7。每个增殖周期中每个试管可以获得1-10个苗。

将苗从增殖过程中移出后，苗可被转移到小型组织培养箱(称为“magenta箱”)中放置10-120天(通常14-21天)，其中包含阶段3或阶段4培养基，在这个例子中，pH为5.7的BR-2培养基中培养10-120天(通常14-21天)或pH为5.7的Amel培养基中培养10-120天(通常14-21天)。

也可以使用下列步骤(阶段1、阶段2、阶段3等培养基在本文他处定义)：

由一株3月龄到3岁龄的竹植株开始，可以用茎干上侧生苗刚刚突破鞘的节作为外植体。每个节部分可被切割成3-5毫米的部分并保持苗的完整。某些外植体，包括取自1岁龄或更大的茎干的外植体，可以通过将它们在有70％异丙醇的罐中震荡3秒，随后再将它们在自来水下冲洗1分钟进行预清洗。其他外植体不用预清洗。

外鞘可以剥去并丢弃，并将剩余的节部分的块放入10％的漂白溶液中。漂白溶液中的外植体可被放到实验室用旋转器-可调速的巴恩斯特德/Lab line定轨摇床(型号KS260)振动台上1小时，每分钟6-9转。对于某些外植体来说，包括那些取自1岁龄或更大的茎干的外植体，该步骤可修改为向10％的漂白溶液添加几滴Tween 20并浸泡该外植体45分钟而不是1小时。随后外植体可被放入1％的漂白溶液中，并放回振动台上振动30分钟。然后可以重复该1％漂白溶液步骤。

单独的外植体可随后被放到试管中的阶段1培养基(15-25ml)上，试管可被放入可调节的洁净的生长室中，以65℉-70℉的温度和200-500英尺烛光的全谱光水平。阶段1培养基可以是pH为5.7的b-12c-iv培养基。每10-120天(通常是每21天)，外植体可被转入新鲜的b-12c-iv培养基，并丢弃污染的试管。这些外植体可以在b-12c-iv培养基上保留2个10-120天的周期(通常是21天的周期)。在周期之间，过剩的鞘可被去除。在转到第3个周期时，外植体可被转移到阶段2培养基上，在这个实例当中，为b-12-c补充7g/L角叉菜胶而不是上述提供的5.5g/L。第三个周期之后，外植体可被清洁。外植体可被保留在补充了7g/L角叉菜胶而不是上述提供的5.5g/L的b-12-c上进行10-120天的周期(通常是21天的周期)，直到观察到多个苗。观察到多个苗可发生在3-15个月内。

一旦外植体展现出多个苗，其可以保留在阶段2培养基上，也可以转移至阶段3培养基。非限制性的阶段3培养基包括：b-9培养基、CW1培养基、CW2培养基、CW3培养基、CW4培养基、CW5培养基、CW6培养基或b-6培养基，pH为5.7。培养物可保留在阶段2或阶段3培养基上，直到通过分离到新的试管并进一步扩增获得了期望数量的苗。通常，时间范围包括10-120天的周期(通常是21天的周期)，周期之间可使培养物经历另一轮增殖或转换到阶段3或阶段4培养基，例如pH是5.7的BR-2培养基中在″magenta箱″中培养10-120天(通常是21天)，或pH是5.7的Amel培养基中培养10-120天(通常是14-21天)。

在甚至更多特定的非限制性的实施方案中，可以根据第53页第13行至本页第10行的描述将下述种在下述培养基中进行微繁殖，通常是阶段2培养基，pH是5.5-5.7：

Arundinaria gigantea：b-9-v、CW1-v、CW3-v、CW4-v、CW5-v或CW6-v；

Bambusa balcoa：b-9-v、CW1-v、CW3-v、CW4-v、CW5-v或CW6-v；

龙头竹(Bambusa vulgaris)：b-9-v、CW1-v、CW3-v、CW4-v、CW5-v或CW6-v；

龙头竹′Vitatta′：b-9-v、CW1-v、CW3-v、CW4-v、CW5-v或CW6-v；

绿竹(Bambusa Oldhamii)：b-9-v、CW1-v、CW3-v、CW4-v、CW5-v或CW6-v；

马甲竹(Bambusa tulda)：b-9-v、CW1-v、CW3-v、CW4-v、CW5-v或CW6-v；

勃氏甜龙竹(Dendrocalamus brandesii)：b-9-v、CW1-v、CW3-v、CW4-v、CW5-v或CW6-v；

马来甜龙竹(Dendrocalamus asper)：b-9-v、CW 1-v、CW3-v、CW4-v、CW5-v或CW6-v；

版纳甜龙竹(Dendrocalamus hamiltoni)：b-9-v、CW1-v、CW3-v、CW4-v、CW5-v或CW6-v；

龙竹(Dendrocalamus giganteus)：b-9-v、CW1-v、CW3-v、CW4-v、CW5-v或CW6-v；

黄竹(Dendrocalamus membranaceus)：b-9-v、CW1-v、CW3-v、CW4-v、CW5-v或CW6-v；

牡竹(Dendrocalamus strictus)：b-9-v、CW1-v、CW3-v、CW4-v、CW5-v或CW6-v；

Gigantochloa aspera：b-9-v、CW1-v、CW3-v、CW4-v、CW5-v或CW6-v；

Gigantochloa scortechini：b-9-v、CW1-v、CW3-v、CW4-v、CW5-v或CW6-v；

瓜多竹(Guaduaculeata)：b-9-v、CW1-v、CW3-v、CW4-v、CW5-v或CW6-v；

瓜多竹′尼加拉瓜′：b-9-v、CW1-v、CW3-v、CW4-v、CW5-v或CW6-v；

Guadua amplexifolia：b-9-v、CW1-v、CW3-v、CW4-v、CW5-v或CW6-v；

狭叶瓜多竹(Guadua angustifolia)：b-9-v、CW1-v、CW3-v、CW4-v、CW5-v或CW6-v；

Guadua angustofolia bi-color：b-9-v、CW1-v、CW3-v、CW4-v、CW5-v或CW6-v；

从瓜多竹(Guadua paniculata)：b-9-v、CW1-v、CW3-v、CW4-v、CW5-v或CW6-v；

Melocanna bambusoides：b-9-v、CW1-v、CW3-v、CW4-v、CW5-v或CW6-v；

Neohouzeaua dullooa(长穗竹属(Teinostachyum))：b-9-v、CW1-v、CW3-v、CW4-v、CW5-V或CW6-v；

Ochlandra travancorica：b-9-v、CW1-v、CW3-v、CW4-v、CW5-v或CW6-v；

毛竹(Phyllostachys edulis)′Moso′：b-9-v、CW1-v、CW3-v、CW4-v、CW5-v或CW6-v；

紫竹(Phyllostachys nigra)：b-9-v、CW1-v、CW3-V、CW4-V、CW5-V或CW6-v；

毛金竹(Phyllostachys nigra′Henon′)：b-9-v、CW1-v、CW3-v、CW4-v、CW5-v或CW6-v；

Schizostachyum lumampao：b-9-v、CW1-v、CW3-v、CW4-v、CW5-v或CW6-V。

如前所述，根据本发明所描述的方法生产的竹具有许多用途。除了在他处描述的那些用途或者作为那些用途的补充，根据本发明所公开的培养基、系统或方法所生产的竹的用途和产品的非限制性实例包括：

示例性纸张类型：不含木浆纸(freesheet)；原纸(stock)；无酸纸；A4；纸板；胶纸(bond)；书；图案纸(bristol)；无碳纸；目录；带涂层的(coated)；封面；双面胶(dual-purpose bond)；双面纸(duplex)；低光泽低平滑度纸(Englishfinish)；等效纸(equivalent)；精细纸(fine)；不含木浆纸；长纹纸(grain long)；短纹纸(grain short)；磨木浆(groundwood)；牛皮纸；轻磅纸(lightweight)；白报纸(news print)；出版用纸(publishing)；钱币纸(rag)；回收纸(recycled)；标签(tag)；无涂层的(uncoated)；空白纸带(virgin)；吸附纸(absorbent)；酸性纸；相册；蛋白纸(albumin)；碱性纸(alkaline)；钞票纸(bank note)；薄纸(tissue)；厕纸(toilet)；纸巾纸(towel)；绒毛纸(fluff)；卡片纸(cardstock)；一次用碳纸(OTC)；光学字符识别纸(OCR)；薄绵纸(tissue overlay)；和餐巾纸(napkin)。

示例性纸浆类型：风干纸浆；西班牙草浆(alpha)；竹浆；重硫酸盐浆；亚硫酸盐浆；漂白浆；化学纤维素(溶解)浆；绒毛浆；草料(fodder；不含木纸浆(free )；完全漂白浆；硬纸浆；高α-纤维素浆；磨木浆；热磨木浆；黄麻浆(jute)；结筛浆(knotter)；牛皮纸浆；长纤维浆；成捆草浆(baled)；包金箔的纸浆(rolled)；市场纸浆(market)；非木材纸浆；木板纸浆；加压磨木浆；碎布浆(rag)；回收浆(recycled)；加强筋浆(reinforcement)；二次纸浆(secondary)；半碱性浆；半漂白浆；半化学浆；短纤维浆；苏打浆(soda)；特质的浆(specialty)；硫酸盐浆；热化学浆；未漂白浆；纤维胶浆(viscose)；和木浆。

板材/器皿：挂面纸板(linerboard)；盒纸板(containerboard)；硬纸板(cardboard)；旧瓦楞纸箱(old corrugated containers；OCC)；和板纸。

木材：建筑用木板(包括建筑用合板(structural plywood)；定向链板(oriented strand board)；建筑用复合板(structural composite panel))；木料胶合板(glued laminated timber)；建筑用复合木材(包括单板层积材(laminated veneerlumber)；平行拼合條木(parallel strand lumber)；定向刨花板木材(oriented strandlumber))；预制木I-Joists；地板接缝(floor joints)；铁路枕木(railroad ties )；木地板(flooring)；以及其复合材料(composites)(包括汽车用、航空用、乐器用).

纺织材料：原料；长丝纱(filament yarn)；针织品(knitted fabric)；编织品(knitting)；窄幅织物(narrow widthfabric)；无纺布(non woven fabric)；短纤纱(spun yarn)；机织织物(woven fabric)；粘胶人造丝(viscose rayon)；棉絮(batting)；轧棉纤维(ginned fiber)；和布(cloth)。

纺织品：衣物；毛巾；床单/被褥；枕头；窗帘

食品来源：笋；和动物和人类食物消费用任何直接产品或副产品。

消费品：动物饲料；地毯；灯泡；家用清洁产品；筷子和牙签；清洁扫帚；自行车；轮椅；钓竿；啤酒；饮料酒；药物；化妆品；皂/洗发剂；厨房用具；手工艺品；家具；营养制品；纸杯；纸板；和尿布。

能源和生物能源：炭；绝缘体；原料；和生物质。

本发明提供以下非限制性的例子。在所有实例当中，在支持转换到试管外环境的培养基上的时间可以在能透入空气或不能透入空气的容器中。所描述的培养基以上面提供的它们的固体形式加以利用，除非另外注明其为液体。

实施例

实施例1.蓉城竹(Phyllostachys bissetti)

由一株3月龄到3岁龄的竹植株开始，用茎干上侧生苗刚刚突破鞘的节作为外植体。每个节部分被切割成3-5毫米的部分并保持苗的完整。外鞘被剥去并丢弃，并将剩余的节部分的块放入10％的漂白溶液中，终浓度为0.6％氢氯化钠。漂白溶液中的外植体被放到实验室用旋转器-可调速的巴恩斯特德/Lab line定轨摇床(型号KS260)振动台上1小时，每分钟6-9转。外植体随后放入1％漂白溶液中，终浓度为0.6％氢氯化钠，随后放回到振动台上30分钟。然后重复该1％漂白溶液步骤。

单独的外植体随后被放到试管中的阶段1培养基(15-25ml)上，试管被放入可调节的洁净的生长室中，以65℉-70℉的温度和200-500英尺烛光的全谱光水平。在本实施例中初始阶段1培养基是pH为5.7的b-12c-iv。外植体随后每10-120天(通常是每21天)被转移至新鲜的b-12c-iv培养基中，其间丢弃被污染的试管。被污染的试管通过琼脂的细菌性变色或通过可见的表面污染来鉴别。这些外植体在b-12c-iv培养基上放置3-4个10-120天的周期(通常是21天的周期)。如果发生了增殖，外植体随后在第三个周期后被取出培养基。如果不发生增殖或增殖未达到显著的程度，外植体留在培养基上进行第四个周期。

活的苗随后被转移到阶段2培养基上，在本实施例中，即b-9-iv，pH为5.7。培养物留在b-9-iv培养基上直到通过分离到新的试管中并进一步扩增而获得了预期数量的苗。通常，时间范围包括10-120天的周期(通常14-21天的周期)，其间培养物被用来在阶段2培养基中进行另一轮的增殖或转换到阶段3培养基中进行进一步增殖，在本实施例中，阶段3培养基为b-10-iv，pH是5.7。每个增殖周期中每个试管可以获得1-10个苗。

将苗从增殖过程中移出后，苗被转移到小型组织培养箱(称为“magenta箱”)中放置10-120天(通常14-21天)，其中包含阶段3或阶段4培养基，在本实施例中，是pH为5.7的BR-2-iv培养基中培养10-120天(通常14-21天)。

实施例2.缺苞箭竹(Fargesia denudate)

在缺苞箭竹的实施例中，如实施例1一样选择外植体并进行灭菌。

外植体随后被转入包含阶段1培养基的罐中，在本实施例中，是如实施例1所述的b-12c-iv(液态；30-40ml)培养基，只是使用了罐。第三个周期之后，如果发生了增殖，将外植体移出培养基。如果未发生增殖或增殖未达到显著的程度，将外植体保留在培养基上进行第四个周期。丢弃被污染的试管。

随后培养物被转移到阶段2培养基上，在本实施例中，即罐中的b-11-iv(液态)，将罐放于旋转架上，旋转架提供每分钟6-9转。该培养物保留在pH为5.7的b-11-iv培养基上10-120天的周期(通常为14天的周期)，直到通过分离到新的罐中并进一步增殖而获得了预期数量的苗。每个增殖周期中每罐获得了1-15个苗。随后将苗置于阶段3培养基中，在本实施例中，是pH为6的Ech-iv，培养10-120天(通常是14-21天)。

实施例3.云锦苦竹(Pleioblastus fortunei)

在云锦苦竹的实施例中，如实施例1一样选择外植体并进行灭菌。外植体随后被转入包含阶段1培养基的试管中，在本实施例中，阶段1培养基为b-12c-iv，也如实施例1所述。随后苗被转移到阶段2培养基上，在本实施例中，是放在magenta箱(40-50ml)中的b-9-iv。使其保留在b-9-iv培养基上10-120天的周期(通常为14天的周期)，直到通过分离到新的箱中并进一步扩增而获得了预期数量的苗。每个增殖周期每箱获得了1-20个苗。随后将苗置于阶段3培养基中，在本实施例中是BR-2-iv，培养10-120天(通常是14-21天)。

实施例4.Sasa Veitchii

在Sasa Veitchii的实施例中，如实施例1一样选择外植体并进行灭菌。

外植体随后被转入包含阶段1培养基的试管中，在本实施例中，阶段1培养基是b-12c-iv，也如实施例1所述。随后苗被转移到阶段2培养基，在本实施例中是pH为5.5的b-1-iv，培养10-120天的周期(通常是21天的周期)，直到通过分离到新的试管中并进一步扩增而获得了预期数量的苗。每个增殖周期中每个试管获得了1-10个苗。随后将苗置于阶段3培养基中，在本实施例中，是pH为5.7的BR-2-iv，培养14-21天。

实施例5.Pleioblastus viridistriatus和Thamnocalamus crassinodus

在Pleioblastus viridistriatus和Thamnocalamus crassinodus的实施例中，如实施例1一样选择外植体并进行灭菌。外植体随后被转入包含阶段1培养基的试管中，在本实施例中，阶段1培养基是b-12c-iv，也如实施例1所述。随后苗被转移到阶段2培养基，在本实施例中是pH为5.5的b-4-iv，培养10-120天的周期(通常是21天的周期)，直到通过分离到新的试管中并进一步扩增而获得了预期数量的苗。每个增殖周期中每个试管获得了1-10个苗。随后将苗置于阶段3培养基中，在本实施例中是pH为5.7的BR-2-iv，培养10-120天(通常是14-21天)。

实施例6.Chusquea Culeo″Cana Prieta″

在Chusquea Culeo″Cana Prieta″的实施例中，如实施例1一样选择外植体并进行灭菌。外植体随后被转入包含阶段1培养基的试管中，在本实施例中，阶段1培养基为b-12c-iv，也如实施例1所述。随后苗被转移到阶段2培养基，在本实施例中，是pH为5.5的b-9-iv，培养10-120天的周期(通常是21天的周期)，直到通过分离到新的试管中并进一步扩增而获得了预期数量的苗。每个增殖周期中每个试管获得了1-10个苗。随后将苗置于阶段3培养基中，在本实施例中，是pH为5.7的Amel-iv，培养10-120天(通常是14-21天)。

实施例7.绿竹(Bambusa OldHamii)

在绿竹的实施例中，如实施例1一样选择外植体并进行灭菌。外植体随后被转入包含阶段1培养基的箱中，在本实施例中，阶段1培养基是b-10-iv(40-50ml)，也如实施例1所述，除了改为箱。苗在b-10-iv培养基上保留10-120天的周期(通常是21天的周期)，直到通过分离到新的箱中并进一步扩增而获得了预期数量的苗。每个增殖周期中每个箱获得了1-20个苗。随后将苗置于阶段2培养基中，在本实施例中，是pH为5.7的Amel-iv，培养10-120天(通常是14-21天)。

实施例8.毛竹″Moso″(Phyllostachys Edulis″Moso″)、乌芽竹(Phyllostachys Atrovaginata)和马来甜龙竹(Dendrocalamus Asper)

在毛竹″Moso″、乌芽竹(Phyllostachys Atrovaginata)和马来甜龙竹的实施例中，如实施例1一样选择外植体并进行灭菌。外植体随后被转入包含阶段1培养基的试管中，在本实施例中，阶段1培养基为b-12c-iv，也如实施例1所述。随后苗被转移到阶段2培养基，在本实施例中，是pH为5.5的b-9-iv，培养10-120天的周期(通常是21天的周期)，直到通过分离到新的试管中并进一步扩增而获得了预期数量的苗。也可以使用pH为5.5的B-6培养基。每个增殖周期中每个试管获得了1-10个苗。随后将苗置于阶段3培养基中，在本实施例中，是pH为5.7的Amel-iv，培养10-120天(通常是14-21天)。

实施例9.狭叶瓜多竹(Guadua Angustifolia)

在狭叶瓜多竹的实施例中，如实施例1一样选择外植体并进行灭菌。外植体随后被转入包含阶段1培养基的试管中，在本实施例中，阶段1培养基为b-12c-iv，也如实施例1所述。随后苗被转移到阶段2培养基，在本实施例中，是pH为5.5的b-10-iv，培养10-120天的周期(通常是21天的周期)，直到通过分离到新的试管中并进一步扩增而获得了预期数量的苗。每个增殖周期中每个试管获得了1-10个苗。随后将苗置于阶段3培养基中，在本实施例中，是pH为5.7的Amel-iv，培养10-120天(通常是14-21天)。

实施例10.蓉城竹(Phyllostachys bissetti)——可选的方法

由一株3月龄到3岁龄的竹植株开始，用茎干上侧生苗刚刚突破鞘的节作为外植体。每个节部分被切割成3-5毫米的部分并保持苗的完整。一些外植体，包括取自1岁龄或更老的茎干的外植体，通过将它们在有70％异丙醇的罐中震荡3秒，随后再将它们在自来水下冲洗1分钟进行预清洗。其他外植体不用预清洗。

将外鞘剥去并丢弃，并将剩余的节部分的块放入10％的漂白溶液中。漂白溶液中的外植体被放到实验室用旋转器-可调速的巴恩斯特德/Lab line定轨摇床(型号KS260)振动台上1小时，每分钟6-9转。对于某些外植体来说，包括那些取自1岁龄或更大的茎干的外植体，该步骤修改为向10％的漂白溶液添加几滴Tween 20并浸泡该外植体45分钟而不是1小时。随后外植体被放入1％的漂白溶液中，并放回振动台上振动30分钟。然后重复该1％漂白溶液步骤。

随后独立的外植体被放到试管中的阶段1培养基(15-25ml)上，随后将试管放到可调节的洁净生长室中，以65℉-70℉的温度和200-500英尺烛光的全谱光水平。本实施例中，阶段1培养基是pH为5.7的b-12c-iv。每10-120天(通常是每21天)，将外植体转入新鲜的b-12c-iv培养基，并丢弃污染的试管。这些外植体在b-12c-iv培养基上保留2个10-120天的周期(通常是21天的周期)。在两个周期之间，除去多余的鞘。在转到第3个周期时，外植体可被转移到阶段2培养基，在本实施例中，是补充了7g/L而不是上述提供的5.5g/L的角叉菜胶的b-12-c。第三个周期之后，清洁外植体。外植体被保留在补充7g/L角叉菜胶的b-12-c上10-120天的周期(通常是21天的周期)，直到观察到多个苗。观察到多个苗可发生在3-15个月内。

一旦外植体展现出多个苗，其被保留在阶段2培养基上，或转移至阶段3培养基中，在本实施例中，使用pH为5.7的b-9-iv。替代使用一种B-9培养基，也可以使用pH为5.7的CW1培养基。培养物被保留在阶段2或阶段3培养基上，直到通过分离到新的试管中并进一步扩增获得了期望数量的苗。通常，时间范围包括10-120天的周期(通常是21天的周期)，周期之间使培养物经历另一轮增殖或转换到阶段3或阶段4培养基，在本实施例中，是pH是5.7的BR-2-iv，在″magenta箱″中培养10-120天(通常是21天)。

实施例11.缺苞箭竹——可选的方法

在缺苞箭竹的实施例中，如实施例10一样选择外植体并进行灭菌。外植体随后被转入包含阶段1培养基的罐中，在本实施例中，是如实施例1所描述的b-12c-iv(液态；30-40ml)培养基，只是使用了罐。这些外植体在b-12c-iv培养基上保留2个10-120天的周期(通常是21天的周期)。周期之间，除去多余的鞘。在转入第三个周期之时，将外植体转换到阶段2培养基，在本实施例中，是补充了7g/L而不是上述提供的5.5g/L的角叉菜胶的b-12-c。第三个周期之后，清洁外植体。将外植体保留在补充了7g/L角叉菜胶的b-12-c上10-120天的周期(通常是21天的周期)，直到观察到多个苗。观察到多个苗发生在3-15个月内。

一旦外植体展现出多个苗，将其保留在阶段2培养基上，或转移至阶段3培养基中，在本实施例中，即罐中的pH为5.7的b-11-iv(液态)，将罐放于旋转架上，旋转架提供每分钟6-9转。将该培养物保留在阶段2或阶段3培养基上10-120天的周期(通常14天的周期)，直到通过分离到新的罐中并进一步扩增获得了期望数量的苗。每个增殖周期中每个罐中获得了1-15个苗。随后将苗放到阶段3或阶段4培养基中，在本实施例中，是pH为6的Ech-iv，培养10-120天(通常是21天)。

实施例12.云锦苦竹——可选的方法

在云锦苦竹的实施例中，如实施例10一样选择外植体并进行灭菌。外植体随后被转入包含阶段1培养基的试管中，在本实施例中，是b-12c-iv，也如实施例10所描述。这些外植体在b-12c-iv培养基上保留2个10-120天的周期(通常是21天的周期)。周期之间，除去多余的鞘。在转入第三个周期之时，将外植体转换到阶段2培养基，在本实施例中，是补充了7g/L而不是上述提供的5.5g/L的角叉菜胶的b-12-c。第三个周期之后，清洁外植体。将外植体保留在补充了7g/L角叉菜胶的b-12-c上10-120天的周期(通常是21天的周期)，直到观察到多个苗。观察到多个苗发生在3-15个月内。

一旦外植体展现出多个苗，将其保留在阶段2培养基上，或转移至阶段3培养基中，在本实施例中，是magenta箱(40-50ml)中的b-9-iv。(也可使用CW1培养基)。将它们保留在b-9-iv培养基上10-120天的周期(通常14天的周期)，直到通过分离到新的箱中并进一步扩增获得了期望数量的苗。每个增殖周期中每个箱中获得了1-20个苗。随后将苗放到阶段3或阶段4培养基中，在本实施例中，是BR-2-iv，培养10-120天(通常是14-21天)。

实施例13.Sasa Veitchii——可选的方法

在Sasa Veitchii的实施例中，如实施例10一样选择外植体并进行灭菌。

外植体随后被转入包含阶段1培养基的试管中，在本实施例中，是b-12c-iv，也如实施例10所描述。这些外植体在b-12c-iv培养基上保留2个10-120天的周期(通常是21天的周期)。周期之间，除去多余的鞘。在转入第三个周期之时，将外植体转换到阶段2培养基，在本实施例中，是补充了7g/L而不是上述提供的5.5g/L的角叉菜胶的b-12-c。第三个周期之后，清洁外植体。将外植体保留在补充了7g/L角叉菜胶的b-12-c上10-120天的周期(通常是21天的周期)，直到观察到多个苗。观察到多个苗发生在3-15个月内。

一旦外植体展现出多个苗，将其保留在阶段2培养基上，或转移至阶段3培养基中，在本实施例中，是pH为5.5的b-1-iv，培养10-120天的周期(通常21天的周期)，直到通过分离到新的试管中并进一步扩增获得了期望数量的苗。每个增殖周期中每个试管中获得了1-10个苗。随后将苗放到阶段3或阶段4培养基中，在本实施例中，是pH为5.7的BR-2-iv，培养10-120天(通常是14-21天)。

实施例14.Pleioblastus viridistriatus和Thamnocalamus crassinodus——可选的方法

在Pleioblastus viridistriatus和Thamnocalamus crassinodus的实施例中，如实施例10一样选择外植体并进行灭菌。外植体随后被转入包含阶段1培养基的试管中，在本实施例中，是b-12c-iv，也如实施例10所描述。这些外植体在b-12c-iv培养基上保留2个10-120天的周期(通常是21天的周期)。周期之间，除去多余的鞘。在转入第三个周期之时，将外植体转换到阶段2培养基，在本实施例中，是补充了7g/L而不是上述提供的5.5g/L的角叉菜胶的b-12-c。第三个周期之后，清洁外植体。将外植体保留在补充了7g/L角叉菜胶的b-12-c上10-120天的周期(通常是21天的周期)，直到观察到多个苗。观察到多个苗发生在3-15个月内。

一旦外植体展现出多个苗，将其保留在阶段2培养基上，或转移至阶段3培养基中，在本实施例中，是pH为5.5的b-4-iv，培养10-120天的周期(通常21天的周期)，直到通过分离到新的试管中并进一步扩增获得了期望数量的苗。每个增殖周期中每个试管中获得了1-10个苗。随后将苗放到阶段3或阶段4培养基中，在本实施例中，是pH为5.7的BR-2-iv，培养10-120天(通常是14-21天)。

实施例15.Chusquea Culeo″Cana Prieta″——可选的方法

在Chusquea Culeo″Cana Prieta″的实施例中，如实施例10一样选择外植体并进行灭菌。外植体随后被转入包含阶段1培养基的试管中，在本实施例中，是b-12c-iv，也如实施例10所描述。这些外植体在b-12c-iv培养基上保留2个10-120天的周期(通常是21天的周期)。周期之间，除去多余的鞘。在转入第三个周期之时，将外植体转换到阶段2培养基，在本实施例中，是补充了7g/L而不是上述提供的5.5g/L的角叉菜胶的b-12-c。第三个周期之后，清洁外植体。将外植体保留在补充了7g/L角叉菜胶的b-12-c上10-120天的周期(通常是21天的周期)，直到观察到多个苗。观察到多个苗发生在3-15个月内。

一旦外植体展现出多个苗，将其保留在阶段2培养基上，或转移至阶段3培养基中，在本实施例中，是pH为5.5的b-9-iv，培养10-120天的周期(通常21天的周期)，直到通过分离到新的试管中并进一步扩增获得了期望数量的苗。也可以使用pH为5.5的B-6培养基。每个增殖周期中每个试管中获得了1-10个苗。随后将苗放到阶段3或阶段4培养基中，在本实施例中，是pH为5.7的Amel-iv，培养10-120天(通常是14-21天)。

实施例16.绿竹——可选的方法

在绿竹的实施例中，如实施例10一样选择外植体并进行灭菌。外植体随后被转入包含阶段1培养基的箱中，在本实施例中，b-10-iv(40-50ml)也如实施例10所描述，除了改为箱外。这些外植体在b-10-iv培养基上保留2个10-120天的周期(通常是21天的周期)。周期之间，除去多余的鞘。在转入第三个周期之时，将外植体转换到阶段2培养基，在本实施例中，是补充了7g/L而不是上述提供的5.5g/L的角叉菜胶的b-10-c培养基。第三个周期之后，清洁外植体。将外植体保留在补充了7g/L角叉菜胶的b-10-c培养基上10-120天的周期(通常是21天的周期)，直到观察到多个苗。观察到多个苗发生在3-15个月内。培养物被保留在阶段2培养基上，直到获得期望数量的苗。每个增殖周期中每个箱中获得了1-20个苗。随后将苗放到阶段3培养基中，在本实施例中，是pH为5.7的Amel-iv，培养10-120天(通常是14-21天)。

实施例17.毛竹″Moso″、乌芽竹(Phyllostachys Atrovaginata)和马来甜龙竹——可选的方法

在毛竹″Moso″、乌芽竹(Phyllostachys Atrovaginata)和马来甜龙竹的实施例中，如实施例10一样选择外植体并进行灭菌。外植体随后被转入包含阶段1培养基的试管中，在本实施例中，是b-12c-iv，也如实施例10所描述。这些外植体在b-12c-iv培养基上保留2个10-120天的周期(通常是21天的周期)。周期之间，除去多余的鞘。在转入第三个周期之时，将外植体转换到阶段2培养基，在本实施例中，是补充了7g/L而不是上述提供的5.5g/L的角叉菜胶的b-12-c。第三个周期之后，清洁外植体。将外植体保留在补充了7g/L角叉菜胶的b-12-c上10-120天的周期(通常是21天的周期)，直到观察到多个苗。观察到多个苗发生在3-15个月内。

一旦外植体展现出多个苗，将其保留在阶段2培养基上，或转移至阶段3培养基中，在本实施例中，是pH为5.5的b-9-iv，培养10-120天的周期(通常21天的周期)，直到通过分离到新的试管中并进一步扩增获得了期望数量的苗。或使用pH为5.5的B-6培养基。每个增殖周期中每个试管中获得了1-10个苗。随后将苗放到阶段3或阶段4培养基中，在本实施例中，是pH为5.7的Amel-iv，培养10-120天(通常是14-21天)。

实施例18.狭叶瓜多竹——可选的方法

在狭叶瓜多竹的实施例中，如实施例10一样选择外植体并进行灭菌。外植体随后被转入包含阶段1培养基的试管中，在本实施例中，是b-12c-iv，也如实施例10所描述。这些外植体在b-12c-iv培养基上保留2个10-120天的周期(通常是21天的周期)。周期之间，除去多余的鞘。在转入第三个周期之时，将外植体转换到阶段2培养基，在本实施例中，是补充了7g/L而不是上述提供的5.5g/L的角叉菜胶的b-12-c。第三个周期之后，清洁外植体。将外植体保留在补充了7g/L角叉菜胶的b-12-c上10-120天的周期(通常是21天的周期)，直到观察到多个苗。观察到多个苗发生在3-15个月内。

一旦外植体展现出多个苗，将其保留在阶段2培养基上，或转移至阶段3培养基中，在本实施例中，是pH为5.5的b-10-iv，培养10-120天的周期(通常21天的周期)，直到通过分离到新的试管中并进一步扩增获得了期望数量的苗。每个增殖周期中每个试管中获得了1-10个苗。随后将苗放到阶段3或阶段4培养基中，在本实施例中，是pH为5.7的Amel-iv，培养10-120天(通常是14-21天)。

本领普通域技术人员根据本发明提供的实施例可以理解，用于各个种的组织培养方法包括培养基、时机和生长条件上的微小变化。这些有关各个种的变化需要根据一些因素进行优化，包括地点、预期的产量、起始材料等。

对于以上列出的实施例提供的每一个种，在特定的实施方案中，每种都可以在以下的培养基中启动和/或增殖：b-9-i培养基、b-9-ii培养基、b-9-iii培养基、b-9-iv培养基、b-9-v培养基、CW2-i培养基、CW2-II培养基、CW2-iii培养基、CW2-iv培养基、CW2-v培养基、b-10-i培养基、b-10-ii培养基、b-10-iii培养基、b-10-iv培养基、b-10-v培养基、b-11-i培养基、b-11-ii培养基、b-11-iii培养基、b-11-iv培养基、b-11-v培养基、b-12c-i培养基、b-12c-ii培养基、b-12c-iii培养基、b-12c-iv培养基、b-12c-v培养基、b-1-i培养基、b-1-ii培养基、b-1-iii培养基、b-1-iv培养基、b-1-v培养基、b-4-i培养基、b-4-ii培养基、b-4-iii培养基、b-4-iv培养基、b-4-v培养基、b-6-i培养基、b-6-ii培养基、b-6-iii培养基、b-6-iv培养基、b-6-v培养基、CW1-i培养基、CW1-ii培养基、CW1-iii培养基、CW1-iv培养基、CW1-v培养基、CW3-i培养基、CW3-ii培养基、CW3-iii培养基、CW3-iv培养基、CW3-v培养基、CW4-i培养基、CW4-ii培养基、CW4-iii培养基、CW4-iv培养基、CW4-v培养基、CW5-i培养基、CW5-ii培养基、CW5-iii培养基、CW5-iv培养基、CW5-v培养基、CW6-i培养基、CW6-N培养基、CW6-iii培养基、CW6-iv培养基和/或CW6-v培养基。

如此处所用的“......中”和“......上”在将外植体、苗或小植株置入包含培养基的试管、罐、箱或缸的语境中可以互换。

除非另有说明，在说明书和权利要求书中使用的表达成分的量、性质诸如分子量、反应条件等等的数值可被理解为在一切情况下都可被词语“大约”所修饰。相应的，除非有相反的指示，说明书及所附权利要求书中出现的数值参数是近似值，其可根据本发明寻求获得的期望性质而发生变化。最少，且并不意图限制与权利要求的范围相当的含义的运用，每个数值参数至少可依据报道的有效数字的数量进行解释，或适用相近领域的普通技术进行解释。

尽管使本发明具有较宽范围的数值范围和参数设定是近似值，在特定实施例中出现的数值量是尽可能精确的记载的。但是，任何的数值量，由于其各自的检验方式中存在的标准差，必然导致其自身固有包含某些误差。

在描述本发明的上下文中(尤其是在下述权利要求的上下文中)使用的术语“一个”、“一种”、“所述”、“该”以及类似的指代可被解释为覆盖了单数和复数，除非本文另有指示或者明显与上下文相抵触。对本发明数值范围的记载只是要提供一种单独提及落入范围内的每个独立的值的简便方法。除非本发明另有指示，每个独立的值都落入说明书的范围，就如同本发明单独列举了一样。本发明描述的所有方法都能以任何合适的顺序执行，除非本发明另有指示或明显与上下文相抵触。本发明所提供的任何和所有实施例或示例性用语(如“例如”)的使用，只是意图更好的说明本发明，并且不是以其他方式对本发明的范围形成限制。说明书中的所有用语均不能被解释为暗示本发明的实施需要未要求保护的要素。

将本发明公开的可替换的要素或实施方案进行分组并不应理解为限制。每个组的成员均可被涉及并被独立的要求保护或以任何方式与该组其他成员或本文出现的其他要素进行组合。预期可以出于方便性和/或可专利性将组内的一个或多个成员纳入某个组或从某个组中删除。当任何这样的纳入或删除发生时，说明书将被看作是包含修改之后的组，以满足所附从属权利要求中的马库什组的书写说明。

本发明描述了特定的实施方案，包括发明人所知的实施本发明的最佳方式。当然，对于这些所述的实施方案进行的改变对于本领域普通技术人员来说在阅读上述说明书的基础上将是显然的。发明人期望本领域技术人员视需要的引入这样的改变，并且发明人期望本发明通过其他的方式实施而不仅是此处具体描述的方式。相应的，本发明包括所附权利要求中记载的主题的所有的变更和等效方式，只要被相应的法律所允许。此外，上述要素以其任何可能的变换形式所进行的任何组合均落入本发明的范围，除非本发明另有指示或明显与上下文相抵触。

本发明所公开的特定的实施方案可在权利要求中被进一步限定，运用术语组成是或基本上组成是。当在权利要求中使用时，无论作为申请文件提交或作为修改添加，该连接性术语“组成是”排除了任何在权利要求中未指明的要素、步骤或成分。连接性术语“基本上的组成是”将权利要求的保护范围限制在具体指明的材料或步骤以及那些不会对基本的和新的性能有实质影响的材料和步骤。本发明要求保护的实施方案固有的或清楚的在此描述并具有实施的可能性。

最后，可以理解的是，本发明公开的实施方案是本发明原理的示例性阐述。可以引入的其他改变方式也落入本发明的范围。因此，经由实施例，但不限于此，可以根据本发明的教导利用本发明的可替换形式。相应的，本发明并不限于其所精确展示和清晰描述的内容。

Claims

1.一种用于微繁殖竹的培养基，其中所述培养基包含Meta-topolin或其类似物并且使10-120天的增殖周期维持至少6个月。

2.根据权利要求1的培养基，其中所述培养基使10-120天的增殖周期维持至少1年。

3.根据权利要求1或2的培养基，其中所述的Meta-topolin或其类似物以0.0125mg/mL-10mg/mL的量存在。

4.根据权利要求1、2或3的培养基，其中所述培养基进一步包含苯基噻二唑脲或其类似物。

5.根据权利要求1、2、3或4的培养基，其中所述培养基进一步包含NAA、BAP、2ip和/或IBA。

6.一种微繁殖竹的方法，包括在权利要求1、2、3、4或5的培养基中培养竹外植体和/或苗。

7.根据权利要求6的微繁殖竹的方法，其中所述竹是蓉城竹(Phyllostachys bissetti)；缺苞箭竹(Fargesia denudata)；云锦苦竹(Pleioblastusfortunei)；Sasa Veitchii；Pleioblastus viridistriatus；Thamnocalamus crassinodus；Chusquea Culeo″CanaPrieta″；绿竹(Bambusa Old Hamii)；毛竹(PhyllostachysMoso)；乌芽竹(Phyllostachys Atrovaginata)；马来甜龙竹(DendrocalamusAsper)；或狭叶瓜多竹(Guadua Angustifolia)。

8.根据权利要求6的微繁殖竹的方法，其中所述竹是Arundinariagigantea；Bambusa balcoa；龙头竹(Bambusa vulgaris)；龙头竹‘Vitatta’(Bambusavulgaris‘Vitatta’)；绿竹(Bambusa Oldhamii)；马甲竹(Bambusa tulda)；勃氏甜龙竹(Dendrocalamus brandesii)；马来甜龙竹(Dendrocalamus asper)；版纳甜龙竹(Dendrocalamus hamiltoni)；龙竹(Dendrocalamus giganteus)；黄竹(Dendrocalamus membranaceus)；牡竹(Dendrocalamus strictus)；Gigantochloaaspera；Gigantochloa scortechini；瓜多竹(Guadua culeata)；瓜多竹′尼加拉瓜′(uadua aculeata‘Nicaragua’)；Guadua amplexifolia；狭叶瓜多竹(Guaduaangustifoli)；Guadua angustofolia bi-color；从瓜多竹(Guadua paniculata)；Melocanna bambusoides；eohouzeaua dullooa(长穗竹属(Teinostachyum))；Ochlandra travancorica；毛竹(Phyllostachys edulis)′毛竹′(‘Moso’)；紫竹(Phyllostachys nigra)；毛金竹(Phyllostachys nigra′Henon′)；或Schizostachyumlumampao。

9.一种用于将苗转移到试管外条件的培养基，其中所述培养基包含、基本上的组成是或组成是Br-2-i培养基、Br-2-ii培养基、Br-2-iii培养基、Br-2-iv培养基、Ech-i培养基、Ech-ii培养基、Ech-iii培养基、Ech-iv、Amel-i培养基、Amel-ii培养基、Amel-iii培养基、Amel-iv培养基或Amel-v。

10.一种用于微繁殖竹的培养基，其中所述培养基包含苯基噻二唑脲或其类似物并且使10-120天的增殖周期维持至少6个月。

11.根据权利要求10的培养基，其中所述培养基使10-120天的增殖周期维持至少1年。

12.根据权利要求10或11的培养基，其中所述苯基噻二唑脲或其类似物以0.0001mg/mL-5mg/mL的量存在。

13.根据权利要求10、11或12的培养基，其中所述培养基进一步包含Meta-topolin或其类似物、NAA、BAP、2ip和/或IBA。

14.根据权利要求13的培养基，其中所述Meta-topolin或其类似物以0.0125mg/mL-10mg/mL的量存在。

15.根据权利要求1、2、3、4、5、10、11、12、13或14的培养基，其中所述培养基包含、基本上的组成是或组成是b-9-i培养基、b-9-ii培养基、b-9-iii培养基、b-9-iv培养基、b-9-v培养基、CW2-i培养基、CW2-ii培养基、CW2-iii培养基、CW2-iv培养基、CW2-v培养基、b-10-i培养基、b-10-ii培养基、b-10-iii培养基、b-10-iv培养基、b-10-v培养基、b-11-i培养基、b-11-ii培养基、b-11-iii培养基、b-11-iv培养基、b-11-v培养基、b-12c-i培养基、b-12c-ii培养基、b-12c-iii培养基、b-12c-iv培养基、b-12c-v培养基、b-1-i培养基、b-1-ii培养基、b-1-iii培养基、b-1-iv培养基、b-1-v培养基、b-4-i培养基、b-4-ii培养基、b-4-iii培养基、b-4-iv培养基、b-4-v培养基、b-6-i培养基、b-6-ii培养基、b-6-iii培养基、b-6-iv培养基、b-6-v培养基、CW1-i培养基、CW1-ii培养基、CW1-iii培养基、CW1-iv培养基、CW1-v培养基、CW3-i培养基、CW3-ii培养基、CW3-iii培养基、CW3-iv培养基、CW3-v培养基、CW4-i培养基、CW4-ii培养基、CW4-iii培养基、CW4-iv培养基、CW4-v培养基、CW5-i培养基、CW5-ii培养基、CW5-iii培养基、CW5-iv培养基、CW5-v培养基、CW6-i培养基、CW6-ii培养基、CW6-iii培养基、CW6-iv培养基和/或CW6-v培养基。

16.一种微繁殖竹的方法，包括在权利要求11、12、13、14或15的培养基中培养竹外植体和/或苗。

17.根据权利要求16的微繁殖竹的方法，其中所述竹是蓉城竹(Phyllostachys bissetti)；缺苞箭竹(Fargesia denudata)；云锦苦竹(Pleioblastusfortunei)；Sasa Veitchii；Pleioblastus viridistriatus；Thamnocalamus crassinodus；Chusquea Culeo″CanaPrieta″；绿竹(Bambusa Old Hamii)；毛竹(PhyllostachysMoso)；乌芽竹(Phyllostachys Atrovaginata)；马来甜龙竹(DendrocalamusAsper)；或狭叶瓜多竹(Guadua Angustifolia)。

18.根据权利要求7的微繁殖竹的方法，其中所述竹是Arundinariagigantea；Bambusa balcoa；龙头竹(Bambusa vulgaris)；龙头竹′Vitatta′(Bambusavulgaris′Vitatta′)；绿竹(Bambusa Oldhamii)；马甲竹(Bambusa tulda)；勃氏甜龙竹(Dendrocalamus brandesii)；马来甜龙竹(Dendrocalamus asper)；版纳甜龙竹(Dendrocalamus hamiltoni)；龙竹(Dendrocalamus giganteus)；黄竹(Dendrocalamus membranaceus)；牡竹(Dendrocalamus strictus)；Gigantochloaaspera；Gigantochloa scortechini；瓜多竹(Guadua culeata)；瓜多竹′尼加拉瓜′；Guadua amplexifolia；狭叶瓜多竹(Guadua angustifoli)；Guadua angustofoliabi-color；从瓜多竹(Guadua paniculata)；Melocanna bambusoides；eohouzeauadullooa(长穗竹属(Teinostachyum))；Ochlandra travancorica；毛竹(Phyllostachysedulis)′毛竹′(‘Moso’)；紫竹(Phyllostachys nigra)；毛金竹(Phyllostachys nigra′Henon′)；或Schizostachyum lumampao。

19.一种试剂盒，包含根据权利要求1、2、3、4、5、9、10、11、12、13、14或15的任一项的培养基。