CN103044566B - 一种竹荪水提残渣中抗氧化剂多糖的制备方法 - Google Patents

一种竹荪水提残渣中抗氧化剂多糖的制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN103044566B
CN103044566B CN201310001081.2A CN201310001081A CN103044566B CN 103044566 B CN103044566 B CN 103044566B CN 201310001081 A CN201310001081 A CN 201310001081A CN 103044566 B CN103044566 B CN 103044566B
Authority
CN
China
Prior art keywords
polysaccharide
dictyophora phalloidea
water
dictyophora
extraction residue
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN201310001081.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN103044566A (zh
Inventor
王军辉
孙汉巨
刘咏
李军红
姚玉飞
单亮
孙克范
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hefei University of Technology
Original Assignee
Hefei University of Technology
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hefei University of Technology filed Critical Hefei University of Technology
Priority to CN201310001081.2A priority Critical patent/CN103044566B/zh
Publication of CN103044566A publication Critical patent/CN103044566A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN103044566B publication Critical patent/CN103044566B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)

Abstract

本发明公开了一种竹荪水提残渣中抗氧化剂多糖的制备方法，该方法包括以下操作步骤：竹荪水提残渣的制备，多糖提取液的配置，竹荪水提残渣中多糖的提取，多糖提取液中水不溶性α-(1→3)-d-葡聚糖的去除，脱色，小分子杂质的去除，多糖的纯化，透析与冷冻干燥，抗氧化活性检测等。本发明不仅提供了一种成本低、高效、无污染的竹荪中抗氧化剂多糖的制备方法，而且提供了竹荪水提残渣综合加工利用的方法，拓展了竹荪的深加工领域。

Description

一种竹荪水提残渣中抗氧化剂多糖的制备方法
技术领域
本发明涉及多糖领域，确切地说是一种竹荪水提残渣中高活性多糖的制备方法。
背景技术
竹荪 Dictyophora indusiata俗名有竹参、竹笙、面纱菌、网纱菌、竹姑娘，隶属于腹菌纲、鬼笔目、鬼笔科、竹荪属，是名贵的食用菌，历史上列为“宫廷贡品”，近代做为国宴名菜，为食疗佳品。据报道竹荪能补气养阴、润肺止咳、清热利湿，具有滋补强壮、益气补脑、宁神健体的功效；另外，竹荪能够保护肝脏，减少腹壁脂肪的积存，有俗称“刮油”的作用。现代医学研究表明其对高血压、神经衰弱、肠胃疾病等具有一定的保健作用。虽然竹荪很珍贵，但对竹荪的研究与开发利用并不充分，目前主要集中在竹荪的种植、化学成分的测定与药理活性检测等方面，而对竹荪的主要活性化学成分多糖的研究不多，也未见对竹荪水提残渣中高活性多糖分离纯化的报道。而本发明即是提供了一种竹荪水提残渣中高活性抗氧化剂多糖的制备方法。
发明内容
本发明的目的是提供一种竹荪水提残渣中抗氧化剂多糖的制备方法。
本发明通过以下方案实现：
一种竹荪水提残渣中抗氧化剂多糖的制备方法，包括以下步骤：
（1）竹荪水提残渣的制备：将干燥的竹荪磨碎，过80-100目筛得竹荪粉末。称取一定质量的竹荪粉末并加入40-50倍蒸馏水，搅拌均匀后用普通高压锅提取1-2小时，过滤。滤渣重复上述提取步骤1-2次。过滤获得竹荪水提残渣；
（2）多糖提取液的配置：配制5%NaOH/0.05% NaBH4 的混合碱溶液；
（3）竹荪水提残渣中多糖的提取：取一定量的竹荪水提残渣加入混合碱提液进行提取，用双层滤布过滤，滤液浓缩到原来体积的1/3-1/5后即得竹荪水提残渣的多糖提取液；
（4）多糖提取液中水不溶性α-(1→3)-d-葡聚糖的去除：搅拌过程中加入冰乙酸，调节提取液的pH至6-7，离心去除α-(1→3)-d 型不溶的沉淀，上清液即为所需的β-D-葡聚糖；
（5）脱色：上清液用25-30%H2O2进行脱色；
（6）小分子杂质的去除：将脱色后的糖液浓缩到原来体积的1/3-1/4，彻底透析，透析液浓缩到原来体积的1/5-1/7后离心去除去沉淀，获得纯净的多糖浓缩液；
（7）多糖的纯化：把多糖浓缩液稀释到浓度为1-2%，按等体积往溶液中缓慢加入预冷分析纯丙酮，搅拌下将该混合液缓慢升温至45-50℃，保持2-3 h后，立即离心分出沉淀物；
（8）透析与冷冻干燥：把沉淀溶于蒸馏水中，用截留分子量3500Da的透析袋先对自来水透析3-4天，后用重蒸水透析2-3天。透析液浓缩后冷冻干燥即得干燥的竹荪多糖。
（9）抗氧化活性检测：取冻干的竹荪多糖进行体外清除·OH、O2 .-、H2O2及DPPH的抗氧化试验。
所述步骤（3）中混合碱提液的加入量为竹荪水提残渣的20-25倍，提取温度为25-30℃，提取时间为1-2 h，提取次数为2-3次。
所述步骤（4）中乙酸的浓度为1-1.5 mol/L，离心机转速5000-8000 rpm，离心时间为15-30 min。
所述步骤（5）中加入H2O2的量为总体积的1/7-1/10，然后加热到40-50℃，保持2-3 h。
所述步骤（6）中透析袋规格为3500 Da，自来水水透析5-6天，蒸馏水透析3-4天，离心机转速为8000-10000 rpm，离心时间为10-15 min。
本发明的有益效果：
（1）提供一种简单、成本低、高效、无污染的竹荪水提残渣中抗氧化剂多糖的制备方法；
（2）可实现竹荪水提残渣的充分利用，提高工业生产过程中的附加值；
（3）拓展了竹荪的深加工领域，为竹荪的进一步开发利用提供参考。
具体实施方式
     竹荪水提残渣中抗氧化剂多糖的制备方法：
（1）竹荪水提残渣的制备：将干燥的竹荪磨碎，过80目筛获得竹荪粉末。称取一定质量的竹荪粉末并加入40倍蒸馏水，搅拌均匀后用普通高压锅提取1.5小时，过滤。滤渣重复上述提取步骤1-2次，过滤获得竹荪水提残渣；
（2）多糖提取液的配置：配制5%NaOH/0.05% NaBH4 的混合碱溶液；
（3）竹荪水提残渣中多糖的提取：取一定量的竹荪水提残渣加入20倍质量比的混合碱提液于25℃下提取2 h，用双层滤布过滤，滤渣重复提取1次，滤液浓缩到原来体积的1/4后即得竹荪水提残渣的多糖提取液；
（4）、多糖提取液中水不溶性α-(1→3)-d-葡聚糖的去除：搅拌过程中加入1 mol/L冰乙酸，调节提取液的pH到为7，然后于5000-8000 rpm转速下离心时间为15-30 min，离心去除α-(1→3)-d 型不溶的沉淀，上清液即为所需的β-D-葡聚糖；
（5）脱色：上清液加入总体积1/7-1/10的30%H2O2，然后加热到50℃，保持2 h，进行脱色
（6）小分子杂质的去除：将脱色后的糖液浓缩为原来的1/3-1/4，用规格为3500 Da透析袋对自来水水透析5天，蒸馏水透析3天，透析液浓缩到原来体积的1/10后于8000-10000 rpm转速下离心10 - 15 min去除去沉淀，获得纯净的多糖浓缩液；
（7）多糖的纯化：把多糖浓缩液稀释到1%，按等体积往溶液中缓慢加入预冷分析纯丙酮，搅拌下将该混合液缓慢升温至50℃，保持2 h后，立即离心分出沉淀物；
（8）透析与冷冻干燥：把沉淀溶于蒸馏水中，用截留分子量3500 Da的透析袋先对自来水透析，后用重蒸水透析。透析液浓缩后冷冻干燥即得干燥的竹荪多糖。
(9)、抗氧化活性检测：取冻干的竹荪多糖进行体外清除·OH、O2 .-、H2O2及DPPH的抗氧化试验。
    结果表明，竹荪多糖在浓度为2 mg/mL时对OH、O2 .-、H2O2及DPPH的体外清除率达到86%、83%、74%和91%。说明竹荪多糖具有较强的清除氧自由基的能力，是一种天然高效的抗氧化剂。

Claims (5)

1.一种竹荪水提残渣中抗氧化剂多糖的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）竹荪水提残渣的制备：将干燥的竹荪磨碎，过80-100目筛得竹荪粉末；称取一定质量的竹荪粉末并加入40-50倍蒸馏水，搅拌均匀后用普通高压锅提取1-2小时，过滤，滤渣重复上述提取步骤1-2次，过滤获得竹荪水提残渣；
（2）多糖提取液的配制：配制5%NaOH/0.05% NaBH4 的混合碱溶液；
（3）竹荪水提残渣中多糖的提取：取一定量的竹荪水提残渣加入混合碱提液进行提取，用双层滤布过滤，滤液浓缩到原来体积的1/3-1/5后即得竹荪水提残渣的多糖提取液；
（4）多糖提取液中水不溶性α-(1→3)-d-葡聚糖的去除：搅拌过程中加入冰乙酸，调节提取液的pH至6-7，离心去除α-(1→3)-d 型不溶的沉淀，上清液即为所需的β-D-葡聚糖；
（5）脱色：上清液用25-30%H2O2进行脱色；
（6）小分子杂质的去除：将脱色后的糖液浓缩到原来体积的1/3-1/4，彻底透析，透析液浓缩到原来体积的1/5-1/7后离心去除沉淀，获得纯净的多糖浓缩液；
（7）多糖的纯化：把多糖浓缩液稀释到浓度为1-2%，按等体积往溶液中缓慢加入预冷分析纯丙酮，搅拌下将该混合液缓慢升温至45-50℃，保持2-3 h后，立即离心分出沉淀物；
（8）透析与冷冻干燥：把沉淀溶于蒸馏水中，用截留分子量3500 Da的透析袋先对自来水透析3-4天，后用重蒸水透析2-3天；透析液浓缩后冷冻干燥即得干燥的竹荪多糖；
（9）抗氧化活性检测：取冻干的竹荪多糖进行体外清除·OH、O2 .-、H2O2及DPPH的抗氧化试验。
2.根据权利要求1所述的一种竹荪水提残渣中抗氧化剂多糖的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）中混合碱提液的加入量为竹荪水提残渣的20-25倍，提取温度为25-30℃，提取时间为1-2 h，提取次数为2-3次。
3.根据权利要求1所述的一种竹荪水提残渣中抗氧化剂多糖的制备方法，其特征在于，所述步骤（4）中乙酸的浓度为1-1.5 mol/L，离心机转速5000-8000 rpm，离心时间为15-30 min。
4.根据权利要求1所述的一种竹荪水提残渣中抗氧化剂多糖的制备方法，其特征在于，所述步骤（5）中加入H2O2的量为总体积的1/7-1/10，然后加热到40-50℃，保持2-3 h。
5.根据权利要求1所述的一种竹荪水提残渣中抗氧化剂多糖的制备方法，其特征在于，所述步骤（6）中透析袋规格为3500 Da，自来水水透析5-6天，蒸馏水透析3-4天，离心机转速为8000-10000rpm，离心时间为10-15 min。
CN201310001081.2A 2013-01-04 2013-01-04 一种竹荪水提残渣中抗氧化剂多糖的制备方法 Expired - Fee Related CN103044566B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310001081.2A CN103044566B (zh) 2013-01-04 2013-01-04 一种竹荪水提残渣中抗氧化剂多糖的制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310001081.2A CN103044566B (zh) 2013-01-04 2013-01-04 一种竹荪水提残渣中抗氧化剂多糖的制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN103044566A CN103044566A (zh) 2013-04-17
CN103044566B true CN103044566B (zh) 2015-07-01

Family

ID=48057447

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201310001081.2A Expired - Fee Related CN103044566B (zh) 2013-01-04 2013-01-04 一种竹荪水提残渣中抗氧化剂多糖的制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN103044566B (zh)

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104211828B (zh) * 2014-09-17 2016-08-24 上海交通大学 一种桑椹抗氧化多糖及其制备方法
CN104211829B (zh) * 2014-09-17 2017-02-15 上海交通大学 一种银耳功能性多糖的制备及应用
CN104479040A (zh) * 2014-12-21 2015-04-01 曾丹 一种竹荪多糖的提取工艺
CN105384844A (zh) * 2015-12-17 2016-03-09 黑龙江众生生物工程有限公司 一种从竹荪子实体中提取水溶性β葡聚糖的方法
CN105837701A (zh) * 2016-04-29 2016-08-10 苏州市天灵中药饮片有限公司 一种竹荪多糖的提取工艺
CN108948221A (zh) * 2018-08-03 2018-12-07 广东药科大学 一种具有神经保护功效的长裙竹荪多糖及其制备和应用
FR3090275B1 (fr) * 2018-12-21 2022-04-29 Covertis Substance biologiquement active, son procede de fabrication et son utilisation comme agent protecteur d’un tissu biologique
CN112010989B (zh) * 2020-08-24 2022-06-17 贵州省生物研究所 一种具有抗氧化活性的竹荪菌托多糖的制备方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1454904A (zh) * 2003-05-08 2003-11-12 扬州大学 高纯度真菌多糖的制备方法
CN1613876A (zh) * 2004-09-14 2005-05-11 武汉大学 一种具有抗肿瘤活性的三螺旋香菇多糖及其制法和用途
CN101503477A (zh) * 2008-09-28 2009-08-12 武汉理工大学 一种三螺旋竹荪多糖的提取方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1454904A (zh) * 2003-05-08 2003-11-12 扬州大学 高纯度真菌多糖的制备方法
CN1613876A (zh) * 2004-09-14 2005-05-11 武汉大学 一种具有抗肿瘤活性的三螺旋香菇多糖及其制法和用途
CN101503477A (zh) * 2008-09-28 2009-08-12 武汉理工大学 一种三螺旋竹荪多糖的提取方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
房县小冬菇中香菇多糖的精制、结构鉴定和体外抗肿瘤活性研究;李石军;《中国优秀硕士学位论文全文数据库 工程科技I辑》;20120715(第7期);第10-12页 *
长裙竹荪多糖Di-S2P的分离纯化和鉴定;林玉满;《中国食用菌》;20030315;第22卷(第2期);第40-42页 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN103044566A (zh) 2013-04-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103044566B (zh) 一种竹荪水提残渣中抗氧化剂多糖的制备方法
CN101461514B (zh) 苦瓜提取物的制备方法
CN108341887B (zh) 一种霍山石斛多糖的制备方法
CN101659707B (zh) 灰树花子实体或菌丝体d组分多糖的提取分离方法
CN103254322B (zh) 怀牛膝多糖的闪式提取方法
CN101003775A (zh) 一种显齿蛇葡萄保健茶酒的生产方法及其产品
CN101585885A (zh) 一种玉竹多糖的制备方法
CN104403014A (zh) 一种高得率的灰树花多糖的制备方法
CN1313479C (zh) 利用海参加工废液制备海参皂甙的工艺方法
CN104311676A (zh) 一种从橡籽仁中提取食用淀粉并副产单宁酸的方法
CN103923050B (zh) 利用芦丁制备槲皮素的方法
CN107573438A (zh) 一种从百香果果皮中提取多糖的方法
CN105037571A (zh) 一种酶法制备低黏度车前子多糖的方法
CN102277400B (zh) 含有β-1,3-D-葡聚糖的提取物及其用途
CN102533900A (zh) 一种香菇多糖的提取方法
CN101659706B (zh) 灰树花子实体或菌丝体x组分多糖的提纯分离方法
CN101020914A (zh) 酸法结合酶法制备低分子量岩藻聚糖的方法
CN112442136A (zh) 一种银耳功能性成分的提取方法
CN102643261A (zh) 一种蓝莓果酒渣提取花青素的方法
CN105348406A (zh) 一种葱白多糖提取纯化方法
CN101736051A (zh) 美洲帘蛤多糖的制备方法
CN102585027A (zh) 一种毛头鬼伞大分子多糖及其制备方法
CN103041175B (zh) 一种从绶草中提取生物碱的方法
CN102870927A (zh) 一种普洱茶膏的提取工艺
CN108059686B (zh) 一种以化橘红为基础制备多糖的方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20150701

Termination date: 20190104

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee