CN103038228A - 作为前列腺素d2受体拮抗剂的取代的嘧啶类化合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及式(I)的取代的嘧啶化合物，或其对映异构体，或其前药或药学上可接受的盐，或包含该化合物的药物组合物。本发明还涉及一种通过给药药学有效量的该化合物治疗患者的方法。式(I)中，m和n彼此独立地选自整数0、1、2或3；X和Y彼此独立地选自CR₁R₁、NR₁或O，其中X和Y不能同时为O；或者，X和Y与它们之间的键一起形成任选地被一个至四个R₃基团取代的苯基基团；每个Z彼此独立地为CR₁R₂；R₁、R₂和R₃彼此独立地选自以下基团：H、卤素、芳基、氨基、任选取代的烷基、任选取代的烷氧基，以及羧基；其中，任选取代的烷基可被一个至三个相同或不同的卤素、羧基、氰基、羟基、氨基或芳基取代。

Description

作为前列腺素D2受体拮抗剂的取代的嘧啶类化合物

发明领域

本发明涉及取代的嘧啶类化合物，其制备方法，含此类化合物的药物组合物，及其在治疗可通过抑制前列腺素D2受体而调节的疾病症状中的药学应用。

发明背景

对过敏性鼻炎、支气管哮喘、过敏性结膜炎及特应性皮炎患者进行局部变应原激发的结果显示，在鼻腔及支气管的灌洗液(lavage fluid)、眼泪及皮肤腔液中，前列腺素D2“(PGD2)”水平迅速升高。PGD2有许多炎性作用，比如增加结膜和皮肤的血管渗透性、增加鼻腔气道阻力、气道收缩以及嗜酸细胞对结膜和气管的浸润。

PGD2是花生四烯酸的主要环氧化酶产物，是在免疫激发条件下从肥大细胞中产生的。[Lewis,RA,Soter NA,Diamond PT,Austen KF,Oates JA,Roberts LJ II,prostaglandin D2generation after activation of rat and human mastcells with anti-IgE，J.Immunol 129,1627-1631,1982]。活化的肥大细胞是PGD2的主要来源，是在哮喘、过敏性鼻炎、过敏性结膜炎、过敏性皮炎等疾病中促进过敏反应的关键因素之一。[Brightling CE,Bradding P，Pavord ID,Wardlaw AJ,New Insights into the role of the mast cell in asthma，Clin ExpAllergy 33,550-556,2003]。

PGD2的许多作用都是通过其对D类前列腺素(“DP”)受体(DP1)的作用而介导的，D类前列腺素受体是表达在上皮细胞及平滑肌上的一种G蛋白偶联的受体。

长期以来，在哮喘研究方面，呼吸上皮细胞被认为是推动疾病发展的炎性细胞因子和趋化因子的主要来源[Holgate S,Lackie P，Wilson S,Roche W，Davies D,Bronchial Epithelium as a key Regulator of Airway AllergenSensitization and Remodeling in Asthma，Am J Respir Crit Care Med.162,113-117,2000]。在哮喘的实验鼠类模型中，受到抗原激发时，DP受体在气道上皮细胞上大幅上调[Matsuoka T,Hirata M,Tanaka H,Takahashi Y，MurataT,Kabashima K,Sugimoto Y，Kobayashi T,Ushikubi F,Aze Y，Eguchi N,UradeY，Yoshida N,Kimura K,Mizoguchi A,Honda Y，Nagai H,Narumiya S,prostaglandin D2 as a mediator of allergic Asthma，Science 287,2013-2017,2000]。在基因敲除的小鼠中，由于缺乏DP受体，气道高反应性和慢性炎症都显著减少[Matsuoka T,Hirata M,Tanaka H,Takahashi Y，Murata T,Kabashima K,Sugimoto Y，Kobayashi T,Ushikubi F,Aze Y，Eguchi N,Urade Y，Yoshida N,Kimura K,Mizoguchi A,Honda Y，Nagai H,Narumiya S,Prostaglandin D2 as a mediator of allergic Asthma，Science 287,2013-2017,2000]。

DP受体还被认为与人的过敏性鼻炎有关，过敏性鼻炎是一种常见的过敏性疾病，以打喷嚏、瘙痒、鼻漏及鼻塞等症状为特征。对鼻子局部施用PGD2，可引起与剂量有关的鼻塞加剧[Doyle WJ,Boehm S,Skoner DP，Physiologic responses to intranasal dose-response challenges with histamine,methacholine,bradykinin,and prostaglandin in adult volunteers with and withoutnasal allergy，J Allergy Clin Immunol.86(6Pt1)，924-35,1990]。

在豚鼠的实验性哮喘模型中，DP受体拮抗剂已显示出减少气道炎症。[Arimura A,Yasui K,Kishino J,Asanuma F,Hasegawa H,Kakudo S,Ohtani M,Arita H(2001),Prevention of allergic inflammation by a novel prostaglandinreceptor antagonist，J Pharmaco lExp Ther.298(2),411-9,2001]。因此，PGD2表现为作用于DP受体，并在诱发过敏性哮喘的某些关键特征方面起着重要作用。

DP拮抗剂已显示出在多种物种中有效缓解过敏性鼻炎的症状，尤其是，已显示出抑制由抗原引发的鼻塞，这是过敏性鼻炎最明显的症状[Jones,T.R.,Savoie,C.,Robichaud,A.,Sturino,C.,Scheigetz,J.,Lachance,N.,Roy,B.,Boyd,M.,Abraham,W.,Studies with a DP receptor antagonist in sheep and guinea pigmodels of allergic rhinitis，Am.J.Resp.Crit.Care Med.167,A218,2003；以及Arimura A,Yasui K,Kishino J,Asanuma F,Hasegawa H,Kakudo S,Ohtani M,Arita H,Prevention of allergic inflammation by a novel prostaglandin receptorantagonist。J Pharmacol Exp Ther.298(2),411-9,2001]。

DP受体拮抗剂在过敏性结膜炎和过敏性皮炎的实验模型中也是有效的[Arimura A,Yasui K,Kishino J,Asanuma F,Hasegawa H,Kakudo S,Ohtani M,Arita H,Prevention of allergic inflammation by a novel prostaglandin receptorantagonist,S-5751,J Pharmacol Exp Ther.298(2),411-9,2001；以及Torisu K,Kobayashi K,Iwahashi M,Nakai Y，Onoda T,Nagase T,Sugimoto I,Okada Y，Matsumoto R,Nanbu F,Ohuchida S,Nakai H,Toda M,Discovery of a new classof potent,selective,and orally active prostaglandin D₂ receptor antagonists,Bioorg.& Med Chem.12,5361-5378,2004]。

被识别为DP受体拮抗剂的化合物已在PCT专利申请WO2006/044732中公开，该专利的标题为：2,6-取代的-4-单取代的氨基嘧啶作为前列腺素D2受体拮抗剂。本发明化合物均选自上述申请中公开的化合物的广泛范围之内。

黄斑变性是视网膜中称为黄斑的部分退化的疾病的总称。年龄相关的黄斑变性(AMD)是最常见的黄斑变性类型。据报导，在美国，AMD是55岁以上人群失明的主要原因。美国有1000多万人罹患此病，其中包括23%的90岁以上人群。(www.webmd.com/eye-health/macular-degeneration/macular-degeneration-overview)。

DP1受体在眼睛的视网膜中高度表达[Boie,Y；Sawyer,D;Slipetta,D M;Metters,K.M.;Abramaovitz,M.Molecular cloning and characterization of thehuman prostanoid DP receptor,J Biol Chem 270,18910-18916,1995]。DP激动剂已被证明可在人视网膜微血管中造成血管扩张[Spada,C.S.;Nieves,A.L.;Woodward,D.F.Vascular activities of prostaglandins and selective prostanoidreceptor antagonists in human retinal microvessels,Exp.Eye Res.75,155-163,2002]。

存在多种类型的黄斑变性影响患者。一种类型的黄斑变性为“干性”黄斑变性。干性黄斑变性是该疾病的早期阶段，其中色素沉积在黄斑部位。这种色素沉积可因年龄增加或黄斑组织变薄引起。作为色素沉积的结果，则可能会逐渐出现中央视觉的丧失。很多时候，AMD起始于干性黄斑变性。

另一种AMD为“湿性”黄斑变性。湿性黄斑变性是一种新生血管形成型黄斑变性，其中血管在视网膜下异常生成并开始渗漏。由于这种渗漏的结果，对视网膜的光敏细胞造成永久性损伤，最终导致这些细胞死亡，因此出现盲点。不像干性黄斑变性，其中视力丧失可能比较轻微，湿性黄斑变性的视力丧失则可能很严重。事实上，已有报导，尽管AMD患者中只有10%患有湿性黄斑变性，但是66%具有显著视力丧失的AMD患者的视力丧失均可直接归因于湿性黄斑变性。

由于黄斑变性的病因尚属未知，在确定该疾病的病因方面仅取得了有限的成功。此外，黄斑变性的治疗也仅仅取得了有限的成功。至今为止，尚无FDA批准的治疗干性黄斑变性的方法，仅用营养干预来防止湿性黄斑变性的进展。

烟酸(尼克酸)是一种常用于治疗高血脂的药物。烟酸对脂质特征的有益效应包括能够降低人血浆中的胆固醇、甘油三酯、游离脂肪酸和脂蛋白的水平。与其它降血脂药物相比，烟酸具有增加血浆中HDL胆固醇同时降低LDL和VLDL胆固醇的特殊益处。结果，在治疗具有低HDL胆固醇水平的患者方面，烟酸作为一种对他汀疗法的辅助治疗可能是有益的。

与烟酸治疗有关的常见副作用为潮红。潮红由不舒服的症状组成，如伴有发热感的皮肤发红、发痒或主要影响上身和面部的刺激。这些症状对患者遵从医嘱有负面影响，在严重情况下，造成了烟酸治疗的中止。烟酸的潮红效应是短暂的，服药后持续大约一小时。此外，患者在几天内即可对烟酸引起的潮红产生耐受性，而烟酸改善血脂特征的效应却长期稳定。

烟酸引起的潮红是皮肤血管舒张的结果(Turenne,SD;Seeman,M;Ross,B.Schizophrenia Research 2001.50:191-197)。最近研究表明，烟酸引起的潮红可能是由一种称为GPR109A的G蛋白偶联受体(人中为HM74A，小鼠中为PUMA-G)所介导(Benyo,Z;Gille,A等，The Journal of ClinicalInvestigation 2005.115:3634-3640)。GPR109A的小鼠同源在巨噬细胞和其它免疫细胞中高度表达(Lorenzen,A;Stannek,C等，Biochemical Pharmacology2002.64:645-648)。GPR109A被烟酸活化引发可能来自皮肤免疫细胞的前列腺素，尤其是前列腺素D2(PGD2)的释放。PGD2然后作用于其质膜受体DP(PGD2受体)，从而刺激腺苷酰环化酶的活化并导致血管舒张/潮红。DP涉及烟酸引起的潮红，进一步被使用缺乏DP受体的转基因小鼠模型的研究所支持(Benyo,Z;Gille,A等，The Journal of Clinical Investigation 2005.115:3634-3640)。最近，已经证明，具体DP拮抗剂抑制了PGD2和烟酸介导的啮齿动物的血管舒张(美国专利公布号20040229844)。

发明概述

本发明涉及式(I)的取代的嘧啶化合物：

其中，m和n彼此独立地选自整数0、1、2或3；

X和Y彼此独立地选自CR₁R₂、NR₁或O，其中X和Y不能同时为O。

或者，X和Y与它们之间的键一起形成任选地被一个至四个R₃基团取代的苯基基团；

每个Z彼此独立地为CR₁R₂；

R₁、R₂和R₃彼此独立地选自以下基团：H、卤素、芳基、氨基、任选取代的烷基、任选取代的烷氧基，以及羧基；

其中，任选取代的烷基可被一个至三个相同或不同的卤素、羧基、氰基、羟基、氨基或芳基取代；

其中，任选取代的烷氧基可被一个至三个相同或不同的卤素、羧基、氰基、氨基或芳基取代；

其中，芳基部分彼此独立地任选被羟基、氨基、烷基、烷氧基、羧基或烷氧基羰基取代；

条件是，卤素不能结合至N原子上，且

条件是，该化合物不是(1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-哌啶-3-基)乙酸；

或其对映异构体，或其前药或药学上可接受的盐。

如上所述，本发明化合物均为选自PCT专利申请WO2006/044732中公开的化合物的广泛范围内。尽管该申请中公开的许多化合物为前列腺素D2受体的具有口服活性的强效、选择性拮抗剂，但是现已发现，它们提高了CYP3A酶的量。这可能对它们作为口服疗法的研发潜力有负面影响。现已发现，本发明选择的化合物没有那些不希望的CYP3A诱导的水平。

本发明的另一个方面是药物组合物，其包含一种或多种药学有效量的式(I)化合物以及药学上可接受的载体。

本发明的另一方面是一种通过对患者给药药学有效量的式(I)化合物，为患者治疗由PGD2介导的疾病的方法，所述疾病包括但不限于过敏性疾病(如过敏性鼻炎、过敏性结膜炎、特应性皮炎、支气管哮喘和食物过敏)、全身性肥大细胞增多症、伴随全身性肥大细胞活化的疾病、过敏性休克、支气管收缩、支气管炎、荨麻疹、湿疹、伴随瘙痒的疾病(如特应性皮炎和荨麻疹)、因为伴随瘙痒的行为(如挠痒和拍打)继发产生的疾病(如白内障、视网膜脱落、炎症、感染和睡眠障碍)、炎症、慢性阻塞性肺炎、缺血性再灌注损伤、脑血管意外、慢性风湿性关节炎、胸膜炎、溃疡性结肠炎、黄斑变性、急性黄斑变性、干性黄斑变性等等。

本发明还涉及治疗或改善患者的黄斑变性的方法。

此外，在本发明的方法中，向患有黄斑变性的患者给药化合物，调节患者的免疫细胞的活性。在本发明的方法中可调节多种类型的免疫细胞的活性。这些免疫细胞的实例包括自然杀伤细胞(NK细胞)、自然杀伤T细胞(NKT细胞)、肥大细胞、树突细胞，以及选自嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞和中性粒细胞的粒细胞。很自然，这些细胞的组合的活性也可用本发明的方法调节。

此外，本发明的方法还可用于治疗或改善脉络膜新生血管形成，于是也可治疗或改善患者的湿性黄斑变性。

本发明的另一个方面涉及药物组合物及其在治疗动脉粥样硬化、血脂异常或糖尿病而不引起潮红副作用中的药学应用，该药物组合物包含烟酸或其药学上可接受的盐或N-氧化物，或烟酸受体激动剂以及前列腺素D2受体抑制剂。本发明的另一个方面涉及药物组合物及其在治疗动脉粥样硬化、血脂异常或糖尿病而不引起潮红副作用中的药学应用，该药物组合物包含他汀、烟酸或其药学上可接受的盐、溶剂合物或N-氧化物，或烟酸受体激动剂以及前列腺素D2受体抑制剂。

发明详述

如上文所用及贯穿本发明的说明书，下列术语应被理解为具有以下含义，除非另行说明：

“烷氧基”是指烷基-O-。代表性的烷氧基包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基和庚氧基。

“烷基”是指具有1至大约20个碳原子，尤其是1至大约12个碳原子的直链或支链脂肪烃，更优选低级烷基。“支链”是指一个或多个低级烷基(如甲基、乙基或丙基)与一个直链的烷基链相连。“低级烷基”是指该直链的烷基链含有1至约4个碳原子，其可为直链或支链。

“芳基”意为芳香族单环或多环体系，其含有约6至约14个碳原子，优选约6至10个碳原子。代表性的芳基包括苯基和萘基。

“卤”或“卤素”是指氟、氯、溴或碘，尤其是氟或氯。

“患者”包括人和其它哺乳动物。

本文所述的“药学上可接受的前药”，是指本发明的化合物的以下前药：在合理的医学判断范围内，其适合用于与患者的组织接触而不具有过度的毒性、刺激和过敏性反应，并具有合理的受益/风险比，而且它们在本发明的化合物的既定用途方面是有效的。“前药”是指在体内转化例如(在血液中水解)而生成本发明的母体化合物的那些化合物。可通过代谢裂解迅速地转化的官能团，在体内能与本发明的化合物的羧基反应形成了一类基团。它们包括但不限于以下基团：烷酰基(如乙酰基、丙酰基、丁酰基等)、未取代的和取代的芳酰基(如苯甲酰基和取代的苯甲酰基)、烷氧基羰基(如乙氧基羰基)、三烷基甲硅烷基(如三甲基甲硅烷基和三乙基甲硅烷基)、与二羧酸(如丁二酰基)形成的单酯。由于本发明的化合物的可代谢裂解的基团易于在体内裂解，含有这类基团的化合物可像前药那样起作用。含有可代谢裂解的基团的化合物的优点在于，由于存在该可代谢裂解的基团，提高了母体化合物的溶解度和/或吸收速率，因而显示出更好的生物利用度。以下文献提供了详尽的讨论：Design of Prodrugs,H.Bundgaard,ed.,Elsevier(1985);Methods in Enzymology;K.Widder et al,Ed.,Academic Press,42,309-396(1985);A Textbook of DrugDesign and Development,Krogsgaard-Larsen and H.Bandaged,ed.,Chapter 5;Design and Applications of Prodrugs 113-191(1991);Advanced Drug DeliveryReviews,H.Bundgard,8,1-38,(1992);J.Pharm.Sci.,77,285(1988);Chem.Pharm.Bull.,N.Nakeya et al,32,692(1984)；Pro-drugs as Novel DeliverySystems,T.Higuchi and V. Stella,14 A.C.S.Symposium Series，以及Bioreversible Carriers in Drug Design,E.B.Roche,ed.,AmericanPharmaceutical Association and Pergamon Press,1987，上述文献均通过引用方式并入本文。

“酯类前药”是指可在生物体内通过代谢(例如通过水解)转化为式(I)化合物的化合物。例如，含有羟基的式(I)化合物的酯可在体内水解转化为母体分子。另外，含有羧基的式(I)化合物的酯也可在体内转化为母体分子。酯类前药的代表性实例为甲氧基甲基酯、1-乙氧基羰基氧基乙酯、2-二甲基氨基乙酯、乙酯和甲酯。

“药学上可接受的盐”是指无毒性的本发明的化合物的无机酸加成盐和有机酸加成盐以及碱加成盐。这些盐可在该化合物最终分离和纯化期间原位制备。

含有羟基的式(I)化合物的合适的酯为，例如乙酸酯、柠檬酸酯、乳酸酯、酒石酸酯、丙二酸酯、草酸酯、水杨酸酯、丙酸酯、琥珀酸酯、富马酸酯、马来酸酯、亚甲基-双-b-羟基萘甲酸酯、龙胆酸酯、羟乙磺酸酯、二-对甲苯酰酒石酸酯、甲磺酸酯、乙磺酸酯、苯磺酸酯、对甲苯磺酸酯、环己基氨基磺酸酯(cyclohexylsulfamate)以及奎尼酸酯。

含有羧基的式(I)化合物的合适的酯如F.J.Leinweber,Drug Metab.Res.,1987,18,page 379所描述的那些。

一类特别有用的含有羟基的式(I)化合物可从Bundgaard et.al.,J.Med.Chem.,1989,32,pages 2503-2507所述的那些酯中选择的酸性部分来形成，包括取代的(氨基甲基)-苯甲酸酯，如二烷基氨基-甲基苯甲酸酯，其中两个烷基基团可由一个氧原子或由一个任选取代的氮原子结合在一起和/或间隔，如一个烷基化的氮原子，更具体为(吗啉代-甲基)苯甲酸酯，如3-或4-(吗啉代甲基)-苯甲酸酯，以及(4-烷基哌嗪-1-基)苯甲酸酯，如3-或4-(4-烷基哌嗪-1-基)苯甲酸酯。

本发明的一些化合物是碱性的，而且这些化合物以其游离碱的形式或以其药学上可接受的酸加成盐的形式存在时是有用的。

酸加成盐是更方便使用的形式；实际上，以盐的形式使用在本质上相当于以游离碱的形式使用。用于制备酸加成盐的酸优选以下酸，当它们与游离碱混合时，将形成药学上可接受的盐，换言之，在该盐的药用剂量，该盐的阴离子对患者无毒性，使得该游离碱内在的有益抑制作用不会因阴离子的副作用而受到损害。虽然所述碱性化合物的药学上可接受的盐是优选的，但所有的酸加成盐有用于作为游离碱形式的来源，即使具体的盐本身只是作为中间产品，例如，当仅仅出于纯化和鉴定的目的而制备该盐时，或当使用该盐作为中间体通过离子交换操作制备药学上可接受的盐时。尤其是，酸加成盐可通过将游离碱形式的纯化的化合物与合适的有机或无机酸分别反应，然后分离所形成的盐来制备。属于本发明范围内的药学上可接受的盐包括从无机酸和有机酸衍生的各种盐。代表性的酸式加成盐包括氢溴酸盐、盐酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、硝酸盐、乙酸盐、草酸盐、戊酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、奎尼酸盐、硬脂酸盐、月桂酸盐、硼酸盐、苯甲酸盐、乳酸盐、甲苯磺酸盐、柠檬酸盐、马来酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、萘酸盐、甲磺酸盐、葡庚酸盐、乳糖酸盐、氨基磺酸盐、丙二酸盐、水杨酸盐、丙酸盐、亚甲基-双-β-羟基萘甲酸盐、龙胆酸盐、羟乙磺酸盐、二对甲苯酰基酒石酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、环己基氨基磺酸盐和月桂基磺酸盐。参见如S.M.Berge等,"Pharmaceutical Salts,"J.Pharm.Sci.,66,1-19(1977),该文献在此处通过引用方式并入本文。

当本发明的化合物被一个酸性基团取代时，可形成碱加成盐，而且该盐是更方便使用的形式；实际上，以盐的形式使用在本质上相当于以游离酸的形式使用。可用于制备碱加成盐的碱优选以下碱，当它们与游离酸混合时，将形成药学上可接受的盐，换言之，在该盐的药用剂量，该盐的阳离子对患者无毒性，使得该游离碱内在的有益抑制作用不会因阳离子的副作用而受到损害。碱加成盐的制备，可通过将游离酸形式的纯化的化合物与从碱金属盐和碱土金属盐衍生的合适的有机碱或无机碱分别反应，然后分离所形成的盐来实现。碱加成盐包括药学上可接受的金属盐和胺盐。合适的金属盐包括钠、钾、钙、钡、锌、镁以及铝的盐。优选钠盐和钾盐。合适的无机碱加成盐从金属碱制备，金属碱包括氢化钠、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、氢氧化铝、氢氧化锂、氢氧化镁、氢氧化锌等。合适的胺的碱加成盐从一些胺制得，这些胺具有足够的碱性以形成稳定的盐，最优选药物化学中经常使用的那些胺，因为它们具有适合于医学用途的低毒性和可接受性。氨、乙二胺、N-甲基-葡糖胺、赖氨酸、精氨酸、鸟氨酸、胆碱、N,N'-二苄基乙二胺、氯普鲁卡因、二乙醇胺、普鲁卡因、N-苄基苯乙基胺、二乙胺、哌嗪、三(羟基甲基)-氨基甲烷、四甲基氢氧化铵、三乙胺、二苄胺、苯丙胺、去氢松香胺、N-乙基哌啶、苄胺、四甲基铵、四乙基铵、甲胺、二甲胺、三甲胺、乙胺、基本的氨基酸(如赖氨酸和精氨酸)，以及二环己基胺。

本发明的化合物的盐不但其本身作为活性化合物是很有用的，在纯化该化合物的目的中也是很有用的，例如，通过本领域技术人员熟知的技术，利用该盐与母体化合物、副产物和/或起始原料之间在溶解度上的差别可纯化该化合物。

应该理解，本发明的化合物可含有不对称中心。这些不对称中心可以分别是R构型或S构型。对于本领域技术人员显而易见的是，本发明的一些化合物也可显示几何异构现象。应该理解，本发明的范围包括上述式(I)化合物的各种几何异构体和立体异构体及其混合物，包括外消旋混合物。这些异构体可通过采用已知方法从其混合物中分离。手性色谱法技术是一种从其混合物中分离异构体的方法。也可试用手性重结晶技术作为从其混合物中分离异构体的另一种方法。单个异构化合物在适用的情况下可通过采用手性前体来制备。

本发明的化合物以及用于其制备的中间体和起始原料按照IUPAC命名规则命名，其中特征基团具有递减的作为主要基团的引用优先次序，如下所示：酸、酯、酰胺等。另外，这些化合物是用AutoNom 4(Beilstein InformationSystems,Inc.)命名的。

但是，应该理解，对于同时以结构式和命名法名称提及的具体化合物，如果结构式和命名法名称互相不一致，则以结构式为准。

本发明的化合物展示了前列腺素D2受体拮抗活性，且可用作药理学活性药物。因此，它们被掺入药物组合物中并用于治疗患有某些医学症状的患者。

根据文献中和下文药理学试验部分所述的试验，可以认为本发明范围内的化合物是前列腺素D2受体的拮抗剂，而且认为该试验结果是与人和其它哺乳动物的药理学活性相关的。因此，在另一实施方式中，本发明提供了本发明的化合物和含有本发明的化合物的药物组合物，其用于治疗患有或易患某些症状，但经过服用PGD2拮抗剂可获得改善的患者。例如，本发明的化合物因此可用于治疗各种由PGD2介导的疾病，包括但不限于，过敏性疾病(如过敏性鼻炎、过敏性结膜炎、特应性皮炎、支气管哮喘和食物过敏)、全身性肥大细胞增多症、伴随全身性肥大细胞活化的疾病、过敏性休克、支气管收缩、支气管炎、荨麻疹、湿疹、伴随瘙痒的疾病(如特应性皮炎和荨麻疹)、因为伴随瘙痒的行为(如挠痒和拍打)继发产生的疾病(如白内障、视网膜脱落、炎症、感染和睡眠障碍)、炎症、慢性阻塞性肺炎、缺血性再灌注损伤、黄斑变性、急性黄斑变性、脑血管意外、慢性风湿性关节炎、胸膜炎、溃疡性结肠炎等等。

本发明的化合物还有用于治疗中，所述治疗包括具有以下药物的组合治疗：

(i)抗组胺药，例如非索非那定、氯雷他定、左西替利嗪和西替利嗪，用于治疗过敏性鼻炎；

(ii)白三烯拮抗剂，例如孟鲁司特和扎鲁司特，用于治疗过敏性鼻炎、COPD、过敏性皮炎、过敏性结膜炎等。请参考WO 01/78697；

(iii)β激动剂，例如舒喘宁(albuterol)、沙丁胺醇(salbuterol)和特布他林，用于治疗哮喘、COPD、过敏性皮炎、过敏性结膜炎等；

(iv)抗组胺药，例如非索非那定、氯雷他定、西替利嗪和左西替利嗪，用于治疗哮喘、COPD、过敏性皮炎、过敏性结膜炎等；

(v)PDE4(磷酸二酯酶4)抑制剂，例如罗氟司特和西洛司特，用于治疗哮喘、COPD、过敏性皮炎、过敏性结膜炎等；或

(vi)TP(血栓烷A2受体)或CrTh2(表达在Th2细胞上的化学引诱物受体-同源分子)拮抗剂，例如雷马曲班(BAY-u3405)，用于治疗COPD、过敏性皮炎、过敏性结膜炎等。

本发明的治疗方法的一个具体实施方式是治疗过敏性鼻炎。

本发明的治疗方法的另一具体实施方式是治疗支气管哮喘。

本发明的治疗方法的另一具体实施方式是治疗干性黄斑变性。

本发明的治疗方法的另一具体实施方式是治疗湿性黄斑变性。

本发明的治疗方法的另一个具体实施方式是改善烟酸诱发的潮红。

根据本发明的另一特点，提供了一种可用于治疗患有或易患某些症状(例如上文所述的一些病症)，但经过服用前列腺素D2受体拮抗剂可获得改善的人或动物患者的方法，该方法包括向患者给药有效量的本发明的化合物或含有本发明的化合物的药物组合物。“有效量”是指作为前列腺素D2受体拮抗剂起作用从而产生预期疗效的本发明的化合物的量。

本文中提及的治疗应被理解为包括预防性治疗和已确诊病症的治疗。

本发明在其范围内还包括药物组合物，其包含至少一种本发明的化合物以及药学上可接受的载体。

实际上，本发明的化合物可以以药学上可接受的剂型，通过局部或全身给药方式施用于人和其它动物，包括口服、吸入、直肠、鼻腔、口腔、眼内、舌下、阴道、结肠、注射(包括皮下、肌内、静脉、皮内、鞘内和硬膜外)、脑池内，以及腹腔内给药。应该理解，首选的途径可随例如接受者的身体状况而改变。

“药学上可接受的剂型”是指本发明的化合物的剂型，包括例如片剂、糖衣片、粉剂、酏剂、糖浆、包括悬浮液在内的液体制剂、喷雾剂、吸入片剂、锭剂、乳液、溶液、颗粒、胶囊和栓剂，以及用于注射的液体制品，包括脂质体制品。其技术和配方通常可在Remington's Pharmaceutical Sciences,MackPublishing Co.,Easton,PA,latest edition中找到。

本发明的一个具体方面提供了以药物组合物形式给药的本发明的化合物。根据本发明的药物组合物包含本发明的化合物以及药学上可接受的载体。

取决于给药方式和剂型，药学上可接受的载体包括至少一种以下成分：药学上可接受的载体、稀释剂、包衣、佐剂、赋形剂或媒介，如防腐剂、填充剂、崩解剂、润湿剂、乳化剂、乳液稳定剂、悬浮剂、等渗剂、甜味剂、调味剂、芳香剂、着色剂、抗菌剂、抗真菌剂、其它治疗剂、润滑剂、吸附延缓或促进剂，以及分散剂。

代表性的悬浮剂包括乙氧基化的异硬脂醇、聚氧乙烯山梨糖醇酯和山梨聚糖酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂和黄蓍胶，或这些物质的混合物。

代表性的预防微生物作用的抗菌剂和抗真菌剂包括对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸等。

代表性的等渗剂包括糖、氯化钠等等。

代表性的用于延缓吸收的吸附延缓剂包括单硬脂酸铝和明胶。

代表性的用于增加吸收的吸附促进剂包括二甲基亚砜和相关类似物。

代表性的稀释剂、溶剂、媒介、增溶剂、乳化剂和乳液稳定剂包括水、氯仿、蔗糖、乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、四氢糠醇、苯甲酸苄酯、多元醇、丙二醇、1,3-丁二醇、甘油、聚乙二醇、二甲基甲酰胺、

60、60、十八醇十六醇混合物、肉豆蔻醇、单硬脂酸甘油酯和十二烷基硫酸钠、山梨聚糖脂肪酸酯、植物油(如棉籽油、花生油、玉米胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)以及可注射的有机酯(如油酸乙酯等)，或这些助剂的合适的混合物。

代表性的赋形剂包括乳糖(lactose，milk sugar)、柠檬酸钠、碳酸钙和磷酸二钙。

代表性的崩解剂包括淀粉、海藻酸以及某些络合的硅酸盐类。

代表性的润滑剂包括硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉，以及高分子量的聚乙二醇。

药学上可接受的载体的选择通常取决于活性化合物的化学性质(如溶解度)，给药的具体方式和用药过程中观察到的情况。

适合于口服给药的本发明的药物组合物可制成独立的单位，如固体剂型，如各含有预定量的活性成分的胶囊、扁囊剂或片剂，或粉末或颗粒；也可制成液体剂型，如溶液或水性或非水性悬浮液，或者水包油乳液或油包水乳液。活性成分也可制成大丸剂、药糖剂或糊剂。

“固体剂型”是指本发明的化合物的剂型是固态形式，例如胶囊、片剂、丸剂、粉末、糖衣片或颗粒。这种固体剂型中，本发明的化合物与至少一种常用的惰性赋形剂(或载体)混合，如柠檬酸钠或磷酸二钙，或与以下混合：(a)填充剂或增量剂，例如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸，(b)粘合剂，例如羧甲基纤维素、海藻酸盐类、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶，(c)保湿剂，例如甘油，(d)崩解剂，例如琼脂、碳酸钙、马铃薯粉或木薯淀粉、海藻酸、某些络合的硅酸盐类和碳酸钠，(e)溶液阻滞剂，例如石蜡，(f)吸收促进剂，例如季铵化合物，(g)润湿剂，例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯，(h)吸附剂，例如高岭土和膨润土，(i)润滑剂，例如滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠，(j)遮光剂，(k)缓冲剂，以及可在肠道某一部分以缓释方式释放本发明的化合物的试剂。

片剂可以以压制或模制的方式制备，还可任选地含有一种或多种辅助成分。压制片剂可通过将活性成分以自由流动形式(如粉末或颗粒)，任选地与粘合剂、润滑剂、惰性稀释剂、防腐剂、表面活性剂或分散剂混合，再在合适的机器中压制而成。可以使用赋形剂(如乳糖、柠檬酸钠、碳酸钙、磷酸二钙)，崩解剂(如淀粉、海藻酸)以及某些络合的硅酸盐与润滑剂(硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠及滑石粉)的组合。用惰性液体稀释剂润湿的粉末状化合物的混合物可在合适的机器中模制而制成模制片剂。片剂可任选地包衣或刻痕，也可配制成使所含活性成分得以缓慢地或控制地释放。

固体组合物也可作为软胶囊和硬胶囊的填充剂，以乳糖以及高分子量的聚乙二醇等为赋形剂。

如果需要，并为了更有效地分布，该化合物可用微胶囊密封或附着于一种缓释或靶向递送体系，例如生物相容的，可生物降解的聚合物基质(如聚乙丙交酯(poly(d,l-lactide co-glycolide)))、脂质体和微球，并通过一种被称为皮下或肌内贮存剂(depot)的技术进行皮下注射或肌内注射，使该化合物在两周或更长时间内得以持续缓慢地释放。该化合物可以以各种方式消毒，例如，用细菌保留滤器过滤，或将灭菌剂加入无菌固体组合物中，在使用时再溶于无菌水或其它无菌注射介质。

“液体剂型”是指待给予患者的活性化合物处于液体形式，例如药学上可接受的乳液、溶液、悬浮液、糖浆和酏剂。除活性化合物之外，液体剂型可含有本领域内常用的惰性稀释剂，例如溶剂、增溶剂和乳化剂等。

当使用水性悬浮液时，它们可含有乳化剂或促进悬浮的试剂。

适合于局部给药的药物组合物是指形式为适合以局部给予患者的剂型。所述剂型呈现为本领域内众所周知的局部软膏、油膏、粉剂、喷雾剂和吸入剂、凝胶剂(水性或醇性)、乳膏，或者，将其加入一种基质中以贴剂形式敷用，使得化合物可经由皮肤障碍控制地释放。当配制成软膏时，活性成分可与石蜡或水溶性软膏基质一起使用。或者，活性成分可以水包油乳膏基质配制成乳膏。适合于在眼睛里局部给药的剂型包括滴眼剂，其中活性成分溶解或悬浮于一种合适的载体中，尤其是适合于该活性成分的水性溶剂。适合于在口腔内局部给药的剂型包括锭剂，其在调味基质中含有活性成分，该基质通常是蔗糖和阿拉伯胶或黄蓍胶；芳香片剂，其在惰性基质中含有活性成分，该惰性基质例如明胶和甘油，或蔗糖和阿拉伯胶；漱口剂，其在合适的液体载体中含有活性成分。

乳液状药物组合物的油相可以以已知的方式由已知的成分组成。虽然该油相可仅由乳化剂(或者已知为利泄剂)组成，但最好含有由至少一种乳化剂与一种脂肪或油，或与脂肪和油两者所组成的混合物。在优选的实施方式中，亲水乳化剂与一种作为稳定剂的亲脂乳化剂一起使用。该乳化剂单独或与稳定剂一起构成乳化蜡，与油和脂肪一起则构成乳化软膏基质，后者形成乳膏剂型的油性分散相。

如果需要，乳膏基质的水相可包括例如至少30%w/w的多元醇，即含有两个或两个以上羟基的醇，如丙二醇、1,3-丁二醇、甘露醇、山梨糖醇、甘油和聚乙二醇(包括PEG 400)及其混合物。局部应用的药物可理想地含有能促进吸收或促进活性成分穿透皮肤或其它受影响部位的化合物。

适合于组合物的油类或脂肪的选择基于取得所需的性质。因此，乳膏优选为非油脂、不着色及容易洗去的产品，并具有合适的稠度以避免从软管或其它容器中渗漏出来。可以使用直链或支链，单或二烷基酯，如豆蔻酸二异丙酯、油酸癸酯、棕榈酸异丙酯、硬脂酸丁酯、棕榈酸2-乙基己酯或被称为Crodamol CAP的支链酯混合物。取决于所需的性质，这些助剂可单独使用或结合使用。或者，也可使用高熔点脂质，如白色软石蜡和/或液体石蜡或其它矿物油。

适合于直肠或阴道给药的药物组合物，是指形式为适合于经直肠或阴道给予患者的剂型，并且含有至少一种本发明的化合物。栓剂是这类药物的具体形式，可将本发明的化合物与合适的无刺激性赋形剂或载体(如可可脂、聚乙二醇或栓剂用蜡)混合的方式来制备，这些赋形剂或载体在常温下是固体但在体温下成为液体，因此可在直肠或阴道腔中融化并释放活性成分。

以注射方式给药的药物组合物可经肌肉、静脉内、腹腔内和/或皮下进行注射。本发明的组合物可配制在液体溶液中，尤其是生理上相容的缓冲液如Hank溶液或Ringer溶液中。此外，该组合物可配制成固体形式并在使用前再重新溶解或悬浮。冻干的形式也包括在内。该剂型是无菌的，且包括乳液、悬浮液、水性与非水性注射溶液，可含有悬浮剂和增稠剂以及抗氧剂、缓冲液、抑菌剂，以及溶质，其使该剂型与既定接受者的血液等渗，并具有适当调节的pH值。

适合于经鼻腔或吸入途径给药的本发明的药物组合物，是指形式为适合于经鼻腔或吸入途径给予患者的组合物。该组合物可含有粉末状载体，其粒径为例如1至500微米的范围(包括20和500微米之间的范围，以5微米递增，例如30微米、35微米等)。其中载体为液体的合适的组合物，其例如作为鼻腔喷剂或滴剂给药，包括活性成分的水溶液或油溶液。适合于以气雾剂方式给药的组合物可按照常规方法制备，并可与其它治疗剂一起递送。计量吸入器有用于给药本发明的组合物，用于吸入治疗。

本发明的组合物所含的活性成分的实际剂量水平可以改变，以便获得以下量的活性成分，其使得患者对具体组合物和给药方法产生所需的治疗反应。因此，为任何具体患者选择的剂量水平取决于多种因素，包括所需的治疗作用、给药途径、所需的治疗持续时间、疾病的病因和严重性、患者的病情、体重、性别、饮食和年龄、每种活性成分的类型和效力、吸收速率、代谢和/或排泄及其它因素。

患者每天单次或分次服用的本发明的化合物的每天总剂量可以是，例如，每天约0.001至100mg/kg体重，优选0.01至10mg/kg体重/天。例如，在成年人中，吸入剂量通常是每天约0.01至100mg/kg体重，优选约0.01至10mg/kg体重；口服剂量是每天约0.01至100mg/kg体重，优选约0.1至70mg/kg体重，尤其0.5至10mg/kg体重；静脉内给药物量是每天约0.01至50mg/kg体重，优选0.01至10mg/kg体重。组合物中活性成分的百分比可以改变，但其仍应构成一定的比例，以获得合适的剂量。单位剂量组合物可含有等分的该剂量，使得可以构成每天剂量。显然，可在几乎同时给药多种单位剂量形式。为了获得所需的治疗效果，可以根据需要而尽量频繁地给药剂量。某些患者可能会对较高或较低的剂量迅速地作出反应，也可能会发现低得多的维持剂量就已经足够。对于其它患者，可能有必要按照每个具体患者的生理要求，进行每天1至4剂的长期治疗。当然地，对于其它患者，将有必要开出每天不超过一剂或两剂的处方。

该剂型可用药剂学领域中众所周知的任何方法制备成单位剂量形式。这些方法包括将活性成分与构成一种或多种辅助成分的载体相混合的步骤。通常，这些剂型将活性成分与液体载体或精细粉碎的固体载体或两者一起均匀和密切地混合，然后，若有必要，使产品成形。

这些制剂可置于单位剂量或多剂量容器内，例如密封的安瓿和带胶塞的小瓶，并可在冻干(冷冻干燥)条件下储存，只需在即将使用之前加入无菌液状载体如注射用水。实时准备的注射溶液和悬浮液可从前述的那类无菌粉末、颗粒和片剂制备。

本发明的化合物可通过应用或改编已知的方法来制备，所谓已知的方法是指此前使用的方法或文献中公开的方法，例如R.C.Larock在Comprehensive Organic Transformations,VCH publishers,1989中所述的那些方法。

在以下所述的反应中，可能有必要保护最终产物中需要的某些反应性官能团，例如羟基、氨基、亚氨基、硫基或羧基，以免它们不必要地参与反应。常规的保护基可按照标准实践使用，例如，可参见T.W.Greene and P.G.M.Wuts,Protecting Groups in Organic Synthesis,3rd edition,John Wiley & Sons,Inc.,1999。合适的胺保护基包括磺酰基(如甲苯磺酰基)，酰基(如苄氧羰基或叔丁氧羰基)以及芳基烷基(如苄基)，这些保护基可根据情况通过水解或氢解作用脱除。其它适宜的胺保护基包括可经碱催化水解除去的三氟乙酰基[-C(=O)CF₃]，或与固相树脂结合的苄基，如与Merrifield树脂结合的2,6-二甲氧基苄基(Ellman连接基)或2,6-二甲氧基-4-[2-(聚苯乙烯基甲氧基)乙氧基]苄基，它们可经例如使用三氟乙酸的酸催化水解脱除。

本发明的化合物的酸加成盐可通过应用或改编已知的方法从盐再生(regenerate)。例如，通过用一种碱(例如碳酸氢钠水溶液或氨水溶液)处理，可将本发明的母体化合物从它们的酸加成盐再生。

本发明的化合物可通过应用或改编已知的方法从它们的碱加成盐再生。例如，通过用一种酸(例如盐酸)处理，可将本发明的母体化合物从它们的碱加成盐再生。

根据本发明的另一个特点，本发明的化合物的碱加成盐可通过应用或改编已知的方法，通过将游离酸与合适的碱进行反应来制备。例如，本发明的化合物的碱加成盐可通过以下任一步骤制备：将该游离酸溶于水或醇的水溶液，或其它含有合适碱的合适溶剂，并通过蒸发该溶液而分离该盐；或者是将该游离酸在一种有机溶剂中与碱反应，在此情况下可直接分离该盐或可通过浓缩该溶液的方式而获得该盐。

起始原料和中间体可通过应用或改编已知的方法来制备，例如对照实例中所述的方法或明显与它们相当的化学方法。

测定保留时间(R_T)和相关的质量离子的高压液相色谱-质谱联用(LCMS)实验采用以下方法进行。

质谱(MS)用Micromass LCT质谱仪记录。该方法为正电喷雾离子化，扫描质量m/z为100至1000。液相色谱在Hewlett Packard 1100系列二元泵及脱气器上进行；固定相：Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP 20X 4.0mm柱，流动相：A=0.1%甲酸(FA)水溶液，B=0.1%甲酸的乙腈溶液。进样量为5μL，通过CTC Analytical公司的PAL系统注入。流速为1mL/分钟。梯度为3分钟内从10%B增至90%B,2分钟内从90%B增至100%B。辅助检测器为：Hewlett Packard 1100系列UV检测器，波长=220nm以及Sedere SEDEX 75蒸发光散射检测器(ELS)，温度=46°C，氮气压力=4巴。

300MHz¹H核磁共振波谱(NMR)用配有ASW 5mm探头的VarianMercury(300MHz)型光谱仪于环境温度记录。在NMR中，化学位移(δ)表示为相对于四甲基硅烷的ppm值。化学位移值以百万分之一(ppm)表示，以四甲基硅烷(TMS)作为内标。

在以下实施例和制备方法中，本文所用的术语将具有下列含义：“kg”是指千克，“g”是指克，“mg”是指毫克，“μg”是指微克，“mol”是指摩尔，“mmol”是指毫摩尔，“M”是指摩尔/升，“mM”是指毫摩尔/升，“μM”是指微摩尔/升，“nM”是指纳摩尔/升，“L”是指升，“mL”或“ml”是指毫升，“μL”是指微升，“°C”是指摄氏度，“mp”或“m.p.”是指熔点，“bp”或“b.p.”是指沸点，“mm of Hg”是指以毫米汞柱计的压强，“cm”是指厘米，“nm”是指纳米，“abs.”是指绝对的，“conc.”是指浓缩的，“c”是指以g/mL计的浓度，“rt”是指室温，“TLC”是指薄层色谱，“HPLC”是指高效液相色谱，“RP-HPLC”是指反相高效液相色谱，“i.p.”是指腹腔内地，“i.v.”是指静脉内地，“s”=单峰，“d”=双重峰；“t”=三重峰；“q”=四重峰；“m”=多重峰，“dd”=两组双重峰；“br”=宽峰，“LC”=液相色谱，“MS”=质谱，“ESI/MS”=电喷雾离子化/质谱，“R_t”=保留时间，“M”=分子离子，“PSI”=磅/平方英寸，“DMSO”=二甲基亚砜，“DMF”=二甲基甲酰胺，“DCM”=二氯甲烷，“HCl”=盐酸，“SPA”=闪烁亲近测定法，“ATTC”=美国典型培养物保藏中心，“EtOAc”=乙酸乙酯，“THF”=四氢呋喃，“MeOH“=甲醇，“EtOH”=乙醇，“PBS”=磷酸盐缓冲盐水，“TMD”=跨膜域，“IBMX”=3-异丁基-1-甲基黄嘌呤，“cAMP”=环磷腺苷。

本发明通过以下例示的实施例和中间体进一步说明，但不受其限制。

实施例

中间体：

A.三氟甲磺酸2-甲氧基-6-三氟甲磺酰基-嘧啶-4-基酯

于室温搅拌2-甲氧基-嘧啶-4,6-二醇(3.0g,21.1mmol)和TEA(11.8mL,84.5mmol)在CH₂Cl₂(50mL)中的混合物1小时。将混合物在冰浴上冷却，并在5分钟的时间内滴加三氟甲磺酸酐(14.3mL,84.5mmol)。将混合物在室温搅拌1小时并在真空下浓缩。将残余物在硅胶上纯化，以EtOAc/庚烷(30%)洗脱，得到标题产物(2.07g,24%)，其为黄色液体。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ6.58(s,1H),4.08(s,3H);¹⁹F NMR(300MHz,CDCl₃)δ-71.96(s,6F);LC Rt1.12分钟;MS 407(M+1)。

B.2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙胺盐酸盐

向500ml氢化反应器中加入(4-三氟甲氧基-苯基)-乙腈(25.0g,124.28mmol)、盐酸(12N,25.89mL,310.70mmol)在200ml甲醇中的溶液和钯/碳(5wt%,13.00g)。将反应器置于Parr-振动器中，于室温在55PSI氢气压下氢化过夜(17小时)。催化剂通过过滤用硅藻土垫除去，并在减压下浓缩滤液。将固体残余物溶于乙酸乙酯/二氯甲烷(300mL,1:1v/v)中，并在剧烈搅拌下缓慢地用200mL庚烷稀释。通过过滤收集沉淀的胺盐，得到标题化合物(25.50g,85%)。LC/MS:Rt=1.96分钟,MS m/z=206。

三氟甲磺酸2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基酯

于室温将三氟甲磺酸2-甲氧基-6-三氟甲磺酰基-嘧啶-4-基酯(2.07g,5.10mmol)、2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙胺(1.23g,5.10mmol)和DIEA(1.78mL,10.20mmol)的CH₂Cl₂(30mL)溶液搅拌2小时。反应混合物在水和CH₂Cl₂之间分配。分离两层，有机层用水和饱和盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。将残余物在硅胶上纯化，以EtOAc/庚(10-50%)洗脱，得到标题产物(1.83g,77%)，其为白色固体。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.20(dd,J=8.7,15.6Hz,4H),5.75(s,1H),3.93(s,3H),3.70(bs,2H);¹⁹F NMR(300MHz,CDCl₃)δ-57.51(s,3F),-72.38(s,3F);LC Rt 1.18分钟;MS 462(M+1)。

D.三氟甲磺酸6-{叔丁氧羰基-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基]-氨基}-2- 甲氧基-嘧啶-4-基酯

于室温将三氟甲磺酸2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基酯(1.83g,3.96mmol)、焦碳酸二叔丁酯(4mL,4.00mmol,1.0M THF溶液)和DMAP(催化剂)的THF(20mL)溶液搅拌3小时。反应混合物在水和EtOAc之间分配。分离两层，有机层用水和饱和盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。将残余物在硅胶上纯化，以EtOAc/庚烷(10-50%)洗脱，得到标题产物(1.96g,88%)，其为白色固体。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.60(s,1H),7.18(dd,J=8.6,20.4Hz,4H),4.25(t,J=7.4Hz,2H),4.02(s,3H),2.92(t,J=7.6Hz,2H),1.50(s,9H);¹⁹F NMR(300MHz,CDCl₃)δ-57.53(s,3F),-72.48(s,3F);LC Rt 1.25分钟;MS 562(M+1)。

E.(6-氯-2-甲氧基-嘧啶-4-基)-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基]-胺

于90°C将2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙胺盐酸盐(24.50g,101.39mmol)、4,6-二氯-2-甲氧基嘧啶(18.15g,101.39mmol)和碳酸氢钠(21.29g,253.47mmol)在300mL乙醇中的悬浮液回流17小时。冷却至室温后，用450mL水稀释反应并继续搅拌1.5小时。过滤形成的沉淀并风干，得到标题化合物(34.25g,97%)。LC/MS:Rt=3.37分钟,MS m/z=348。

实施例1

4-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-吗啉-2-甲酸三氟乙酸盐

1A.三氟甲磺酸2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基酯

于室温，将三氟甲磺酸2-甲氧基-6-三氟甲磺酰基-嘧啶-4-基酯(105mg,0.26mol)和2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙胺(53mg,0.26mmol)的CH₂Cl₂(3mL)溶液搅拌过夜。加入更多2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙胺(约100mg)。2小时后，LC/MS表明反应已完全。真空下浓缩反应混合物，粗产物未经进一步纯化直接用于下一步。LC Rt:1.19分钟;MS 462(M+1)。

1B.4-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-吗啉-2-甲酸乙酯

于95°C，将三氟甲磺酸2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基酯(得自实施例1A)和吗啉-2-甲酸乙酯(82mg,0.51mmol)在DMF(2mL)中的混合物加热过夜。真空下除去溶剂，残余物在硅胶上纯化，以EtOAc/庚烷(33%)洗脱，得到标题产物(79mg,65%两步)，其为浅黄色泡沫。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.20(dd,J=8.4,22.4Hz,4H),5.14(s,1H),4.62(t,J=6.5Hz,1H),4.36-4.14(m,4H),4.09(dt,J=3.1,11.5Hz,2H),3.98-3.88(m,1H),3.87(s,3H),3.69(dt,J=2.9,11.2Hz,1H),3.55(q,J=6.7Hz,2H),3.25-3.11(m,2H),2.91(t,J=6.6Hz,2H),1.32(t,J=7.1Hz,3H);LC Rt 2.88分钟;MS471(M+1)。

1C.4-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-吗啉-2-甲酸三氟乙酸盐

于70°C将4-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-吗啉-2-甲酸乙酯(70mg,0.15mmol)和NaOH(100mg,2.50mmol)在MeOH(4mL)/水(2mL)中的混合物加热2小时。真空下除去溶剂，用RP-HPLC纯化，得到标题产物(12.8mg,15%)，其为白色固体。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.34-7.27(m,2H),7.18-7.11(m,2H),4.93(s,1H),4.29-4.02(m,4H),3.98(s,3H),3.75(t,J=10.5Hz,1H),3.47-3.25(m,5H),3.00(t,J=7.1Hz,2H);¹⁹F NMR(300MHz,CDCl₃)δ-57.44(s,3F),-75.35(s,3F);LC Rt 2.53分钟;MS 443(M+1)。

hPRP IC₅₀=10nM。

实施例2

(4-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-哌嗪-1-基)-乙酸三三氟乙酸盐

2A.[4-(6-{叔丁氧羰基-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基]-氨基}-2-甲氧基-嘧啶-4-基)-哌嗪-1-基]-乙酸乙酯

于40°C将三氟甲磺酸6-{叔丁氧羰基-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基]-氨基}-2-甲氧基-嘧啶-4-基酯(100mg,0.18mmol)和哌嗪-1-基-乙酸乙酯(61mg,0.35mmol)的CH₂Cl₂(5mL)溶液加热过夜。在真空下浓缩反应混合物，残余物在硅胶上纯化，以MeOH/CH₂Cl₂(2-3%)洗脱，得到标题产物(37mg,36%)。LC Rt:3.59分钟;MS 584(M+1)。

2B.(4-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-哌嗪-1-基)-乙酸乙酯盐酸盐

于室温，将[4-(6-{叔丁氧羰基-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基]-氨基}-2-甲氧基-嘧啶-4-基)-哌嗪-1-基]-乙酸乙酯(60mg,0.10mmol)的4M HCl二

烷(1mL)溶液搅拌2小时。在真空下浓缩反应混合物，粗产物在硅胶上纯化，以MeOH/CH₂Cl₂(0-50%含NH₄OH)洗脱，得到标题产物(43mg,80%)，其为黄色泡沫。¹⁹F NMR(300MHz,CDCl₃)δ-57.38(s,3F);LC Rt 2.68分钟;MS 484(M+1)。

2C.(4-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-哌嗪-1-基)-乙酸三三氟乙酸盐

于70°C将(4-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-哌嗪-1-基)-乙酸乙酯盐酸盐(40mg,0.08mmol)和NaOH(100mg,2.50mmol)在MeOH(1.6mL)/水(0.4mL)中的混合物加热2小时。在真空中除去溶剂并将残余物重新溶于水中。用3M HCl将得到的溶液的pH调节至7，然后在真空下浓缩至干。用RP-HPLC纯化残余物，得到产物(38mg,57%)，其为白色固体。¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ7.33(dd,J=9.1,25.8Hz,4H),7.17(bs,1H),5.46(s,1H),5.12-3.83(m,7H),3.79(s,3H),3.55-3.07(m,6H),2.85(t,J=7.9Hz,2H);¹⁹F NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ-56.37(s,3F),-73.96(s,9F);LC Rt 2.40分钟;MS 456(M+1)。

hPRP IC₅₀=368nM。

实施例3

1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-哌啶-2-甲酸三氟乙酸盐

3A.1-(6-{叔丁氧羰基-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基]-氨基}-2-甲氧基-嘧啶-4-基)-哌啶-2-甲酸乙酯

于85°C将三氟甲磺酸6-{叔丁氧羰基-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基]-氨基}-2-甲氧基-嘧啶-4-基酯(144mg,0.26mmol)和哌啶-2-甲酸乙酯盐酸盐(99mg,0.51mmol)和DIEA(89μL,0.51mmol)的DMF(3mL)溶液加热过夜。将反应混合物在真空中浓缩，残余物在CH₂Cl₂和水之间分配。分离两层，并将有机层用10%柠檬酸、饱和NaHCO₃、水和饱和盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。将粗产物在硅胶上纯化，以EtOAc/庚烷(5至10%)洗脱，得到标题产物(134mg,92%)，其为无色胶状物。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.17(dd,J=8.5,28.5Hz,4H),6.99(s,1H),5.84(bs,1H),4.29-4.06(m,5H),4.03-3.92(m,1H),3.90(s,3H),3.20(dt,J=2.7,12.7Hz,1H)2.96(t,J=7.4Hz,2H),2.30(d,J=13.0Hz,1H),1.86-1.66(m,3H),1.48(s,9H),1.43-1.31(m,1H),1.24(t,J=6.9Hz,3H);¹⁹F NMR(300MHz,CDCl₃)δ-57.45(s,3F);LCRt:4.59分钟;MS 569(M+1)。

3B.1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-哌啶-2-甲酸乙酯盐酸盐

于室温，将1-(6-{叔丁氧羰基-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基]-氨基}-2-甲氧基-嘧啶-4-基)-哌啶-2-甲酸乙酯(120mg,0.21mmol)的4M HCl二烷(2mL)溶液搅拌1.5小时。在真空下浓缩反应混合物，得到标题产物(93mg,87%)，其为泡沫。该产物未经进一步纯化直接用于下一步。

3C.1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-哌啶-2-甲酸三氟乙酸盐

于70°C将1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-哌啶-2-甲酸乙酯盐酸盐(93mg,0.20mmol)和NaOH(100mg,2.50mmol)在MeOH(1.6mL)/水(0.4mL)中的混合物加热2小时。在真空中除去溶剂并将残余物重新溶于水中。用RP-HPLC纯化残余物，得到产物(87mg,79%)，其为白色固体。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ9.74(bs,1H),7.30-7.00(m,4H),5.58(bs,1H),5.00(s,1H),3.90(s,3H),3.75-3.47(m,1H),3.45-3.28(m,2H),3.20(t,J=12.8Hz,1H),2.98(t,J=6.2Hz,2H),2.38(d,J=12.1Hz,1H),1.95-1.69(m,3H),1.68-1.38(m,2H),1.37-1.20(m,1H);¹⁹F NMR(300MHz,CDCl₃)δ-57.44(s,3F),-75.35(s,9F);LC Rt 2.97分钟;MS 441(M+1)。

hPRP IC₅₀=885nM(为HCl盐)。

实施例4

(1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-哌啶-2-基)-乙酸三氟乙酸盐

4A.[1-(6-{叔丁氧羰基-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基]-氨基}-2-甲氧基-嘧啶-4-基)-哌啶-2-基]-乙酸乙酯

于室温，将三氟甲磺酸6-{叔丁氧羰基-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基]-氨基}-2-甲氧基-嘧啶-4-基酯(180mg,0.32mmol)和哌啶-2-乙酸乙酯盐酸盐(133mg,0.64mmol)的DMF(3mL)溶液搅拌过夜。在真空下浓缩反应混合物，残余物在硅胶上纯化，以EtOAc/庚烷(10%)洗脱，得到标题产物(133mg,71%)，其为无色胶状物。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.25-7.08(m,4H),6.89(s,1H),4.30-4.12(m,3H),4.07(d,J=7.4Hz,2H),3.92(s,3H),3.03-2.86(m,3H),2.62(d,J=7.5Hz,2H),1.82-1.62(m,5H),1.53-1.50(m,2H),1.48(s,9H),1.20(t,J=7.1Hz,3H);¹⁹F NMR(300MHz,CDCl₃)δ-57.45(s,3F);LC Rt:4.53分钟;MS 483(M+1)。

4B.(1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-哌啶-2-基)-乙酸乙酯盐酸盐

于室温，将[1-(6-{叔丁氧羰基-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基]-氨基}-2-甲氧基-嘧啶-4-基)-哌啶-2-基]-乙酸乙酯(125mg,0.21mmol)的4M HCl二

烷(2mL)溶液搅拌1小时。在真空下浓缩反应混合物，残余物在硅胶上纯化，先后以EtOAc/庚烷(50%)和MeOH/CH₂Cl₂(2%)洗脱，得到标题产物(84mg,80%)，其为泡沫。该产物未经进一步纯化直接用于下一步。

4C.(1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-哌啶-2-基)-乙酸三氟乙酸盐

于70°C将(1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-哌啶-2-基)-乙酸乙酯盐酸盐(84mg,0.16mmol)和NaOH(100mg,2.50mmol)在MeOH(1.6mL)/水(0.4mL)中的混合物加热2小时。在真空中除去溶剂并将残余物重新溶于水中。用RP-HPLC纯化得到的溶液，得到产物(54mg,55%)，其为白色固体。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ9.44(bs,1H),7.30-7.07(m,4H),5.87-4.17(m,3H),3.92(s,3H),3.80-3.43(m,3H),3.41-3.24(m,3H),2.94(t,J=6.9Hz,3H),2.82-2.50(m,2H),1.89-1.59(m,4H),1.58-1.40(m,1H),1.39-1.21(m,1H);¹⁹F NMR(300MHz,CDCl₃)δ-57.43(s,3F),-75.30(s,3F);LC Rt 2.92分钟;MS 455(M+1)。

hPRP IC₅₀=32nM。

实施例5

(2-甲氧基-6-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基]-胺

于110°C将(6-氯-2-甲氧基-嘧啶-4-基)-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基]-胺(348mg,1mmol)和吗啉(174mg,2mmol)在10ml甲苯中的混合物加热12小时。真空浓缩反应混合物。在SiO₂快速色谱上纯化，以75%乙酸乙酯/庚烷洗脱，得到0.39g(97%)标题化合物。¹H NMR(300MHz,CDCl₃):δ7.2-7.1(m,4H),5.1(s,1H),4.6(m,1H),3.9(s,3H),3.7(m,4H),3.5(m,6H),2.9(m,2H).MSm/z:[M+H]⁺=399。

hPRP IC₅₀=1176nM(作为HCl盐)。

实施例6

4-(1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-哌嗪-1-甲酸乙酯

于140°C将哌嗪甲酸乙酯(1.06g,6.51mmol)、(6-氯-2-甲氧基-嘧啶-4-基)-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基]-胺(1.01g,2.91mmol)和碳酸钾(1.26g,9.09mmol)在1-甲基-2-吡咯酮(70mL)中的混合物加热过夜。将该混合物冷却至室温，并在H₂O和EtOAc之间分配。分离两相，用饱和盐水洗涤有机相，用MgSO₄干燥，过滤并真空浓缩。将粗产物在硅胶上纯化，以庚烷/EtOAc(40/60)洗脱，得到浅橙色固体(1.30g,95%)。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.25-7.22(m,2H),7.16-7.14(m,2H),5.11(s,1H),4.75(宽s,2H),4.17(q,2H),3.86(s,3H),3.54(宽s,6H),2.91(t,2H),2.07-2.04(m,3H),1.28(t,3H).¹⁹F NMR(282MHz,CDCl₃)δ-58.4(s,3F).MS m/z:[M+H]⁺=470。

hPRP IC₅₀=609nM。

实施例7

1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-3-甲基-吡咯烷-3-甲酸

于140°C将3-甲基-吡咯烷-3-甲酸(0.26g,2mmol)、(6-氯-2-甲氧基-嘧啶-4-基)-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基]-胺(0.35g,1mmol)和碳酸钾(0.55g,4mmol)在1-甲基-2-吡咯酮(5mL)中的混合物加热过夜。反应混合物用EtOAc稀释，并用H₂O和饱和盐水洗涤。有机相用MgSO₄干燥，过滤并真空浓缩。粗产物用快速色谱法纯化，以100%EtOAc洗脱，得到标题化合物(0.145g,33%)。¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ12.6(bs,1H),7.4(d,2H),7.3(d,2H),6.7(bs,1H),5.8(s,1H),5.0(s,1H),3.7(s,3H),3.4(m,4H),3.2(m,1H),2.8(m,2H),2.3(m,1H),1.8(m,1H),1.3(s,3H).MS m/z:[M+H]⁺=441。

hPRP IC₅₀=317nM。

实施例8

(3S,4S)-4-异丙基-1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-吡咯烷-3-甲酸

8A.(3S,4S)-4-异丙基-1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-吡咯烷-3-甲酸甲酯

使用(3S,4S)-4-异丙基-吡咯烷-3-甲酸甲酯作为起始原料，以类似于实施例7的方式制得标题化合物。¹H NMR(300MHz,CDCl₃):δ7.3-7.1(m,5H),4.8(s,1H),4.5(m,1H),3.8(s,3H),3.7(s,3H),3.5(m,3H),3.2(m,1H),2.9(m,3H),2.5(m,1H),1.8(m,1H),1.6(m,1H),0.9(m,6H).MS m/z:[M+H]⁺=483。

8B.(3S,4S)-4-异丙基-1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-吡咯烷-3-甲酸

向(3S,4S)-4-异丙基-1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-吡咯烷-3-甲酸甲酯(0.14g,0.29mmol)的MeOH(15ml)溶液中加入1N NaOH(3mL,3mmol)。将反应混合物在室温搅拌1小时，然后在50°C搅拌2小时。再将混合物冷却至0°C，并用1N HCl酸化至pH=6。收集生成的沉淀，得到标题化合物(0.12g,88%)。¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ12.6(bs,1H),7.4(d,2H),7.3(d,2H),6.8(bs,1H),5.1(s,1H),3.8(s,3H),3.7(m,1H),3.4(m,4H),3.1(m,1H),2.8(m,3H),2.3(m,1H),1.7(m,1H),0.9(m,6H).MS m/z:[M+H]⁺=469。

hPRP IC₅₀=376nM。

实施例9

1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-吡咯烷-3-甲酸

以类似于实施例7的方式，用吡咯烷-3-甲酸作为起始材料制得标题化合物。¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ12.6(bs,1H),7.4(d,2H),7.3(d,2H),6.7(bs,1H),5.8(s,1H),5.1(s,1H),3.7(s,3H),3.6-3.3(m,5H),3.1(m,1H),2.8(m,2H),2.1(m,2H).MS m/z:[M+H]⁺=427。

hPRP IC₅₀=575nM。

实施例10

(3R,4S)-1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-4-苯基-吡咯烷-3-甲酸

10A.(3R,4S)-1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-4-苯基-吡咯烷-3-甲酸甲酯

使用(3R,4S)-4-苯基-吡咯烷-3-甲酸甲酯作为起始原料，以类似于实施例7的方式制得标题化合物。¹H NMR(300MHz,CDCl₃):δ7.4-7.1(m,10H),4.9(s,1H),4.5(m,1H),3.8(s,3H),3.7(m,2H),3.6(s,3H),3.5(m,3H),3.3(m,1H),2.9(m,2H).MS m/z:[M+H]⁺=517。

10B.(3R,4S)-1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-4-苯基-吡咯烷-3-甲酸

使用(3R,4S)-1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-4-苯基-吡咯烷-3-甲酸甲酯作为起始原料，以类似于实施例7的方式制得标题化合物。¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ12.6(bs,1H),7.4-7.2(m,10H),7.0(bs,1H),5.2(s,1H),3.9(m,1H),3.8(s,3H),3.6(m,2H),3.4(m,4H),2.8(m,2H).MS m/z:[M+H]⁺=503。

hPRP IC₅₀=28nM。

实施例11

(3R,4S)-4-(4-甲氧基-苯基)-1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-吡咯烷-3-甲酸

11A.(3R,4S)-4-(4-甲氧基-苯基)-1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-吡咯烷-3-甲酸甲酯

使用(3R,4S)-4-(4-甲氧基-苯基)-吡咯烷-3-甲酸甲酯作为起始原料，以类似于实施例7的方式制得标题化合物。¹H NMR(300MHz,CDCl₃):δ7.3-7.1(m,6H),6.9(d,2H),4.9(s,1H),4.6(m,1H),4.0(m,2H),3.85(s,3H),3.8(s,3H),3.7(m,2H),3.6(s,3H),3.5(m,3H),3.2(m,1H),2.9(m,2H).MS m/z:[M+H]⁺=547。

11B.(3R,4S)-4-(4-甲氧基-苯基)-1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-吡咯烷-3-甲酸

使用(3R,4S)-4-(4-甲氧基-苯基)-1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-吡咯烷-3-甲酸甲酯作为起始原料，以类似于实施例7的方式制得标题化合物。¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ12.5(bs,1H),7.4-7.2(m,7H),6.9(d,2H),6.7(bs,1H),5.1(s,1H),3.9(m,2H),3.7(s,3H),3.6-3.4(m,3H),3.3(s,3H),3.2(m,2H),2.9(m,2H).MS m/z:[M+H]⁺=533。

hPRP IC₅₀=409nM。

实施例12

[6-(3,4-二氢-1H-异喹啉-2-基)-2-甲氧基-嘧啶-4-基]-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基]-胺三氟乙酸盐

使用1,2,3,4-四氢异喹啉作为起始原料，以类似于实施例7的方式制得标题化合物。¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ7.56(宽s,1H),7.40(d,2H),7.29(d,2H),7.24-7.21(m,4H),5.53(s,1H),4.73(s,2H),3.93(s,3H),3.82(宽s,2H),3.52(宽s,2H),2.92-2.87(m,4H).¹⁹F NMR(282MHz,DMSO-d₆)δ-57.5(s,3F),-74.8(s,3F).MS m/z:[M+H]⁺=445。

hPRP IC₅₀=1220nM。

实施例13

[2-甲氧基-6-(4-苯基-哌嗪-1-基)-嘧啶-4-基]-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基]-胺

使用1-苯基哌嗪作为起始原料，以类似于实施例7的方式制得标题化合物。¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ7.38(d,2H),7.28(d,2H),7.22(d,2H),6.98(d,2H),6.83-6.78(m,2H),5.37(s,1H),3.75(s,3H),3.58(宽s,4H),3.45-3.43(m,2H),3.18(宽s,4H),2.85(t,2H).¹⁹F NMR(282MHz,DMSO-d₆)δ-57.2(s,3F).MS m/z:[M+H]⁺=474。

hPRP IC₅₀=397nM。

实施例14

((R)-1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-吡咯烷-3-基)-乙酸

14A.[(R)-1-(6-{叔丁氧羰基-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基]-氨基}-2-甲氧基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-3-基]-乙酸

于85℃将三氟甲磺酸6-{叔丁氧羰基-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基]-氨基}-2-甲氧基-嘧啶-4-基酯(213mg,0.38mmol)和吡咯烷-3-(R)-基-乙酸(126mg,0.76mmol)在DMF(6mL)中加热5小时。让反应混合物冷却至室温，然后真空浓缩。将残余物溶于CH₂Cl₂并用色谱纯化，以5%MeOH/CH₂Cl₂洗脱，得到产物(200mg,98%)，其为白色固体。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.21(d,2H),7.17(d,2H),6.61(s,1H),4.20(t,2H),3.97(s,3H),2.99(t,2H),2.98(s,2H),2.90(s,2H),2.75-2.65(m,1H),2.50(d,2H),2.27-2.20(m,1H),1.78-1.65(m,1H),1.42(s,9H);MS m/z:[M+H]⁺=541。

14B.((R)-1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-吡咯烷-3-基)-乙酸

将[(R)-1-(6-{叔丁氧羰基-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基]-氨基}-2-甲氧基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-3-基]-乙酸(200mg,0.37mmol)的Et₂O(2mL)溶液用2MHCl的乙醚(2mL，4mmol)溶液处理，并于30°C加热4.5小时。反应混合物在真空中浓缩至干，残余物用反相HPLC纯化，以10-70%CH₃CN/(0.1%TFA/水)洗脱。将洗脱液为62%CH₃CN/(0.1%TFA/水)时收集的级分冻干，得到标题产物，其为白色固体(10mg,6%)。¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ7.38(d,2H),7.29(d,2H),5.16(s,1H),3.90(s,3H),3.70-3.60(br m,2H),3.19-3.00(brm,2H),2.87(t,2H),2.58-2.53(m,1H),2.40(d,2H),2.05-2.18(m,2H),1.70-1.60(m,2H);MS m/z:[M+H]⁺=441。

hPRP IC₅₀=713nM。

实施例15

(±)-反式-4-(2-甲氧基-苯基)-1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-吡咯烷-3-甲酸

15A.1-(6-{叔丁氧羰基-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基]-氨基}-2-甲氧基-嘧啶-4-基)-(±)-反式-4-(2-甲氧基-苯基)-吡咯烷-3-甲酸

于85°C将三氟甲磺酸6-{叔丁氧羰基-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基]-氨基}-2-甲氧基-嘧啶-4-基酯(111mg,0.20mmol)、(±)-反式-4-(2-甲氧基-苯基)-吡咯烷-3-甲酸盐酸盐(102mg,0.40mmol)和iPr₂EtN(0.07mL,0.41mmol)在DMF (4mL)中加热过夜。将反应混合物冷却至室温，并真空浓缩。将残余物以SiO₂柱色谱纯化，以5%MeOH/CH₂Cl₂洗脱，得到产物(106mg,85%)，其为白色固体。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.20-7.11(m,6H),6.92-6.88(m,2H),6.71(s,1H),4.19(t,2H),4.13-4.03(m,1H),3.94(s,3H),3.84(s,3H),3.52-3.45(m,4H),2.96(t,2H),1.47(s,9H);MS m/z:[M+H]⁺=633。

15B.(±)-反式-4-(2-甲氧基-苯基)-1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-吡咯烷-3-甲酸

用TFA(2mL)处理1-(6-{叔丁氧羰基-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基]-氨基}-2-甲氧基-嘧啶-4-基)-(±)-反式-4-(2-甲氧基-苯基)-吡咯烷-3-甲酸(106mg,0.17mmol)的CH₂Cl₂(5mL)溶液并在室温搅拌5.5小时。反应混合物在真空下浓缩至干，并用SiO₂柱色谱纯化，以5%MeOH/CH₂Cl₂洗脱，得到产物(80mg,91%)，为灰白色固体。¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ12.60(宽s,1H),7.58-7.38(m,2H),7.29-7.27(m,4H),7.01-6.92(m,2H),5.29(s,1H),4.00-3.68(m,4H),3.92(s,3H),3.81(s,3H),3.60-3.40(m,4H),2.90-2.86(b,2H);MS m/z:[M+H]⁺=533。

hPRP IC₅₀=436nM。

药理学试验

通过HTRF cAMP分析评估化合物对BW245C-诱导的cAMP在人富含血小板血浆(hPRP)中聚积的拮抗活性。

该分析的目的在于评估在血浆蛋白存在的情况下，化合物对人前列腺素D2受体(DP)(DP1)的拮抗活性。DP是一种Gs蛋白偶联受体，其活化诱导cAMP的聚积。BW245C是一种DP选择性激动剂。因此，通过测量BW245C诱导的3'-5'-环磷腺苷(cAMP)在人富含血小板血浆(PRP)中的聚积，该分析使得能够鉴定并确认对于人DP和/或IP受体的拮抗化合物。

该分析的原理基于HTRF(均相时间分辨荧光)技术。该方法是由细胞产生的cAMP和用染料d2标记的示踪cAMP之间的竞争性免疫分析。示踪剂是通过用穴状化合物标记的单克隆抗体抗cAMP取得可视化。具体的信号(如能量转移)与标准或样品中的cAMP的浓度成反比关系。分析是用Cisbio公司的cAMP HiRange HTRF试剂盒(目录号62AM6PEB,888-963-4567)进行。

人富含血小板血浆(hPRP)的制备：人血获自赛诺菲-安万特的现场供血者。轻轻地将血液从血袋中转移至50ml的离心管中，并在223xg(1000rpm)下不停地离心15分钟。慢慢地抽吸出上层(PRP)并转移至250ml离心管中。使用前，将PRP放置在细胞培养橱中大约30分钟。

IBMX的制备：IBMX是磷酸二酯酶(PDE)抑制剂，分析中用它来防止cAMP的分解。在DMSO中配制1M IBMX储备液。然后将20μL的1M IBMX储备液加入至30μL的DMSO中，以获得400mM IBMX DMSO溶液。进一步将该溶液用0.9%氯化钠按1:50倍稀释，得到8mM IBMX工作溶液。该溶液在使用前，用超声处理60分钟。

BW245C的制备：在DMSO中制备10mM BW245C，并将等分溶液储存于–80°C。在分析的当天，将10mM BW245C储备液用DMSO按1:400稀释，制备25μM溶液。将100μL 25μM BW245C溶液加入至4900μL的0.9%氯化钠溶液中，制备500nM工作溶液。

化合物的稀释：将10mM化合物DMSO储备液用DMSO按1:3系列稀释至96孔板中，以获得从10mM至0.00017mM的11种不同的浓度。接着对每个浓度用0.9%氯化钠溶液进行1:20倍稀释，以获得每种化合物浓度范围为500μM至0.0085μM(11点)的工作浓度。对于阳性和阴性对照，用0.9%氯化钠溶液对DMSO (无化合物)进行1:20倍稀释。

cAMP标准品、cAMP-d2和抗cAMP穴状化合物(都在分析试剂盒中)的制备：根据制造商的说明书加入蒸馏水(通常为456μL水)重新配制cAMP标准品。然后用0.9%氯化钠溶液对重新配制的cAMP标准品按1:4倍系列稀释，以获得11种不同的浓度。通过加入2mL蒸馏水重新配制cAMP-d2，然后再用8mL裂解缓冲液(包含在试剂盒中)进一步稀释。通过加入1.1mL蒸馏水重新配制抗cAMP穴状化合物，然后再用4.4mL裂解缓冲液进一步稀释。

分析步骤：在分析中，每个化合物一式两份进行分析。每孔最终分析体积为50μl。

在分析板中，向每孔加入42μL富血小板血浆(PRP)。接着向每孔加入2.5μL 8mM IBMX(最终浓度400μM)和3μL不同浓度的稀释的化合物(最终浓度范围为从30,000nM至0.51nM，每个化合物11个点)。阳性和阴性对照孔中加入3μL稀释的DMSO溶液，而不是化合物。轻轻敲击培养板，并在37°C培养20分钟。接着加入2.5μL的500nM BW245C(最终浓度25nM)，而在阴性对照孔中，加入2.5μL稀释的DMSO溶液。分析板在室温和无振动情况下再培养20分钟。

在另一个cAMP标准板上，向每孔中加入了25μL PRP。接着在每孔中加入25μL不同浓度的稀释cAMP标准品(最终浓度范围为2800nM至0.0027nM，11个点各两份)。

为了检测cAMP，在分析板和含cAMP标准品的板上向每孔加入25μLcAMP-d2，然后加入25μl抗cAMP穴状化合物。于室温和无振动的条件下培养分析板至少1小时(信号稳定至少24小时)，然后在相容的HTRF读板仪LGL analyst AD上进行读数。记录了在665nm和620nm处的荧光计数并计算了665nm/620nm比值。

数据分析：

在Graphpad Prism 4.03版中利用非线性回归(曲线拟合)得到cAMP标准曲线(X轴：cAMP标准品的log[cAMP](M)；Y轴：得自LGL analyst的665nm/620nm比值*10000)。然后在Graphpad Prism 4.03版中对比标准曲线计算了每孔的665nm/620nm*10000数据，以获得每孔的cAMP浓度。

对阳性对照孔中(即仅含BW245C，不含化合物)的cAMP浓度取平均值，并用来对所有其它孔的值进行标准化：

%BW245C-诱发的cAMP聚积=(各孔中的cAMP浓度/阳性对照孔中的平均cAMP浓度)*100。

在Graphpad Prism 4.03版中利用非线性回归(曲线拟合)得到每个化合物浓度响应曲线。(X为化合物浓度的对数；Y为%BW245C-诱导的cAMP聚积)。用于非线性回归-具有可变斜率的S形剂量相应的方程为：

Y=Bottom+(Top-Bottom)/(1+10^((LogEC50-X)*HillSlope))。

Claims (10)

1.式(I)化合物

其中m和n彼此独立地选自整数0、1、2或3；

X和Y彼此独立地选自CR₁R₂、NR₁或O，其中X和Y不能同时为O；

或者，X和Y与它们之间的键一起形成任选地被一个至四个R₃基团取代的苯基基团；

每个Z彼此独立地为CR₁R₂；

R₁、R₂和R₃彼此独立地选自以下基团：H、卤素、芳基、氨基、任选取代的烷基、任选取代的烷氧基，以及羧基；

其中，任选取代的烷基可被一个至三个相同或不同的卤素、羧基、氰基、羟基、氨基或芳基取代；

其中，任选取代的烷氧基可被一个至三个相同或不同的卤素、羧基、氰基、氨基或芳基取代；

其中，芳基部分可彼此独立地任选地被羟基、氨基、烷基、烷氧基、羧基或烷氧基羰基取代；

条件是，卤素不能结合至N原子上，且

条件是，该化合物不是(1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-哌啶-3-基)乙酸；

或其对映异构体，或其前药或药学上可接受的盐。

2.如权利要求1所述的化合物，该化合物选自：

4-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}吗啉-2-甲酸，

(4-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-哌嗪-1-基)-乙酸，

1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-哌啶-2-甲酸，

(1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-哌啶-2-基)-乙酸，

(2-甲氧基-6-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基]-胺，

4-(1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-哌嗪-1-甲酸乙酯，

1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-3-甲基-吡咯烷-3-甲酸，

(3S,4S)-4-异丙基-1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-吡咯烷-3-甲酸，

1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-吡咯烷-3-甲酸，

(3R,4S)-1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-4-苯基-吡咯烷-3-甲酸，

(3R,4S)-4-(4-甲氧基-苯基)-1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-吡咯烷-3-甲酸，

[6-(3,4-二氢-1H-异喹啉-2-基)-2-甲氧基-嘧啶-4-基]-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基]-胺，

[2-甲氧基-6-(4-苯基-哌嗪-1-基)-嘧啶-4-基]-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基]-胺，

((R)-1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-吡咯烷-3-基)-乙酸，以及

(±)-反式-4-(2-甲氧基-苯基)-1-{2-甲氧基-6-[2-(4-三氟甲氧基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-吡咯烷-3-甲酸。

3.药物组合物，其包含药学有效量的权利要求1的化合物以及药学上可接受的载体。

4.一种治疗患有过敏性疾病、支气管哮喘、过敏性鼻炎、过敏性皮炎、黄斑变性、湿性黄斑变性、干性黄斑变性、过敏性结膜炎或慢性阻塞性肺病的患者的方法，该方法包括向上述患者给药药学有效量的权利要求1的化合物。

5.药物组合物，其包含药学有效量的权利要求1的化合物，和选自抗组胺药、白三烯拮抗剂、β-激动剂、PDE4抑制剂、TP拮抗剂和CrTh2拮抗剂的化合物，以及药学上可接受的载体。

6.如权利要求5的药物组合物，其中所述抗组胺药为非索非那定、氯雷他定、西替利嗪或左西替利嗪；所述白三烯拮抗剂为孟鲁司特或扎鲁司特；所述β-激动剂是舒喘宁、沙丁胺醇和特布他林；所述PDE4抑制剂是罗氟司特或西洛司特；所述TP拮抗剂是雷马曲班；所述CrTh2拮抗剂是雷马曲班。

7.药物组合物，其包含权利要求1的化合物和烟酸，或其药学上可接受的盐，或烟酸受体激动剂。

8.药物组合物，其包含权利要求1的化合物和烟酸，或其药学上可接受的盐，或烟酸受体激动剂，以及他汀。

9.一种在需要该治疗的患者中治疗动脉粥样硬化、血脂异常、糖尿病或相关疾病，同时降低明显潮红的方法，该方法包括对患者给药权利要求7的药物组合物。

10.一种在需要该治疗的患者中治疗动脉粥样硬化、血脂异常、糖尿病或相关疾病，同时降低明显潮红的方法，该方法包括对患者给药权利要求8的药物组合物。