CN103030644A - 一种他拉泊芬及其中间体的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于医药化学领域，具体涉及一种他拉泊芬及其中间体的制备方法。本发明应用化合物二氢卟吩e6单天冬氨酸-4-酯作为关键中间体，采用二氢卟吩e6单天冬氨酸-4-酯水解得他拉泊芬。本发明提高了产品纯度，简化了操作，降低了对设备的要求，易于工业化生产。

Description

一种他拉泊芬及其中间体的制备方法

技术领域

本发明属于医药化学领域，具体涉及一种他拉泊芬及其中间体的制备方法。

背景技术

他拉泊芬钠(Talaporphin sodium)，其化学名为二氢卟吩e6单天冬氨酸酰胺四钠盐，化学结构式如下所示：

该产品在医药上用作光敏剂，是光动力学疗法治疗肿瘤的优良光敏剂，2004年在日本上市。到目前为止，他拉泊芬的合成报道较少，专利US4675338公开了他拉泊芬的制备方法，用二氢卟吩e6在缩合剂的作用下和L-天冬氨酸二叔丁酯反应，不经分离，直接水解，然后经过高效液相制备分离，得到最终产物。该方法步骤较少，操作简单。但是，L-天冬氨酸二叔丁酯中所连接的L-天冬氨酸的两个羧基均被叔丁酯保护，氨基活性较高，除了能和二氢卟吩内酸酐反应外，还能和其自身相邻的羧基反应，造成双取代产物增多，一般能达到15～20％，使得后期分离纯化困难，导致最终产物收率较低，成本高；对设备要求苛刻，用到高效液相制备色谱，不利于工业化生产，总收率只有27％。而且由于L-天冬氨酸二叔丁酯水解时容易和手性碳原子形成双键，当去除酯基时造成消旋，所以产生的异构体一般在5％以上，难以达到药物的要求。

专利WO2008005308中，二氢卟吩e6首先在缩合剂的作用下生成二氢卟吩e6内酸酐，经过分离纯化后，与L-天冬氨酸钠反应生成目标产物他拉泊芬钠。该方法能够有效控制异构体和杂质含量，但是中间体不稳定，难储存，给工业化生产带来困难。

发明内容

针对上述问题，本发明提出了一种他拉泊芬中间体及其制备方法，并应用该中间体合成他拉泊芬。本发明应用化合物二氢卟吩e6单天冬氨酸-4-酯(IV)作为关键中间体，采用二氢卟吩e6单天冬氨酸-4-酯水解得他拉泊芬的路线，提高了产品纯度，简化了操作，降低了对设备的要求，易于工业化生产。

本发明的技术方案如下：

具有通式IV的化合物，

其中，R为C1-6直链烷基或支链烷基或硅基烷基。当R为叔丁基时，得到的产物与原料极性相差较大，易于分离，所以R优选叔丁基。

具有上述通式的化合物，其制备方法为：二氢卟吩e6在缩合剂的作用下与L-天冬氨酸-4-酯于-20-80℃在溶剂中反应，反应完毕，经柱色谱纯化，得二氢卟吩e6单天冬氨酸-4-酯。温度过低，杂质太多且反应很慢；温度过高，产物和原料容易降解，所以将反应温度设为-20-80℃，反应式如下：

其中，二氢卟吩e6和L-天冬氨酸-4-酯以及缩合剂的摩尔比例为1∶0.5-2∶1-1.5；所述的缩合剂为N，N′-二环己基碳二亚胺(DCC)或1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)；所述的溶剂为二氯甲烷或三氯甲烷或N’，N-二甲基甲酰胺或其混合溶剂。反应完毕，为了保证产品纯度达到要求，需要将其经过柱色谱纯化，所述的柱色谱为常压柱色谱或中压制备色谱或高压制备色谱。

在水解试剂的作用下，将具有通式IV的化合物水解，酸化，即得他拉泊芬，反应路线如下：

所述的水解试剂选自NaOH或KOH或LiOH或AlCl₃或LiI或三氟乙酸；所述的溶剂选自水或醇类或其混合溶剂，醇类优选甲醇、乙醇、异丙醇；反应温度为0-100℃，优选50-80℃；为了保证反应完毕产物的充分析出，酸化后pH值为3-4。

所获得的他拉泊芬可以与钠源成盐得他拉泊芬钠，路线如下：

所述的钠源选自醇钠或氢氧化钠或氢化钠，醇钠优选甲醇钠或乙醇钠。

综上所述，本发明采用化合物IV来制备他拉泊芬，化合物IV中所连接的天冬氨酸-1位羧酸未被保护，降低了反应的活性，提高了反应的选择性，在反应中L-天冬氨酸-4-酯主要和活性更高的二氢卟吩e6内酸酐反应，双酰胺化杂质可以控制在1％以内，通过分离可以方便除去。在化合物IV中，由于和手性碳原子连接的羧基裸露，无需水解，降低了水解过程中消旋的可能性，其异构体可以控制在0.5％以下。本发明提供的他拉泊芬制备方法总收率为40％以上(按二氢卟吩e6摩尔量计)，产品纯度高，达99％以上，无危险步骤，操作简单，适于医药工业规模化生产。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明做进一步说明，但不限于本实施例。

实施例1

(1)二氢卟吩e6单天冬氨酸-4-叔丁酯的制备：

将30g二氢卟吩e6悬浮在二氯甲烷中，加入9.6g EDC和2.4g对二甲氨基吡啶，室温下反应，TLC检测原料基本反应完毕，加入11.4gL-天冬氨酸-4-叔丁酯，TLC检测中间体酸酐反应完毕，停止反应，中压制备色谱分离(分离条件：80mm×400mm不锈钢柱，300-400目的硅胶，二氯甲烷∶甲醇∶冰乙酸为25∶1∶0.1为洗脱剂)，收集目标点，蒸干溶剂得到二氢卟吩e6单天冬氨酸-4-叔丁酯25.9g，收率为67.1％。HPLC分析，纯度为99.09％。

MS：768.6(M+1)⁺，790.6(M+Na)⁺。

¹HNMR：(DMSO，600M)：9.79(1H，S)，9.73(1H，S)，9.16(1H，S)，8.32(1H，m)，8.10(1H，dd)，6.48(1H，dd)，6.20(1H，dd)，5.1-5.3(2H，m)，4.73(1H，m)，4.60(1H，m)，4.31(1H，dd)，3.82(2H，m)，3.58(3H，s)，3.52(3H，s)，3.49(3H，s)，3.31(3H，s)，3.13(4H，m)，2.73(2H)，1.65(3H，d)，1.63(3H，t)，1.49(9H，S)。

(2)他拉泊芬的制备：

室温下将20g二氢卟吩e6单天冬氨酸-4-叔丁酯溶解在2000ml 1mol/L的氢氧化钾水溶液中，50℃反应至HPLC检测原料消失。冷却，用1N的稀盐酸调节pH值至3-4，黑色固体析出，乙酸乙酯萃取，蒸干，得到黑色粉末状他拉泊芬17.6g，收率95％，HPLC分析，纯度为99.13％。

(3)他拉泊芬钠的制备：

将15g他拉泊芬置于2000ml单口烧瓶中，缓慢加入85ml的氢氧化钠(1mol/L)水溶液，室温搅拌至全部溶解，加入400ml无水甲醇，搅拌10min后加入1000ml丙酮，继续搅拌30min，静置，过滤得到他拉泊芬钠粗品15g。

将15g他拉泊芬钠粗品用30ml水溶解，300ml甲醇稀释，加入500ml丙酮搅拌析出沉淀，静置过滤得到黑色固体，干燥得到产品13g，收率为86.7％。HPLC分析，纯度为99.68％。

实施例2

(1)二氢卟吩e6单天冬氨酸-4-叔丁酯的制备：

将30g二氢卟吩e6悬浮在三氯甲烷中，加入10.4g DCC和2.4g对二甲氨基吡啶，-20℃下反应，TLC检测原料基本反应完毕，加入7.6gL-天冬氨酸-4-叔丁酯，TLC监测中间体酸酐反应完毕，停止反应，中压制备色谱分离(分离条件：80mm×400mm不锈钢柱，300-400目的硅胶，二氯甲烷∶甲醇∶冰乙酸为25∶1∶0.1为洗脱剂)，收集目标点，蒸干溶剂得到二氢卟吩e6单天冬氨酸-4-叔丁酯27.1g，收率为70.2％。HPLC分析，纯度为99.04％。

MS：768.6(M+1)⁺，790.6(M+Na)⁺。

¹HNMR：(DMSO，600M)：9.79(1H，S)，9.73(1H，S)，9.16(1H，S)，8.32(1H，m)，8.10(1H，dd)，6.48(1H，dd)，6.20(1H，dd)，5.1-5.3(2H，m)，4.73(1H，m)，4.60(1H，m)，4.31(1H，dd)，3.82(2H，m)，3.58(3H，s)，3.52(3H，s)，3.49(3H，s)，3.31(3H，s)，3.13(4H，m)，2.73(2H)，1.65(3H，d)，1.63(3H，t)，1.49(9H，S)。

(2)他拉泊芬的制备：

室温下将20g二氢卟吩e6单天冬氨酸-4-叔丁酯溶解在2000ml 1mol/L的氢氧化钾水溶液中，80℃反应至HPLC检测原料消失。冷却，用1N的稀盐酸调节pH值至3-4，黑色固体析出，乙酸乙酯萃取，蒸干，得到黑色粉末状他拉泊芬17.7g，收率96％，HPLC分析，纯度为99.1％。

(3)他拉泊芬钠的制备：

将15g他拉泊芬置于2000ml单口烧瓶中，缓慢加入100ml的甲醇钠(1mol/L)溶液，室温搅拌至全部溶解，加入400ml无水甲醇，搅拌10min后加入1000ml丙酮，继续搅拌30min，静置，过滤得到他拉泊芬钠粗品14.5g。

将14.5g他拉泊芬钠粗品用30ml水溶解，300ml甲醇稀释，加入500ml丙酮搅拌析出沉淀，静置过滤得到黑色固体，干燥得到产品12.6g，收率为87％。HPLC分析，纯度为99.70％。

该步骤中的甲醇钠也可以用乙醇钠代替，采用乙醇作为溶剂。

实施例3

(1)二氢卟吩e6单天冬氨酸-4-三甲硅基酯的制备：

将3g二氢卟吩e6悬浮在二氯甲烷中，加入1.36g EDC和0.24g对二甲氨基吡啶，80℃下反应，TLC检测原料基本反应完毕，加入0.52gL-天冬氨酸-4-三甲硅基酯，TLC监测中间体酸酐反应完毕，停止反应，中压制备色谱分离(分离条件：40mm×400mm不锈钢柱，300-400目的硅胶，二氯甲烷∶甲醇∶冰乙酸为25∶1∶0.1为洗脱剂)，收集目标点，蒸干溶剂得到二氢卟吩e6单天冬氨酸-4-三甲硅基酯2.5g，收率为63.3％，纯度99.08％。

MS：785.4(M+1)⁺，817.5(M+Na)⁺。

(2)他拉泊芬的制备：

室温下将20g二氢卟吩e6单天冬氨酸-4-叔丁酯溶解在2000ml 1mol/L的三氟乙酸的甲醇溶液中，0℃反应至HPLC检测原料消失。冷却，用1N的稀盐酸调节pH值至3-4，黑色固体析出，乙酸乙酯萃取，蒸干，得到黑色粉末状他拉泊芬17.4g，收率94％，HPLC分析，纯度为99.03％。

实施例4

(1)二氢卟吩e6单天冬氨酸-4-叔丁酯的制备：

将30g二氢卟吩e6悬浮在DMF中，加入12.4g DCC和2.4g对二甲氨基吡啶，5℃下反应至TLC检测原料基本反应完毕，加入15.2gL-天冬氨酸-4-叔丁酯，TLC监测中间体酸酐反应完毕，停止反应，常压柱层析(分离条件：100mm×1500mm玻璃柱，200-300目的硅胶，二氯甲烷∶甲醇∶冰乙酸为30∶1∶0.1为洗脱剂)，收集目标点，蒸干溶剂得到二氢卟吩e6单天冬氨酸-4-叔丁酯23.2g，收率为60.1％，纯度99.22％。

MS：768.6(M+1)⁺，790.6(M+Na)⁺。

(2)他拉泊芬的制备：

室温下将20g二氢卟吩e6单天冬氨酸-4-叔丁酯溶解在2000ml 1mol/L的氢氧化钾水溶液中，65℃反应至HPLC检测原料消失。冷却，用1N的稀盐酸调节pH值至3-4，黑色固体析出，乙酸乙酯萃取，蒸干，得到黑色粉末状他拉泊芬17.8g，收率97％，HPLC分析，纯度为99.13％。

实施例5

(1)二氢卟吩e6单天冬氨酸-4-叔丁酯的制备：

将3g二氢卟吩e6悬浮在二氯甲烷中，加入0.96g EDC和0.24g对二甲氨基吡啶，55℃下反应，TLC检测原料基本反应完毕，加入1.9gL-天冬氨酸-4-叔丁酯，TLC监测中间体酸酐反应完毕，停止反应，采用常用的高压制备色谱分离，分离液蒸干甲醇，过滤，干燥得到产品3.1g，收率为80％，纯度99.50％。

MS：768.6(M+1)⁺，790.6(M+Na)⁺。

(2)他拉泊芬的制备：

室温下将20g二氢卟吩e6单天冬氨酸-4-叔丁酯溶解在2000ml 1mol/L的氢氧化锂水溶液中，100℃反应至HPLC检测原料消失。冷却，用1N的稀盐酸调节pH值至3-4，黑色固体析出，乙酸乙酯萃取，蒸干，得到黑色粉末状他拉泊芬17.1g，收率98％，HPLC分析，纯度为99.18％。

上文虽示出了本发明的详尽实施例，当然，本领域的技术人员在不违背本发明实质的前提下，可进行部分的修改和变更，上文的描述仅作为描述性的例证，并非作为对本发明的限制，具有上述技术特征的他拉泊芬的制备方法，均落入本发明的保护范围。

Claims (10)

1.具有通式IV的化合物，

其中，R为C1-6直链烷基或支链烷基或硅基烷基，其命名为二氢卟吩e6单天冬氨酸-4-酯。

2.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于：R优选叔丁基。

3.制备如权利要求1所述的化合物，其特征在于：其具体步骤为：二氢卟吩e6在缩合剂的作用下与L-天冬氨酸-4-酯于-20-80℃在溶剂中反应，反应完毕，经柱色谱纯化，得二氢卟吩e6单天冬氨酸-4-酯。

4.根据权利要求3所述的化合物的制备方法，其特征在于：二氢卟吩e6和L-天冬氨酸-4-酯以及缩合剂的摩尔比例为1∶0.5-2∶1-1.5；所述的缩合剂为N，N′-二环己基碳二亚胺或1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐；所述的溶剂为二氯甲烷或三氯甲烷或N’，N-二甲基甲酰胺或其混合溶剂。

5.根据权利要求3所述的化合物的制备方法，其特征在于：所述的柱色谱为常压柱色谱或中压制备色谱或高压制备色谱。

6.应用权利要求1或2所述的化合物制备他拉泊芬，其特征在于：在水解试剂的作用下，将化合物二氢卟吩e6单天冬氨酸-4-酯水解，酸化，得他拉泊芬。

7.根据权利要求6所述的他拉泊芬的制备方法，其特征在于：所述的水解试剂选自NaOH或KOH或LiOH或AlCl₃或LiI或三氟乙酸；所述的溶剂选自水或醇类或其混合溶剂；反应温度为0-100℃；酸化后pH值为3-4。

8.根据权利要求6所述的他拉泊芬的制备方法，其特征在于：所获得的他拉泊芬进一步与钠源成盐得他拉泊芬钠。

9.根据权利要求8所述的他拉泊芬的制备方法，其特征在于：所述的钠源选自醇钠或氢氧化钠或氢化钠。

10.根据权利要求9所述的他拉泊芬的制备方法，其特征在于：所述的醇钠选自甲醇钠或乙醇钠。