CN103013975A - 一种固定化酶的CaSiO3@SiO2粒子的制备方法 - Google Patents
一种固定化酶的CaSiO3@SiO2粒子的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103013975A CN103013975A CN2013100206724A CN201310020672A CN103013975A CN 103013975 A CN103013975 A CN 103013975A CN 2013100206724 A CN2013100206724 A CN 2013100206724A CN 201310020672 A CN201310020672 A CN 201310020672A CN 103013975 A CN103013975 A CN 103013975A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- casio
- sio
- particle
- aqueous solution
- enzyme
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 229910004762 CaSiO Inorganic materials 0.000 title claims abstract description 103
- 239000002245 particle Substances 0.000 title claims abstract description 100
- 108010093096 Immobilized Enzymes Proteins 0.000 title claims abstract description 43
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 26
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 67
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 37
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 37
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 24
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 20
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 claims abstract description 20
- NTHWMYGWWRZVTN-UHFFFAOYSA-N sodium silicate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-][Si]([O-])=O NTHWMYGWWRZVTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 18
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 15
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 claims abstract description 15
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims abstract description 12
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims abstract description 12
- 229910004298 SiO 2 Inorganic materials 0.000 claims description 95
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 60
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 46
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 44
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 36
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 claims description 28
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 claims description 28
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 28
- 235000019353 potassium silicate Nutrition 0.000 claims description 17
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 16
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 claims description 16
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 claims description 16
- -1 polypropylene Polymers 0.000 claims description 14
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 claims description 13
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 claims description 13
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims description 13
- BPQQTUXANYXVAA-UHFFFAOYSA-N Orthosilicate Chemical compound [O-][Si]([O-])([O-])[O-] BPQQTUXANYXVAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 12
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 claims description 12
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 12
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 claims description 11
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 claims description 11
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 claims description 11
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 claims description 11
- 229940040461 lipase Drugs 0.000 claims description 11
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 10
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 10
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 9
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 8
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 8
- FZHAPNGMFPVSLP-UHFFFAOYSA-N silanamine Chemical group [SiH3]N FZHAPNGMFPVSLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 238000002791 soaking Methods 0.000 claims description 8
- 108010029541 Laccase Proteins 0.000 claims description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 6
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 claims description 5
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 claims description 5
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 5
- 108010064696 N,O-diacetylmuramidase Proteins 0.000 claims description 5
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 claims description 5
- 238000010306 acid treatment Methods 0.000 claims description 5
- MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N diammonium hydrogen phosphate Chemical compound [NH4+].[NH4+].OP([O-])([O-])=O MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000000835 fiber Substances 0.000 claims description 5
- 239000004584 polyacrylic acid Substances 0.000 claims description 5
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 5
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 5
- SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 2-(2-methoxy-5-methylphenyl)ethanamine Chemical compound COC1=CC=C(C)C=C1CCN SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 2-Propenoic acid Natural products OC(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000013019 agitation Methods 0.000 claims description 4
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 4
- IMBKASBLAKCLEM-UHFFFAOYSA-L ferrous ammonium sulfate (anhydrous) Chemical compound [NH4+].[NH4+].[Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O IMBKASBLAKCLEM-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- 229920001519 homopolymer Polymers 0.000 claims description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 4
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 claims description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 229920001495 poly(sodium acrylate) polymer Polymers 0.000 claims description 4
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 claims description 4
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 235000017550 sodium carbonate Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 claims description 4
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 235000011008 sodium phosphates Nutrition 0.000 claims description 4
- NNMHYFLPFNGQFZ-UHFFFAOYSA-M sodium polyacrylate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)C=C NNMHYFLPFNGQFZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 4
- 238000000967 suction filtration Methods 0.000 claims description 4
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 4
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 3
- 108010059892 Cellulase Proteins 0.000 claims description 2
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 claims description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 2
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 claims description 2
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 claims description 2
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 claims description 2
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 claims description 2
- 229940106157 cellulase Drugs 0.000 claims description 2
- 229940072417 peroxidase Drugs 0.000 claims description 2
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 claims description 2
- 229920002492 poly(sulfone) Polymers 0.000 claims description 2
- 229920002239 polyacrylonitrile Polymers 0.000 claims description 2
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 claims description 2
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 claims description 2
- 229920000915 polyvinyl chloride Polymers 0.000 claims description 2
- 239000004800 polyvinyl chloride Substances 0.000 claims description 2
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 claims description 2
- ZNCPFRVNHGOPAG-UHFFFAOYSA-L sodium oxalate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)C([O-])=O ZNCPFRVNHGOPAG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 229940039790 sodium oxalate Drugs 0.000 claims description 2
- BFKJFAAPBSQJPD-UHFFFAOYSA-N tetrafluoroethene Chemical group FC(F)=C(F)F BFKJFAAPBSQJPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 claims description 2
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 2
- 229940038773 trisodium citrate Drugs 0.000 claims description 2
- 235000019263 trisodium citrate Nutrition 0.000 claims description 2
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 abstract description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 5
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 abstract description 4
- 239000000378 calcium silicate Substances 0.000 abstract 3
- 229910052918 calcium silicate Inorganic materials 0.000 abstract 3
- OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N calcium;dioxido(oxo)silane Chemical compound [Ca+2].[O-][Si]([O-])=O OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 3
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 abstract 2
- 239000004115 Sodium Silicate Substances 0.000 abstract 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 abstract 1
- 229910052911 sodium silicate Inorganic materials 0.000 abstract 1
- 229960001866 silicon dioxide Drugs 0.000 description 9
- 239000012510 hollow fiber Substances 0.000 description 8
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 8
- 239000004745 nonwoven fabric Substances 0.000 description 8
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 4
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 4
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 4
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 4
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 3
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 3
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 3
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 3
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 2
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 2
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 2
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 2
- 108010091086 Recombinases Proteins 0.000 description 2
- 102000018120 Recombinases Human genes 0.000 description 2
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 2
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 2
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 2
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 2
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 2
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 2
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 description 2
- 241001436672 Bhatia Species 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710205162 Laccase-2 Proteins 0.000 description 1
- 229910008051 Si-OH Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910006358 Si—OH Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000000274 adsorptive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 239000008204 material by function Substances 0.000 description 1
- 125000000962 organic group Chemical group 0.000 description 1
- TWNQGVIAIRXVLR-UHFFFAOYSA-N oxo(oxoalumanyloxy)alumane Chemical compound O=[Al]O[Al]=O TWNQGVIAIRXVLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000058 polyacrylate Polymers 0.000 description 1
- 229910021426 porous silicon Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 1
- 238000002444 silanisation Methods 0.000 description 1
- 238000003980 solgel method Methods 0.000 description 1
- LFQCEHFDDXELDD-UHFFFAOYSA-N tetramethyl orthosilicate Chemical compound CO[Si](OC)(OC)OC LFQCEHFDDXELDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 1
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
Abstract
本发明提供了一种固定化酶的CaSiO3SiO2粒子的制备方法。制备方法是：首先用硅酸钠和钙离子反应制备硅酸钙，经盐酸处理后得到表面含接枝介孔硅胶的CaSiO3SiO2粒子，采用物理吸附和共价键固定两种方法，将酶固定于表面含介孔结构硅胶的硅酸钙粒子即CaSiO3SiO2上，而含固定化酶的CaSiO3SiO2粒子可被接枝到不同形貌的基体材料表面，得到表面含固定化酶的CaSiO3SiO2的材料。本发明方法操作简单，不使用任何有机溶剂，固定化酶的活性高，材料本身生物相容性好，而且可体内降解，在组织工程、催化等领域有很好的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及一种固定化酶的CaSiO3SiO2粒子的制备方法，属于功能材料和生物材料领域。
背景技术
酶的固定化是近几十年来生物技术领域中最为瞩目的进展之一，这一技术既克服了游离酶催化过程中酶催化剂与底物及产物难以分离的缺点，又可使酶催化剂重复利用，极大地提高了酶催化的效率与稳定性，因此关于酶的固定化一直是生物界与化学界广泛关注的课题【高等学校化学学报，2006，06：1167-1172】。酶固定化技术的核心是载体材料的选择与制备，载体材料的物理和化学性质在很大程度上决定着固定化酶的活力。首先，载体材料要能在温和条件下与酶产生一定的结合力(或物理吸附，或化学键合)，使酶既不易脱落，又不改变其构象，不影响其催化活性；其次，载体材料要有一定的机械强度与亲水性，使酶能充分发挥其催化效能。
为了提高酶的使用效率，克服游离酶对热、酸、碱、有机溶剂等因素的不稳定性，人们对酶的固定化进行了广泛深入的研究，出现了许多固定化材料和方法，目前，酶固定化所用的载体多为聚合物，如聚丙烯膜，聚丙烯酸酯类及无机高分子材料等。其中亲水性高分子载体因具有较好的生物相容性，可使得其最大化地与酶分子接触而固定更多的酶蛋白，因而具有较为广阔的应用前景。Gupta等通过聚乙烯醇(PVA)改性聚丙烯膜，再经醛基化后获得了柔性固定化载体，并用于固定化脂肪酶。结果表明，该载体通过化学键合所固定的脂肪酶比聚丙烯膜吸附的脂肪酶具有更高的酶活力、稳定性及催化性能【催化学报，2011，12：1869-1874】。相比较而言，无机载体比有机载体更耐生物降解、有更高的热稳定性和更低的价格。多孔玻璃、多孔硅球、氧化铝及硅藻土是目前应用较为广泛的无机载体，但它们在用于固定化酶时需要经过强酸或强碱的活化，再在甲苯中长时间回流进行硅烷化，载体的制备过程繁琐，且氨基含量不高，因此制备出更加高效、低成本、易于制备的新型固定化载体和新的固定化方法是众多科研工作者的目标【生物工程学报，2004，2：287-290】。
利用二氧化硅溶胶-凝胶法进行生物分子固定化一直是一个非常活跃的研究领域。通过溶胶-凝胶技术可将许多生物分子如蛋白质、酶，甚至完整的细胞包埋到二氧化硅凝胶中。然而，与其它的生物固定化方法一样，生物分子包埋后，其生物活性下降甚至丧失是一个普遍存在的问题。目前主要是通过引入有机基团来制备二氧化硅有机/无机杂化材料。Gill等报道了使用甘油对水解前体进行化学修饰；Brennan等报道了将糖分子和硅酸甲酯硅共价结合后，水解前体可以显著地提高生物相容性；Bhatia等则通过使用模数为3.25的水玻璃水解制备了二氧化硅凝胶，优点是水解过程不产生醇，但需要在pH＝2的强酸性条件下进行；Ferrer等报道了采用特殊的真空干燥的方法也可以制备得到完全不含醇的二氧化硅凝胶。【高等学校化学学报，2011，05：1100-1105】。二氧化硅颗粒收集使用很不方便，而且在体内不能生物降解。硅酸钙力学性能优良，作为第三代生物材料之一，近年来引起研究者的重视【Biomaterials，2008，29：2588-2596】。通过盐酸处理，可以在硅酸钙表面得到具有丰富的Si-OH官能团的硅胶层，控制溶液的pH值，可以得到不同孔径的介孔硅胶结构【Acta Biomaterialia，2009，5：1686-1696】。pH＝0.5条件下处理后，硅胶表面对溶菌酶的吸附量达到195mg/g，是酸处理前蛋白质吸附量的4.5倍。赵孔银等采用紫外辐射的方法先在纤维表面接枝聚丙烯酸钠，然后利用钙离子交联的方法在纤维上接枝硅酸钙，经不同pH值的盐酸溶液处理后，得到表面具有介孔硅胶层的接枝纤维【发明专利201010576348.7】。
目前，固定化方法主要有包埋法、吸附法和交联法等。其中，运用包埋法和吸附法固定化生物活性单元时，虽然对其生物活力伤害较小，但生物活性单元易脱落，稳定性差，而共价交联法固定化生物活性单元则可克服上述不足。本发明提供了一种固定化酶的CaSiO3SiO2粒子及其制备方法。采用物理吸附和共价键固定两种方法，将酶固定于表面含介孔结构硅胶的硅酸钙粒子即CaSiO3SiO2上，而含固定化酶的CaSiO3SiO2粒子可被接枝到不同形貌的基体材料表面，得到表面含固定化酶的CaSiO3SiO2的材料。本发明方法操作简单，不使用任何有机溶剂，固定化酶的活性高，材料本身生物相容性好，而且可体内降解，在组织工程、催化等领域有很好的应用前景。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明拟解决的技术问题是固定化酶活性单元易脱落，稳定性差，生物相容性差等问题。
本发明解决所述固定化酶活性单元易脱落，稳定性差，生物相容性差等问题的技术方案是设计一种固定化酶的CaSiO3SiO2粒子的制备方法。
本发明提供了一种固定化酶的CaSiO3SiO2粒子的制备方法，其特征是采用物理吸附或共价键结合两种方法，将酶固定于表面含介孔硅胶的硅酸钙粒子即CaSiO3SiO2上，而含固定化酶的CaSiO3SiO2粒子可被接枝到不同形貌的基体材料表面，得到表面含固定化酶的CaSiO3SiO2粒子的材料。
一种固定化酶的CaSiO3SiO2粒子的制备方法，其特征是包括以下步骤：
a)配制质量百分比为0.5％-20％的硅酸钠和0-15％的其他可与钙离子反应的无机盐，配制质量百分比浓度为0.5％-20％的氯化钙水溶液，在搅拌下，将上述硅酸钠和其他可与钙离子反应的无机盐混合水溶液逐渐加入上述氯化钙水溶液中，反应0.5-2小时，静置后得到固体沉淀，用去离子水冲洗固体沉淀3-5遍，抽滤干燥，得到固体粉末；
b)用盐酸调配pH值在0.1-6.5的水溶液，将步骤a)得到的固体粉末在不同pH值的水溶液中浸泡0.5-12小时，得到表面具有介孔硅胶的硅酸钙粒子，即CaSiO3SiO2；
c)配制质量百分比为0.05％-10％的酶的水溶液，将步骤b)得到的CaSiO3SiO2粒子浸泡入上述酶的水溶液中吸附2-48小时，将吸附后的CaSiO3SiO2粒子离心分离，用去离子水洗3遍，冷冻干燥，得到物理吸附固定化酶的CaSiO3SiO2粒子；
d)将步骤b)得到的CaSiO3SiO2粒子用质量百分比为0.1％-5％的氨基硅烷水溶液浸泡2-48小时，再用质量百分比为0.5％-20％的戊二醛浸泡2-48小时，得到含醛基的CaSiO3SiO2粒子，将含醛基的CaSiO3SiO2粒子浸泡入质量百分比为0.05％-10％的酶的水溶液中2-48小时，然后将CaSiO3SiO2粒子离心分离，用去离子水洗3遍，冷冻干燥，得到共价键结合固定化酶的CaSiO3SiO2粒子。
表面含固定化酶的CaSiO3SiO2粒子的材料的制备方法，其特征是包括以下步骤：
a)将基体材料放入体积百分数为5％-50％的丙烯酸水溶液中，加入质量百分数为0.5-3％的阻聚剂硫酸亚铁铵，通入氮气，用紫外灯照射0.5-1小时，取出用去离子水洗净均聚物，用氢氧化钠中和处理后，得到聚丙烯酸钠接枝的基体材料；
b)配制质量百分比为0.5％-20％的硅酸钠和0-15％的其他可与钙离子反应的无机盐，配制质量百分比浓度为0.5％-20％的氯化钙水溶液，将步骤a)得到的接枝聚丙烯酸钠的基体材料浸泡入上述硅酸钠和其他可与钙离子反应的无机盐混合水溶液中1-12小时，取出后滴淌2-5分钟，用吸水纸吸去粘附的过多溶液，使基体材料表面的附着液尽量均匀，立即将其放入上述氯化钙水溶液中，反应0.5-4小时，用去离子水冲洗3-5遍，干燥后得到接枝固体粉末的基体材料；
c)用盐酸调配pH值在0.1-6.5的水溶液，将步骤b)得到的接枝固体粉末的基体材料在不同pH值的水溶液中浸泡0.5-12小时，得到表面接枝CaSiO3SiO2粒子的基体材料；
d)配制质量百分比为0.05％-10％的酶的水溶液，将步骤c)得到的表面接枝CaSiO3SiO2粒子的基体材料浸泡入上述酶的水溶液中吸附2-48小时，将吸附后的表面接枝CaSiO3SiO2粒子的基体材料用去离子水洗3遍，冷冻干燥，得到表面含物理吸附固定化酶的CaSiO3SiO2粒子的材料；
e)将步骤c)得到的表面接枝CaSiO3SiO2粒子的基体材料用质量百分比为0.1％-5％的氨基硅烷水溶液浸泡2-48小时，再用质量百分比为0.5％-20％的戊二醛浸泡2-48小时，得到含醛基的表面接枝CaSiO3SiO2基体材料，将该基体材料浸泡入质量百分比为0.05％-10％的酶的水溶液中2-48小时，然后将其取出，用去离子水洗3遍，冷冻干燥，得到表面含共价键结合固定化酶的CaSiO3SiO2粒子的材料。
本发明一种固定化酶的CaSiO3SiO2粒子的制备方法，是充分利用CaSiO3SiO2粒子的生物相容性和多孔性实现的，CaSiO3SiO2粒子表面的介孔硅胶壳高效固定化酶并显著提高酶分子的稳定性。
本发明表面含固定化酶的CaSiO3SiO2粒子的材料的制备方法，是利用钙离子交联使硅酸钙接枝到基体材料表面，经酸处理后，硅酸钙表层生成介孔硅胶实现的。基体材料包括聚丙烯、聚乙烯、聚氯乙烯、聚偏氟乙烯、聚四氟乙烯、聚丙烯腈、聚酯和聚砜，所述基体材料的形态包括膜、纤维、微球和颗粒。
本发明所述的其他可与钙离子反应的无机盐包括碳酸钠、磷酸钠、磷酸氢二铵、磷酸氢二钠、柠檬酸钠、草酸钠中的一种或两种以上混合物，添加的无机盐先与钙离子生成不溶性钙盐沉淀，经盐酸处理后可溶解致孔，或增加不同的功能性。
本发明所述的酶包括溶菌酶、过氧化氢酶、蛋白酶、脂肪酶、过氧化物酶、纤维素酶、漆酶、脱氢酶、凝血酶的一种或两种以上混合物。
本发明方法操作简单，不使用任何有机溶剂，固定化酶的活性高，材料本身生物相容性好，而且可体内降解，在组织工程、催化等领域有很好的应用前景。
具体实施方式
下面介绍本发明的具体实施例，但本发明不受实施例的限制。
实施例1.一种固定化溶菌酶的CaSiO3SiO2粒子的制备方法
a)配制质量百分比为0.5％的硅酸钠和0.5％的碳酸钠水溶液，配制质量百分比浓度为0.5％的氯化钙水溶液，在搅拌下，将上述硅酸钠和碳酸钠混合水溶液逐渐加入上述氯化钙水溶液中，反应0.5-2小时，静置后得到固体沉淀，用去离子水冲洗固体沉淀3-5遍，抽滤干燥，得到固体粉末；
b)用盐酸调配pH值在3的水溶液，将步骤a)得到的固体粉末在pH＝3的水溶液中浸泡0.5小时，得到表面具有介孔硅胶的硅酸钙粒子，即CaSiO3SiO2；
c)配制质量百分比为0.05％的溶菌酶的水溶液，将步骤b)得到的CaSiO3SiO2粒子浸泡入上述酶的水溶液中吸附2小时，将吸附后的CaSiO3SiO2粒子离心分离，用去离子水洗3遍，冷冻干燥，得到物理吸附固定化溶菌酶的CaSiO3SiO2粒子；
d)将步骤b)得到的CaSiO3SiO2粒子用质量百分比为0.5％的氨基硅烷水溶液浸泡2-48小时，再用质量百分比为0.5％的戊二醛浸泡24小时，得到含醛基的CaSiO3SiO2粒子，将含醛基的CaSiO3SiO2粒子浸泡入质量百分比为0.05％的溶菌酶的水溶液中48小时，然后将CaSiO3SiO2粒子离心分离，用去离子水洗3遍，冷冻干燥，得到共价键结合固定化溶菌酶的CaSiO3SiO2粒子。
实施例2.一种固定化过氧化氢酶的CaSiO3SiO2粒子的制备方法
a)配制质量百分比为20％的硅酸钠和15％的磷酸钠，配制质量百分比浓度为20％的氯化钙水溶液，在搅拌下，将上述硅酸钠和磷酸钠混合水溶液逐渐加入上述氯化钙水溶液中，反应2小时，静置后得到固体沉淀，用去离子水冲洗固体沉淀3-5遍，抽滤干燥，得到固体粉末；
b)用盐酸调配pH值在0.1的水溶液，将步骤a)得到的固体粉末在pH＝0.1的水溶液中浸泡12小时，得到表面具有介孔硅胶的硅酸钙粒子，即CaSiO3SiO2；
c)配制质量百分比为1％的过氧化氢酶的水溶液，将步骤b)得到的CaSiO3SiO2粒子浸泡入上述酶的水溶液中吸附2-48小时，将吸附后的CaSiO3SiO2粒子离心分离，用去离子水洗3遍，冷冻干燥，得到物理吸附固定化过氧化氢酶的CaSiO3SiO2粒子；
d)将步骤b)得到的CaSiO3SiO2粒子用质量百分比为5％的氨基硅烷水溶液浸泡48小时，再用质量百分比为20％的戊二醛浸泡2小时，得到含醛基的CaSiO3SiO2粒子，将含醛基的CaSiO3SiO2粒子浸泡入质量百分比为1％的过氧化氢酶的水溶液中2小时，然后将CaSiO3SiO2粒子离心分离，用去离子水洗3遍，冷冻干燥，得到共价键结合固定化过氧化氢酶的CaSiO3SiO2粒子。
实施例3.表面含固定化脂肪酶CaSiO3SiO2粒子的聚丙烯无纺布的制备方法
a)将聚丙烯无纺布放入体积百分数为5％的丙烯酸水溶液中，加入质量百分数为0.5％的阻聚剂硫酸亚铁铵，通入氮气，用紫外灯照射1小时，取出用去离子水洗净均聚物，用氢氧化钠中和处理后，得到聚丙烯酸钠接枝的聚丙烯无纺布；
b)配制质量百分比为0.5％的硅酸钠和0.5％的磷酸氢二铵，配制质量百分比浓度为0.5％的氯化钙水溶液，将步骤a)得到的接枝聚丙烯酸钠的聚丙烯无纺布浸泡入上述硅酸钠和磷酸氢二铵混合水溶液中1小时，取出后滴淌2-5分钟，用吸水纸吸去粘附的过多溶液，使基体材料表面的附着液尽量均匀，立即将其放入上述氯化钙水溶液中，反应4小时，用去离子水冲洗3-5遍，干燥后得到接枝固体粉末的聚丙烯无纺布；
c)用盐酸调配pH值在4.5的水溶液，将步骤b)得到的接枝固体粉末的基体材料在pH＝4.5的水溶液中浸泡0.5小时，得到表面接枝CaSiO3SiO2粒子的聚丙烯无纺布；
d)配制质量百分比为0.05％的脂肪酶的水溶液，将步骤c)得到的表面接枝CaSiO3SiO2粒子的基体材料浸泡入上述脂肪酶的水溶液中吸附2小时，将吸附后的表面接枝CaSiO3SiO2粒子的基体材料用去离子水洗3遍，冷冻干燥，得到表面含物理吸附固定化脂肪酶CaSiO3SiO2粒子的聚丙烯无纺布；
e)将步骤c)得到的表面接枝CaSiO3SiO2粒子的基体材料用质量百分比为0.1％的氨基硅烷水溶液浸泡2小时，再用质量百分比为0.5％的戊二醛浸泡48小时，得到含醛基的表面接枝CaSiO3SiO2基体材料，将该基体材料浸泡入质量百分比为0.05％的脂肪酶的水溶液中48小时，然后将其取出，用去离子水洗3遍，冷冻干燥，得到表面含共价键结合固定化脂肪酶CaSiO3SiO2粒子的聚丙烯无纺布。
实施例4.表面含固定化漆酶CaSiO3SiO2粒子的聚砜中空纤维膜的制备方法
a)将聚砜中空纤维膜放入体积百分数为50％的丙烯酸水溶液中，加入质量百分数为3％的阻聚剂硫酸亚铁铵，通入氮气，用紫外灯照射0.5小时，取出用去离子水洗净均聚物，用氢氧化钠中和处理后，得到聚丙烯酸钠接枝的聚砜中空纤维膜；
b)配制质量百分比为20％的硅酸钠和10％的磷酸氢二钠，配制质量百分比浓度为20％的氯化钙水溶液，将步骤a)得到的接枝聚丙烯酸钠的聚砜中空纤维膜浸泡入上述硅酸钠和磷酸氢二铵混合水溶液中12小时，取出后滴淌2-5分钟，用吸水纸吸去粘附的过多溶液，使基体材料表面的附着液尽量均匀，立即将其放入上述氯化钙水溶液中，反应0.5小时，用去离子水冲洗3-5遍，干燥后得到接枝固体粉末的聚砜中空纤维膜；
c)用盐酸调配pH值在1的水溶液，将步骤b)得到的接枝固体粉末的基体材料在pH＝1的水溶液中浸泡12小时，得到表面接枝CaSiO3SiO2粒子的聚砜中空纤维膜；
d)配制质量百分比为1％的漆酶的水溶液，将步骤c)得到的表面接枝CaSiO3SiO2粒子的基体材料浸泡入上述漆酶的水溶液中吸附2小时，将吸附后的表面接枝CaSiO3SiO2粒子的基体材料用去离子水洗3遍，冷冻干燥，得到表面含物理吸附固定化漆酶CaSiO3SiO2粒子的聚砜中空纤维膜；
e)将步骤c)得到的表面接枝CaSiO3SiO2粒子的基体材料用质量百分比为5％的氨基硅烷水溶液浸泡2小时，再用质量百分比为50％的戊二醛浸泡48小时，得到含醛基的表面接枝CaSiO3SiO2基体材料，将该基体材料浸泡入质量百分比为1％的漆酶的水溶液中2小时，然后将其取出，用去离子水洗3遍，冷冻干燥，得到表面含共价键结合固定化漆酶CaSiO3SiO2粒子的聚砜中空纤维膜。
Claims (7)
1.一种固定化酶的CaSiO3SiO2粒子的制备方法，其特征是采用物理吸附或共价键结合两种方法，将酶固定于表面含介孔硅胶的硅酸钙粒子即CaSiO3SiO2上，而含固定化酶的CaSiO3SiO2粒子可被接枝到不同形貌的基体材料表面，得到表面含固定化酶的CaSiO3SiO2粒子的材料。
2.如权利要求1所述的一种固定化酶的CaSiO3SiO2粒子的制备方法，其特征是包括以下步骤：
a)配制质量百分比为0.5％-20％的硅酸钠和0-15％的其他可与钙离子反应的无机盐，配制质量百分比浓度为0.5％-20％的氯化钙水溶液，在搅拌下，将上述硅酸钠和其他可与钙离子反应的无机盐混合水溶液逐渐加入上述氯化钙水溶液中，反应0.5-2小时，静置后得到固体沉淀，用去离子水冲洗固体沉淀3-5遍，抽滤干燥，得到固体粉末；
b)用盐酸调配pH值在0.1-6.5的水溶液，将步骤a)得到的固体粉末在不同pH值的水溶液中浸泡0.5-12小时，得到表面具有介孔硅胶的硅酸钙粒子，即CaSiO3SiO2；
c)配制质量百分比为0.05％-10％的酶的水溶液，将步骤b)得到的CaSiO3SiO2粒子浸泡入上述酶的水溶液中吸附2-48小时，将吸附后的CaSiO3SiO2粒子离心分离，用去离子水洗3遍，冷冻干燥，得到物理吸附固定化酶的CaSiO3SiO2粒子；
d)将步骤b)得到的CaSiO3SiO2粒子用质量百分比为0.1％-5％的氨基硅烷水溶液浸泡2-48小时，再用质量百分比为0.5％-20％的戊二醛浸泡2-48小时，得到含醛基的CaSiO3SiO2粒子，将含醛基的CaSiO3SiO2粒子浸泡入质量百分比为0.05％-10％的酶的水溶液中2-48小时，然后将CaSiO3SiO2粒子离心分离，用去离子水洗3遍，冷冻干燥，得到共价键结合固定化酶的CaSiO3SiO2粒子。
3.如权利要求1所述的表面含固定化酶的CaSiO3SiO2粒子的材料的制备方法，其特征是包括以下步骤：
a)将基体材料放入体积百分数为5％-50％的丙烯酸水溶液中，加入质量百分数为0.5-3％的阻聚剂硫酸亚铁铵，通入氮气，用紫外灯照射0.5-1小时，取出用去离子水洗净均聚物，用氢氧化钠中和处理后，得到聚丙烯酸钠接枝的基体材料；
b)配制质量百分比为0.5％-20％的硅酸钠和0-15％的其他可与钙离子反应的无机盐，配制质量百分比浓度为0.5％-20％的氯化钙水溶液，将步骤a)得到的接枝聚丙烯酸钠的基体材料浸泡入上述硅酸钠和其他可与钙离子反应的无机盐混合水溶液中1-12小时，取出后滴淌2-5分钟，用吸水纸吸去粘附的过多溶液，使基体材料表面的附着液尽量均匀，立即将其放入上述氯化钙水溶液中，反应0.5-4小时，用去离子水冲洗3-5遍，干燥后得到接枝固体粉末的基体材料；
c)用盐酸调配pH值在0.1-6.5的水溶液，将步骤b)得到的接枝固体粉末的基体材料在不同pH值的水溶液中浸泡0.5-12小时，得到表面接枝CaSiO3SiO2粒子的基体材料；
d)配制质量百分比为0.05％-10％的酶的水溶液，将步骤c)得到的表面接枝CaSiO3SiO2粒子的基体材料浸泡入上述酶的水溶液中吸附2-48小时，将吸附后的表面接枝CaSiO3SiO2粒子的基体材料用去离子水洗3遍，冷冻干燥，得到表面含物理吸附固定化酶的CaSiO3SiO2粒子的材料；
e)将步骤c)得到的表面接枝CaSiO3SiO2粒子的基体材料用质量百分比为0.1％-5％的氨基硅烷水溶液浸泡2-48小时，再用质量百分比为0.5％-20％的戊二醛浸泡2-48小时，得到含醛基的表面接枝CaSiO3SiO2基体材料，将该基体材料浸泡入质量百分比为0.05％-10％的酶的水溶液中2-48小时，然后将其取出，用去离子水洗3遍，冷冻干燥，得到表面含共价键结合固定化酶的CaSiO3SiO2粒子的材料。
4.如权利要求1所述的一种固定化酶的CaSiO3SiO2粒子的制备方法，其特征是所述的基体材料包括聚丙烯、聚乙烯、聚氯乙烯、聚偏氟乙烯、聚四氟乙烯、聚丙烯腈、聚酯和聚砜，所述基体材料的形态包括膜、纤维、微球和颗粒。
5.如权利要求1所述的一种固定化酶的CaSiO3SiO2粒子的制备方法，其特征是所述的酶包括溶菌酶、过氧化氢酶、蛋白酶、脂肪酶、过氧化物酶、纤维素酶、漆酶、脱氢酶、凝血酶的一种或两种以上混合物。
6.如权利要求2所述的一种固定化酶的CaSiO3SiO2粒子的制备方法，其特征是所述的其他可与钙离子反应的无机盐包括碳酸钠、磷酸钠、磷酸氢二铵、磷酸氢二钠、柠檬酸钠、草酸钠中的一种或两种以上混合物，添加的无机盐先与钙离子生成不溶性钙盐沉淀，经盐酸处理后可溶解致孔。
7.如权利要求1所述的一种固定化酶的CaSiO3SiO2粒子的制备方法，其特征是利用CaSiO3SiO2粒子的生物相容性和多孔性，高效固定化酶并显著提高酶分子的稳定性。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201310020672.4A CN103013975B (zh) | 2013-01-21 | 2013-01-21 | 一种固定化酶的CaSiO3@SiO2粒子的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201310020672.4A CN103013975B (zh) | 2013-01-21 | 2013-01-21 | 一种固定化酶的CaSiO3@SiO2粒子的制备方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN103013975A true CN103013975A (zh) | 2013-04-03 |
| CN103013975B CN103013975B (zh) | 2014-11-19 |
Family
ID=47963090
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201310020672.4A Expired - Fee Related CN103013975B (zh) | 2013-01-21 | 2013-01-21 | 一种固定化酶的CaSiO3@SiO2粒子的制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN103013975B (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105237128A (zh) * | 2015-08-27 | 2016-01-13 | 马鞍山市安康菌业有限公司 | 一种可密闭调控发酵速度的鸡腿菇高效培养基及其制备方法 |
| CN106000134A (zh) * | 2016-07-08 | 2016-10-12 | 天津工业大学 | 一种温度敏感窄孔径分布的过滤膜及其制备方法 |
| CN108743929A (zh) * | 2018-06-14 | 2018-11-06 | 四川大学 | 一种用作尿素清除剂的脲酶凝胶微球的制备方法和用途 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101058824A (zh) * | 2006-04-21 | 2007-10-24 | 北京化工大学 | 固定化酶生物催化剂及其制备方法和应用 |
| CN101182507A (zh) * | 2007-12-15 | 2008-05-21 | 宁夏大学 | 一种载体和固定化脂肪酶的制备及应用 |
| CN102061618A (zh) * | 2010-12-07 | 2011-05-18 | 天津工业大学 | 一种钙离子交联在纤维上接枝介孔硅胶的方法 |
| CN102086592A (zh) * | 2010-12-07 | 2011-06-08 | 天津工业大学 | 一种钙离子交联在纤维上接枝的聚合物水凝胶及制备方法 |
| CN102558599A (zh) * | 2012-01-16 | 2012-07-11 | 天津工业大学 | 一种表层含介孔硅胶的硅酸/海藻酸钙杂化材料的制备方法 |
-
2013
- 2013-01-21 CN CN201310020672.4A patent/CN103013975B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101058824A (zh) * | 2006-04-21 | 2007-10-24 | 北京化工大学 | 固定化酶生物催化剂及其制备方法和应用 |
| CN101182507A (zh) * | 2007-12-15 | 2008-05-21 | 宁夏大学 | 一种载体和固定化脂肪酶的制备及应用 |
| CN102061618A (zh) * | 2010-12-07 | 2011-05-18 | 天津工业大学 | 一种钙离子交联在纤维上接枝介孔硅胶的方法 |
| CN102086592A (zh) * | 2010-12-07 | 2011-06-08 | 天津工业大学 | 一种钙离子交联在纤维上接枝的聚合物水凝胶及制备方法 |
| CN102558599A (zh) * | 2012-01-16 | 2012-07-11 | 天津工业大学 | 一种表层含介孔硅胶的硅酸/海藻酸钙杂化材料的制备方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 刘志良等: "氨基化硅胶载体固定化纤维素酶的研究", 《生物技术通报》, 31 December 2010 (2010-12-31), pages 196 - 198 * |
| 吴帅宾: "基于环氧功能基团的杂化硅胶固定化酶反应器", 《中国科学: 生命科学》, vol. 40, no. 9, 31 December 2010 (2010-12-31), pages 874 - 879 * |
| 蒲小聪: "溶胶-凝胶法固定脂肪酶的方法研究", 《应用化工》, vol. 37, no. 10, 31 October 2008 (2008-10-31) * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105237128A (zh) * | 2015-08-27 | 2016-01-13 | 马鞍山市安康菌业有限公司 | 一种可密闭调控发酵速度的鸡腿菇高效培养基及其制备方法 |
| CN106000134A (zh) * | 2016-07-08 | 2016-10-12 | 天津工业大学 | 一种温度敏感窄孔径分布的过滤膜及其制备方法 |
| CN108743929A (zh) * | 2018-06-14 | 2018-11-06 | 四川大学 | 一种用作尿素清除剂的脲酶凝胶微球的制备方法和用途 |
| CN108743929B (zh) * | 2018-06-14 | 2021-07-27 | 四川大学 | 一种用作尿素清除剂的脲酶凝胶微球的制备方法和用途 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN103013975B (zh) | 2014-11-19 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103232989A (zh) | 一种固定化生物大分子的海藻酸盐杂化水凝胶膜及接枝材料的制备方法 | |
| CN104511045B (zh) | 一种含纳米银的聚乙烯醇/壳聚糖纳米纤维膜敷料的制备方法 | |
| CN102260662B (zh) | 用于固定化酶的载体及其用途和固定有酶的载体 | |
| CN101967471B (zh) | 一种以细菌纤维素小球/膜块为载体制备固定化酶的方法 | |
| Yu et al. | Stability and repeatability improvement of horseradish peroxidase by immobilization on amino-functionalized bacterial cellulose | |
| CN101329296B (zh) | 一种基于磁性碳纳米管的葡萄糖氧化酶电极及其制备方法 | |
| Metin | Immobilization of laccase onto polyethyleneimine grafted chitosan films: effect of system parameters | |
| Terentyeva et al. | Bioactive flake–shell capsules: soft silica nanoparticles for efficient enzyme immobilization | |
| CN103013975B (zh) | 一种固定化酶的CaSiO3@SiO2粒子的制备方法 | |
| CN103723725B (zh) | 硅烷化活性炭的制备方法、固载化酶的制备方法 | |
| CN108330686A (zh) | 亲水性壳聚糖改性玄武岩纤维载体的制备方法 | |
| CN102703411B (zh) | 固定生物酶的顺磁性的环氧基介孔分子筛及其制备方法 | |
| CN102061618B (zh) | 一种钙离子交联在纤维上接枝介孔硅胶的方法 | |
| Xu et al. | Immobilization of cellulase proteins on zeolitic imidazolate framework (ZIF-8)/polyvinylidene fluoride hybrid membranes | |
| CN102102097A (zh) | 基于偕胺肟pan纳米纤维膜为载体的固定过氧化氢酶的方法 | |
| CN109331798A (zh) | 一种固相微萃取材料的制备方法 | |
| CN101748113A (zh) | 磁性壳聚糖复合微球制备固定化葡萄糖异构酶的方法 | |
| Ren et al. | Multiscale immobilized lipase for rapid separation and continuous catalysis | |
| CN102952792A (zh) | 凹凸棒土负载海藻酸钠固定β-葡萄糖苷酶的制备方法 | |
| Zhao et al. | Immobilization on magnetic PVA/SA@ Fe3O4 hydrogel beads enhances the activity and stability of neutral protease | |
| CN103013976A (zh) | 一种固定化生物大分子的有机-无机复合水凝胶膜及接枝材料的制备方法 | |
| Rosa et al. | A new application of humic substances: activation of supports for invertase immobilization | |
| CN100371372C (zh) | 磷脂改性腈纶纳米纤维复合膜及其制备和固定化酶的方法 | |
| CN102703412A (zh) | 固定生物酶的顺磁性的醛基介孔分子筛及其制备方法 | |
| CN105238828B (zh) | 一种利用分子网布包埋β-葡萄糖苷酶提高纤维素水解效率并降低纤维素乙醇成本的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20141119 |