CN103013976A - 一种固定化生物大分子的有机-无机复合水凝胶膜及接枝材料的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种固定化生物大分子的有机-无机复合水凝胶膜及接枝材料的制备方法。制备方法是:在制备复合水凝胶的过程中,通过吸附、包埋或吸附包埋后再通过共价键交联的方式,将生物大分子固定到厚度可控的复合水凝胶膜上,而该复合水凝胶膜可通过钙离子交联的方式接枝到其他基体材料表面,得到固定化生物大分子的有机-无机复合水凝胶膜接枝材料。本发明方法操作简单,不使用任何有机溶剂,固定化生物大分子的活性高,材料本身生物相容性好,膜厚度可控,在组织工程、药物控制释放、催化等领域有很好的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及一种固定化生物大分子的有机-无机复合水凝胶膜及接枝材料的制备方法,属于功能材料和生物材料领域。
背景技术
固定化技术是20世纪中期发展起来的一项新型生物技术,其发展可分为两个阶段。首先是固定化酶阶段,起步于20世纪50年代;其次是固定化细胞阶段,诞生于20世纪70年代中期,但后者的应用范围和发展前景远远超过前者。1971年,在美国召开的第一届国际酶工程会议上正式提出了“固定化酶”的概念。目前,固定化生物大分子的研究越来越成为横跨材料、化学、生物、医学等领域跨的研究热点。
所谓固定化生物催化剂,是指利用化学或物理手段将游离的酶、微生物细胞、动植物细胞、细胞器等生物催化剂定位于限定的空间区域并使其保持活性和可反复使用的一种新型生物技术,因其具有小型高效、稳定性好、可重复并连续使用、易连续反应和自动化控制等优点,可以提高产物的纯度和过程效率,克服游离生物催化剂对环境敏感、性质不稳定、易失活或死亡等缺点。
固定化生物大分子技术具有处理效率高,操作稳定,对环境耐受力强,工艺流程简便等一系列优点,目前已经在工业、医学、化学分析、环境保护、能源开发等方面得到广泛的应用。实际应用中,载体及包埋条件的选择是固定化生物大分子在较长时间内保持一定的强度和生物活性,降低固定化成本并延长其使用寿命的关键。理想的载体应具备对生物的低毒性,具有多孔性,传质快、稳定性能好,没有特异性吸附,有适合引入配基的官能团、寿命长和价格低廉等特点【环境科学与技术,2012,02:167-172】。
固定化所需要的载体各有不同,比如海藻酸钠、PVA、壳聚糖、聚酯等有机高分子和磷酸钙、碳酸钙、硅胶、硅藻土等无机物。海藻酸钠和壳聚糖均是无毒、生物相容性好、可生物降解的天然高分子材料。海藻酸钠-壳聚糖已被应用于药物控制释放、固定化生物催化剂、细胞培养及微反应器、人体器官和基因运载工具以及分离介质等领域,效果良好,应用前景十分广阔【仲恺农业技术学院学报,2007,04:1-5】。海藻酸钠作为天然高分子材料因其安全环保,价格低廉,对细胞相对毒性小,固定化成形方便,传质性能好,广泛应用于生物大分子的固定中,如固定化脂肪酶、谷氨酰胺转胺酶等。海藻酸钠固定化生物大分子需钙离子形成凝胶,能有效地包埋生物大分子,生物大分子活收率较高,但钙化的海藻酸钠凝胶稳定性差,容易在多离子作用或在钙离子扩散而钾、钠离子大量聚集时变软,出现“漏酶”现象。壳聚糖的氨基酸在适当pH下容易质子化而形成阳离子聚电解质,海藻酸钠的羧基在水中易离子化成阴离子聚电解质,聚阳离子和聚阴离子可互相吸引形成稳定的聚电解质化合物。添加壳聚糖于海藻酸钙凝胶中,利用壳聚糖氨基组与海藻酸羧基组的结合作用可加强海藻酸钙稳固性。【食品工业科技,2011,05:209-211.】
利用无机物进行生物分子固定化也是一个非常活跃的研究领域。通过溶胶-凝胶技术可将许多生物分子如蛋白质、酶,甚至完整的细胞包埋到二氧化硅凝胶中。然而,与其它的生物固定化方法一样,生物分子包埋后,其生物活性下降甚至丧失是一个普遍存在的问题。目前主要是通过引入有机基团来制备二氧化硅有机/无机杂化材料。Gill等报道了使用甘油对水解前体进行化学修饰;Brennan等报道了将糖分子和硅酸甲酯硅共价结合后,水解前体可以显著地提高生物相容性【高等学校化学学报,2011,05:1100-1105】。此外,很多无机物粒子虽然固定化生物大分子效率高,稳定性好,但是无机物颗粒收集使用很不方便,有些无机物表面生物相容性差,固定化后生物大分子容易失活。
用有机-无机复合材料进行生物大分子的固定是近年来研究的新兴方向。马文韬等以硅基介孔分子筛MCM-41为载体,在二氧化硅载体的介孔孔道中固定生物酶分子,再将制备好的固定化酶生物催化剂二次固定于海藻酸钙凝胶体中【发明专利CN200810034104.9】。本发明方法采用了物理吸附包埋法和溶胶-凝胶法,固定酶生物催化剂具有较好的酶分散性和较高的载酶量,并且具有较高的酶活性回收率和重复利用率。
固定化生物大分子的方法主要有吸附、包埋、共价键结合和交联法等,其中包埋法不需要化学修饰,具有反应条件温和、很少改变生物大分子结构、生物活力损失小等优点。海藻酸钠是最为常见的包埋材。二价金属离子如Ca2+与可溶性海藻酸钠反应生成海藻酸钙凝胶,而海藻酸钠可与戊二醛基形成Schiff氏碱,可增加海藻酸钙凝胶的强度。张佳宁,宋云花等以海藻酸钠-壳聚糖为包埋材料,戊二醛为交联剂,固定化细胞PLA2,最终选择出最优的固定化条件【食品工业科技,2012,33(21):201-205】。
本专利提供了一种固定化生物大分子的有机-无机复合水凝胶膜及接枝材料的制备方法,其特征是在制备复合水凝胶的过程中,通过吸附、包埋或吸附包埋后再通过共价键交联的方式,将生物大分子固定到厚度可控的复合水凝胶膜上,而该复合水凝胶膜可通过钙离子交联的方式接枝到其他基体材料表面,得到含固定生物大分子复合凝胶膜的接枝材料。
发明内容
针对现有技术的不足,本发明拟解决的技术问题是海藻酸钙凝胶强度低、无机物固定化生物分子活性差、颗粒状材料使用不方便、生物分子容易泄露等问题。
本发明解决所述海藻酸钙凝胶强度低、无机物固定化生物分子活性差、颗粒状材料使用不方便、生物分子容易泄露等问题的技术方案是设计一种固定化生物大分子的有机-无机复合水凝胶膜及接枝材料。
本发明提供了一种固定化生物大分子的有机-无机复合水凝胶膜的制备方法,其特征是包括以下步骤:
a)配制质量百分比为0.05%-10%的生物大分子的缓冲水溶液,在一个玻璃瓶中加入无机物粉体,然后加入0.1-10ml的含生物大分子的缓冲水溶液,在4-40℃下震荡吸附2-48小时,将吸附后的无机物离心分离,用去离子水洗3遍,冷冻干燥,得到吸附生物大分子的无机物;
b)将步骤a)得到的吸附生物大分子的无机物分散到水溶液中,然后加入海藻酸钠粉末,搅拌溶解,超声分散使吸附生物大分子的无机物与海藻酸钠均匀混合,得到海藻酸钠质量百分比为0.5%-5%,吸附生物大分子的无机物占海藻酸钠质量百分比为1%-70%的粘稠混合物,静置消去气泡;
c)将步骤b)得到吸附生物大分子的无机物与海藻酸钠粘稠混合物取1-5g,倒入表面干洁的平放的玻璃片上,用厚度为20-1000μm的刮膜棒刮平,形成均匀厚度的膜,然后立即连同玻璃片一起浸泡入质量百分比为0.5%-50%的氯化钙溶液中,保持浸泡0.5-5小时,用去离子水冲洗3-5遍,得到厚度在10-900μm的吸附包埋固定化生物大分子的有机-无机复合水凝胶膜;
d)将步骤c)得到的吸附包埋固定化生物大分子的有机-无机复合水凝胶膜浸泡入质量百分比为0.5%-50%的交联剂溶液中交联0.5-48小时,用去离子水冲洗3-5遍,得到共价键交联固定生物大分子的有机-无机复合水凝胶膜。
本发明还提供了一种固定化生物大分子的有机-无机复合水凝胶膜接枝材料的制备方法,其特征是包括以下步骤:
a)将基体材料放入体积百分数为5%-50%的丙烯酸水溶液中,加入质量百分数为0.5%-3%的阻聚剂硫酸亚铁铵,通入氮气,用紫外灯照射0.1-1小时,取出用去离子水洗净均聚物,用氢氧化钠中和处理后,得到聚丙烯酸钠接枝的基体材料;
b)配制质量百分比为0.05%-10%的生物大分子的缓冲水溶液,在一个玻璃瓶中加入无机物粉体,然后加入0.1-10ml的含生物大分子的缓冲水溶液,在4-40℃下震荡吸附2-48小时,将吸附后的无机物离心分离,用去离子水洗3遍,冷冻干燥,得到吸附生物大分子的无机物;
c)将步骤b)得到的吸附生物大分子的无机物分散到水溶液中,然后加入海藻酸钠粉末,搅拌溶解,超声分散使吸附生物大分子的无机物与海藻酸钠均匀混合,得到海藻酸钠质量百分比为0.5%-5%,吸附生物大分子的无机物占海藻酸钠质量百分比为1%-70%的粘稠混合物,静置消去气泡;
d)将步骤c)得到的吸附生物大分子的无机物与海藻酸钠粘稠混合物取1-5g,倒入平整放置好的步骤a)得到的聚丙烯酸钠接枝的基体材料上,用厚度为20-1000μm的刮膜棒刮平,形成均匀厚度的膜,然后立即将基体材料浸泡入质量百分比为0.5%-50%的氯化钙溶液中,保持浸泡0.5-5小时,用去离子水冲洗3-5遍,得到厚度在10-900μm的吸附包埋固定化生物大分子的有机-无机复合水凝胶膜接枝材料;
e)将步骤d)得到的吸附包埋固定化生物大分子的有机-无机复合水凝胶膜接枝材料浸泡入质量百分比为0.5%-50%的交联剂溶液中交联0.5-48小时,用去离子水冲洗3-5遍,得到共价键交联固定生物大分子的有机-无机复合水凝胶膜接枝材料。
本发明所述的生物大分子包括酶、蛋白质、生长因子、DNA、RNA,所述的无机物包括磷酸钙、碳酸钙、草酸钙、硅酸钙、二氧化硅。
本发明所述的基体材料包括聚丙烯、聚乙烯、聚四氟乙烯、聚丙烯腈、聚酯和聚砜,所述的基体材料的形态包括膜和纤维无纺布。
本发明所述的交联剂包括戊二醛、京尼平、环氧氯丙烷、碳二亚胺、琥珀酸酐、重氮盐的一种或两种以上混合物。
本发明所述的缓冲水溶液包括PBS缓冲水溶液、Tris-HCl缓冲水溶液、SDS缓冲溶液、硼酸盐缓冲水溶液。
本发明方法操作简单,不使用任何有机溶剂,固定化生物大分子的活性高,材料本身生物相容性好,膜厚度可控,在组织工程、药物控制释放、催化等领域有很好的应用前景。
具体实施方式
下面介绍本发明的具体实施例,但本发明不受实施例的限制。
实施例1.一种固定化溶菌酶的海藻酸钙-磷酸钙复合水凝胶膜的制备方法
a)配制质量百分比为0.05%的溶菌酶的缓冲水溶液,在一个玻璃瓶中加入磷酸钙粉体,然后加入10ml的含溶菌酶的缓冲水溶液,在4℃下震荡吸附2小时,将吸附后的磷酸钙离心分离,用去离子水洗3遍,冷冻干燥,得到吸附溶菌酶的磷酸钙;
b)将步骤a)得到的吸附溶菌酶的磷酸钙分散到水溶液中,然后加入海藻酸钠粉末,搅拌溶解,超声分散使吸附溶菌酶的磷酸钙与海藻酸钠均匀混合,得到海藻酸钠质量百分比为0.5%,吸附溶菌酶的磷酸钙占海藻酸钠质量百分比为10%的粘稠混合物,静置消去气泡;
c)将步骤b)得到吸附溶菌酶的磷酸钙与海藻酸钠粘稠混合物取1g,倒入表面干洁的平放的玻璃片上,用厚度为400μm的刮膜棒刮平,形成均匀厚度的膜,然后立即连同玻璃片一起浸泡入质量百分比为0.5%的氯化钙溶液中,保持浸泡5小时,用去离子水冲洗3-5遍,得到吸附包埋固定化溶菌酶的海藻酸钙-磷酸钙复合水凝胶膜;
d)将步骤c)得到的吸附包埋固定化溶菌酶的海藻酸钙-磷酸钙复合水凝胶膜浸泡入质量百分比为0.5%的戊二醛溶液中交联48小时,用去离子水冲洗3-5遍,得到戊二醛共价键交联固定溶菌酶的海藻酸钙-磷酸钙复合水凝胶膜。
实施例2.一种固定化牛血清白蛋白的海藻酸钙-碳酸钙复合水凝胶膜的制备方法
a)配制质量百分比为10%的牛血清白蛋白的缓冲水溶液,在一个玻璃瓶中加入碳酸钙粉体,然后加入0.1ml的含牛血清白蛋白的缓冲水溶液,在40℃下震荡吸附48小时,将吸附后的碳酸钙离心分离,用去离子水洗3遍,冷冻干燥,得到吸附牛血清白蛋白的碳酸钙;
b)将步骤a)得到的吸附牛血清白蛋白的碳酸钙分散到水溶液中,然后加入海藻酸钠粉末,搅拌溶解,超声分散使吸附牛血清白蛋白的碳酸钙与海藻酸钠均匀混合,得到海藻酸钠质量百分比为5%,吸附牛血清白蛋白的碳酸钙占海藻酸钠质量百分比为70%的粘稠混合物,静置消去气泡;
c)将步骤b)得到吸附牛血清白蛋白的碳酸钙与海藻酸钠粘稠混合物取5g,倒入表面干洁的平放的玻璃片上,用厚度为1000μm的刮膜棒刮平,形成均匀厚度的膜,然后立即连同玻璃片一起浸泡入质量百分比为50%的氯化钙溶液中,保持浸泡0.5小时,用去离子水冲洗3-5遍,得到吸附包埋固定化牛血清白蛋白的海藻酸钙-碳酸钙复合水凝胶膜;
d)将步骤c)得到的吸附包埋固定化牛血清白蛋白的海藻酸钙-碳酸钙复合水凝胶膜浸泡入质量百分比为1%的京尼平溶液中交联48小时,用去离子水冲洗3-5遍,得到京尼平共价键交联固定牛血清白蛋白的海藻酸钙-碳酸钙复合水凝胶膜。
实施例3.一种固定化成纤维细胞生长因子的海藻酸钙-硅酸钙复合水凝胶膜的制备方法
a)配制质量百分比为0.5%的成纤维细胞生长因子的缓冲水溶液,在一个玻璃瓶中加入硅酸钙粉体,然后加入5ml的含成纤维细胞生长因子的缓冲水溶液,在25℃下震荡吸附48小时,将吸附后的硅酸钙离心分离,用去离子水洗3遍,冷冻干燥,得到吸附成纤维细胞生长因子的硅酸钙;
b)将步骤a)得到的吸附成纤维细胞生长因子的硅酸钙分散到水溶液中,然后加入海藻酸钠粉末,搅拌溶解,超声分散使吸附成纤维细胞生长因子的硅酸钙与海藻酸钠均匀混合,得到海藻酸钠质量百分比为2%,吸附成纤维细胞生长因子的硅酸钙占海藻酸钠质量百分比为50%的粘稠混合物,静置消去气泡;
c)将步骤b)得到吸附成纤维细胞生长因子的硅酸钙与海藻酸钠粘稠混合物取2g,倒入表面干洁的平放的玻璃片上,用厚度为200μm的刮膜棒刮平,形成均匀厚度的膜,然后立即连同玻璃片一起浸泡入质量百分比为2%的氯化钙溶液中,保持浸泡2小时,用去离子水冲洗3-5遍,得到吸附包埋固定化成纤维细胞生长因子的海藻酸钙-硅酸钙复合水凝胶膜;
d)将步骤c)得到的吸附包埋固定化成纤维细胞生长因子的海藻酸钙-硅酸钙复合水凝胶膜浸泡入质量百分比为1%的碳二亚胺溶液中交联48小时,用去离子水冲洗3-5遍,得到碳二亚胺共价键交联固定成纤维细胞生长因子的海藻酸钙-硅酸钙复合水凝胶膜。
实施例4.一种固定化小鼠精子DNA的海藻酸钙-二氧化硅复合水凝胶膜接枝聚丙烯无纺布的制备方法
a)将聚丙烯无纺布放入体积百分数为30%的丙烯酸水溶液中,加入质量百分数为1%的阻聚剂硫酸亚铁铵,通入氮气,用紫外灯照射0.5小时,取出用去离子水洗净均聚物,用氢氧化钠中和处理后,得到聚丙烯酸钠接枝的聚丙烯无纺布;
b)配制质量百分比为0.05%的小鼠精子DNA的缓冲水溶液,在一个玻璃瓶中加入二氧化硅粉体,然后加入0.5ml的含小鼠精子DNA的缓冲水溶液,在4℃下震荡吸附24小时,将吸附后的二氧化硅离心分离,用去离子水洗3遍,冷冻干燥,得到吸附小鼠精子DNA的二氧化硅;
c)将步骤b)得到的吸附小鼠精子DNA的二氧化硅分散到水溶液中,然后加入海藻酸钠粉末,搅拌溶解,超声分散使吸附小鼠精子DNA的二氧化硅与海藻酸钠均匀混合,得到海藻酸钠质量百分比为3%,吸附小鼠精子DNA的二氧化硅占海藻酸钠质量百分比为20%的粘稠混合物,静置消去气泡;
d)将步骤c)得到吸附小鼠精子DNA的二氧化硅与海藻酸钠粘稠混合物取1g,倒入平整放置好的步骤a)得到的聚丙烯酸钠接枝的聚丙烯无纺布上,用厚度为200μm的刮膜棒刮平,形成均匀厚度的膜,然后立即将聚丙烯无纺布浸泡入质量百分比为5%的氯化钙溶液中,保持浸泡5小时,用去离子水冲洗3-5遍,得到吸附包埋固定化小鼠精子DNA的海藻酸钙-二氧化硅复合水凝胶膜接枝聚丙烯无纺布;
e)将步骤d)得到的吸附包埋固定化小鼠精子DNA的海藻酸钙-二氧化硅复合水凝胶膜接枝聚丙烯无纺布浸泡入质量百分比为1%的重氮盐溶液中交联0.5-48小时,用去离子水冲洗3-5遍,得到重氮盐共价键交联固定小鼠精子DNA的海藻酸钙-二氧化硅复合水凝胶膜接枝聚丙烯无纺布。
Claims (9)
1.一种固定化生物大分子的有机-无机复合水凝胶膜及接枝材料的制备方法,其特征是在制备复合水凝胶的过程中,通过吸附、包埋或吸附包埋后再通过共价键交联的方式,将生物大分子固定到厚度可控的复合水凝胶膜上,而该复合水凝胶膜可通过钙离子交联的方式接枝到其他基体材料表面,得到固定化生物大分子的有机-无机复合水凝胶膜接枝材料。
2.如权利要求1所述的一种固定化生物大分子的有机-无机复合水凝胶膜制备方法,其特征是包括以下步骤:
a)配制质量百分比为0.05%-10%的生物大分子的缓冲水溶液,在一个玻璃瓶中加入无机物粉体,然后加入0.1-10ml的含生物大分子的缓冲水溶液,在4-40℃下震荡吸附2-48小时,将吸附后的无机物离心分离,用去离子水洗3遍,冷冻干燥,得到吸附生物大分子的无机物;
b)将步骤a)得到的吸附生物大分子的无机物分散到水溶液中,然后加入海藻酸钠粉末,搅拌溶解,超声分散使吸附生物大分子的无机物与海藻酸钠均匀混合,得到海藻酸钠质量百分比为0.5%-5%,吸附生物大分子的无机物占海藻酸钠质量百分比为1%-70%的粘稠混合物,静置消去气泡;
c)将步骤b)得到吸附生物大分子的无机物与海藻酸钠粘稠混合物取1-5g,倒入表面干洁的平放的玻璃片上,用厚度为20-1000μm的刮膜棒刮平,形成均匀厚度的膜,然后立即连同玻璃片一起浸泡入质量百分比为0.5%-50%的氯化钙溶液中,保持浸泡0.5-5小时,用去离子水冲洗3-5遍,得到厚度在10-900μm的吸附包埋固定化生物大分子的有机-无机复合水凝胶膜;
d)将步骤c)得到的吸附包埋固定化生物大分子的有机-无机复合水凝胶膜浸泡入质量百分比为0.5%-50%的交联剂溶液中交联0.5-48小时,用去离子水冲洗3-5遍,得到共价键交联固定生物大分子的有机-无机复合水凝胶膜。
3.如权利要求1所述的一种固定化生物大分子的有机-无机复合水凝胶膜接枝材料的制备方法,其特征是包括以下步骤:
a)将基体材料放入体积百分数为5%-50%的丙烯酸水溶液中,加入质量百分数为0.5-3%的阻聚剂硫酸亚铁铵,通入氮气,用紫外灯照射0.1-1小时,取出用去离子水洗净均聚物,用氢氧化钠中和处理后,得到聚丙烯酸钠接枝的基体材料;
b)配制质量百分比为0.05%-10%的生物大分子的缓冲水溶液,在一个玻璃瓶中加入无机物粉体,然后加入0.1-10ml的含生物大分子的缓冲水溶液,在4-40℃下震荡吸附2-48小时,将吸附后的无机物离心分离,用去离子水洗3遍,冷冻干燥,得到吸附生物大分子的无机物;
c)将步骤b)得到的吸附生物大分子的无机物分散到水溶液中,然后加入海藻酸钠粉末,搅拌溶解,超声分散使吸附生物大分子的无机物与海藻酸钠均匀混合,得到海藻酸钠质量百分比为0.5%-5%,吸附生物大分子的无机物占海藻酸钠质量百分比为1%-70%的粘稠混合物,静置消去气泡;
d)将步骤c)得到吸附生物大分子的无机物与海藻酸钠粘稠混合物取1-5g,倒入平整放置好的步骤a)得到的聚丙烯酸钠接枝的基体材料上,用厚度为20-1000μm的刮膜棒刮平,形成均匀厚度的膜,然后立即将基体材料浸泡入质量百分比为0.5%-50%的氯化钙溶液中,保持浸泡0.5-5小时,用去离子水冲洗3-5遍,得到厚度在10-900μm的吸附包埋固定化生物大分子的有机-无机复合水凝胶膜接枝材料;
e)将步骤d)得到的吸附包埋固定化生物大分子的有机-无机复合水凝胶膜接枝材料浸泡入质量百分比为0.5%-50%的交联剂溶液中交联0.5-48小时,用去离子水冲洗3-5遍,得到共价键交联固定生物大分子的有机-无机复合水凝胶膜接枝材料。
4.如权利要求1所述的一种固定化生物大分子的有机-无机复合水凝胶膜及接枝材料的制备方法,其特征是所述的生物大分子包括酶、蛋白质、生长因子、DNA、RNA。
5.如权利要求1所述的一种固定化生物大分子的有机-无机复合水凝胶膜及接枝材料的制备方法,其特征是所述的无机物包括磷酸钙、碳酸钙、草酸钙、硅酸钙、二氧化硅。
6.如权利要求1所述的一种固定化生物大分子的有机-无机复合水凝胶膜及接枝材料的制备方法,其特征是所述的基体材料包括聚丙烯、聚乙烯、聚四氟乙烯、聚丙烯腈、聚酯和聚砜,所述的基体材料的形态包括膜和纤维无纺布。
7.如权利要求1所述的一种固定化生物大分子的有机-无机复合水凝胶膜及接枝材料的制备方法,其特征是所述的交联剂包括戊二醛、京尼平、环氧氯丙烷、碳二亚胺、琥珀酸酐、重氮盐中的一种或两种以上混合物。
8.如权利要求1所述的一种固定化生物大分子的有机-无机复合水凝胶膜及接枝材料的制备方法,其特征是得到的固定化生物大分子的有机-无机复合水凝胶膜及接枝材料制备方法简单,生物相容性好,膜厚度可控。
9.如权利要求2所述的一种固定化生物大分子的有机-无机复合水凝胶膜及接枝材料的制备方法,其特征是所述的缓冲水溶液包括PBS缓冲水溶液、Tris-HCl缓冲水溶液、SDS缓冲溶液、硼酸盐缓冲水溶液。
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