CN103013855A - 一种复合微生物制剂及其生产工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种复合微生物制剂及其生产工艺，该复合微生物制剂原料重量百分比包括以下组分：浓缩光合菌剂45％～50％，多菌剂45％～50％，复合保护剂2％～3％；所述的多菌剂包括酵母菌、枯草芽孢杆菌、硝化细菌、乳酸菌其中的至少一种或任意组合；所述的复合保护剂各组分重量百分比为甘油40％～50％，吐温2020％～30％，硼酸钠30％～40％。本发明的复合微生物制剂明显提高了水体中的溶氧量，提高鲈鱼苗、虾苗和蟹苗等水产产品品的成活率，降低了水体COD和氨氮含量。且生产过程很少产生废气、废渣和废水污染。因此，该套生产工艺的产品和副产品均能充分利用，达到无危害、无污染，属于节能减排生产。
Description
技术领域
本发明涉及一种水产养殖技术领域，尤其涉及一种复合微生物制剂及其生产工艺。
背景技术
随着海水养殖业的快速发展，海洋环境和海水养殖环境日益恶化。据资料表明，我国的主要养殖区，约有50％的池塘受到较严重的污染，30％的池塘受到中度污染，有20％的池塘受到轻度污染。主要表现在：一是在养殖过程投放的饲料不充分利用、动物排泄物造成的产生大量的富营养养殖废水。当虾池排放的污水物质总量超出海洋区域内环境容量的时，造成海洋水质污染和富营养化。二是在养殖过程中使用消毒剂、抗菌素对海洋和养殖环境造成较大的影响。富含消毒剂和抗菌素的养殖水大量排放后，对近岸水域微生物生态系统产生了直接的影响。各类污染物质进入近岸水域生态环境后，其最终的降解和净化都与微生物的活动有关。当正常的微生物生态系统受到干扰或破坏之后，污染物质的分解速率易受到影响，自净能力明显降低，这样将会导致水质的进一步恶化。三是养殖废水排放造成自身污染。养殖水大量排放污染到近岸水域的同时，造成近岸水域污染后，海水中的氨氮和硫化物等有害物质含量升高。当这种受污染的海水再抽(放)使用，也造成了自身污染，危及养殖业的本身。
随着水质恶化的日益加剧，全面改善水环境的微生物制剂已成为当今消费者追求的目标。如何合理利用水资源，建立绿色无公害生态养殖模式是日前急待解决的问题。
微生物制剂又称“有益微生物”等，它是以直接从自然界中分离的有益菌为主体开发出来的新型产品，是指一类有助于稳定宿主固定菌群，对宿主能产生有益影响的活菌制剂，微生物制剂对水产品无毒副作用，无残留性和抗药性，能有效净化养殖废水。微生物技术作为一项高效、节能的环保技术，已被国外广泛用于治理水域环境。本发明研究开发复合微生物制剂产品，并应用于水产养殖，探讨了其使用效果。证实了它在海水养殖业中应用前景广、潜力大，具有广泛的经济效益和社会效益。
发明内容
本发明的目的是提供一种用于复合微生物制剂及其生产方法，采用高浓度光合菌、乳酸菌、放线菌、枯草芽孢杆菌、硫化细菌、硝化细菌、反硝化细菌等80多种微生物复合培养，开发出新型无毒微生物制剂。将其用于改善养殖环境，净化养殖水质，以提高养殖生物成活率，减少海洋环境污染。
本发明通过以下技术方案予以实现：
一种复合微生物制剂，其特征在于，该复合微生物制剂原料重量百分比包括以下组分：浓缩光合菌剂45％～50％，多菌剂45％～50％，复合保护剂2％～3％；
所述的多菌剂包括酵母菌、枯草芽孢杆菌、硝化细菌、乳酸菌其中的至少一种或任意组合；所述的复合保护剂各组分重量百分比为甘油40％～50％，吐温2020％～30％，硼酸钠30％～40％。
所述的复合微生物制剂，其特征在于，其中的光合菌剂采用如下配方发酵培养：培养基分为种子培养基和生产培养基，种子培养基配方为：醋酸钠2.5g～3.5g，氯化铵0.6g～1.4g，磷酸二氢钾0.5g～1.5g，硫酸镁0.3g～0.8g，氯化钠2.0g，碳酸氢钠0.5g～1.5g，复合B族维生素溶液1ml～2ml，酵母膏0.1g～0.5g，矿物质水1000ml，PH6.8～7.0；其生产培养基配方为：醋酸钠2.5g～3.5g，氯化铵0.6g～1.4g，磷酸二氢钾0.5g～1.5g，硫酸镁0.3g～0.8g，氯化钠2.0g，碳酸氢钠0.5g～1.5g，复合B族维生素1ml～2ml，亚硫酸钠1.5g，自来水1000ml，PH6.8～7.0。
所述的复合微生物制剂，其特征在于，多菌剂菌种采用如下配方发酵培养：甘蔗废糖蜜40g～60g，氯化铵4g～6g，豆粕45g～65g，磷酸二氢钾2g～4g，硫酸镁0.3g～1.2g，酵母膏0.3g，淀粉0.5g～3g，碳酸钙1g，自来水1000ml，PH6.8～7.0。
同时，本发明还提供一种复合微生物制剂的生产工艺，其特征在于，它包括以下步骤：
(1)制备浓缩光合菌剂
(2)制备多菌剂，先培养多菌种，然后制得多菌剂；
(3)混合，将制得的光合细菌高浓缩剂和多菌剂混合按体积1∶1的比例混合，并加入复合保护剂；
(4)灌装；
(5)成品。
所述步骤(1)制备浓缩光合菌剂之前，还有如下依次步骤：光合细菌富集、光合细菌分离、光合细菌纯化、光合细菌鉴定，筛选光合菌剂发酵培养基，培养光合菌剂；所述步骤(2)制备多菌剂之前，还有如下依次步骤：多种菌菌种驯化，筛选多菌种发酵培养基。
所述步骤(1)制备浓缩光合菌剂是先用1000ml热水煮20g淀粉，淀粉糊化后加入羧甲基水溶性壳聚糖80g，共煮10min，待冷却后补足冷开水到1000g即得到菌剂浓缩剂，使用时将1kg加入1000kg的光合细菌菌液中，混匀，静置24小时后移去60％上清液，即得下层高浓缩光和菌剂。
所述的光合细菌富集，其富集培养基为：富集培养基：醋酸钠3.2g，氯化铵1.1g，磷酸二氢钾1.2g，硫酸镁0.50g，氯化钠2.0g，碳酸氢钠1.0g，酵母膏0.10g，复合B族维生素溶液1.5mL，纯化水1000mL，pH 6.8～7.0；
所述的光合细菌分离，其分离培养基为：醋酸钠3.2g，氯化铵1.1g，磷酸二氢钾 1.2g，硫酸镁0.50g，氯化钠2.0g，碳酸氢钠1.0g，酵母膏0.10g，复合B族维生素溶液1.5mL，纯化水1000mL，pH 6.8～7.0，1.8％琼脂粉；
所述的光合细菌纯化是将待分离样品加到富集培养液中，胶塞密封后厌氧光照培养，当培养液呈红棕色时，再转接到新鲜培养液二次富集，用平板倾注法厌氧分离。倾注法厌氧分离是将分离平板置于干燥锅内，在锅底添加焦性没食子酸与碳酸钠的混合物，用真空泵抽取锅内空气，充入氮气，以此操作3次后，于光照下培养7天，挑取平板上不同特征的菌落斜面培养。
所述培养光合菌剂是先将培养基组份按5L量配成10∶1，既浓缩母液为500ml，然后煮沸消毒，冷却后接到新洗净的5L塑料桶中，按8％接种量接入400mL新鲜菌液，直接用自来水补足到5L，同上连续接种培养30批，检测每两批的活菌总数及杂菌率，同时用富集培养基做比较，与第0批相比计算第30批的活菌保持率。
所述步骤(2)制备多菌剂是用20L发酵罐连续发酵30批，每批发酵液作为下批的菌种液，发酵温度30℃，摇床转数为200rpm，通气比为1∶0.5，接种量8％，发酵25h，每两批发酵液检测一次其活菌总数和杂菌率。
所述的复合B族维生素包括：维生素B1300mg，维生素B260mg，维生素B690mg，烟酰胺300mg，泛酸钙30mg，蒸馏水1000mL。
本发明的有益效果为：明显提高了水体中的溶氧量，提高鲈鱼苗、虾苗和蟹苗等水产产品品的成活率，降低了水体COD和氨氮含量。本发明产品生产过程很少产生废气、废渣和废水污染，在浓缩光合细菌过程中产生的废弃液可以用于蔬菜种植，而且该废弃液可以提高蔬菜产量和品质。因此，该套生产工艺的产品和副产品均能充分利用，达到无危害、无污染，属于节能减排生产。
附图说明
图1为本发明所述的一种复合微生物制剂及其生产工艺的流程图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式并不局限于实施例表示的范围。
实施例1
一种复合微生物制剂，其特征在于，该复合微生物制剂原料重量百分比包括以下组分：浓缩光合菌剂48％，多菌剂49％，复合保护剂3％；
所述的多菌剂包括酵母菌、枯草芽孢杆菌、硝化细菌、乳酸菌其中的至少一种或任意组合； 所述的复合保护剂各组分重量百分比为甘油40％，吐温2025％，硼酸钠35％。
所述的复合微生物制剂，其特征在于，其中的光合菌剂采用如下配方发酵培养：培养基分为种子培养基和生产培养基，种子培养基配方为：醋酸钠2.5g，氯化铵1g，磷酸二氢钾1g，硫酸镁0.5g，氯化钠2.0g，碳酸氢钠1g，复合B族维生素溶液1.5ml，酵母膏1g，矿物质水1000ml，PH6.8～7.0；其生产培养基配方为：醋酸钠2.5g，氯化铵1g，磷酸二氢钾1g，硫酸镁0.5g，氯化钠2.0g，碳酸氢钠1g，复合B族维生素1.5ml，亚硫酸钠1.5g，自来水1000ml，PH6.8～7.0。
所述的复合微生物制剂，其特征在于，多菌剂菌种采用如下配方发酵培养：甘蔗废糖蜜40g，氯化铵4.5g，豆粕50g，磷酸二氢钾2.5g，硫酸镁0.5g，酵母膏0.3g，淀粉1.5g，碳酸钙1g，自来水1000ml，PH6.8～7.0。
同时，本发明还提供一种复合微生物制剂的生产工艺，其特征在于，它包括以下步骤：
(1)制备浓缩光合菌剂
(2)制备多菌剂，先培养多菌种，然后制得多菌剂；
(3)混合，将制得的光合细菌高浓缩剂和多菌剂混合按体积1∶1的比例混合，并加入复合保护剂；
(4)灌装；
(5)成品。
所述步骤(1)制备浓缩光合菌剂之前，还有如下依次步骤：光合细菌富集、光合细菌分离、光合细菌纯化、光合细菌鉴定，筛选光合菌剂发酵培养基，培养光合菌剂；所述步骤
(2)制备多菌剂之前，还有如下依次步骤：多种菌菌种驯化，筛选多菌种发酵培养基。
所述步骤(1)制备浓缩光合菌剂是先用1000ml热水煮20g淀粉，淀粉糊化后加入羧甲基水溶性壳聚糖80g，共煮10min，待冷却后补足冷开水到1000g即得到菌剂浓缩剂，使用时将1kg加入1000kg的光合细菌菌液中，混匀，静置24小时后移去60％上清液，即得下层高浓缩光和菌剂。
所述的光合细菌富集，其富集培养基为：富集培养基：醋酸钠3.2g，氯化铵1.1g，磷酸二氢钾1.2g，硫酸镁0.50g，氯化钠2.0g，碳酸氢钠1.0g，酵母膏0.10g，复合B族维生素溶液1.5mL，纯化水1000mL，pH 6.8～7.0；
所述的光合细菌分离，其分离培养基为：醋酸钠3.2g，氯化铵1.1g，磷酸二氢钾1.2g，硫酸镁0.50g，氯化钠2.0g，碳酸氢钠1.0g，酵母膏0.10g，复合B族维生素溶液1.5mL，纯化水1000mL，pH 6.8～7.0，1.8％琼脂粉；
所述的光合细菌纯化是将待分离样品加到富集培养液中，胶塞密封后厌氧光照培养，当培养液呈红棕色时，再转接到新鲜培养液二次富集，用平板倾注法厌氧分离。倾注法厌氧分 离是将分离平板置于干燥锅内，在锅底添加焦性没食子酸与碳酸钠的混合物，用真空泵抽取锅内空气，充入氮气，以此操作3次后，于光照下培养7天，挑取平板上不同特征的菌落斜面培养。
所述培养光合菌剂是先将培养基组份按5L量配成10∶1，既浓缩母液为500ml，然后煮沸消毒，冷却后接到新洗净的5L塑料桶中，按8％接种量接入400mL新鲜菌液，直接用自来水补足到5L，同上连续接种培养30批，检测每两批的活菌总数及杂菌率，同时用富集培养基做比较，与第0批相比计算第30批的活菌保持率。
所述步骤(2)制备多菌剂是用20L发酵罐连续发酵30批，每批发酵液作为下批的菌种液，发酵温度30℃，摇床转数为200rpm，通气比为1∶0.5，接种量8％，发酵25h，每两批发酵液检测一次其活菌总数和杂菌率。
所述的复合B族维生素包括：维生素B1300mg，维生素B260mg，维生素B690mg，烟酰胺300mg，泛酸钙30mg，蒸馏水1000mL。
实施例2
一种复合微生物制剂，其特征在于，该复合微生物制剂原料重量百分比包括以下组分：浓缩光合菌剂49％，多菌剂49％，复合保护剂2％；
所述的多菌剂包括酵母菌、枯草芽孢杆菌、硝化细菌、乳酸菌其中的至少一种或任意组合；所述的复合保护剂各组分重量百分比为甘油42％，吐温2025％，硼酸钠33％。
所述的复合微生物制剂，其特征在于，其中的光合菌剂采用如下配方发酵培养：培养基分为种子培养基和生产培养基，种子培养基配方为：醋酸钠3g，氯化铵1g，磷酸二氢钾1g，硫酸镁0.8g，氯化钠2.0g，碳酸氢钠0.5gg，复合B族维生素溶液2ml，酵母膏0.1g，矿物质水1000ml，PH6.8～7.0；其生产培养基配方为：醋酸钠3g，氯化铵1g，磷酸二氢钾1g，硫酸镁0.8g，氯化钠2.0g，碳酸氢钠0.5gg，复合B族维生素2ml，亚硫酸钠1.5g，自来水1000ml，PH6.8～7.0。
所述的复合微生物制剂，其特征在于，多菌剂菌种采用如下配方发酵培养：甘蔗废糖蜜50g，氯化铵5.5g，豆粕50g，磷酸二氢钾2g，硫酸镁0.7g，酵母膏0.3g，淀粉3g，碳酸钙1g，自来水1000ml，PH6.8～7.0。
同时，本发明还提供一种复合微生物制剂的生产工艺，其特征在于，它包括以下步骤：
(1)制备浓缩光合菌剂
(2)制备多菌剂，先培养多菌种，然后制得多菌剂；
(3)混合，将制得的光合细菌高浓缩剂和多菌剂混合按体积1∶1的比例混合，并加入复合保护剂；
(4)灌装；
(5)成品。
所述步骤(1)制备浓缩光合菌剂之前，还有如下依次步骤：光合细菌富集、光合细菌分离、光合细菌纯化、光合细菌鉴定，筛选光合菌剂发酵培养基，培养光合菌剂；所述步骤(2)制备多菌剂之前，还有如下依次步骤：多种菌菌种驯化，筛选多菌种发酵培养基。
所述步骤(1)制备浓缩光合菌剂是先用1000ml热水煮20g淀粉，淀粉糊化后加入羧甲基水溶性壳聚糖80g，共煮10min，待冷却后补足冷开水到1000g即得到菌剂浓缩剂，使用时将1kg加入1000kg的光合细菌菌液中，混匀，静置24小时后移去60％上清液，即得下层高浓缩光和菌剂。
所述的光合细菌富集，其富集培养基为：富集培养基：醋酸钠3.2g，氯化铵1.1g，磷酸二氢钾1.2g，硫酸镁0.50g，氯化钠2.0g，碳酸氢钠1.0g，酵母膏0.10g，复合B族维生素溶液1.5mL，纯化水1000mL，pH 6.8～7.0；
所述的光合细菌分离，其分离培养基为：醋酸钠3.2g，氯化铵1.1g，磷酸二氢钾1.2g，硫酸镁0.50g，氯化钠2.0g，碳酸氢钠1.0g，酵母膏0.10g，复合B族维生素溶液1.5mL，纯化水1000mL，pH 6.8～7.0，1.8％琼脂粉；
所述的光合细菌纯化是将待分离样品加到富集培养液中，胶塞密封后厌氧光照培养，当培养液呈红棕色时，再转接到新鲜培养液二次富集，用平板倾注法厌氧分离。倾注法厌氧分离是将分离平板置于干燥锅内，在锅底添加焦性没食子酸与碳酸钠的混合物，用真空泵抽取锅内空气，充入氮气，以此操作3次后，于光照下培养7天，挑取平板上不同特征的菌落斜面培养。
所述培养光合菌剂是先将培养基组份按5L量配成10∶1，既浓缩母液为500ml，然后煮沸消毒，冷却后接到新洗净的5L塑料桶中，按8％接种量接入400mL新鲜菌液，直接用自来水补足到5L，同上连续接种培养30批，检测每两批的活菌总数及杂菌率，同时用富集培养基做比较，与第0批相比计算第30批的活菌保持率。
所述步骤(2)制备多菌剂是用20L发酵罐连续发酵30批，每批发酵液作为下批的菌种液，发酵温度30℃，摇床转数为200rpm，通气比为1∶0.5，接种量8％，发酵25h，每两批发酵液检测一次其活菌总数和杂菌率。
所述的复合B族维生素包括：维生素B1300mg，维生素B260mg，维生素B690mg，烟酰胺300mg，泛酸钙30mg，蒸馏水1000mL。
实施例3
一种复合微生物制剂，其特征在于，该复合微生物制剂原料重量百分比包括以下组分：浓缩光合菌剂50％，多菌剂48％，复合保护剂2％；
所述的多菌剂包括酵母菌、枯草芽孢杆菌、硝化细菌、乳酸菌其中的至少一种或任意组合；所述的复合保护剂各组分重量百分比为甘油48％，吐温2020％，硼酸钠32％。
所述的复合微生物制剂，其特征在于，其中的光合菌剂采用如下配方发酵培养：培养基分为种子培养基和生产培养基，种子培养基配方为：醋酸钠3.5g，氯化铵1.4g，磷酸二氢钾0.5g，硫酸镁0.8g，氯化钠2.0g，碳酸氢钠1g，复合B族维生素溶液1.5ml，酵母膏0.1g，矿物质水1000ml，PH6.8～7.0；其生产培养基配方为：醋酸钠3.5g，氯化铵1.4g，磷酸二氢钾0.5gg，硫酸镁0.8g，氯化钠2.0g，碳酸氢钠1g，复合B族维生素1.5ml，亚硫酸钠1.5g，自来水1000ml，PH6.8～7.0。
所述的复合微生物制剂，其特征在于，多菌剂菌种采用如下配方发酵培养：甘蔗废糖蜜60g，氯化铵4.5g，豆粕55g，磷酸二氢钾2g，硫酸镁1.2g，酵母膏0.3g，淀粉2.5g，碳酸钙1g，自来水1000ml，PH6.8～7.0。
同时，本发明还提供一种复合微生物制剂的生产工艺，其特征在于，它包括以下步骤：
(1)制备浓缩光合菌剂
(2)制备多菌剂，先培养多菌种，然后制得多菌剂；
(3)混合，将制得的光合细菌高浓缩剂和多菌剂混合按体积1∶1的比例混合，并加入复合保护剂；
(4)灌装；
(5)成品。
所述步骤(1)制备浓缩光合菌剂之前，还有如下依次步骤：光合细菌富集、光合细菌分离、光合细菌纯化、光合细菌鉴定，筛选光合菌剂发酵培养基，培养光合菌剂；所述步骤(2)制备多菌剂之前，还有如下依次步骤：多种菌菌种驯化，筛选多菌种发酵培养基。
所述步骤(1)制备浓缩光合菌剂是先用1000ml热水煮20g淀粉，淀粉糊化后加入羧甲基水溶性壳聚糖80g，共煮10min，待冷却后补足冷开水到1000g即得到菌剂浓缩剂，使用时将1kg加入1000kg的光合细菌菌液中，混匀，静置24小时后移去60％上清液，即得下层高浓缩光和菌剂。
所述的光合细菌富集，其富集培养基为：富集培养基：醋酸钠3.2g，氯化铵1.1g，磷酸二氢钾1.2g，硫酸镁0.50g，氯化钠2.0g，碳酸氢钠1.0g，酵母膏0.10g，复合B族维生素溶液1.5mL，纯化水1000mL，pH 6.8～7.0；
所述的光合细菌分离，其分离培养基为：醋酸钠3.2g，氯化铵1.1g，磷酸二氢钾1.2g，硫酸镁0.50g，氯化钠2.0g，碳酸氢钠1.0g，酵母膏0.10g，复合B族维生素溶液1.5mL，纯化水1000mL，pH 6.8～7.0，1.8％琼脂粉；
所述的光合细菌纯化是将待分离样品加到富集培养液中，胶塞密封后厌氧光照培养，当培养液呈红棕色时，再转接到新鲜培养液二次富集，用平板倾注法厌氧分离。倾注法厌氧分离是将分离平板置于干燥锅内，在锅底添加焦性没食子酸与碳酸钠的混合物，用真空泵抽取锅内空气，充入氮气，以此操作3次后，于光照下培养7天，挑取平板上不同特征的菌落斜面培养。
所述培养光合菌剂是先将培养基组份按5L量配成10∶1，既浓缩母液为500ml，然后煮沸消毒，冷却后接到新洗净的5L塑料桶中，按8％接种量接入400mL新鲜菌液，直接用自来水补足到5L，同上连续接种培养30批，检测每两批的活菌总数及杂菌率，同时用富集培养基做比较，与第0批相比计算第30批的活菌保持率。
所述步骤(2)制备多菌剂是用20L发酵罐连续发酵30批，每批发酵液作为下批的菌种液，发酵温度30℃，摇床转数为200rpm，通气比为1∶0.5，接种量8％，发酵25h，每两批发酵液检测一次其活菌总数和杂菌率。
所述的复合B族维生素包括：维生素B1300mg，维生素B260mg，维生素B690mg，烟酰胺300mg，泛酸钙30mg，蒸馏水1000mL。
产品有效期试验
含有光合细菌、枯草芽胞菌、假丝酵母菌、硝化细菌等多菌种的产品中加入保护剂后，保存6个月后，产品中有效活菌数继续达到68亿/mL，保存12个月后有效活菌数维持在57亿/mL(详见表1)。
表1保质期试验结果
应用试验结果
(1)产品对养殖水体水质的影响。
对虾养殖试验池使用产品，考察了产品使用前后水体中溶解氧、COD、氨氮等指标的变化，结果详见表2。
表2产品对对虾养殖水质的影响试验结果
注：表中第0天数据为使用产品前的水质情况，不参与平均值计算。
试验结果表明，对虾养殖使用产品后，试验组水体中的溶氧量比对照组高达57.7％，养殖水体COD比对照组降低了35.1％，氨氮比对照组下降49.8％。
(2)产品对鱼幼苗成活率的影响
使用该产品于鲈鱼苗的培育，试验组鱼苗成活率达到82.2％，比对照组的提高33.6％。试验组鱼苗也比对照组长(详见表2)。
表2产品对鲈鱼苗成活率的影响试验结果
(3)产品对对虾幼苗成活率的影响
产品使用于南美白对虾苗的养殖，试验30d后，试验组的虾苗成活率达到83％，比对照组高出34.8％，每只虾的平均体重较对照组的长1.8g(见表3)。
表3产品对虾幼苗成活率的影响试验结果
(4)产品对河蟹幼苗成活率的影响
河蟹苗的养殖使用该产品2个月后，试验组的蟹苗成活率达到76.0％，比对照组高出27.2％(详见表4)。
表4产品对河蟹苗成活率的影响试验结果
(5)光合细菌废弃液利用效果
试验结果如表5，在相同的基肥和管理情况下，喷施光合细菌废弃液可以增加蔬菜的亩产量，因为废弃液中含有部分光合细菌活菌、有机氮、可溶性磷、钾、游离氨基酸、水溶性维生素等营养成分。其中上海青、生菜的增产都比较明显，增产率分别为22.7％和21.9％，试验组的蔬菜生长比较快，植株比较健壮，室温保存期也比对照组的长。说明施用光合细菌废弃液可以显著提高蔬菜的产量和延长其存贮期。
表5光合细菌废弃液种植蔬菜试验结果
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的图例。
Claims (10)
1.一种复合微生物制剂，其特征在于，该复合微生物制剂原料重量百分比包括以下组分：浓缩光合菌剂45％～50％，多菌剂45％～50％，复合保护剂2％～3％；
所述的多菌剂包括酵母菌、枯草芽孢杆菌、硝化细菌、乳酸菌其中的至少一种或任意组合；
所述的复合保护剂各组分重量百分比为甘油40％～50％，吐温20 20％～30％，硼酸钠30％～40％。
2.根据权利要求1所述的复合微生物制剂，其特征在于，其中的光合菌剂采用如下配方发酵培养：培养基分为种子培养基和生产培养基，种子培养基配方为：醋酸钠2.5g～3.5g，氯化铵0.6g～1.4g，磷酸二氢钾0.5g～1.5g，硫酸镁0.3g～0.8g，氯化钠2.0g，碳酸氢钠0.5g～1.5g，复合B族维生素溶液1ml～2ml，酵母膏0.1g～0.5g，矿物质水1000ml，PH6.8～7.0；其生产培养基配方为：醋酸钠2.5g～3.5g，氯化铵0.6g～1.4g，磷酸二氢钾0.5g～1.5g，硫酸镁0.3g～0.8g，氯化钠2.0g，碳酸氢钠0.5g～1.5g，复合B族维生素1ml～2ml，亚硫酸钠1.5g，自来水1000ml，PH6.8～7.0。
3.根据权利要求1所述的复合微生物制剂，其特征在于，多菌剂菌种采用如下配方发酵培养：甘蔗废糖蜜40g～60g，氯化铵4g～6g，豆粕45g～65g，磷酸二氢钾2g～4g，硫酸镁0.3g～1.2g，酵母膏0.3g，淀粉0.5g～3g，碳酸钙1g，自来水1000ml，PH6.8～7.0。
4.一种复合微生物制剂的生产工艺，其特征在于，它包括以下步骤：
(1)制备浓缩光合菌剂
(2)制备多菌剂，先培养多菌种，然后制得多菌剂；
(3)混合，将制得的光合细菌高浓缩剂和多菌剂混合按体积1∶1的比例混合，并加入复合保护剂；
(4)灌装；
(5)成品。
5.根据权利要求4所述的复合微生物制剂的生产工艺，其特征在于，在所述步骤(1)制备浓缩光合菌剂之前，还有如下依次步骤：光合细菌富集、光合细菌分离、光合细菌纯化、光合细菌鉴定，筛选光合菌剂发酵培养基，培养光合菌剂；所述步骤(2)制备多菌剂之前，还有如下依次步骤：多种菌菌种驯化，筛选多菌种发酵培养基。
6.根据权利要求4所述的复合微生物制剂的生产工艺，其特征在于，所述步骤(1)制备浓缩光合菌剂是先用1000ml热水煮20g淀粉，淀粉糊化后加入羧甲基水溶性壳聚糖80g，共煮10min，待冷却后补足冷开水到1000g即得到菌剂浓缩剂，使用时将1kg加入1000kg的光合细菌菌液中，混匀，静置24小时后移去60％上清液，即得下层高浓缩光和菌剂。
7.根据权利要求5所述的复合微生物制剂的生产工艺，其特征在于，所述的光合细菌富集，其富集培养基为：富集培养基：醋酸钠3.2g，氯化铵1.1g，磷酸二氢钾1.2g硫酸镁0.50g，氯化钠2.0g，碳酸氢钠1.0g，酵母膏0.10g，复合B族维生素溶液1.5mL，纯化水1000mL，pH6.8～7.0；
所述的光合细菌分离，其分离培养基为：醋酸钠3.2g，氯化铵1.1g，磷酸二氢钾1.2g，硫酸镁0.50g，氯化钠2.0g，碳酸氢钠1.0g，酵母膏0.10g，复合B族维生素溶液1.5mL，纯化水1000mL，pH6.8～7.0，1.8％琼脂粉；
所述的光合细菌纯化是将待分离样品加到富集培养液中，胶塞密封后厌氧光照培养，当培养液呈红棕色时，再转接到新鲜培养液二次富集，用平板倾注法厌氧分离。倾注法厌氧分离是将分离平板置于干燥锅内，在锅底添加焦性没食子酸与碳酸钠的混合物，用真空泵抽取锅内空气，充入氮气，以此操作3次后，于光照下培养7天，挑取平板上不同特征的菌落斜面培养。
8.根据权利要求5所述的复合微生物制剂的生产工艺，其特征在于，所述培养光合菌剂是先将培养基组份按5L量配成10∶1，既浓缩母液为500ml，然后煮沸消毒，冷却后接到新洗净的5L塑料桶中，按8％接种量接入400mL新鲜菌液，直接用自来水补足到5L，同上连续接种培养30批，检测每两批的活菌总数及杂菌率，同时用富集培养基做比较，与第0批相比计算第30批的活菌保持率。
9.根据权利要求3所述的复合微生物制剂的生产工艺，其特征在于，所述步骤(2)制备多菌剂是用20L发酵罐连续发酵30批，每批发酵液作为下批的菌种液，发酵温度30℃，摇床转数为200rpm，通气比为1∶0.5，接种量8％，发酵25h，每两批发酵液检测一次其活菌总数和杂菌率。
10.根据权利要求2或7所述的复合微生物制剂及其生产方法，其特征在于，所述的复合B族维生素包括：维生素B1300mg，维生素B260mg，维生素B690mg，烟酰胺300mg，泛酸钙30mg，蒸馏水1000mL。
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