CN113200611B - 一种改善液体微生态制剂胀瓶的组合物及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种改善液体微生态制剂胀瓶的组合物及其应用具体公开了一种防止微生物制剂胀瓶用的组合物，其由以下质量份成分制成：山梨酸钾0.05‑0.15份；甘氨酸0.05‑0.15份；硼砂0.1‑0.2份；海藻糖0.01‑0.05份。本发明所述组合物可以应用在兽药、饲料添加剂或水质改良剂中，提高产品的稳定性，延长保质期。

Description

一种改善液体微生态制剂胀瓶的组合物及其应用
技术领域
本发明涉及农业生物技术领域，具体涉及一种改善液体微生态制剂胀瓶的组合物及其应用。
背景技术
微生态制剂因其安全、无公害在农业领域应用越来越广泛，家禽家畜养殖业中微生态制剂已经在逐步地取代传统的添加剂。在未来，微生态制剂作为遵循生态环境自然循环法则的无公害制剂，将是添加剂行业的一种发展趋势。近年来微生态制剂产品层出不穷，特别是在饲料添加剂领域，以枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌为主的芽孢杆菌类产品居多，这些类型的微生态产品当制备成液体剂型的时候，常会面临常温运输和保存过程中产品胀瓶的问题，产品发生胀瓶主要是微生态制剂发生代谢，产生大量气体，导致产品外观受到影响，而且产品胀瓶会导致微生态制剂pH发生变化，导致产品中的活菌数下降，保存期变短。因此，微生态领域都在寻求一种能改善液体微生态制剂胀瓶问题的有效方法。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种改善液体微生态制剂胀瓶的组合物及其应用。本发明所述组合物为了实现本发明的目的，本发明采用如下技术方案：
本发明一个方面提供了一种防止微生物制剂胀瓶用的组合物，其由以下质量份成分制成：
Figure BDA0002762515460000011
本发明另一个方面提供了一种防止微生物制剂胀瓶用的组合物，其由以下质量份成分组成：
Figure BDA0002762515460000021
在本发明的具体实施方案中，组合物由以下质量份成分制成：
Figure BDA0002762515460000022
在本发明的具体实施方案中，组合物由以下质量份成分制成：
Figure BDA0002762515460000023
本发明另一个方面提供了一种微生物制剂，其中每1L微生态制剂中含山梨酸钾0.05-0.15g，甘氨酸0.05-0.15g，硼砂0.1-0.2g，海藻糖0.01-0.05g；
在本发明的具体实施方案中，山梨酸钾0.07-0.09g，甘氨酸0.07-0.09g g，硼砂0.13-0.17g，海藻糖0.01-0.03g；
在本发明的具体实施方案中，，山梨酸钾0.08g，甘氨酸0.08g，硼砂0.15g，海藻糖0.02g。
在本发明的具体实施方案中，所述液体微生态制剂为液体芽孢杆菌制剂。
在本发明的具体实施方案中，所述液体芽孢杆菌制剂为液体枯草芽孢杆菌制剂、液体地衣芽孢杆菌制剂。
在本发明的具体实施方案中，所述微生物制剂为常温保存的微生物制剂；优选地，所述常温保存的条件为10度以上，优选为25度以上。
本发明再一个方面提供了一种降低微生物制剂胀瓶的方法，所述方法为在微生物制剂中加入权利要求1-3任一项所述的组合物。
本发明再一个方面提供了本发明所述的组合物在制备常温保存微生物制剂中的用途。
本发明所述的组合物应用于液体微生态制剂为液体芽孢杆菌制剂。所述的液体芽孢杆菌制剂为地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌中至少一种。
在一些实施方案中，本发明所述的组合组，加入以枯草芽孢杆菌为主要成分的液体微生态制剂中，每1L液体微生态制剂加入山梨酸钾0.08g，甘氨酸0.08g，硼砂0.15g，海藻糖0.02g。以未添加其他物质的液体枯草芽孢杆菌制剂为对照，放置于37℃条件下进行加速保存实验。对液体枯草芽孢杆菌制剂进行包装瓶外观观察，并对制剂中枯草芽孢杆菌活菌数进行检测。结果显示，添加本发明组合物的实验组，放置7天，胀瓶率为0％，活菌数损失率为4.40％。未添加其他物质的对照组在24h后出现胀瓶情况，放置7天，胀瓶率为100％，活菌数损失94.00％。本发明组合物对液体枯草芽孢杆菌制剂的胀瓶情况有显著改善作用，且能起到提高产品稳定性的作用。
在一些实施方案中，本发明所述的组合组，加入以地衣芽孢杆菌为主要成分的液体微生态制剂中，每1L液体微生态制剂加入山梨酸钾0.08g，甘氨酸0.08g，硼砂0.15g，海藻糖0.02g。以未添加其他物质的地衣枯草芽孢杆菌制剂为对照，放置于37℃条件下进行加速保存实验。对液体地衣芽孢杆菌制剂进行包装瓶外观观察，并对制剂中地衣芽孢杆菌活菌数进行检测。结果显示，添加本发明组合物的实验组，放置7天，胀瓶率为0％，活菌数损失率为5.70％。未添加其他物质的对照组在24h后出现胀瓶情况，放置7天，胀瓶率为100％，活菌数损失率为87.88％。本发明组合物对液体地衣芽孢杆菌制剂的胀瓶情况有显著改善作用，且能起到提高产品稳定性的作用。
在一些实施方案中，本发明所述的组合组，分别对以液体枯草芽孢杆菌制剂和地衣芽孢杆菌制剂为主要成分的液体微生态制剂中，每1L液体微生态制剂加入山梨酸钾0.08g，甘氨酸0.08g，硼砂0.15g，海藻糖0.02g。以未添加其他物质的液体枯草芽孢杆菌制剂或液体地衣芽孢杆菌制剂为对照，放置于常温(25℃)进行保存实验。对液体微生态制剂进行包装瓶外观观察，并对制剂中枯草芽孢杆菌活菌数或地衣芽孢杆菌活菌数进行检测。结果显示，液体枯草芽孢杆菌制剂添加本发明组合物的实验组，放置90天，胀瓶率为0％，活菌数损失率为33.19％。未添加其他物质的对照组，放置90天，胀瓶率为100％，活菌数损失85.80％。液体地衣芽孢杆菌制剂添加本发明组合物的实验组，放置90天，胀瓶率为0％，活菌数损失率为42.09％。未添加其他物质的对照组，放置90天，胀瓶率为96％，活菌数损失73.51％。本发明组合物对液体枯草芽孢杆菌制剂和液体地衣芽孢杆菌制剂的胀瓶情况有显著改善作用，且能起到提高产品稳定性的作用。
在一些实施方案中，本发明所述的组合组，分别对以液体枯草芽孢杆菌制剂和地衣芽孢杆菌制剂为主要成分的液体微生态制剂中，每1L液体微生态制剂加入山梨酸钾0.08g，甘氨酸0.08g，硼砂0.15g，海藻糖0.02g。以未添加其他物质的液体枯草芽孢杆菌制剂或液体地衣芽孢杆菌制剂为对照，放置于4℃进行长期保存实验。对液体微生态制剂进行包装瓶外观观察，并对制剂中枯草芽孢杆菌活菌数或地衣芽孢杆菌活菌数进行检测。结果显示，在4℃保存条件下，添加本发明组合物的实验组与未添加物质的对照组，在保存1年时间时胀瓶率均为0％。枯草芽孢杆菌活菌数对照组损失率为11.65％，实验组损失率为10.77％。地衣芽孢杆菌活菌数对照组损失率为43.98％，实验组损失率为38.61％。表明本发明的组合物对液体枯草芽孢杆菌在4℃保存条件下对产品中活菌数影响不大。
本发明组合物可在兽药、饲料添加剂或水质改良剂中应用，改善产品运输及使用过程中出现胀瓶现象，提高产品的稳定性，延长保质期。
由上述技术方案可知，本发明提供了一种组合物及其应用。本发明所述组合物包含以下成分：山梨酸钾、甘氨酸、硼砂、海藻糖，其特征是：每1L液体微生态制剂含山梨酸钾0.05-0.15g，甘氨酸0.05-0.15g，硼砂0.1-0.2g，海藻糖0.01-0.05g。
有益效果
本发明所述组合物具有改善液体微生态制剂胀瓶的效果。
本发明所述组合物可以在兽药、饲料添加剂或水质改良剂中应用，改善产品运输及使用过程中出现胀瓶现象，提高产品的稳定性，延长保质期，应用范围广泛，具有良好的经济和社会效应。
本发明的组合物材料简单，但是能够实现常温和高温下0％胀瓶率，改变了微生物制剂需要低温保存和运输的问题，产生了预料不到的技术效果。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
为了进一步理解本发明，下面结合具体实施例对本发明进行详细阐述。如无特征说明，本发明所述山梨酸钾、甘氨酸、硼砂、海藻糖为本领域常规试剂，本领域技术人员可以通过常规渠道购买得到。
筛选液体微生态制剂防胀瓶的组合物，目前食品和饲料中常添加的稳定剂和防腐剂，有山梨酸钾、甘氨酸、硼砂、海藻糖、苯甲酸钠、丙酸钠和壳聚糖。
山梨酸钾是一种普遍使用的食品防腐剂，可以有效抑制好氧性细菌的活性，减缓其繁殖速率。应用于液体微生态制剂中可以有效控制微生物的繁殖速率，降低其产酸性能，维持正常pH，从而延长微生物的保存期；
甘氨酸：对大肠杆菌及芽孢杆菌的繁殖具有一定的抑制作用；
硼砂：对多种致病菌都有抑制作用，防止产品的腐坏；
海藻糖：是一种生物制品的保护剂和稳定剂，可以保证产品中生物活性物质不被外界高温、高寒、高渗透压及干燥失水影响活性；
苯甲酸钠：是一种广谱的抗微生物试剂，苯甲酸钠的抗菌、抑菌作用；
丙酸钠：丙酸钠是一种常用的食品防腐剂，对霉菌、好氧芽孢菌或革兰氏阴性杆菌都有较强的抑制作用；
壳聚糖：是目前食品中常用的增稠剂和稳定剂，是优良的天然抗菌抗氧化剂，可有效控制食品中有害细菌的含量，对食品具有明显的保鲜作用。
对以上7种稳定剂进行常用含量的查询，结果如下：
表1 7种稳定剂常用量
稳定剂 常用量g/L
山梨酸钾 0.05-0.15
甘氨酸 0.05-0.15
硼砂 0.1-0.2
海藻糖 0.01-0.05
苯甲酸钠 0.3-0.8
丙酸钠 0.01-0.05
壳聚糖 0.03-0.06
实施例1稳定剂的筛选
对以上7种稳定剂，分别设置不同的含量梯度，具体分组方式如下：
表2 7种稳定剂不同浓度梯度分组情况
稳定剂 山梨酸钾 甘氨酸 硼砂 海藻糖 苯甲酸钠 丙酸钠 壳聚糖
1 0.05
2 0.10
3 0.15
4 0.05
5 0.10
6 0.15
7 0.10
8 0.20
9 0.30
10 0.01
11 0.03
12 0.05
13 0.30
14 0.50
15 0.80
16 0.01
17 0.03
18 0.05
19 0.30
20 0.50
21 0.80
22(对照组)
实验设置22组，实验组为枯草芽孢杆菌液体微生态制剂中每1L液体微生态制剂加入表1稳定剂的不同梯度含量。对照组(22组)为未添加其他物质的液体枯草芽孢杆菌制剂，每组50瓶，放置于37℃条件下进行加速保存实验。每天对液体枯草芽孢杆菌制剂进行包装瓶外观胀瓶率的统计，每隔一天对每组随机选取3瓶对制剂中枯草芽孢杆菌活菌数进行检测。连续检测7天。统计以上22组实验结果，胀瓶率统计见表3，枯草芽孢杆菌活菌数统计如见表4。
表3 7种稳定剂不同浓度梯度胀瓶率统计
Figure BDA0002762515460000061
Figure BDA0002762515460000071
表4 7种稳定剂不同浓度梯度枯草芽孢杆菌活菌数统计
Figure BDA0002762515460000072
通过对比表3中7种稳定剂不同浓度梯度胀瓶率的统计数据，可以看出7种稳定剂对枯草芽孢杆菌微生态制剂胀瓶的控制效果，硼砂＞山梨酸钾＞海藻糖＞甘氨酸＞苯甲酸钠＞丙酸钠＞壳聚糖。山梨酸钾、甘氨酸、硼酸和海藻糖对枯草芽孢杆菌微生态制剂的胀瓶率有一定的控制作用，保存7天，胀瓶率没有达到100％。苯甲酸钠、丙酸钠和壳聚糖对枯草芽孢杆菌微生态制剂的胀瓶率抑制作用较小，保存7天内，都出现了100％的胀瓶率。对比表4中7种稳定剂不同浓度梯度枯草芽孢杆菌活菌数的统计，与表3的胀瓶率结果一致，对枯草芽孢杆菌活菌数的保有率效果：硼砂＞山梨酸钾＞海藻糖＞甘氨酸＞苯甲酸钠＞丙酸钠＞壳聚糖。因此选择山梨酸钾、硼砂、海藻糖和甘氨酸进行进一步的摸索实验。
实施例2：稳定剂浓度的确定
1.硼砂浓度的确定
实验设置5组，实验组为枯草芽孢杆菌液体微生态制剂中每1L液体微生态制剂加入硼砂的不同梯度含量。每组50瓶，放置于37℃条件下进行加速保存实验。每天对液体枯草芽孢杆菌制剂进行包装瓶外观胀瓶率的统计，每隔一天对每组随机选取3瓶对制剂中枯草芽孢杆菌活菌数进行检测。连续检测7天。统计以上5组实验结果，胀瓶率统计见表5，枯草芽孢杆菌活菌数统计如见表6。
表5 硼砂不同浓度梯度胀瓶率统计
g/L 1d 2d 3d 4d 5d 6d 7d
1 0.10 0％ 0％ 6％ 10％ 14％ 24％ 28％
2 0.15 0％ 0％ 4％ 6％ 10％ 18％ 24％
3 0.20 0％ 0％ 4％ 8％ 12％ 20％ 28％
4 0.25 0％ 0％ 6％ 10％ 18％ 24％ 36％
5 0.30 0％ 0％ 6％ 12％ 20％ 26％ 40％
表6 硼砂不同浓度梯度枯草芽孢杆菌活菌数统计
g/L 1d 3d 5d 7d
1 0.10 4.38±0.23×10<sup>10</sup> 4.32±0.11×10<sup>10</sup> 4.21±0.11×10<sup>10</sup> 4.16±0.21×10<sup>10</sup>
2 0.15 4.43±0.32×10<sup>10</sup> 4.35±0.26×10<sup>10</sup> 4.27±0.16×10<sup>10</sup> 4.22±0.15×10<sup>10</sup>
3 0.20 4.33±0.26×10<sup>10</sup> 4.26±0.25×10<sup>10</sup> 4.21±0.23×10<sup>10</sup> 4.10±0.21×10<sup>10</sup>
4 0.25 4.35±0.32×10<sup>10</sup> 4.20±0.11×10<sup>10</sup> 4.13±0.22×10<sup>10</sup> 4.05±0.25×10<sup>10</sup>
5 0.30 4.33±0.31×10<sup>10</sup> 4.13±0.26×10<sup>10</sup> 4.09±0.12×10<sup>10</sup> 4.01±0.16×10<sup>10</sup>
通过对比表5中硼砂不同浓度梯度胀瓶率的统计数据，可以看出硼砂对枯草芽孢杆菌微生态制剂胀瓶的控制效果，0.15g/L效果最好。对比表6中硼砂不同浓度梯度枯草芽孢杆菌活菌数的统计，与表5的胀瓶率结果一致，0.15g/L硼砂对枯草芽孢杆菌活菌数的保有率最好。
2.山梨酸钾浓度的确定
实验设置6组，实验组为枯草芽孢杆菌液体微生态制剂中每1L液体微生态制剂加入山梨酸钾的不同梯度含量。每组50瓶，放置于37℃条件下进行加速保存实验。每天对液体枯草芽孢杆菌制剂进行包装瓶外观胀瓶率的统计，每隔一天对每组随机选取3瓶对制剂中枯草芽孢杆菌活菌数进行检测。连续检测7天。统计以上6组实验结果，胀瓶率统计见表7，枯草芽孢杆菌活菌数统计如见表8。
表7 山梨酸钾不同浓度梯度胀瓶率统计
g/L 1d 2d 3d 4d 5d 6d 7d
1 0.03 0％ 4％ 14％ 30％ 36％ 42％ 50％
2 0.05 0％ 2％ 14％ 26％ 28％ 30％ 32％
3 0.08 0％ 0％ 8％ 16％ 20％ 22％ 26％
4 0.10 0％ 2％ 12％ 26％ 26％ 30％ 30％
5 0.13 0％ 2％ 16％ 24％ 26％ 30％ 36％
6 0.15 0％ 4％ 16％ 26％ 28％ 32％ 40％
表8 山梨酸钾不同浓度梯度枯草芽孢杆菌活菌数统计
g/L 1d 3d 5d 7d
1 0.03 4.35±0.23×10<sup>10</sup> 4.16±0.21×10<sup>10</sup> 3.97±0.11×10<sup>10</sup> 3.66±0.28×10<sup>10</sup>
2 0.05 4.41±0.16×10<sup>10</sup> 4.23±0.23×10<sup>10</sup> 4.05±0.36×10<sup>10</sup> 3.74±0.16×10<sup>10</sup>
3 0.08 4.40±0.26×10<sup>10</sup> 4.22±0.31×10<sup>10</sup> 4.15±0.20×10<sup>10</sup> 4.07±0.13×10<sup>10</sup>
4 0.10 4.39±0.13×10<sup>10</sup> 4.17±0.35×10<sup>10</sup> 4.10±0.22×10<sup>10</sup> 3.90±0.26×10<sup>10</sup>
5 0.13 4.35±0.33×10<sup>10</sup> 4.20±0.13×10<sup>10</sup> 4.03±0.17×10<sup>10</sup> 3.88±0.31×10<sup>10</sup>
6 0.15 4.36±0.21×10<sup>10</sup> 4.16±0.21×10<sup>10</sup> 3.96±0.21×10<sup>10</sup> 3.66±0.17×10<sup>10</sup>
通过对比表7中山梨酸钾不同浓度梯度胀瓶率的统计数据，可以看出山梨酸钾对枯草芽孢杆菌微生态制剂胀瓶的控制效果，0.08g/L效果最好。对比表8中山梨酸钾不同浓度梯度枯草芽孢杆菌活菌数的统计，与表7的胀瓶率结果一致，0.08g/L山梨酸钾对枯草芽孢杆菌活菌数的保有率最好。
3.海藻糖浓度的确定
实验设置5组，实验组为枯草芽孢杆菌液体微生态制剂中每1L液体微生态制剂加入海藻糖的不同梯度含量。每组50瓶，放置于37℃条件下进行加速保存实验。每天对液体枯草芽孢杆菌制剂进行包装瓶外观胀瓶率的统计，每隔一天对每组随机选取3瓶对制剂中枯草芽孢杆菌活菌数进行检测。连续检测7天。统计以上5组实验结果，胀瓶率统计见表9，枯草芽孢杆菌活菌数统计如见表10。
表9 海藻糖不同浓度梯度胀瓶率统计
g/L 1d 2d 3d 4d 5d 6d 7d
1 0.10 0％ 4％ 16％ 28％ 34％ 40％ 44％
2 0.20 0％ 2％ 12％ 20％ 30％ 32％ 36％
3 0.30 0％ 4％ 20％ 26％ 34％ 38％ 44％
4 0.40 0％ 4％ 20％ 26％ 36％ 42％ 54％
5 0.50 0％ 6％ 22％ 30％ 38％ 50％ 60％
表10 海藻糖不同浓度梯度枯草芽孢杆菌活菌数统计
g/L 1d 3d 5d 7d
1 0.10 4.27±0.12×10<sup>10</sup> 4.10±0.17×10<sup>10</sup> 3.71±0.25×10<sup>10</sup> 3.10±0.15×10<sup>10</sup>
2 0.20 4.42±0.13×10<sup>10</sup> 4.23±0.21×10<sup>10</sup> 4.01±0.21×10<sup>10</sup> 3.85±0.18×10<sup>10</sup>
3 0.30 4.30±0.17×10<sup>10</sup> 4.12±016×10<sup>10</sup> 3.91±0.16×10<sup>10</sup> 3.24±0.22×10<sup>10</sup>
4 0.40 4.32±0.12×10<sup>10</sup> 4.07±0.31×10<sup>10</sup> 3.87±0.22×10<sup>10</sup> 3.21±0.21×10<sup>10</sup>
5 0.50 4.33±0.16×10<sup>10</sup> 4.00±0.23×10<sup>10</sup> 3.65±0.21×10<sup>10</sup> 3.15±0.25×10<sup>10</sup>
通过对比表9中海藻糖不同浓度梯度胀瓶率的统计数据，可以看出海藻糖对枯草芽孢杆菌微生态制剂胀瓶的控制效果，0.02g/L效果最好。对比表10中海藻糖不同浓度梯度枯草芽孢杆菌活菌数的统计，与表9的胀瓶率结果一致，0.02g/L海藻糖对枯草芽孢杆菌活菌数的保有率最好。
4.甘氨酸浓度的确定
实验设置6组，实验组为枯草芽孢杆菌液体微生态制剂中每1L液体微生态制剂加入甘氨酸的不同梯度含量。每组50瓶，放置于37℃条件下进行加速保存实验。每天对液体枯草芽孢杆菌制剂进行包装瓶外观胀瓶率的统计，每隔一天对每组随机选取3瓶对制剂中枯草芽孢杆菌活菌数进行检测。连续检测7天。统计以上6组实验结果，胀瓶率统计见表7，枯草芽孢杆菌活菌数统计如见表8。
表11 甘氨酸不同浓度梯度胀瓶率统计
g/L 1d 2d 3d 4d 5d 6d 7d
1 0.03 0％ 6％ 22％ 36％ 40％ 56％ 62％
2 0.05 0％ 4％ 20％ 32％ 38％ 50％ 60％
3 0.08 0％ 2％ 14％ 26％ 32％ 40％ 50％
4 0.10 0％ 6％ 20％ 30％ 36％ 46％ 54％
5 0.13 0％ 6％ 20％ 34％ 38％ 46％ 56％
6 0.15 2％ 8％ 20％ 34％ 40％ 52％ 64％
表12 甘氨酸不同浓度梯度枯草芽孢杆菌活菌数统计
g/L 1d 3d 5d 7d
1 0.03 4.35±0.21×10<sup>10</sup> 4.02±0.26×10<sup>10</sup> 3.75±0.31×10<sup>10</sup> 3.14±0.15×10<sup>10</sup>
2 0.05 4.36±0.13×10<sup>10</sup> 4.11±0.16×10<sup>10</sup> 3.87±0.25×10<sup>10</sup> 3.30±0.13×10<sup>10</sup>
3 0.08 4.42±0.26×10<sup>10</sup> 4.17±0.23×10<sup>10</sup> 3.90±0.21×10<sup>10</sup> 3.71±0.29×10<sup>10</sup>
4 0.10 4.40±0.13×10<sup>10</sup> 4.13±0.12×10<sup>10</sup> 3.87±0.22×10<sup>10</sup> 3.45±0.21×10<sup>10</sup>
5 0.13 4.37±0.16×10<sup>10</sup> 4.04±0.32×10<sup>10</sup> 3.76±0.25×10<sup>10</sup> 3.41±0.15×10<sup>10</sup>
6 0.15 4.11±0.26×10<sup>10</sup> 4.02±0.17×10<sup>10</sup> 3.65±0.11×10<sup>10</sup> 3.32±0.27×10<sup>10</sup>
通过对比表11中甘氨酸不同浓度梯度胀瓶率的统计数据，可以看出甘氨酸对枯草芽孢杆菌微生态制剂胀瓶的控制效果，0.08g/L效果最好。对比表12中甘氨酸不同浓度梯度枯草芽孢杆菌活菌数的统计，与表11的胀瓶率结果一致，0.08g/L甘氨酸对枯草芽孢杆菌活菌数的保有率最好。
实施例3：对液体枯草芽孢杆菌制剂胀瓶的影响
以枯草芽孢杆菌为主要成分的液体微生态制剂的制备：枯草芽孢杆菌发酵结束后，芽孢率为95％，芽孢数为4.55×1010cfu/mL。
实验设置两组，实验组为以上液体微生态制剂中，每1L液体微生态制剂加入山梨酸钾0.08g，甘氨酸0.08g，硼砂0.15g，海藻糖0.02g。对照组为未添加其他物质的液体枯草芽孢杆菌制剂。每组50瓶，放置于37℃条件下进行加速保存实验。每天对液体枯草芽孢杆菌制剂进行包装瓶外观胀瓶率的统计，并每组随机选取3瓶对制剂中枯草芽孢杆菌活菌数进行检测。连续检测7天。
表13 对液体枯草芽孢杆菌制剂胀瓶的影响
Figure BDA0002762515460000111
由表13结果可知，添加的本发明组合物的实验组，在37℃加速实验条件下，7天胀瓶率均为0％；未添加物质的对照组，在保存第一天胀瓶率为80％，第二天胀瓶率为92％，保存三天，胀瓶率达到100％。另外，液体微生态制剂中的枯草芽孢杆菌活菌数，实验组37℃保存7天，活菌数损失率为4.40％，对照组37℃保存7天，活菌数损失94.00％。表明本发明的组合物对液体枯草芽孢杆菌制剂的胀瓶情况有显著改善作用，且能起到提高产品稳定性的作用。
实施例4：对液体地衣芽孢杆菌制剂胀瓶的影响
以地衣芽孢杆菌为主要成分的液体微生态制剂的制备：地衣芽孢杆菌发酵结束后，芽孢率为93％，芽孢数为3.16×1010cfu/mL。使用该发酵液直接进行产品的灌装，制备液体微生态制剂。
实验设置两组，实验组为以上液体微生态制剂中，每1L液体微生态制剂加入山梨酸钾0.08g，甘氨酸0.08g，硼砂0.15g，海藻糖0.02g。对照组为未添加其他物质的液体地衣芽孢杆菌制剂，每组50瓶，放置于37℃条件下进行加速保存实验。每天对地衣芽孢杆菌制剂进行包装瓶外观胀瓶率的统计，并每组随机选取3瓶对制剂中地衣芽孢杆菌活菌数进行检测。连续检测7天。
表14 对液体地衣芽孢杆菌制剂胀瓶的影响
Figure BDA0002762515460000112
Figure BDA0002762515460000121
由表14结果可知，添加的本发明组合物的实验组，在37℃加速实验条件下，7天胀瓶率均为0％；未添加物质的对照组，在保存第一天胀瓶率为72％，第二天胀瓶率为84％，第三天胀瓶率为92％，保存四天，胀瓶率达到100％。对比实施例1中的结果，如果仅以山梨酸钾、甘氨酸、硼砂或海藻糖中的其中一种进行实验，在第7天时，胀瓶率最低分别为30％、54％、28％和44％。而对于本领域而言，即使是1％的胀瓶率也会影响极大程度的影响产品的品质，本发明通过组合的方式，意外地发现，这四种成分能够起到协同作用，进而实现7天加速试验后胀瓶率为0，产生了预料不到的效果。另外，液体微生态制剂中的地衣芽孢杆菌活菌数，实验组37℃保存7天，活菌数损失率仅为5.70％，对照组37℃保存7天，活菌数损失87.88％。表明本发明的组合物对液体地衣芽孢杆菌的胀瓶情况有显著改善作用，且能起到提高产品稳定性的作用。
实施例5：对液体微生态制剂常温保存的影响
以枯草芽孢杆菌为主要成分的液体微生态制剂的制备：枯草芽孢杆菌发酵结束后，芽孢率为95％，芽孢数为4.55×1010cfu/mL。使用该发酵液直接进行产品的灌装，制备液体微生态制剂。
以地衣芽孢杆菌为主要成分的液体微生态制剂的制备：地衣芽孢杆菌发酵结束后，芽孢率为93％，芽孢数为3.16×1010cfu/mL。使用该发酵液直接进行产品的灌装，制备液体微生态制剂。
实验设置四组，枯草芽孢杆菌制剂设置两组，一组为实验组，一组为对照组。地衣芽孢杆菌制剂设置两组，一组为实验组，一组为对照组。实验组为以上液体微生态制剂中，每1L液体微生态制剂加入山梨酸钾0.08g，甘氨酸0.08g，硼砂0.15g，海藻糖0.02g。对照组为未添加其他物质的液体微生态制剂，每组50瓶，放置于常温(25℃)条件下进行长期保存实验。定期对液体枯草芽孢杆菌制剂或地衣芽孢杆菌制剂进行包装瓶外观胀瓶率的统计，并每组随机选取3瓶对制剂中枯草芽孢杆菌或地衣芽孢杆菌活菌数进行检测。
表15 对液体微生态制剂常温(25℃)保存的影响
Figure BDA0002762515460000122
Figure BDA0002762515460000131
由表15结果可知，液体枯草芽孢杆菌制剂添加的本发明组合物的实验组，在常温(25℃)保存条件下，7天胀瓶率均为0％；未添加物质的对照组，在保存90天胀瓶率为100％。枯草芽孢杆菌活菌数，实验组常温(25℃)保存90天，活菌数损失率为33.19％，对照组常温(25℃)保存90天，活菌数损失85.80％。表明本发明的组合物对液体枯草芽孢杆菌在常温保存条件下的胀瓶情况有显著改善作用，且能起到提高产品稳定性的作用。
液体地衣芽孢杆菌制剂添加的本发明组合物的实验组，在常温(25℃)保存条件下，7天胀瓶率均为0％；未添加物质的对照组，在保存90天胀瓶率为96％。地衣芽孢杆菌活菌数，实验组常温(25℃)保存90天，活菌数损失率为42.09％，对照组常温(25℃)保存90天，活菌数损失73.51％。表明本发明的组合物对液体地衣芽孢杆菌在常温保存条件下的胀瓶情况有显著改善作用，且能起到提高产品稳定性的作用。
实施例6：对液体微生态制剂4℃保存的影响
以枯草芽孢杆菌为主要成分的液体微生态制剂的制备：枯草芽孢杆菌发酵结束后，芽孢率为95％，芽孢数为4.55×1010cfu/mL。使用该发酵液直接进行产品的灌装，制备液体微生态制剂。
以地衣芽孢杆菌为主要成分的液体微生态制剂的制备：地衣芽孢杆菌发酵结束后，芽孢率为93％，芽孢数为3.16×1010cfu/mL。使用该发酵液直接进行产品的灌装，制备液体微生态制剂。
实验设置四组，枯草芽孢杆菌制剂设置两组，一组为实验组，一组为对照组。地衣芽孢杆菌制剂设置两组，一组为实验组，一组为对照组。实验组为以上液体微生态制剂中，每1L液体微生态制剂加入山梨酸钾0.08g，甘氨酸0.08g，硼砂0.15g，海藻糖0.02g。对照组为未添加其他物质的液体微生态制剂，每组50瓶，放置于4℃条件下进行长期保存实验。定期对液体枯草芽孢杆菌制剂或地衣芽孢杆菌制剂进行包装瓶外观胀瓶率的统计，并每组随机选取3瓶对制剂中枯草芽孢杆菌或地衣芽孢杆菌活菌数进行检测。
表16 对液体微生态制剂4℃保存的影响
Figure BDA0002762515460000141
由表16结果可知，液体枯草芽孢杆菌制剂添加的本发明组合物的实验组，在4℃保存条件下，与未添加物质的对照组，在保存1年时间时胀瓶率均为0％。枯草芽孢杆菌活菌数对照组损失率为11.65％，实验组损失率为10.77％。表明本发明的组合物对液体枯草芽孢杆菌在4℃保存条件下对产品中活菌数影响不大。
液体地衣芽孢杆菌制剂添加的本发明组合物的实验组，在4℃保存条件下，与未添加物质的对照组，在保存1年时间时胀瓶率均为0％。地衣芽孢杆菌活菌数对照组损失率为43.98％，实验组损失率为38.61％。表明本发明的组合物对液体地衣芽孢杆菌在4℃保存条件下对产品中活菌数影响不大。

Claims (14)

1.一种防止微生物制剂胀瓶用的组合物，其由以下质量份成分组成：
山梨酸钾0.05-0.15份；
甘氨酸0.05-0.15份；
硼砂0.1-0.2份；
海藻糖0.01-0.05份。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，其由以下质量份成分组成：
山梨酸钾0.07-0.09份；
甘氨酸0.07-0.09份；
硼砂0.13-0.17份；
海藻糖0.01-0.03份。
3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，其由以下质量份成分组成：
山梨酸钾0.08份；
甘氨酸0.08份；
硼砂0.15份；
海藻糖0.05份。
4.一种微生物制剂，其特征在于，其中每1L微生态制剂中含山梨酸钾0.05-0.15g，甘氨酸0.05-0.15g，硼砂0.1-0.2g，海藻糖0.01-0.05g。
5.权利要求4所述的微生物制剂，其特征在于，其中每1L微生态制剂中含山梨酸钾0.07-0.09g，甘氨酸0.07-0.09g，硼砂0.13-0.17g，海藻糖0.01-0.03g。
6.权利要求4所述的微生物制剂，其特征在于，其中每1L微生态制剂中含山梨酸钾0.08g，甘氨酸0.08g，硼砂0.15g，海藻糖0.02g。
7.根据权利要求4-6任一项所述的微生物制剂，其特征在于，所述微生态制剂为液体芽孢杆菌制剂。
8.根据权利要求7所述的微生物制剂，其特征在于，所述液体芽孢杆菌制剂为液体枯草芽孢杆菌制剂、液体地衣芽孢杆菌制剂。
9.根据权利要求4-6任一项所述的微生物制剂，所述微生物制剂为常温保存的微生物制剂。
10.根据权利要求9所述的微生物制剂，其特征在于，所述常温保存的条件为10度以上。
11.根据权利要求10所述的微生物制剂，其特征在于，所述常温保存的条件为25度以上。
12.一种降低微生物制剂胀瓶的方法，其特征在于，所述方法为在微生态制剂中加入权利要求1-3任一项所述的防止微生物制剂胀瓶用的组合物。
13.权利要求12所述的方法，其特征在于，所述微生态制剂为液体芽孢杆菌制剂。
14.权利要求1-3任一项所述的防止微生物制剂胀瓶用的组合物在制备常温保存微生物制剂中的用途。
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