CN102352316A - 一种复合菌浆液、其生产方法及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种复合菌浆液、其生产方法及其应用，属于微生物应用领域。所述复合菌浆液由以下方式制得：以氨基酸废浆液为发酵基，多粘类芽孢杆菌按6％的接种量、类球红细菌按4％的接种量接种，在pH6.5～7.0、30℃～34℃和需氧条件下发酵24h，即得复合菌浆液。该复合菌浆液中多粘类芽孢杆菌含量≥5×10⁹CFU/ml；类球红细菌含量≥3×10⁹CFU/ml，可应用于净化养殖水体或制备有机肥料。与现有技术相比，本发明的复合菌浆液以氨基酸废浆液为发酵基，具有生产成本低、节能环保等特点，可广泛应用于养殖水体净化及有机肥生产中。

Description

一种复合菌浆液、其生产方法及其应用

技术领域

本发明涉及微生物应用领域，具体地说是一种复合菌浆液、其生产方法及其应用。

背景技术

目前，我国从事氨基酸生产的企业近百家，年产量已超过300万吨。氨基酸的生产原料主要为玉米、大米；年消耗量432.6万吨，每生产一吨氨基酸就产生7-10吨废浆液。氨基酸废浆液中含有大量的碳水化合物、有机杂酸和蛋白质等有机污染物，直接排放会污染环境，而要处理达标后再排放则需要高昂费用，已成为阻碍氨基酸生产行业发展的重要问题。如何使氨基酸废浆液得到充分地回收利用，已成为本领域技术人员渴望解决的技术问题。

类球红细菌(Rhodobacter sphaeroides)属于细菌域中紫色细菌群的α亚群，具有广泛的代谢方式，可以在多种生长条件下生长。如它具有广泛的能量代谢机制，包括：光合作用、无机营养、好氧和厌氧呼吸等。它还可以固定氮分子，合成重要生物活性物质四吡咯(tetrapyrroles)、叶绿素(chlorophylls)、血红素(heme)、维生素B12等。大量研究文献表明，类球红细菌已经成为一种非常有工业化开发潜力的微生物。属于农业部菌种分类中一级安全菌种。

多粘芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)原属于芽孢杆菌属，随着研究的深入，1993年Ash等将其从芽孢杆菌属中独立出来，定为类芽孢杆菌属。它具有有机营养、无机营养、兼性厌氧生长的能量代谢机制，主要代谢产物如多粘抗菌素、吲哚乙酸、苯丙氨酸等有机化合物，对农作物有极好的促进生长和土传病害的防治作用，我国农业部把其分类为一级安全菌种。

发明内容

本发明的技术任务是针对上述现有技术的不足，提供一种类球红细菌与多粘芽孢杆菌的复合菌浆液，该复合菌浆液以氨基酸废浆液为发酵基发酵制得，可以使氨基酸废浆液得到充分地回收利用。

本发明第二个技术任务是提供上述复合菌浆液的生产方法；

本发明第三个技术任务是提供上述复合菌浆液的应用。

本发明所使用的类球红细菌(Rhodobacter sphaeroides)菌株已于2010年4月20日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.3757，保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编：100101。该菌株的16S rDNA序列信息已递交到GenBank数据库，登录号为EU263643。

本发明所使用的多粘芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)菌株已于2008年2月26日保藏在中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.2377，保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编：100101。该菌株的16S rDNA序列信息已递交到GenBank数据库，登录号为EF545556。

本发明的复合菌浆液，是以氨基酸废浆液为发酵基发酵制得的，多粘类芽孢杆菌按6％的接种量、类球红细菌按4％的接种量接种，在pH6.5～7.0、30℃～34℃和需氧条件下发酵24h，即可得到上述复合菌浆液，

所述复合菌浆液中多粘类芽孢杆菌含量≥5×10⁹CFU/ml；类球红细菌含量≥3×10⁹CFU/ml。

上述复合菌浆液具体的生产方法：将氨基酸生产中所产生的废浆液调整pH至6.5～7.0，经121℃灭菌30min后，降温至30℃～34℃进行菌种接种，多粘类芽孢杆菌按6％的接种量、类球红细菌按4％的接种量接种，控制温度30℃～34℃，以体积比每分钟0.5～1.0的通气量通入净化空气，并以80-100r/min的转速搅拌，发酵24h即得复合菌浆液，

所得复合菌浆液中多粘类芽孢杆菌含量≥5×10⁹CFU/ml；类球红细菌含量≥3×10⁹CFU/ml。

具体地说，上述复合菌浆液的生产方法包括：

(1)多粘类芽孢杆菌液体菌种制备：

所用液体培养基配制方法(以1000ml为例)：称取土豆100g，切块，并放入纯净水中沸煮30min，过滤，取滤液，加纯净水定容至1000ml，加入葡萄糖10g、磷酸氢二钾2.5g、磷酸二氢钾1.5g，用乙酸或氢氧化钠调pH 6.5～7.0，121℃灭菌30min；降温至30℃～34℃时，接菌种上摇床调温30℃～32℃震荡培养；摇床转速100-120r/min，培养24h，制成液体菌种，菌液中多粘类芽孢杆菌含量≥1×10¹⁰CFU/ml；

(2)类球红细菌液体菌种制备：

所用液体培养基配制方法(以1000ml为例)：在蒸馏水中加入硫酸铵1g、硫酸镁200mg、硫酸亚铁100mg、硫酸锰5mg、硫酸锌60mg、硫酸铜4mg、磷酸二氢钾600mg、磷酸氢二钾900mg、氯化钙75mg、硼酸3mg、钼酸钠1mg、维生素B₁、B₆烟酸各1mg、乙酸钠3g，用乳酸或氢氧化钠调节pH至6.5～7.0，121℃灭菌30min；降温至30℃～34℃接种上摇床，调温30℃～32℃震荡培养；摇床转速100-120r/min，培养24h，制成液体菌种，菌液中类球红细菌含量≥5×10⁹CFU/ml。

(3)复合菌浆液制备：

将氨基酸生产中产生的废浆液装入100L种子培养罐至70L，调pH至6.5～7.0，121℃灭菌30min；降温至30℃～34℃接种，多粘类芽孢杆菌按6％的接种量、类球红细菌按4％的接种量接种，以体积比每分钟0.5～1.0的通气量通入净化空气，并以80-100r/min的转速搅拌，发酵24h，所得混合菌种中多粘类芽孢杆菌含量≥5×10⁹CFU/ml；类球红细菌含量≥3×10⁹CFU/ml，pH值7.5～8.5。

放大发酵：将氨基酸生产中产生的废浆液装入1000L发酵罐至700L，调pH至6.0～6.5，121℃灭菌30min；降温至30℃～32℃，将100L种子培养罐中发酵好的混合菌种转入1000L发酵罐中，以体积比每分钟为0.5～1.0的通气量通入无菌空气，并以80-100r/min的转速搅拌，发酵24h，所得复合菌浆液中多粘类芽孢杆菌含量≥5×10⁹CFU/ml；类球红细菌含量≥3×10⁹CFU/ml；pH值7.5～8.5。

复合菌浆液中含有大量多粘类芽孢杆菌和类球红细菌。多粘类芽孢杆菌具有抑制沙门氏菌、葡萄球菌、大肠杆菌等有害菌生长的特性；而类球红细菌具有促进放线菌、光合细菌、酵母菌、乳酸菌等益生菌群增殖的特性，利用两种菌的互不拮抗、互不抑制的共生特征和协同作用，特别适合在养殖水体的净化领域中的应用。

在将上述复合菌浆液用于净化养殖水体时，可以直接将其投入水池等养殖水体。但为了更好的延长保存期菌活力和效能发挥，可以制成复合微生物颗粒剂，优选以下方式：

以复合菌浆液为原料，生产用于养殖水体净化的复合微生物颗粒剂，该颗粒剂含有多粘芽孢杆菌3×10⁸CFU/g以上，类球红细菌2×10⁸CFU/g以上，

所述颗粒剂的具体生产方法为：

(1)将权利要求1所述复合菌浆液与60-100目的沸石粉按重量比0.1～0.5∶1搅拌混合均匀，做成沸石粉与菌浆液混合的散状混合物；

将上述散状混合物送入造粒机制成Φ2～Φ5mm颗粒，在50℃～60℃下干燥至水分含量小于20％时即得复合微生物颗粒剂成品。

复合菌浆液中含有大量多粘类芽孢杆菌和类球红细菌。多粘类芽孢杆菌具有抑制青枯病原菌和有害真菌的特性；而类球红细菌具有促进土壤放线菌、光合细菌、酵母菌、乳酸菌等益生菌群增殖的特性，两种菌的协同作用，特别适合在制备生物有机肥的领域中的应用。

上述复合菌浆液可以用于制备各种液态肥、粉状冲施肥等，但为了更好的促进有效菌群的活力和效能发挥，优选以下方式：

以复合菌浆液为原料，生产复合微生物有机肥颗粒，

具体生产方法为：

(1)将有机肥料干粉与权利要求1所述复合菌浆液以重量比1∶0.1～0.5比例混合均匀，做成散状混合物；

(2)将上述散状混合物送入造粒机制成Φ2～Φ5mm颗粒，在50℃～60℃下干燥至水分含量小于20％时即得复合微生物有机肥颗粒成品。

上述有机肥干粉由以下方式制得：

将腐植酸、沸石粉、肉骨粉、干牛粪以5∶2∶1∶2的重量比混合，粉碎至50-100目，即得所述有机肥料干粉；

或者：

将腐植酸、沸石粉、肉骨粉或羽毛粉、干羊粪或干鸡鸭粪以2∶4∶1∶3的重量比混合，粉碎至50-100目，即得所述有机肥料干粉。

本发明的复合菌浆液、其生产方法及其应用与现有技术相比具有以下突出的有益效果：

(一)以氨基酸生产中所产生的废浆液为发酵基生产多粘类芽孢杆菌和类球红细菌的复合菌浆液，变废为宝，使氨基酸废浆液得到充分地回收利用，节能环保，具有巨大的社会效益和经济效益。

(二)将本发明的复合菌浆液应用于净化养殖水体，能够抑制水体病原菌滋生，降解水体氨氮、硫化氢、亚硝酸盐等有害物质，提高水产养殖物种的成活率，对水产健康养殖发展有着积极的推动作用，并对资源化利用促进生态环境建设有深远的意义。适用于河蟹、海参、对虾、泥鳅、黑鱼、黄颡鱼等高密度养殖水体的净化。

(三)将本发明的复合菌浆液应用于生产有机肥料，能够促进作物对养分的吸收和利用，减少化肥的使用量，从而改善农田环境质量，提高农产品的品质。

附图说明

附图1是本发明方法所制备复合微生物颗粒剂所做对比实验(实验例一)的效果图；

附图2是本发明方法所制备复合微生物颗粒剂所做对比实验(实验例二)的效果图；

附图3是本发明方法所制备复合微生物颗粒剂所做对比实验(实验例三)的效果图；

附图4是本发明方法所制备有机肥颗粒所做对比实验(实验例四)的效果图；

附图5是本发明方法所制备有机肥颗粒所做对比实验(实验例五)的统计结果图。

具体实施方式

以具体制备实施例、实验例对本发明的复合菌浆液、其生产方法及其应用作以下详细地说明。

制备实施例一：

以取自江苏汉光生物工程有限公司的氨基酸废浆液为原料。废浆液中主要含有碳水化合物、有机酸、蛋白质、氨基酸、B族维生素、氮、磷、钾等多种营养物质，总固形物含量6.7％。

生产步骤：

(1)多粘类芽孢杆菌液体菌种制备：

所用液体培养基配制方法(以1000ml为例)：称取土豆100g，切成1cm方块放入1000ml纯净水中沸煮30min，过滤，取滤液，加纯净水定容至1000ml，加入葡萄糖10g、磷酸氢二钾2.5g、磷酸二氢钾1.5g，用乙酸或氢氧化钠调pH6.5～7.0，121℃灭菌30min；降温至31℃时，接菌种上摇床调温30℃震荡培养；摇床转速110r/min，培养24h，制成液体菌种，菌液中多粘类芽孢杆菌含量≥1×10¹⁰CFU/ml。

(2)类球红细菌液体菌种制备：

所用液体培养基配制方法(以1000ml为例)：在1000ml蒸馏水中加入硫酸铵1g、硫酸镁200mg、硫酸亚铁100mg、硫酸锰5mg、硫酸锌60mg、硫酸铜4mg、磷酸二氢钾600mg、磷酸氢二钾900mg、氯化钙75mg、硼酸3mg、钼酸钠1mg、维生素B₁、B₆烟酸各1mg、乙酸钠3g，用乳酸或氢氧化钠调节pH至6.5～7.0，121℃灭菌30min；降温至31℃接种上摇床，调温30℃震荡培养；摇床转速110r/min，培养24h，制成液体菌种，菌液中类球红细菌含量≥5×10⁹CFU/ml。

(3)复合菌浆液制备：

将氨基酸废浆液装入100L种子培养罐至70L，用氢氧化钠调pH至6.5～7.0，121℃灭菌30min；降温至31℃接种，多粘类芽孢杆菌按6％的接种量、类球红细菌按4％的接种量接种，以体积比每分钟0.7的通气量通入净化空气，并以90r/min的转速搅拌，发酵24h，所得混合菌种中多粘类芽孢杆菌含量≥5×10⁹CFU/ml；类球红细菌含量≥3×10⁹CFU/ml，pH值7.5～8.5。

放大发酵：将氨基酸废浆液装入1000L发酵罐至700L，用氢氧化钠调pH至6.0～6.5，121℃灭菌30min；降温至30℃，将100L种子培养罐中发酵好的混合菌种转入1000L发酵罐中，以体积比每分钟为0.7的通气量通入无菌空气，并以90r/min的转速搅拌，发酵24h，所得复合菌浆液中多粘类芽孢杆菌含量≥5×10⁹CFU/ml；类球红细菌含量≥3×10⁹CFU/ml；pH值7.5～8.5。

制备实施例二：

生产步骤：

(1)多粘类芽孢杆菌液体菌种制备：

所用液体培养基配制方法(以1000ml为例)：称取土豆100g，切成1cm方块放入1000ml蒸馏水中沸煮30min，过滤，取滤液，加水定容至1000ml，加入葡萄糖10g、磷酸氢二钾2.5g、磷酸二氢钾1.5g，用氢氧化钠调pH 6.5～7.0，121℃灭菌30min；降温至34℃时，接菌种上摇床调温32℃震荡培养；摇床转速110r/min，培养24h，制成液体菌种，菌液中多粘类芽孢杆菌含量≥1×10¹⁰CFU/ml；

(2)类球红细菌液体菌种制备：

所用液体培养基配制方法(以1000ml为例)：在1000ml蒸馏水中加入硫酸铵1g、硫酸镁200mg、硫酸亚铁100mg、硫酸锰5mg、硫酸锌60mg、硫酸铜4mg、磷酸二氢钾600mg、磷酸氢二钾900mg、氯化钙75mg、硼酸3mg、钼酸钠1mg、维生素B₁、B₆烟酸各1mg、乙酸钠3g，用乳酸或氢氧化钠调节pH至6.5～7.0，121℃灭菌30min；降温至34℃接种上摇床，调温32℃震荡培养；摇床转速110r/min，培养24h，制成液体菌种，菌液中类球红细菌含量≥5×10⁹CFU/ml。

(3)复合菌浆液制备：

将氨基酸废浆液装入100L种子培养罐至70L，用氢氧化钠调pH至6.5～7.0，121℃灭菌30min；降温至34℃接种，多粘类芽孢杆菌按6％的接种量、类球红细菌按4％的接种量接种，以体积比每分钟0.9的通气量通入净化空气，并以90r/min的转速搅拌，发酵24h，所得混合菌种中多粘类芽孢杆菌含量≥5×10⁹CFU/ml；类球红细菌含量≥3×10⁹CFU/ml，pH值7.5～8.5。

放大发酵：将氨基酸废浆液装入1000L发酵罐至700L，用氢氧化钠调pH至6.0～6.5，121℃灭菌30min；降温至32℃，将100L种子培养罐中发酵好的混合菌种转入1000L种子罐中，以体积比每分钟为0.8的通气量通入无菌空气，并以90r/min的转速搅拌，发酵24h，所得复合菌浆液中多粘类芽孢杆菌含量≥5×10⁹CFU/ml；类球红细菌含量≥3×10⁹CFU/ml；pH值7.5～8.5。

制备实施例三：

以复合菌浆液为原料，生产用于养殖水体净化的复合微生物颗粒剂。

配方：

复合菌浆液(制备实施例一制得)    1kg；

沸石粉(80目)                    7kg。

制备步骤：

(1)将上述配方量的复合菌浆液与沸石粉搅拌混合均匀，做成沸石粉与菌浆液混合的散状混合物；

(2)将上述散状混合物送入造粒机制成Φ2～Φ5mm颗粒，在50℃下干燥至水分含量小于20％时即得复合微生物颗粒剂成品。

所得颗粒剂含有多粘芽孢杆菌≥3×10⁸CFU/g，类球红细菌≥2×10⁸CFU/g。

制备实施例四：

以复合菌浆液为原料，生产有机肥颗粒。

配方：

有机肥干粉                     10kg；

复合菌浆液(制备实施例一制得)   2kg。

有机肥干粉是以腐植酸、沸石粉、肉骨粉、干牛粪以5∶2∶1∶2的重量比混合，并粉碎至80目所得。

生产步骤：

(1)将上述配方量的有机肥料干粉与复合菌浆液混合均匀，做成散状混合物；

(2)将上述散状混合物送入造粒机制成Φ2～Φ5mm颗粒，在55℃下干燥至水分含量小于20％时即得复合微生物有机肥颗粒成品。

所得有机肥颗粒中含有多粘芽孢杆菌≥3×10⁸CFU/g，类球红细菌≥2×10⁸CFU/g 。

制备实施例五：

以复合菌浆液为原料，生产有机肥颗粒。

配方：

有机肥干粉                    10kg；

复合菌浆液(制备实施例一制得)  4kg。

有机肥干粉是将腐植酸、沸石粉、羽毛粉、干羊粪以2∶4∶1∶3的重量比混合，并粉碎至80目所得。

生产步骤：

(1)将上述配方量的有机肥料干粉与复合菌浆液混合均匀，做成散状混合物；

(2)将上述散状混合物送入造粒机制成Φ2～Φ5mm颗粒，在55℃下干燥至水分含量小于20％时即得复合微生物有机肥颗粒成品。

所得有机肥颗粒中含有多粘芽孢杆菌≥3×10⁸CFU/g，类球红细菌≥2×10⁸CFU/g。

实验例一；

以制备实施例三所得复合微生物颗粒剂进行水体净化实验

实验时间：2010年5月19日～6月20日

实验地点：宜兴市高塍镇蟹塘

实验蟹塘水深90cm，5月19日投放复合微生物颗粒剂m²的用量为3g，6月5日又投放同等量的颗粒剂。试验期共投放2次。

实验数据如表一所示。

表一

实验前后(30天)效果图片见附图一。

实验例二；

以制备实施例三所得复合微生物颗粒剂进行水体净化实验

实验时间：2010.4.20-8.28

实验地点：山东海阳行村对虾养殖池塘

实验蟹塘水深100cm，复合微生物颗粒剂m²的用量为5g。4.20日、5.20日、6.22日、7.19日共投放四次；用量相同。

实验前后(一周)效果图片见附图二。

实验例三；

以制备实施例三所得复合微生物颗粒剂进行水体净化实验

实验时间：2010.6.6-8.10

实验地点：江苏赣榆的泥鳅养殖塘

实验塘水深100cm，复合微生物颗粒剂m²的用量为5g。6.6日、7.10日同等量投放2次。

实验前后(10天)效果图片见附图三。

实验例四：

以制备实施例四所得有机肥颗粒及市售的周天牌生物有机肥进行对甜瓜种植比实验。

实验地点：宜兴市徐舍镇

时间：2010.4.17-7.12

壤质：黄棕壤保护地

实验方法：共设3个实验小区；3个对照小区，每小区20平方米。

每个实验小区施入制备实施例四所得有机肥颗粒20kg，对照组每个小区施入市售的周天牌生物有机肥20kg，施入后同时翻耕于4.17日栽苗。

于2010年7月12日大小甜瓜一次性摘完称量计算产量，结果如下：

对照组平均每小区产量为39.7kg；实验组平均每小区产量为53.6kg，平均比对照提高产量35％，达到极显著增产水平。

对比实验效果如附图四所示。

实验例五：

以制备实施例五所得有机肥颗粒及市售的天耕牌生物有机肥进行小麦种植对比实验。

实验地点：江苏宜兴

时间：种植时间是2010.11.25；收割时间2011.6.2。

小麦品种：“宁麦15”

对照组：CK，亩用50kg天耕牌生物有机肥；

实验组：T1，亩用30kg制备实施例五所得有机肥颗粒；

T2，亩用30kg制备实施例五所得有机肥颗粒；

T3，亩用40kg制备实施例五所得有机肥颗粒；

T4，亩用50kg制备实施例五所得有机肥颗粒；

实验统计结果如附图五所示。

如附图五所示：与对照组CK比，T1增产12.5％，T2增产14.8％，T3增产16.7％，.T4增产19.3％。平均比CK增产15.8％。

Claims (10)

1.一种复合菌浆液，其特征在于，以氨基酸废浆液为发酵基，多粘类芽孢杆菌按6％的接种量、类球红细菌按4％的接种量接种，在pH6.5～7.0、30℃～34℃和需氧条件下发酵24h，即得复合菌浆液，

所述复合菌浆液中多粘类芽孢杆菌含量≥5×10⁹CFU/ml；类球红细菌含量≥3×10⁹CFU/ml。

2.权利要求1所述的复合菌浆液的生产方法，其特征在于：以氨基酸废浆液为发酵基，多粘类芽孢杆菌按6％的接种量、类球红细菌按4％的接种量接种，在pH6.5～7.0、30℃～34℃和需氧条件下发酵24h，即得复合菌浆液，

所述复合菌浆液中多粘类芽孢杆菌含量≥5×10⁹CFU/ml；类球红细菌含量≥3×10⁹CFU/ml。

3.根据权利要求2所述复合菌浆液的生产方法，其特征在于：将氨基酸生产中所产生的废浆液调整pH至6.5～7.0，经121℃灭菌30min后，降温至30℃～34℃进行菌种接种，多粘类芽孢杆菌按6％的接种量、类球红细菌4％的接种量接种，控制温度30℃～34℃，以体积比每分钟0.5～1.0的通气量通入净化空气，并以80-100r/min的转速搅拌，发酵24h即得复合菌浆液，

所得复合菌浆液中多粘类芽孢杆菌含量≥5×10⁹CFU/ml；类球红细菌含量≥3×10⁹CFU/ml。

4.根据权利要求2所述复合菌浆液的生产方法，其特征在于：该方法包括：

(1)多粘类芽孢杆菌液体菌种制备：

所用液体培养基配制方法：称取土豆100g，切块，并放入纯净水中沸煮30min，过滤，取滤液，加纯净水定容至1000ml，加入葡萄糖10g、磷酸氢二钾2.5g、磷酸二氢钾1.5g，用乙酸或氢氧化钠调pH 6.5～7.0，121℃灭菌30min；降温至30℃～34℃时，接菌种上摇床调温30℃～32℃震荡培养；摇床转速100-120r/min，培养24h，制成液体菌种，菌液中多粘类芽孢杆菌含量≥1×10¹⁰CFU/ml；

(2)类球红细菌液体菌种制备：

所用液体培养基配制方法：以1000ml蒸馏水为例，在蒸馏水中加入硫酸铵1g、硫酸镁200mg、硫酸亚铁100mg、硫酸锰5mg、硫酸锌60mg、硫酸铜4mg、磷酸二氢钾600mg、磷酸氢二钾900mg、氯化钙75mg、硼酸3mg、钼酸钠1mg、维生素B1、B6烟酸各1mg、乙酸钠3g，用乳酸或氢氧化钠调节pH至6.5～7.0，121℃灭菌30min；降温至30℃～34℃接种上摇床，调温30℃～32℃震荡培养；摇床转速100-120r/min，培养24h，制成液体菌种，菌液中类球红细菌含量≥5×10⁹CFU/ml。

(3)复合菌浆液制备：

将氨基酸生产中产生的废浆液装入100L种子培养罐至70L，调pH至6.5～7.0，121℃灭菌30min；降温至30℃～34℃接种，多粘类芽孢杆菌按6％的接种量、类球红细菌按4％的接种量接种，以体积比每分钟0.5～1.0的通气量通入净化空气，并以80-100r/min的转速搅拌，发酵24h，所得混合菌种中多粘类芽孢杆菌含量≥5×10⁹CFU/ml；类球红细菌含量≥3×10⁹CFU/ml，pH值7.5～8.5。

放大发酵：将氨基酸生产中产生的废浆液装入1000L发酵罐至700L，调pH至6.0～6.5，121℃灭菌30min；降温至30℃～32℃，将100L种子培养罐中发酵好的混合菌种转入1000L发酵罐中，以体积比每分钟为0.5～1.0的通气量通入无菌空气，并以80-100r/min的转速搅拌，发酵24h，所得复合菌浆液中多粘类芽孢杆菌含量≥5×10⁹CFU/ml；类球红细菌含量≥3×10⁹CFU/ml；pH值7.5～8.5。

5.权利要求1所述的复合菌浆液在净化养殖水体中的应用。

6.根据权利要求5所述复合菌浆液在净化养殖水体中的应用，其特征在于，以复合菌浆液为原料，生产用于养殖水体净化的复合微生物颗粒剂，该颗粒剂含有多粘芽孢杆菌3×10⁸CFU/g以上，类球红细菌2×10⁸CFU/g以上，

所述颗粒剂的生产方法为：

(1)将权利要求1所述复合菌浆液与60-100目的沸石粉按重量比0.1～0.5∶1搅拌混合均匀，做成沸石粉与菌浆液混合的散状混合物；

(2)将上述散状混合物送入造粒机制成Φ2～Φ5mm颗粒，在50℃～60℃下干燥至水分含量小于20％时即得复合微生物颗粒剂成品。

7.权利要求1所述的复合菌浆液在制备生物有机肥中的应用。

8.根据权利要求7所述复合菌浆液在制备生物有机肥中的应用，其特征在于，以复合菌浆液为原料，生产复合微生物有机肥颗粒，

所述有机肥颗粒的生产方法为：

(1)将有机肥料干粉与权利要求1所述复合菌浆液以重量比1∶0.1～0.5比例混合均匀，做成散状混合物；

(2)将上述散状混合物送入造粒机制成Φ2～Φ5mm颗粒，在50℃～60℃下干燥至水分含量小于20％时即得复合微生物有机肥颗粒成品。

9.根据权利要求8所述的复合菌浆液在制备生物有机肥中的应用，其特征在于，

将腐植酸、沸石粉、肉骨粉、干牛粪以5∶2∶1∶2的重量比混合，粉碎至50-100目，即得所述有机肥料干粉。

10.根据权利要求8所述的复合菌浆液在制备生物有机肥中的应用，其特征在于，

将腐植酸、沸石粉、肉骨粉或羽毛粉、干羊粪或干鸡鸭粪以2∶4∶1∶3的重量比混合，粉碎至50-100目，即得所述有机肥料干粉。

Images