CN103012414A - 一种酶法制备浒苔叶绿素的工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种叶绿素的制备工艺,以浒苔为浸取原料,该方法主要包括对浒苔的酶解步骤。具体地说,本发明的浒苔叶绿素的制备方法包括先用硫酸铜稳定叶绿素,再使用酶制剂对浒苔细胞进行酶解,破碎浒苔细胞壁,然后采用90%的乙醇反复浸泡提取,提取液用硫酸铵沉淀,离心,取沉淀干燥后即成浒苔叶绿素成品。本发明工艺流程简单,成本低廉,适宜大规模生产。
Description
技术领域
本发明涉及一种叶绿素的制备工艺,具体涉及一种酶法制备浒苔叶绿素的工艺。
背景技术
市场上的叶绿素包括天然色素和合成色素。合成色素主要来自于化工原料,发色物质多含有苯环、萘环等基团,摄入一定量会对人体产生危害,甚至会致毒、致癌和致畸;天然色素是从动物、植物或微生物的组织中提取得到的有色物质,色泽自然,更重要的是无毒副作用,因而倍受消费者的欢迎。
受工业废水以及生活污水排放的影响,海水的富营养化日趋加重,因此浒苔暴发也越来越频繁,越来越严重。而目前浒苔资源缺乏有效利用的方法,资源浪费严重,且打捞出来的浒苔一旦得不到及时的处理,会造成严重的环境污染,因此如何快速将浒苔处理掉,减轻污染,已成为环境保护的重大课题。而目前国内外并无从浒苔中提取叶绿素的报道,因此,如果能研究一种从浒苔中提取叶绿素的方法,不仅可以减轻环境污染,还可以降低目前叶绿素生产的成本。
发明内容
本发明的目的是针对目前浒苔资源缺乏有效利用的方法,资源浪费严重,且打捞出来的浒苔一旦得不到及时的处理,会造成严重的环境污染的现状,本发明提供一种酶法制备浒苔叶绿素的工艺。
本发明通过以下技术方案来实现:一种酶法制备浒苔叶绿素的工艺,包括以下步骤:
(1) 将浒苔沥干、加入10倍浒苔重量的质量浓度为0.04%~0.06%的硫酸铜溶液浸泡稳定叶绿素,4~6 小时后用清水洗去浒苔上的硫酸铜,然后烘干、绞碎细化;
(2) 取浒苔细粉,加入1倍重量的蒸馏水混匀,加入1/20重量的纤维素酶和几丁质酶酶解;
(3) 酶解结束后,100℃加热灭酶活,加入2倍体积、质量浓度为90%的乙醇容易反复浸泡提取两次,浸泡时间为24~36小时,把2次浸取提取液合并在一起;
(4) 向提取液中加入硫酸铵,沉淀浒苔叶绿素,离心,取沉淀干燥后即成浒苔叶绿素成品。
上述步骤(2)所述的酶解温度为50℃~70℃,酶解时间为4~6小时,纤维素酶和几丁质酶的质量比为2~1:1。
上述步骤(4)所述硫酸铵为硫酸铵晶体,所述浒苔细粉与硫酸铵晶体的重量比为1:0.1~0.4。
上述步骤(4)所述的离心转速为8000rpm,离心时间为20分钟。
本发明的有益效果是:本发明的成本低,工艺流程简单,提取的叶绿素稳定性好,适宜大规模生产,可广泛应用于药品、保健品、食品领域的产品着色。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明作进一步描述,但不作为对本发明的限定。
实施例1
将浒苔沥干、加入10倍浒苔重量的质量浓度为0.04%的硫酸铜溶液浸泡稳定叶绿素,6小时后用清水洗去浒苔上的硫酸铜,然后烘干、绞碎细化。取1Kg浒苔细粉,加入1倍重量的蒸馏水混匀,加入1/20重量的纤维素酶和几丁质酶酶解,纤维素酶和几丁质酶的质量比为2:1,酶解温度为50℃,酶解时间为6小时;酶解结束后,100℃加热灭酶活,加入2倍体积、质量浓度为90%的乙醇反复浸泡提取两次,浸泡时间为24~36小时,把2次浸取提取液合并在一起,向提取液中加入硫酸铵晶体,浒苔细粉与硫酸铵晶体的重量比为1:0.1,将提取液离心,离心转速为8000rpm,离心时间为20分钟,取沉淀干燥后即成浒苔叶绿素成品。
实施例2
将浒苔沥干、加入10倍浒苔重量的质量浓度为0.05%的硫酸铜溶液浸泡稳定叶绿素,5小时后用清水洗去浒苔上的硫酸铜,然后烘干、绞碎细化。取1Kg浒苔细粉,加入1倍重量的蒸馏水混匀,加入1/20重量的纤维素酶和几丁质酶酶解,纤维素酶和几丁质酶的质量比为1.5:1,酶解温度为60℃,酶解时间为5小时;酶解结束后,100℃加热灭酶活,加入2倍体积、质量浓度为90%的乙醇反复浸泡提取两次,浸泡时间为24~36小时,把2次浸取提取液合并在一起,向提取液中加入硫酸铵晶体,浒苔细粉与硫酸铵晶体的重量比为1:0.3,将提取液离心,离心转速为8000rpm,离心时间为20分钟,取沉淀干燥后即成浒苔叶绿素成品。
实施例3
将浒苔沥干、加入10倍浒苔重量的质量浓度为0.06%的硫酸铜溶液浸泡稳定叶绿素,4小时后用清水洗去浒苔上的硫酸铜,然后烘干、绞碎细化。取1Kg浒苔细粉,加入1倍重量的蒸馏水混匀,加入1/20重量的纤维素酶和几丁质酶酶解,纤维素酶和几丁质酶的质量比为1:1,酶解温度为70℃,酶解时间为4小时;酶解结束后,100℃加热灭酶活,加入2倍体积、质量浓度为90%的乙醇反复浸泡提取两次,浸泡时间为24~36小时,把2次浸取提取液合并在一起,向提取液中加入硫酸铵晶体,浒苔细粉与硫酸铵晶体的重量比为1:0.4,将提取液离心,离心转速为8000rpm,离心时间为20分钟,取沉淀干燥后即成浒苔叶绿素成品。
Claims (4)
1.一种酶法制备浒苔叶绿素的工艺,其特征在于,包含以下步骤:
(1) 将浒苔沥干、加入10倍浒苔重量的质量浓度为0.04%~0.06%的硫酸铜溶液浸泡稳定叶绿素,4~6 小时后用清水洗去浒苔上的硫酸铜,然后烘干、绞碎细化;
(2) 取浒苔细粉,加入1倍重量的蒸馏水混匀,加入1/20重量的纤维素酶和几丁质酶酶解;
(3) 酶解结束后,100℃加热灭酶活,加入2倍体积、质量浓度为90%的乙醇容溶液反复浸泡提取两次,浸泡时间为24~36小时,把2次浸取提取液合并在一起;
(4) 向提取液中加入硫酸铵,沉淀浒苔叶绿素,离心,取沉淀干燥后即成浒苔叶绿素成品。
2.按照权利要求1所述的酶法制备浒苔叶绿素的工艺,其特征在于:步骤(2)所述的酶解温度为50℃~70℃,酶解时间为4~6 小时,纤维素酶和几丁质酶的质量比为1~2:1。
3.按照权利要求1所述的酶法制备浒苔叶绿素的工艺,其特征在于:步骤(4)所述硫酸铵为硫酸铵晶体,所述浒苔细粉与硫酸铵晶体的重量比为1:0.1~0.4。
4.按照权利要求1所述的酶法制备浒苔叶绿素的工艺,其特征在于:步骤(4)所述的离心转速为8000rpm,离心时间为20分钟。
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CN103725033A (zh) * | 2013-12-24 | 2014-04-16 | 上海海洋大学 | 一种提取浒苔色素的方法 |
CN103833763A (zh) * | 2014-03-21 | 2014-06-04 | 中国海洋大学 | 一种快速制备稳定浒苔叶绿素的方法 |
CN107253953A (zh) * | 2017-08-02 | 2017-10-17 | 中国科学院海洋研究所 | 一种从浒苔中提取叶绿素的方法 |
CN107372966A (zh) * | 2017-08-21 | 2017-11-24 | 紫云自治县红花茶业种植有限公司 | 一种桔梗花茶及其制备方法 |
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C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
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