CN102998272A - 一种桑葚颗粒的质量控制方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供的一种桑葚颗粒的质量控制方法，包括性状、紫外鉴别、薄层鉴别、含量测定。其中，所述含量测定为以芦丁为对照，在紫外分光光度计508nm波长处测定总黄酮的含量。本发明提供的桑葚颗粒的质量控制方法精密度高、重现性好、检测成本低、可操作性强，能够有效保证桑葚颗粒的质量。

Description

一种桑葚颗粒的质量控制方法

技术领域

本发明属于中药制剂质量控制领域，特别涉及一种桑葚颗粒的质量控制方法。 

背景技术

桑葚，又称桑果、桑枣等，为桑科桑属植物桑Morus alba L.、华桑M.cathayana Hemsl.、黑桑M.nigralinn.等植物的成熟果穗。其性寒味甘，入肝肾经，具有补血滋阴，生津润燥的功效，用于眩晕耳鸣、心悸失眠、须发早白、津伤口渴、血虚便秘等症。桑葚中含有大量的还原糖、有机酸、维生素、氨基酸、桑色素及磷脂等营养成分，以及黄酮、生物碱等生物活性分子。 

桑葚中总黄酮主要为芦丁、槲皮素、花青素等黄酮类化合物，芦丁与乌发成分有关，能使头发变的黑而亮泽。花青素等黄酮类化合物作为一种强有力的抗氧化剂，它能够保护人体免受自由基的损伤，有助于预防癌症、心脏病、过早衰老和关节炎，还能增强血管弹性，改善循环系统和增进皮肤的光滑度，抑制炎症和过敏，改善关节的柔韧性。槲皮素具有扩张血管降血压、防止冠心病、减轻心肌肥厚、抑制血管平滑肌细胞增生肥大、抗血栓形成等多种心血管保护作用。 

CN102138976公开了一种桑葚颗粒的制备方法，该方法能够有效提高桑葚颗粒中有效成分的比重，制备得到的桑葚颗粒疗效好。然而，现有桑葚颗粒的质量控制通常采用定性的方法来确定，这些方法存在特征性不强、定性结果不准确、重复性不好等缺陷，导致现有桑葚颗粒的质量难以控制。 

发明内容

发明目的：本发明的目的是提供一种测定结果准确的桑葚颗粒质量控制的方法。 

技术方案：本发明提供的一种桑葚颗粒的质量控制方法，包括性状、紫外鉴别、薄层鉴别、含量测定。 

其中，所述含量测定为以芦丁为对照，在紫外分光光度计508nm波长处测定总黄酮的含量。 

该质量控制方法，具体为：包括以下步骤： 

（1）性状： 

所述桑葚颗粒为棕褐色的颗粒，味甜、微酸； 

（2）鉴别： 

取桑葚颗粒，以乙醇溶解，所述桑葚颗粒：乙醇的用量比为1g：10ml，水浴温热10-15分钟溶解，冷却、过滤，得滤液； 

取滤液，加入镁粉，盐酸数滴，水浴加热3-6分钟，显樱红色； 

取滤液，点于滤纸上，置254nm紫外灯下，显蓝色荧光，滴加三氰化铝试液后，显亮黄绿色荧光； 

（3）薄层鉴别： 

薄层供试品准备：取桑葚颗粒，以石油醚超声提取15-30min，所述桑葚颗粒：石油醚的用量比为1g：10ml，过滤，蒸干，以乙醇溶解，过滤，即得薄层供试品溶液； 

薄层对照品准备：取桑葚药材，以石油醚超声提取15-30min，所述桑葚药材：石油醚的用量比为1g：10ml，过滤，蒸干，以乙醇溶解，过滤，即得薄层对照品溶液； 

以亚油酸为对照，将薄层供试品、薄层对照品和亚油酸分别点于硅胶薄层板上，以乙酸乙酯-石油醚20：80展开，0.1％α-亚硝基-β-荼酚硫酸试液加热显色； 

（4）总黄酮含量测定： 

对照品溶液准备：取芦丁对照品0.2g，精密称定，置100ml量瓶中，加70%乙醇70ml，水浴微热溶解，冷却，70%乙醇定容，摇匀，精密量取10ml，置100ml量瓶中，定容，即得对照品溶液； 

标准曲线的制备：精密量取对照品溶液0ml、1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml，分别置于25ml量瓶中，加水至6ml，加5%亚硝酸钠溶液1ml，混匀，静置6min，加10%硝酸铝溶液1ml，摇匀，静置6min，加氢氧化钠试液10ml，加水至刻度，摇匀，静置15min；以0ml对照品溶液为空白，以紫外分光光度法，在508nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标、浓度为横坐标绘制标准曲线； 

测定方法：取桑葚颗粒，以70%乙醇溶解，所述桑葚颗粒：乙醇的用量比为2g：100ml，精密称定，超声10-15min，冷却，70%乙醇补足重量；精密吸取5ml，置于25ml量瓶中，加水至6ml，加5%亚硝酸钠溶液1ml，混匀，静置6min，加10%硝酸铝溶液1ml，摇匀，静置6min，加氢氧化钠试液10ml，加水至刻度，摇匀，静置15min；以0ml对照品溶液为空白，以紫外分光光度法，在508nm波长处测定吸光度，根据标准曲线，计算总黄酮含量。 

有益效果：本发明提供的桑葚颗粒的质量控制方法精密度高、重现性好、检测成本 低、可操作性强，能够有效保证桑葚颗粒的质量。 

具体实施方式

下面结合实施例对本发明的技术方案作出进一步说明。 

实施例1桑葚颗粒总黄酮含量测定方法考察。 

（1）仪器与试剂： 

TU-1901型紫外分光光度计北京通用仪器设备有限公司 

亚硝酸钠         南京化学试剂有限公司 

硝酸铝           南京化学试剂有限公司 

氢氧化钠         南京化学试剂有限公司 

芦丁对照品       中检所 

桑葚颗粒样品     三批，自制；批次1、批次2和批次3。 

（2）溶液准备： 

对照品溶液准备：取芦丁对照品0.2002g，精密称定，置100ml量瓶中，加70%乙醇70ml，水浴微热溶解，冷却，70%乙醇定容，摇匀，精密量取10ml，置100ml量瓶中，定容，即得对照品溶液；所述对照品溶液的浓度为0.2002mg/ml。 

供试品溶液准备：取三批次桑葚颗粒，以70%乙醇溶解，所述桑葚颗粒：乙醇的用量比为2g：100ml，精密称定，超声10-15min，冷却，70%乙醇补足重量；即得三批供试品溶液，分别为批次1溶液、批次2溶液和批次3溶液。 

（3）波长选择： 

分别取对照品溶液和批次1溶液，以不加入对照品溶液和供试品溶液作为阴性对照；精密吸取5ml，置于25ml量瓶中，加水至6ml，加5%亚硝酸钠溶液1ml，混匀，静置6min，加10%硝酸铝溶液1ml，摇匀，静置6min，加氢氧化钠试液10ml，加水至刻度，摇匀，静置15min；在250-600波长范围内扫描，对照品溶液和供试品溶液在波长508处有最大吸收，而阴性对照在此波长无明显吸收，因此选择508nm为检测波长。 

（4）标准曲线的制备： 

精密量取对照品溶液0ml、1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml，分别置于25ml量瓶中，加水至6ml，加5%亚硝酸钠溶液1ml，混匀，静置6min，加10%硝酸铝溶液1ml，摇匀，静置6min，加氢氧化钠试液10ml，加水至刻度，摇匀，静置15min；以0ml对照品溶液为空白，以紫外分光光度法，在508nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标、 浓度为横坐标绘制标准曲线；所得标准曲线为A=0.0141C+0.0006（R²=1）其中A为吸光度，C为芦丁浓度。测定结果见表1。 

表1  芦丁对照品标准曲线考察 

序号	对照品溶液量ml	浓度μg/ml	吸光度
				1	1	8.008	0.113
2	2	16.016	0.228
				3	3	24.024	0.341
4	4	32.032	0.451
				5	5	40.04	0.566
6	6	48.048	0.680

（5）精密度实验

取3号对照品溶液，以标准曲线测定方法重复测定5次，记录吸光度值，并计算标准偏差，结果表明，对照品芦丁测定精密度良好。见表2。 

表2  精密度试验结果 

（6）稳定性试验 

取批次1溶液5ml，室温下每隔一段时间以标准曲线测定方法重复测定，记录吸光度值，并计算标准偏差，结果表明，试样总黄酮测定稳定性好。见表3。 

表3  稳定性试验结果 

（7）重复性试验 

取批次1溶液5ml，以标准曲线测定方法重复测定5次，记录吸光度值，并计算标准偏差，结果表明，试样总黄酮测定重复性好。见表4。 

表4  重复性试验结果 

实施例2桑葚颗粒质量控制。 

（1）桑葚颗粒性状： 

所述桑葚颗粒为棕褐色的颗粒，味甜、微酸； 

（2）鉴别： 

取桑葚颗粒2g，以20ml乙醇溶解，水浴温热10-15分钟溶解，冷却、过滤，得滤液；取滤液，加入镁粉，盐酸数滴，水浴加热3-6分钟，显樱红色；取滤液，点于滤纸上，置254nm紫外灯下，显蓝色荧光，滴加三氰化铝试液后，显亮黄绿色荧光； 

另取桑葚药材2g，以石油醚20ml超声提取15-30min，过滤，蒸干，以乙醇溶解，过滤；取滤液，加入镁粉，盐酸数滴，水浴加热3-6分钟，显樱红色；取滤液，点于滤纸上，置254nm紫外灯下，显蓝色荧光，滴加三氰化铝试液后，显亮黄绿色荧光； 

由此可见，桑葚颗粒与桑葚药材性状一致，均含有黄酮类主要成分。 

（3）薄层鉴别： 

薄层供试品准备：取桑葚颗粒，以石油醚超声提取15-30min，所述桑葚颗粒：石油醚的用量比为1g：10ml，过滤，蒸干，以乙醇溶解，过滤，即得薄层供试品溶液； 

薄层对照品准备：取桑葚药材，以石油醚超声提取15-30min，所述桑葚药材：石油醚的用量比为1g：10ml，过滤，蒸干，以乙醇溶解，过滤，即得薄层对照品溶液； 

以亚油酸为对照，将薄层供试品、薄层对照品和亚油酸分别点于硅胶薄层板上，以乙酸乙酯-石油醚20：80展开，0.1％α-亚硝基-β-荼酚硫酸试液加热显色； 

结果显示，桑葚颗粒与桑葚药材在薄层板上主要显色点基本一致，且桑葚颗粒显色更清晰，显色点略少于桑葚药材。 

（4）总黄酮含量测定： 

分别精密吸取5ml待测试样，置于25ml量瓶中，加水至6ml，加5%亚硝酸钠溶液1ml，混匀，静置6min，加10%硝酸铝溶液1ml，摇匀，静置6min，加氢氧化钠试液10ml，加水至刻度，摇匀，静置15min；以0ml对照品溶液为空白，以紫外分光光度法，在508nm波长处测定吸光度，计算总黄酮含量。 

批次1溶液、批次2溶液和批次3溶液分别各测定三次，结果见表5。 

表5  总黄酮含量测定结果 

Claims (3)

1.一种桑葚颗粒的质量控制方法，其特征在于：该质量控制方法包括性状、紫外鉴别、薄层鉴别、含量测定。

2.根据权利要求1所述的一种桑葚颗粒的质量控制方法，其特征在于：所述含量测定为以芦丁为对照，在紫外分光光度计508nm波长处测定总黄酮的含量。

3.根据权利要求1所述的一种桑葚颗粒的质量控制方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）性状：

所述桑葚颗粒为棕褐色的颗粒，味甜、微酸；

（2）鉴别：

取桑葚颗粒，以乙醇溶解，所述桑葚颗粒：乙醇的用量比为1g：10ml，水浴温热10-15分钟溶解，冷却、过滤，得滤液；

取滤液，加入镁粉，盐酸数滴，水浴加热3-6分钟，显樱红色；

取滤液，点于滤纸上，置254nm紫外灯下，显蓝色荧光，滴加三氰化铝试液后，显亮黄绿色荧光；

（3）薄层鉴别：

薄层供试品准备：取桑葚颗粒，以石油醚超声提取15-30min，所述桑葚颗粒：石油醚的用量比为1g：10ml，过滤，蒸干，以乙醇溶解，过滤，即得薄层供试品溶液；

薄层对照品准备：取桑葚药材，以石油醚超声提取15-30min，所述桑葚药材：石油醚的用量比为1g：10ml，过滤，蒸干，以乙醇溶解，过滤，即得薄层对照品溶液；

以亚油酸为对照，将薄层供试品、薄层对照品和亚油酸分别点于硅胶薄层板上，以乙酸乙酯-石油醚20：80展开，0.1％α-亚硝基-β-荼酚硫酸试液加热显色；

（4）总黄酮含量测定：

对照品溶液准备：取芦丁对照品0.2g，精密称定，置100ml量瓶中，加70%乙醇70ml，水浴微热溶解，冷却，70%乙醇定容，摇匀，精密量取10ml，置100ml量瓶中，定容，即得对照品溶液；

标准曲线的制备：精密量取对照品溶液0ml、1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml，分别置于25ml量瓶中，加水至6ml，加5%亚硝酸钠溶液1ml，混匀，静置6min，加10%硝酸铝溶液1ml，摇匀，静置6min，加氢氧化钠试液10ml，加水至刻度，摇匀，静置15min；以0ml对照品溶液为空白，以紫外分光光度法，在508nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标、浓度为横坐标绘制标准曲线； 

测定方法：取桑葚颗粒，以70%乙醇溶解，所述桑葚颗粒：乙醇的用量比为2g：100ml，精密称定，超声10-15min，冷却，70%乙醇补足重量；精密吸取5ml，置于25ml量瓶中，加水至6ml，加5%亚硝酸钠溶液1ml，混匀，静置6min，加10%硝酸铝溶液1ml，摇匀，静置6min，加氢氧化钠试液10ml，加水至刻度，摇匀，静置15min；以0ml对照品溶液为空白，以紫外分光光度法，在508nm波长处测定吸光度，根据标准曲线，计算总黄酮含量。