CN102965422A - 一种从油茶籽粕中提取油茶蛋白的方法 - Google Patents

一种从油茶籽粕中提取油茶蛋白的方法 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种从油茶籽蛋白中提取油茶籽多肽的方法，提取工艺路线为：油茶籽蛋白→粉碎→过筛→加水得悬浮液→热变性处理→调pH值→复合酶酶解→灭酶→离心→取上清液→树脂脱盐→SephadexG-50柱层析→离心→取上清液冷冻干燥→油茶籽多肽。本发明采用复合酶酶解，缩短了酶解时间，降低了能耗，同时也提高了油茶籽多肽的提取率，实现了变废为宝，低能耗、低污染的目的。

Description

一种从油茶籽粕中提取油茶蛋白的方法
技术领域
   本发明涉及油茶籽加工领域，具体涉及一种从油茶籽粕中提取油茶蛋白的方法。
背景技术
油茶系山茶科山茶属植物，是我国重要的油料作物。我国有丰富的油茶资源，年产油茶籽120余万吨。油茶籽榨油后饼粕中含有约12%～15%的蛋白质，其利用率相当低，造成资源的极大浪费。植物蛋白质在生物酶法条件下，水解生成的多肽及氨基酸等物质，具有很高的营养价值与功能特性，因此该法已成为研究热点。很多种植物蛋白质酶解后产生的多肽除了具有易被人体消化吸收的特性外，还具有很强的抗氧化、降低胆固醇等功能特性。到目前为止，未见国内外有关油茶籽多肽的研究报道。因此，开展对油茶籽多肽保健功能活性的研究具有重要的现实意义。 
发明内容
  本发明提供了一种从油茶籽粕中提取油茶蛋白的方法。实现资源的充分利用，变废为宝，减少污染的绿色经济目的。
   为实现上述目的本发明采用的技术方案为：
一种油茶籽蛋白中提取油茶籽多肽的方法，其特征在于，其提取工艺路线为：油茶籽蛋白→粉碎→过筛→加水得悬浮液→热变性处理 →调pH值→复合酶酶解→灭酶→离心→取上清液→树脂脱盐→SephadexG-25柱层析→离心→取上清液冷冻干燥→油茶籽多肽，具体包括以下步骤：
（1）将油茶籽蛋白粉碎，按底物浓度 2.8-3.0%，加水混合，90℃热变性处理15-20 min后降温至60℃以下，先调节PH值为5.5-6.0，静置3-4小时，再调节PH为8.0-8.5，静置3-4小时；然后再调节pH值为7.0，按每克底物向其中加入4000-5000 u的中性蛋白酶和4000-5000 u的木瓜蛋白酶，在53-54℃搅拌酶解2-3h，酶解后将温度升至80-85℃灭酶4-6min，然后用转速为3000-4000r/min的离心机离心分离10-15min，取上清液；
（2）上清液采用树脂柱脱盐，过滤，得滤液；
（3） 所得滤液用SephadexG-25柱层析，以蒸馏水为洗脱液，洗脱速度为 0.3ml/min，得层析液；
（4）然后离心分离层析液；
（5）取上清液冷冻干燥得到油茶籽多肽。 
所述的从油茶籽粕中提取油茶蛋白的方法，其特征在于：步骤（1）所述的底物浓度2.9%。
所述的从油茶籽粕中提取油茶蛋白的方法，其特征在于：步骤（1）的酶解温度为53.4℃。
本发明的有益效果：
本发明采用中性蛋白酶和木瓜蛋白酶复合酶酶解处理，缩短了酶解时间，降低了能耗，同时也提高了茶籽多肽的提取率，由原来的56.8%提高到78%，实现了变废为宝，低能耗、低污染的目的。
具体实施方式
  将油茶籽蛋白粉碎后过80目筛，按底物浓度 2.9%，加水混合，90℃热变性处理20 min后降温至60℃以下，先调节PH值为5.5，静置3小时，再调节PH为8.5，静置4小时；然后再调节pH值为7.0，按每克底物向其中加入4364.1 u的中性蛋白酶和5000 u的木瓜蛋白酶，在53.4℃搅拌酶解3h，酶解后将温度升至85℃灭酶6min，然后用转速为4000r/min的离心机离心分离15min，取上清液；上清液采用树脂柱脱盐，过滤，得滤液；所得滤液用SephadexG-25柱层析，以蒸馏水为洗脱液，洗脱速度为 0.3ml/min，得层析液；然后离心分离层析液；取上清液冷冻干燥得到油茶籽多肽。
经检测，得知，12000Da～5000Da 的多肽分子占 6%，5000Da～1300Da 之间的多肽分子占 24%，1300Da～600Da 之间多肽分子占 36%，600Da～300Da 之间多肽分子占 5%，小于300Da多肽分子占6%，氨基酸占9.3%。

Claims (3)

1.一种油茶籽蛋白中提取油茶籽多肽的方法，其特征在于，其提取工艺路线为：油茶籽蛋白→粉碎→过筛→加水得悬浮液→热变性处理 →调pH值→复合酶酶解→灭酶→离心→取上清液→树脂脱盐→SephadexG-50柱层析→离心→取上清液冷冻干燥→油茶籽多肽，具体包括以下步骤：
（1）将油茶籽蛋白粉碎，按底物浓度 2.8-3.0%，加水混合，90℃热变性处理15-20 min后降温至60℃以下，先调节PH值为5.5-6.0，静置3-4小时，再调节PH为8.0-8.5，静置3-4小时；然后再调节pH值为7.0，按每克底物向其中加入4000-5000 u的中性蛋白酶和4000-5000 u的木瓜蛋白酶，在53-54℃搅拌酶解2-3h，酶解后将温度升至80-85℃灭酶4-6min，然后用转速为3000-4000r/min的离心机离心分离10-15min，取上清液；
（2）上清液采用树脂柱脱盐，过滤，得滤液；
（3） 所得滤液用葡萄糖凝胶SephadexG-50柱层析，凝胶经过蒸馏水浸泡，煮沸活化40-50分钟后冷却装柱，以蒸馏水为洗脱液，得层析液；
（4）然后离心分离层析液；
（5）取上清液冷冻干燥得到油茶籽多肽。
2.根据权利要求1所述的从油茶籽粕中提取油茶蛋白的方法，其特征在于：步骤（1）所述的底物浓度2.9%。
3.根据权利要求1所述的从油茶籽粕中提取油茶蛋白的方法，其特征在于：步骤（1）的酶解温度为53.4℃ 。
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