CN102965417A - 一种硫酸新霉素发酵的方法 - Google Patents
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Abstract
一种硫酸新霉素发酵的方法，其特征在于该方法由以下步骤组成：1）培养斜面孢子：将砂土孢子制得斜面孢子；2）培养斜面孢子悬浮液：将斜面孢子于28±2℃，4～12天培养制得斜面孢子悬浮液；3）种子罐培养：将斜面孢子悬浮液放入种子培养罐中培养，种子罐中花生粕的质量含量为种子罐培养液质量的1～2%；4）发酵罐培养：将经种子罐培养的培养液送入发酵培养罐中培养，发酵罐中的培养液中的花生粕的质量含量为发酵罐培养液质量的0～4%；5）将发酵液浓度稀释稀发酵液，完成发酵步骤。本发明提供的一种硫酸新霉素发酵的方法，可以解决花生饼质量不稳定的问题，有效的保障了新霉素发酵生产。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域，尤其是一种硫酸新霉素发酵的方法。
背景技术
国内现有的新霉素发酵使用的原料主要是粮食加工类原料，如碎米、花生饼、黄豆饼等，为了能够提高这些原材料的生物利用度，通常情况下需要将上述原料进行粉碎过筛，制成米粉、花生粉和黄豆粉。
为了节省成本，目前，制造企业长期使用花生饼作为新霉素发酵生产原料，花生饼主要是由花生经过热榨或冷榨之后得到的剩余物，由于花生饼多为农间小作坊生产，存在质量不稳定，质量不均一的情况，因小作坊加工控制不严而导致黑色花生饼的情况发生（正常的花生饼应为棕褐色），黑色花生饼在经过粉碎过筛后颜色不易辨别，企业将黑色花生饼应用于新霉素发酵生产后，使得发酵代谢异常，菌丝畸形严重，给发酵生产带来了非常大的不利影响。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种硫酸新霉素发酵的方法，可以解决花生饼质量不稳定的问题，有效的保障了新霉素发酵生产。
为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：一种硫酸新霉素发酵的方法，其特征在于该方法由以下步骤组成：
1）培养斜面孢子：将砂土孢子经密封，干燥后，于0～4℃贮藏制得斜面孢子；
2）培养斜面孢子悬浮液：将斜面孢子于28±2℃，4～12天培养制得斜面孢子悬浮液；
3）种子罐培养：将斜面孢子悬浮液放入种子培养罐中培养，种子罐中花生粕的质量含量为种子罐培养液质量的1～2%；
4）发酵罐培养：将经种子罐培养的培养液送入发酵培养罐中培养，发酵罐中的培养液中的花生粕的质量含量为发酵罐培养液质量的0～4%；
5）向发酵液中加入732树脂，将发酵液浓度稀释至13000u/ml以下，中和至pH值6.4～7.0制得稀发酵液，完成发酵步骤。
步骤3）中，种子罐中的花生粕的质量含量为种子罐培养液质量的1%。
步骤3）中，发酵罐中的花生粕的质量含量为发酵罐培养液质量的2%。
花生粕是以脱壳花生果为原料经有机溶剂提取或预压浸提法提取油脂后的副产品。
花生粕替代花生饼后种子罐和发酵罐中培养液配方比例的变化如表1所示（%为质量百分比）：
表1
本发明提供的一种硫酸新霉素发酵的方法，有益效果如下：
1、解决了花生饼质量不稳定的难题
由于新霉素发酵工艺中大量使用粮食类加工产品作为微生物发酵的碳源和氮源，因此，粮食类原材料的质量稳定性对于新霉素发酵生产水平和工艺控制至关重要。花生饼作为花生作物的粗加工副产品，存在着产量低、供应无保障、制备工艺粗糙、质量不稳定、产品均一性难以保障等诸多缺点。长期以来，新霉素发酵生产水平波动和工艺控制偏差都与花生饼原料的质量不稳定有着密切的联系。通过使用花生粕替代花生饼用于硫酸新霉素发酵，很好的解决了这一难题，花生粕来自于工业化大生产的油脂加工企业，其质量稳定可靠、供应有保障，能够满足企业新霉素发酵生产的工艺要求。
2、解决了花生饼质量不均一的难题
花生饼的来源绝大多数是农村个体小作坊，其质量均一性很难保障，往往一批的花生饼中混有数个甚至数十个不同来源的产品，新霉素生产企业现行的产品抽样检验程序和工艺控制管理都无法避免和解决这一问题。而花生粕来自于大型的油脂加工企业，其企业规模大，生产稳定，有良好的工艺控制和质量管理，来自于这样企业的花生粕其质量稳定，产品均一，很好的解决了原材料质量不均一导致生产发生波动的难题，对稳定企业新霉素发酵生产起到了非常积极的作用。
3、减少了影响发酵生产的主要波动因素
新霉素发酵生产受原材料、蒸汽、空气、搅拌、工艺控制等多因素的影响，往往在生产遇到波动的时候，需要判断和排除的因素非常多。在以往的生产中，花生饼的质量状况是影响新霉素发酵生产的一个重要因素，在生产发生波动时，往往需要通过摇瓶试验，增加检验项目或专项大罐试验来判断和评估花生饼对生产的影响程度，由于花生饼质量不稳定，产品不均一，给判断和评估带来了非常大的困难。而花生粕在应用后，在新霉素发酵生产表现非常稳定，即使在生产遇到波动的时候，也能够准确的判断和评估其对生产的影响程度，降低了生产波动后对发酵工艺控制和调整的难度。
4、提高了供货的可靠性，有效的保障了新霉素发酵生产
花生粕较之花生饼，其来源更加稳定，供货及时有保障，出现供货断档、产品不合格退货等情况的几率大大降低。特别是每年春节期间，由于作坊停工、物资运输等问题，使得花生饼的供应更加难以保障，而花生粕由于其生产企业属大规模工业化生产，产品供应稳定，供货合同执行有保障，很好的解决了物资供应不稳定的问题。
使用花生粕替代花生饼后，经检测，生产出的硫酸新霉素质量没有任何变化，检验结果如表2、表3所示：
表2：使用花生饼时期（2011.1-4月）成品质量情况
鉴别项检测结果，呈正反应用“+”表示。
表3：使用花生粕时间（2011.9-12月）成品质量情况
鉴别项检测结果，呈正反应用“+”表示。
附图说明
下面结合附图和实施例对本发明作进一步说明：
图1为本发明生产硫酸新霉素的工艺流程图。
具体实施方式
实施例一
如图1所示，一种硫酸新霉素发酵的方法，由以下步骤组成：
1、培养斜面孢子：将砂土孢子经密封，干燥后，于0～4℃贮藏制得斜面孢子；
2、培养斜面孢子悬浮液：将斜面孢子于28±2℃，4～12天培养制得斜面孢子悬浮液；
3、种子罐培养：将斜面孢子悬浮液放入种子培养罐中培养，种子罐中的花生粕质量含量为种子罐培养液质量的1%；
4、发酵罐培养：将经种子罐培养的培养液送入发酵培养罐中培养，发酵罐中的培养液不含花生粕；
5、向发酵液中加入732树脂，将发酵液浓度稀释至13000u/ml以下，中和至pH值6.4～7.0制得稀发酵液，完成发酵步骤。
种子罐中的种子罐培养液以及发酵罐中的发酵罐培养液的配方如表4所示：
表4
按照上述配方发酵制得的硫酸新霉素质量情况如下表5所示：
表5
鉴别项检测结果，呈正反应用“+”表示。
由上表可知，生产出的硫酸新霉素质量合格，品质没有发生任何改变。
实施例二
如图1所示，一种硫酸新霉素发酵的方法，由以下步骤组成：
1、培养斜面孢子：将砂土孢子经密封，干燥后，于0～4℃贮藏制得斜面孢子；
2、培养斜面孢子悬浮液：将斜面孢子于28±2℃，4～12天培养制得斜面孢子悬浮液；
3、种子罐培养：将斜面孢子悬浮液放入种子培养罐中培养，种子罐中的花生粕质量含量为种子罐培养液质量的1.5%；
4、发酵罐培养：将经种子罐培养的培养液送入发酵培养罐中培养，发酵罐中的培养液中花生粕的质量含量为为发酵罐培养液质量的2%；
5、向发酵液中加入732树脂，将发酵液浓度稀释至13000u/ml以下，中和至pH值6.4～7.0制得稀发酵液，完成发酵步骤。
种子罐中的种子罐培养液以及发酵罐中的发酵罐培养液的配方如表6所示：
表6
按照上述配方发酵制得的硫酸新霉素质量情况如下表7所示：
表7
鉴别项检测结果，呈正反应用“+”表示。
由上表可知，生产出的硫酸新霉素质量合格，品质没有发生任何改变。
实施例三
如图1所示，一种硫酸新霉素发酵的方法，由以下步骤组成：
1、培养斜面孢子：将砂土孢子经密封，干燥后，于0～4℃贮藏制得斜面孢子；
2、培养斜面孢子悬浮液：将斜面孢子于28±2℃，4～12天培养制得斜面孢子悬浮液；
3、种子罐培养：将斜面孢子悬浮液放入种子培养罐中培养，种子罐中的花生粕质量含量为种子罐培养液质量的2%；
4、发酵罐培养：将经种子罐培养的培养液送入发酵培养罐中培养，发酵罐中的培养液中花生粕的质量含量为为发酵罐培养液质量的4%；
5、向发酵液中加入732树脂，将发酵液浓度稀释至13000u/ml以下，中和至pH值6.4～7.0制得稀发酵液，完成发酵步骤。
种子罐中的种子罐培养液以及发酵罐中的发酵罐培养液的配方如表8所示：
表8
按照上述配方发酵制得的硫酸新霉素质量情况如下表9所示：（补充表9）
表9
鉴别项检测结果，呈正反应用“+”表示。
由上表可知，生产出的硫酸新霉素质量合格，品质没有发生任何改变。
Claims (3)
1.一种硫酸新霉素发酵的方法，其特征在于该方法由以下步骤组成：
1）培养斜面孢子：将砂土孢子经密封，干燥后，于0～4℃贮藏制得斜面孢子；
2）培养斜面孢子悬浮液：将斜面孢子于28±2℃，4～12天培养制得斜面孢子
悬浮液；
3）种子罐培养：将斜面孢子悬浮液放入种子培养罐中培养，种子罐中花生粕
的质量含量为种子罐培养液质量的1～2%；
4）发酵罐培养：将经种子罐培养的培养液送入发酵培养罐中培养，发酵罐中的
培养液中的花生粕的质量含量为发酵罐培养液质量的0～4%；
向发酵液中加入732树脂，将发酵液浓度稀释至13000 u /ml 以下，中和至
pH值6.4～7.0制得稀发酵液，完成发酵步骤。
2.根据权利要求1所述的一种硫酸新霉素发酵的方法，其特征在于：步骤3）中，种子罐中的花生粕的质量含量为种子罐培养液质量的1%。
3.根据权利要求1所述的一种硫酸新霉素发酵的方法，其特征在于：步骤3）中，发酵罐中的花生粕的质量含量为发酵罐培养液质量的2%。
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| CN110777181A (zh) * | 2019-11-26 | 2020-02-11 | 宜昌三峡制药有限公司 | 一种硫酸新霉素发酵培养基及发酵方法 |
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