CN102946889B

CN102946889B - 钙剂及其制造方法

Info

Publication number: CN102946889B
Application number: CN201180016133.2A
Authority: CN
Inventors: 好田勉; 安田俊隆; 下條学; 正木和好
Original assignee: Toyo Suisan Kaisha Ltd
Current assignee: GC Corp
Priority date: 2010-03-31
Filing date: 2011-03-31
Publication date: 2015-05-06
Anticipated expiration: 2031-03-31
Also published as: EP2561878A4; JPWO2011125910A1; US8911805B2; JP5956925B2; CN102946889A; JP2015110572A; US20130022733A1; WO2011125910A1; EP2561878A1; EP2561878B1

Abstract

本发明的目的在于提供即使在高浓度也能以溶液的形态稳定的钙剂。作为这种钙剂，提供一种pH为弱酸性以上的透明的钙水溶液剂，其为含有水、钙、式Ⅰ的化合物及式Ⅱ的化合物作为构成要素的钙水溶液剂，所述钙大部分作为非离子性钙存在，且在维持式Ⅰ的化合物和/或式Ⅱ的化合物的基本骨架的状态下构成与它们结合的复合体，且所述复合体的至少一部分形成胶体粒子；[化1]这里，A₁、A₂、A₃、A₄、A₅及A₆分别独立地为O^-或OX，X表示1价或多价的阳离子，OX存在多个时，X互相相同或不同。

Description

钙剂及其制造方法

技术领域

本发明涉及钙剂及其制造方法。

背景技术

日本人钙摄取量的不足，不仅与日本国土以酸性土为基础有关，而且还因为与欧美各国相比，土壤中含有的钙量低，因此从农作物或水等中摄取的钙量少。另外，与欧美各国相比，乳制品的摄取量少也是其原因。

在厚生劳动省作为生活习惯病对策发表的“日本人的食物摄取基准(2010年版)”中，日本人应该有意识地逐渐增加摄取量的营养素中包含钙。2008年的国民健康和营养调查中，日本人的平均钙摄取量为511mg，该结果低于大人每人每天的推荐量的约600mg～约700mg。钙在维持生物体自身以及其功能上担当重要的角色，不仅与骨骼和牙齿的形成有关，而且对于维持包括血液、神经以及肌肉等生物体内的众多的器官、组织以及细胞中的生理功能及其平衡性都是不可或缺的元素。

另一方面，为了实现预防医学目的或提高生活质量，保健品或营养成分强化食品等被广泛利用。但是，钙是从食品中的吸收少的物质。而且，钙的独特的苦味也成为通过口服持续摄取钙溶液作为营养辅助剂的障碍。

在这种状况下，进行了较多的关于钙的开发，并存在较多的申请或报告。

日本特开昭56-97248(专利文献1)公开了水溶性的苹果酸钙-柠檬酸钙复合体，其利用了水难溶性的柠檬酸钙在苹果酸钙的共存下溶解率增大的特性。日本特表平5-507692(专利文献2)以及日本特表2002-525091(专利文献3)均公开了水溶性改善的苹果酸柠檬酸钙。但是，这些文献中公开的溶液是长时间的稳定性欠缺的钙溶液。

日本特开平7-89852(专利文献4)公开了将高温烧成的氧化钙溶解于有机酸或含有有机酸的液体中、并通过干燥得到水溶性的钙粉末的技术。其中公开的水溶性钙粉末在溶解于水中时为酸性。

日本特开2003-235466(专利文献5)公开了有机酸和磷酸钙盐混合形成的水溶性混合饲料组合物。得到的溶液为酸性，且公开了饲料用组合物。

日本特开平9-289877(专利文献6)公开了如下技术：作为在加水时不产生沉淀而长时间稳定且能分散悬浊的钙补强剂，将羟磷灰石的800nm以下的微粒用柠檬酸或含有柠檬酸盐的溶液或蛋白质或者肽进行表面处理。日本特开平6-329557(专利文献7)公开了通过将羟磷灰石微粒用白蛋白和/或多元有机酸进行表面处理使分散液稳定化的技术。通过这些技术公开的羟磷灰石分散液为稳定分散的液体，但这些技术主要在酸性下实施，且不仅不透明，而且容易产生凝集。

Adv.Mater.1998,10,No.149-53(非专利文献1)公开了如下技术：将柠檬酸、磷酸钠及氯化钙的混合物或磷酸/EDTA/钙的混合液通过微波照射或100℃的加热得到纳米大小的羟磷灰石结晶。J.Coll.int.Sci,318(2008).210-216(非专利文献2)公开了柠檬酸和pH会对羟磷灰石的结晶大小产生影响。US6,248,376(专利文献8)公开了如下方法：将氢氧化钙、磷酸、柠檬酸及氢氧化钙的混合物在水中加热至约100℃得到含有磷酸离子源、柠檬酸离子源、钙离子源及氢氧化金属以及水的富含钙的组合物。这些技术均是用于得到羟磷灰石结晶的方法。

日本特表2004-534709(专利文献9)公开了含有氨基酸作为稳定剂的羟磷灰石的稳定的水性胶体分散液。日本特表2005-500231（专利文献10）公开了含有双官能团稳定剂的羟磷灰石的稳定的水性胶体分散液。J.Mater.Chem.,2004,14,2277-2281（非专利文献3）公开了含有氨基酸作为稳定剂的羟磷灰石的水性胶体。所有的文献均需要两离子性的稳定剂用于制造羟磷灰石的水性胶体分散液。

日本特开平9-175994（专利文献11）公开了通过将钙源用柠檬酸和/或苹果酸及乳酸溶解来得到高溶解量的钙液的技术。

另外，为了提供易吸收性改善的组合物，日本特开平9-12811（专利文献12）公开了将钙盐用乳酸及磷酸溶解的技术。

虽然存在如此多的报告，但得到高浓度且苦味少并稳定的钙透明溶液的技术还未确立，仍然期望开发更加优良的技术。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开昭56-97248号公报

专利文献2：日本特表平5-507692号公报

专利文献3：日本特表2002-525091号公报

专利文献4：日本特开平7-89852号公报

专利文献5：日本特开2003-235466号公报

专利文献6：日本特开平9-289877号公报

专利文献7：日本特开平6-329557号公报

专利文献8：美国专利第6,248,376号说明书

专利文献9：日本特表2004-534709号公报

专利文献10：日本特表2005-500231号公报

专利文献11：日本特开平9-175994号公报

专利文献12：日本特开平9-12811号公报

非专利文献

非专利文献1：Adv.Mater.1998,10,No.149-53

非专利文献2：J.Coll.int.Sci.318(2008),210-216

非专利文献3：J.Mater.Chem.,2004,14,2277-2281

发明内容

发明所要解决的技术问题

本发明的目的在于提供：即使高浓度也以溶液的形态稳定的钙剂，特别是苦味少、且在弱酸性以上的宽的pH范围内即使高浓度也以溶液的形态稳定的钙剂。

解决技术问题所采用的技术方案

深入研究的结果是本发明人完成了用于解决上述的课题的本发明。

本发明的一种方式为pH为弱酸性以上的透明的钙水溶液剂，其为含有水、钙、式Ⅰ的化合物及式Ⅱ的化合物作为构成要素的钙水溶液剂，所述钙大部分作为非离子性钙存在，且在维持式Ⅰ的化合物和/或式Ⅱ的化合物的基本骨架的状态下构成与它们结合的复合体，且所述复合体的至少一部分形成胶体粒子；

[化1]

这里，A₁、A₂、A₃、A₄、A₅及A₆分别独立地为O^-或OX，X表示1价或多价的阳离子，OX存在多个时，X互相相同或不同。

本发明的进一步的方式为通过将所述钙剂干燥得到的固体化钙剂。

本发明的进一步的方式为钙水溶液剂的制造方法，其特征在于：将在水中被离子化的钙源与式Ⅰ的化合物源和式Ⅱ的化合物源混合，在使最终得到的溶液的pH成为弱酸性以上的条件下将得到液体从不透明液体转变成透明液体。

本发明的进一步的方式为防止来源于钙的沉淀生成的方法，其为防止来源于钙水溶液中的钙的沉淀物生成的方法，其特征在于：将在水中被离子化的钙与式Ⅰ的化合物和式Ⅱ的化合物混合，使最终得到的溶液的pH成为弱酸性以上的条件下将得到液体在从不透明液体转变成透明液体。

发明的效果

通过本发明，可以提供即使高浓度也能以溶液的形态稳定的钙剂。

附图的简单说明

图1是表示本发明的例1的结果的图。

图2是表示本发明的例4的结果的图。

图3是表示本发明的例4的结果的图。

图4是表示本发明的例4的结果的图。

图5是表示本发明的例4的结果的图。

图6是表示本发明的例14的结果的图。

图7A是表示本发明的例21的结果的图。

图7B是表示本发明的例21的结果的图。

图7C是表示本发明的例21的结果的图。

图7D是表示本发明的例21的结果的图。

图8A是表示本发明的例21的结果的图。

图8B是表示本发明的例21的结果的图。

图8C是表示本发明的例21的结果的图。

图9A是表示钙剂的缓冲能力及钙离子释放能力的评价结果的图。

图9B是表示钙剂的缓冲能力及钙离子释放能力的评价结果的图。

图9C是表示钙剂的缓冲能力及钙离子释放能力的评价结果的图。

图9D是表示钙剂的缓冲能力及钙离子释放能力的评价结果的图。

图10A是表示钙剂的牙本质脱钙抑制效果的评价结果的照片。

图10B是表示钙剂的牙本质脱钙抑制效果的评价结果的图表。

图11A是表示钙剂的牙本质脱钙抑制效果的评价结果的照片。

图11B是表示钙剂的牙本质脱钙抑制效果的评价结果的图表。

图12A是表示钙剂的牙本质脱钙抑制效果的评价结果的照片。

图12B是表示钙剂的牙本质脱钙抑制效果的评价结果的图表。

图13A是表示钙剂的牙本质脱钙抑制效果的评价结果的照片。

图13B是表示钙剂的牙本质脱钙抑制效果的评价结果的图表。

图14A是表示钙剂的牙本质脱钙抑制效果的评价结果的照片。

图14B是表示钙剂的牙本质脱钙抑制效果的评价结果的图表。

图15A是表示钙剂的牙本质脱钙抑制效果的评价结果的照片。

图15B是表示钙剂的牙本质脱钙抑制效果的评价结果的图表。

图16A是表示钙剂的牙本质脱钙抑制效果的评价结果的照片。

图16B是表示钙剂的牙本质脱钙抑制效果的评价结果的图表。

具体实施方式

以下，详细说明本发明的实施方式。

1、钙剂

本发明的钙剂，可以是水溶液的形态，也可以是通过将该水溶液干燥得到的固体形态。处于水溶液的形态时，该钙剂特别称为钙水溶液。另外，处于固体形态时，将该钙剂特别称为固体化钙剂。

2、钙水溶液剂

本发明的钙水溶液剂为pH为弱酸性以上的透明的钙水溶液剂，其是含有水、钙、式Ⅰ的化合物及式Ⅱ的化合物作为构成要素的钙水溶液剂，所述钙大部分作为非离子性钙存在，且在维持式Ⅰ的化合物和/或式Ⅱ的化合物的基本骨架的状态下构成与它们结合的复合体，所述复合体的至少一部分形成胶体粒子；

[化2]

这里，A1、A2、A3、A4、A5及A6分别独立地为O-或OX，X表示1价或多价的阳离子，OX存在多个时，X互相相同或不同。这里的“阳离子”，只要是氢离子、金属离子及铵离子等的阳离子即可。另外，在钙水溶液剂中，X可以以游离的状态和/或非游离的状态存在。

钙水溶液剂中含有的钙，其大部分以非离子性钙的形态存在。非离子性钙是指在水溶液中存在的总钙中，用钙离子电极未检出的钙。

使用钙水溶液剂中含有的非离子性钙时，“大部分”是指相对于总钙，非离子性钙的比例约为98%以上，优选约为99%以上，进一步优选约为99.9%以上。例如，总钙为100mM时，检出的离子性钙约为2mM以下，优选约为1mM以下，进一步优选约为0.1mM以下。

作为非离子性钙存在的钙，与式Ⅰ的化合物和/或式Ⅱ的化合物结合构成复合体。复合体中含有的式Ⅰ的化合物和/或式Ⅱ的化合物，在维持作为这些化合物的基本骨架的状态下与钙结合。

钙水溶液剂，作为构成要素也可以进一步含有氟。含有氟时，钙水溶液剂中含有的氟的至少一部分与所述复合体结合。

这里说“复合体”时，只要没有特别的记载，是指由钙、式Ⅰ的化合物和/或式Ⅱ的化合物构成的复合体，也指由作为其下位概念的钙、式Ⅰ的化合物和/或式Ⅱ的化合物构成的、且与氟结合存在的复合体。

复合体，至少其一部分或全部形成胶体。该胶体的确认可以通过作为一般公知的方法的丁达尔现象的观察进行。

此外，钙水溶液剂，也可以进一步含有镁作为构成要素。

“式Ⅰ的化合物”这个用语，是具有柠檬酸骨架的化合物的总称。因此，式Ⅰ的化合物中包含“柠檬酸”、“柠檬酸盐”及“柠檬酸离子”。

“式Ⅱ的化合物”这个用语，是具有磷酸骨架的化合物的总称。因此，式Ⅱ的化合物中包含“磷酸”、“磷酸盐”及“柠檬酸离子”。

钙水溶液剂中的式Ⅰ的化合物的浓度，相对于100mM钙，例如只要约为25mM以上即可。

钙水溶液中的式Ⅱ的化合物的浓度，相对于100mM钙，例如只要约为12.5mM以上，优选约为25～约100mM，进一步优选约为50mM即可。

钙水溶液剂的透明度，例如可以由通过目视和/或吸光值测定的结果进行判定。用目视判定时，由溶液中没有沉淀物，以及某种特定的图案、例如直线或曲线等图形、文字为通过钙水溶液剂可见的程度来判定即可。用吸光值测定时，例如，用595nm的波长的照射光得到的吸光值，如果是钙浓度为100mM的情况，则将其溶液100μL装入96孔盘的1孔中用微孔板测定时约为0.3以下。该值依赖于钙浓度及测定容器而变化。

钙水溶液剂的pH值为弱酸性以上。这里所述的弱酸性以上是指约4～约13的pH值。

此外，钙水溶液剂中的胶体粒子的ζ-电位（Zeta电位）为典型的正电。

钙水溶液剂中的胶体粒子的平均粒径，例如为100nm以下，典型的为50nm一下。另外，该平均粒径，例如为1nm以上，典型的为5nm以上。此外，这里“平均粒径”是指通过动态光散射法测定的值。

3、制造方法

钙水溶液剂的制造，例如可以通过如下方法进行：其特征在于，将在水中被离子化的钙源与式Ⅰ的化合物源和式Ⅱ的化合物源混合，在使最终得到的溶液的pH成为弱酸性以上的条件下将得到的液体从不透明溶液转变成透明液体。

该制造方法也可以是如下方法：其特征在于，在水中将钙源进行离子化，将离子化的钙与式Ⅰ的化合物源和式Ⅱ的化合物源混合，在使最终得到的溶液的pH成为弱酸性以上的条件下将得到的液体从不透明液体转变成透明液体。还可以是由如下构成的方法：在水中将钙源进行离子化，将离子化的钙与式Ⅰ的化合物源和式Ⅱ的化合物源混合，将得到的液体在使最终得到的溶液的pH成为弱酸性以上的条件下，从不透明液体转变成透明液体。还可以是包含或具备所述工序的方法。

钙源也可以是其自身公知的任意的钙盐。这样的例子包括：氯化钙、氢氧化钙、乳酸钙、硝酸钙、硫酸钙、碳酸钙、氧化钙、双（磷酸二氢）钙、磷酸氢钙、二磷酸钙、磷酸三钙及柠檬酸钙。作为钙源，可以使用一种钙盐，也可以使用两种以上的钙盐。此外，特别是将本发明的钙剂用于食品用途时，作为钙源也可以使用含有氧化钙作为主成分的烧成钙。

水，可以根据用途不同从其自身公知的任意的水，例如，自来水、蒸馏水、离子交换水、精制水、超纯水及注射用灭菌水等水中选择。

式Ⅰ的化合物源的例子，包括柠檬酸、柠檬酸一钾、柠檬酸三钾、柠檬酸钙、柠檬酸铁及柠檬酸三钠。例如，可以使用它们之中的1种或2种以上的组合作为式Ⅰ的化合物源。

所述式Ⅱ的化合物源的例子，包括磷酸、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、磷酸三钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸钠、磷酸一铵、磷酸二铵、磷酸氢钙及二磷酸钙。可以使用它们之中的1种或2种以上的组合作为式Ⅱ的化合物源。

水中的钙源的离子化，也可以通过对任意的水溶解钙源的方法进行。溶解时，因作为钙源使用的钙盐的种类不同也有对水的溶解性低的钙源。这种情况下，只要通过降低使用的水的pH值使其为酸性来将钙源离子化即可。另外，使用水易溶性的钙源时，也可以在弱酸性、中性或碱性的水中进行离子化。

将钙源离子化时为了调节pH值使用的酸，可以是本领域中通常在pH的调节中使用的其自身公知的任意的酸。另外，根据钙盐的种类，也可以使用作为式Ⅰ的化合物源使用的柠檬酸和/或作为式Ⅱ的化合物源使用的磷酸来进行钙源的离子化。

离子化的钙源与式Ⅰ的化合物及式Ⅱ的化合物的反应，通过使离子化的钙源与式Ⅰ的化合物源和式Ⅱ的化合物源在水中共存、并使它们接触而进行。该接触中，优选式Ⅰ的化合物源及式Ⅱ的化合物源溶解。

使离子化的钙源与式Ⅰ的化合物源及式Ⅱ的化合物源接触时，可以通过对含有离子化的钙的水溶液添加式Ⅰ的化合物源及式Ⅱ的化合物源进行；也可以对钙源添加水溶液中含有的式Ⅰ的化合物源及式Ⅱ的化合物源；还可以在对钙源添加水溶液中含有的式Ⅰ的化合物源及式Ⅱ的化合物源的一种后，再添加剩余的一种。式Ⅰ的化合物源和式Ⅱ的化合物源的添加可以同时，也可以在添加任一种后再添加另一种。钙源与式Ⅰ的化合物源和/或式Ⅱ的化合物源的最初的接触，可以与钙源的离子化同时，也可以在钙源离子化后。对通过最初的接触形成的混合物，也可以添加进一步追加的钙源、式Ⅰ的化合物源和/或式Ⅱ的化合物源。

添加的式Ⅰ的化合物源及式Ⅱ的化合物源，可以预先在水中溶解后添加于含有离子化的钙的水溶液中，也可以在添加于该水溶液后再溶解。优选预先在水中溶解后再添加于含有离子化的钙的水溶液中。将式Ⅰ的化合物源和式Ⅱ的化合物源预先溶解于水中时，式Ⅰ的化合物源和式Ⅱ的化合物源可以作为各自的水溶液制备，也可以作为含有式Ⅰ的化合物源和式Ⅱ的化合物源的水溶液制备，但优选作为各自的水溶液制备。该制备可以通过将式Ⅰ的化合物源溶解于上述的任意的水中，另外，将式Ⅱ的化合物源溶解于上述的任意的水中而进行。

钙水溶液剂进一步含有氟或镁作为构成要素时，将氟源或镁源与钙源以及式Ⅰ的化合物源和/或式Ⅱ的化合物源的接触同时，或者在它们之前或在它们之后与钙源接触。优选将氟源或镁源事先溶解于水中，得到水溶液后，与同样将其事先溶解于水中而制备的式Ⅰ的化合物源的水溶液、式Ⅱ的化合物源的水溶液以及钙源的水溶液同时混合，或依次混合。但是，并不局限于此，也可以与式Ⅰ的化合物源及式Ⅱ的化合物源同样以上述的任意的方式完成钙源与氟源或镁源的接触。

氟源，可以是氟化钠、氟化钾、氟化钙及氟化镁等氟化物。

作为镁源，例如，可以列举：氯化镁、氢氧化镁、乳酸镁、硝酸镁、硫酸镁、碳酸镁、氧化镁、双（磷酸二氢）镁、磷酸氢镁、二磷酸镁、磷酸三镁及柠檬酸镁。

也可以在式Ⅰ的化合物源的水溶液和/或式Ⅱ的化合物源的水溶液和/或任意的氟源或镁源的水溶液中添加钙源，但这种情况下，该水溶液中添加的钙源，在反应时有必要以离子化的状态存在。

离子化的钙源与式Ⅰ的化合物源及式Ⅱ的化合物源的反应，通过在水中共存并接触而开始。反应液，在反应中可以搅拌，也可以静置。在反应开始前或反应中通过形成最终得到的溶液的pH为弱酸性以上的条件，进行从不透明液体至透明液体的转变。

得到的液体的从不透明液体至透明液体的转变，也可以通过在室温下静置来完成。

从不透明液体至透明液体的转变，在使最终得到的溶液的pH为弱酸性以上的条件下进行。因此，该条件也可以通过调节pH使最终得到的液体pH为弱酸性以上来满足。例如，可以在离子化的钙源、式Ⅰ的化合物源及式Ⅱ的化合物源、以及任意的氟源和/或镁源接触之前，调节含有它们中的至少一种的水溶液的pH，使最终得到的液体的pH为弱酸性以上。pH的调节可以使用用于pH调节的其自身公知的酸和/或碱。pH的调节，例如，可以使用氢氧化钠水溶液、氢氧化钾水溶液、盐酸、硫酸及硝酸等其自身公知的任意的调节液。

pH的调节，为了得到最终的适当的pH值，即弱酸性以上的pH，也可以在不透明液体的阶段添加事先决定的量的碱性溶液和/或酸性溶液。例如，只要调节使最终得到的钙水溶液剂的pH值约为4以上、约4～约13、约5～约13、约8～约13、约10～约13、约12～约13即可。

如上所述本发明的钙水溶液剂，具有弱酸性以上的pH值。该反应液的pH，为了使最终得到的钙水溶液剂为弱酸性以上的pH值，在反应中和/或从不透明液体向透明液体的转变中，也可以随着变化。

另外，从不透明液体向透明液体的转变，例如可以通过在约4℃～约90℃静置约3小时～1周、优选约12小时～约1周进行。另外，转变时间的长短可能依赖于温度而变化。该转变期也可以称为熟成。

从不透明液体向透明液体的转变，也可以理解为从非胶体液体向胶体液体的转变。

通过这种工序得到的钙水溶液剂，经长期，例如半永久的或者至少6个月、1个月、3周、2周、1周或5天或3天以上不会生成来源于钙离子或钙盐的沉淀物，而维持透明性。

钙水溶液剂的保存只要在约-80℃～约90℃即可，与保存温度无关而维持透明性。这里“稳定的”是指不含沉淀物及白色浑浊，而维持溶液的透明性的状态。透明性的判定，可以由上述的目视和/或吸光值的测定结果而导出。通过成为判定对象的溶液特定的模样可由目视判定，将未观察到白色浑浊及沉淀物的情况判定为“透明”。另外，吸光值的情况，例如，只要在595nm测定96孔微孔板1孔中100μL的溶液时为0.3以下，且同时通过目视确认没有沉淀物时，判定为“透明”即可。通过目视和吸光值的判定，可以仅进行其中的一种，也可以合并使用。

根据本发明的钙水溶液剂，可以通过上述的方法得到。作为最终产物得到的钙水溶液剂，是在其制造过程中将来源于使用的钙源、式Ⅰ的化合物源及式Ⅱ的化合物源的成分全部作为其构成成分而维持的钙水溶液剂。

4、固体化钙剂

上述记载的钙水溶液剂，例如可以通过将由上述的方法制造的钙水溶液剂冷冻干燥、热风干燥、风干或喷雾干燥等手段进行的干燥而进行固体化。固体化的固体化钙剂，长期稳定，且通过溶解于水或食盐水及砂糖水等水溶液中，可以再度构成本发明所述的钙水溶液剂。

例如，通过冷冻干燥进行的钙水溶液剂的干燥，只要使用其自身公知的冷冻干燥法进行即可。例如，在0℃～-80℃冷冻，并使用其自身公知的冷冻干燥机干燥即可。

5、用途

本发明所述的钙剂，即钙水溶液剂及固体化钙剂，显示出长期的优良的稳定性。即，为水溶液的形态时，经长期，也不会生成来源于钙离子或盐的沉淀物。另外，由于钙特有的苦味极少，因此可以用于经口摄取。而且，即使在经口摄取时，也可以期待良好的吸收性。

钙剂也可以单独或与其它的活性成分和/或副成分组合，作为如下食品添加剂使用：用于向对象给予钙的钙制剂等的用于对医药品、准药品（医药部外品，介于药品和化妆品之间的一类）、保健品、钙强化食品添加。

其他的活性成分，可以是医学上活性的药物，也可以是营养学上活性的成分，还可以是作为其他的目的发挥有效性的可能的成分。

副成分，可以是其自身公知的任意的添加剂。添加剂的例子可以是赋形剂、甜味剂、香味剂、防腐剂和/或保存剂等。

另外，钙水溶液剂或固体化钙剂，即使与其他的各种溶液混合也难以产生沉淀。因此也可以与其他的溶液混合，制造水剂形态的医药品或准药品、化妆品、保健品、饮料等。

另外，通过将钙剂与其他的任意的固体混合，也可以得到医药品、准药品、化妆品、保健品、饮料及食品。这种情况下使用的钙剂，可以是钙水溶液剂，也可以是固体化钙剂。如上所述，本发明所述的钙水溶液剂是透明的。通常，透明的钙溶液被认为吸收性好。因此，含有本发明所述的医药品、准药品及食品被认为以吸收性良好的形态含有钙。

而且，钙水溶液在农业、渔业、畜牧业及园艺等领域中，也可以用于对对象有效地给予钙。

6、防止钙水溶液中的沉淀物生成的方法

根据本发明，上述的钙水溶液剂的制造方法，也可以作为防止钙水溶液中的沉淀物生成的方法提供。这种情况，为了防止来源于钙水溶液中的钙的沉淀物生成，可以是如下方法：其特征在于，将在水中被离子化的钙与式Ⅰ的化合物及式Ⅱ的化合物混合，并在最终得到的溶液的pH为弱酸性以上的条件下将得到的液体从不透明液体转变成透明液体。该方法可以是由，在水中将钙源进行离子化，将离子化的钙与式Ⅰ的化合物及式Ⅱ的化合物混合，并在最终得到的溶液的pH为弱酸性以上的条件下将得到的液体从不透明液体转变成透明液体构成的方法，也可以是包含所述工序的方法。

关于各个工序的详细说明只要与上述的制造方法的记载同样即可。

7、例

例1、使用氯化钙的钙水溶液剂的制造

使用蒸馏水制备2M柠檬酸溶液（最终制备的被测液的钙浓度为400mM以上时为4M）、2M磷酸溶液（最终制备的被测液的钙浓度为400mM以上时为4M）、5M氯化钙溶液及5M氢氧化钠溶液（最终制备的被测液的钙浓度为400mM以上时为10M）。然后，将柠檬酸溶液、磷酸溶液、氢氧化钠溶液、蒸馏水混合使成为规定的浓度，得到混合液。在该混合液中添加氯化钙溶液使成为规定的浓度并混合。之后，在37℃静置1周，得到被测液。

例如，柠檬酸200mM、磷酸50mM、钙100mM、氯化物200mM、钠550mM的钙水溶液剂的情况，将2M柠檬酸溶液1000μL、2M磷酸溶液250μL、5M氢氧化钠溶液1100μL、蒸馏水7250μL在试管内混合。在15mL容积的药瓶中加入5M氯化钙溶液200μL，并加入所述混合液4800μL进行混合。之后，在37℃静置1周，得到被测液。

对得到的溶液，测定pH（堀场制作所pH/离子计F-53、电极9610-10D）、钙离子浓度（堀场制作所pH/离子计F-53、复合离子电极6583-10C、芯片电极#7683）及吸光值（96孔盘的1孔中100μL、O.D.595nm、BioTek设备公司（BioTekInstruments）制读板仪、EL312e）。另外，在暗处通过对玻璃容器中的被测液从侧面照射激光来观察丁达尔现象。

将关于得到的溶液的各成分的浓度、分析值记载于表中的同时，对透明度的情况也通过表中的各行(mass)的背景的亮度表示。

代表性的表的读法如表1所示。

[表1]

表中的字母分别表示C：柠檬酸、P：磷酸、Ca：钙、Cl：氯，另外，数值表示将各成分的添加量换算成最终的被测液浓度（mM）的值。例如“C400P200Ca100Cl200”的记载，表示柠檬酸400mM、磷酸200mM、钙100mM、氯200mM的溶液。

被测液的透明度用4个阶段评价，从透明度高的一方开始依次为“A”、“B”、“C”和“D”。它们之中，透明度的评价为“A”、“B”或“C”的相当于本发明的钙水溶液剂。

关于各被测液的情况，例如，通过表1中“NaOH浓度（mM）”的列中配置的1行与其之下的1行、即“C400P100Ca100Cl200”的列中配置的1行来表示。这时，上侧的行中包含的数值用将对被测液的氢氧化钠的添加量换算成最终的被测液浓度（mM）的值表示。该行的下面，即下侧的行中包含的数值，左侧表示最终的被测液的pH值，右侧表示最终的被测液的游离钙离子浓度（μM）。

进而，在例6中记载的表11-1中，也表示关于氟化钠的情况。“NaF浓度（mM）”的列中配置的各行中，用将对被测液的氢氧化钠的添加量换算成最终的被测液浓度（mM）的值表示。例如由“C100P100Ca200NOH100”等的记载表示的各被测液的列中含有的行中，左侧记载最终的被测液的pH值，中央记载最终的被测液的游离钙离子浓度（μM），进而右侧表示最终的被测液的游离氟化物离子浓度（μM）。

例18中记载的各表中，进一步也表示关于镁的情况。具体的，在“Ca：Mg：Cl浓度（mM）”的行中，从左侧开始依次表示钙浓度（添加量；mM）、镁浓度（添加量；mM）及氯化物浓度（添加量；mM）。

另外，在表2-2等中表示对具有各条件的被测液的吸光值。

此外，这里言及表时，表序号中有分支号，并省略其分支号记载时，意思是指将对应于记载的表序号中包含的全部的分支号的表作为系列来总称。例如，记载为“表2-1”时，是指“表2-1-1”、“表2-1-2”、“表2-1-3”、“表2-1-4”、“表2-1-5”及“表2-1-6”的总称。

将上述的例1的结果表示在表2中。表2是将钙浓度固定为100mM，并使柠檬酸在0～400mM、磷酸在0～200mM变化时的结果。

[表2-1-1]

[表2-1-2]

[表2-1-3]

[表2-1-4]

[表2-1-5]

[表2-1-6]

[表2-2-1]

[表2-2-2]

[表2-2-3]

[表2-2-4]

[表2-2-5]

[表2-2-6]

柠檬酸浓度为25mM～400mM的范围可以得到本发明的钙水溶液剂。磷酸浓度为12.5～200mM的范围可以得到本发明的钙水溶液剂，磷酸浓度为50mM时可溶化范围最宽。可以得到本发明的钙水溶液剂的pH范围为5.67～12.88。即，得到本发明的钙水溶液剂，是在柠檬酸浓度为25mM～400mM、且磷酸浓度为12.5～200mM且pH范围为5.67～12.88的条件的情况。

将钙浓度固定为200mM、并使柠檬酸在0～400mM、磷酸在50～200mM变化时的结果表示在表3中。

[表3-1-1]

[表3-1-2]

[表3-1-3]

[表3-2-1]

[表3-2-2]

[表3-2-3]

磷酸为200mM且柠檬酸为200～400mM、磷酸为100mM且柠檬酸为50～400mM时，可以得到本发明的钙水溶液剂。得到本发明的钙水溶液剂的pH范围为5.83～12.69。

将钙浓度固定为400mM、并使柠檬酸在100～800mM、磷酸在100～400mM变化时的结果表示在表4中。

[表4-1-1]

[表4-1-2]

[表4-1-3]

[表4-2-1]

[表4-2-2]

[表4-2-3]

磷酸为100mM、400mM且柠檬酸为800mM，磷酸为200mM且柠檬酸为100～800mM时，可以得到本发明的钙水溶液剂。得到本发明的钙水溶液剂的pH范围为7.22～13.37。

将钙浓度固定为600mM、并使柠檬酸在150～1200mM、磷酸在300mM变化时的结果表示在表5中。

[表5-1]

[表5-2]

磷酸为300mM且柠檬酸为300～1200mM时，可以得到本发明的钙水溶液剂。得到本发明的钙水溶液剂的pH范围为12.06～13.46。

进一步，将柠檬酸：磷酸：钙比固定为1:1:2，进行从低浓度至高浓度的透明液的制造。将其结果表示在表6中。

[表6-1]

[表6-2]

柠檬酸：磷酸：钙比为1:1:2时且钙浓度为200～800mM的范围时，可以制造本发明的钙水溶液剂。

上述的表2～表6的结果具有以下倾向：钙浓度越高形成本发明的钙水溶液剂的组成范围越窄，钙浓度越低组成范围越宽。

另外，钙和磷酸的添加量的比约为2:1时，具有形成本发明的钙水溶液剂的组成范围变宽的倾向。

因此，可以认为：在100mM以下的低浓度时，可以在比本实施例中所示的条件宽的范围内得到本发明的钙水溶液剂。另外，还认为：通过调节柠檬酸的组成比或pH的条件，即使是800mM以上的高浓度，也可以得到本发明的钙水溶液剂。

图1是表示本发明的例1的结果的图。图1表示钙水溶液剂的组成及NaOH浓度与钙水溶液剂的透明性的关系。在钙水溶液剂中没有沉淀且通过溶液可见配置于其背面的曲线时，其水溶液剂可以判断为充分透明。

例2、使用氢氧化钙的钙水溶液剂的制造

使用蒸馏水制备2M柠檬酸溶液、2M磷酸溶液、5M氢氧化钠溶液。然后，将氢氧化钙悬浊于蒸馏水中使成为规定的浓度得到悬浊液。将柠檬酸溶液、磷酸溶液与所述氢氧化钙悬浊液混合使成为规定的浓度得到混合液。在该混合液中添加氢氧化钠溶液使成为规定的浓度并混合。将其在37℃静置1周，得到被测液。对得到的溶液，测定pH（堀场制作所pH/离子计F-53、电极9610-10D）、钙离子浓度（堀场制作所pH/离子计F-53、复合离子电极6583-10C、芯片电极#7683）及吸光值（96孔盘的1孔中100μL、O.D.595nm、BioTek设备公司制读板仪、EL312e）。将结果表示在表7中。

[表7-1-1]

[表7-1-2]

[表7-1-3]

[表7-2-1]

[表7-2-2]

[表7-2-3]

通过采用由柠檬酸、磷酸溶解钙盐的方法，即使是氢氧化钙也能与氯化钙（参照表3）几乎同样可以制造本发明的钙水溶液剂。使用氢氧化钙时，由于不添加氯化物，可以以柠檬酸、磷酸、钙及使pH为碱侧的调节剂为最少的构成制造本发明的钙水溶液剂。

例3、使用氢氧化钾作为pH调节剂的钙水溶液剂的制造

用例2的方法将作为pH调节剂使用的氢氧化钠溶液替换成氢氧化钾溶液，将这种情况的结果表示在表8中。

[表8-1-1]

[表8-1-2]

[表8-1-3]

[表8-2-1]

[表8-2-2]

[表8-2-3]

即使将使用的pH调节剂从氢氧化钠（参照表7）换成氢氧化钾，也几乎同样可以制造本发明的钙水溶液剂。从营养学上钙吸收的方面考虑，与钠相比优选用钾制造。

例4、保存实验

在例1中，将在钙浓度100mM的实验区得到的钙水溶液剂的27检体静置于37℃，将观察到的保存中的透明度、pH及钙离子浓度的经时变化的结果表示在表9中。

[表9-1-1]

[表9-1-2]

[表9-2-1]

[表9-2-2]

磷酸浓度为12.5mM的水溶液剂在1周后、磷酸浓度为25mM的钙水溶液剂在1个月后，在大部分的检体中生成沉淀，但磷酸浓度为50mM、100mM时，即使经过3个月，大部分仍保持初期的透明度。从保存性的方面显示，50mM以上良好。我们认为：4个月、5个月后、6个月后及1年后的数据与经过3个月后的数据几乎没有变化，透明的被测液、白色浑浊的被测液均处于稳定的状态。

图2～图5是表示例4的结果的图。图2～图5表示钙水溶液剂的透明性的经时变化。钙水溶液剂中没有沉淀、且通过溶液可见配置于其背面的曲线时，该水溶液剂可以判断为充分透明。

例5、熟成温度

在例1的方法中将熟成温度设为4℃、37℃、60℃来制造钙水溶液剂，将这时的结果表示在表10中。

[表10-1]

[表10-2]

无论哪种熟成温度，均可以得到本发明的钙水溶液剂。在37℃和60℃时几乎在同样的范围内得到钙水溶液剂。另一方面，在4℃时，与37℃和60℃相比，可以得到钙水溶液剂的范围窄。

例6、进一步的钙水溶液剂

可以将在上述的例子中得到的钙水溶液剂中含有的成分进行进一步地修饰。

使用蒸馏水制备2M柠檬酸溶液、2M磷酸溶液、5M氢氧化钠溶液及500mM氟化钠。然后，将氢氧化钙悬浊于蒸馏水中使成为规定的浓度得到悬浊液。将柠檬酸溶液、磷酸溶液及氟化钠溶液与所述悬浊液混合使成为规定的浓度得到混合液。接着，在该混合液中添加氢氧化钠溶液使成为规定的浓度并混合。将其在37℃静置1周，得到被测液。

对得到的水溶液剂，测定pH（堀场制作所pH/离子计F-53、电极9610-10D）、钙离子浓度（堀场制作所pH/离子计F-53、复合离子电极6583-10C、芯片电极#7683）、氟化物离子浓度（堀场制作所pH/离子计、复合离子电极6583-10C、芯片电极#7661）及吸光值（96孔盘的1孔中100μL、O.D.595nm、BioTek设备公司制读板仪、EL312e）。与所述的钙水溶液剂同样，基于通过目视及吸光值得到的结果判定该修饰钙水溶液剂的透明度。

将其结果表示在表11中。

[表11-1]

[表11-2]

在不添加氟化钠时，在柠檬酸100mM、磷酸100mM、钙200mM、氢氧化钠150mM的条件下无法制备本发明所述的钙水溶液剂，通过添加20mM以上的氟化钠进行熟成可以制造钙水溶液剂。

添加氟化钠进行熟成的溶液中的氟化物离子浓度为总氟化物的10%以下，因此溶液中的氟化物，被认为与非离子性钙同时构成与式Ⅰ的化合物和/或式Ⅱ的化合物结合的复合物。另一方面，添加氯化钠时未见这种现象。

例如，该例中得到的钙水溶液剂可以与上述不含氟化物的其他的钙水溶液剂同样使用。

例7、冷冻干燥

通过冷冻干燥将上述例子中得到的钙水溶液剂制成固体化钙剂。用例1的方法制造钙为200mM的钙水溶液剂，在-80℃冷冻一晚后，使用冷冻干燥机（EYELA FREEZE DRYER FD-5N）进行冷冻干燥。对干燥的粉末加入蒸馏水使其与干燥前浓度相同。对进一步得到的水溶液剂，测定pH（堀场制作所pH/离子计F-53、电极9610-10D）、钙离子浓度（堀场制作所pH/离子计F-53、复合离子电极6583-10C、芯片电极#7683）及吸光值（96孔盘的1孔中100μL、O.D.595nm、BioTek设备公司制读板仪、EL312e）。

将结果表示在表12中。

[表12-1-1]

[表12-1-2]

[表12-1-3]

[表12-2-1]

[表12-2-2]

[表12-2-3]

冷冻干燥前，在柠檬酸50mM～400mM全部的浓度范围内均可以制造透明的钙水溶液剂。

将各水溶液剂冷冻干燥后，再溶解于蒸馏水中后，200mM和400mM的柠檬酸在与冷冻干燥前几乎相同的试验区内可以得到钙水溶液剂。但是，100mM的柠檬酸仅在600mM氢氧化钠的试验区内可以得到钙水溶液剂。50mM的柠檬酸无法得到钙水溶液剂。

例8、冷冻

也可以将上述的例子中得到的钙水溶液剂冷冻保存。用例1的方法制造钙为200mM的钙水溶液剂，在-80℃冷冻一晚后，解冻。对解冻得到的被测液，测定pH（堀场制作所pH/离子计F-53、电极9610-10D）、钙离子浓度（堀场制作所pH/离子计F-53、复合离子电极6583-10C、芯片电极#7683）及吸光值（96孔盘的1孔中100μL、O.D.595nm、BioTek设备公司制读板仪、EL312e）。

将结果表示在表13中。

[表13-1]

[表13-2]

在冷冻前和冷冻后均未见透明度不同，因此冷冻对钙水溶液剂的稳定性没有影响。

比较例

除了改变柠檬酸而使用乌头酸、苹果酸、酒石酸、甘氨酸、丙氨酸及赖氨酸以外，使用与例1同样的方法以各种浓度混合磷酸及氯化钙并进行熟成，虽然在一部分高浓度的酒石酸中可以得到透明液体，但其他的大部分的情况均无法得到本发明的钙水溶液剂。

例9、对试验溶液的制备及配合顺序的研究

对以下的例子，试验溶液全部为100mM柠檬酸、100mM磷酸、200mM钙，钠的浓度在使用氢氧化钙时为225mM，在使用氢氧化钙和盐酸时为610mM，在使用氯化钙时为610mM，进行制备。

吸光值的测定使用日本分光株式会社制造的分光光度计（Ubest-30）、使用玻璃制吸收池在595nm进行。

pH的测定，使用东亚电波工业株式会社制造的pH计(HM-5S)，钙离子浓度使用堀场制作所制造的pH/离子计（F-53）测定。

（1）试验溶液的制备{使用氢氧化钙时100mM柠檬酸、100mM磷酸、200mM氢氧化钙、225mM氢氧化钠}及{使用氯化钙时100mM柠檬酸、100mM磷酸、200mM氯化钙、610mM氢氧化钠}

使用氢氧化钙时的试验溶液如下所述制备。即，在500mL体积的量瓶中取氢氧化钙0.741g，加入超纯水30mL悬浊后，添加1M柠檬酸溶液5mL使氢氧化钙溶解。之后添加1M磷酸溶液5mL，添加5M氢氧化钠溶液225mL（这时为白色浑浊）并用超纯水定容至50mL。将该溶液移至50mL容积的媒介瓶(Media Bottle)中，制成试验溶液{氢氧化钙}。

通过将试验溶液{氢氧化钙}静置于37℃，并熟成1周，得到pH7.5、吸光值（595nm）为0.06、钙离子浓度低于1mM的透明液。

使用氯化钙时的试验溶液如下所述制备。即，取超纯水10mL至50mL容积的量瓶中，混合1M柠檬酸溶液5mL、1M磷酸溶液5mL后，添加5M氢氧化钠溶液6.1mL，并直接于50mL量瓶中加入1M氯化钙10mL（这时为白色浑浊），用超纯水定容至50mL。将该溶液移至50mL容积的媒介瓶中，制成试验溶液(氯化钙)。将试验溶液(氯化钙)静置于37℃，熟成6天，由此得到pH7.5、吸光值（595nm）为0.07、钙离子浓度低于1mM的透明液。

（2）添加顺序不同的试验（钙源为氯化钙）

对制备透明液时的各成分的添加顺序进行研究。各试验溶液分别制备2份。试验溶液的制备如下所述进行。

即，取超纯水4mL至10mL容积的媒介瓶中，混合1M柠檬酸溶液1mL、1M磷酸溶液1mL后，添加5M氢氧化钠溶液1.22mL，加入超纯水0.78mL。这时的pH为12.9。之后，添加1M氯化钙2mL（这时为白色浑浊）。将该溶液作为试验溶液对照品。该试验溶液的pH为12.0。

最后添加柠檬酸的试验溶液如下所示制备。即，取超纯水4mL至10mL容积的媒介瓶中，添加1M磷酸溶液1mL、5M氢氧化钠溶液1.22mL，加入超纯水0.78mL。这时的pH为13.9。之后，添加1M氯化钙2mL（这时为白色浑浊），并立即添加1M柠檬酸溶液1mL。将该溶液作为试验溶液。该试验溶液的pH为11.1。

最后添加磷酸的试验溶液如下所示制备。即，取超纯水4mL至10mL容积的媒介瓶中，添加1M柠檬酸溶液1mL、5M氢氧化钠溶液1.22mL，并加入超纯水0.78mL。这时的pH为14.0。之后，在添加1M氯化钙2mL后，立即添加1M磷酸溶液1mL（这时为白色浑浊）。将该溶液作为试验溶液。该试验溶液的pH为10.5。

测定将各试验溶液（全部为白色浑浊溶液）静置于37℃、并使其熟成3天时的pH及吸光值（595nm）、钙离子浓度（值为平均值）。

将结果表示在表14中。

[表14]

试验溶液	PH	吸光值(595nm)	Ca²⁺(mM)
				对照	8.1	0.113	＜1mM
最后添加柠檬酸	8.0	0.136	＜1mM
				最后添加磷酸	7.5	0.098	＜1mM

由该试验结果可知，使用氯化钙作为钙源时，与柠檬酸、磷酸、钙的添加顺序无关，均可以得到透明液。

例10、透明液制备中的各种研究

制备试验溶液使全部含有100mM柠檬酸、100mM磷酸、200mM钙。

（1）静置与搅拌的不同{钙源为氢氧化钙}

各样品分别制备2份。该试验中，将与用例9所示的顺序制备的试验溶液{氢氧化钙}组成相同的100mL的试验溶液在37℃静置或搅拌并熟成，研究得到的透明液是否观察到不同。

即，取氢氧化钙1.482g至100mL容积的量瓶中，加入超纯水70mL悬浊后，添加1M柠檬酸10mL溶解氢氧化钙。之后添加1M磷酸溶液10mL，放置10分钟后，添加5M氢氧化钠溶液4.5mL（这时为白色浑浊），用超纯水定容至100mL。将该溶液移至100mL容积的媒介瓶中，作为试验溶液。

测定将各试验溶液（全部为白色浑浊溶液）于37℃静置或搅拌并熟成时的pH及吸光值（595nm）、钙离子浓度（值为平均值）。

将结果表示在表15中。

[表15]

试验溶液分别静置、搅拌均得到透明液。另外，得到的透明液的pH及吸光值（595nm）、钙离子浓度均未见大的不同。

（2）使用不同的磷酸盐的透明液的制备{钙源为氢氧化钙}

取氢氧化钙1.482g至100mL容积的量瓶中，加入超纯水60～70mL悬浊后，添加1M柠檬酸10mL，用超声波短时间处理，分别添加氢氧化钠溶液使最终的钠浓度为225mM，加入磷酸盐溶液后（这时为白色浑浊），用超纯水定容至100mL。将该溶液移至100mL容积的媒介瓶中，于37℃熟成。试验中使用的磷酸盐和磷酸盐溶液添加量、5M氢氧化钠溶液添加量如表16中所示。

此外，对磷酸钠，按照以下的方法制备试验溶液。即，取氢氧化钙1.48g至100mL容积的量瓶中，添加2M盐酸溶液15mL溶解。加入超纯水30mL并悬浊，添加1M柠檬酸溶液10mL。15分钟后添加250mM磷酸钠溶液40mL，添加5M氢氧化钠溶液4.2mL，并立即用超纯水定容至100mL。将该溶液移至媒介瓶中，于37℃使其熟成。

[表16]

将各试验溶液（全部为白色浑浊溶液）于37℃熟成时的pH及吸光值（595nm）、钙离子浓度的测定结果表示在表17中。

[表17]

使用各磷酸盐的全部的试验溶液均可以得到透明液。

（3）使用柠檬酸盐、磷酸盐的透明液的制备（钙源为氯化钙）

对使用氯化钙作为钙源、柠檬酸及柠檬酸三钠作为式Ⅰ的化合物源、磷酸及磷酸氢二钠作为式Ⅱ的化合物源时的透明液进行研究。

即，按照如下所述制备氯化钙作为钙源，使用柠檬酸和磷酸、柠檬酸和磷酸氢二钠、柠檬酸三钠和磷酸氢二钠的三种试验溶液，于37℃熟成进行透明液的比较。

各样品分别制备2份。使用柠檬酸和磷酸的溶液，在50mL容积的媒介瓶中加入超纯水15mL，添加1M柠檬酸溶液5mL、1M磷酸溶液5mL。放置5分钟后，添加5M氢氧化钠溶液6.1mL,5分钟后添加超纯水8.9mL后，加入1M氯化钙10mL（这时为白色浑浊）制成试验溶液。

使用柠檬酸和磷酸二钠的溶液是在50mL容积的媒介瓶中加入超纯水12mL，添加1M柠檬酸溶液5mL、0.5M磷酸氢二钠溶液10mL。放置5分钟后，添加5M氢氧化钠溶液4.1mL,5分钟后添加超纯水8.9mL后，加入1M氯化钙10mL（这时为白色浑浊）制成试验溶液。

使用柠檬酸三钠和磷酸氢二钠的溶液是在50mL容积的媒介瓶中加入超纯水15mL，添加1M柠檬酸三钠溶液5mL、0.5M磷酸氢二钠溶液10mL。放置5分钟后，添加5M氢氧化钠溶液1.1mL,5分钟后添加超纯水8.9mL后，加入1M氯化钙10mL（这时为白色浑浊）制成试验溶液。

测定将试验溶液（全部为白色浑浊溶液）于37℃静置熟成2天时的pH及吸光值（595nm）、钙离子浓度（值为平均值）。将其结果表示在下述表18中。

[表18]

与式Ⅰ的化合物源、式Ⅱ的化合物源的组合无关，全部的试验溶液均可以得到透明液。

（4）使用柠檬酸钙的透明液的制备

关于在试验溶液的制备中，作为钙源、式Ⅰ的化合物源，使用对水的溶解性低的柠檬酸钙的方法进行研究。即，取柠檬酸钙285mg至10mL容积的媒介瓶中，加入超纯水6mL进行悬浊，添加1M磷酸溶液1mL。30分钟后添加5M氢氧化钠溶液0.75mL，并立即添加1M氯化钙溶液0.5mL。添加2M盐酸0.325mL后，立即添加超纯水1.425mL制成试验溶液。该试验溶液中，柠檬酸钙沉淀几乎不溶解而保持沉淀状态。在装有该试验溶液媒介瓶上盖上盖，于37℃使其熟成1周。初始的pH为10.7。

于37℃熟成1周的试验溶液，是pH为7.4且吸光值（595nm）为2.000以上的白浊液。

进而，如下所述，对用酸溶解柠檬酸钙使用的方法进行了研究。即，取柠檬酸钙285mg至10mL容积的媒介瓶中，加入2M盐酸溶液1mL溶解。加入超纯水5mL进行悬浊，添加1M磷酸溶液1mL。30分钟后添加5M氢氧化钠溶液1.22mL，并立即添加1M氯化钙溶液0.5mL，然后立即添加超纯水0.78mL制成试验溶液。在装有该试验溶液媒介瓶上盖上盖，于37℃使其熟成1周。熟成的试验溶液是pH为9.7且吸光值（595nm）为0.295、钙离子浓度低于1mM的透明液。

由以上的结果可知，在使用难溶性的钙盐时，在不经钙盐暂时溶解的工序（未离子化）的条件下无法得到透明液体，即使是难溶性的钙盐，通过用酸暂时溶解也可以得到透明液体。

（5）使用各种磷酸钙的透明液的制备

在试验溶液的制备中，对使用各种磷酸钙作为钙源、式Ⅱ的化合物源的方法进行了研究。称量磷酸钙使磷酸浓度为100mM，对钙浓度200mM的钙不足的部分通过添加氯化钙来补充。各样品分别制备2份。

作为比较使用的磷酸使用的试验溶液如下所述制备。即，在10mL容积的媒介瓶中添加超纯水4mL及1M柠檬酸溶液1mL、1M磷酸溶液1mL。15分钟后，添加1M氯化钙溶液2mL，15分钟后添加5M氢氧化钠溶液1.22mL(这时为白色浑浊)，并立即添加超纯水0.78mL，制成试验溶液。

另一方面，使用各种磷酸钙的试验溶液如下所述制备。此外作为磷酸钙，使用双（磷酸二氢）钙一水合物{Ca(H₂PO₄)₂·H₂O}及磷酸氢钙二水合物（CaHPO₄·2H₂O）。

使用双（磷酸二氢）钙一水合物{Ca(H₂PO₄)₂·H₂O}的试验溶液，在10mL容积的媒介瓶中取双（磷酸二氢）钙一水合物126mg，添加超纯水6mL进行悬浊，添加1M柠檬酸溶液1mL。15分钟后，添加1M氯化钙溶液1.5mL。放置15分钟后添加5M氢氧化钠溶液1.02mL，并立即添加超纯水0.98mL制成试验溶液。使用磷酸氢钙二水合物（CaHPO₄·2H₂O）的试验溶液，取磷酸氢钙二水合物172mg至10mL容积的媒介瓶中，添加2N盐酸溶液1mL溶解。加入超纯水5mL进行悬浊，添加1M柠檬酸溶液1mL。15分钟后，添加1M氯化钙溶液1mL。进一步放置15分钟后添加5M氢氧化钠溶液1.22mL，并立即添加0.78mL超纯水制成试验溶液。

测定将各试验溶液（全部为白色浑浊溶液）于37℃静置熟成一周时的pH及吸光值（595nm）、钙离子浓度（值为平均值）。将其结果表示在下述表19中。

[表19]

样品	pH	吸光值（595nm）	Ca²⁺（mM）
				磷酸	9.3	0.117	＜1mM
双(磷酸二氢)钙	9.8	0.098	＜1mM
				磷酸氢钙	8.8	0.125	＜1mM

结果显示，即使使用磷酸钙作为钙源、式Ⅱ的化合物源也能得到透明液。

（6）关于熟成温度和时间的研究

对在各温度下进行一定时间处理后的透明度进行研究。

试验溶液如下所述制备。此外，37℃～90℃在使用磷酸二钠和柠檬酸三钠的试验溶液中进行、沸腾及高压釜在使用磷酸和柠檬酸的试验溶液中进行。

即，在使用磷酸二钠和柠檬酸三钠的试验溶液中，取超纯水15mL至50mL容积的媒介瓶中，添加1M柠檬酸三钠溶液5mL、0.5M磷酸氢二钠溶液10mL。5分钟后，添加5M氢氧化钠溶液1.1mL，在添加8.9mL超纯水后，立即加入1M氯化钙溶液10mL（这时为白色浑浊），制成试验溶液。将该试验溶液在各温度保存一定时间使其熟成。

另外，在使用磷酸和柠檬酸的试验溶液中，取超纯水10mL至50mL容积的媒介瓶中，混合1M柠檬酸溶液5mL、1M磷酸溶液5mL后，添加5M氢氧化钠溶液6.1mL，在添加13.9mL超纯水后，立即加入1M氯化钙溶液10mL（这时为白色浑浊），制成试验溶液。

进而，在各温度下熟成后的试验溶液在37℃进一步熟成，并进行之后的透明度变化的确认。在各温度下保存一定时间使其熟成。

对各熟成后的试验溶液测定pH和吸光值。另外，对37℃熟成后的试验溶液测定钙离子浓度。结果如下所示。

[表20]

熟成条件(温度和时间)	pH	吸光值(595nm)	Ca²⁺(mM)
				37℃-8h	11.0	2.000以上	-
37℃-4天	8.0	0.073	＜1mM
				60％-5h	-	0.203	-
60℃-8h	7.8	0.180	-
				60℃-8h后37℃-4天	7.9	0.116	＜1mM
80℃-3h	7.4	0.305	-
				80℃-5h	7.5	0.231	-
80℃-5h后37℃-1天	7.6	0.200	＜1mM
				90℃-5h	7.9	0.364	-
90℃-5h后37℃-3天	7.9	0.244	＜1mM
				沸腾4小时后37℃-4天	8.3	0.954	-
高压釜(121℃-15分钟)	7.4	2.000以上	-
				高压釜后37℃-4天	7.4	0.811	-

可知，通过在高温下熟成，可以实现缩短透明化的时间。另一方面，在沸腾、高压釜等一定的温度条件以上的高温下的熟成中，不进行透明化的反应，无法得到目标的透明液。

例11.添加剂的影响

按照与例10的（3）中所示的柠檬酸三钠、磷酸二钠、氯化钙相同的配方来制备的透明液中，分别添加葡萄糖或甘氨酸使重量为10%（w/w）、氯化钠使重量为2%（w/w），制备试验溶液，对在室温及37℃保存后的试验溶液的透明度的变化进行研究。

即，取超纯水15mL至50mL容积的媒介瓶中，添加1M柠檬酸三钠溶液5mL、0.5M磷酸氢二钠溶液10mL。5分钟后，添加5M氢氧化钠溶液1.1mL，在添加8.9mL超纯水后，立即加入1M氯化钙溶液10mL（这时为白色浑浊），制成试验溶液。将该试验溶液在37℃熟成一周，得到透明液。该透明液，pH为7.8且吸光值（595nm）为0.069、钙离子浓度低于1mM。

添加了添加剂的各样品分别制造2份。添加了葡萄糖及甘氨酸的样品如下制备：在10mL容积的媒介瓶中分别取葡萄糖或甘氨酸500mg，在其中分别添加4.5g上述的透明液。另外，添加了氯化钠的样品是在10mL容积的媒介瓶中分别取氯化钠100mg，在其中分别添加4.9g上述的透明液。

分析将该试验溶液在室温下静置6天时及之后于37℃静置9天时的溶液。

将结果表示在表21中。

[表21]

可见，即使在本发明的透明液中添加10%（w/w）葡萄糖作为糖、10%（w/w）甘氨酸作为氨基酸、2%（w/w）氯化钠作为盐类时，也不会生成沉淀等而维持透明度。

例12、透明液的干燥粉末的制备（固体化钙剂的制备）

取例9的（1）中得到的使用氯化钙的透明液5mL至玻璃制50mL容器中，在各自的方法、温度下干燥后，再溶解于5mL的超纯水中。干燥方法为：使用（A）真空冷冻干燥（东京理化器械株式会社制造的冷冻干燥机FD-5N）、干燥机（三洋株式会社（サンヨー（株））制造的对流烤箱（COVECTION OVEN））、在（B）50℃、（C）60℃下的热风干燥。

测定再溶解后的溶液的pH及吸光值（595nm）。将其结果表示在下述表22中。

[表22]

干燥条件	pH	吸光值（595nm）
			未处理(原液)	7.5	0.094
(A)FD	7.5	0.098
			(B)50℃热风干燥	7.5	0.222
(C)60℃热风干燥	7.5	0.222

经FD（冷冻干燥）处理得到的干燥粉末，通过再溶解几乎恢复成原来的溶液。另外，用50℃、60℃下的热风干燥得到的干燥粉末的再溶解液,虽然达不到原来的透明液的透明度，但可以再溶解成无沉淀的透明液。

例13、通过高浓度钙水溶液的冷冻干燥得到的固体化钙剂

使用氧化钙作为钙源，在以下的条件下制备2份C400P400Ca800K900的钙水溶液剂。将氧化钙2.24g悬浊于35mL的蒸馏水中。将柠檬酸3.84g及85%磷酸1.36mL溶解于4.65mL蒸馏水中后，添加于上述氧化钙悬浊液中并搅拌。向其中加入5M氢氧化钠水溶液9mL，在45℃搅拌。

2份中1份保持原样至96小时并观察经过（以下称为A），另一份于24小时后冷冻干燥，于120小时后溶解于蒸馏水使其与冷冻干燥前浓度相同（以下称为B）。然后，在以下的条件中，使用玻璃制吸收池测定pH（堀场制作所pH/离子计 F-53、电极9610-10D）、钙离子浓度（堀场制作所pH/离子计 F-53、复合离子电极6583-10C、芯片电极#7683）及吸光值（日本分光株式会社制造的分光光度计(Ubest-30)）（在595nm进行）。将其结果表示在下述表23中。

[表23]

	pH	Ca(μM)	O.D.595
				A：24h后	7.73	47.1	0.081
A：96h后	6.94	46.9	2.838
				B：24h后	7.80	46.5	0.184
B：FD粉末再溶解后	7.20	83.9	0.121

在24小时后的测定中，虽然A和B浊度稍有差别，但是2份均可以得到透明的钙水溶液剂。若A经过24小时后也继续在45℃搅拌，则96小时后会生成沉淀。另一方面，在24小时后冷冻干燥的B,即使于120小时后再悬浊于蒸馏水中的情况下，也能形成透明的钙水溶液剂的状态。

由以上可知，即使在中性附近，也可以制备钙浓度为800mM的高浓度的钙水溶液剂。另外，还可知，即使随着时间的经过生成沉淀而不再透明的钙水溶液剂，也可以在透明的状态下通过冷冻干燥等制成固体化钙剂，并通过再悬浊可以容易得到透明的钙水溶液剂。

例14、固体化钙剂对大鼠的经口给予试验

关于本发明的固体化钙剂对低Ca饲料饲养大鼠的骨量减少的改善效果，使用5周龄的Crl:CD(SD)系的雄性进行试验。对4周龄的大鼠给予AIN-93M并驯化1周后，给予3周各种饲料。基本饲料使用将AIN-93M的钙含量变为0.2%(通常饲料为0.5%)的饲料。

试验组，将给予基本饲料的组作为低钙饲料组，使基本饲料中Ca含量为0.5%，将给予添加了碳酸钙、熟成后（37℃2天）C100P100Ca200K225溶液的冷冻干燥粉末，熟成后（37℃1天）C200P100Ca200K550溶液的冷冻干燥粉末，熟成前C100P100Ca200K225溶液的冷冻干燥粉末及添加了乳酸钙的饲料的组共计6组（1组8只）作为试验组。

期间，对体重的增加率、摄食量、每日的摄取量，各组间未见显著差异。另外，在低钙饲料组以外的组中，每日的钙摄取量也未见显著差异。

在3周后测定摘出的胫骨的干燥重量。将其结果表示在图6中。此外，图6中，“A”表示“熟成后”，“B”表示“熟成前”。

本实验中，与低钙饲料组相比，碳酸钙或乳酸钙同样在使用本发明所述的钙剂时，骨重量也会显著上升，即使加工成苦味少且透明的钙溶液，也可以确认不逊色于其他材料的吸收性。

例15、喷雾干燥的影响

本发明的钙水溶液剂可以通过喷雾干燥制成固体化钙剂。

使用喷雾干燥机（EYELA SD-1），在入口温度：135℃、出口温度：85～95℃、送风机：0.55m³/min、空气泵：0.8kg/cm²、干燥速度1L/h的条件下，进行C100P100Ca200K225、C100P100Ca200Cl400Na600、C100P100Ca200K225Na10F10、C200P100Ca200K550的钙水溶液剂的喷雾干燥。其结果，全部的溶液均可制成白色的粉末。理论上的收率为86～88%。

然后，在干燥的粉末中加入蒸馏水使其与干燥前浓度相同。进而对得到的水溶液剂，使用玻璃制吸收池测定pH（堀场制作所pH/离子计 F-53、电极9610-10D）、钙离子浓度（堀场制作所pH/离子计 F-53、复合离子电极6583-10C、芯片电极#7683）及吸光值（日本分光株式会社制造的分光光度计(Ubest-30)）（在595nm进行）。将其结果表示在下述表24中。

[表24]

喷雾干燥前	pH	Ca浓度(μM)	O.D.595
				C100P100Ca200K2225	6.64	109	0.100
C200P100Ca200K550	6.56	35.5	0.097
				C100P100Ca200Na600Cl400	6.48	580	0.111
C100P100Ca200K225Na10F10	7.22	39.6	0.075
				喷雾干燥后	pH	Ca浓度(μM)	O.D.595
C100P100Ca200K225	6.85	113	0.089
				C200P100Ca200K550	6.75	53.1	0.100
C100P100Ca200Na600Cl400	6.67	477	0.196
				C100P1OOCa200K225Na10F10	7.31	57.2	0.075

干燥的粉末，可以容易地以与原液相同浓度溶解于水中，再溶解后的pH、钙离子浓度、吸光值未见与原液有大的不同。

例16、高压釜（AC）的影响

本发明的钙水溶液剂可以通过高压釜加热灭菌。

用例1的方法制备钙浓度为200mM的钙水溶液剂，使用高压釜于121℃、15分钟的条件下加热灭菌。对使用高压釜灭菌后的被测液，测定pH（堀场制作所pH/离子计F-53、电极9610-10D）、钙离子浓度（堀场制作所pH/离子计F-53、复合离子电极6583-10C、芯片电极#7683）及吸光值（96孔盘的1孔中100μL、O.D.595nm、BioTek设备公司制读板仪、EL312e）。将其结果表示在下述表25及表26中。

[表25-1]

[表25-2]

[表26-1]

[表26-2]

在使用高压釜前和高压釜后，透明度未见大的不同。由此表明高压釜对钙水溶液剂的稳定性几乎没有影响。

例17、溶解速度确认试验

进行确认固体化钙剂对水的溶解性的试验。

使用搅拌机（THREE-ONE MOTOR（三-一发动机）BL300）搅拌桨叶（螺旋桨R），以300rpm搅拌100mL的烧杯中的50mL的DW。在烧杯中加入乳酸钙、葡萄糖酸钙、氯化钙、C100P100Ca200K225溶液的冷冻干燥粉末使钙为50mM，测定至透明的时间。将其结果表示在表27中。

[表27]

由表27所示的结果可以确认，本发明的固体化钙剂，即使与被称为溶解性高的其他的钙原料相比，也更加容易溶于水。

例18、添加镁的试验

镁被认为是与钙同样用于维持骨骼健康的重要的矿物质，并优选以2:1摄取钙和镁。

因此，不仅使用钙而且也使用镁进行制备本发明的钙水溶液剂的试验。

固定柠檬酸50mM、磷酸50mM、钙100mM的组成，进行与钙同时添加25～200mM镁的试验。本实验中，使用氯化钙作为钙源、氯化镁作为镁源、氢氧化钠作为pH调节液。将其结果表示在下述表28中。

[表28-1]

[表28-2]

在该条件下，无论镁添加量、pH多少，均无法形成透明的胶体溶液。

另一方面，固定柠檬酸200mM、磷酸50mM、钙100mM的组成，进行与钙同时添加25～200mM镁的试验。将其结果表示在下述表29中。

[表29-1]

[表29-2]

在该条件下，在镁添加量为0～50mM、pH7.24～11.78的范围内可以得到透明的胶体溶液。由该结果可知，通过将柠檬酸从50mM增加至200mM可以扩大可溶化范围。

然后，将柠檬酸50mM、磷酸50mM固定，将钙换成镁并使钙和镁的总量为100mM进行试验。将其结果表示在下述表30中。

[表30-1]

[表30-2]

在该条件下，仅在NaOH275mM、Ca67mM、Mg33mM的情况下形成透明的胶体溶液。

另一方面，将柠檬酸200mM、磷酸50mM固定，将钙换成镁并使钙和镁的总量为100mM进行试验。将其结果表示在下述表31中。

[表31-1]

[表31-2]

可知，在该条件下，仅在NaOH700mM:Ca67mM:Mg33mM的情况下形成透明的胶体溶液（在NaOH700mM:Ca33mM:Mg67mM、NaOH650mM:Ca0mM:Mg100mM、NaOH700mM:Ca0mM:Mg100mM时无法确认丁达尔现象，认为是非胶体溶液）。即使将柠檬酸从50mM增加200mM也几乎未见不同。

进而，使用氢氧化钙作为钙源、氢氧化镁作为镁源、氢氧化钾溶液作为pH调节剂进行钙剂的制备。将磷酸固定为100mM、钙固定为200mM，使柠檬酸为100mM、150mM、200mM，与钙同时添加25mM、50mM、100mM、150mM、200mM的镁进行试验。

由其结果可知，在该条件下，柠檬酸为100mM时无法得到添加镁的透明液，但柠檬酸为150mM、200mM时，可以得到镁添加量为25mM及50mM的透明的胶体溶液，与使用氯化钙、氯化镁、氢氧化钠时同样，可以通过增加柠檬酸来扩大透明化的范围。

例19、使用氧化钙的钙水溶液剂的制造

使用氧化钙作为钙源制备钙水溶液剂。将氧化钙1.12g悬浊于75.2mL的蒸馏水中，加入分别含有500mM柠檬酸及磷酸的水溶液20mL并搅拌。向其中加入5M氢氧化钾水溶液4.5mL，于45℃放置一晚并搅拌。第二天，可以得到透明的胶体溶液。该溶液含有柠檬酸100mM、磷酸100mM、钙200mM、钾225mM。将该溶液用高压釜处理后的pH为6.74，钙离子浓度为68.8μmol/L。

另外，使用氧化钙为主成分的贝壳烧成钙代替氧化钙，其他的组成与上述相同，制备钙水溶液剂使溶液的总量为50mL后，可以得到透明的胶体溶液。该溶液用高压釜处理后，pH为6.73，钙离子浓度为70.2μmol/L。

例20、平均粒径的测定

本发明的钙水溶液剂中未见丁达尔现象，因此可以表明形成胶体溶液。

因此，将钙水溶液剂稀释10000倍，在测定用塑料池(plastic cell)中于25℃使用动态光散射光度计（DLS：粒子尺寸公司（Particle Sizing SystemsCo.）NICOMP 380ZLS）测定粒径。由其结果可知，在C100P100Ca200K225的钙水溶液剂中含有具有5.6nm的平均粒径的胶体粒子、C100P100Ca200K350中含有具有32nm的平均粒径的胶体粒子、C100P100Ca200K400中含有具有29nm的平均粒径的胶体粒子、C200P100Ca200K550中含有具有25.6nm的平均粒径的胶体粒子、C100P100Ca200K225Na10F10中含有具有12.8nm的平均粒径的胶体粒子。

由此，可以认为在钙水溶液剂中含有100nm以下的胶体粒子作为构成成分。

另一方面，对通过冷冻干燥将钙水溶液剂制成固体化钙剂、并再溶解的溶液测定DLS后，可知：在C100P100Ca200K225的钙水溶液剂中含有具有26.8nm的平均粒径的胶体粒子、C100P100Ca200K350中含有具有40.3nm的平均粒径的胶体粒子、C100P100Ca200K400中含有具有26.4nm的平均粒径的胶体粒子、C200P100Ca200K550中含有具有25.5nm的平均粒径的胶体粒子、C100P100Ca200K225Na10F10中含有具有10.8nm的平均粒径的胶体粒子。

可知，虽然在C100P100Ca200K225的组成中可见20nm左右的不同，但几乎与原液的平均粒径一致，因此在将钙水溶液剂通过冷冻干燥制成固体化钙剂时，胶体粒子也能维持原液的状态。

例21、X射线晶体解析

以确认上述的胶体粒子为目的，对冷冻干燥钙水溶液剂得到的固体化钙剂，进行X射线衍射（XRD）测定、解析。测定使用PHILIPS X’Pert Pro对固定池上切割(すり切り)配置的粉末进行。此外，作为射线源，使用CuKα。将XRD测定的结果表示在图7A～D及图8A～C中。

可知，在C100P100Ca200K225、C200P100Ca200K550、C100P100Ca200K225Na10F10中，与羟磷灰石的一致率高。

此外，即使是相同的C100P100Ca200K225组成，不熟成而直接以白浊的状态进行冷冻干燥的样品，其结晶性低，不存在一致的化合物的候补。由此可知，熟成中非晶性的磷酸钙转变成羟磷灰石的胶体粒子。

即使进行熟成也未形成透明的钙水溶液剂的C100P100Ca200K50的钙水溶液剂，与透钙磷石的一致率也高。C100P100Ca200K100中可见透钙磷石、Ca(H₂PO₄)₂·2H₂O、Ca₃(PO₃)₆·10H₂O、羟磷灰石作为候补。C100P100Ca200K150中透钙磷石、Ca(H₂PO₄)₂·2H₂O、Ca₃(PO₃)₆·10H₂O、羟磷灰石作为候补，但与C100P100Ca200K100中相比，可知与羟磷灰石的一致率高。

由以上的结果表明：非晶性的磷酸钙通过熟成转变成有结晶性的磷酸钙化合物；通过增加pH容易生成羟磷灰石；通过某固定值以上的pH可以形成分散稳定性优良的羟磷灰石的胶体粒子。

例22、钙剂的苦味的官能评价

将钙剂中苦味稍少的乳酸钙及葡萄糖酸钙与本发明的钙剂的苦味进行比较评价。

作为用于溶解钙剂的溶液，准备0.5%食盐水及5%蔗糖溶液。将乳酸钙、葡萄糖酸钙及下述表32中记载的本发明的钙剂（1）～（7）以每100mL含有150mg的钙的浓度分别溶解于上述的食盐水及蔗糖溶液中。

[表32]

将食盐水及蔗糖溶液自身的苦味分别作为1，将苦味强的氯化钙溶解于食盐水及蔗糖溶液中使其与各钙剂溶液具有相同钙浓度得到的溶液的苦味分别作为5，通过接受过味觉评价训练的5人评价者评价各钙剂的苦味。将其结果表示在表33中。

[表33]

如上表所示，本发明的钙剂，与乳酸钙及葡萄糖酸钙相比，苦味少。特别是在含有食盐的溶液中，乳酸钙及葡萄糖酸钙的情况下会强烈感觉到苦味，而本发明的钙剂，即使在食盐溶液中苦味也极弱，认为可以用于多种食品中。

例23、牙科用途

本发明的钙剂，由于安全性和稳定性优良以及对口中的酸可以期待以下的2个优点，因此具有可配合于口腔保健商品的可能性。

作为一个优点，由于虫牙是由血小板内产生的酸引起的磷灰石的溶解现象，因此如果本发明的钙剂对酸有缓冲作用，则通过使本发明的钙剂滞留在血小板内，期望可以中和该酸并具有抑制牙齿的脱钙的效果。

作为另一个优点，本发明的钙剂被酸分解时，从本发明的钙剂中溶出的钙离子及磷酸离子会抑制牙齿的脱钙，另外，pH恢复至中性附近时，通过该钙离子及磷酸离子具有促进再矿化的可能性。

此外，关于牙科用途的试验，在没有特别的限制时，将C100P100Ca200K225简称为CPCa，将C100P100Ca200K225Na10F10简称为CPCaF。另外，将C100P100Ca200K225的冷冻干燥粉末简称为CPCa(FD)，将C100P100Ca200K225Na10F10的冷冻干燥粉末简称为CPCaF(FD)。

（1）对本发明的钙剂的缓冲能力及钙离子释放能力的研究

进行对本发明的钙剂的酸缓冲能力和钙离子的释放能力的评价。

（方法）

准备蒸馏水、调节为pH7.0的3mM的磷酸钠溶液（唾液中的磷酸浓度）、调节为pH7.0的1.09mM(相当于CPCa(FD)及CPCaF(FD)的0.05%溶液中的柠檬酸浓度的浓度)或2.18mM(相当于CPCa(FD)及CPCaF(FD)的0.1%溶液中的柠檬酸浓度的浓度)的柠檬酸钠溶液及调节为pH7.0的3mM的磷酸钠与1.09mM或2.18mM的柠檬酸钠的混合溶液。

制备在该各溶液中溶解了0.05%或0.1%的CPCa(FD)或CPCaF(FD)的试验液（100mL），一边搅拌一边加入0.1当量的盐酸0.1mL，记录达到稳定时的pH。

（结果与考察）

将以上的结果表示在图9A～图9D中。图9A～图9D中黑框的数据表示pH，白框的数据表示钙离子浓度。

图9A中，（A）表示蒸馏水、（B）表示0.05%的CPCa(FD)、（C）表示3mM的磷酸、（D）表示3mM的磷酸与0.05%的CPCa(FD)的混合物、（E）表示1.09mM的柠檬酸、（F）表示3mM的磷酸与1.09mM的柠檬酸的混合物。

图9B中，（A）表示蒸馏水、（B）表示0.1%的CPCa(FD)、（C）表示3mM的磷酸、（D）表示3mM的磷酸与0.1%的CPCa(FD)的混合物、（E）表示1.09mM的柠檬酸、（F）表示3mM的磷酸与1.09mM的柠檬酸的混合物。

图9C中，（A）表示蒸馏水、（B）表示0.05%的CPCaF(FD)、（C）表示3mM的磷酸、（D）表示3mM的磷酸与0.05%的CPCaF(FD)的混合物、（E）表示1.09mM的柠檬酸、（F）表示3mM的磷酸与1.09mM的柠檬酸的混合物。

图9D中，（A）表示蒸馏水、（B）表示0.1%的CPCaF(FD)、（C）表示3mM的磷酸、（D）表示3mM的磷酸与0.1%的CPCaF(FD)的混合物、（E）表示1.09mM的柠檬酸、（F）表示3mM的磷酸与1.09mM的柠檬酸的混合物。

由这些结果可知，CPCa(FD)的溶液及CPCaF(FD)的溶液，与同浓度柠檬酸钠溶液相比对酸的缓冲能力均较强，具有随着变为酸性而释放钙离子的特性。由此表明，本发明的钙剂具有中和酸而抑制牙齿脱钙的效果以及促进再钙化的效果。

（2）本发明的钙剂的牙本质脱钙抑制效果的评价

研究本发明的钙剂的脱钙抑制效果。

（方法）

将牙齿样品（将牛牙牙本质的块包埋于树脂中而得到的样品）浸渍于含有各种浓度（0,0.02,0.05,0.1%）的固体化钙剂（CPCa(FD)及CPCaF(FD)）的脱钙液（CaCl₂:1.5mM、KH₂PO₄:0.9mM、醋酸：50mM、NaN₃:0.02%、pH:4.5）10mL中，在37℃脱钙1周。

脱钙处置后，从牙齿样品中以240μm的厚度切出切片，取得TMR（作为X射线透射法的横断显微放射技术（transversal microradiography））图像，对其进行图像解析。

（结果）

将该结果表示在下述表34以及图10A～图16A及图10B～图16B中。

[表34]

图10A～图16A，是表示钙剂的牙本质脱钙抑制效果的评价结果的照片，图10B～图16B是表示钙剂的牙本质脱钙抑制效果的评价结果的图。此外，图10B～图16B中，“A”表示脱钙表面，“B”表示脱钙最前线。

如表34所示可知，若CPCa在0.05%时平均脱钙抑制率为44.7%，CPCaF在0.25%时平均脱钙抑制率为60.3%，则显示出充分的脱钙抑制效果。

（3）本发明的钙剂的人工血小板滞留试验

为了确认本发明的钙水溶液剂中的钙及磷酸在人工血小板中滞留多大程度进行了研究。

（方法）

将变形链球菌（S.mutans）在TSB[Bact(注册商标)：胰酶大豆肉汤]中进行一晚前培养。将前培养的变形链球菌的培养液100μL接种于添加2.5mL的1%蔗糖的TSB中，将试管以倾斜成约30°的状态培养一晚。培养一晚后除去培养液，用3mL生理盐水洗涤3次，得到附着于试管内壁的人工血小板。钙水溶液剂通过溶解固体化钙剂（CPCa(FD)及CPCaF(FD)）成为0.25%～10%而制备。在附着人工血小板的试管中添加3mL钙水溶液剂。在室温反应10分钟。用3mL生理盐水洗涤3次，用1N HCl3mL提取钙及磷酸3次。测定人工血小板的重量。将10mL钙提取液混合后，使用ICP测定钙及磷浓度，算出滞留于人工血小板中的钙浓度及磷浓度。

（结果与考察）

将使钙水溶液剂（CPCa）反应10分钟时的结果表示在下述表35中。

[表35]

钙水溶液剂（CPCa）中的Ca和P的摩尔比为2:1，因此重量比为2.6:1。上述结果中，滞留于人工血小板的Ca与P的比例几乎维持理论上的CPCa的比例。

这里，CPCa中的Ca含量为17.5%，若假定CPCa中的其他成分也全部以相同比例滞留，则使CPCa10%溶液反应时，滞留浓度以CPCa换算为0.4%。另外，CPCa5%溶液中为0.24%、CPCa1%溶液中为0.034%、CPCa0.5%溶液中为0.0171%、CPCa0.25%溶液中为0.0057%。

使用牙本质的脱钙抑制效果及对酸的缓冲作用均在CPCa浓度为0.05%时显示出效果，因此通过与1%～5%左右的CPCa溶液接触10分钟左右，血小板中滞留有效量的CPCa，具有得到脱钙抑制效果的可能性。

继而，将使钙水溶液剂（CPCaF）反应10分钟时的结果表示在下述表36中。

[表36]

由于钙水溶液剂（CPCaF）中的Ca和P的摩尔比为2:1，因此重量比为2.6:1。上述结果中，滞留于人工血小板中的Ca与P的比例几乎维持理论上的CPCaF的比例。

这里，CPCaF中的Ca含量为17.5%，若假定CPCaF中的其他成分也全部以相同比例滞留，则使CPCaF-10%溶液反应时，滞留浓度以CPCaF换算为0.52%。另外，CPCaF-5%溶液中为0.25%、CPCaF-1%溶液中为0.074%、CPCaF-0.5%溶液中为0.034%、CPCaF-0.25%溶液中为0.017%。

使用牙本质的脱钙抑制效果在0.025%时,对酸的缓冲作用在CPCaF浓度为0.05%时显示出效果，因此通过与0.5%～1%左右的钙水溶液剂（CPCaF）接触10分钟左右，血小板中滞留有效量的CPCaF，具有得到脱钙抑制效果的可能性。

例24、ζ-电位的测定

使用电动声波（electrokinetic sonic amplitude；ESA）法进行钙水溶液剂中的胶体粒子的ζ-电位的测定。具体的使用ζ-电位测定器（装置名：ESA-8000）将样品的原液装入测定用池中，在25℃条件下测定。将其结果表示在下述表37中。

[表37]

表37

	ζ-电位κ(mV)
		C100P100Ca200K225	15.6
C100P100Ca200K300	8.37
		C100P100Ca200K350	2.61
C100P100Ca200K400	3.41
		C100P100Ca200K550	4.6
C100P100Ca200K225Na2.5F2.5	4.61
		C100P100Ca200K225Na5F5	0.92
C100P100Ca200K225Na7.5F7.5	0.851
		C100P100Ca200K225Na10F10	0.597
C100P100Ca200K225Na20F20	0.0465
		C100P100Ca133Mg67K190	1.08

由表37中所示的结果可知，钙水溶液剂中的胶体粒子，ζ-电位为正电。

进一步的利益及变形对本领域技术人员是容易的。因此，本发明在比此更广的面上，不应该限定于这里记载的特定的记载或代表性的方式。因此，只要在不脱离由随附的权利要求书的范围及其等同规定的本发明的概括性概念的真意或范围内可以进行各种变形。

产业上利用的可能性

根据本发明的钙剂，适用于在例如，医疗、食品、农业、畜牧业、渔业及园艺等领域中，对对象给予钙。

Claims

1.pH值为4～13的透明的钙水溶液剂，其特征在于，通过如下方法制造：将在水中被离子化的钙源与式Ⅰ的化合物源及式Ⅱ的化合物源混合，在使最终得到的溶液的pH值为4～13的条件下将得到的液体在4℃～90℃的温度下熟成3小时～1周从而从非胶体液体转变成胶体液体，从不透明液体转变成透明液体；其为含有水、钙、式Ⅰ的化合物及式Ⅱ的化合物作为构成要素的钙水溶液剂，所述钙大部分作为非离子性钙存在，且在维持式Ⅰ的化合物和/或式Ⅱ的化合物的基本骨架的状态下构成与它们结合的复合体，且所述复合体的至少一部分形成胶体粒子，该胶体粒子的平均粒径为100nm以下；

[化1]

2.固体化钙剂，其是通过将权利要求1所述的钙水溶液剂干燥得到的。

3.如权利要求2所述的固体化钙剂，其特征在于：通过再添加水形成权利要求1所述的钙水溶液剂。

4.pH值为4～13的透明的钙水溶液剂，其特征在于，通过如下方法制造：将在水中被离子化的钙源与式Ⅰ的化合物源、式Ⅱ的化合物源及氟源混合，在使最终得到的溶液的pH值为4～13的条件下将得到的液体在4℃～90℃的温度下熟成3小时～1周从而从非胶体液体转变成胶体液体，从不透明液体转变成透明液体；其为含有水、钙、式Ⅰ的化合物、式Ⅱ的化合物及氟作为构成要素的钙水溶液剂，所述钙大部分作为非离子性钙存在，且在维持式Ⅰ的化合物和/或式Ⅱ的化合物的基本骨架的状态下构成与它们结合的复合体，所述氟的至少一部分与所述复合体结合，且所述复合体的至少一部分形成胶体粒子，该胶体粒子的平均粒径为100nm以下；

[化2]

5.固体化钙剂，其是通过将权利要求4所述的钙水溶液剂干燥得到的。

6.如权利要求5所述的固体化钙剂，其特征在于：通过再添加水形成权利要求4所述的钙水溶液剂。

7.钙水溶液剂的制造方法，其特征在于：将在水中被离子化的钙源与式Ⅰ的化合物源及式Ⅱ的化合物源混合，在使最终得到的溶液的pH值成为4～13的条件下将得到的液体在4℃～90℃的温度下熟成3小时～1周从而从非胶体液体转变成胶体液体，从不透明液体转变成透明液体；

[化3]

8.钙水溶液剂的制造方法，其具备：

(1)在水中使钙源离子化，

(2)将(1)中被离子化的钙与式Ⅰ的化合物源及式Ⅱ的化合物源混合，

(3)使(2)中得到的溶液在4℃～90℃的温度下熟成3小时～1周从而从非胶体液体转变成胶体液体，从不透明液体转变成透明液体，

(4)在所述的(1)～(3)的任一工序中，调节pH使最终得到的溶液的pH值为4～13；

[化4]

9.钙水溶液剂的制造方法，其特征在于：将在水中被离子化的钙源与式Ⅰ的化合物源、式Ⅱ的化合物源及氟源混合，在使最终得到的溶液的pH值为4～13的条件下将得到的液体在4℃～90℃的温度下熟成3小时～1周从而从非胶体液体转变成胶体液体，从不透明液体转变成透明液体；

[化5]

10.钙水溶液剂的制造方法，其具备：

(1)在水中使钙源离子化，

(2)将(1)中被离子化的钙与式Ⅰ的化合物源及式Ⅱ的化合物源及氟源混合，

[化6]

11.固体化钙剂的制造方法，其具备将通过权利要求7～10的任一项所述的制造方法得到的钙水溶液剂进行进一步干燥的工序。

12.pH值为4～13的透明的钙水溶液剂，其是通过具备以下工序的方法制造的：

(1)在水中使钙源离子化，

其为含有水、钙、式Ⅰ的化合物及式Ⅱ的化合物作为构成要素的钙水溶液剂，所述钙大部分作为非离子性钙存在，且在维持式Ⅰ的化合物和/或式Ⅱ的化合物的基本骨架的状态下构成与它们结合的复合体，且所述复合体的至少一部分形成胶体粒子，该胶体粒子的平均粒径为100nm以下；

[化8]

13.pH值为4～13的透明的钙水溶液剂，其是通过具备如下工序的方法制造的：

(1)在水中使钙源离子化，

(2)将(1)中被离子化的钙与式Ⅰ的化合物源、式Ⅱ的化合物源及氟源混合，

其为含有水、钙、式Ⅰ的化合物、式Ⅱ的化合物及氟作为构成要素的钙水溶液剂，所述钙大部分作为非离子性钙存在，且在维持式Ⅰ的化合物和/或式Ⅱ的化合物的基本骨架的状态下构成与它们结合的复合体，所述氟的至少一部分与所述复合体结合，且所述复合体的至少一部分形成胶体粒子，该胶体粒子的平均粒径为100nm以下；

[化10]

14.如权利要求1或4所述的钙水溶液剂，其特征在于：所述钙水溶液剂维持并含有在所述反应时存在的所有构成成分。

15.如权利要求12或13所述的钙水溶液剂，其特征在于：维持并含有在所述(1)和(2)中存在的所有构成成分。

16.固体化钙剂，其是通过权利要求11的方法制造的。

17.如权利要求16所述的固体化钙剂，其特征在于：通过再添加水形成权利要求1或4的钙水溶液剂。

18.防止来源于钙的沉淀生成的方法，其为防止来源于钙水溶液中的钙的沉淀物生成的方法，其特征在于：将在水中被离子化的钙与式Ⅰ的化合物和式Ⅱ的化合物混合，在使最终得到的溶液的pH值为4～13的条件下将的得到的液体在4℃～90℃的温度下熟成3小时～1周从而从非胶体液体转变成胶体液体，从不透明液体转变成透明液体；

[化11]

19.防止来源于钙的沉淀生成的方法，其为防止来源于钙水溶液中的钙的沉淀物生成的方法，其具备：

(1)在水中使钙离子化，

(2)将(1)中被离子化的钙与式Ⅰ的化合物及式Ⅱ的化合物混合，

[化12]