CN102946878A - 前列腺癌的治疗方法 - Google Patents

Abstract

公开了治疗治疗前列腺癌的方法，包括给予需要治疗的病人钌络合物盐。

Description

前列腺癌的治疗方法

交叉引用美国相关专利申请

本申请案主张2010年4月23日提交的美国临时专利申请案第61/327,492号的权益。

发明领域

本发明总体涉及治疗癌症的方法，尤其是治疗前列腺癌的方法。

发明背景

在美国男性中，前列腺癌是最常见的癌症类型。例如，在2008年，有186,000例新增前列腺癌患者，有28,600例患者死于前列腺癌。因此，存在对于治疗前列腺癌的新药的显著需求。

Peti等人(Peti et al，Eur.J.Inorg.Chem.1999，1551-1555)和PCT公开文件(No.WO2008/154553)都公开了反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钠化合物的合成方法。

发明概述

现在发现，化合物反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钠能特别有效地抑制前列腺癌细胞生长。也惊人地发现，对于对如多西他赛和长春花碱(vinblastine)药物敏感或耐药的前列腺癌细胞，反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钠具有同等效果。

因此，一方面，本发明提供了治疗前列腺癌的方法。该方法包括：用有效治疗剂量的反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]或其药学上可接受的盐来治疗鉴定为前列腺癌的患者。

另一方面，本发明提供了一种预防或延迟前列腺癌发作的方法。该方法包括：给需要预防、或延迟前列腺癌发作的前列腺癌患者摄入有效治疗剂量的反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]或其药学上可接受的盐。

本发明进一步提供了反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]或其药学上可接受的盐在生产用于治疗、预防或延迟前列腺癌发作的药物中的应用。

另外，本发明提供了治疗抵抗性前列腺癌的方法。该方法包括：确认病人患有抵抗性前列腺癌，并用有效治疗剂量的反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]或其药学上可接受的盐来治疗。在具体的实施方案中，前列腺癌患者对包含多西他赛和/或长春花碱的治疗有耐药性。

本发明的以上所述及其它优势和特点，及其完成方式，在考虑下面有关本发明的详细描述结合所附的表现优选范例性实施方案的例子之后将会更加明了。

附图概述

图1是一个反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钠在LNCaP细胞中剂量依赖性地抑制生长(MTT试验)的曲线图。

图2是一个反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钠(MTT试验)在PC-3细胞中的剂量依赖性地抑制生长的曲线图。

发明详述

本发明至少部分基于反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钠化合物在治疗前列腺癌有效的这一发现。因此，根据本发明的第一方面，提供一种用于治疗前列腺癌的方法。具体地，此种方法包括用有效治疗剂量的反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]或其药学上可接受的盐来治疗鉴定为前列腺癌的患者。即，本发明相关于有效治疗剂量的反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]或其药学上可接受的盐在制备用于治疗前列腺癌患者或诊断为前列腺癌的病人的药物中的应用。在优选的实施方案中，使用反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]碱金属盐(例如反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钠盐或反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钾盐)或反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]吲唑盐。

在本发明这一方面的各种实施方案中，治疗方法还可选择性的包括一个诊断或鉴定病人患有前列腺癌的步骤。确诊的患者可用有效治疗剂量的反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]或其药学上可接受的盐(例如反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钠盐)或反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]吲唑盐)进行治疗。各种前列腺癌可以用本领域中任何已知的常规诊断方法包括PSA测试、活检、Gleason评分、PCA-3基因测试等来诊断。

此外，还令人惊奇地发现，反式-[四氯双(1H-引唑)钌(III)]钠化合物在对微管蛋白抑制剂如多西他赛(docetaxel)和长春花碱耐药的前列腺癌细胞同样有效。因此，本发明还提供治疗抵抗性前列腺癌的方法。该方法包括用有效治疗剂量的反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]或其药学上可接受的盐(例如反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钠盐或反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]吲唑盐)治疗确定为有抵抗性前列腺癌的病人。在一个实施方案中，患前列腺癌的病人患有对包括紫杉烷类药物(例如多西他赛、紫杉醇、Abraxane等)的治疗有抗性。在另一实施方案中，患前列腺癌的病人患有对包括长春碱类药物(例如长春花碱、长春新碱、长春地辛和长春瑞滨)的治疗有抗性，即，本发明还涉及使用反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]或其药学上可接受的盐(例如反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钠或反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]吲唑)来制备用于治疗对紫杉烷类药物(例如多西他赛、紫杉醇、abraxane等)或长春碱类药物(例如长春花碱、长春新碱、长春地辛和长春瑞滨)有抵抗性的前列腺癌。

术语“抵抗性前列腺癌”在这里是指对不包括反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]或其药学上可接受的盐在内的抗肿瘤治疗方案无有效反应的前列腺癌，或者是对不包括反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]或其药学上可接受的盐在内的抗肿瘤治疗方案有效反应后复发的前列腺癌。因此，“对一种治疗有抵抗性的前列腺癌”在这里是指对这种治疗无有效反应，或表现出抗性，或对这种治疗有有效反应后发生复发的前列腺癌。例如，这种先前治疗方案可以是包括多西他赛(docetaxel)和磷酸雌二醇氮芥(estramustine phosphate)的化疗。

因此，在一些实施方案中，本发明的方法中，反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]或其药学上可接受的盐是用于治疗那些对一种或多种诸如紫杉烷类(例如多西他赛、紫杉醇、abraxane等)和长春花生物碱类(例如长春花碱、长春新碱、长春地辛和长春瑞滨)药物治疗产生耐药的前列腺癌患者。换句话说，该方法用于治疗之前用包括一种或多种诸如紫杉烷类(例如多西他赛、紫杉醇、abraxane等)和长春花生物碱类(例如长春花碱、长春新碱、长春地辛和长春瑞滨)药物治疗无效或对治疗产生耐药性的前列腺癌患者。在其它实施方案中，该方法用于治疗那些先前用一种或多种如紫杉烷类(例如多西他赛、紫杉醇、abraxane等)和长春花生物碱类(例如长春花碱、长春新碱、长春地辛和长春瑞滨)药物治疗，但前列腺癌复发的前列腺癌患者，也就是说，起初对上述一种或多种药物治疗有有效反应，但随后又复发的前列腺癌患者。在具体的实施方案中，用反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钠盐治疗先前用多西他赛治疗的前列腺癌患者，即，该患者对多西他赛治疗产生耐药性或在多西他赛治疗后前列腺癌复发。在另一具体实施方案中，反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钠盐用于治疗先前用长春花碱治疗的前列腺癌患者，即，该患者对长春花碱治疗产生耐药或在长春花碱有效治疗后前列腺癌复发。

检测抵抗性前列腺癌时，可以在起始治疗阶段仔细监控患者对药物的耐药性、治疗无应答或前列腺癌复发。这可以通过检测患者癌症对起始治疗例如包括多西他赛或长春花生物碱治疗的响应。癌症对起始治疗的响应、不响应或复发都可以通过本领域中任何合适的方法来鉴定。例如，这可以通过评估肿瘤的大小和数量来完成。肿瘤增大或肿瘤数量增大都表示肿瘤对化疗没有响应，或已发生复发。根据“RECIST”标准的详细描述(Therasse et al，J.Natl.Cancer Inst.92：205-216(2000))，可以完成此鉴定。

另一方面，本发明提供了一种方法用于防止或延缓前列腺癌，或防止或延缓前列腺癌的复发。该方法包括用有效预防剂量的反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钠或反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]吲唑治疗需要预防或延迟癌症的患者。

为了预防或延缓前列腺癌的复发，经治疗后已缓解或处在一个稳定状态或无复发迹象状态的前列腺癌患者可以用预防性的有效剂量的反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]或其药学上可接受的盐(例如反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钠盐或反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]吲唑盐)来有效预防或延缓前列腺癌的再发生或复发。

本专利所用的短语“用、、、治疗、、、”或它们意译意味着给病人施用一种化合物或引起病人体内一种化合物的形成。

根据本发明的方法，前列腺癌可以用有效剂量的作为单一药物或者结合一个或更多其它抗癌药物的反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]或其药学上可接受的盐(例如反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钠或反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]吲唑)治疗。例如药学上可接受的盐包括碱金属盐(例如钠盐或钾盐)、吲唑盐等。选用一种碱金属盐，优选反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钠盐(即，反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钠或反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钾)是特别有用的。

反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]碱金属盐可以用本领域中的任何已知方法制造。例如，PCT公开号为WO/2008/154553的文件中公开了一种高效制备反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钠的方法。美国专利号为7,338,946的文件中公开了反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]吲唑和含有该吲唑盐的制剂制备方法。

药学上可接受的反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]盐(例如，反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钠或反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]吲唑)这样的药物可以通过静脉注射或其它任何合适的途径依据人体总重量的每公斤体重按0.1毫克至1000毫克剂量给药。有效剂量的药物可以一次性给药，或可分为若干较小的剂量在预定的时间间隔(例如，每天一次或每两天一次)给药。应该知道的是，本发明上面列出的剂量范围只是示范性的而不限制本发明的范畴。这种活性化合物的有效治疗剂量是随各种因素变化的，包括但不限于，使用的化合物的活性、活性化合物在病人体内的稳定性、症状缓解的程度、治疗病人的总重量、给药途径、人体对活性化合物的吸收、分布和排泄难易度、病人的年龄和对药物治疗的敏感度等因素及类似的专业技术人员说熟知的因素。各种因素随着时间推移而改变，给药的剂量也可以进行调整。

本发明还提供了使用反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]或其药学上可接受的盐(例如，一种诸如反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钠或反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钾的反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]碱金属盐，或反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]吲唑)来制备治疗前列腺癌的药剂。

在具体的实施方案中，本发明提供了使用反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]或其药学上可接受的盐(例如，一种诸如反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钠或反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钾的反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]碱金属盐，或反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]吲唑)来制备药剂用于治疗先前用多西他赛和或长春花碱治疗，但对药物存在耐药性或在多西他赛和或长春花碱治疗后复发的前列腺癌。

这种治疗用的药物可以一种注射形式，适合于静脉、皮下、或肌肉给药。注射剂型是本领域内熟知的，例如缓冲液或悬浮液。

根据本发明的另一方面，提供了一个药盒，包括在一个容器中有一个单位剂型的反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]或其药学上可接受的盐(例如一种诸如反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钠或反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钾的反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]碱金属盐，或反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]吲唑)、以及可选地关于在本发明的方法中使用本药盒的说明书，例如，(例如，治疗、预防或延缓一系列前列腺癌，或预防或延缓前列腺癌复发，或治疗抵抗性前列腺癌)。如技术人员所知，单位剂型中有效化合物的量是由本发明的方法中用于患者的剂量所确定的。在药盒中。在药盒中的反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]或其药学上可接受的盐(例如，一种诸如反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钠或反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钾的反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]碱金属盐，或反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]吲唑)化合物可以以冻干粉形式例如按25毫克的量添加到安瓿瓶中。在临床上，冻干粉可以溶解在缓冲液中，并根据本发明的治疗方法给需要的患者摄入。

实施例1

为了测试反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钠的活性，采用人前列腺癌细胞系LNCaP克隆FGC(前列腺癌)和PC-3(前列腺癌)进行ATCC的MTT细胞增殖试培养细胞生长至70-80％覆盖率用于本研究。用ATCC的MTT细胞增殖试验体系(产品编号30-1010K)反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钠对所述细胞系的抗增殖活性。在培养皿板中用按每孔4000个细胞接种LNCaP克隆FGC，并以含1％ HEPES(1M溶液)、1％丙酮酸钠(sodiumpyruvate)、1％葡萄糖(45％溶液)、10％高温灭活的FBS和1％的青霉素或链霉素或谷氨酰胺的RPMI1640培养基培养细胞。在培养皿板中按每孔6000个细胞接种PC-3细胞，并以含10％高温灭活的FBS、1％青霉素或链霉素或谷氨酰胺的Ham F12培养基培养细胞。细胞培养物维持在37摄氏度、5％CO₂/95％空气的湿润环境中。用1000μM或一系列4×稀释(250μM、62.5μM等)的反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钠处理细胞。处理后72小时时，从每个孔中除去100μl培养液，加入10μl的MTT试剂到每个孔中。培养皿板于37摄氏度培养4小时，然后加入100μl去垢剂。该板于室温下在黑暗中放置过夜，并用SoftMax Pro(Molecular Decives公司，5.2版本)平板计数器计数。

吸光度数据分析如下：吸光度值转换为参照百分比并并用

Pro(version 5.2，Molecular Devices)绘制其对待测试剂浓度的曲线图来计算IC₅₀。。计算对照百分比之前，从每个孔的数值中减去平板空白信号均值。参照百分比值是由每个测试孔的吸光度值除以无药物处理空白对照(细胞加介质对照的11组数值)平均吸光度值再乘以100得来。用4元方程获得IC₅₀值和描述S型剂量反应曲线的其他参数来图解分析化合物浓度对参照百分比的关系。

通过用下面的4参数罗杰斯蒂方程(logistic equation)曲线拟合数据来估算测试试剂的IC₅₀值。

$Y=\frac{\mathrm{Top}-\mathrm{Bottom}}{1+{(X/{\mathrm{IC}}_{50})}^n}+\mathrm{Bottom}$

这里“Top”是指最大参照吸光度百分比(100％)(图1和图2中的“A”值)，“Bottom”是指在最高试剂浓度(下降到0)下最小参照吸光度百分比(图1和图2中的“D”值)，Y是指参照吸光度百分比，X是指测试试剂浓度，IC₅₀是指对比参照细胞抑制细胞50％生长时的试剂浓度(图1和图2中的“C”值)，n是指曲线斜率(图1和图2中的“B”值)。反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钠在LNCaP细胞系中的IC₅₀值是17.3μM(图1)，在PC-3细胞系中的IC₅₀值为41.8μM(图2)。

此外，从公开发表的文献可以获得多西他赛在LNCaP和PC-3细胞系中的IC₅₀值。计算反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钠在一个对其它药物敏感细胞系和一个对相同药物不敏感细胞系中的IC₅₀值比率。计算结果显示在下列的表1中(“测试药物”在表格中表示反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钠)。这些数据表明，反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钠实际上在耐多西他赛和长春花碱的LNCaP细胞中比在对多西他赛和长春花碱相对敏感的PC-3细胞中更有活性。参见Domingo-Domenech et al.，Clin.Cancer Res.，12(18)：5578-5586(2006)；Blagosklonny et al.，J.Urol.，163(3)：1022-6(2000)。因此，反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钠可以有效地治疗对前面提到的其它药物耐药的前列腺癌。

表1

＊Domingo-Domenech et al.，Clin.Cancer Res.，12(18)：5578-5586(2006).

本说明书中提及的所有论文和专利申请书是领域内技术人员对本发明相关的认识水平的体现。所有的论文和专利申请书在此通过相同程度的引用结合到文中，好像每篇单个的论文或专利申请书都是特定的和单独的提及而通过引用结合到文中。仅仅提及论文和专利申请书不一定表示承认它们是先于本申请的在先技术。

虽然为了达到清晰理解的目的已用图解和实例的方式对上述发明进行了细节描述，但是要知道在附上的权利要求范围内可以进行某些变化和修改。

Claims (7)

1.反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]的药学上可接受的盐在制备用于前列腺癌治疗、预防或延缓的药物中的应用。

2.权利要求1之应用，其中所述的前列腺癌是抵抗性前列腺癌。

3.权利要求1或2之应用，其中所述的药学上可接受的盐是反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]碱金属盐。

4.权利要求1或2或3之应用，其中所述的药学上可接受的盐是反式-[四氯双(1H-吲唑)钌(III)]钠盐。

5.权利要求2之应用，其中所述的前列腺癌是对包括紫杉烷或长春花碱的治疗方案有耐药性的前列腺癌。

8.权利要求7之应用，其中所述前列腺癌先前曾用包含多西他赛的治疗方案治疗过。

9.权利要求7之应用，其中所述的前列腺癌先前曾用包含长春花碱的治疗方案治疗过。

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