CN102106851A - 鸦胆苦醇作为化疗药增效剂的应用 - Google Patents
鸦胆苦醇作为化疗药增效剂的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102106851A CN102106851A CN 201010589025 CN201010589025A CN102106851A CN 102106851 A CN102106851 A CN 102106851A CN 201010589025 CN201010589025 CN 201010589025 CN 201010589025 A CN201010589025 A CN 201010589025A CN 102106851 A CN102106851 A CN 102106851A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- brusatol
- picrol
- chemotherapeutic
- cell
- platinum
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明公开了鸦胆苦醇的一种新用途，即：作为化疗药增效剂的应用，应用时，与化疗药联合使用。所述化疗药为顺铂、卡铂、奥沙利铂、5-氟脲嘧啶、紫杉醇、阿霉素或依托泊苷。本发明的鸦胆苦醇可制成一切药学可接受口服和非口服制剂形式。本发明的鸦胆苦醇在制备化疗增效剂的应用中的有益效果如下：(1)鸦胆苦醇作用于Nrf2途径，可以增加多种化疗药对于肿瘤细胞的杀伤作用。(2)鸦胆苦醇可以增加低剂量顺铂对于裸鼠移植瘤的生长抑制，具有临床应用前景。(3)鸦胆苦醇与顺铂联用可以增加非小细胞肺癌细胞株中顺铂含量。(4)鸦胆苦醇与化疗药联用在细胞水平及小鼠试验工作浓度均未见毒性。
Description
技术领域
本发明涉及鸦胆苦醇作为化疗药增效剂的新用途，与化疗药联用增加化疗疗效，提高肿瘤细胞对化疗药敏感性的新用途。
背景技术
目前，化疗是恶性肿瘤治疗的主要手段，而肿瘤的耐药性是化疗失败的重要原因之一，这种耐药性既包括肿瘤经过化疗产生的获得性耐药，也包括肿瘤细胞内在的耐药性。肿瘤耐药性的机制非常复杂，近年的研究表明，肿瘤组织和肿瘤细胞中Nrf2信号途径高表达，Nrf2信号通路主要功能是介导细胞解毒和自身保护。因此，Nrf2的高表达介导了Nrf2靶基因包括细胞解毒酶NQO1、HO-1和GCS，多药耐药蛋白Mrp1和Mrp2以及还原性物质GSH的高表达，使肿瘤组织或细胞可以通过解毒酶或还原性物质将化疗药转化成毒性较低形式，或是通过膜蛋白Mrp1和Mrp2增加化疗药的泵出，两方面的作用有助于肿瘤细胞逃过化疗药的杀伤，导致化疗失败。有研究表明，通过基因手段SiRNA或RNAi降低Nrf2的表达，可以增加肿瘤细胞对于多种化疗药的敏感性，因此，寻找具有Nrf2途径抑制作用的化合物与化疗药联用将提供一种肿瘤治疗的新策略。
鸦胆苦醇是来自鸦胆子的苦木素类化合物，分子量为：520，分子式为：C26H33O11，结构式如下：
其单独应用抗肿瘤已有文献报道，可用于诱导白血病细胞分化，治疗白血病。然而，尚未见报道鸦胆苦醇通过抑制Nrf2途径增强多种化疗药的疗效。
发明内容
针对上述现有技术，本发明提供了一种增强化疗药疗效的新方法，即鸦胆苦醇作为化疗药增效剂的新用途。
本发明是通过以下技术方案实现的：
本发明发现，鸦胆苦醇可以抑制Nrf2在细胞中的表达，而由于肿瘤组织和细胞中Nrf2处于高表达水平，而Nrf2介导的是化疗药的解毒和泵出，因此，鸦胆苦醇在多种肿瘤细胞中对多种化疗药的疗效有增加作用。
鸦胆苦醇作为化疗药增效剂的应用，应用时，与化疗药联合使用。
所述化疗药为顺铂、卡铂、奥沙利铂、5-氟脲嘧啶、紫杉醇、阿霉素或依托泊苷。
本发明的鸦胆苦醇可制成一切药学可接受口服和非口服制剂形式。
本发明还提供了一种治疗肿瘤的化疗联合用药物，包括鸦胆苦醇和化疗药。
所述化疗药为顺铂、卡铂、奥沙利铂、5-氟脲嘧啶、紫杉醇、阿霉素或依托泊苷。
所述肿瘤为肺癌、子宫内膜癌、子宫颈癌、乳腺癌、肠癌或移植瘤。
本发明的鸦胆苦醇在制备化疗增效剂的应用中的有益效果如下：
(1)鸦胆苦醇作用于Nrf2途径，可以增加多种化疗药如铂类化疗药、5-FU、依托泊苷、阿霉素、紫杉醇等多种化疗药对于肿瘤细胞的杀伤作用，肿瘤细胞的种类包括肺癌、子宫内膜癌、子宫颈癌、乳腺癌、肠癌等。
(2)鸦胆苦醇可以增加低剂量顺铂对于裸鼠移植瘤的生长抑制，具有临床应用前景。
(3)鸦胆苦醇与顺铂联用可以增加非小细胞肺癌细胞株中顺铂含量。
(4)鸦胆苦醇与化疗药联用在细胞水平及小鼠试验工作浓度均未见毒性。
附图说明
图1为鸦胆苦醇抑制Nrf2在非小细胞肺癌A549、子宫颈癌Hela、子宫内膜癌Ishikawa和Spec-2、乳腺癌MDA-MB-231细胞株中的表达示意图。
图2为鸦胆苦醇增加顺铂、卡铂、奥沙利铂、紫杉醇、5-FU和依托泊苷对于A549细胞的作用示意图，其中，A：鸦胆苦醇40nM，顺铂6uM；B：鸦胆苦醇40nM，顺铂18uM；C：鸦胆苦醇40nM，卡铂80uM；D：鸦胆苦醇40nM，卡铂160uM；E：鸦胆苦醇40nM，奥沙利铂10uM；F：鸦胆苦醇40nM，紫杉醇100nM；G：鸦胆苦醇40nM，紫杉醇200nM；H：鸦胆苦醇40nM，5-FU 50uM；I：鸦胆苦醇40nM，紫杉醇5-FU 200uM；J：鸦胆苦醇40nM，依托泊苷28uM；；K：鸦胆苦醇40nM，依托泊苷58uM。
图3为鸦胆苦醇增加顺铂、卡铂对于Hela细胞的作用示意图，其中，A：鸦胆苦醇40nM，顺铂6uM；B：鸦胆苦醇40nM，顺铂18uM；C：鸦胆苦醇40nM，卡铂80uM；D：鸦胆苦醇40nM，卡铂160uM。
图4为鸦胆苦醇增加顺铂、卡铂、阿霉素对于MDA-MB-231细胞的作用示意图，其中，A：鸦胆苦醇40nM，顺铂6uM；B：鸦胆苦醇40nM，顺铂18uM；C：鸦胆苦醇40nM，卡铂80uM；D：鸦胆苦醇40nM，卡铂160uM；E：鸦胆苦醇40nM，阿霉素0.3uM。
图5为鸦胆苦醇增加顺铂对于裸鼠移植瘤的作用示意图。
图6为鸦胆苦醇增加A549细胞胞内顺铂含量示意图。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明做进一步说明。
实施例1：非小细胞肺癌A549、子宫颈癌Hela、子宫内膜癌Ishikawa和Spec-2、乳腺癌MDA-MB-231细胞株中Nrf2蛋白表达的测定
实验材料：非小细胞肺癌A549、子宫颈癌Hela、子宫内膜癌Ishikawa和Spec-2、乳腺癌MDA-MB-231细胞株购自美国ATCC；鸦胆苦醇分离自鸦胆子，NMR和MS确定结构；Nrf2和GAPDH抗体购自Santa Cruz公司；顺铂、卡铂、依托泊苷、5-FU和紫杉醇购自Sigma公司。
实验方法：
(1)细胞处理：细胞以1×106个细胞每孔的密度接种于6孔板，加鸦胆苦醇DMSO溶液处理4小时。
(2)细胞裂解：细胞处理完成后，以冰PBS洗两次出去残留药物，加入SDS细胞裂解液100μl/孔，细胞刮刀收集细胞裂解液，煮沸3分钟，超声。
(3)Western blot：采用聚丙烯酰胺凝胶电泳，转膜至硝酸纤维素薄膜，5％脱脂牛奶封闭1小时，1∶1000加入一抗室温孵育2小时，洗3次，每次20分钟，加二抗1∶5000室温孵育2小时，洗3次，每次20分钟，化学发光检测蛋白条带。
3、实验结果：鸦胆苦醇对于所述细胞株Nrf2水平均呈剂量依赖性抑制，参见图1。
实施例2：鸦胆苦醇增加顺铂、卡铂、5-FU、依托泊苷和紫杉醇对于A549细胞的作用
实验材料：细胞株、药品、培养液来源同实施例1。
仪器：罗氏公司Xcelligence细胞实时检测系统。
实验方法：细胞以每孔8000个的密度接种于Xcelligence专用16孔板，待细胞贴壁生长16-24小时后，加鸦胆苦醇预处理4小时，然后加入化疗药共同培养，设定每30分钟记录细胞生长指数，记录72小时。
实验结果：鸦胆苦醇单独应用对于细胞呈现暂时性抑制，随着处理时间延长，鸦胆苦醇处理组细胞逐渐恢复生长，而联合用药组细胞生长指数显著小于化疗药单用组，说明鸦胆苦醇与化疗药协同作用，参见图2。
实施例3：鸦胆苦醇可以增加顺铂、卡铂对于Hela细胞的作用
实验材料和实验方法同实施例2。
实验结果：鸦胆苦醇在Hela细胞中表现出与化疗药的协同作用，参见图3。
实施例4：鸦胆苦醇可以增加顺铂、卡铂和阿霉素对于MDA-MB-231细胞的作用
实验材料和实验方法同实施例2。
实验结果：鸦胆苦醇在MDA-MB-231细胞中表现出与化疗药的协同作用，参见图4。
实施例5：鸦胆苦醇可以增加顺铂对于裸鼠移植瘤的作用
实验材料：药品来源同实施例1，裸鼠来自美国Harlan公司，均为雄性，4-6周龄。
实验方法：裸鼠随机分为4个实验组，分别为对照组、鸦胆苦醇组、顺铂组和鸦胆苦醇顺铂联用组，每组10只，皮下接种A549细胞株，1×107个细胞每只，每周两次测定瘤体体积，记录，待肿瘤长至80mm3时，对照组给予DMSO，鸦胆苦醇组给予2mg/kg，顺铂给予2mg/kg，联合用药组给予鸦胆苦醇和顺铂各2mg/kg，每两天给药一次，共给药5次，停止给药后1周，再次给药5次，方式同第一周期，停止给药，继续测量肿瘤至实验结束。
实验结果：联合用药组肿瘤生长显著较其它3组慢，结束试验后，取出肿瘤，联用组肿瘤重量小于其它3组，参见图5。
实施例6：鸦胆苦醇可以增加A549细胞胞内顺铂含量
实验材料同实施例1。
实验方法：细胞接种于D-150培养皿，分成3组，空白对照组、顺铂组和联合组，每组3盘，待细胞长至覆盖率约90％时联合组加入鸦胆苦醇预处理4小时，PBS洗去残留药物，顺铂组和联合组加入顺铂处理2小时，PBS清洗两次，胰蛋白酶消化，收集细胞，除去培养液，得细胞。硝酸消化，原子吸收法测定铂元素含量，换算为顺铂含量。
实验结果：联合用药组细胞内顺铂含量高于顺铂单用组1.6倍。
Claims (6)
1.鸦胆苦醇作为化疗药增效剂的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：应用时，与化疗药联合使用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述化疗药为顺铂、卡铂、奥沙利铂、5-氟脲嘧啶、紫杉醇、阿霉素或依托泊苷。
4.一种治疗肿瘤的化疗联合用药物，其特征在于：包括鸦胆苦醇和化疗药。
5.根据权利要求4所述的治疗肿瘤的化疗联合用药物，其特征在于：所述化疗药为顺铂、卡铂、奥沙利铂、5-氟脲嘧啶、紫杉醇、阿霉素或依托泊苷。
6.根据权利要求4所述的治疗肿瘤的化疗联合用药物，其特征在于：所述肿瘤为肺癌、子宫内膜癌、子宫颈癌、乳腺癌、肠癌或移植瘤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201010589025 CN102106851B (zh) | 2010-12-15 | 2010-12-15 | 鸦胆苦醇作为化疗药增效剂的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201010589025 CN102106851B (zh) | 2010-12-15 | 2010-12-15 | 鸦胆苦醇作为化疗药增效剂的应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102106851A true CN102106851A (zh) | 2011-06-29 |
| CN102106851B CN102106851B (zh) | 2012-12-05 |
Family
ID=44171207
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN 201010589025 Expired - Fee Related CN102106851B (zh) | 2010-12-15 | 2010-12-15 | 鸦胆苦醇作为化疗药增效剂的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102106851B (zh) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106551926A (zh) * | 2015-09-30 | 2017-04-05 | 南通大学 | 鸦胆子苦醇在制备抗肿瘤血管形成药物中的应用 |
| KR101859641B1 (ko) * | 2016-12-30 | 2018-05-18 | 울산대학교 산학협력단 | 아르테미신 유도체 및 Nrf2 억제제를 포함하는 항암용 조성물 |
| CN110935018A (zh) * | 2019-12-23 | 2020-03-31 | 新乡医学院 | 治疗乳腺癌的药物或组合物 |
| CN111214479A (zh) * | 2020-03-19 | 2020-06-02 | 陕西科技大学 | 龙胆苦苷在逆转肝癌细胞HepG2多药耐药中的应用 |
| CN112587518A (zh) * | 2020-12-28 | 2021-04-02 | 温州医科大学附属第一医院 | 鸦胆子苦醇药物组合物及其用途 |
| CN112641775A (zh) * | 2020-12-28 | 2021-04-13 | 温州医科大学附属第一医院 | 鸦胆子苦醇及其类似物在垂体腺瘤治疗中的应用 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20030149096A1 (en) * | 2001-02-05 | 2003-08-07 | Pezzuto John M. | Cancer chemopreventative compounds and compositions and methods of treating cancers |
| CN101234113A (zh) * | 2007-02-01 | 2008-08-06 | 中国人民解放军第二军医大学 | 一种靶向于人磷脂酰乙醇胺结合蛋白4的抗肿瘤小分子化合物 |
-
2010
- 2010-12-15 CN CN 201010589025 patent/CN102106851B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20030149096A1 (en) * | 2001-02-05 | 2003-08-07 | Pezzuto John M. | Cancer chemopreventative compounds and compositions and methods of treating cancers |
| CN101234113A (zh) * | 2007-02-01 | 2008-08-06 | 中国人民解放军第二军医大学 | 一种靶向于人磷脂酰乙醇胺结合蛋白4的抗肿瘤小分子化合物 |
Non-Patent Citations (7)
| Title |
|---|
| 《Biochimica et Biophysica Acta》 19811231 WALKER WILLINGHAM,Jr.et al. MECHANISM OF EUKARYOTIC PROTEIN SYNTHESIS INHIBITION BY BRUSATOL 第654卷, 2 * |
| 《Cancer Research》 20100701 Tao Jiang et al. High Levels of Nrf2 Determine Chemoresistance in Type Ⅱ Endometrial Cancer 第70卷, 第13期 2 * |
| 《上海中医药杂志》 20090331 金春晖等 鸦胆子乳剂、5-Fu局部注射联合开道散对人胃癌裸鼠移植瘤的抗肿瘤机制研究 第43卷, 第3期 2 * |
| 《中国肿瘤》 20071231 王红梅等 鸦胆子油乳剂联合顺铂治疗肺癌胸水70例 第16卷, 第12期 2 * |
| 《国际妇产科学杂志》 20100831 李仲慜等 Nrf2-Keap1-ARE信号通路与肿瘤耐药相关性 第37卷, 第4期 2 * |
| 《沈阳药科大学学报》 20060930 刘丽等 中药鸦胆子总苦木内酯提取物中鸦胆苦醇的含量测定 第23卷, 第9期 * |
| 《细胞生物学杂志》 20091231 辛爱等 Nrf2-ARE信号通路与肿瘤发生及耐药性的关系 第31卷, 第3期 2 * |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106551926A (zh) * | 2015-09-30 | 2017-04-05 | 南通大学 | 鸦胆子苦醇在制备抗肿瘤血管形成药物中的应用 |
| KR101859641B1 (ko) * | 2016-12-30 | 2018-05-18 | 울산대학교 산학협력단 | 아르테미신 유도체 및 Nrf2 억제제를 포함하는 항암용 조성물 |
| CN110935018A (zh) * | 2019-12-23 | 2020-03-31 | 新乡医学院 | 治疗乳腺癌的药物或组合物 |
| CN111214479A (zh) * | 2020-03-19 | 2020-06-02 | 陕西科技大学 | 龙胆苦苷在逆转肝癌细胞HepG2多药耐药中的应用 |
| CN112587518A (zh) * | 2020-12-28 | 2021-04-02 | 温州医科大学附属第一医院 | 鸦胆子苦醇药物组合物及其用途 |
| CN112641775A (zh) * | 2020-12-28 | 2021-04-13 | 温州医科大学附属第一医院 | 鸦胆子苦醇及其类似物在垂体腺瘤治疗中的应用 |
| CN112587518B (zh) * | 2020-12-28 | 2021-11-05 | 温州医科大学附属第一医院 | 鸦胆子苦醇药物组合物及其用途 |
| CN112641775B (zh) * | 2020-12-28 | 2022-02-11 | 温州医科大学附属第一医院 | 鸦胆子苦醇及其类似物在垂体腺瘤治疗中的应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN102106851B (zh) | 2012-12-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR102490334B1 (ko) | 암 치료용 아젤니디핀 약학 조성물의 새로운 적응증 | |
| Liao et al. | Dihydroartemisinin inhibits cell proliferation via AKT/GSK3β/cyclinD1 pathway and induces apoptosis in A549 lung cancer cells | |
| CN102106851B (zh) | 鸦胆苦醇作为化疗药增效剂的应用 | |
| Fan et al. | Hexokinase 2 dimerization and interaction with voltage‐dependent anion channel promoted resistance to cell apoptosis induced by gemcitabine in pancreatic cancer | |
| Wang et al. | Oridonin inhibits metastasis of human ovarian cancer cells by suppressing the mTOR pathway | |
| Xu et al. | LncRNA UCA1 induces acquired resistance to gefitinib by epigenetically silencing CDKN1A expression in non-small-cell lung cancer | |
| Uesato et al. | Synergistic antitumor effect of a combination of paclitaxel and carboplatin with nobiletin from Citrus depressa on non-small-cell lung cancer cell lines | |
| Li et al. | Valeriana jatamansi constituent IVHD-valtrate as a novel therapeutic agent to human ovarian cancer: in vitro and in vivo activities and mechanisms | |
| CN104398526B (zh) | 雷公藤甲素和雷公藤红素在制备抗肿瘤药物中的应用 | |
| Lin et al. | Antitumor effects and biological mechanism of action of the aqueous extract of the Camptotheca acuminata fruit in human endometrial Carcinoma cells | |
| CN101332301A (zh) | 一种抗肿瘤组合物及其应用 | |
| Zhang et al. | Solasonine inhibits gastric cancer proliferation and enhances chemosensitivity through microRNA-486-5p | |
| Li et al. | Silencing of ATF2 inhibits growth of pancreatic cancer cells and enhances sensitivity to chemotherapy | |
| Cen et al. | Honokiol induces apoptosis of lung squamous cell carcinoma by targeting FGF2‐FGFR1 autocrine loop | |
| Lee et al. | A phase I multicenter study of antroquinonol in patients with metastatic non-small-cell lung cancer who have received at least two prior systemic treatment regimens, including one platinum-based chemotherapy regimen | |
| Nipin et al. | Methylsulfonylmethane induces G1 arrest and mitochondrial apoptosis in YD-38 gingival cancer cells | |
| Wang et al. | CDK4/6 nano-PROTAC enhances mitochondria-dependent photodynamic therapy and anti-tumor immunity | |
| Li et al. | The cytotoxic and mechanistic effects of aaptamine on hepatocellular carcinoma | |
| Deng et al. | Yangzheng Sanjie decoction regulates proliferation and apoptosis of gastric cancer cells by enhancing let-7a expression | |
| Kudoh et al. | Dual inhibition of phosphatidylinositol 3′-kinase and mammalian target of rapamycin using NVP-BEZ235 as a novel therapeutic approach for mucinous adenocarcinoma of the ovary | |
| Wang et al. | Combination of irinotecan silicasome nanoparticles with radiation therapy sensitizes immunotherapy by modulating the activation of the cGAS/STING pathway for colorectal cancer | |
| TWI797426B (zh) | 西奧羅尼用於小細胞肺癌的治療 | |
| Qin et al. | Synergistic antitumor activity of reversine combined with aspirin in cervical carcinoma in vitro and in vivo | |
| Zuo et al. | Caspase-8 knockdown suppresses apoptosis, while induces autophagy and chemo-sensitivity in non-small cell lung cancer cells | |
| CN109481431B (zh) | 一种卡巴他赛和榄香烯分子配伍药物组合物及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20121205 Termination date: 20141215 |
|
| EXPY | Termination of patent right or utility model |