CN102944621A - 一种环境样品中三乙膦酸铝残留量的测定方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种环境样品中三乙膦酸铝残留量的测定方法：(1)将土壤样品用10％-50％甲醇水溶液提取，C₁₈固相萃取柱净化并用超纯水稀释后，采用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)系统分离检测；(2)环境水质样品用C₁₈固相萃取柱净化并用超纯水稀释后，采用HPLC-MS/MS系统分离检测。所采用的色谱柱为以碳十八烷基键合硅胶为填充剂的色谱柱，流动相为乙腈-水，梯度洗脱，电喷雾、负离子扫描模式分离与检测三乙膦酸铝。本发明经过系统的比较研究，建立了测定环境样品中三乙膦酸铝残留量的测定方法，具有分离效果好，测定准确、灵敏度高、专属性强，分析简便快速等技术特点。

Description

一种环境样品中三乙膦酸铝残留量的测定方法

技术领域

本发明涉及一种农药残留分析方法，具体涉及一种采用高效液相色谱-串联质谱法测定环境样品中三乙膦酸铝的残留量。

背景技术

三乙膦酸铝，英文名Phosethyl-Al，分子式C₆H₁₈AlO₉P₃，分子量354.10。三乙膦酸铝为无色粉末，熔点大于300℃；蒸气压＜0.013mpa(25℃)；在水中的溶解度120g/L(20℃)。一般贮存条件下稳定，遇强酸强碱水解，能被氧化剂氧化，＞200℃分解。

加拿大规定三乙膦酸铝在蔓菁根上的最大残留限量为15mg/kg，在洋葱头上为10mg/此，在柑橘类上为9mg/kg；欧盟规定三乙膦酸铝在莴苣上的最大残留限量为2mg/kg。

国内外三乙膦酸铝在蔬菜、水果中的残留分析方法有气相色谱法和液相色谱-串联质谱法。

日本厚生劳动省公开了用重氮甲烷为衍生试剂，采用气相色谱法，用FPD检测三乙膦酸铝的残留量。

J.AOAC International 86(4)，2002，832-838公开了用液相色谱电喷雾串联质谱法测定莴苣中三乙膦酸铝的残留量，用水提取莴苣中的三乙膦酸铝，加入四丁基乙酸铵作为离子对试剂，促进三乙膦酸铝的电离。

《农药2009，48(10)》公开了用三甲基硅重氮甲烷为衍生试剂，采用气相色谱法，用FPD检测三乙膦酸铝的残留量。

《中国烟草科学2010，31(2)》公开了通过三乙膦酸铝碱解生成乙醇，用FID检测乙醇的含量间接测定三乙膦酸铝的残留量。

《农产品加工2012，2》公开了用50％乙腈提取菠菜中的三乙膦酸铝，经硅藻土和C₁₈固相萃取柱净化，用高效液相色谱串联质谱检测。

但目前还没有对三乙膦酸铝在土壤和环境水质中残留量的研究。为寻求对于土壤和水中三乙膦酸铝残留量的检测方法，本发明人经过系统的对比研究，提供了一种测定土壤和水中三乙膦酸铝残留的高效液相色谱-串联质谱法。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于，提供一种简便快速的环境样品中三乙膦酸铝残留量的高效液相色谱-串联质谱测定方法。

本发明为实现上述目的，所采用的技术方案是：

本发明的一种环境样品中三乙膦酸铝残留量的测定方法，包括以下步骤：

1.环境水质样品前处理

预先用5-15mL甲醇，5-15mL水活化C₁₈固相萃取柱，将5-10mL水样移入固相萃取柱中，控制流速为2滴/秒，弃去前1mL流出液，收集剩余流出液，过0.22μm水系滤膜，用超纯水稀释后，供高效液相色谱-串联质谱测定。

2.土壤样品前处理

称取3-15g土壤至50mL离心管中，加入6-30mL10％-50％甲醇，涡旋混匀后，超声提取30min，以3000-8000r/min离心3-10min。取5-10mL提取液移入C₁₈固相萃取柱(预先用5-15mL甲醇，5-15mL水活化)中，控制流速为2滴/秒，弃去前1mL流出液，收集剩余流出液，过0.22μm有机系滤膜，用超纯水稀释后供高效液相色谱-串联质谱测定。

3.色谱测定

称取三乙膦酸铝标准品，用超纯水溶解，加入2mL甲醇，并用超纯水定容后作为储备液，然后进一步用超纯水稀释为具有浓度梯度的标准使用液；

利用液相色谱仪对试样进行检测，外标法定量；

作为优选，高效液相色谱-串联质谱分析条件为：

a)色谱柱：以碳十八烷基键合硅胶为填充剂；

b)流动相：乙腈和水作为流动相，梯度洗脱，洗脱程序见表1；

表1流动相洗脱程序

时间(min)	乙腈(％，V/V)	超纯水(％，V/V)
			0	10	90
0.5	50	50
			2	10	90
3	10	90

c)柱温：40℃；

d)流速：0.2mL/min；

e)进样量：10μL；

质谱条件：

离子源：ESI；                    扫描方式：负离子扫描；

监测方式：MRM多反应监测；        电喷雾电压：3kV；

离子源温度：110℃；              去溶剂温度：400℃离子对、锥孔电压、碰撞能量见表2。

表2离子对、锥孔电压、碰撞能量

由于采用上述技术方案，本发明的有益效果在于：

1、建立了环境样品中三乙膦酸铝残留量的高效液相色谱-串联质谱测定方法，比已有的气相色谱法安全、快速，检出限低，利于推广应用。

2、对土壤样品，直接用水提取，易形成泥浆，离心后液体浑浊。本发明采用10％-50％甲醇震荡提取，离心分层，提取效率高，利用C₁₈固相萃取柱净化并用超纯水稀释后，提取液中杂质溶出少且基质效应明显减少，具有较高的回收率。如甲醇含量过高，溶出杂质较多，C₁₈固相萃取柱吸附杂质效果不好。

3、本方法具有简单、快速、准确、高效等优点，三乙膦酸铝检测低限为0.02mg/kg(mg/L)，平均回收率为110.1-127.6％，变异系数(CV％)为2.3-5.5％。方法的检测低限满足国内外相关法规的要求。

4、本发明可应用于环境样品中三乙膦酸铝残留量的检测，对促进我国农药残留的检测，保障环境安全、人类身体健康都具有十分重要的意义。

具体实施方式：

下面结合具体实施例对本发明作进一步详细说明，但本发明并不局限于具体实施例。

实施例1水中三乙膦酸铝残留量的测定

1、样品前处理：预先用10mL甲醇，10mL水活化C₁₈固相萃取柱，将5mL水样移入固相萃取柱中，控制流速为2滴/秒，弃去前1mL流出液，收集剩余流出液，过0.22μm水系滤膜，取200μL样液，加入800μL超纯水稀释后，供高效液相色谱-串联质谱测定。

2、高效液相色谱-串联质谱测定

按照液相色谱-串联质谱条件测定样品和标准工作溶液，用标准曲线对样品溶液浓度进行校正，外标法定量。

3、线性关系

将标准溶液用空白水基质逐级稀释，制备为0.01、0.02、0.05、0.1和0.2μg/mL五个不同浓度的系列标准溶液，按浓度从低到高顺序，依照上述色谱条件测定。每一浓度测定3次，按其标准溶液浓度C(μg/mL)与对应平均峰面积A作标准曲线图，计算回归方程为A＝0.5803C-1.9048，相关系数为0.9917。

4、回收率和精密度

采用阴性水样品进行加标测定其准确度，加标浓度分别为0.4μg/mL和1μg/mL，每个浓度平行测定三次，平均回收率分别为114.7％和117.0％，相对标准偏差分别为3.5％和3.2％。

5、检测低限

以阴性地表水样品进行添加试验，当取样量为5.0mL时，以3倍信噪比求得本方法中三乙膦酸铝的检出限(LOD)。三乙膦酸铝在水样中的检测低限为0.02mg/L。

实施例2土壤中三乙膦酸铝残留量的测定

1、样品提取：称取已制备好的土壤样品5.0g于50mL具盖离心管中，加入10mL10％的甲醇溶液，超声提取30min后，8000rpm离心5min，用移液管移取5mL上清液至C₁₈固相萃取柱(预先用5-15mL甲醇，5-15mL水活化)中，控制流速为2滴/秒，弃去前1mL流出液，收集剩余流出液，过0.22μm有机系滤膜，用超纯水稀释后供高效液相色谱-串联质谱测定。

2、高效液相色谱-串联质谱测定：同实施例1。

3、回收率和精密度

采用阴性土壤样品进行加标测定其准确度，加标浓度分别为0.4mg/kg和1mg/kg，每个浓度平行测定三次，平均回收率分别为120.6％和122.5％，相对标准偏差分别为5.5％和2.3％。

4、检测低限

以阴性土壤样品进行添加试验，以3倍信噪比求得本方法中三乙膦酸铝的检出限(LOD)。三乙膦酸铝在土壤样品中的检测低限为0.02mg/kg。

上述实施例仅供说明本发明之用，而并非是对本发明的限制，有关技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明范围的情况下，还可以作出各种变化和变型，因此所有等同的技术方案也应属于本发明的范畴，本发明的专利保护范围应由各权利要求限定。

Claims (4)

1.一种环境样品中三乙膦酸铝残留量的测定方法，其特征在于：所述测定方法包括如下的步骤：

(1)土壤样品经提取液超声提取，提取液经固相萃取柱净化并用超纯水稀释后，采用高效液相色谱-串联质谱测定；

(2)环境水质样品经固相萃取柱净化并用超纯水稀释后，采用高效液相色谱-串联质谱测定。

2.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤(1)中所述提取溶剂为体积比为10％-50％的甲醇水溶液。

3.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤(1)和(2)中所述固相萃取柱为C₁₈固相萃取柱。

4.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述的环境样品为土壤和环境水质。