CN102940701A - 一种梨多酚的提取方法 - Google Patents
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Abstract
一种梨多酚的提取方法，其步骤如下：将梨果肉切成1cm3的小块，用液氮研磨成粉末；将所述的梨肉粉末加入到乙醇水溶液中，经微波处理；再经水浴回流浸提，分别在不同的温度下浸提1次，抽滤后离心20min，离心功率为4000r/min，过滤，然后真空旋转蒸发回收乙醇，得多酚粗提液；将所述多酚粗提液配制为4mg/mL的溶液，流过大孔树脂进行吸附，水浴振荡24h，水浴温度为25℃，振荡功率为120r/min；将吸附后的树脂过滤，蒸馏水洗两次后滤干，用乙醇进行动态洗脱，乙醇浓度为40%，洗脱液浓缩后冷冻干燥，得到多酚提取物。该方法可以有效缩短提取时间，提高提取率，提高纯度。
Description
技术领域
本发明涉及一种从梨肉中提取梨多酚的方法，属植物提取领域。
技术背景
植物多酚是广泛存在于植物体内的重要次生代谢产物，具有抗氧化、抗肿瘤、保护肝脏等多种生理功能。植物多酚在粮食、蔬菜中含量较少，但在水果及谷物皮层中含量较高。梨是我国第三大水果，含有多种如熊果苷、绿原酸、香草醛等多酚类物质，具有一定的抗氧化保健功能。研究表明，在成熟果实中这些多酚物质的相对浓度不高，但是梨幼果中含量十分丰富。在生产中，由于生理落果或疏花疏果等栽培管理的需要，大量幼果被遗弃，造成了多酚类生物资源的浪费，本发明提供了一种从梨幼果中高效提取多酚类物质的方法。
现有技术中，植物多酚的提取方法主要有溶液浸提法、超声提取法、微波法等，但是单一的提取方法产率低。本发明先采用微波提取工艺，破坏梨肉细胞，促使其中的多酚物质溶出并向外扩散，再采用乙醇浸提，特别是根据浸提液浓度的变化，依次调整不同的浸提温度，可以有效缩短提取时间，提高提取率，提高纯度。
发明内容
本发明的目的是提供一种提取梨多酚的方法，该方法可以有效缩短提取时间，提高提取率，提高纯度。
为实现以上目的，本发明的一种梨多酚的提取方法，步骤如下：
(1) 将梨果肉切成1cm3的小块，用液氮研磨成粉末；
(2) 将所述的梨肉粉末加入到乙醇水溶液中，经微波处理；
(3) 再经水浴回流浸提，分别在不同的温度下浸提1次，抽滤后离心20min，离心功率为4000r/min，过滤，然后真空旋转蒸发回收乙醇，得多酚粗提液；
(4) 将所述多酚粗提液配制为4mg/mL的溶液，流过大孔树脂进行吸附，水浴振荡24h，水浴温度为25℃，振荡功率为120r/min；
(5) 将吸附后的树脂过滤，蒸馏水洗两次后滤干，用乙醇进行动态洗脱，乙醇浓度为40%，洗脱液浓缩后冷冻干燥，得到多酚提取物。
优选的，步骤(2)中所述的乙醇浓度为30%-40%。
优选的，步骤(2)中所述的梨肉粉末与乙醇的质量比为1:20-1:30。
优选的，步骤(2)中所述的微波功率为250-300W，微波作用时间为20-25s；
优选的，步骤(3)中所述的不同的温度分别为55℃、65℃、70℃，每次的浸提时间为1.5-2h。
优选的，步骤(4)中所述的大孔树脂类型为：D101、AB-8或NKA-II，更优选为D101。
优选的，步骤(4)中所述的多酚粗提液流过大孔树脂的流速为3-4BV/h。
优选的，步骤(4)中所述的吸附时间为2-3h。
优选的，步骤(5)中所述的洗脱速率为2-3BV/h。
本发明的从石榴皮中提取梨多酚的方法，是经多次实验后得到的优选的参数，每个步骤均可有效的提高多酚提取物的提取率。
水溶性多酚主要分布在细胞的液泡中，非水溶性的多酚类合物存在于细胞壁上，且多与蛋白质或者多糖类化合物以氢键形式结合，高浓度的乙醇引起蛋白质变性难以将水溶性多酚浸提出来，阻止了多酚类化合物的传质过程，导致多酚含量降低，因此步骤(2)中乙醇浓度优选为30%-40%。
微波功率为250-300W时，对梨肉细胞的破坏力最佳，促使梨肉中多酚物质溶出并向外扩散，如果继续加大功率，会使析出的多酚变性，或与其他组分发生化学反应，导致提取率降低。
经微波处理后水浴回流浸提，根据浸提液浓度的变化，依次调整不同的浸提温度，优选为55℃、65℃、70℃，这样可以缩短每次浸提的时间，达到更好的浸提效果。
经多次实验验证，类型为D101、AB-8或NKA-II的大孔树脂对梨多酚的静态吸附率和解析率均较高，可达到80%以上，更为优选的D101型大孔树脂静态吸附率和解析率分别为87.2%、85.7%。
实施例
实施例1：
以如下步骤提取梨多酚：
(1) 将梨果肉切成1cm3的小块，用液氮研磨成粉末；
(2) 将所述的梨肉粉末加入到浓度为30%的乙醇水溶液中，梨肉粉末与乙醇的质量比为1:20，经微波处理，微波功率为300W，微波作用时间为20s；
(3) 再经水浴回流浸提，分别在55℃、65℃、70℃下浸提1次，每次2h，抽滤后离心20min，离心功率为4000r/min，过滤，然后真空旋转蒸发回收乙醇，得多酚粗提液；
此时测量橄榄叶多酚提取率为18.3%。
(4) 将所述多酚粗提液配制为4mg/mL的溶液，以3BV/h的流速流过D101型大孔树脂，吸附2h，水浴振荡24h，振荡功率为120r/min；
(5) 将吸附后的树脂过滤，蒸馏水洗两次后滤干，用乙醇进行动态洗脱，洗脱速率为2BV/h，乙醇浓度为40%，洗脱液浓缩后冷冻干燥，得到多酚提取物。
经以上步骤得到梨多酚的纯度为77.8%。
实施例2：
以如下步骤提取梨多酚：
(1) 将梨果肉切成1cm3的小块，用液氮研磨成粉末；
(2) 将所述的梨肉粉末加入到浓度为35%的乙醇水溶液中，梨肉粉末与乙醇的质量比为1:25，经微波处理，微波功率为250W，微波作用时间为25s；
(3) 再经水浴回流浸提，分别在55℃、65℃、70℃下浸提1次，每次1.5h，抽滤后离心20min，离心功率为4000r/min，过滤，然后真空旋转蒸发回收乙醇，得多酚粗提液；
此时测量橄榄叶多酚提取率为18.1%。
(4) 将所述多酚粗提液配制为4mg/mL的溶液，以4BV/h的流速流过D101型大孔树脂，吸附3h，水浴振荡24h，振荡功率为120r/min；
(5) 将吸附后的树脂过滤，蒸馏水洗两次后滤干，用乙醇进行动态洗脱，洗脱速率为3BV/h，乙醇浓度为40%，洗脱液浓缩后冷冻干燥，得到多酚提取物。
经以上步骤得到梨多酚的纯度为78.4%。
实施例3：
以如下步骤提取梨多酚：
(1) 将梨果肉切成1cm3的小块，用液氮研磨成粉末；
(2) 将所述的梨肉粉末加入到浓度为40%的乙醇水溶液中，梨肉粉末与乙醇的质量比为1:30，经微波处理，微波功率为250W，微波作用时间为25s；
(3) 再经水浴回流浸提，分别在55℃、65℃、70℃下浸提1次，每次1.5h，抽滤后离心20min，离心功率为4000r/min，过滤，然后真空旋转蒸发回收乙醇，得多酚粗提液；
此时测量橄榄叶多酚提取率为17.9%。
(4) 将所述多酚粗提液配制为4mg/mL的溶液，以4BV/h的流速流过AB-8型大孔树脂，吸附2.5h，水浴振荡24h，振荡功率为120r/min；
(5) 将吸附后的树脂过滤，蒸馏水洗两次后滤干，用乙醇进行动态洗脱，洗脱速率为2.5BV/h，乙醇浓度为40%，洗脱液浓缩后冷冻干燥，得到多酚提取物。
经以上步骤得到梨多酚的纯度为74.3%。
实施例4：
以如下步骤提取梨多酚：
(1) 将梨果肉切成1cm3的小块，用液氮研磨成粉末；
(2) 将所述的梨肉粉末加入到浓度为40%的乙醇水溶液中，梨肉粉末与乙醇的质量比为1:30，经微波处理，微波功率为250W，微波作用时间为25s；
(3) 再经水浴回流浸提，分别在55℃、65℃、70℃下浸提1次，每次1.5h，抽滤后离心20min，离心功率为4000r/min，过滤，然后真空旋转蒸发回收乙醇，得多酚粗提液；
此时测量橄榄叶多酚提取率为17.9%。
(4) 将所述多酚粗提液配制为4mg/mL的溶液，以3.5BV/h的流速流过NKA-II型大孔树脂，吸附3h，水浴振荡24h，振荡功率为120r/min；
(5) 将吸附后的树脂过滤，蒸馏水洗两次后滤干，用乙醇进行动态洗脱，洗脱速率为3BV/h，乙醇浓度为40%，洗脱液浓缩后冷冻干燥，得到多酚提取物。
经以上步骤得到梨多酚的纯度为74.9%。
Claims (10)
1.一种梨多酚的提取方法，其特征在于：步骤如下：
将梨果肉切成1cm3的小块，用液氮研磨成粉末；
将所述的梨肉粉末加入到乙醇水溶液中，经微波处理；
再经水浴回流浸提，分别在不同的温度下浸提1次，抽滤后离心20min，离心功率为4000r/min，过滤，然后真空旋转蒸发回收乙醇，得多酚粗提液；
将所述多酚粗提液配制为4mg/mL的溶液，流过大孔树脂进行吸附，水浴振荡24h，水浴温度为25℃，振荡功率为120r/min；
将吸附后的树脂过滤，蒸馏水洗两次后滤干，用乙醇进行动态洗脱，乙醇浓度为40%，洗脱液浓缩后冷冻干燥，得到多酚提取物。
2.如权利要求1所述的一种梨多酚的提取方法，其特征在于：步骤(2)中所述的乙醇浓度为30%-40%。
3.如权利要求1或2中所述的一种梨多酚的提取方法，其特征在于：步骤(2)中所述的梨肉粉末与乙醇的质量比为1:20-1:30。
4.如权利要求1所述的一种梨多酚的提取方法，其特征在于：步骤(2)中所述的微波功率为250-300W，微波作用时间为20-25s。
5.如权利要求1所述的一种梨多酚的提取方法，其特征在于：步骤(3)中所述的不同的温度分别为55℃、65℃、70℃，每次的浸提时间为1.5-2h。
6.如权利要求1所述的一种梨多酚的提取方法，其特征在于：步骤(4)中所述的大孔树脂类型为：D101、AB-8或NKA-II。
7.如权利要求6所述的一种梨多酚的提取方法，其特征在于：步骤(4)中所述的大孔树脂类型为：D101。
8.如权利要求1所述的一种梨多酚的提取方法，其特征在于：步骤(4)中所述的多酚粗提液流过大孔树脂的流速为3-4BV/h。
9.如权利要求1所述的一种梨多酚的提取方法，其特征在于：步骤(4)中所述的吸附时间为2-3h。
10.如权利要求1所述的一种梨多酚的提取方法，其特征在于：步骤(5)中所述的洗脱速率为2-3BV/h。
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