CN102924581B - 水稻抗白叶枯病相关蛋白及其编码基因与应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种水稻抗白叶枯病基因OsLRR编码的蛋白质，以及编码上述蛋白质的基因，属于植物基因工程技术领域；本发明还公开了含有上述基因的质粒、该种质粒的植物表达载体、相应的转基因植物细胞，以及对水稻抗白叶枯病进行改造的方法。本发明的水稻OsLRR蛋白的编码基因可以插入到植物表达的多克隆位点制备成重组表达载体，进一步构建转基因植物，研究发现，导入该基因的水稻在抗白叶枯病方面有明显提高。本发明基因的克隆有助于研究水稻抗白叶枯病的分子机制，对生产上培育具有抗白叶枯病的水稻品种，或是通过转基因的方法改良其他对白叶枯病敏感作物的抗性具有很大的应用价值。

Description

水稻抗白叶枯病相关蛋白及其编码基因与应用

技术领域

本发明涉及植物基因工程技术领域，具体涉及水稻OsLRR蛋白及其编码基因和应用。

背景技术

    水稻白叶枯病是由革兰氏阴性菌黄单孢菌侵染引起的细菌性维管束病害。病原菌侵害稻株后，造成叶片早期枯死，严重时使稻杆腐朽倒伏，对水稻生产带来很大的损失（Mew TW. Current status and future prospects of research on bacterial blight of rice. Ann Rev Phytopathol,1987,25:359-382）。现在白叶枯病的发生已遍及世界各水稻产区，成为世界水稻的主要病害之一。

水稻白叶枯病抗病基因发掘与鉴定是开展抗白叶枯病育种的重要基础。目前已先后鉴定了30多个水稻白叶枯病抗性基因，其中有7个基因已经被克隆，分别是Xa1、xa5、xa13、Xa21、Xa23、Xa26t、Xa27(苗丽丽等, 水稻抗白叶枯病新基因的初步定位.中国农业科学,2010,43(15): 3051-3058; 王涛等, 6个已克隆水稻白叶枯病抗性基因及其作用机理. 浙江农业科学, 2011, 23(6): 1282-1289)。研究表明，Xa1位于第4号染色体，编码序列为5406bp,其编码产物没有明显的跨膜结构，属于NBS-LRR类抗性基因,并可被病原菌诱导表达（Yoshimura et al,Expression of Xa1, a bacterial blight- resistance gene in rice, is induced by bacterial inoculation. Proc.Nati.Acad.Sci.USA,1998,95:1663-1668）；xa5基因位于第5号染色体，其导致的抗病性由隐性基因控制，研究发现xa5基因编码产物由105个氨基酸组成，是一个在39位氨基酸发生突变的转录因子ⅡA的小亚基（Iyer and McCouch,The rice bacterial blight resistance gene xa5 encodes a novel form of disease resistance. Molecular Plant Microbiology Interaction. 2004, 17: 1348-1354）；xa13基因是在水稻品种BJ1中鉴定到的一个抗白叶枯病基因，具有完全隐性的特征，Chu等（Chu et al, Targeting xa13, a recessive gene for bacterial blight resistance in rice. Theor Appl Genet, 2006,112: 455-461）将xa13定位在9.2kb的片段上，并用农杆菌介导的遗传转化方法和RNAi技术验证候选基因为xa13，序列分析表明，Xa13基因编码的产物是一个未知具体功能的细胞膜蛋白；Xa21基因编码一个包括1025个氨基酸的LRR-受体激酶，其基因产物是一个具有激酶活性的跨膜受体，并且该基因为组成型表达（Century et al, Short communication: developmental control of Xa21-mediated disease resistance in rice. Plant J, 1999,20: 231-236）；Xa26基因是在水稻品种明恢63中被发现，序列分析表明，Xa26基因编码区全长3309bp，基因产物为受体激酶，具有胞外LRR结构域、单一跨膜区和胞内蛋白激酶结构域（Sun et al, Xa26, a gene conferring resistance to Xanthomonas Oryzae pv. Oryzae in rice, encodes as an LRR receptor kinase-like protein. Plant J, 2004, 37: 517-527）；Xa27基因来源于野生稻，该基因编码一个包含113个氨基酸的未知功能蛋白（Gu et al,  R gene expression induced by a type-Ⅲeffector triggers disease resistance in rice. Nature, 2005, 435: 1122-1125）。

富亮氨酸重复序列（leucine-rich repeat, LRR）是首次在富亮氨酸α2糖蛋白中发现并被命名的。植物中含有多种富含亮氨酸重复结构的蛋白质，这些蛋白质在LRRs单位重复数目以及氨基酸序列上有所差异。植物LRR蛋白由于具有特异的LRRs结构，大多具有相似或相同的功能，目前研究的LRR蛋白大多参与植物应答逆境和防御相关的过程，与抗逆性反应、调节植物发育和介导植物信号转导相关。近年来，人们发现植物抗性基因 (resistance gene, R基因) 的编码蛋白中最重要的结构特征之一就是具有LRRs结构。目前克隆到的水稻抗白叶枯病基因中Xa1、Xa21和Xa26均为编码富含LRR蛋白的基因。有研究表明，烟草NtLRR1和NtLRR2基因参与了逆境胁迫下的信号转导，盐胁迫可诱导其表达 (Xu et al, Isolation and identification of two genes encoding leucine-rich repeat (LRR) proteins differentially responsive to pathogen attack and salt stress in tobacco. Plant Sci, 2009, 176: 38-45)；盐胁迫可诱导苜蓿 (Medicago truncatula L.) 基因( Salt-induced receptor-like kinase, Srlk)的大量表达，该基因也是编码LRR蛋白 (Merchanet al,Identification of regulatory pathways involved in the reacquisition of root growth after salt stress in Medicago truncatula. Plant J, 2007, 51(1): 1-17; de Lorenzo et al, A novel plant leucine-rich repeat receptor kinase regulates the response of Medicago truncatula roots to salt stress. Plant Cell, 2009, 21: 668-680)。因此，植物LRR蛋白可能通过LRRs结构参与蛋白质之间的相互作用，从而引起下游信号转导和相关基因表达调节植物对生物与非生物逆境的抗性。

发明内容：

本发明的目的在于针对现有技术中的不足，提供一种水稻OsLRR蛋白。

本发明的另一目的是提供上述水稻OsLRR蛋白编码的基因。

本发明的又一目的是提供上述水稻OsLRR蛋白编码的基因在制备转基因植物中的应用。

本发明通过以下技术方案实现上述目的：

水稻OsLRR蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示，或该序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且功能与SEQ ID NO:2所示序列相同的序列。

上述水稻OsLRR蛋白的编码基因。该编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。或在严格条件下可与SEQ ID NO:1杂交并且编码上述水稻OsLRR蛋白的DNA分子，所述的严格条件可为在6×SSC，0.5%SDS的溶液中，在65℃下杂交，然后用2×SSC，0.1% SDS和1×SSC，0.1% SDS各洗杂交膜一次。或者与SEQ ID NO:1的序列有90%以上的同源性（优选95%以上同源性），并且编码上述水稻OsLRR蛋白的DNA分子。

上述水稻OsLRR蛋白的编码基因的启动子，序列如SEQ ID NO:3所示；或严格条件下可与SEQ ID NO:3所示的DNA 分子杂交且具有启动子功能的DNA分子，上述的严格条件是：在6×SSC，0.5%SDS的溶液中，在65℃下杂交，然后用2×SSC，0.1% SDS和1×SSC，0.1% SDS各洗杂交膜一次。

一种表达载体，是由上述水稻OsLRR蛋白的编码基因插入到植物表达载体的多克隆位点构建而成。

此外，使用本发明的的基因构建植物表达载体时，还可以使用增强子，包括翻译增强子或者转录增强子，这些增强子区域可以是ATG起始密码子或是邻接区域起始密码子等，但必需与编码序列的阅读框相同，以保证整个序列的正确翻译。所述翻译控制信号和其实密码子的来源是广泛的，可以是天然的，也可以是合成的。翻译起始区域可以来自转录起始区域或结构区域。

为了便于对转基因植物细胞或植物进行鉴定及筛选，可对所用植物表达载体进行加工，如加入可在植物中表达可以产生颜色变化的酶或是发光化合物的基因（如GUS基因、荧光素酶基因等）、具有抗性的抗生素标记物（庆大霉素标记物、卡那霉素标记物等）或是抗化学试剂标记基因（如抗除秀剂基因）等。

以上所述任意一种表达载体，所述的植物表达载体为pCAMBIA3301 、pCAMBIA1300、pCAMBIA2301或pBI121，或其他衍生植物表达载体。

上述的水稻OsLRR蛋白或水稻OsLRR蛋白的编码基因，可用于提高植物抗白叶枯病能力。如，水稻OsLRR蛋白在制备提高植物抗白叶枯病药剂中的应用；或者，水稻OsLRR蛋白的编码基因在制备抗白叶枯病转基因植物中的应用。

携带有本发明的水稻OsLRR蛋白的编码基因的植物表达载体可以通过Ti质粒、Ri质粒、植物病毒载体、直接DNA转化、显微注射、电导、农杆菌介导等常规生物学方法转化到植物细胞或是组织中。被转化的宿主植物可以是水稻或其它作物。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

实验结果表明，转OsLRR基因植株表现对水稻白叶枯病的抗性明显增强，其蛋白质和编码基因对水稻抗白叶枯病的调控具有重要的实际意义，在实际应用中可以将OsLRR基因转入不同的水稻品种中以培育更加理想的水稻栽培品种。OsLRR蛋白及其编码基因在农业领域具有广阔的应用和市场前景。

附图说明：

图1 水稻OsLRR的扩增；

泳道M为分子量标记DL2000 plus（购自TAKARA）；泳道1-3为目的基因。

图2 重组OsLRR的过量表达载体酶切鉴定；

泳道M为分子量标记DL2000（购自TAKARA）；泳道1和2为含OsLRR的植物重组表达载体质粒。

图3经农杆菌介导得到的转化植株分化及生根；

A：预分化中的抗性愈伤组织；B：分化出幼苗；C：生根壮苗培养基中生长的幼苗。

图4 定量PCR分析转基因植株中OsLRR的表达；

WT为野生型植株中花11；pOX：OsLRR为OsLRR过量表达植株。

图5 转基因植株的抗白叶枯病鉴定；

WT为野生型植株中花11；pOX：OsLRR为OsLRR过量表达植株；

抗白叶枯病鉴定：转基因植株和野生型水稻种子萌发后田间播种，等秧苗长至4叶期进行移苗，在水稻抽穗期用人工剪叶接种法分别进行白叶枯病接种，接种14-20天后，待感病品种病情趋于稳定时调查抗病情况。

具体实施方式：

下面结合具体实例进一步解释本发明，实施例中所用方法如无特别说明均为常规方法。所用引物合成及测序工作由北京奥科生物技术有限公司完成。

实施例1 OsLRR基因的获得

根据NCBI（http://www.ncbi.nlm.nih.gov/）提供的关于该基因的cDNA序列设计引物，引物序列如下：（30-2163bp）

OsLRR-F1:  AGTTGAATTCCTTGTTGCAGTCAACCTC(SEQ ID NO:4下划线为限制性内切酶EcoRI识别位点)

OsLRR-R1:  AGTTGGATCCGGACTGGAGATATTGCTC(SEQ ID NO:5下划线为限制性内切酶BamHI识别位点)

以粳稻品种中花11号2周的幼苗叶片cDNA为模板，在引物OsLRR-F1和OsLRR-R1的引导下，用常规方法扩增OsLRR基因。反应结束后，对PCR扩增产物进行1%的琼脂糖凝胶电泳，回收并纯化大约2100bp左右的DNA片段，将该片段克隆到pMD18-T载体（购自TAKARA公司）上，获得pMD18-T-OsLRR载体，送北京奥科生物技术有限公司测序，测序结果表明，该DNA片段的序列如序列1所示；编码序列表中序列2所示的蛋白，在其DNA两端引入了合适的酶切位点。

实施例2 遗传转化鉴定目的基因的功能

将OsLRR基因克隆入植物过量表达载体pCAMBIA1380（购自澳大利亚CAMBIA公司）多克隆位点的EcoRI和BamHI酶切位点之间，得到含有OsLRR基因的植物表达载体，然后利用农杆菌介导的方法转化粳稻品种中花11号的成熟胚的愈伤组织, 方法如下述文献描述（Hiei et al, Efficient transformation of rice (Oryza sativa L.) mediated by Agrobacterium and SEQuence analysis of the boundaries of the T-DNA, Plant J. 1994, 6: 271-282），经过预分化、分化，得到18株转化植株，经过PCR鉴定，全部为阳性，PCR引物序列如下：

引物1： 5’- CTGAACTCACCGCGACGTCTGTC -3'（SEQ ID NO:6）；

引物2：5’- TAGCGCGTCTGCTGCTCCATACA -3’（SEQ ID NO:7）；

PCR扩增条件为：94 ℃ 2 min；94℃ 30 sec，58 ℃ 30 sec，72℃ 1 min，35个循环；72 ℃ 5 min。

经过PCR鉴定为阳性的转基因植株后，提取T1代转基因植株叶片基因组DNA进行Southern Blot检测插入基因的拷贝数，选择单拷贝的转基因植株分单株收取种子，然后取100粒以上种子发芽后利用潮霉素进行筛选，若没有死亡则表明种子已经纯合；选择已经纯合的转基因种子和野生型水稻中花11种子萌发后，利用木村B营养液（调pH为4.8）培养水稻至4叶期，然后提取水稻RNA，检测总RNA浓度和完整度后再合成cDNA第一链，以水稻Actin作为内参基因，加入等量的cDNA模板，在荧光定量PCR仪扩增Actin 和OsLRR，从图4 可以看出，在转基因植株叶片中OsLRR的表达较野生型水稻提高了141倍；所用PCR引物序列如下：

Actin-F: 5’- GCCACACTGTCCCCATCTATG -3'（SEQ ID NO:8）；

Actin-R: 5’- AGGTCGAGACGAAGGATAGCAT -3'（SEQ ID NO:9）；

LRR-F: 5’- GGA ATT GAT GAT GAT GCC CT -3'（SEQ ID NO:10）；

LRR-R: 5’- CAT CCA GCT TCA GTT TCT GC -3'（SEQ ID NO:11）；

PCR扩增条件为：95 ℃ 10 min；95℃ 15 sec，60 ℃ 1 min，40个循环；60-95 ℃ 分析溶解曲线。

木村B营养液具体配方为：(NH₄)₂SO₄ (0.365mM), KH₂PO₄ (0.182 mM), KNO₃ (0.183 mM), K₂SO₄ (0.086 mM), Ca(NO₃)₂ (0.366 mM), MgSO₄ (0.548 mM), EDTA-Fe^Ⅲ (0.020 mM), MnCl₂ ^.4H₂O (0.091×10^-3 mM), ZnSO₄ ^.7H₂O (0.77×10^-3 mM), CuSO₄ ^.5H₂O (0.32×10^-3 mM), H₃BO₃ (0.0462 mM), (NH₄)₆Mo₇O₂₄ ^.4H₂O (0.145×10^-3 mM)。

通过以上实验，我们证实了过量表达OsLRR的转基因植株为阳性植株，并且转基因植株在核酸表达水平较野生型提高了141倍。为了检验转基因纯合植株对水稻白叶枯病的抗性，我们进一步对转基因纯合植株进行抗白叶枯病的鉴定，抗白叶枯病的鉴定方法如下述文献描述（张小红等, 转Xa23基因水稻的白叶枯病抗性及其遗传分析. 作物学报. 2008, 34(10): 1679-1687），具体如下：转基因植株和野生型水稻种子萌发后田间播种，等秧苗长至4叶期进行移苗，在水稻抽穗期用人工剪叶接种法分别进行白叶枯病（广东省水稻白叶枯病优势菌系Ⅳ型菌）接种，接种14-20天后，待感病品种病情趋于稳定时调查抗病情况。

结果如图5所示，野生型水稻中花11病斑侵入长度超过叶片长度的25%，甚至侵入至叶鞘位置，过量表达OsLRR的转基因植株的病斑侵入长度不足3厘米（图 5A）。测定病斑侵入长度，并进行统计分析，过量表达OsLRR的转基因植株的病斑侵入长度是野生型的15%，差异极显著（图 5B）。参照国家水稻区域试验白叶枯人工接种抗性评价分级标准（兰艳荣等,分子标记辅助选择改良水稻光温敏核不育系华201S的白叶枯病抗性.中国水稻科学.2011,25(2):169-174），野生型水稻中花11的抗性为7级，属感病材料；过量表达OsLRR的转基因植株的抗性为1级，达到抗级水平。

序列表：

SEQ ID NO:1 cDNA全长

tgattattactaccttcccttcccttcttcttgttgcagtcaacctcgccATGGCCTCGCCTATGCCAACGCCTACCCACCGCGTCAAGCGCCGCCGCCTCGACCTCTCCCCGCCCCCGCACCTCAACGACCTCGCCGACGAGCTCCTCTTCCTCATCCTCGACCGTGCCGCCGCCCATGACCCCCGCGCCCTCAAGTCCTTCTCCCTCGTCTCCCGCGCCTGCCACGCCGCCGAGTCGCGCCACCGCCGCGTACTCCGCCCCTTCCGCCCCGACCTCCTCCCCGCCGCGCTCGCCCGCTACCCCGCCCTCTCCCGCCTCGATCTCTCCCTCTGCCCGCGCCTCCCCGACGCCGCCCTCGCCGCGCTCCCCGCCGCGCCGTCCGTCTCCGCCGTCGACCTCTCCCGCTCCCGGGGGTTCGGCGCCGCCGGCCTCGCCGCGCTCGTCGCCGCGTGCCCCAATCTCACGGACCTCGACCTCTCCAATGGCCTCGACCTCGGGGATGCCGCGGCGGCGGAGGTGGCCAAGGCGCGCCGCCTGCAGAGGCTCTCGCTGTCGCGATGCAAGCGCATCACTGACATGGGGCTCGGATGCATCGCCGTCGGATGCCCCGACCTGCGCGAGCTCTCGCTCAAGTGGTGCATCGGGGTCACTCATCTCGGACTAGACCTCCTCGCCCTCAAGTGCAACAAGCTCAACATCCTGGATCTCTCCTACACCATGATTGTAAAAAAATGCTTTCCAGCCATCATGAAGCTACAAAGTCTACAAGTGTTACTACTGGTGGGATGTAATGGAATTGATGATGATGCCCTTACTAGTCTTGATCAAGAATGCAGCAAATCACTACAGGTTCTTGATATGTCAAATTATTACAATGTCACTCATGTCGGTGTTCTGTCCATTGTGAAGGCAATGCCGAATCTGTTGGAACTCAATCTATCATACTGCTCTCCTGTTACTCCTTCTATGTCAAGCAGCTTCGAAATGATTCATAAATTGCAGACACTGAAGCTGGATGGTTGCCAATTCATGGATGATGGATTAAAATCCATTGGGAAATCCTGTGTTTCTTTGAGGGAGTTAAGTCTGAGCAAATGTTCTGGAGTGACAGACACAGATCTTTCTTTTGTCGTGCCAAGACTGAAAAATTTGCTGAAGCTGGATGTTACTTGTTGTCGCAAAATCACTGATGTTTCATTAGCTGCCATCACAACCTCATGCCCCTCCCTCATCTCTCTGAGAATGGAGTCCTGTAGCCTTGTTTCCAGCAAAGGACTACAGCTGATTGGAAGGCGCTGCACTCACTTGGAGGAATTGGATCTTACTGACACTGATTTGGATGATGAAGGTTTGAAAGCTCTCTCTGGATGCAGCAAACTTTCAAGCCTAAAAATTGGCATATGCTTGAGGATAACTGATGAGGGCCTTAGACACGTTAGCAAGTCCTGTCCAGATCTCCGAGATATCGATTTGTACAGGTCTGGGGCGATCAGTGATGAAGGGGTTACTCATATAGCTCAAGGATGCCCAATGTTAGAGTCTATCAATTTGTCCTACTGCACAAAATTAACAGACTGTTCACTGAGATCACTTTCAAAATGCATAAAGCTGAACACATTGGAGATTCGTGGCTGCCCCATGGTTTCATCTGCTGGTCTCTCGGAAATTGCCACAGGATGCAGGCTACTTTCTAAGCTTGATATCAAGAAATGCTTTGAGATCAATGACATGGGAATGATTTTCCTTTCCCAATTCTCTCACAACCTCCGGCAGATAAACTTGTCATATTGTTCGGTCACCGACATTGGGCTTATATCCCTTTCAAGCATATGTGGCTTGCAGAACATGACCATTGTGCATTTAGCGGGTGTTACGCCTAATGGACTGATAGCTGCTCTTATGGTCTGTGGTTTGAGAAAAGTGAAGCTTCATGAAGCATTCAAATCCATGGTGCCATCACATATGCTCAAAGTTGTTGAAGCCCGTGGTTGTCTTTTCCAGTGGATTAATAAACCCTACCAGGTTGCGGTAGAACCGTGTGATGTATGGAAGCAGCAGTCGCAGGATTTGCTTGTACAGTGAaatgtttcaaagataaacgttgtggaaactggggcgtgttttgtggtgttgaatttatctagagcaatatctccagtcctagagaatgagctccaaaagttttgtgccataactggctgaatagtgtattgaattgctgacggtagtattgtcagaacaacatactagtactggtattttgcttgtatgccagtggaggcgagggaggttatattcttgctgtgttgtatatagcgcaggtaggaatcaacaatcaaagagagatcattggggtaaagcatgttgtaagtagtgcggagtatgtgatatgccttgctgtgcctttttgatgcacaatttgattaatggaatggaacattgcattctcact

SEQ ID NO:2 蛋白质序列

MASPMPTPTHRVKRRRLDLSPPPHLNDLADELLFLILDRAAAHDPRALKSFSLVSRACHAAESRHRRVLRPFRPDLLPAALARYPALSRLDLSLCPRLPDAALAALPAAPSVSAVDLSRSRGFGAAGLAALVAACPNLTDLDLSNGLDLGDAAAAEVAKARRLQRLSLSRCKRITDMGLGCIAVGCPDLRELSLKWCIGVTHLGLDLLALKCNKLNILDLSYTMIVKKCFPAIMKLQSLQVLLLVGCNGIDDDALTSLDQECSKSLQVLDMSNYYNVTHVGVLSIVKAMPNLLELNLSYCSPVTPSMSSSFEMIHKLQTLKLDGCQFMDDGLKSIGKSCVSLRELSLSKCSGVTDTDLSFVVPRLKNLLKLDVTCCRKITDVSLAAITTSCPSLISLRMESCSLVSSKGLQLIGRRCTHLEELDLTDTDLDDEGLKALSGCSKLSSLKIGICLRITDEGLRHVSKSCPDLRDIDLYRSGAISDEGVTHIAQGCPMLESINLSYCTKLTDCSLRSLSKCIKLNTLEIRGCPMVSSAGLSEIATGCRLLSKLDIKKCFEINDMGMIFLSQFSHNLRQINLSYCSVTDIGLISLSSICGLQNMTIVHLAGVTPNGLIAALMVCGLRKVKLHEAFKSMVPSHMLKVVEARGCLFQWINKPYQVAVEPCDVWKQQSQDLLVQ.

SEQ ID NO:3 启动子

tcgcagacgacatgttccctctccctcacatcactcgcataaccacccatcctcaaaaaaaacaaagaaaaatcaaactattggttaaaaggaaaaaaatcggttcaaaaataccggtcagattgtttcggtctatgggctcatgcaacctattctcatatggtcctgttgtaatgtatgagcatggcaccgatcatgctcttgtaaaggttaaaaagtaaaaaccgttgtacgcaatatgttacatgtgactacttatgtaccactatctaactgtgactgtatctgtatgtgttcgatgatgtatgtaatgtggaaaaataattatatatcaaatcatcatttttggaagtatacaaatttttgaaagtataataattatataattatatcattttttgaagtatacaaatgctgaaaattttcacaataacaaatcatcgtcacgagaacgacatgcgaacactcaactagttcgcgctgaaaccttgcgaactatagccatggtcaataagatcagatgtggacaccacaaaattgcaagaattcgcacaggcatgaagcgaagtaattttatagggccgcgagatggcatattttctatgtaaactgggccgtgtggtcacgagctcgcaccatgtctgcatgcactcgttcgggtcagtccgaggacatcatcgactttgcatcccatctgcttgaactcgtctggatgctggcgcatgatgtcgtcaatcaaatatgatcacaattatacagaaaggtaggtggatttaattacattattacactggtttattatgttggctcggcatttgccaactcaaatgcagcaaagtactccatccgtttcaggctataagatgttttgactattaaactacttcaagtttgactaagtttatagataaatataataatatttgtaacaccaaattagcttcattaaatcaataattaaatatattttcataataaatttttcttgagttgaaaatattcttttttctacaaacttaatcaaacttaaaataatttgactttgaccaaaattaaaacgtcttataacctgaaacggaggtagtagctcacaagtttgctgagttatatgatgccgtctttaaactgaccctcgcgttctcaagcaatagtccccgctatgctgaagacaacatggtatatttgtgcacgctaattagaagtcatatattaatgtaaattcagggaaaaaaggtatatttttaaatctttttgcatataacgtgtgcgtgcaagcagaaaaagaaaatgagaaggaaaacgttatgcaaacagaaagtagatgcagaacccacggattgagtgcaatggcgactcccttccttcacccaagccgagccgtccccggggtgcacgggaccagtcaacaactcccccaagtgcagcgcgtcctcttccacttccaacatctactatcttttctcacgctttttccgttacccgcgaagagctgaatacgaggagggcccatgcgtcggtgggtagggtgaaaagattccatgggtagaaggagtagttgtgtgatttcgtacgagtccgcactcacaagctgtacgatccgttccgttcgtcctttgatccttttctatctctcctcccccgcatcgccccctccccacttgactctctccactcgccttcgctttccacttctaccccaccctgtactctctccgtacattaccgtcccttccccacatttaccattccacccccacatgaccacgtatattaccgtcctttgccagccatgcttgtacttggacgaggggcaaatacggtaacccagctggtgacctctcctcacccagatcgaggcgccgccggggcactctcgtcatctcatctcccccttgtttcgtttcttcctcccttcttctccttctccacatgcgccgcgccaaacgcccaccattattactaccttcccttcccttcttcttgttgcagtcaacctcgcc。

Claims (4)

1.水稻OsLRR蛋白的编码基因在提高水稻抗白叶枯病能力上的应用，其特征在于，所述水稻OsLRR蛋白的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO: 1 所示。

2.水稻OsLRR蛋白在制备提高水稻抗白叶枯病药剂中的应用，其特征在于，所述水稻OsLRR蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO: 2 所示。

3.水稻OsLRR蛋白的编码基因在制备抗白叶枯病转基因水稻中的应用，其特征在于，所述水稻OsLRR蛋白的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO: 1 所示。

4.一种对水稻抗白叶枯病进行改造的方法，其特征在于：OsLRR基因转化水稻细胞，再将转化后的水稻细胞培育成植株，所述OsLRR基因的序列如SEQ ID NO: 1 所示。