CN105175519B - 蛋白srl2在培育叶卷曲水稻中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了蛋白SRL在培育叶卷曲水稻中的应用。本发明提供蛋白SRL在培育叶卷曲水稻中的应用；所述蛋白质SRL2，是如下a)或b)的蛋白质：a)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；b)将序列表中序列2的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由(a)衍生的蛋白质。本发明的实验证明了SRL2基因可用于培育叶片适度卷曲的水稻品种，为水稻“理想株型”高产品种培育做出贡献。

Description

蛋白SRL2在培育叶卷曲水稻中的应用
技术领域
本发明涉及生物技术领域，尤其涉及蛋白SRL2在培育叶卷曲水稻中的应用。
背景技术
水稻是世界上最主要的粮食作物之一，有近一半人口以稻米为主食，我国更高达到60％以上。目前世界人口已经超过60亿，预计到2030年将可能达到80亿，与此同时,每年转作其他用途的农田有近500万-1500万公顷.为了满足不断增长的人口对粮食总量的需求，这就需要不断提高作物单产。因此，培育高产品种一直是育种家追求的永恒目标。
水稻等作物的株型是决定其产量的核心因素之一。袁隆平的超高产杂交稻的理想株型模式中，对叶片的要求为“长、直、窄、凹、厚”，其中“凹”即要求叶片要有一定的卷曲度。水稻叶片的适度卷曲能提高叶片直立度，进而提高群体内透光率，改善群体中后期的基部光照条件，最终提高作物产量。
水稻叶片的卷曲类型可分为正卷和反卷，从卷曲程度上又可分为高度卷曲(成筒状)、中度卷曲以及轻微卷曲。生产上需要的是叶片具有一定卷曲度的中度卷曲类型。水稻卷叶资源可通过自然界水稻的自发突变获得，也可以通过EMS或辐射诱变人工创制。
发明内容
本发明的一个目的是提供蛋白质SRL2或其编码基因或含有其编码基因的重组载体、表达盒、转基因细胞系、重组菌或重组病毒的用途。
本发明提供的蛋白质SRL2或其编码基因或含有其编码基因的重组载体、表达盒、转基因细胞系、重组菌或重组病毒在调控植物叶片卷曲中的应用；
所述蛋白质SRL2，是如下a)或b)的蛋白质：
a)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；
b)将序列表中序列2的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由(a)衍生的蛋白质。
上述应用中，所述调控植物叶片卷曲为促进植物叶片卷曲。
上述应用中，所述植物为单子叶植物或双子叶植物；
或所述植物为单子叶植物，所述单子叶植物为水稻。
蛋白质SRL2或其编码基因或含有其编码基因的重组载体、表达盒、转基因细胞系、重组菌或重组病毒在培育叶片卷曲转基因植物中的应用也是本发明保护的范围。
抑制蛋白质SRL2表达的物质在调控植物叶片卷曲中的应用也是本发明保护的范围；
所述蛋白质SRL2，是如下a)或b)的蛋白质：
a)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；
b)将序列表中序列2的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由(a)衍生的蛋白质。
上述应用中，所述调控植物叶片卷曲为促进植物叶片卷曲。
上述应用中，所述抑制蛋白质SRL2表达的物质为如下：
1)干扰蛋白质SRL2表达的DNA片段，其包括DNA片段1和DNA片段2，所述DNA片段1的核苷酸序列为序列表中序列3第1-225位，所述DNA片段2的核苷酸序列为序列表中序列3第433-656位；
2)含有所述干扰片段的重组载体、表达盒、转基因细胞系、重组菌或重组病毒。
上述应用中，上述干扰片段的核苷酸序列为序列3。
本实施例中是将含有所述干扰片段的重组载体导入水稻。
含有所述干扰片段的重组载体为将序列表中序列3替换pCam13OX载体骨架Pst I和Sal I酶切位点间的DNA片段得到的重组载体，其中序列3第1-225位为DNA片段1、第433-656位为DNA片段2、第226-432位为DNA片段3。该重组载体命名为pSRL2RNAi，即为RNAi干扰载体。
pCam13OX载体为将组成型CaMV35S启动子片段插入pCAMBIA1300的Pst I和HindIII酶切位点，且将277bp的NOS终止子片段插入pCAMBIA1300的EcoR I和Sac I酶切位点，得到的载体。
本发明的另一个目的是提供一种培育叶片卷曲转基因植物的方法。
本发明提供的方法，包括如下步骤：抑制目的植物中蛋白质SRL2的表达，得到叶片卷曲转基因植物。
上述方法中，所述抑制目的植物中蛋白质SRL2的表达为将上述抑制蛋白质SRL2表达的物质导入目的植物。
上述应用或方法中，所述植物为单子叶植物或双子叶植物；
或所述植物为单子叶植物，所述单子叶植物为水稻。
序列表中序列2由988个氨基酸残基组成。
上述蛋白质SRL2编码基因为如下1)或2)或3)的DNA分子：
1)编码区为序列表中序列1所示的DNA分子；
2)与1)或2)限定的DNA序列至少具有70％、至少具有75％、至少具有80％、至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性且编码上述蛋白质的DNA分子；
3)在严格条件下与1)或2)或3)限定的DNA序列杂交且编码上述蛋白质的DNA分子。
序列表中的序列1由2967个碱基组成，其开放阅读框架(ORF)为自5′末端第1-2967位核苷酸。
上述严格条件可为在0.1×SSPE(或0.1×SSC)，0.1％SDS的溶液中，在65℃条件下杂交并洗膜。
上述含有蛋白质SRL2编码基因的重组载体也属于本发明的保护范围。
可用现有的植物表达载体构建含有所述基因的重组表达载体。
所述植物表达载体包括双元农杆菌载体(如pBI121、pBin19、pCAMBIA2301、pCAMBIA3301、pCAMBIA1301-UbiN、pCAMBIA1300等)和可用于植物微弹轰击的载体等。所述植物表达载体还可包含外源基因的3’端非翻译区域，即包含聚腺苷酸信号和任何其它参与mRNA加工或基因表达的DNA片段。所述聚腺苷酸信号可引导聚腺苷酸加入到mRNA前体的3’端，如农杆菌冠瘿瘤诱导(Ti)质粒基因(如胭脂合成酶Nos基因)、植物基因(如大豆贮存蛋白基因)3’端转录的非翻译区均具有类似功能。
使用所述基因构建重组植物表达载体时，在其转录起始核苷酸前可加上任何一种增强型启动子、组成型启动子或诱导型启动子，如花椰菜花叶病毒(CAMV)35S启动子、玉米的泛素启动子(Ubiquitin)、胁迫诱导型启动子Rd29A等，它们可单独使用或与其它的植物启动子结合使用；此外，使用本发明的基因构建植物表达载体时，还可使用增强子，包括翻译增强子或转录增强子，这些增强子区域可以是ATG起始密码子或邻接区域起始密码子等，但必需与编码序列的阅读框相同，以保证整个序列的正确翻译。所述翻译控制信号和起始密码子的来源是广泛的，可以是天然的，也可以是合成的。翻译起始区域可以来自转录起始区域或结构基因。
为了便于对转基因植物细胞或植物进行鉴定及筛选，可对所用植物表达载体进行加工，如加入可在植物中表达的编码可产生颜色变化的酶或发光化合物的基因(GUS基因、萤光素酶基因等)、具有抗性的抗生素标记物(庆大霉素标记物、卡那霉素标记物等)或是抗化学试剂标记基因(如抗除莠剂基因)等。从转基因植物的安全性考虑，可不加任何选择性标记基因，直接以逆境筛选转化植株。
利用任何一种可以引导外源基因在植物中表达的载体，将编码所述蛋白的基因导入植物细胞，可获得半卷叶表型的转基因细胞系及转基因植株。携带有所述基因的表达载体可通过使用Ti质粒、Ri质粒、植物病毒载体、直接DNA转化、显微注射、电导、农杆菌介导等常规生物学方法转化植物细胞或组织，并将转化的植物组织培育成植株。
本发明通过Co60辐射籼稻品种中籼3037种子，得到一个半卷叶突变体，SRL2(Semi-Rolled Leaf)，该突变体与野生型中籼3037相比，主要变现为叶片向上半卷，同时株高略有降低，叶片变窄。遗传分析表明该突变表型由一个隐性核基因控制。通过构建定位群体，利用图位克隆的方法，获得了控制这一性状的基因。序列比较表明，该基因编码一个植物特有的未知功能蛋白，目前水稻中尚无这类基因突变影响叶片卷曲的报道，说明这是一个控制水稻叶片形态的新基因。这一新突变体的获得，对了解水稻叶片形态建成机制具有重要的应用价值。
本发明还通过干扰野生型水稻中的SRL2基因表达，得到转基因水稻，其与未干扰的野生型水稻相比，发生叶片卷曲。因此，SRL2基因可用于水稻高产育种，丰富现有的水稻育种材料的遗传多样性。本发明水稻半卷叶蛋白SRL2，可用于培育叶片适度卷曲的水稻品种，为水稻“理想株型”高产品种培育做出贡献。
附图说明
图1为3037与突变体srl2的植株和叶片表型观察。
图2为SRL2基因的定位及互补表达载体的构建。
a.SRL2基因位点被定位到水稻3号染色体短臂上的分子标记S3和S4之间。
b.SRL2基因的结构。黑色代表外显子，该基因只有19个外显子。箭头标示的是缺失一个碱基T的位点。
c.互补表达载体的构建。pCSRL2，互补表达载体，包括SRL2基因上游7674bp和下游2592bp；pCSRL2-CK，互补表达载体对照，与pCSRL2相比少了SRL2基因的部分启动子区、整个编码区和3’调控区。
图3为3037与SRL2基因RNA干扰转基因植株和叶片的表型。
图4为野生型盐稻8号和pSRL2RNAi植株在插秧移栽后21天，叶片中SRL2基因表达量。
图5为野生型盐稻8号和pSRL2RNAi植株在抽穗期，倒二叶片的卷曲指数计算。
具体实施方式
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
下述实施例中的百分含量，如无特别说明，均为质量百分含量。
实施例1、水稻半卷叶突变体srl2的表型及遗传分析
1、水稻半卷叶突变srl2的表型分析
水稻半卷叶突变体srl2是本实验室通过Co60辐射籼稻品种中籼3037(WT，购自扬州大学农学院)种子,得到一个半卷叶突变体。srl2与对照3037相比，叶片明显呈半卷叶状态(图1，a和b分别为对照3037(左)与srl2(右)在幼苗期和成熟期植株整体的表型，c为叶片表型，d为叶片的徒手切片显微观察，e为叶片的扫描电镜超微结构观察)。切片观察发现，突变体叶肉细胞的分化和分布明显不同于野生型。与野生型相比，突变体叶片在卷曲地方的小维管束背面没有厚壁组织的形成；而那些大的维管束的截面形态则与野生型没有明显差别。进一步扫描电镜超微结构观察发现，srl2叶片正面的表皮细胞与野生型相比没有明显差别，而叶片背面的表皮细胞，在一些小的维管束中则缺少由哑铃型硅质细胞形成的纵列。因此，在突变体中，正是由于在一些叶片维管束背部缺乏厚壁组织细胞的分化，导致了卷叶的表型。
2、水稻半卷叶突变体srl2的遗传分析
水稻半卷叶突变srl2与粳型野生型水稻材料(Japonica)日本晴(中国农科院作物科学研究所水稻种质资源中心保藏，库编号I1A13071)，配置杂交获得F1代，F1代自交产生F2代群体。对F2代群体内各植株进行叶片卷曲与否的表型观察，日本晴和srl2分别作为正、负对照。F2代植株的表型鉴定结果如表1所示，表明水稻半卷叶这一性状符合单基因控制遗传规律。表1中，正常株数是指具有日本晴表型的株数，srl2株数是指具有srl2表型的株数。
表1 水稻半卷叶突变体srl2的遗传分析
实施例2、SRL2基因的获得
1、图位克隆SRL2的基因组DNA
为了克隆SRL基因，将水稻半卷叶突变体srl2和日本晴配置杂交组合，获得的杂交F1代自交得到F2群体，对其中2994个F2隐性个体(具有半卷叶表型的F2代个体)进行SRL基因的精细定位。利用实验室已开发的STS(Sequence-Tagged Site)分子标记(表2)，通过PCR的方法，首先将SRL基因定位于第3染色体长臂上的STS标记S1和S6之间。进一步，利用STS标记S2，S3，S4和S5，最终将SRL基因精细定位在BAC克隆AC134769上56Kb范围内，利用水稻基因组注解数据库RiceGAAS(http://ricegaas.dna.affrc.go.jp/rgadb)分析表明，56kb区域内共有3个基因(图2a)，将这3个基因进行DNA序列测定，比较了突变体和野生型序列，发现其中2个基因在突变体中的序列都与野生型的一致，只有基因LOC_Os03g19520在第15个外显子发生了一个碱基T的缺失，最终导致翻译蛋白的改变和提前终止。因此，将突变的LOC_Os03g19520确定为目标基因，命名为SRL2。图2b为SRL2基因结构，图中标记为基因的突变位点。
表2 本研究新创制的STS标记
2、SRL2基因全长ORF的获得
用Bioteke公司RNA提取试剂盒(Bioteke，RP1201)提取水稻日本晴叶片总RNA，采以Oligo(dt)-18为引物，以所提取的总RNA为模板进行反转录合成第一链cDNA。以此cDNA为模板，primer 1(5’-ATGGGTTTCATGTCAGCGAA-3’)和primer 2(5’-CTACTGGGCACGATATGCAGC-3’)，进行PCR扩增反应，反应条件如下：
反应体积50μl，其中含有：模板(cDNA)5μl(5ng)，引物正向引物、反向引物终浓度各0.2μM，dNTP终浓度各200μM，Ex Taq DNA聚合酶2.5U，10×Ex Taq DNA聚合酶缓冲液5μl，用双蒸水补足至50μl体积。
反应温度、时间：94℃，变性5分钟；然后94℃变性30秒，55℃退火30秒，72℃延伸3分钟，扩增35个循环；最后在72℃下延伸10分钟。
扩增产物为3’有碱基A的3’突出粘端片段，用QIAquick胶回收试剂盒(Qiagen，28706)按产品说明书进行纯化，然后与3’有碱基T的线性pGEM-T EASY载体(Promega，A1360)在16℃下连接6小时，使用2mm电极杯，2500V转化大肠杆菌DH5α，转化物在含氨苄青霉素的LB平板培养基上生长，挑选克隆，提取质粒，使用AbI PRISM 3700DNA分析仪(Perkin-Elmer/Applied Biosystem)测序。
扩增产物具有序列表中序列1所示的核苷酸，为SRL2基因全长ORF，长2967bp，该基因编码的蛋白命名为SRL2，该蛋白的氨基酸序列为序列表中序列2所示。
实施例3、用突变体SRL2互补实验验证基因SRL2的功能
1、互补载体pCSRL2及互补对照载体pCSRL2-CK的构建
利用EcoRI酶切BAC AC134769(购自中科院上海国家基因研究中心)，获得包含有SRL2的起始密码子ATG上游的7674个碱基和终止密码子TGA后的2592个碱基的全长序列的DNA片段(16934bp)，克隆到pCAMBIA1300(DingGuo,MCV033)EcoRI位点，即构建成了互补表达载体pCSRL2(图2c)。
将构建好的互补载体pCSRL2用XholI酶切，去除SRL2基因的部分启动子区、整个编码区和3’调控区，保留5’端的部分启动子区，即构建成了互补对照载体pCSRL2-CK(图2c)。
2、pCSRL2和pCSRL2-CK转化株系的获得及其表型鉴定
两载体pCSRL2和pCSRL2-CK通过电击的方法分别转入农杆菌(AgroBacteriumtumefaciens)株系EHA105(北京亚平宁生物)中，利用农杆菌的介导法分别将pCSRL2和pCSRL2-CK转入半卷叶突变体srl2中。
转化的具体方法是将突变体个体幼胚脱壳灭菌，接种到诱导愈伤组织的培养基中。培养2周后，挑选生长旺盛，颜色浅黄，比较松散的胚性愈伤组织，用作转化的受体。用含有pCSRL2和pCSRL2-CK质粒的EHA105菌株分别侵染水稻愈伤组织，在黑暗处25℃培养3天后，在含有50mg/L潮霉素的选择培养基上筛选抗性愈伤组织和转基因植株。将潮霉素抗性植株在阴凉处练苗，7天后移栽到水田。观察转基因植株的表型恢复情况。
结果表明转入互补载体pCSRL2的植株能恢复叶片不卷曲的野生型表型，而转入互补对照载体pCSRL2-CK的植株仍为半卷叶，不能恢复表型。功能互补实验表明SRL2控制水稻半卷叶表型。
实施例4、用RNA干扰实验验证基因SRL2的功能
1、表达SRL2基因RNA干扰质粒pSRL2RNAi
用Bioteke公司RNA提取试剂盒(Bioteke，RP1201)提取水稻日本晴叶片总RNA，采以Oligo(dt)-18为引物，以所提取的总RNA为模板进行反转录合成第一链cDNA。以此cDNA为模板，用引物对primer 3(5’-GCCCAAGCTCGCGGCGCCCTG-3’)和primer4(5’-TGCAAATGAAGAGTAGCTTG-3’)进行PCR反应扩增，反应条件如下：
反应体积50μl，其中含有：模板(cDNA)5μl(5ng)，引物正向引物、反向引物终浓度各0.2μM，dNTP终浓度各200μM，Pfu DNA聚合酶2.5U，10×DNA聚合酶缓冲液5μl，用双蒸水补足至50μl体积。
反应温度、时间：94℃，变性5分钟；然后94℃变性30秒，55℃退火30秒，72℃延伸40秒，扩增35个循环；最后在72℃下延伸3分钟。
扩增产物为3’有碱基A的3’突出粘端片段，用Biomed胶回收试剂盒(Biomed，28706)按产品说明书进行纯化，然后连入3’有碱基T的线性pMD19-T(Takara,D101)载体中得到载体pMD19-SRL2。
用Sal I和BamH I酶切载体pMD19-SRL2，得到225bp的DNA片段1；
用Pst I和Xba I酶切载体pMD19-SRL2，得到224bp的DNA片段2；
用Bgl II和Xba I双酶切载体pUCCRNAi，得到219bp的DNA片段3；
pUCCRNAi载体记载在如下文献中：参见“Hengxiu Yu，Mo Wang，Ding Tang etal.OsSPO11-1 is essential for both homologous chromosome pairing andcrossover formation in rice.Chromosoma.2010(119)：625-636.”一文，公众可从中国科学院遗传与发育生物学研究所获得。
将DNA片段1、DNA片段2、DNA片段3和经过Pst I和Sal I酶切的pCam13OX载体骨架中，得到重组载体。
经过测序，该重组载体为将序列表中序列3替换pCam13OX载体骨架Pst I和Sal I酶切位点间的DNA片段得到的重组载体，其中序列3第1-225位为DNA片段1、第433-656位为DNA片段2、第226-432位为DNA片段3。该重组载体命名为pSRL2RNAi，即为RNAi干扰载体。
pCam13OX载体为将组成型CaMV35S启动子片段(序列4)插入pCAMBIA1300的Pst I和Hind III酶切位点，且将277bp的NOS终止子片段(序列5)插入pCAMBIA1300的EcoR I和Sac I酶切位点，得到的载体；具体构建方法如下：
用引物对35S-F：(5’-AAGCTTCCCAGATTAGCCTTTTCAAT-3’)和35S-R：(5’-CTGCAGTCCCCCGTGTTCTCTCCAA-3’)PCR扩增质粒pBI121(DingGuo,MCV032)得到约855bp的组成型CaMV35S启动子片段(序列4)；
将该片段用Pst I和Hind III双酶切，与经过同样酶切的载体pCAMBIA1300(DingGuo,MCV033)连接，得到中间载体pCam13OXM；
用EcoR I和Sac I双酶切质粒pBI121(DingGuo,MCV032)，回收277bp的NOS终止子片段(序列5)，将277bp的NOS终止子片段与经过EcoR I和Sac I双酶切的中间载体pCam13OXM连接，得到表达载体pCam13OX。
2、转SRL2RNAi盐稻8号的获得
1)重组菌构建
将上述重组载体pSRL2RNAi通过电击转入农杆菌(AgroBacterium tumefaciens)EHA105中，得到重组菌EHA105/pSRL2RNAi(提取质粒，测序验证，含有pSRL2RNAi的菌为阳性菌)。
2)转SRL2RNAi盐稻8号
将盐稻8号(以下简称为野生型水稻，中国水稻研究所国家水稻数据中心保藏，登记编号苏审稻200307)个体幼胚脱壳灭菌，接种到诱导愈伤组织的培养基中。培养2周后，挑选生长旺盛，颜色浅黄，比较松散的胚性愈伤组织，用作转化的受体。
用重组菌EHA105/pSRL2RNAi菌液侵染水稻愈伤组织，在黑暗处25℃培养3天后，在含有50mg/L潮霉素的选择培养基上筛选抗性转基因植株。将潮霉素抗性植株在阴凉处练苗，7天后移栽到水田，得到T0代转SRL2RNAi盐稻8号。
3)分子鉴定
取T0代转SRL2RNAi盐稻8号和野生型水稻插秧后21的叶片，提取总RNA，采用Bioteke公司RNA提取试剂盒(Bioteke，RP1201)按照说明书操作。以Oligo(dt)-18为引物，以所提取的总RNA为模板进行反转录合成第一链cDNA。通过qRT-PCR比较转基因植株及野生型材料盐稻8号的叶片cDNA中SRL2基因的表达量，以水稻Ubiquitin基因的表达量做参照。
扩增SRL2基因用引物对primer 5(5’-TCCATCTGCGCAGCATTTCA-3’)和primer6(5’-CTACTGGGCACGATATGCAG-3’)；
扩增Ubiquitin基因用引物对primer 7(5'-CAAGATGATCTGCCGCAAATGC-3’)和primer 8(5'-TTTAACCAGTCCATGAACCCG-3’)。
qRT-PCR扩增反应条件设置如下：
反应体积20μl，其中含有：模板(cDNA)1μl(25ng)，正向引物、反向引物终浓度各0.2μM，dNTP终浓度各200μM，Taq DNA聚合酶1U，10×Taq DNA聚合酶缓冲液2μl，Sybgreen染料0.5μl，用双蒸水补足至20μl体积。
反应温度、时间设置为：95℃，变性5分钟；然后95℃变性10秒，56℃退火20秒，72℃延伸20秒。
结果如图4所示，pSRL2RNAi为T0代转SRL2RNAi盐稻8号，WT为野生型水稻，可以看出，与野生型水稻相比，pSRL2RNAi植株中SRL2基因的表达有明显下降，T0代转SRL2RNAi盐稻8号为阳性转基因水稻，确实达到了干扰的效果。
采用同样的方法将pCam13OX转入野生型水稻中，得到T0代转空载体水稻。
3、转SRL2RNAi盐稻8号的表型观察
将分子鉴定为阳性的T0代转SRL2RNAi盐稻8号、T0代转空载体水稻和野生型水稻组培苗或秧苗种植在自然条件下(6月-9月份)生长，抽穗后调查表型,同时计算倒二叶的叶片卷曲指数LRI(leaf rolling index),LRI＝【(Lw-Ln)/Lw】*100％。其中Lw为叶片展开时最宽处的宽度(cm),Ln为叶片最宽处卷曲后两叶缘之间的距离(cm)。每个类型调查5株，结果取平均值。
表型如图3所示，pSRL2RNAi为T0代转SRL2RNAi盐稻8号，WT为野生型水稻，a和b分别为植株表型和叶片表型，可以看出，与野生型水稻相比，阳性的T0代转SRL2RNAi盐稻8号表现出像srl2突变体一样的典型的叶片呈半卷叶表型，野生型水稻为叶片不卷曲。
进一步计算抽穗期倒二叶的叶片卷曲指数，结果如图5所示,野生型的叶片卷曲指数为0.04(4％),基本不卷曲；而T0代转SRL2RNAi盐稻8号的叶片卷曲指数为0.4(40％),卷曲指数增加了10倍。
T0代转空载体水稻结果与野生型水稻无显著差异。

Claims (11)

1.蛋白质SRL2或其编码基因或含有其编码基因的重组载体、表达盒、转基因细胞系、重组菌或重组病毒在调控植物叶片卷曲中的应用；
所述蛋白质SRL2，是由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述调控植物叶片卷曲为促进植物叶片卷曲。
3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述植物为单子叶植物或双子叶植物。
4.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述植物为单子叶植物，所述单子叶植物为水稻。
5.蛋白质SRL2或其编码基因或含有其编码基因的重组载体、表达盒、转基因细胞系、重组菌或重组病毒在培育叶片卷曲转基因植物中的应用；
所述蛋白质SRL2，是由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质。
6.抑制蛋白质SRL2表达的物质在调控植物叶片卷曲中的应用；
所述蛋白质SRL2，是由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；
所述抑制蛋白质SRL2表达的物质为如下：
1）干扰蛋白质SRL2表达的DNA片段，其包括DNA片段1和DNA片段2，所述DNA片段1的核苷酸序列为序列表中序列3第1-225位，所述DNA片段2的核苷酸序列为序列表中序列3第433-656位；
或干扰蛋白质SRL2表达的DNA片段，其核苷酸序列为序列3；
2）含有所述干扰片段的重组载体、表达盒、转基因细胞系、重组菌或重组病毒。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：所述调控植物叶片卷曲为促进植物叶片卷曲。
8.一种培育叶片卷曲转基因植物的方法，包括如下步骤：抑制目的植物中蛋白质SRL2的表达，得到叶片卷曲转基因植物；
所述蛋白质SRL2，是由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于:所述抑制目的植物中蛋白质SRL2的表达为将权利要求6中所述抑制蛋白质SRL2表达的物质导入目的植物。
10.根据权利要求5-7中任一所述的应用或8或9所述的方法，其特征在于：所述植物为单子叶植物或双子叶植物。
11.根据权利要求5-7中任一所述的应用或8或9所述的方法，其特征在于：所述植物为单子叶植物，所述单子叶植物为水稻。
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