CN104098662A - 水稻耐旱相关蛋白及其编码基因与应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种水稻耐旱相关蛋白及其编码基因与应用。本发明提供的蛋白质，名称为DRK1，是如下（a）或（b）：（a）由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；（b）将序列表中序列2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物耐旱相关的由序列2衍生的蛋白质。本发明的实验证明，本发明克隆得到DRK1基因，过表达该基因可以降低植物的耐旱性，而缺失该基因可以提高植物的耐旱性，说明该基因可用来调控植物耐旱性；为培养耐旱植物奠定了基础。因此应用DRK1基因调控植物耐旱性，提高干旱条件下农作物的产量和质量。

Description

水稻耐旱相关蛋白及其编码基因与应用

技术领域

本发明涉及植物基因工程领域，尤其涉及一种水稻耐旱相关蛋白及其编码基因与应用。

背景技术

水稻是最重要的粮食作物之一，世界上一半以上人口以它为主食。水稻生产的可持续性是关系国计民生的重大课题。水稻生产受到病虫害等生物胁迫和干旱、盐害、低温等非生物胁迫的影响。其中干旱是影响水稻生产最大限制因素之一。尤其是当前水资源短缺的形式下，研究水稻对干旱响应的分子机理具有特别重要的意义。

水稻可以通过多种机制对干旱做出响应，如缩短生育周期，增强对土壤中水分的吸收能力，减少水分散失等。水稻也可以通过形态、生理和生化等方面的复杂改变，增强对干旱的抵抗。在组织和细胞水平，这些改变包括提早成熟，降低叶面积，叶片卷曲，增强根系吸收，降低分蘖数，降低呼吸作用，关闭气孔，积累渗透物质如脯氨酸和海藻糖等。植物需要维持各条耐旱途径之间达到合理平衡，以便在干旱下达到最优的产量。

研究发现许多基因参与水稻对干旱的响应过程，包括蛋白激酶、转录因子、水孔蛋白、LEA蛋白、脱水蛋白、细胞色素P450等。鉴定水稻耐旱的关键基因，进而揭示耐旱的分子机制，是生产上对水稻进行遗传改良的前提。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种水稻耐旱相关蛋白及其编码基因。

本发明提供的蛋白质，名称为DRK1(Drought resistant kinase1)，来源于水稻(Oryza sativa），是如下（a）或（b）：

（a）由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

（b）将序列表中序列2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物耐逆性相关的由序列2衍生的蛋白质。

所述一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加为不超过10个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加。

上述序列表中的序列2由1001个氨基酸残基组成。

编码所述蛋白的DNA分子也属于本发明的保护范围。

上述DNA分子是如下(1）或(2）或(3）的DNA分子：

(1）编码区为序列表中序列1所示的DNA分子；

(2）在严格条件下与（1）限定的DNA序列杂交且编码与植物耐逆性相关蛋白的DNA分子；

(3）与（1）限定的DNA序列至少具有70%、至少具有75%、至少具有80%、至少具有85%、至少具有90%、至少具有95%、至少具有96%、至少具有97%、至少具有98%或至少具有99%同源性且编码与植物耐逆性相关蛋白的DNA分子。

所述严格条件为在6×SSC，0.5%SDS的溶液中，在65°C下杂交,然后用2×SSC,0.1%SDS和1×SSC,0.1%SDS各洗膜一次。

上述序列表中的序列1由3006个核苷酸组成。

上述耐逆性均具体为耐旱性。

本发明的另一个目的是提供抑制或沉默上述蛋白表达的物质的用途。

本发明提供的抑制或沉默上述蛋白表达的物质在调控植物耐逆性中的应用。

上述应用中，所述抑制或沉默权利要求1所述蛋白表达的物质为重组载体、含有重组载体的转基因细胞系或重组菌；

所述重组载体为将DNA片段1和DNA片段2均插入双元表达载体中，得到的抑制或沉默权利要求1所述蛋白表达的重组载体；所述DNA片段1的编码区与所述DNA片段2的编码区互为反向互补；所述DNA分子1编码区的核苷酸序列为序列表中序列1自5’末端第1位-499位核苷酸；在本发明的实施例中，双元表达载体为pCUbi1390-△FAD2，重组载体为RNA干扰重组载体pCUbi1390-△FAD2-SX，其构建方法见实施例2的一的2。

上述应用中，所述调控植物耐逆性为提高植物耐旱性，提高耐旱性通过在干旱胁迫下，提高植物成活率和/或降低植物失水率和/或降低植物失水率速率体现。

所述植物具体为双子叶植物或单子叶植物；所述单子叶植物进一步具体为水稻。

本发明的第三个目的提供重组载体、含有重组载体的转基因细胞系或重组菌。

本发明提供的重组载体、含有重组载体的转基因细胞系或重组菌：

所述重组载体为将DNA片段1和DNA片段2均插入双元表达载体中，得到的抑制或沉默权利要求1所述蛋白表达的重组载体；所述DNA片段1的编码区与所述DNA片段2的编码区互为反向互补；所述DNA分子1编码区的核苷酸序列为序列表中序列1自5’末端第1位-499位核苷酸；

在本发明的实施例中，双元表达载体为pCUbi1390-△FAD2，重组载体为RNA干扰重组载体pCUbi1390-△FAD2-SX，其构建方法见实施例2的一的2。

含有上述DNA分子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌也是本发明保护的范围；

所述重组载体为将上述DNA分子插入表达载体中，得到表达上述蛋白的重组载体。在本发明的实施例中，表达载体具体为pCUbi1390，重组载体为序列表中序列1所示的核苷酸同源重组到双元表达载体pCUbi1390上得到的载体，命名为pCUbi1390-DRK1。

上述蛋白、上述DNA分子或上述含有上述DNA分子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌在调控植物耐逆性中的应用；

所述调控植物耐逆性具体为降低植物耐旱性，降低耐旱性通过在干旱胁迫下，降低成活率和/或提高失水率和/或提高植物失水率速率体现。

所述植物具体为双子叶植物或单子叶植物；所述单子叶植物进一步具体为水稻。

本发明的第四个目的是提供一种培育转基因植物B的方法或一种培育转基因植物A的方法。

本发明提供的一种培育转基因植物B的方法，为抑制目的植物中的上述蛋白的活性或表达，得到转基因植物B，所述转基因植物B的耐旱性高于所述目的植物；

所述抑制目的植物中的上述蛋白的活性或表达具体为将第三个目的中的重组载体导入所述目的植物；

本发明提供的一种培育转基因植物A的方法，为将上述DNA分子导入目的植物中，得到转基因植物A，所述转基因植物A的耐旱性低于所述目的植物；

所述将编码上述蛋白的DNA分子具体通过上述含有上述DNA分子的重组载体导入目的植物。

所述目的植物具体为双子叶植物或单子叶植物；所述单子叶植物进一步具体为水稻。

扩增所述DNA分子全长或其任意片段的引物对也是本发明保护的范围。

本发明实施例中的引物对如下：5’-ATGGGCCTCACGTGTGATACAC-3’和5’-TCATGCATCTTGTTCATTACATGCC-3’。

本发明的实验证明，本发明克隆得到DRK1基因，过表达该基因可以降低植物的耐旱性，而缺失该基因可以提高植物的耐旱性，说明该基因可用来调控植物耐旱性；为培养耐旱植物奠定了基础。因此应用DRK1基因调控植物耐旱性，提高干旱条件下农作物的产量和质量。

附图说明

图1为pCUbi1390-△FAD2载体结构示意图

图2为DRK1缺失和过表达植株中DRK1基因转录水平检测

图3为DRK1缺失和过表达植株的表型

具体实施方式

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。

下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

水稻(Oryza sativa ssp.Japonica)Asominori记载在如下文献中：Wu W,ZhengXM,Lu G,Zhong Z,Gao H,Chen L,Wu C,Wang HJ,Wang Q,Zhou K,Wang JL,WuF,Zhang X,Guo X,Cheng Z,Lei C,Lin Q,Jiang L,Wang H,Ge S,Wan J（2013）Association of functional nucleotide polymorphisms at DTH2with the northwardexpansion of rice cultivation in Asia.Proc Natl Acad Sci U S A.19;110(8):2775-80，公众可从中国农业科学院作物科学研究所获得，以下也称为水稻日本晴或野生型水稻。

根癌农杆菌EHA105（Agrobacterium tumefaciens EHA105）记载在如下文献中：New Agrobacterium helper plasmids for gene transfer to plants.Hood,ElizabethE;Gelvin,Stanton B;Melchers,Leo S;Hoekema,Andre.Transgenic Research,2(4):p.208-218-218（1993）.公众可从中国农业科学院作物科学研究所获得。

双元表达载体pCUbi1390记载在如下文献中：Wu Z,Zhang X,He B,Diao L,ShengS,Wang J,Guo X,Su N,Wang L,Jiang L,Wang C,Zhai H,Wan J.Achlorophyll-deficient rice mutant with impaired chlorophyllide esterificationin chlorophyll biosynthesis.Plant Physiol.2007Sep;145(1):29-40，公众可从中国农业科学院作物科学研究所获得。

pCUbi1390-△FAD2载体记载在如下文献中：Wax crystal-sparse leaf2,a ricehomologue of WAX2/GL1,is involved in synthesis of leaf cuticular wax.Mao B.,etal.(2012).Planta235:39–52，公众可从中国农业科学院作物科学研究所获得。

水稻材料的栽培条件：将水稻种子用水浸泡3天，然后播种在苗床上。4叶期的水稻幼苗移栽到水田中，分单株插秧。

实施例1、DRK1基因的获得

根据gramene数据库，设计引物（引物序列为：forward primer，5’

-ATGGGCCTCACGTGTGATACAC-3’；reverse primer，5’

-TCATGCATCTTGTTCATTACATGCC-3’），用上述引物，以水稻(Oryza sativa ssp.

Japonica)Asominori2周幼苗的cDNA为模板，得到全长cDNA序列3006bp，结果为该PCR产物具有序列表中序列1所示的核苷酸，该PCR产物的基因为DRK1，该基因的编码区为序列表中序列1；该基因编码的蛋白命名为DRK1，该蛋白的氨基酸序列为序列表中的序列2。

实施例2、DRK1基因在调控植物耐旱性中的应用

一、过表达重组载体获得

1、过表达重组载体pCUbi1390-DRK1的获得

以水稻(Oryza sativa ssp.Japonica)Asominori2周苗提取RNA反转录得到的总cDNA为模板，用引物5-TCTGCACTAGGTACCTGCAGATGGGCCTCACGTGTGATACAC-3和5-ATGGATCCGTCGACCTGCAGTCATGCATCTTGTTCATTACATGCC-3进行扩增，得到3049bp的PCR产物。经过测序，该PCR产物具有序列表中序列1所示的核苷酸；

回收上述PCR产物，通过clontech infusion kit(takara公司产品)同源重组到双元表达载体pCUbi1390的酶切位点PstI上，得到的连接产物转入大肠杆菌中，得到转化子。

提取转化子的质粒送去测序，该质粒为将序列表中序列1所示的核苷酸同源重组到双元表达载体pCUbi1390上得到的载体，命名为pCUbi1390-DRK1，为过表达重组载体。

二、DRK1基因RNA干扰载体pCUbi1390-△FAD2-DRK1的构建

1、DRK1基因干扰片段的获得

（1）水稻品种Asominori幼苗RNA的提取及cDNA的制备

使用RNAprep pure植物总RNA提取试剂盒（购自天根生化科技（北京）有限公司），提取水稻(Oryza sativa ssp.Japonica)Asominori14天幼苗的RNA，反转录得到cDNA。

（2）引物的设计

扩增DRK1正义片段的引物为DRK1-sense-F:5-

TTCTGCACTAGGTACCAGGCCTGATGGGCCTCACGTGTGATACAC-3和DRK1-sense-R:5-

CTGACGTAGGGGCGATAGAGCTCGAAGTGCACCAGTTAGGGCATTTC-3。

扩增DRK1反义片段的引物为DRK1-antisense-F:5-CGGGGATCCGTCGACTACATGGGCCTCACGTGTGATACAC-3和DRK1-antisense-R:5-AGGTGGAAGACGCGTTACGAAGTGCACCAGTTAGGGCATTTC-3。

（3）PCR扩增DRK1基因干扰片段

以cDNA为模板，用DRK1-sense-F及DRK1-sense-R引物进行PCR扩增，得到片段1。以cDNA为模板，用DRK1-antisense-F及DRK1-antisense-R引物进行PCR扩增，得到片段2。

将上述片段电泳检测,片段1大小为499bp，片段2大小为499bp。将片段1和片段2均送去测序，结果表明片段1的编码序列为序列表中序列1所示核苷酸自5’末端第1-499bp，片段2的编码序列为序列表中序列1所示核苷酸自5’末端第1-499的反向互补序列。

2、带DRK1基因正义干扰片段的pCUbi1390-△FAD2-sense-DRK1重组载体获得

（1）DRK1基因正义干扰片段的同源重组定向克隆

用SacⅠ酶切pCUbi1390-△FAD2载体（结构示意图如图1所示），得到了线性pCUbi1390-△FAD2，回收。将片段1采用同源重组定向克隆的方法连接到线性的pCUbi1390-△FAD2载体（具体步骤和方法参考clontech infusion kit说明书，该试剂盒可从大连宝生物公司购买），再将同源重组产物转入DH5α感受态细胞，37度培养过夜，得到单克隆。

（2）鉴定pCUbi1390-△FAD2-sense-DRK1重组载体

挑选（1）中所得的单克隆，接种于含卡那霉素的LB液体培养基中，过夜培养；取过夜培养的菌液作为PCR反应模板，使用载体引物1390-F及FAD-R进行PCR扩增,鉴定已经插入片段1的pCUbi1390-△FAD2-sense-DRK1重组载体，得到854bp DNA条带的即为阳性克隆，引物序列如下：

1390-F：5'-TGCCTTCATACGCTATTTATTTGC-3'；

FAD-R：5'-GAAGCGACGGACCTGGAGAT-3'。

提取阳性克隆的质粒，送去测序，测序引物为Left MCS-F及Left MCS-R，测序结果表明，片段1正确连接到pCUbi1390-△FAD2载体SacⅠ上的质粒命名为pCUbi1390-△FAD2-sense-DRK1。

3、带DRK1基因正义及反义干扰片段的pCUbi1390-△FAD2-SX重组载体的获得（1）DRK1基因反义干扰片段的同源重组定向克隆

用SnaBⅠ酶切步骤pCUbi1390-△FAD2-sense-DRK1质粒，回收待用。采用同源重组定向克隆的方法（具体步骤和方法参考clontech infusion kit说明书，该试剂盒可从大连宝生物公司购买），先将回收的片段2和线性pCUbi1390-△FAD2-sense-DRK1进行同源重组反应，再将同源重组产物转入DH5α感受态细胞，37度过夜培养得到单克隆。

（2）鉴定pCUbi1390-△FAD2-DRK1重组载体

挑选单克隆菌，接种于含卡拉霉素的LB液体培养基中，过夜培养；取过夜培养的菌液作为PCR反应模板，使用FAD-F及1390-R引物，进行PCR扩增反应。引物序列如下：

FAD-F：5'-CCTTTCACAACCTGATTTCCCA-3'；

1390-R：5'-TAATCATCGCAAGACCGGCAACAGG-3'。

能够扩出片段大小为1k的质粒即为阳性克隆。将该质粒送去测序，以FAD-F及1390-R作为测序引物，该质粒为将片段1连接到pCUbi1390-△FAD2载体SacⅠ，且将片段2连接到pCUbi1390-△FAD2载体SnabI位点的质粒，片段1的编码区和片段2的编码区互为反向互补；命名为pCUbi1390-△FAD2-SX。

三、过表达转DRK1水稻和RNA干扰转DRK1RNAi水稻的获得

1、过表达转DRK1水稻的获得

将上述获得的过表达重组载体pCUbi1390-DRK1通过热激的方法转入根癌农杆菌EHA105中，得到重组菌，提取质粒，送去测序，质粒为pCUbi1390-DRK1，含有该质粒的重组菌命名为EHA105/pCUbi1390-DRK1。

将水稻日本晴的种子脱壳灭菌，参照Hiei等的方法（Plant J.1994，6:271–282）进行转化，得到T0代转DRK1水稻植株。

T0代转DRK1水稻植株收种后播种得到T1代转DRK1水稻植株。

T1代转DRK1水稻植株生长1个月后，提取叶片的RNA反转录得到cDNA作为模板，用引物ATGGGCCTCACGTGTGATACAC和GAAGTGCACCAGTTAGGGCATTTC进行荧光定量PCR（方法参照kakara公司，Premix Ex Taq^TM试剂说明书），筛选DRK1表达量调高的单株。以野生型水稻（WT）为对照。

内参为Ubiquitin，内参的引物为UBI-F:ACCCTGGCTGACTACAACATC和UBI-R:AGTTGACAGCCCTAGGGTG。结果如图2所示，野生型水稻中DRK1的相对表达量为2.0,而T1代转DRK1水稻株系OE1、OE2、OE3、OE4、OE5、OE6和OE8的DRK1基因的表达量分别为8.2,6.2,1.8,5.1,6.5,12,7.9。

表明，T1代转DRK1水稻中DRK1基因的表达量高于野生型水稻，为过表达DRK1水稻。

采用同样方法将空载体pCUbi1390转入野生型水稻中，得到T0代转pCUbi1390水稻，收种、播种，得到T1代转pCUbi1390水稻。

2、DRK1基因RNA干扰水稻的获得

将上述获得的质粒pCUbi1390-△FAD2-SX通过热激的方法转入根癌农杆菌EHA105中，得到重组菌，提取质粒，送去测序，质粒为pCUbi1390-△FAD2-SX，含有该质粒的重组菌命名为EHA105/pCUbi1390-△FAD2-SX。

将水稻日本晴的种子脱壳灭菌，接种到诱导愈伤的培养基中。培养3周后，从盾片处生长出愈伤组织，挑选生长旺盛，颜色浅黄，比较松散的胚性愈伤，用作转化的受体。

将上述获得的EHA105/pCUbi1390-△FAD2-SX侵染胚性愈伤，在黑暗处25℃培养3天后，在含有50mg／L潮霉素的选择培养基上筛选潮霉素抗性植株。将潮霉素抗性植株在阴凉处炼苗，几天后移栽到水田，得到T0代转DRK1RNAi水稻。

T0代转DRK1RNAi水稻植株收种后播种得到T1代转DRK1RNAi水稻植株。

T1代转DRK1RNAi水稻植株生长1个月后，提取叶片的RNA反转录得到cDNA作为模板，用载体上的引物1390-F(10707-10730):TGCCTTCATACGCTATTTATTTGC和FAD2-R(10827-10846):GAAGCGACGGACCTGGAGAT进行定量PCR。以野生型水稻（WT）为对照。

内参为Ubiquitin，内参的引物为UBI-F:ACCCTGGCTGACTACAACATC和UBI-R:AGTTGACAGCCCTAGGGTG。结果如图2显示，野生型水稻中DRK1的表达量为2.0，而T1代转DRK1RNAi水稻中RNAi-1,RNAi-3,RNAi-4和RNAi-5中DRK1基因的表达量分别为0.8,0.8,0.2和1.1，均低于野生型水稻。

表明，T1代转DRK1RNAi水稻中DRK1基因的表达量低于野生型水稻。

采用同样方法将空载体pCUbi1390-△FAD2转入野生型水稻中，得到T0代转pCUbi1390-△FAD2水稻，收种、播种，得到T1代转pCUbi1390-△FAD2水稻。

三、过表达转DRK1水稻和RNA干扰转DRK1RNAi水稻的表型鉴定

将编号为OE1和OE8的T1代转DRK1水稻、编号为RNAi-4的T1代转DRK1RNAi水稻、野生型水稻（WT）、T1代转pCUbi1390水稻和T1代转pCUbi1390-△FAD2水稻的种子播种后，培养3周后浇透水，然后不再浇水进行自然干旱处理，生长7天后，然后恢复浇水，4天后照相。每个株系30株，实验重复3次，统计植株成活率和失水率。

叶片失水率实验方法为：生长3周水稻苗，取地上部分称重（Z），然后不再浇水进行自然干旱处理，一定时间后称取材料重量(Zt)，失水率=(Z-Zt)/Z*100%。

结果如图3所示，A为表型观察，B为成活率，C为失水率；

从图3A中可以看出，干旱处理前，野生型、T1代转DRK1水稻和T1代转DRK1RNAi生长状态没有明显差异；干旱处理后过表达植株失水最严重，其次是野生型日本晴，而干扰植株生长最好；恢复浇水后干扰植株最快恢复正常，野生型较慢，而过表达植株出现大量旱死植株。

从图3B中可以看出，编号为OE1和OE8的T1代转DRK1水稻、编号为RNAi-4的T1代转DRK1RNAi水稻、野生型日本晴（WT）的成活率分别为12.4%、21.6%、83.5%和34.5%；

从图3C中可以看出，

编号为OE1的T1代转DRK1水稻在自然干旱处理后1、2、3、4、5、6、7h的失水率分别为30.5、51.2、72.5、80.4、85.7、90.1、92.8；

编号为OE8的T1代转DRK1水稻在自然干旱处理后1、2、3、4、5、6、7h的失水率分别为32.5、54.6、73.5、80.4、88.4、92.5、95.6；

编号为RNAi-4的T1代转DRK1RNAi水稻在自然干旱处理后1、2、3、4、5、6、7h的失水率分别为21.2、30.5、40.5、45.6、50.4、53.6、56.7；

野生型水稻（WT）在自然干旱处理后1、2、3、4、5、6、7h的失水率分别为25.7、45.2、60.3、75.4、80.4、85.3、88.6；

从上述可以看出，编号为OE1和OE8的T1代转DRK1水稻、编号为RNAi-4的T1代转DRK1RNAi水稻、野生型水稻（WT）的失水率速度从快到慢的顺序是OE8，OE1，WT和RNAi-4。

野生型水稻（WT）、T1代转pCUbi1390水稻和T1代转pCUbi1390-△FAD2水稻结果无显著差异。

以上结果表明，DRK1编码的蛋白与耐旱相关，干扰该蛋白的表达可以提高植物的耐旱性。

Claims (10)

1.一种蛋白，是如下（a）或（b）：

（a）由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

（b）将序列表中序列2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物耐逆性相关的由序列2衍生的蛋白质。

2.编码权利要求1所述蛋白的DNA分子。

3.如权利要求2所述的DNA分子，其特征在于：所述DNA分子是如下(1）或(2）或(3）的DNA分子：

(1）编码区为序列表中序列1所示的DNA分子；

(2）在严格条件下与（1）限定的DNA序列杂交且编码与植物耐逆性相关蛋白的DNA分子；

(3）与（1）限定的DNA序列至少具有70%、至少具有75%、至少具有80%、至少具有85%、至少具有90%、至少具有95%、至少具有96%、至少具有97%、至少具有98%或至少具有99%同源性且编码与植物耐逆性相关蛋白的DNA分子。

4.抑制或沉默权利要求1所述蛋白表达的物质在调控植物耐逆性中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述抑制或沉默权利要求1所述蛋白表达的物质为重组载体、含有重组载体的转基因细胞系或重组菌；

所述重组载体为将DNA片段1和DNA片段2均插入双元表达载体中，得到的抑制或沉默权利要求1所述蛋白表达的重组载体；所述DNA片段1的编码区与所述DNA片段2的编码区互为反向互补；所述DNA分子1编码区的核苷酸序列为序列表中序列1自5’末端第1位-499位核苷酸。

6.根据权利要求4或5所述的应用，其特征在于：

所述调控植物耐逆性为提高植物耐旱性；

所述植物具体为双子叶植物或单子叶植物；所述单子叶植物进一步具体为水稻。

7.重组载体、含有重组载体的转基因细胞系或重组菌：

所述重组载体为将DNA片段1和DNA片段2均插入双元表达载体中，得到的抑制或沉默权利要求1所述蛋白表达的重组载体；所述DNA片段1的编码区与所述DNA片段2的编码区互为反向互补；所述DNA分子1编码区的核苷酸序列为序列表中序列1自5’末端第1位-499位核苷酸。

8.含有权利要求2或3所述DNA分子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌；

所述重组载体为将权利要求2或3所述DNA分子插入表达载体中，得到表达权利要求1所述蛋白的重组载体。

9.权利要求1所述蛋白、权利要求2或3所述DNA分子或权利要求8所述重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌在调控植物耐逆性中的应用；

所述调控植物耐逆性具体为降低植物耐旱性；

所述植物具体为双子叶植物或单子叶植物；所述单子叶植物进一步具体为水稻。

10.一种培育转基因植物B的方法，为抑制目的植物中的权利要求1所述蛋白的活性或表达，得到转基因植物B，所述转基因植物B的耐旱性高于所述目的植物；

所述抑制目的植物中的权利要求1所述蛋白的活性或表达具体为将权利要求5或6所述应用中的所述重组载体或权利要求7所述的重组载体导入所述目的植物；

或一种培育转基因植物A的方法，为将权利要求2或3所述DNA分子导入目的植物中，得到转基因植物A，所述转基因植物A的耐旱性低于所述目的植物；

所述将编码权利要求1所述蛋白的DNA分子具体通过权利要求8所述重组载体导入目的植物；

所述目的植物具体为双子叶植物或单子叶植物；所述单子叶植物进一步具体为水稻。