CN102924311B

CN102924311B - 一种l-天门冬氨酸-l-鸟氨酸盐的制备方法

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Publication number: CN102924311B
Application number: CN201110230744.9A
Authority: CN
Inventors: 车冯升; 冯谦; 霍彩霞; 牛玉乐; 屈英薇; 黄晓霞
Original assignee: Hainan Sihuan Pharmaceutical Co Ltd; Beijing Sihuan Pharmaceutical Co Ltd; Beijing Ao He Research Institute Co Ltd
Current assignee: Hainan Sihuan Pharmaceutical Co Ltd; Beijing Sihuan Pharmaceutical Co Ltd; Beijing Ao He Research Institute Co Ltd
Priority date: 2011-08-12
Filing date: 2011-08-12
Publication date: 2014-12-24
Anticipated expiration: 2031-08-12
Also published as: CN102924311A

Abstract

本发明涉及一种L-天门冬氨酸-L-鸟氨酸盐的制备方法，以L-鸟氨酸-α-酮戊二酸盐、L-鸟氨酸柠檬酸盐、L-鸟氨酸苹果酸盐的任一种或其组合溶于水后，加入L-天门冬氨酸，调整pH值至7.0～8.0，加入活性炭脱色过滤，滤液加入适量的与水互溶的有机溶剂，搅拌析晶，过滤，干燥，即得。本发明的制备方法具有收率高、产品质量好(含量高、杂质含量低等)、成本低廉等优点。

Description

一种L-天门冬氨酸-L-鸟氨酸盐的制备方法

技术领域

本发明属于化合物制备技术领域，特别涉及一种L-天门冬氨酸-L-鸟氨酸盐的制备方法。

背景技术

L-鸟氨酸-L-天门冬氨酸盐，化学名为(S)-2，5-二氨基戊酸-(S)-2-氨基丁二酸盐，分子式为C₉H₁₉N₃O₆，分子量为265.26，结构式为：

L-鸟氨酸-L-天门冬氨酸盐主要用于治疗肝性脑病及急、慢性肝病(如口各型肝炎、肝硬化、脂肪肝、肝炎后综合症)引发的血氨升高，如伴发或继发于肝脏解毒功能受损或发作期肝性脑病，尤其适用于治疗肝昏迷早期或肝昏迷期的意识模糊状态。

已有的L-鸟氨酸-L-天门冬氨酸盐的制备方法中，L-鸟氨酸多以盐酸盐、硫酸盐、醋酸盐的形式存在，如何去除L-鸟氨酸中的盐成为影响其制备工艺的技术关键。

文献GB965637、GB1067742、EP477991公开的L-鸟氨酸-L-天门冬氨酸盐的制备方法中，主要通过阳离子交换树脂来处理L-鸟氨酸盐，以得到游离的L-鸟氨酸，再与L-天门冬氨酸反应，制得L-鸟氨酸-L-天门冬氨酸盐。该方法的缺点是：产品收率低(约50％)，且需要耗费大量的树脂，而树脂再生过程中需要消耗大量的水，并生成大量待处理且处理困难的酸水，难以实现工业化生产。

CN101100435A公开了一种L-鸟氨酸-L-天门冬氨酸盐的制备方法，用氢氧化钡中和L-鸟氨酸硫酸盐中的硫酸，再用D403树脂螯合去除滤液中残余的钡离子后，加入无水乙醇搅拌结晶，制得L-鸟氨酸-L-天门冬氨酸盐。该方法采用D403树脂去除剧毒的钡离子，存在制造成本较高，操作复杂、不利于工业化生产等缺陷。

CN101798275A公开了一种L-鸟氨酸-L-天门冬氨酸盐的制备方法，包括下述步骤：将L-鸟氨酸醋酸盐溶于水后，加入L-天门冬氨酸，用氨调节pH值至6-9，加入活性炭脱色过滤，滤液中加入适量的乙醇或甲醇，搅拌析晶，过滤，干燥，即得。该方法存在产品纯度不高，单杂超过0.1％，难以作为原料药进行制剂生产，且其起始原料价格较高(700元/kg)，不利于工业化生产等缺陷。

发明内容

本发明的目的在于提供一种L-天门冬氨酸-L-鸟氨酸盐的制备方法，其特征在于，将L-鸟氨酸-α-酮戊二酸盐、L-鸟氨酸柠檬酸盐、L-鸟氨酸苹果酸盐的任一种或其组合溶于水后，加入L-天门冬氨酸，调整pH值至7.0-8.0，加入活性炭脱色处理后，过滤，滤液加入适量的与水互溶的有机溶剂，搅拌析晶，过滤，干燥，即得。

本发明的优选技术方案中，调节pH值的物质选自有机碱或无机碱的任一种或其组合。

本发明的优选技术方案中，所述有机碱选自吡啶、三乙胺、N-甲基吗啉、乙醇钠的任一种或其组合，优选为三乙胺。

本发明的优选技术方案中，所述无机碱选自氨水、氨气、氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠、碳酸氢钾的任一种或其组合，优选为氨水、氨气的任一种或其组合。

本发明的优选技术方案中，所述反应温度为0-100℃，优选为20-25℃。

本发明的优选技术方案中，其中，L-鸟氨酸-α-酮戊二酸盐、L-鸟氨酸柠檬酸盐、L-鸟氨酸苹果酸盐的任一种或其组合与水的重量比为1∶1-1∶10，优选为1∶3。

本发明的优选技术方案中，其中，L-鸟氨酸-α-酮戊二酸盐、L-鸟氨酸柠檬酸盐、L-鸟氨酸苹果酸盐的任一种或其组合与L-天门冬氨酸的摩尔比为1∶1-1∶4，优选为1∶3。

本发明的优选技术方案中，其中，活性碳的加入量为L-鸟氨酸-α-酮戊二酸盐、L-鸟氨酸柠檬酸盐、L-鸟氨酸苹果酸盐的任一种或其组合的0.1-50wt.％，优选为1-10wt.％。

本发明的优选技术方案中，所述的与水互溶的有机溶剂选自乙腈、四氢呋喃、丙酮、C1-C4的直链醇或支链醇中的任一种或其组合，优选为无水乙醇。

本发明的优选技术方案中，无水乙醇与水的体积比是1∶1-1∶10，优选为1∶3。

本发明采用盐置换方法制备L-天门冬氨酸-L-鸟氨酸盐，并采用重结晶方法去除产物中的无机盐，以解决现有生产工艺中存在的使用树脂纯化所导致的三废产量大、收率低、成品质量差等问题，且显著提高了L-天门冬氨酸-L-鸟氨酸盐的质量，所得产品纯度高，单杂小于0.05％，适合工业化生产。因此，本发明的制备方法具有工艺简单，三废产量少，收率高，质量好等优点，且与现有技术相比，具有如下有益效果：

(1)起始原料有固定来源，成本较低(如L-鸟氨酸-α-酮戊二酸盐的价格不超过350元/kg)，利于工业化生产。

(2)产品质量好，含量较高(99-101％)，且单杂(即单个杂质)低于0.05％。

(3)产品质量好，几乎完全去除无机盐，成品灼烧残渣(ROI)小于0.1％，且合格率显著提高。

(4)不使用离子交换树脂，工艺简单易操作，废水量大大减少，显著降低生产成本(成本下降45％)，且适合工业化生产。

本发明所述的L-天门冬氨酸-L-鸟氨酸盐的含量按照高效液相色谱法(《中国药典》(2010年版)二部附录V D)测定，包括下述步骤：用氨基键合硅胶色谱柱；以0.05mol/ml磷酸二氢钾-乙腈(38：62)为流动相；检测波长为200nm，流速为1.5ml/min，柱温30℃。理论塔板数按门冬氨酸峰和鸟氨酸峰计算均应不低于2000，门冬氨酸、鸟氨酸峰与相邻色谱峰之间的分离度均应符合要求。

取本品适量，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml约含门冬氨酸鸟氨酸0.2mg的溶液，精密量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取门冬氨酸鸟氨酸对照品，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。

本发明所述的L-天门冬氨酸-L-鸟氨酸盐的“单杂”即单个杂质，其测定方法为：取本品适量，用水溶解并稀释成每1ml中约含门冬氨酸鸟氨酸20mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取1ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液；另取(S)-3-氨基哌啶-2-酮盐酸盐适量，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含20μg的对照品溶液。照含量测定项下的色谱条件，取对照溶液10μl，注入液相色谱仪，调节仪器灵敏度，使门冬氨酸峰的峰高约为满量程的25％。再精密量取供试品溶液、对照溶液和对照品溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至鸟氨酸峰保留时间的2.5倍。供试品溶液的色谱图中，单个杂质峰面积不得大于对照溶液中门冬氨酸与鸟氨酸峰面积和的1/4(0.25％)。

本发明所述的L-天门冬氨酸-L-鸟氨酸盐的成品灼烧残渣(ROI)测定方法按照《中国药典》(2010年版)附录VIII N方法测定：取供试品1.0～2.0g，置已炽灼至恒重的坩埚中，精密称定，缓缓炽灼至完全炭化，放冷；加硫酸0.5～1ml使湿润，低温加热至硫酸蒸气除尽后，在700～800℃炽灼使完全灰化，移置干燥器内，放冷，精密称定后，再在700～800℃炽灼至恒重，即得。

本发明所述的L-天门冬氨酸-L-鸟氨酸盐的比旋光度测定方法为：取本品，精密称定，加盐酸溶液溶解并稀释成每1ml中约含80mg的溶液，依法测定(《中国药典》(2010年版)二部附录VI E)。

本发明所述的L-天门冬氨酸-L-鸟氨酸盐的熔点测定方法为：按照《中国药典》(2010年版)附录VI C方法测定，将温度计放入盛装传温液的容器中，使温度计汞球部的底端与容器的底部距离2.5cm以上，加入传温液以使传温液受热后的液面适在温度计的分浸线处。将传温液加热，待温度上升至较规定的熔点低限约低10℃时，将装有供试品的毛细管浸入传温液，贴附在温度计上(用橡皮圈固定)，位置使毛细管的内容物适在温度计汞球中部；继续加热，调节升温速率为每分钟上升1.0～1.5℃，加热时须不断搅拌使传温液温度保持均匀，记录供试品在初熔至全熔时的温度，重复测定3次，取其平均值，即得。

具体实施方式

下面通过实施例来进一步描述本发明的技术方案，对于本领域的普通技术人员而言，下列实施例不构成对本发明的保护范围的限制。

实施例1 L-天门冬氨酸-L-鸟氨酸盐的制备

L-天门冬氨酸-L-鸟氨酸盐的制备方法，包括下述步骤：

1、在20～25℃下，将31.40g(0.1mol)L-鸟氨酸-α-酮戊二酸盐(含二分子结晶水)加入至100ml水中，搅拌溶解；加入40.00g(0.3mol)L-天门冬氨酸，加入三乙胺，调节pH7.0～8.0；

2、加入1.57g活性炭，升温至50-55℃，保温1小时，热过滤；

3、滤液在搅拌下，滴入300ml无水乙醇中，析晶，过滤，干燥，得23.50gL-天门冬氨酸-L-鸟氨酸盐，收率为94.6％，熔点为210.4-210.7℃。

¹HNMR：3.75(1H，m)，3.64(1H，t)，2.9(2H，t)，2.66(1H，m)，2.53(1H，m)，1.78(2H，m)，1.64(1H，m)，1.58(1H，m)。

含量：100.17％ROI：0.02％[α]_D ²⁰＝+28.20°

实施例2 L-天门冬氨酸-L-鸟氨酸盐的制备

1、在20～25℃下，将45.60g(0.1mol)L-鸟氨酸柠檬酸盐加入至140ml水中，搅拌溶解；加入40.00g(0.3mol)L-天门冬氨酸，通入氨气，调节pH7.0～8.0；

2、加入2.30g活性炭，升温至50-55℃，保温0.5小时，热过滤；

3、滤液在搅拌下，滴入420ml无水乙醇中，析晶，过滤，干燥，得25.35gL-天门冬氨酸-L-鸟氨酸盐，收率为95.6％，熔点为208.8-210.9℃。

含量：100.74％ROI：0.03％[α]_D ²⁰＝+28.13°

实施例3 L-天门冬氨酸-L-鸟氨酸盐的制备

1、在20～25℃下，将40.00g(0.1mol)L-鸟氨酸苹果酸盐加入至120ml水中，搅拌溶解；加入40.00g(0.3mol)L-天门冬氨酸，加入乙醇钠，调节pH7.0～8.0；

2、加入2.00g活性炭，升温至50-55℃，保温0.5小时，热过滤；

3、滤液在搅拌下，滴入360ml无水乙醇中，析品，过滤，干燥，得24.53gL-天门冬氨酸-L-鸟氨酸盐，收率为92.5％，熔点为210.5-211.10℃。

含量：100.69％；ROI：0.02％；[α]_D ²⁰＝+28.07°

对比例1 L-天门冬氨酸-L-鸟氨酸盐的制备

采用CN101798275A实施例1的方法制备，包括下述步骤：

将L-鸟氨酸醋酸盐30g加入60ml蒸馏水中，搅拌溶解后，加入L-天门冬氨酸17.6g，加入氨水调节pH值至7.0，加热升温至60℃，反应液澄清，加入活性炭1.5g，保持上述温度搅拌脱色半小时后趁热过滤除去活性炭。

将上述所得滤液加热升温至74℃，在此温度下搅拌滴加甲醇270ml，加毕保持温度回流0.5小时，降温抽滤，甲醇水溶液(体积比5∶1)40ml×3洗涤，40ml×2甲醇洗涤，80℃下真空干燥2小时得到成品24.30g。

收率为69.28％，熔点为203.6-204.8℃。

含量：98.5％；ROI：0.08％；[α]D20＝+28.94°。

对比例2 L-天门冬氨酸-L-鸟氨酸盐的制备

采用CN101798275A实施例2的方法制备，包括下述步骤：

将L-鸟氨酸醋酸盐30g加入50ml蒸馏水中，搅拌溶解后，加入L-天门冬氨酸16.1g，加入氨水调节pH值至7.0，加热升温至65℃，反应液澄清，加入活性炭1.5g，保持上述温度搅拌脱色半小时后趁热过滤除去活性炭。

在所得滤液中滴加乙醇共160ml，加热升温至72℃回流，并保持回流1小时，然后自然冷却至室温，抽滤，乙醇水溶液(体积比3∶1)40ml×3洗涤，40ml×2乙醇洗涤，80℃下真空干燥3小时得到成品23.25g。

收率为72.48％，熔点为204.2-207.5℃。

含量：97.2％；ROI：1.2％；[α]D20＝+29.20°。

对比例3 L-天门冬氨酸-L-鸟氨酸盐的制备

采用CN101798275A实施例3的方法制备，包括下述步骤：

将L-鸟氨酸醋酸盐30g加入到60ml蒸馏水中，搅拌溶解后，加入L-天门冬氨酸17.6g，通入氨气调节溶液pH值至7.8左右，加热升温至45℃，反应液澄清，加入活性炭1.5g，保持上述温度搅拌脱色半小时后趁热过滤除去活性炭。

室温搅拌下，在上述滤液中滴加甲醇120ml，升温至72℃回流1小时，降温抽滤，甲醇水溶液(体积比5∶1)40ml×3洗涤，40ml×2甲醇洗涤，80℃下真空干燥2小时得到成品22.72g。

收率为64.78％，熔点为202.3-205.5℃。

含量：96.7％；ROI：1.5％；[α]D20＝+29.70°。

对比例4 L-天门冬氨酸-L-鸟氨酸盐的制备

采用CN101798275A实施例4的方法制备，包括下述步骤：

将L-鸟氨酸醋酸盐30g加入到70ml蒸馏水中，搅拌溶解后，加入L-天门冬氨酸17.6g，通入氨气调节溶液pH值至7.8左右，加热升温至45℃，反应液澄清，加入活性炭1.5g，保持上述温度搅拌脱色半小时后趁热过滤除去活性炭。

室温下，在上述滤液中滴加乙醇共120ml，升温至78℃回流0.5小时，降温抽滤，乙醇水溶液(体积比2∶1)40ml×3洗涤，40ml×2乙醇洗涤，80℃下真空干燥3小时得到成品26.37g。

收率为75.20％，熔点为204.3-207.5℃。

含量：97.5％；ROI：1.4％；[α]D20＝+29.20°。

表1 实施例1-3与对比例1-4的制备效果比较

编号	收率(％)	含量(％)	ROI(％)	熔点(℃)	[α]D20	成本(元/kg)
							实施例1	94.6	100.17	0.02	210.4-210.7	+28.20°	580
实施例2	95.6	100.74	0.03	208.8-210.9	+28.13°	620
							实施例3	92.5	100.69	0.02	210.5-211.10	+28.07°	650
对比例1	69.28	98.5	0.08	203.6-204.8	+28.94°	920
							对比例2	72.48	97.2	1.2	204.2-207.5	+29.20°	880
对比例3	64.78	96.7	1.5	202.3-205.5	+29.70°	1150
							对比例4	75.2	97.5	14	204.3-207.5	+29.20°	850

由表1可见，与对比例1-4相比，本发明的制备方法具有产品收率高、质量好(含量高、杂质含量低)等优点，且生产成本显著下降(下降率约45％)。

Claims

1.一种L-天门冬氨酸-L-鸟氨酸盐的制备方法，其特征在于将L-鸟氨酸-α-酮戊二酸盐溶于水后，加入L-天门冬氨酸，在20-25℃条件下进行反应，加入三乙胺调节pH值至7.0-8.0，加入活性炭脱色处理，过滤，滤液加入无水乙醇，搅拌析晶，过滤，干燥，即得。

2.根据权利要求1所述的制备方法，L-鸟氨酸-α-酮戊二酸盐与L-天门冬氨酸的摩尔比为1:3。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其中：L-鸟氨酸-α-酮戊二酸盐与水的重量比为1:3。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其中，活性炭的加入量为L-鸟氨酸-α-酮戊二酸盐的1-10wt%。

5.根据权利要求1所述的制备方法，无水乙醇与水的体积比为1:3。