CN102907319B - 一种提高甜叶菊组培增殖效率的方法 - Google Patents
一种提高甜叶菊组培增殖效率的方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种提高甜叶菊组培增殖效率的方法。在利用甜叶菊的增殖培养基对甜叶菊的茎段进行丛芽诱导时，在接种前剪去茎上的叶片，再剪成单节的茎段。接种时将茎段的茎节插入培养基。经过这般处理，可以大幅度提高甜叶菊丛芽诱导的增殖率，大幅度增加分枝上的茎节数，大幅度提高快繁的效率。
Description
技术领域
一种提高甜叶菊组培增殖效率的方法，属于植物组织培养技术，具体地说是在甜叶菊组织培养技术基础上创造的高效增殖扩繁方法。
背景技术
甜叶菊组织培养可以在短时间内提供大量的菊苗用于生产或科学研究。植物组织培养技术包含增殖和生根两个阶段。现有的植物组织培养增殖技术是将组培形成的植物增殖苗的单个茎段植入增殖培养基中进行丛芽诱导和培养，产生大量的新生苗，然后将这些新生苗再剪成单节的茎段用于进一步的扩大繁殖或进行生根处理，进而用于生产。在甜叶菊的增殖过程中，产生的丛芽和茎节越多，下一步培养可栽插的苗也越多，实现的繁殖效率越高。
发明内容
本发明就是提供一种通过接种时的剪叶和深插处理，在相同的组织培养条件下，用同样的时间培养出更多组培苗的新技术。
1.本发明的核心技术是在接种时剪去所有的叶片。
2.组培培养基为腋芽诱导培养基，其配方为1.0mg·L-16-BA、0.1mg·L-1NAA、5.0g·L-1琼脂粉和30g·L-1蔗糖的MS培养基。
3.培养条件：温度为25±2℃，照度为2000lx，光照时间为12h·d-1。
4.每个组培瓶中接种4-5个甜叶菊茎段。
5.茎段接入培养基时将茎节插入培养基。
6.接种步骤是：
①从增殖苗上剪取甜叶菊的枝条；
②将上述枝条上的叶片全部剪去；
③将剪去叶片的枝条截成单节的茎段；
④将上述截成的茎段接入培养基，茎段上的茎节要插入培养基内；
⑤完成接种后置于上述条件下进行培养。
附图说明
图1为剪叶培养与对照的效果对比图。
1为剪叶插入处理的丛芽诱导结果。
2为未剪叶未插入处理的丛芽诱导结果。
具体实施方式
实施方式1
供试材料为“皖甜1号-18”。取长势较一致的组培苗，除去顶端，剪成带叶片和不带叶片长约1.0cm的2种茎段，所有的茎段都是单节的茎段。将上述茎段分别接种于腋芽诱导培养基上，接种方式分为4个处理：
1.未剪叶插入：保留茎段上的叶片，将茎节插入培养基；
2.剪叶插入：剪去茎段上的叶片，将茎节插入培养基；
3.未剪叶未插入：保留茎段上的叶片，仅将茎节以下的部分插入培养基，茎节外露与培养基之上（设为对照）；
4.剪叶未插入：剪去茎段上的叶片，仅将茎节以下的部分插入培养基，茎节外露与培养基之上；
每瓶接种4个茎段，每处理接种4瓶，3次重复。腋芽诱导培养基为含1.0mg·L-16-BA、0.1mg·L-1NAA、5.0g·L-1琼脂粉和30g·L-1蔗糖的MS培养基，pH为6.0。培养温度为25±2℃，2000lx光照12h·d-1的条件下培养。30天统计各处理的单株分枝数并将各分枝剪成含有一个节的茎段（注：茎顶部1cm长度计为一个茎段）。
单株分枝数=全部分枝数/株数。
单株茎段数=全部茎段数/株数（注：分枝顶部1cm长度计为一个茎段）。
表1.不同茎段处理对“皖甜1号-18”甜叶菊增殖情况的比较
| 处理方式 | 单株分枝数 | 比对照增加（%） | 单株茎段数 | 比对照增加（%） |
| 未剪叶插入 | 3.8c | 15.2 | 137.3a | 41.5 |
| 剪叶插入 | 7.5a | 127.3 | 171.7a | 77.0 |
| 未剪叶未插入 | 3.3c | 97.0b | ||
| 剪叶未插入 | 5.6b | 69.7 | 152.0a | 56.7 |
注：表中不同小写字母表示5%显著水平。
表1的结果表明，剪叶插入处理的单株分枝数比对照提高127.3%，茎段数比对照提高77.0%。方差分析表明剪叶插入处理的单株分枝数和茎段数都与对照有显著的差异。
实施方式2
供试材料为“+3”。取长势较一致的组培苗，将除去顶端，剪成带叶片和不带叶片长约1.0cm的2种茎段，所有的茎段都是单节的茎段。将上述茎段分别接种于腋芽诱导培养基上，接种方式分为2个处理：
1.剪叶插入：剪去茎段上的叶片，将茎节插入培养基；
2未剪叶未插入：保留茎段上的叶片，仅将茎节以下的部分插入培养基，茎节外露与培养基之上（设为对照）；
每瓶接种4个茎段，每处理接种2瓶，6次重复。腋芽诱导培养基为含0.5mg·L-16-BA、0.05mg·L-1NAA、5.0g·L-1琼脂粉和30g·L-1蔗糖的MS培养基，pH为6.0。培养温度为25±2℃，2000lx光照12h·d-1的条件下培养。30天统计各处理的单株分枝数并将各分枝剪成含有一个节的茎段（注：茎顶部1cm长度计为一个茎段）。
单株分枝数=全部分枝数/株数。
单株茎段数=全部茎段数/株数（注：分枝顶部1cm长度计为一个茎段）。
表2.不同茎段处理对“+3”甜叶菊品种增殖情况的比较
| 处理方式 | 单株分枝数 | 比对照增加（%） | 单株节数 | 比对照增加(%) |
| 剪叶插入 | 7.7 | 259.0 | 17.1 | 87.0 |
| 未剪叶未插入 | 2.2 | 9.2 |
表2的结果表明，剪叶插入处理的单株分枝数比对照提高259.0%，茎段数比对照提高87.0%。t检验表明，二者与对照的差异都达到了显著水平。
实施方式3
供试材料为“B1”。取长势较一致的组培苗，将除去顶端，剪成带叶片和不带叶片长约1.0cm的2种茎段，所有的茎段都是单节的茎段。将上述茎段分别接种于腋芽诱导培养基上，接种方式分为2个处理：
1.剪叶插入：剪去茎段上的叶片，将茎节插入培养基；
2.未剪叶未插入：保留茎段上的叶片，仅将茎节以下的部分插入培养基，茎节外露与培养基之上（设为对照）；
每瓶接种4个茎段，每处理接种2瓶，6次重复。腋芽诱导培养基为含1.0mg·L-16-BA、0.2mg·L-1NAA、5.0g·L-1琼脂粉和30g·L-1蔗糖的MS培养基，pH为6.0。培养温度为25±2℃，2000lx光照12h·d-1的条件下培养。30天统计各处理的单株分枝数并将各分枝剪成含有一个节的茎段（注：茎顶部1cm长度计为一个茎段）。
单株分枝数=全部分枝数/株数。
单株茎段数=全部茎段数/株数（注：分枝顶部1cm长度计为一个茎段）。
表3.不同茎段处理对“B1”甜叶菊品种增殖情况的比较
| 处理方式 | 单株分枝数 | 比对照增加（%） | 单株节数 | 比对照增加(%) |
| 剪叶插入 | 4.7 | 122.2 | 13.4 | 35.5 |
| 未剪叶未插入 | 2.1 | 9.9 |
表3的结果表明，剪叶插入处理的单株分枝数比对照提高122.2%，茎段数比对照提高35.3%。t检验表明，二者与对照的差异都达到了显著水平。
Claims (1)
1.一种提高甜叶菊组培增殖效率的方法，其特征在于，接种时剪去所有的叶片，接种时将茎段上的茎节插入培养基内，具体步骤是：
（1）从增殖苗上剪取甜叶菊的枝条；
（2）将上述枝条上的叶片全部剪去；
（3）将剪去叶片的枝条截成单节的茎段；
（4）将茎段接入腋芽诱导培养基，培养基的配方为6-BA 1.0mg·L-1 、NAA 0.1mg·L-1、琼脂粉5.0g·L-1和蔗糖30g·L-1的MS培养基；提供温度为25±2℃，照度为2000lx，光照时间为12h·d-1的培养条件；茎段上的茎节插入培养基之内，每个组培瓶中接种4-5个甜叶菊茎段。
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