CN102898326B - 盐酸金霉素的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种盐酸金霉素的制备方法，是在金色链霉菌充分发酵后对发酵液提纯并加入盐酸，转盐精制而成，包括酸化、过滤、沉淀、粗结晶、过滤、抽提、结晶、洗涤、干燥、混合等步骤；与现有技术比较，本发明优化了工艺流程，减少了反应步骤，缩短了提取周期，在酸化和沉淀步骤中采用低温冷冻水降温，控制反应温度在0~5℃之间，减少了金霉素在提取过程中的差向化损失，产品质量稳定，差向金霉素、去甲基金霉素和脱水四环素等杂质含量低，盐酸金霉素含量达到91~92%。

Description

盐酸金霉素的制备方法

技术领域

本发明属于制药领域，涉及一种抗生素的制备方法。

背景技术

金霉素为金色链霉菌（Streptomyces aureofaciens）生物合成的活性成分，为四环素类抗生素。盐酸金霉素为金霉素的盐酸盐，为金黄色或黄色结晶，无臭，味苦，遇光色渐变暗，在水或乙醇中微溶，在丙酮、乙醚或三氯甲烷中几乎不溶，作为人用药现主要用于治疗结膜炎和沙眼，作为兽用药现主要用于治疗畜禽的伤寒、白痢等疾病，也可作为畜禽促生长剂使用。近年来随着畜牧业的进一步发展，盐酸金霉素的市场需求量不断扩大，国外客户对其质量要求也越来越高，且产品价格与活性成分含量直接相关，因此，有必要改进和完善盐酸金霉素的制备方法，以提高产品质量和活性成分含量。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种改进的制备盐酸金霉素的方法，优化工艺流程，减少反应步骤，缩短提取周期，减少金霉素在提取过程中的差向化损失，提高产品质量和活性成分含量。

为达到上述目的，本发明采用如下技术方案：

盐酸金霉素的制备方法，包括以下步骤：

a．酸化和过滤

将金霉素发酵液降温至0~5℃，加入相当于金霉素发酵液体积0.5~1.2倍的水，再按每100mL金霉素发酵液加入1.5~2.5g草酸的比例加入草酸，用盐酸调pH至l.2~1.4，再按每100mL金霉素发酵液加入0.1~0.2g黄血盐钠的比例加入黄血盐钠，搅拌20~30分钟，再按每100mL金霉素发酵液加入0.1~0.3g硫酸锌的比例加入硫酸锌，搅拌20~30分钟；所得酸化液进行板框压滤，收集滤液，用pH为l.3~1.8的酸水洗涤菌丝渣，合并滤液和洗液，进行板框复滤，收集复滤液；

b．沉淀

在步骤a收集的复滤液中，按每100mL复滤液加入0.1~0.35g氯化镁的比例加入氯化镁，搅拌10~20分钟，再按每100mL复滤液加入0.05~0.15g碳酸钙的比例加入碳酸钙（氯化镁和碳酸钙的具体加入量按复滤液的效价进行计算），搅拌10~20分钟，用氨水调pH至7.6-7.9，析出金霉素钙镁复盐沉淀，控制以上操作均在温度0~5℃条件下完成；所得复盐液进行板框压滤，用水洗涤复盐沉淀至洗液pH为中性，干燥，得金霉素钙镁复盐；

c．粗结晶和过滤

根据步骤b的进料总亿计算，按每亿单位加入2.8~3.2L乙醇的比例量取乙醇，在搅拌条件下加入步骤b制得的金霉素钙镁复盐，再按每亿单位加入1.3~1.6L盐酸的比例加入盐酸，搅拌至金霉素钙镁复盐全部溶解，然后升温至44~48℃保温45~60分钟，析出盐酸金霉素粗晶；所得粗晶液进行板框压滤，用预热至44~48℃的体积比为3:2的乙醇-水混合液洗涤粗晶，干燥，得盐酸金霉素粗晶；

d．抽提

根据步骤b的进料总亿计算，按每亿单位加入9.5~10.5L浓度为70g/L的氯化镁乙醇溶液的比例量取浓度为70g/L的氯化镁乙醇溶液，在搅拌条件下加入步骤c制得的盐酸金霉素粗晶，再控制温度在25℃以下用氨水调节pH至6.5~7.0，搅拌使粗晶完全溶解；所得粗晶溶解液进行板框压滤，收集滤液，用浓度为70g/L的氯化镁乙醇溶液洗涤滤饼，合并洗液与滤液，用孔径为0.11微米的微孔滤膜复滤，收集复滤液；

e．结晶和洗涤

在搅拌条件下，向步骤d收集的复滤液中加入相当于复滤液体积8~14%的盐酸，升温至温度42~48℃保温40~60分钟，析出盐酸金霉素结晶；所得结晶液离心，晶体依次用热水和乙醇淋洗，甩干，得盐酸金霉素湿晶；

f．干燥

将步骤e制得的盐酸金霉素湿晶在进风温度100~130℃、出风温度45~65℃的条件下干燥，干燥物料过60目振动筛，得盐酸金霉素半成品；

g．混合

将步骤f制得的盐酸金霉素半成品置混合机中混合30分钟，即得盐酸金霉素成品。

优选的，所述步骤a是将金霉素发酵液降温至0~5℃，加入相当于金霉素发酵液体积1倍的水，再按每100mL金霉素发酵液加入1.5g草酸的比例加入草酸，用盐酸调pH至l.2，再按每100mL金霉素发酵液加入0.15g黄血盐钠的比例加入黄血盐钠，搅拌30分钟，再按每100mL金霉素发酵液加入0.1g硫酸锌的比例加入硫酸锌，搅拌30分钟；所得酸化液进行板框压滤，收集滤液，用pH为l.5的酸水洗涤菌丝渣至洗液效价不高于1500U/mL，合并滤液和洗液，进行板框复滤，收集复滤液。

优选的，所述步骤b是在步骤a收集的复滤液中，按每100mL复滤液加入0.1~0.35g氯化镁的比例加入氯化镁，搅拌10分钟，再按每100mL复滤液加入0.05~0.15g碳酸钙的比例加入碳酸钙，搅拌10分钟，用氨水调pH至7.8，析出金霉素钙镁复盐沉淀，控制以上操作均在温度0~5℃条件下完成；所得复盐液进行板框压滤，用水洗涤复盐沉淀至洗液pH为中性，空气吹干，得金霉素钙镁复盐。

优选的，所述步骤c是根据步骤b的进料总亿计算，按每亿单位加入3.0L乙醇的比例量取乙醇，在搅拌条件下加入步骤b制得的金霉素钙镁复盐，再按每亿单位加入1.5L盐酸的比例加入盐酸，搅拌至金霉素钙镁复盐全部溶解，然后升温至45℃保温60分钟，析出盐酸金霉素粗晶；所得粗晶液进行板框压滤，用预热至45℃的体积比为3:2的乙醇-水混合液洗涤粗晶，空气吹干，得盐酸金霉素粗晶。

优选的，所述步骤d是根据步骤b的进料总亿，按每亿单位加入10L浓度为70g/L的氯化镁乙醇溶液的比例量取浓度为70g/L的氯化镁乙醇溶液，在搅拌条件下加入步骤c制得的盐酸金霉素粗晶，再控制温度在17℃用氨水调节pH至6.8，搅拌30分钟使粗晶完全溶解；所得粗晶溶解液进行板框压滤，收集滤液，用浓度为70g/L的氯化镁乙醇溶液洗涤滤饼，合并洗液与滤液，用孔径为0.11微米的微孔滤膜复滤，收集复滤液。

优选的，所述步骤e是在搅拌条件下，向步骤d收集的复滤液中加入相当于复滤液体积10%的盐酸，升温至温度44℃保温60分钟，析出盐酸金霉素结晶；所得结晶液离心，晶体依次用热水和乙醇淋洗，甩干，得盐酸金霉素湿晶。

优选的，所述步骤f是将步骤e制得的盐酸金霉素湿晶在进风温度120℃、出风温度50℃的条件下干燥，干燥物料过60目振动筛，得盐酸金霉素半成品。

本发明的有益效果在于：本发明提供了一种改进的制备盐酸金霉素的方法，在金色链霉菌充分发酵后对发酵液提纯并加入盐酸，转盐精制而成，包括酸化、过滤、沉淀、粗结晶、过滤、抽提、结晶、洗涤、干燥、混合等步骤。与现有技术比较，本发明优化了工艺流程，减少了反应步骤，缩短了提取周期，在酸化和沉淀步骤中采用低温冷冻水降温，控制反应温度在0~5℃之间，减少了金霉素在提取过程中的差向化损失，产品质量稳定，差向金霉素、去甲基金霉素和脱水四环素等杂质含量低，盐酸金霉素含量达到91~92%。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面对本发明的优选实施例进行详细的描述。

实施例1、盐酸金霉素的制备

a．酸化和过滤

将效价为21500U/mL的金霉素发酵液转入酸化罐中，降温至0~5℃，加入相当于金霉素发酵液体积1倍的水，再加入相当于金霉素发酵液1.5%(g/mL)的草酸，搅拌条件下，用盐酸调pH至1.2，加入相当于金霉素发酵液0.15%(g/mL)的黄血盐钠，搅拌30分钟，再加入相当于金霉素发酵液0.1%(g/mL)的硫酸锌，搅拌30分钟，测得酸化液效价为10000U/mL；将所得酸化液泵入板框进行压滤，收集滤液，再用pH为1.5的酸水顶洗菌丝渣至洗液效价不高于1500U/mL，合并滤液和洗液，将其泵入复滤板框进行复滤，收集复滤液于复盐沉淀罐中；计算酸化过滤收率(%)=(复滤液效价×体积)/(发酵液效价×体积)×100=100%；

b．沉淀

根据复滤液的效价，向步骤a收集的复滤液中加入相当于复滤液0.15%(g/mL)的氯化镁，搅拌10分钟，再加入相当于复滤液0.1%(g/mL)的碳酸钙，搅拌10分钟，用氨水调pH至7.8，析出金霉素钙镁复盐沉淀，控制上述操作均在温度0~5℃条件下完成；将所得复盐液泵入板框进行压滤，用水顶洗复盐沉淀至洗液pH为中性，空气吹干，得金霉素钙镁复盐；计算复盐沉淀收率(%)=(镁盐液效价×体积)/(复滤液效价×体积)×100=91%；

c．粗结晶

根据步骤b的进料总亿计算，在粗晶罐中按3.0L/10⁹单位预先加入乙醇，在搅拌条件下加入步骤b制得的金霉素钙镁复盐，再按1.5L/10⁹单位加入盐酸，搅拌至金霉素钙镁复盐全部溶解，然后升温至45℃保温60分钟，析出盐酸金霉素粗晶；将所得粗晶液泵入板框进行压滤，用不少于2.0L/10⁹单位的顶洗液（系指在粗晶罐中配制的体积比为3:2的乙醇-水混合液并预热至45℃）洗涤粗晶，空气吹干，得盐酸金霉素粗晶；计算粗晶收率(%)=(粗晶溶解液效价×体积)/(镁盐液效价×体积)×100=90%；

d．抽提

根据步骤b的进料总亿计算，在抽提罐中按10L/10⁹单位配制70g/L氯化镁乙醇溶液，在搅拌条件下加入步骤c制得的盐酸金霉素粗晶，再控制温度在17℃缓缓加入氨水，调节pH值至6.8，继续搅拌30分钟至粗晶完全溶解，测得粗晶溶解液效价为73000U/ml；将所得粗晶溶解液泵入板框进行压滤，收集滤液，用70g/L 氯化镁乙醇溶液顶洗滤饼，合并滤液和洗液，将其用孔径为0.11微米的微孔滤膜过滤，收集复滤液（又称抽提液）于结晶罐中；计算抽提收率(%)=(抽提液效价×体积)/(粗晶溶解液效价×体积)×100=98%；

e．结晶

在搅拌条件下，向步骤d收集的复滤液中加入相当于复滤液体积10%的盐酸，升温至温度44℃保温60分钟，析出盐酸金霉素结晶；将所得结晶液离心，晶体用18L热水淋洗10分钟，再用25L乙醇淋洗5分钟，甩干5分钟，得盐酸金霉素湿晶；测定粗晶水分并称量，测得湿晶效价为850U/ml，计算结晶洗涤收率(%)=(湿晶效价×重量)/(抽提液效价×体积)×100=93%；

f．干燥

将步骤e制得的盐酸金霉素湿晶在进风温度120℃、出风温度50℃的条件下干燥，干燥物料过60目振动筛，即得盐酸金霉素半成品（金黄色晶体粉末）；测得半成品效价为980U/mL，计算干燥收率(%)=(干粉效价×重量)/(抽提液效价×体积)×100=96%，总提取收率为86%；

g．混合

将步骤f制得的盐酸金霉素半成品投至混合机内，混合30分钟，即得盐酸金霉素成品；按现行欧洲药典盐酸金霉素质量标准进行质量检验，盐酸金霉素含量为91.5%，差向金霉素含量低于4%，去甲基金霉素含量低于1%，脱水四环素含量低于0.3%。

 最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过参照本发明的优选实施例已经对本发明进行了描述，但本领域的普通技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离所附权利要求书所限定的本发明的精神和范围。

Claims (1)

1.盐酸金霉素的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

a．酸化和过滤

将金霉素发酵液降温至0~5℃，加入相当于金霉素发酵液体积1倍的水，再按每100mL金霉素发酵液加入1.5g草酸的比例加入草酸，用盐酸调pH至l.2，再按每100mL金霉素发酵液加入0.15g黄血盐钠的比例加入黄血盐钠，搅拌30分钟，再按每100mL金霉素发酵液加入0.1g硫酸锌的比例加入硫酸锌，搅拌30分钟；所得酸化液进行板框压滤，收集滤液，用pH为l.5的酸水洗涤菌丝渣至洗液效价不高于1500U/mL，合并滤液和洗液，进行板框复滤，收集复滤液；

b．沉淀

在步骤a收集的复滤液中，按每100mL复滤液加入0.1~0.35g氯化镁的比例加入氯化镁，搅拌10分钟，再按每100mL复滤液加入0.05~0.15g碳酸钙的比例加入碳酸钙，搅拌10分钟，用氨水调pH至7.8，析出金霉素钙镁复盐沉淀，控制以上操作均在温度0~5℃条件下完成；所得复盐液进行板框压滤，用水洗涤复盐沉淀至洗液pH为中性，空气吹干，得金霉素钙镁复盐；

c．粗结晶和过滤

根据步骤b的进料总亿计算，按每亿单位加入3.0L乙醇的比例量取乙醇，在搅拌条件下加入步骤b制得的金霉素钙镁复盐，再按每亿单位加入1.5L盐酸的比例加入盐酸，搅拌至金霉素钙镁复盐全部溶解，然后升温至45℃保温60分钟，析出盐酸金霉素粗晶；所得粗晶液进行板框压滤，用预热至45℃的体积比为3:2的乙醇-水混合液洗涤粗晶，空气吹干，得盐酸金霉素粗晶；

d．抽提

根据步骤b的进料总亿计算，按每亿单位加入10L浓度为70g/L的氯化镁乙醇溶液的比例量取浓度为70g/L的氯化镁乙醇溶液，在搅拌条件下加入步骤c制得的盐酸金霉素粗晶，再控制温度在17℃用氨水调节pH至6.8，搅拌30分钟使粗晶完全溶解；所得粗晶溶解液进行板框压滤，收集滤液，用浓度为70g/L的氯化镁乙醇溶液洗涤滤饼，合并洗液与滤液，用孔径为0.11微米的微孔滤膜复滤，收集复滤液；

e．结晶和洗涤

在搅拌条件下，向步骤d收集的复滤液中加入相当于复滤液体积10%的盐酸，升温至温度44℃保温60分钟，析出盐酸金霉素结晶；所得结晶液离心，晶体依次用热水和乙醇淋洗，甩干，得盐酸金霉素湿晶

f．干燥

将步骤e制得的盐酸金霉素湿晶在进风温度120℃、出风温度50℃的条件下干燥，干燥物料过60目振动筛，得盐酸金霉素半成品；

g．混合

将步骤f制得的盐酸金霉素半成品置混合机中混合30分钟，即得盐酸金霉素成品。