CN102895656B - 一种含三磷酸腺苷辅酶胰岛素化合物药物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种含三磷酸腺苷辅酶胰岛素化合物药物组合物，本发明药物组合物包括以下比例的成分：三磷酸腺苷15～25mg、辅酶A40～60单位、胰岛素3～5单位、精氨酸4～8mg、低分子右旋糖酐3～7mg，NaOH2～4mg。本发明制备过程中针对不同性质的溶液采取不同的溶解策略，尽可能地保存了各种药物的药效。本发明药物组合物通过合理配置各种成分，使得辅料的用量降低，不仅降低了成本，而且增加了其稳定性和用药安全性。

Description

一种含三磷酸腺苷辅酶胰岛素化合物药物组合物

技术领域

本发明涉及医药领域，具体涉及一种含三磷酸腺苷辅酶胰岛素化合物药物组合物，本发明还涉及其制备方法。

背景技术

三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate，ATP)是一种核苷酸(又叫腺苷三磷酸)，作为细胞内能量传递的物质，储存和传递化学能。三磷酸腺苷是体内广泛存在的辅酶，是体内组织细胞所需能量的主要来源，蛋白质、脂肪、糖和核苷酸的合成都需ATP参与。ATP经腺苷酸环化酶催化形成环磷酸腺苷(cAMP)，是细胞内的生物活性物质，对细胞许多代谢过程有重要的调节作用。ATP为蛋白质、糖原、卵磷脂、尿素等的合成提供能量，促使肝细胞修复和再生，增强肝细胞代谢活性，对治疗肝病有较大针对性。

辅酶A(Coenzyme A，Co A)为体内乙酰化反应的辅酶，对糖、脂肪及蛋白质的代谢起重要作用，其中对脂肪代谢的促进作用更加重要。本品能激活体内的物质代谢，加强物质在体内的氧化并供给能量。主要用于白细胞减少症及原发性血小板减少性紫癜，对脂肪肝、急慢性肝炎、冠脉硬化、慢性动脉炎、心肌梗死、慢性肾功能减退引起的肾病综合征及尿毒症、新生儿缺氧、糖尿病和酸中毒等可作为辅助治疗使用。

胰岛素(Insulin)是由胰岛β细胞受内源性或外源性物质如葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸、胰高血糖素等的刺激而分泌的一种蛋白质激素。胰岛素能促进全身组织细胞对葡萄糖的摄取和利用，并抑制糖原的分解和糖原异生，因此，胰岛素有降低血糖的作用。胰岛素分泌过多时，血糖下降迅速，脑组织受影响最大，可出现惊厥、昏迷，甚至引起胰岛素休克。相反，胰岛素分泌不足或胰岛素受体缺乏常导致血糖升高；若超过肾糖阈，则糖从尿中排出，引起糖尿；同时由于血液成份中改变(含有过量的葡萄糖)，亦导致高血压、冠心病和视网膜血管病等病变。另外胰岛素能促进脂肪的合成与贮存，使血中游离脂肪酸减少，同时抑制脂肪的分解氧化。胰岛素缺乏可造成脂肪代谢紊乱，脂肪贮存减少，分解加强，血脂升高，久之可引起动脉硬化，进而导致心脑血管的严重疾患；与此同时，由于脂肪分解加强，生成大量酮体，出现酮症酸中毒。

三磷酸腺苷辅酶胰岛素是以上述三者为活性成分，用于肝炎、肾炎、肝硬化、心力衰竭等疾病的症状改善。

胰岛素溶解性较差，在水、乙醇、氯仿或乙醚中几乎不溶，在现有技术的制备过程中往往先将其在酸性溶液中溶解，通过添加辅料来提交其溶解性。现有技术中往往采用较多种类或者较大剂量的方式，来提高药品的溶解性以及其他特质。

专利文献CN102038939A公开了一种制备三磷酸腺苷辅酶胰岛素干粉针剂的制备方法，包括三磷酸腺苷二钠、辅酶A、胰岛素、L-精氨酸、乙二胺四乙酸二钠、低分子右旋糖酐、葡萄糖酸钙、盐酸半胱氨酸等成分，这些成分种类较多，一方面使得成本增高，另一方面会使得副作用增多，影响用药安全性。

专利文献CN102397536A公开了一种注射用三磷酸腺苷辅酶胰岛素以及其生产工艺，包括了三磷酸腺苷二钠、辅酶A、胰岛素、盐酸精氨酸、右旋糖酐40、药用炭等成分，相比CN102038939A而言减少了辅料的总类。但是盐酸精氨酸以及右旋糖酐40的加入量仍然较大，精氨酸可能会引起的副作用如导致呼吸急促，瘙痒，湿疹，恶心和胃痛，血液化学品改变等过敏反应等，存在肝脏和肾脏疾病的人也容易出现不良反应。此外，右旋糖酐存在荨麻疹、皮肤瘙痒、发热、恶心、呕吐、喘息、关节痛、出血等副作用，极个别的有血压下降、呼吸困难和胸闷等副作用。另外，孟现民等曾报道过关于注射用三磷酸腺苷辅酶胰岛素致过敏性休克的问题(《中国医院药学杂志》2008年22期)。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术中辅料用量大的问题，提供一种稳定性好、辅料用量小的三磷酸腺苷辅酶胰岛素药物组合物。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种合有三磷酸腺苷辅酶胰岛素化合物药物组合物，其包括以下比例的成分：三磷酸腺苷15～25mg、辅酶A40～60单位、胰岛素3～5单位、精氨酸4～8mg、低分子右旋糖酐3～7mg，NaOH2～4mg。

优选地，本发明药物组合物包括以下比例的成分：三磷酸腺苷20mg、辅酶A60单位、胰岛素4单位、精氨酸6mg、低分子右旋糖酐5mg，NaOH3mg。

所述低分子右旋糖酐的分子量为2万-4万，优选为右旋糖酐40。

本发明的药物组合物，可以是注射剂或者是粉针剂，优选为粉针剂。

本发明还提供一种制备上述药物组合物的方法，其包括如下步骤：

1)将低分子右旋糖酐用注射用水溶解，加入针用活性炭，煮沸，冷却至50～55℃，加入精氨酸，搅拌溶解，过滤除炭，冷却至15℃以下，加入三磷酸腺苷，搅拌溶解，得溶液1)；

2)另取注射用水用盐酸调节pH至4.8～5.2，加入辅酶A，搅拌溶解，得溶液2)；

3)取NaOH用适量注射用水溶解，控制pH9.5～10.0，加入胰岛素，搅拌溶解，得溶液3)；

4)将溶液1)、溶液2)和溶液3)混合，加注射用水至全量，再经除菌滤器过滤至储罐，半成品检验合格后，分装入瓶；

5)将分装好的半成品置于冷冻干燥机制品室板层，4小时降温至-45℃，并于-45℃保温4小时，开启捕水器制冷开关，于预冻保温结束后，开启真空泵，当真空泵读数降至20帕以下时，按10℃/h逐渐升高板层温度至-4℃，保温4小时，升温至0℃继续保温2小时，当制品温度与板层温度接近时，继续升高板层温度至30℃并保温2小时，当制品温度与板层温度接近时结束冻干。然后真空压塞、轧盖、目检、包装。

上述本制备过程中针对不同性质的溶液采取不同的溶解策略，尽可能地保存了各种药物的药效。

如前所述，精氨酸可能会引起的副作用如导致呼吸急促，瘙痒，湿疹，恶心和胃痛，血液化学品改变等过敏反应等，存在肝脏和肾脏疾病的人也容易出现不良反应。而右旋糖酐存在荨麻疹、皮肤瘙痒、发热、恶心、呕吐、喘息、关节痛、出血等副作用，极个别的有血压下降、呼吸困难和胸闷等副作用。另外，辅料还会引入其他杂质，导致更多未知副作用。

然而，对于冻干粉而言，添加辅料以便实现其更好的溶解度及稳定性，是必要的。本发明在此方面作了较多的实验，结果意外发现，三磷酸腺苷辅酶胰岛素药物组合物中，添加适量氢氧化钠之后，不但能降低精氨酸、低分子右旋糖酐的使用量，而且增加了其稳定性和用药安全。这不仅降低了成本而且受到了良好的药剂学上的效果。

具体实施方式

以下实施例用于进一步说明本发明，但不应理解为对本发明的限制。在不背离本发明精神和实质的前提下，对本发明所作的修饰或者替换，均属于本发明的范畴。

实施例1

配方：三磷酸腺苷20g、辅酶A50000单位、胰岛素4000单位、精氨酸6g、右旋糖酐405g，NaOH3g。

制备方法：

1)将低分子右旋糖酐用注射用水溶解，加入处方量0.03％(g/ml)的针用活性炭，煮沸，冷却至55℃，加入精氨酸，搅拌溶解，过滤除炭，冷却至15℃以下，加入三磷酸腺苷，搅拌溶解，得溶液1)；

2)另取注射用水用盐酸调节pH至5.0，加入辅酶A，搅拌溶解，得溶液2)；

3)取NaOH用适量注射用水溶解，控制pH9.5，加入胰岛素，搅拌溶解，得溶液3)；

4)将溶液1)、溶液2)和溶液3)混合，加注射用水至全量2000ml，再经除菌滤器过滤至储罐，半成品检验合格后，分装入瓶(1000支)；

5)将分装好的半成品置于冷冻干燥机制品室板层，4小时降温至-45℃，并于-45℃保温4小时，开启捕水器制冷开关，于预冻保温结束后，开启真空泵，当真空泵读数降至20帕以下时，按10℃/h逐渐升高板层温度至-4℃，保温4小时，升温至0℃继续保温2小时，当制品温度与板层温度接近时，继续升高板层温度至30℃并保温2小时，当制品温度与板层温度接近时结束冻干。然后真空压塞、轧盖、目检、包装。

实施例2

配方：三磷酸腺苷25g、辅酶A400000单位、胰岛素50000单位、精氨酸4g、右旋糖酐207g，NaOH4g。

1)将低分子右旋糖酐用250注射用水溶解，加入配置质量0.5％的针用活性炭，煮沸，冷却至50℃，加入精氨酸，搅拌溶解，过滤除炭，冷却至15℃以下，加入三磷酸腺苷，搅拌溶解，得溶液1)；

2)另取200注射用水用盐酸调节pH至4.8，加入辅酶A，搅拌溶解，得溶液2)；

3)取NaOH用200注射用水溶解，控制pH10.0，加入胰岛素，搅拌溶解，得溶液3)；

4)将溶液1)、溶液2)和溶液3)混合，加注射用水至2000ml，再经除菌滤器过滤至储罐，半成品检验合格后，分装入瓶(1000支)；

5)将分装好的半成品置于冷冻干燥机制品室板层，4小时降温至-45℃，并于-45℃保温4小时，开启捕水器制冷开关，于预冻保温结束后，开启真空泵，当真空泵读数降至20帕以下时，按10℃/h逐渐升高板层温度至-4℃，保温4小时，升温至0℃继续保温2小时，当制品温度与板层温度接近时，继续升高板层温度至30℃并保温2小时，当制品温度与板层温度接近时结束冻干。然后真空压塞、轧盖、目检、包装。

实施例3

配方：三磷酸腺苷15g、辅酶A60000单位、胰岛素3000单位、精氨酸8g、右旋糖酐40 3g，NaOH2g。

1)将低分子右旋糖酐用注射用水溶解，加入配置质量0.5％的针用活性炭，煮沸，冷却至50℃，加入精氨酸，搅拌溶解，过滤除炭，冷却至15℃以下，加入三磷酸腺苷，搅拌溶解，得溶液1)；

2)另取注射用水用盐酸调节pH至4.8，加入辅酶A，搅拌溶解，得溶液2)；

3)取NaOH用适量注射用水溶解，控制pH9.5，加入胰岛素，搅拌溶解，得溶液3)；

4)将溶液1)、溶液2)和溶液3)混合，加注射用水至2000m，再经除菌滤器过滤至储罐，半成品检验合格后，分装入瓶(1000支)；

5)将分装好的半成品置于冷冻干燥机制品室板层，4小时降温至-45℃，并于-45℃保温4小时，开启捕水器制冷开关，于预冻保温结束后，开启真空泵，当真空泵读数降至20帕以下时，按10℃/h逐渐升高板层温度至-4℃，保温4小时，升温至0℃继续保温2小时，当制品温度与板层温度接近时，继续升高板层温度至30℃并保温2小时，当制品温度与板层温度接近时结束冻干。然后真空压塞、轧盖、目检、包装。

实施例4

配方：本发明药物组合物包括以下比例的成分：三磷酸腺苷20g、辅酶A55000单位、胰岛素4000单位、精氨酸6g、右旋糖酐404g，NaOH3g。

制备方法：

1)将低分子右旋糖酐用注射用水溶解，加入针用活性炭，煮沸，冷却至55℃，加入精氨酸，搅拌溶解，过滤除炭，冷却至15℃以下，加入三磷酸腺苷，搅拌溶解，得溶液1)；

2)另取注射用水用盐酸调节pH至5.2，加入辅酶A，搅拌溶解，得溶液2)；

3)取NaOH用适量注射用水溶解，控制pH10.0，加入胰岛素，搅拌溶解，得溶液3)；

4)将溶液1)、溶液2)和溶液3)混合，加注射用水至全量2000ml，再经除菌滤器过滤至储罐，半成品检验合格后，分装入瓶(1000支)；

5)将分装好的半成品置于冷冻干燥机制品室板层，4小时降温至-45℃，并于-45℃保温4小时，开启捕水器制冷开关，于预冻保温结束后，开启真空泵，当真空泵读数降至20帕以下时，按10℃/h逐渐升高板层温度至-4℃，保温4小时，升温至0℃2继续保温2小时，当制品温度与板层温度接近时，继续升高板层温度至30℃并保温2小时，当制品温度与板层温度接近时结束冻干。然后真空压塞、轧盖、目检、包装。

对比例1

按照专利文献CN102397536A实施例公开的配方及配制方式配置，简述如下：

配方：三磷酸腺苷二钠20g、辅酶A5万单位、胰岛素4000单位、盐酸精氨酸12g、右旋糖酐4020g

配置方式：将右旋糖酐40加适量注射用水，搅拌至完全溶解，加配制体积0.3％的药用炭，煮沸30分钟，降温至60℃，加处方量盐酸精氨酸，搅拌溶解，钛棒过滤过滤除炭，降温至8～10℃，加三磷酸腺苷二钠，搅拌溶解，再加辅酶A搅拌使其溶解完全，用2.5mol/L氢氧化钠调节pH至6.0～6.2，备用。另取注射用水，用1mol/L盐酸调节pH至2.5，加入胰岛素，搅拌使其完全溶解，再将两滤液混合均匀，用2.5mol/L氢氧化钠调节pH至6.0～6.2，加8～10℃注射用水至2000ml，微孔过滤除菌。分装成1000支，将分装好的制品置于冻干箱隔板上，制品冷却至-30℃，保温30分钟。冷凝器温度至-45℃±5℃时抽真空，至15Pa时，停止制冷，设导热油温度为10℃进行冷冻升华，至载体温度35℃。制品温度在30℃保持1.5小时。干燥结束后，压塞、轧盖。

实验例1：安全性试验

对实施例和对比例制备的三磷酸腺苷辅酶胰岛素粉针剂进行安全性试验考察，试验方法及结果如下：

一、血管刺激性实验

取体重为2.0-2.5kg的新西兰大白兔30只，随机分为6组，每组5只，包括空白对照组、实验组1～4，药物对照组。采用兔耳缘静脉缓慢注射，注射量为10ml/kg体重/次(按实施例1～4及对比例1的配置用氯化钠注射液稀释至含三磷酸腺苷0.4mg/ml)。其中空白对照组采用氯化钠注射液，实验组1-4组分别采用实施例1-4制备三磷酸腺苷辅酶胰岛素冻干粉针制剂，药物对照组采用对比例1制备的三磷酸腺苷辅酶胰岛素冻干粉针剂，分别加注射用水溶解后注射。

每天一次，连续给药7天，于最后一次给药24小时后剪短兔耳，置于10％甲醛溶液中固定标本，然后送病理进行组织学检查(在兔耳缘静脉的不同部位的5处取材，即从注射初始部位开始向心端每隔1cm作一切片)。

经兔耳缘静脉病理学检查，空白对照组和实验组1～4的耳缘静脉管壁完整，内皮细胞结构清楚，无明显病变，无炎细胞浸润。药物对照组部分出现血管轻度扩张充血，其他正常。

二、过敏实验

Dunkin-Hartley种白化豚鼠，体重250g～350g，临床健康，符合实验动物质量要求。豚鼠随机分为6组，每组10只，雌雄各半。观察豚鼠静脉注射氯化钠空白对照组、实验组1-4组与药物对照组的过敏反应，其中空白对照组采用氯化钠注射液，实验组1-4组分别采用实施例1-4制备三磷酸腺苷辅酶胰岛素冻干粉针制剂，药物对照组采用对比例1制备的三磷酸腺苷辅酶胰岛素冻干粉针，分别加注射用水溶解后注射。

具体方法是：按照空白对照组、实验组1～4组以及药物对照组分别间日给予腹腔注射三磷酸腺苷辅酶胰岛素注射液0.5ml/只(按实施例1～4及对比例1的配置用氯化钠注射液稀释至含三磷酸腺苷0.4mg/ml)致敏，连续三次，然后第14天及21天分别攻击给药(2ml/只)，立即观察1小时。

结果显示，空白对照组和实验组1-4组未出现明显异常现象，药物对照组部分实验对象不同程度上出现了竖毛、呼吸困难、喷嚏、干呕、抽搐、虚脱等现象。

实验例2：稳定性试验

实施例1～4所得的样品与对比例1的样品，按照《中国药典》(2005版)的要求进行外观、澄明度、有关物质及含量等指标的检测及长期(0、6、12、24个月)稳定性试验，结果如下：

表1样品各项指标检测结果

编号

样品

外观

溶液外观

澄明度

有关物质(％)

含量(％)

1

实施例1

白色粉末

无色澄明液体

符合规定

1.27

99.9.0

2

实施例2

白色粉末

无色澄明液体

符合规定

1.28

99.9

3

实施例3

白色粉末

无色澄明液体

符合规定

1.29

99.8

4	实施例4	白色粉末	无色澄明液体	符合规定	1.28	99.9
							5	对比例1	白色粉末	无色澄明液体	符合规定	1.29	99.7

所述样品放置6个月后各项指标检测结果：

表2样品各项指标检测结果(放置6个月后)

编号

样品

外观

溶液外观

澄明度

有关物质(％)

含量(％)

1

实施例1

白色粉末

无色澄明液体

符合规定

1.28

99.8

2

实施例2

白色粉末

无色澄明液体

符合规定

1.31

99.7

3

实施例3

白色粉末

无色澄明液体

符合规定

1.30

99.7

4

实施例4

白色粉末

无色澄明液体

符合规定

1.29

99.8

5

对比例1

白色粉末

无色澄明液体

符合规定

1.39

99.1

所述样品放置12个月后各项指标检测结果：

表3样品各项指标检测结果(放置12个月后)

所述样品放置24个月后各项指标的检测结果：

表4样品各项指标检测结果(放置24个月后)

长期稳定性实验结果见表1～4，可以看出：本发明提供的冻干粉针剂符合各项国家标准的规定，长时间放置后稳定性高，含量、有关物质、澄明度等各项指标变化均不明显，贮藏时间可比现有粉针剂显著延长。

虽然上文中已经用一般性说明、具体实施方式及实验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (5)

1.一种含三磷酸腺苷辅酶胰岛素化合物药物组合物，其由以下比例的成分组成：三磷酸腺苷15～25mg、辅酶A 40～60单位、胰岛素3～5单位、精氨酸4～8mg、低分子右旋糖酐3～7mg，NaOH 2～4mg。 

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其由以下比例的成分组成：三磷酸腺苷20mg、辅酶A 50单位、胰岛素4单位、精氨酸6mg、低分子右旋糖酐5mg，NaOH 3mg。 

3.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物为冻干粉。 

4.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其特征在于，所述低分子右旋糖苷为右旋糖酐40。 

5.制备权利要求1～4任一项所述药物组合物的方法，其包括如下步骤： 

1)将低分子右旋糖酐用注射用水溶解，加入针用活性炭，煮沸，冷却至50～55℃，加入精氨酸，搅拌溶解，过滤除炭，冷却，加入三磷酸腺苷，搅拌溶解，得溶液1)； 

2)另取注射用水用盐酸调节pH至4.8～5.2，加入辅酶A，搅拌溶解，得溶液2)； 

3)取NaOH用适量注射用水溶解，控制pH9.5～10.0，加入胰岛素，搅拌溶解，得溶液3)； 

4)将溶液1)、溶液2)和溶液3)混合，加注射用水至全量，再经除菌滤器过滤至储罐，半成品检验合格后，分装入瓶； 

5)将分装好的半成品置于冷冻干燥机制品室板层，4小时降温至-45℃，并于-45℃保温4小时，开启捕水器制冷开关，于预冻保温结束后，开启真空泵，当真空泵读数降至20帕以下时，按10℃/h逐渐升高板层温度至-4℃，保温4小时，升温至0℃继续保温2小时，当制品温度与板层温度接近时，继续升高板层温度至30℃并保温2小时，当制品温度与板层温度接近时结束冻干。