CN102895326A - 一种治疗小儿感冒的中药组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗小儿感冒的中药组合物及其制备方法。该组合物由下述质量份的原料制成：柴胡4-36份、黄芩2-18份、板蓝根4-36份、葛根2-18份、金银花2-20份、水牛角1-9份、连翘2-22份和大黄1-9份。制备方法如下：柴胡、金银花、连翘蒸馏提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集；水牛角加水煎煮后，再与柴胡等三味的药渣及其余四味药共煎煮，收集煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并，浓缩，放冷，加乙醇使含醇量达50％-80％，搅匀，静置，取上清液，浓缩至适量，与挥发油合并，即得。临床观察感冒发热患儿518例，总有效率为95.9％，对外感风热型疗效最佳，能治疗多种病毒所致的外感高热，能缩短退热时间，无毒、副作用。

Description

一种治疗小儿感冒的中药组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种治疗小儿感冒的中药组合物及其制备方法。

背景技术

小儿外感(感染性)高热属儿科急症范畴，其发病率占儿科疾病的首位，约占门诊人数的60％以上，对小儿的健康威胁很大。过去治疗小儿常见感染性高热多用四环素族及氨基比林、安替比林、复方安乃近片等药物，而这些药物均在卫生部一九八二年公布淘汰的127种药物之中。因此，目前治疗小儿感染性高热则用磺胺类和昂贵的抗生素及A、P、C片等。又鉴于小儿上呼吸道感染90％以上由病毒引起，用抗生素疗效不佳，目前尚无理想的化学药品治疗，人们寄希望于中医中药，迫切要求迅速研制出新型的治疗外感(感染性)高热的高效且便于临床应用的理想药物。

发明内容

本发明的目的是提供一种治疗小儿感冒的中药组合物及其制备方法。

本发明所提供的中药组合物由下述质量份的原料制成：柴胡4-36份、黄芩2-18份、板蓝根4-36份、葛根2-18份、金银花2-20份、水牛角1-9份、连翘2-22份和大黄1-9份。

所述柴胡的质量份具体可为4-36份、10-30份、16-24份；所述黄芩的质量份具体可为2-18份、5-15份、8-12份；所述板蓝根的质量份具体可为4-36份、10-30份、16-24份；所述葛根的质量份具体可为2-18份、5-15份、8-12份；所述金银花的质量份具体可为2-20份、5-17份、9-14份；所述水牛角的质量份具体可为1-9份、2-8份、4-6份；所述连翘的质量份具体可为2-22份、6-18份、9-14份；所述大黄的的质量份具体可为1-9份、2-8份、4-6份。

所述中药组合物可进一步由如下原料制成：柴胡10-30份、黄芩5-15份、板蓝根10-30份、葛根5-15份、金银花5-17份、水牛角2-8份、连翘6-18份和大黄2-8份。

所述中药组合物更进一步由如下原料制成：柴胡16-24份、黄芩8-12份、板蓝根16-24份、葛根8-12份、金银花9-14份、水牛角4-6份、连翘9-14份和大黄4-6份。

最优选的原料组成为：柴胡20份、黄芩10份、板蓝根20份、葛根10份、金银花11份、水牛角5份、连翘12份和大黄5份。

制成本发明药物组合物的各原料药是按照质量份作为配比，在生产时可按照相应的比例增大或减少，如大规模生产可以以公斤或以吨为单位，小规模生产也可以以克为单位，重量可以增大或减小，但各组成之间的原料药质量配比比例不变。

本发明所提供的中药组合物是按照包括下述步骤的方法制备的：

1)将柴胡、金银花、连翘三味药混合后，采用蒸馏法提取挥发油，收集挥发油、蒸馏后的水溶液及药渣；

2)先将水牛角加水单独煎煮2-4小时，再将水牛角药渣及煎煮液与步骤1)所述药渣及其余黄芩、板蓝根、葛根、大黄四味药共同煎煮，收集煎液；

3)将步骤1)得到的蒸馏后的水溶液与步骤2)得到的煎液合并，浓缩成清膏，放冷，然后在所述清膏中加入乙醇使其体积含量达到50％-80％，搅匀，静置，取上清液，回收乙醇并浓缩至适量，与步骤1)得到的挥发油合并，即得到所述中药组合物。

该中药组合物药液可以直接服用或者加入适量矫味剂和/或纯净水制成合剂或口服液。

其中，步骤1)所述蒸馏法(水蒸汽蒸馏法)中，所加入的水量通常为柴胡、金银花和连翘药材总质量的5-10倍，加入水后浸渍20-60分钟，再加热蒸馏。

步骤2)所述单独煎煮中，所加入的水量为水牛角质量的8-12倍(通常条件为加10倍量水，煎煮3小时)。所述共同煎煮可进行1-3次，每次煎煮的时间为1-3小时，每次煎煮所加入的水量为八味药材总质量的5-8倍。

步骤3)中所述清膏为85℃测定的相对密度为1.20-1.25的清膏。所述静置的时间可为24-72小时。

为了进一步得到固态的药物，所述方法还包括：将所述中药组合物浓缩成稠膏，干燥，粉碎，过80-120目筛，得到中药组合物粉末的步骤。

本发明中所使用的药材均为净制后的药材。

本发明的再一个目的是提供所述中药组合物的应用。

本发明所提供的中药组合物的应用是其在制备治疗小儿感冒的药物中的应用。所述小儿外感冒的症状包括：高热、头痛、咽喉肿痛、鼻塞流涕、咳嗽、大便干结。

以本发明所提供的中药组合物为活性成分制成的药物也属于本发明的保护范围。通过上述过程制备得到的药液和药粉，直接或者加入辅料，可制成任何药学上可接受的剂型，例如合剂、口服液、糖浆剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂、丸剂、滴丸剂、等。上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。

以制备合剂为例，将本发明方法制备中药组合物药液加入适量矫味剂，调节pH值为4.5～7.0，并加水稀释至1000ml(含量0.233-2.092g生药/ml)，混匀，静置，滤过，灌装，灭菌，即得。用法与用量：口服。一岁以内一次2.5～5ml，一岁至三岁一次5～10ml，三岁至七岁一次10～15ml，七岁至十二岁一次15～20ml，一日3～4次。

祖国医学认为，小儿脏腑娇嫩，形气未充，腠理疏薄，卫外不固，易为外邪所侵，故小儿罹患外感高热者颇多。且小儿乃“纯阳之体”，阳常有余，阴常不足，感邪之后，易从热化，而现壮热、口渴、面赤、唇红等证候。即使外感风寒，也常因寒郁肌腠而化热；外邪极易伤脾，脾伤则运化失健，致乳食停滞，积而化生里热。故小儿外感高热，以风热表证、表里俱热之症最为多见，据此理论以“热者寒之”的治则而立法，用清热药以治其标，解毒药以治其本，标本兼治，从而收到良好的治疗效果。

方中柴胡、葛根辛凉透表，解肌清热，黄芩苦寒解毒，泻火兼清里热，古人云“清解退热柴胡最佳，然无黄芩不能凉肌达表”，故三药共为主药；金银花、连翘清宣透表，解毒散热，板兰根苦寒解毒清热，兼能利咽候，水牛角味苦咸，性寒与犀角作用相似，能清热解毒，兼凉血分之热，共为辅药；大黄味苦性寒、能解毒行滞、泻实热为佐药；全方以辛凉苦寒为主，既能宣透清热、解肌表、又有清泄里热之功。故对小儿多种外感高热之风热表证，表里俱热等，均有较强的退热解毒作用。

临床试验证明，本发明提供的中药组合物用于临床小儿外感高热518例，最短退热时间为1小时，完全退热时间7小时，总有效率为95.9％，对外感风热型及风寒化热型均有良效，对病毒感染性及细菌感染性也均有效。

实验研究证实该药能快速退热消炎的机理大致有以下五个方面：

1、抑制多种病毒：经实验和临床研究证明，该药对流感病毒(甲₁、甲₃、乙型)、腺病毒、合胞病毒、副流感病毒及流行性腮腺炎病毒等，均有明显抑制作用。

2、增加超氧化物歧化酶的活力，从而提高机体防御系统功能。

3、增强机体免疫功能，包括细胞免疫及体液免疫。

4、直接降温、消炎作用。

5、具有良好镇咳、祛痰作用。

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明进行说明，但本发明并不局限于此。

下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述溶剂和辅料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。

下述实施例中所用的柴胡、黄芩、板蓝根、葛根、金银花、水牛角、连翘、大黄均符合《中国药典》(2010年版)一部正文各药材项下的有关规定。投料前，通过鉴定，各味药材实物与名称相符，质量符合标准。

一、制剂实施例

实施例1、制备中药组合物的合剂(口服液)

取250g柴胡、137.5g金银花、150g连翘加入3225ml水，浸渍30分钟后，加热蒸馏2小时提取得到挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集。取水牛角62.5g加625ml水煎煮3小时后，再与上述柴胡等三味的药渣及其余黄芩(125g)、板蓝根(250g)、葛根(125g)、大黄(62.5g)四味加水6975ml共同煎煮两次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并，浓缩至相对密度为1.20～1.25(85℃)，放冷，加乙醇使乙醇体积含量达65％，搅匀，静置48h，取上清液，回收乙醇，浓缩至适量，与挥发油合并，加入矫味剂，调节pH值至4.5～7.0，加水至1000ml，混匀，静置，滤过，灌装，灭菌，即得。

性状：本品为红棕色的澄清液体；气香，味甜、微苦。

实施例2、制备中药组合物的合剂(口服液)

取200g柴胡、112.5g金银花、175g连翘加入2925ml水，浸渍20分钟后，加热蒸馏2小时提取得到挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集。取水牛角50g加600ml水煎煮3小时后，再与上述柴胡等三味的药渣及其余黄芩(150g)、板蓝根(200g)、葛根(150g)、大黄(50g)四味加水8700ml共同煎煮两次，每次3小时，合并煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并，浓缩至相对密度为1.20～1.25(85℃)，放冷，加乙醇使乙醇体积含量达50％，搅匀，静置72h，取上清液，回收乙醇，浓缩至适量，与挥发油合并，加入矫味剂，调节pH值至4.5～7.0，加水至1000ml，混匀，静置，滤过，灌装，灭菌，即得。

性状：本品为红棕色的澄清液体；气香，味甜、微苦。

实施例3、制备中药组合物的合剂(口服液)

取300g柴胡、175g金银花、112.5g连翘加入3525ml水，浸渍30分钟后，加热蒸馏2小时提取得到挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集。取水牛角75g加750ml水煎煮3小时后，再与上述柴胡等三味的药渣及其余黄芩(100g)、板蓝根(300g)、葛根(100g)、大黄(75g)四味加水6187.5ml共同煎煮1小时，滤过，滤液与上述水溶液合并，浓缩至相对密度为1.20～1.25(85℃)，放冷，加乙醇使乙醇体积含量达80％，搅匀，静置24h，取上清液，回收乙醇，浓缩至适量，与挥发油合并，加入矫味剂，调节pH值至4.5～7.0，加水至1000ml，混匀，静置，滤过，灌装，灭菌，即得。

性状：本品为红棕色的澄清液体；气香，味甜、微苦。

实施例4、制备中药组合物的合剂(口服液)

取125g柴胡、212.5g金银花、75g连翘加入412.5ml水，浸渍60分钟后，加热蒸馏2小时提取得到挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集。取水牛角100g加1000ml水煎煮3小时后，再与上述柴胡等三味的药渣及其余黄芩(62.5g)、板蓝根(375g)、葛根(62.5g)、大黄(100g)四味加水6675ml共同煎煮两次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并，浓缩至相对密度为1.20～1.25(85℃)，放冷，加乙醇使乙醇体积含量达65％，搅匀，静置48h，取上清液，回收乙醇，浓缩至适量，与挥发油合并，加入矫味剂，调节pH值至4.5～7.0，加水至1000ml，混匀，静置，滤过，灌装，灭菌，即得。

性状：本品为红棕色的澄清液体；气香，味甜、微苦。

实施例5、制备中药组合物的合剂(口服液)

取375g柴胡、62.5g金银花、225g连翘加入3975ml水，浸渍30分钟后，加热蒸馏2小时提取得到挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集。取水牛角25g加250ml水煎煮3小时后，再与上述柴胡等三味的药渣及其余黄芩(187.5g)、板蓝根(125g)、葛根(187.5g)、大黄(25g)四味加水7275ml共同煎煮两次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并，浓缩至相对密度为1.20～1.25(85℃)，放冷，加乙醇使乙醇体积含量达75％，搅匀，静置48h，取上清液，回收乙醇，浓缩至适量，与挥发油合并，加入矫味剂，调节pH值至4.5～7.0，加水至1000ml，混匀，静置，滤过，灌装，灭菌，即得。

性状：本品为红棕色的澄清液体；气香，味甜、微苦。

实施例6、制备中药组合物的合剂(口服液)

取50g柴胡、37.5g金银花、275g连翘加入2175ml水，浸渍30分钟后，加热蒸馏2小时提取得到挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集。取水牛角112.5g加1125ml水煎煮3小时后，再与上述柴胡等三味的药渣及其余黄芩(225g)、板蓝根(50g)、葛根(225g)、大黄(12.5g)四味加水5925ml共同煎煮两次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并，浓缩至相对密度为1.20～1.25(85℃)，放冷，加乙醇使乙醇体积含量达65％，搅匀，静置48h，取上清液，回收乙醇，浓缩至适量，与挥发油合并，加入矫味剂，调节pH值至4.5～7.0，加水至1000ml，混匀，静置，滤过，灌装，灭菌，即得。

性状：本品为红棕色的澄清液体；气香，味甜、微苦。

实施例7、制备中药组合物的合剂(口服液)

取450g柴胡、250g金银花、25g连翘加入3625ml水，浸渍30分钟后，加热蒸馏2小时提取得到挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集。取水牛角12.5g加125ml水煎煮3小时后，再与上述柴胡等三味的药渣及其余黄芩(25g)、板蓝根(450g)、葛根(25g)、大黄(112.5g)四味加水8100ml共同煎煮两次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并，浓缩至相对密度为1.20～1.25(85℃)，放冷，加乙醇使乙醇体积含量达65％，搅匀，静置24h，取上清液，回收乙醇，浓缩至适量，与挥发油合并，加入矫味剂，调节pH值至4.5～7.0，加水至1000ml，混匀，静置，滤过，灌装，灭菌，即得。

性状：本品为红棕色的澄清液体；气香，味甜、微苦。

实施例8、制备中药组合物的片剂

取250g柴胡、137.5g金银花、150g连翘加入5375ml水，浸渍30分钟后，加热蒸馏2小时提取得到挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集。取水牛角62.5g加625ml水煎煮3小时后，再与上述柴胡等三味的药渣及其余黄芩(125g)、板蓝根(250g)、葛根(125g)、大黄(62.5g)四味加水6975ml共同煎煮两次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并，浓缩至相对密度为1.20～1.25(85℃)，放冷，加乙醇使乙醇体积含量达65％，搅匀，静置48h，取上清液，回收乙醇，并浓缩成相对密度为1.15～1.35的稠膏，干燥、粉碎，得药物粉末(过100目筛)，将挥发油用淀粉吸附，并与上述药物粉末混匀，制粒，加硬脂酸镁，混匀，压片，包糖衣或薄膜衣，得片剂。

二、药效学实验

实施例9、动物体内药效学试验

采用实施例1样品进行动物体内药效学试验。

一、解热作用：

1实验材料及来源

样品：实施例1制备的中药组合物合剂。

阳性对照药：复方氨基比林注射液。郑州市黄河制药厂生产。

空白对照药：生理盐水。

致热源：啤酒酵母混悬液。由郑州啤酒厂提供。实验前将该菌液抽滤至干，然后用0.5％CMC-Na配制成10％的混悬液供实验用。

实验动物：健康雌性家兔1.8±0.3kg，购自河南医科大学实验动物中心。

2实验方法

取家兔12只，随机分为四组，每组三只，实验室温度20-25℃。实验前测量家兔肛温7次，将一天内所测7次体温的平均值作为家兔正常体温。以平均值作为正常体温，然后给家兔肌注配好的致热原0.8ml/kg。待动物体温升高达1℃后，分别立即给药，甲组为中药组合物合剂高剂量组，灌胃16g生药/kg；乙组为中药组合物合剂低剂量组，灌胃10g生药/kg；丁组为生理盐水，灌同量，三组均按8ml/kg容积灌胃10g/kg，不足者以生理盐水稀释补够，丙组为复方氨基比林，肌注1ml/kg，然后每隔1小时测量肛温依次，连续测量7小时。

3实验结果

复方氨基比林组，1小时后动物体温下降到正常，作用维持仅2个小时，第4小时体温即升到给药前水平，但中药组合物合剂组灌胃后体温于给药后1小时开始下降，2小时体温降至正常，到第6小时体温才回升，第7小时还有升高，但未达到给药前水平，与氨基比林相比，开始退热时间稍慢(可能与给药途径不同有关)，但退热作用持久。实验结果表明，中药组合物合剂高剂量灌胃给药对家兔有良好的退热作用，与生理盐水比较，在给药后第1、6、7小时有显著差异，在第2、3、4、5小时有极显著性差异；与复方氨基比林比较在第4、5、6小时有极显著性差异，第7小时有显著性差异，中药组合物合剂低剂量灌胃与生理盐水比较，在给药第2小时有显著差异，在第3、4小时有极显著差异，但体温并未能恢复到正常，证明以中药组合物合剂高剂量组为优。具体数据见表1。

表1、两种药物解热作用比较表(平均值±标准差)

注：1、括号内的数字表示温度变化值＝致热后体温-不同时间体温；2、*表示与空白对照组比较：*表示P＜0.05，**表示P＜0.01；3、△表示与氨基比林比较：△表示P＜0.05，△△表示P＜0.01；4、下表与此同。

二、抗炎作用(对小白鼠耳壳二甲苯致肿的抑制作用)

1实验材料及来源

样品：实施例1制备的中药组合物合剂。

阿司匹林：南京第二制药厂

生理盐水

实验动物：昆明种小白鼠体重20±2g，购自河南医科大学实验动物中心。

2实验方法

取小鼠40只，雌雄各半，随机分成4组。甲组灌中药组合物合剂20g/kg，乙组灌中药组合物合剂40g/kg，丙组灌阿司匹林0.1g/kg，丁组灌生理盐水，灌胃量均为0.5ml，连续7天，于最后一次灌胃1小时后，将0.03ml二甲苯滴于右侧耳壳上，滴后2小时剪下耳壳，左侧为对照，然后用直径6mm打孔器取下耳边称重。

3实验结果

中药组合物合剂高剂量组与阿司匹林灌胃均能显著抑制二甲苯的致炎作用，低剂量组与生理盐水组相比有显著差异(P＜0.05)，与阿司匹林相比其抗炎作用无显著性差异。高剂量组与生理盐水相比，有极其显著性差异(P＜0.01)；与阿司匹林组相比有显著差异(P＜0.05)。具体数据见表2。

表2二种药物对小鼠耳壳二甲苯致肿抑制作用的比较

组别	炎症肿胀度(X±SD)mg	抑制率(％)
			空白对照组	15.3±1.8
阿司匹林组	9.2±1.1	39.9
			中药组合物低剂量组	9.0±1.0	41.2*
中药组合物高剂量组	7.1±1.0	53.6**△

三、抑制病毒作用

1实验材料及来源

试验样品：实施例1制备的中药组合物合剂。

阳性对照药：小儿清热解毒口服液，每毫升含生药为1.5g。由洛阳民生制药厂生产。

生理盐水：500毫升瓶装，由郑州化学制药厂生产。

毒种：甲₁/京防86-1、乙/京防87-9，甲₃/京防79-2均由中国医学科学院病毒研究所提供。

鸡胚：京白III系种蛋，由郑州市种鸡厂提供，放38℃温箱孵育10日胚龄鸡胚。

2、实验方法

2.1毒种毒力提高：将三种毒种(甲₁、甲₃、乙型)分别稀释三个不同浓度，加青霉素1000U、链霉素1000μg/ml，以下简称双抗。分别接种10日鸡胚尿囊腔，每个鸡胚0.2ml，每个浓度4个鸡胚，放35℃温箱培养72小时，除去24小时内非特异性死亡的鸡胚。放4℃冰箱过夜，次日收获尿囊液，测定血凝效价。均在无菌条件下进行。按照上述方法和过程进行三次传代，提高恢复病毒的活性和毒力。

2.2测定毒种ID₅₀：将三种毒种分别稀释9个不同浓度，分别接种10日龄鸡胚，每一稀释浓度5个鸡胚，每个鸡胚注入尿囊腔0.2ml。放35℃温箱培养72小时，除去24小时内非特异性死亡的鸡胚。放4℃冰箱过夜，次日收获尿囊液，测定血凝定性，计算出ID₅₀，分别为甲₁ 10^-3、甲₃ 10^-6、乙型10^-5。

2.3药物无毒限量及耐受量测定：将试验样品和小儿清热解毒口服液分别用3个不同浓度和剂量，分别加双抗各1000U和1000μg/ml，每个浓度和剂量组5个鸡胚，放38℃温箱培养72小时，除去24小时内非特异性死亡的鸡胚，观察其存活数，得出药物无毒限量和最大限量(最大限量为0.5ml，无毒限量(-))。用最大限量的低于1/2量为应用量。

2.4分组

(1)直接抑制作用：用小儿清热解毒口服液作为本发明中药组合物合剂的阳性对照组，将两种药物分别直接和三种病毒1∶1在试管内混合后，放35℃温箱1小时后，置4℃冰箱过夜，取尿囊液作血凝测定，均在无菌条件下进行。在同等条件下另设病毒加生理盐水作空白对照，每组5个。

(2)预防作用(鸡胚先注射药物后攻击病毒)：将两种药物分别注入10日龄鸡胚的卵黄囊内，每个0.2毫升，放38℃温箱1小时，同时设生理盐水加病毒空白对照组。放35℃温箱培养48小时，取出放4℃冰箱过夜，取尿囊液测血凝效价。

(3)治疗作用(鸡胚先攻击病毒后注射药物)：先将100 ID₅₀的病毒分别接种鸡胚尿囊腔内，每个0.2ml，放35℃温箱1小时，然后注射药物0.2ml于卵黄囊内，放35℃温箱48小时，取出放4℃冰箱过夜，抽取尿囊液测血凝效价。同等条件下设病毒加生理盐水作空白对照组。

3、结果

3.1直接抑制作用：试验样品对100 ID₅₀和1000 ID₅₀甲₁、甲₃、乙型三种流感病毒在鸡胚内繁殖的影响，测得血凝效价结果见表3、4。

表3中药组合物合剂对直接抑制100 ID₅₀的三种流感病毒作用血凝效价

n＝5	甲1	甲3	乙型
				空白对照组	1∶970.06	1∶278.58	1∶242.57
中药组合物合剂	1∶21.01△△*	-△△	-△△
				阳性对照组	1∶201.91	-	-

注：(1)空白对照组为流感病毒加生理盐水。(2)表中血凝效价均为均值。(3)△为中药组合物合剂或阳性对照组与空白对照组比，有显著性差异P＜0.05.(4)△△为中药组合物合剂或阳性对照组与空白对照组比，有极显著性差异P＜0.01。(5)*为中药组合物合剂与阳性对照组比较，有显著性差异P＜0.05.(6)**为中药组合物合剂与阳性对照组比较，有极显著性差异P＜0.01。(下表均同)

表4、提高毒力后中药组合物合剂对1000 ID₅₀三种流感病毒在鸡胚内的繁殖影响

n＝5	甲1	甲3	乙型
				空白对照组	1∶538.17	1∶403.81	1∶2560
中药组合物合剂	1∶5.02△△	1∶15.92△△**	1∶67.27△△*
				阳性对照组	1∶66.60	1∶403.81	1∶452.55

3.2预防作用：中药组合物合剂对100 ID₅₀甲₁、甲₃、乙型三种流感病毒在鸡胚内繁殖的影响，结果见表5。

表5中药组合物合剂预防作用对100 ID₅₀的三种流感病毒在鸡胚内繁殖的影响

n＝5	甲1	甲3	乙型
				空白对照组	1∶278.57	1∶175.7	1∶201.91
中药组合物合剂	1∶2.40△△*	1∶9.15△△	1∶13.26△△*
				阳性对照组	1∶12.61	1∶31.85	1∶175.77

3.3治疗作用：中药组合物合剂对100 ID₅₀三种流感病毒在鸡胚内繁殖的影响，结果见表6。

表6中药组合物合剂治疗作用对100 ID₅₀的三种流感病毒在鸡胚内繁殖的影响

n＝5	甲1	甲3	乙型
				空白对照组	1∶320	1∶160	1∶242.51
中药组合物合剂	1∶1.80△△*	1∶5.77△△	1∶10.51△△
				阳性对照组	1∶14.50	1∶14.50	1∶12.07

4、结论

本发明制备的中药组合物合剂在直接作用、预防作用及治疗作用方面对三种病毒在鸡胚内的繁殖均有明显的抑制作用，并优于阳性对照组。

本发明制备的中药组合物合剂与小儿清热解毒口服液，在直接作用中，对甲₃、乙型病毒均有显著抑制作用，两者无差异，血凝反应为阴性，当把三种病毒提高到1000ID₅₀后，中药组合物合剂与小儿清热解毒口服液两者抑制作用则出现了差异，以本发明制备的中药组合物合剂为优。

5、考察不同浓度中药组合物合剂对流感病毒的抑制作用

试验样品：实施例1制备的中药组合物合剂，最后加水稀释时含量分别调节为2.4g生药/ml、1.2g生药/ml、0.6g生药/ml。

实验方法同2项下。

中药组合物合剂三种不同剂量对三种流感病毒在鸡胚内的抑制作用，结果见表7。

表7不同浓度中药组合物合剂对100 ID₅₀三种病毒在鸡胚内繁殖的影响

n＝5	甲1	甲3	乙型
				中药组合物合剂2.4g/ml	1∶30△△	1∶26△△	1∶12△△
1.2g/ml	1∶384△△	1∶208△△	1∶192△△
				0.6g/ml	1∶1408	1∶896	1∶448
阳性对照组	1∶768	1∶640	1∶228
				空白对照组	1∶2048	1∶1664	1∶896

注：△为中药组合物合剂与阳性对照组比较，有显著性差异P＜0.05.△△为中药组合物合剂与阳性对照组比较，有极显著性差异P＜0.01。

由表7可知，高、中、低不同剂量其治疗作用结果表明，剂量与作用成正比，剂量增大，抑制作用增强。

四、中药组合物合剂对FM₁病毒感染小鼠保护性作用：

1实验材料及来源

试验样品：实施例1制备的中药组合物合剂。

阳性对照药：小儿清热解毒口服液，每毫升含生药为1.5g。由洛阳民生制药厂生产。

生理盐水：500毫升瓶装，由郑州化学制药厂生产。

毒种：FM₁病毒，由中国医学科学院病毒研究所提供。

动物：小白鼠，昆明封闭型，体重11±1克，雌雄各半，由河南医科大学实验动物中心提供。

2实验方法

2.1、提高FM₁病毒活性

2.2、测定FM₁病毒LD₅₀为10^-3

2.3、药物耐受量及毒理测定

2.4、动物分组：

(1)预防给药组：取30只小鼠，随机分为三组，每组10只，雌雄各半，分别灌胃中药组合物合剂、小儿清热解毒口服液和生理盐水，每只0.5ml，每天二次，连续三天，然后在麻醉下用10^-2FM，病毒滴鼻感染，每只0.04毫升感染一次，观察14天。

(2)同时给药组：取30只小鼠，随机分为三组，每组10只，雌雄各半，在麻醉下用10^-2FM病毒滴鼻感染，每只0.04毫升，感染一次，然后将三组分别灌胃中药组合物合剂、小儿清热解毒口服液及生理盐水，每只0.5ml，每天二次，连续三天，观察14天。

(3)治疗给药组：取60只小鼠在麻醉下用10^-2FM病毒滴鼻感染，每只0.04毫升感染一次，在感染一天后，将30只小鼠随机平均分为三组，雌雄各半，分别灌胃中药组合物合剂、小儿清热解毒口服液及生理盐水，每只均0.5ml，每天二次，连续三天，观察14天。在感染二天后再将另外30只小鼠随机平均分为三组，雌雄各半，然后分别灌胃中药组合物合剂、小儿清热解毒口服液及生理盐水每只均0.5ml，每天二次，连续灌胃三天，观察14天。

(4)健康空白对照组：取10只小鼠，雌雄各半在同等条件下常规饲养，观察14天。

药物保护率＝对照组小鼠死亡率-试验组小鼠死亡率。

3、结果

在各组观察14天后，计算各组小鼠的存活数和死亡数，结果见表8。

表8观察14天后各组小鼠存活数、死亡数及死亡率统计表

注：I、为中药组合物合剂；II为小儿清热解毒口服液。

4、结论

本发明制备的中药组合物合剂在预防给药组和同时给药组中对FM₁病毒感染小鼠有一定的保护作用，其保护率分别为40％、20％，而小儿清热解毒口服液在预防给药组对小鼠保护作用为20％，而在同时给药组对小鼠无保护作用，证明本发明的中药组合物合剂对感染小鼠的保护作用优于已知药对照组。

在治疗给药组中，病毒感染1天后给药组中两种药物均有保护作用，保护率均为80％，两药无差异，在感染2天后给药组中本发明的中药组合物合剂对小鼠的保护率仍为80％，而小儿清热解毒口服液为70％。这一结果证明本发明的中药组合物合剂对病程较长、感染较重的小鼠其保护作用优于已知药对照组。

5、考察不同浓度中药组合物合剂对FM₁病毒感染小鼠保护性作用

对感染FM₁病毒小鼠保护试验：取50只小鼠在麻醉下分别用10^-2FM₁病毒滴鼻感染，每只0.04ml，感染一次，在感染二天后，随机分为五组，每组10只，分别灌胃中药组合物合剂组的0.6g/ml、1.20g/ml、2.40g/ml三个不同浓度和小儿清热解毒口服液及生理盐水，每次0.5ml，每天二次，连续三天，观察14天。

空白对照组：取10只小鼠在同等条件下常规饲养，观察14天作健康空白对照。

结果：不同浓度中药组合物合剂对感染FM₁病毒小鼠观察14天后，小鼠存活数见表9。

表9不同浓度中药组合物合剂及各组对感染FM₁病毒小鼠影响观察

注：药物保护率＝对照组小鼠死亡率-试验组小鼠死亡率

由表9可以看出，中药组合物合剂组2.4g/ml保护率为80％，1.2g/ml保护率为70％，0.6g/ml保护率为40％，小儿清热解毒口服液组保护率为50％。

对FM₁病毒感染小鼠呼吸器官及免疫器官的病理观察：实验证明，实施例1制备的口服液可使感染FM₁病毒小鼠肺和气管的炎症病理改变明显减轻；对明显萎缩的胸腺皮质有预防、拮抗和治疗作用，可明显提高脾脏胸腺依赖区的淋巴细胞数。证明该药具有抗炎作用和增强细胞免疫的功能，并优于已知药物对照组。

五、中药组合物合剂体外抑菌试验：

1实验材料

试验样品1号：实施例1制备的中药组合物合剂。

2号：为1号样品稀释1倍的合剂

3号：为去糖去鞣酸口服液，2.4g生药/ml

4号：为稀释一倍去糖去鞣酸口服液。

菌株：①乙型溶血性链球菌CMCC 32204；②金黄色葡萄球菌ATCC25923

③流感嗜血杆菌ATCC10211  ④肺炎链球菌ATCC 49619

2、方法

2.1 1-4号中药作上述四种细菌培养，结果无菌生长。

2.2选用中草药抗菌作用与药物敏感试验-打孔法，孔径6mm，每孔加药液0.07ml，37℃培养24小时。

3、结果：结果判定标准中药抗菌试验生药含量为100mg时，出现抑菌环直径＞20mm为高敏，10-20mm为中敏，＜10mm为耐药。其结果见表10。

表10中药组合物合剂体外抑菌试验结果表

	1号	2号	3号	4号
					CMCC 32204	-	-	-	-
ATCC 25923	24	19	18	14
					ATCC 10211	少	-	少	-
ATCC 49619	-	-	-	-

以上结果表明，中药组合物合剂对金黄色葡萄球菌有较强的抑菌作用，即使浓度稀释一倍仍有抑菌作用，去鞣酸后虽然抑菌环缩小，但仍有抑菌作用，说明这是中药本身的抑菌效果。

六、镇咳祛痰作用：小鼠实验结果表明，高低剂量实施例1制备的口服液均具有良好的镇咳、祛痰作用。但不及磷酸可待因及远志。

七、免疫功能，观察了实施例1制备的口服液对正常小鼠脾脏及胸腺的影响，对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬红细胞的影响及对溶血素形成的影响。结果均证实，该药可以提高机体免疫功能。

实施例10、毒理实验研究

采用实施例1样品进行毒理实验研究。

1、急性毒性实验研究：结果表明小鼠对实施例1制备的口服液一日最大耐受量为500g/kg(药品浓度、给药剂量已达极限，无法再增加剂量)，为该药临床每日用量的200～300倍，可以确认该药安全、无毒。

2、长期毒性实验研究：结果表明实施例1制备的口服液以大(66g/kg)、中(39g/kg)、小(12g/kg)三种剂量连续灌胃大白鼠二个月，对大白鼠饮食、体重、活动、睡眠、血红蛋白、白细胞总数及分类、肝肾功能均无不良影响。与生理盐水对照组数据比较无显著性差异(P＞0.05)，均在正常范围内。对大白鼠脑、肝、心、脾、肺、肾及胃肠经组织学检查，亦无中毒反应性病理变化可见，其组织结构及细胞形态均属正常。证明实施例1制备的口服液长期服用，无毒、副作用。

实施例11、临床药效试验

在六个省、市级医院儿科观察腋温39℃以上重症住院或观察室患儿518例，按3∶1随机分组，治疗组391例，对照组127例。治疗组给予实施例1制备的口服液，给药剂量为：口服，一日3次，一岁以内一次3ml，一岁至三岁一次8ml，三岁至七岁一次12ml，七岁至十二岁一次18ml。对照组服给予磺胺或抗生素加退热药。

按统一诊断标准进行中、两医双重诊断，总有效率(78小时内完全退热)95.9％，痊愈率(54小时内完全退热)84.7％，与对照组(磺胺或抗生素加退热药)相比，P＜0.01。分型疗效对外感风热型及风寒化热型均有良效，尤以外感风热型明显。病因学诊断对病毒感染及细菌感染均有效，尤以病毒感染性高热明显。痊愈病例中平均开始退热时间为6.3±7.88小时，完全退热时间为27.43±14.34小时，后者明显优于对照组，P＜0.005。临床应用仅有2.3％患儿有轻度腹泻，余无其它毒、副作用。

同样，采用实施例2-7制备的口服液对腋温39℃以上重症住院或观察室患儿进行用药观察。患儿共240例，随机分为6组。给药剂量及诊断标准均同上。结果见表11。

表11、实施例2-7制备的口服液的临床效果试验

实验室检测  主要为了明确病因学诊断及探讨中药作用机理。

为了明确病因学诊断，发明人采用了多项指标综合分析的办法，即用计量诊断指数表进行定量诊断，该诊断表通过参考组条件概率的计算，最后归纳为16项指标，除性别、年龄、发病季节、临床症状及治疗效果外，还有多项化验指标，如鼻咽分泌物中脱落细胞测腺病毒及合胞病毒，上清作血凝试验，白细胞测硷性磷酸酶活性，白计分及咽拭子培养等。综合进行分析，取长补短，使诊断更切合临床实际。该计量诊断表经检验符合率为98.9％。

机体炎症过程使体内产生大量超氧自由基，由于它的一系列氧化反应，导致细胞毒性和组织损伤效应，而SOD具有清除超氧自由基损伤的作用，因此在机体抗炎症过程中具有重要意义。IgG是血清中含量最高的抗体，占免疫球蛋白总量的70％，在抗病毒、抗细菌感染中起着重要作用。实施例1制备的口服液可增加机体SOD活力，提高IgG水平，从而提高和增强机体防御力量，是该药能迅速退热消炎的重要机制。

综上所述，本发明提供的中药组合物，对外感风热型及风寒化热型均有良效，对病毒感染性及细菌感染性也均有效。能治疗多种病毒如流感病毒、腺病毒、合胞病毒等所致的高热；能提高机体超氧化物歧化酶的含量；提高机体免疫功能，从而达到快速退热消炎的目的。

Claims (10)

1.一种治疗小儿感冒的中药组合物，由下述质量份的原料制成：柴胡4-36份、黄芩2-18份、板蓝根4-36份、葛根2-18份、金银花2-20份、水牛角1-9份、连翘2-22份和大黄1-9份。

2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于：所述中药组合物由如下质量份的原料制成：柴胡10-30份、黄芩5-15份、板蓝根10-30份、葛根5-15份、金银花5-17份、水牛角2-8份、连翘6-18份和大黄2-8份；所述中药组合物更优选由如下质量份的原料制成：柴胡16-24份、黄芩8-12份、板蓝根16-24份、葛根8-12份、金银花9-14份、水牛角4-6份、连翘9-14份和大黄4-6份。

3.制备权利要求1或2所述中药组合物的方法，包括下述步骤：

1)将所述柴胡、金银花、连翘混合后，采用蒸馏法提取挥发油，收集挥发油、蒸馏后的水溶液及药渣；

2)先将水牛角加水单独煎煮2-4小时，再将水牛角药渣及煎煮液与步骤1)所述药渣、及其余黄芩、板蓝根、葛根、大黄四味药共同煎煮，收集煎液；

3)将步骤1)得到的蒸馏后的水溶液与步骤2)得到的煎液合并，浓缩成清膏，放冷，然后在所述清膏中加入乙醇使其体积含量达到50％-80％，搅匀，静置，取上清液，回收乙醇并浓缩至适量，与步骤1)得到的挥发油合并，即得到所述中药组合物。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：步骤1)所述蒸馏法中，所加入的水量为柴胡、金银花和连翘药材总质量的5-10倍。

5.根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于：步骤2)所述单独煎煮中，所加入的水量为水牛角质量的8-12倍；

所述共同煎煮进行1-3次，每次煎煮的时间为1-3小时，每次煎煮所加入的水量为八味药材总质量的5-8倍。

6.根据权利要求3-5中任一项所述的方法，其特征在于：步骤3)中所述清膏为85℃测定的相对密度为1.20-1.25的清膏；所述静置的时间为24-72小时。

7.根据权利要求3-6中任一项所述的方法，其特征在于：所述方法还包括下述步骤：将所述药物组合物浓缩成稠膏，干燥，粉碎，过80-120目筛，得到药物组合物粉末。

8.权利要求1或2所述的药物组合物在制备下述药物中的应用：1)治疗小儿外感发热型感冒的药物，2)治疗小儿风寒化热型感冒的药物。

9.一种治疗小儿感冒的药物，其活性成分为权利要求1或2所述的药物组合物。

10.根据权利要求9所述的药物，其特征在于：所述药物的剂型为任何药学上可接受的剂型；具体可为合剂、口服液、糖浆剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂、丸剂或滴丸剂。