CN103356728B

CN103356728B - 一种药物组合物及其制备方法、制剂与应用

Info

Publication number: CN103356728B
Application number: CN201310341035.7A
Authority: CN
Inventors: 刘键; 孙蓉; 谢民秀
Original assignee: Kunming Chinese Medicine Factory Co Ltd
Current assignee: Kunming Chinese Medicine Factory Co Ltd
Priority date: 2013-08-07
Filing date: 2013-08-07
Publication date: 2014-12-17
Anticipated expiration: 2033-08-07
Also published as: CN103356728A

Abstract

本发明公开了一种药物组合物及其制备方法、制剂与应用，所述的药物组合物包括原料药重量份臭灵丹草300~500份、蒲公英200~400份、千里光200~400份，经前处理、提取、混匀干燥、粉碎过筛后制备的药物组合物。所述的制备方法包括前处理、混匀干燥、粉碎过筛步骤；所述的制剂为所述的药物组合物中加入药学上接受的辅料制备成散剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸剂或蜜丸剂。本发明的应用为所述药物组合物在制备治疗流感病毒药物中的应用。方中臭灵丹草性味苦辛寒，清热解毒，消肿利咽，重用之为君药。蒲公英、千里光均为清热解毒之品，蒲公英尚可疏散风热，二者共为臣药，辅助君药共奏散风清热、解毒利咽之功。本方经研究证明，具有疗效安全可靠、毒副作用低等特点。

Description

一种药物组合物及其制备方法、制剂与应用

技术领域

本发明属于中药制备技术领域，具体涉及一种药物组合物及其制备方法、制剂与应用。

背景技术

流感病毒，即流行性感冒病毒（influenza virus），是正粘病毒科（Orthomyxoviridae）的代表种，简称流感病毒，包括人流感病毒和动物流感病毒，人流感病毒分为甲（A）、乙（B）、丙（C）三型，是流行性感冒（流感）的病原体。其中甲型流感病毒抗原性易发生变异，多次引起世界性大流行。例如1918～1919年的大流行中，全世界至少有2000万～4000万人死于流感；乙型流感病毒对人类致病性较低；丙型流感病毒只引起人类不明显的或轻微的上呼吸道感染，很少造成流行。甲型流感病毒于1933年分离成功，乙型流感病毒于1940年获得，丙型流感病毒直到1949年才成功分离。

病毒性肺炎是由多种病毒感染引起的支气管肺炎。很多病毒都能引起支气管炎,少数可引起肺炎.婴儿和儿童最常见的是呼吸道合胞病毒,腺病毒,副流感病毒,甲型和乙型流感病毒.在健康成人中,唯一常见的病毒性病原体是甲型,乙型流感病毒.有时,成人病毒性肺炎可由腺病毒,水痘-带状疱疹病毒,Epstein-Barr病毒,柯萨奇病毒和Hanta病毒引起.老年人当中重要的病原体是流感病毒,副流感病毒和呼吸道合胞病毒.细胞免疫受损的病人经常由潜伏病毒,特别是巨细胞病毒(CMV)或单纯疱疹病毒引起肺部感染.除此,大多数病毒感染是由于无免疫力的人接触带有该病原体的人所引起的。病毒侵入细支气管上皮引起细支气管炎,感染可播及肺间质和肺泡而引起肺炎.病变部位充血,有时出血；出现由单核细胞参与的强烈的炎症反应.肺泡内可含纤维蛋白,单核细胞,偶尔还有多形核白细胞.严重病例可出现透明膜.腺病毒,巨细胞病毒,呼吸道合胞病毒或水痘-带状疱疹病毒可以看到具特征性的细胞内病毒包涵体。因此，开发一种用于制备治疗流感病毒的药物组合物是非常必要的。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种药物组合物；第二目的在于提供所述药物组合物的制备方法；第三目的在于提供所述药物组合物的制剂；第四目的在于提供所述药物组合物在制备治疗流感病毒药物中的运用。

本发明的第一目的是这样实现的，包括原料药重量份臭灵丹草300~500份、蒲公英200~400份、千里光200~400份，经前处理、提取、混匀干燥、粉碎过筛后制备的药物组合物。

本发明的第二目的是这样实现的，包括前处理、混匀干燥、粉碎过筛步骤，具体包括：

A、前处理、提取：按原料药组成配比分别进行称量，将5~25%的臭灵丹草和5~20%的千里光粉碎过20~100目筛得到药粉备用，再将剩余的75~95%的臭灵丹草和剩余的80~95%的千里光以及蒲公英通过提取、过滤、浓缩得到相对密度为1.30~1.45的浸膏备用；

B、混匀干燥：将前处理后的浸膏和药粉混匀，干燥至含水率为2~10%得到目标物初品；

C、粉碎过筛：将目标物初品粉碎过40~120目筛得到目标物。

本发明的第三目的是这样实现的，在所述的药物组合物中加入药学上接受的辅料制备成散剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸剂或蜜丸剂。

本发明的第四目的是这样实现的，所述药物组合物在制备治疗流感病毒药物中的应用。

本发明药物组合物包括臭灵丹草、蒲公英、千里光。方中臭灵丹性味苦辛寒，清热解毒，消肿利咽，重用之为君药。蒲公英、千里光均为清热解毒之品，蒲公英尚可疏散风热，二者共为臣药，辅助君药共奏散风清热、解毒利咽之功。本方经研究证明，具有疗效安全可靠、毒副作用低等特点。

附图说明

图1为本发明工艺流程图。

具体实施方式

下面结合附图对本发明作进一步的说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变换或替换，均属于本发明的保护范围。

本发明所述的药物组合物，包括原料药重量份臭灵丹草300~500份、蒲公英200~400份、千里光200~400份，经前处理、提取、混匀干燥、粉碎过筛后制备的药物组合物。

所述的原料药包括重量份臭灵丹草300~500份、蒲公英305~400份、千里光305~400份。

所述的原料药包括重量份450~500份、蒲公英305~400份、千里光305~400份。

本发明所述的药物组合物的制备方法，包括前处理、提取、混匀干燥、粉碎过筛步骤，具体包括：

C、粉碎过筛：将目标物初品粉碎过40~120目筛得到目标物。

A步骤所述的提取为煎煮法、浸渍法、渗漉法中的一种。

所述的提取为煎煮法。

所述的煎煮法为加入重量比4~20倍的水于90~100℃提取2~4次，提取时间为每次1~2h。

本发明所述药物组合物的制剂是在所述的药物组合物中加入药学上接受的辅料制备成散剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸剂或蜜丸剂。

本发明所述药物组合物的应用为所述药物组合物在制备治疗流感病毒药物中的应用。

所述的药物组合物的应用为所述药物组合物在制备治疗甲型和乙型流感病毒性肺炎药物中的应用。

实施例1

准备臭灵丹草 300 g、蒲公英200 g、千里光250 g，将臭灵丹草75 g、千里光20 g粉碎过20 目筛得到药粉；再将剩余的臭灵丹草225 g、千里光230 g和蒲公英200 g移入提取罐加入重量比12倍的80℃的热水浸渍48h，用80℃的热水以2ml/min的速度渗漉，收集漉液，浓缩成相对密度1.30~1.32的浸膏；将浸膏和药粉混合搅拌均匀，干燥至含水率为5~7%，进行粉碎过40 目筛即得目标药物组合物。

实施例2

准备臭灵丹草450 g、蒲公英360 g、千里光240 g，将臭灵丹草45 g、千里光48 g粉碎过40目筛得到药粉；再将剩余的臭灵丹草405 g、千里光292 g和蒲公英360g移入提取罐加入重量比16倍的60℃的热水浸渍48h，用60℃的热水以2ml/min的速度渗漉，收集漉液，浓缩成相对密度1.36~1.38的浸膏；将浸膏和药粉混合搅拌均匀，干燥至含水率为7~9%，进行粉碎过60目筛即得目标药物组合物。

实施例3

准备臭灵丹草400 g、蒲公英300 g、千里光300g，将臭灵丹草60 g、千里光30 g粉碎过24目筛得到药粉；再将剩余的臭灵丹草340 g、千里光270g和蒲公英300 g移入提取罐加入重量比8 倍的水于95℃煎煮提取3次，每次2h，过滤，合并滤液并浓缩成相对密度1.39~1.41的浸膏；将浸膏和药粉混合搅拌均匀，干燥至含水率为3~5%，进行粉碎过80目筛即得目标药物组合物。

实施例4

准备臭灵丹草350 g、蒲公英400 g、千里光200 g，将臭灵丹草28 g、千里光40 g粉碎过100目筛得到药粉；再将剩余的臭灵丹草322 g、千里光160 g和蒲公英400g移入提取罐加入重量比5倍的水于100℃煎煮提取4次，每次1h，过滤，合并滤液并浓缩成相对密度1.38~1.40的浸膏；将浸膏和药粉混合搅拌均匀，干燥至含水率为4~6%，进行粉碎过120 目筛即得目标药物组合物。

实施例5

准备臭灵丹草500 g、蒲公英250 g、千里光400 g，将臭灵丹草25 g、千里光60 g粉碎过50目筛得到药粉；再将剩余的臭灵丹草475 g、千里光340 g和蒲公英250 g移入提取罐加入重量比12倍的水于90℃煎煮提取3次，每次1h，过滤，合并滤液并浓缩成相对密度1.42~1.44的浸膏；将浸膏和药粉混合搅拌均匀，干燥至含水率为6~8%，进行粉碎过100目筛即得目标药物组合物。

实施例6

准备臭灵丹草300g、蒲公英350g、千里光400 g，将臭灵丹草45 g、千里光20 g粉碎过80 目筛得到药粉；再将剩余的臭灵丹草255 g、千里光380 g和蒲公英350 g移入提取罐加入重量比10倍的水于95℃煎煮提取3次，每次1.5h，过滤，合并滤液并浓缩成相对密度1.43~1.45的浸膏；将浸膏和药粉混合搅拌均匀，干燥至含水率为2~4%，进行粉碎过80 目筛即得目标药物组合物。

实施例7

取实施例1制备的药物组合物装袋成为散剂。

实施例8

取实施例2制备的药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成片剂。

实施例9

取实施例3制备的药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成胶囊剂。

实施例10

取实施例4制备的药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成颗粒剂。

实施例11

取实施例5制备的药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成滴丸剂。

实施例12

取实施例5制备的药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成蜜丸剂。

实施例13

以实施例3的药物组合物进行试验，其结果如下：

一、体外抗病毒实验

1.1本发明药物组合物对MDCK细胞的毒性

取药物组合物用DMEM培养基配成10 mg/mL的原液，用维持液对倍稀释成6个浓度；利巴韦林配成5 mg/mL的原液，再对倍稀释成6个浓度，加到单层生长狗肾传代细胞(MDCK细胞)的96孔培养板中，100μL/孔，每稀释度3个复孔，同时设空白对照。将96孔培养板置于37℃、5%CO₂培养箱中培养，每天观察细胞的生长情况，连续观察72小时，并用MTT法测定细胞存活率，确定细胞不出现明显退变的最低浓度为最大无毒浓度TC0，并按Reed-Muench法计算50%毒性浓度TC₅₀，结果表明药物组合物和利巴韦林的TC₅₀分别为6.05 mg/mL和0.84 mg/mL(表1)。

表1. 本发明药物组合物和利巴韦林对MDCK细胞的影响

组别	TC₀(mg/mL)	TC₅₀(mg/mL)
			药物组合物	1.25	6.05
利巴韦林	0.157	0.84

1.2 本发明药物组合物对病毒致细胞病变（CPE）的影响

将MDCK细胞以密度为4×10⁴接种于96孔板，单层生长至培养板80%，吸弃培养液，分别接种50倍半数组织感染浓度（TCID₅₀）的甲型流感病毒和乙型流感病毒病毒液100μL，置35℃、5%CO₂培养箱中吸附2h后，吸弃病毒液，用洗液洗MDCK细胞表面2次，将细胞分为空白对照组、病毒对照组、药物组合物1.25、0.625、0.313、0.157、0.079 mg/mL 5个浓度组，利巴韦林0.16、0.080、0.040、0.020和0.010 mg/mL 5个浓度组，每组3个复孔。药物组合物和利巴韦林系列浓度组分别加入不同浓度的药液，空白对照组和病毒对照组加维持液，100μL/孔，置35℃、5%CO₂培养箱中培养72小时，每日倒置显微镜下观察细胞病变情况，按以下6 级标准判断: ( - ) 细胞正常生长，无病变出现；( ± ) 细胞病变少于整个细胞单层的10%；( + )细胞病变少于整个细胞单层的25%；( + + ) 25% ~50%细胞产生病变；( + + + ) 50% ~ 75% 细胞产生病变；( + + + + ) 75% ~ 100%细胞产生病变。根据CPE 的程度，采用Reed-Muench 法计算半数有效浓度( IC₅₀ )，计算治疗指数( T reatment Index, TI =TC₅₀ / IC₅₀) 。

结果表明药物组合物对甲型和乙型流感病毒的IC₅₀分别为0.41和0.43 mg/mL，TI分别为19.87和18.95(表2)。

表2本发明药物组合物对病毒致MDCK细胞病变的影响

二、本发明药物组合物体内抗病毒实验

2.1 药物组合物对小鼠甲型和乙型流感病毒性肺炎的保护作用

取小鼠120只，雌雄各半，体重18-22 g，随机分为六组，每组20只，即正常对照组、模型组、本发明药物组合物1.0、2.0、4.0 g/kg组和利巴韦林（60 mg/kg）组，各给药组分别给予等容0.2 %羧甲基纤维素钠（CMC-Na）、药物组合物1.12、2.24和4.48 g/kg (相当于临床用量的15、30和60倍)和利巴韦林60 mg/kg，按20 ml/kg灌胃给药，每天1次，连续7 d；给药第3天，各组小鼠乙醚麻醉下，以2LD₅₀浓度的甲型或乙型流感病毒液滴鼻感染，约0.05 mL/只，正常对照组小鼠则给予生理盐水，连续观察14天，记录感染后各组小鼠的死亡情况，计算死亡率和死亡保护率。

结果表明动物感染甲型或乙型流感病毒后，动物死亡率分别为100%和90%，给予本发明药物组合物后，2.24和4.48 g/kg（临床剂量的30倍和60倍）剂量组动物的死亡数明显减少，提示本发明药物组合物对甲型和乙型流感病毒感染有一定的抑制作用，能降低甲型和乙型流感病毒感染小鼠的死亡率(表3、4)。

表3本发明药物组合物对甲型流感病毒性肺炎小鼠死亡率的影响（x ± s，n = 10）

^* P < 0.05, ^** P < 0.01 与溶媒对照组比较(X ²-检验)；

表4本发明药物组合物对乙型流感病毒性肺炎小鼠死亡率的影响（x ± s，n = 10）

^* P < 0.05, ^** P < 0.01 与溶媒对照组比较(X ²-检验)；

2.2 对流感病毒性肺炎小鼠肺指数的抑制作用

取小鼠60只，雌雄各半，体重18-22 g，随机分为六组，每组20只，即正常对照组、模型组、本发明药物组合物1.0、2.0、4.0 g/kg组和利巴韦林（60 mg/kg）组，各给药组分别给予等容0.2 %羧甲基纤维素钠（CMC-Na）、本发明药物组合物1.12、2.24和4.48 g/kg (相当于临床用量的15、30和60倍)和利巴韦林60 mg/kg，按20 ml/kg灌胃给药，每天1次，连续5 d；给药第3天，各组小鼠乙醚麻醉下，以2LD₅₀浓度的流感病毒液滴鼻感染，约0.05 mL/只，正常对照组小鼠则给予生理盐水。第5天脱颈处死动物，取肺称重，计算肺指数及抑制率。

结果表明感染甲型或乙型流感病毒后，动物肺脏明显充血、肿大，肺指数与正常对照组相比，差异有统计学意义(P<0.05)，给予实施例3的药物组合物后，2.24和4.48 g/kg（临床剂量的30倍和60倍）剂量组动物的肺指数明显降低，与模型对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)(表5、6)，提示本发明药物组合物对甲型和乙型流感病毒感染有一定的抑制作用，能降低甲型和乙型流感病毒感染小鼠的肺指数。

表5 本发明药物组合物对甲型流感病毒性肺炎小鼠肺指数的影响（x ± s，n = 10）

^* P < 0.05, ^** P < 0.01 与溶媒对照组比较(t-检验).

表6 本发明药物组合物对乙型流感病毒性肺炎小鼠肺指数的影响（x ± s，n = 10）

^* P < 0.05, ^** P < 0.01 与溶媒对照组比较(t-检验).

实施例14

分别以实施例1、2、4、5、6的药物组合物进行试验，试验方法与实施例13相同，结果均表明感染甲型或乙型流感病毒后，动物肺脏明显充血、肿大，肺指数与正常对照组相比，差异有统计学意义(P<0.05)，分别给予实施例1、2、4、5、6的药物组合物后，临床剂量的30倍和60倍组动物的肺指数均明显降低，与模型对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)，提示本发明药物组合物对甲型和乙型流感病毒感染有一定的抑制作用，能降低甲型和乙型流感病毒感染小鼠的肺指数。

Claims

1.一种药物组合物在制备治疗乙型流感病毒性肺炎药物中应用，其特征在于原料药为重量份臭灵丹草300~500份、蒲公英200~400份、千里光200~400份，经前处理、提取、混匀干燥、粉碎过筛后制备的药物组合物；其制备方法具体包括：

C、粉碎过筛：将目标物初品粉碎过40~120目筛得到目标物。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于所述的原料药为重量份臭灵丹草300~500份、蒲公英305~400份、千里光305~400份。

3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于所述的原料药为重量份450~500份、蒲公英305~400份、千里光305~400份。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于A步骤所述的提取为煎煮法、浸渍法、渗漉法中的一种。

5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于所述的提取为煎煮法。

6.根据权利要求4或5所述的应用，其特征在于所述的煎煮法为加入重量比4～20倍的水于90~100℃提取2~4次，提取时间为每次1~2h。