CN101637529B

CN101637529B - 一种中药组合物在制备治疗手足口病药物中的应用

Info

Publication number: CN101637529B
Application number: CN 200810117302
Authority: CN
Inventors: 吴以岭; 王宏涛
Original assignee: Beijing Yiling Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Beijing Yiling Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2008-07-29
Filing date: 2008-07-29
Publication date: 2013-03-27
Anticipated expiration: 2028-07-29
Also published as: CN101637529A

Abstract

本发明公开了一种中药组合物在制备治疗手足口病的药物中的应用。该中药组合物是由连翘、金银花、麻黄、苦杏仁等药味组成，具有广谱抗病毒作用，并且通过有效杀灭病毒、退热、消炎，有效治疗手足口病。

Description

一种中药组合物在制备治疗手足口病药物中的应用

技术领域

本发明涉及一种中药组合物的新用途，具体地，涉及一种中药组合物在制备治疗手足口病药物中的应用，属中药应用领域。

背景技术

手足口病(Hand-foot-mouth disease，HFMD)是由多种肠道病毒引起的常见传染病，以婴幼儿发病为主。大多数患者症状轻微，以发热和手、足、口腔等部位的皮疹或疱疹为主要特征。少数患者可并发无菌性脑膜炎、脑炎、急性弛缓性麻痹、呼吸道感染和心肌炎等，个别重症患儿病情进展快，易发生死亡。少年儿童和成人感染后多不发病，但能够传播病毒。引起手足口病的肠道病毒包括肠道病毒71型(EV71)和A组柯萨奇病毒(CoxA)、埃可病毒(Echo)的某些血清型。EV71感染引起重症病例的比例较大。肠道病毒传染性强，易引起暴发或流行。

其症状表现为：急性起病，发热，手掌或脚掌部出现斑丘疹和疱疹，臀部或膝盖也可出现皮疹。皮疹周围有炎性红晕，疱内液体较少；口腔粘膜出现散在的疱疹，疼痛明显。部分患儿可伴有咳嗽、流涕、食欲不振、恶心、呕吐和头疼等症状。

手足口病是全球性传染病，世界大部分地区均有此病流行的报道。1957年新西兰首次报道该病。1958年分离出柯萨奇病毒，1959年提出手足口病命名。早期发现的手足口病的病原体主要为Cox A16型，1969年EV71在美国被首次确认。此后EV71感染与Cox A16感染交替出现，成为手足口病的主要病原体。

我国于1981年上海首次报道本病，此后，北京、河北、天津、福建、吉林、山东、湖北、青海和广东等10几个省份均有本病报道。1983年天津发生Cox A16引起的手足口病暴发，5-10月间发生了7000余病例。经过2年低水平散发后，1986年再次暴发。1995年武汉病毒研究所从手足口病人中分离出EV71，1998年深圳市卫生防疫站也从手足口病患者标本中分离出EV71。

手足口病流行无明显的地区性。一年四季均可发病，以夏秋季多见，冬季的发病较为少见。该病流行期间，可发生幼儿园和托儿所集体感染和家庭聚集发病现象。肠道病毒传染性强、隐性感染比例大、传播途径复杂、传播速度快，在短时间内可造成较大范围的流行，疫情控制难度大。人是肠道病毒唯一宿主，患者和隐性感染者均为本病的传染源。肠道病毒主要经粪-口和/或呼吸道飞沫传播，亦可经接触病人皮肤、粘膜泡疹液而感染。是否可经水或食物传播尚不明确。发病前数天，感染者咽部与粪便就可检出病毒，通常以发病后一周内传染性最强。

病人粪便、疱疹液和呼吸道分泌物及其污染的手、毛巾、手绢、牙杯、玩具、食具、奶具、床上用品、内衣以及医疗器具等均可造成本病传播。

人对肠道病毒普遍易感，显性感染和隐性感染后均可获得特异性免疫力，持续时间尚不明确。病毒的各型间无交叉免疫。各年龄组均可感染发病，但以≤3岁年龄组发病率最高。[手足口病预防控制指南(2008年版)]

对于手足口病的治疗原则主要对症处理为主。在患病期间，应加强患儿护理，做好口腔卫生，食物以流质及半流质等为宜。因手足口病可合并心肌炎、脑炎、脑膜炎等，故应及时到医疗机构和疾控机构就诊、复查进行检测，患者一般可完全康复。目前尚无特殊的治疗药物与方法。

本发明是在第03143211.5号的基础上进行的改进发明，在此全文引用该专利文件记载的内容。上述专利未公开该中药组合物在治疗手足口病中的应用。本发明在其基础上进行了相关研究，提供了该中药组合物在制备治疗手足口病药物中的应用。

发明内容

本发明涉及一种中药组合物的新用途，具体地，涉及一种中药组合物在制备治疗手足口病药物中的应用。

优选的，所治疗的手足口病为肠道病毒71型引起的手足口病。

优选的，本发明中药组合物涉及在制备抗肠道病毒71型药物中的应用。

本发明所述中药可以被有相同或相似功效的中药代替，并且这些药材均可按照《全国中药炮制规范》或《中药大辞典》进行炮制。

本发明目的是提供一种中药组合物在制备治疗手足口病药物中的应用，所述中药组合物由如下重量份的原料药制成：

连翘 200-300 金银花 200-300 板蓝根 200-300 大黄 40-60

广藿香 60-100 绵马贯众 200-300 红景天 60-100 薄荷脑 5-9

麻黄 60-100 苦杏仁 60-100 鱼腥草 200-300 甘草 60-100

石膏 200-300。

优选地，该中药组合物由如下重量份的原料药制成：

连翘 200 金银花 300 板蓝根 200 大黄 60 广藿香 60

绵马贯众 300 红景天 60 薄荷脑 9 麻黄 60 苦杏仁 100

鱼腥草 200 甘草 100 石膏 200。

或：

连翘 300 金银花 200 板蓝根 300 大黄 60 广藿香 100

绵马贯众 200 红景天 60 薄荷脑 5 麻黄 100 苦杏仁 60

鱼腥草 300 甘草 60 石膏 300。

或：

连翘 255 金银花 255 板蓝根 255 大黄 51 广藿香 85

绵马贯众 255 红景天 85 薄荷脑 7.5 麻黄 85 苦杏仁 85

鱼腥草 255 甘草 85 石膏 255。

优先地，所述中药组合物所用原料药中，麻黄为蜜麻黄，苦杏仁为炒苦杏仁。

本发明还提供了所述中药组合物的活性成分由以下步骤制成：

(1)按照原料药重量比例称取中药材，净选；

(2)广藿香碎断，加8-10倍量水提取挥发油，提油时间4小时，收集挥发油，备用；提取液过滤后，残渣弃去，滤液备用；

(3)连翘、麻黄、鱼腥草、大黄，用6-10倍量50-90％的乙醇提取2次，每次1-3小时，提取液合并过滤，回收乙醇，滤液备用；

(4)金银花、石膏、板蓝根、绵马贯众、甘草、红景天，加7-11倍量水煎煮至沸，加入苦杏仁，煎煮2次，每次0.5-2.5小时，提取液合并过滤，所得滤液与步骤(2)广藿香提油后的滤液合并，浓缩成在60℃时测定相对密度为1.10-1.15的清膏，加入乙醇，调解至醇浓度为70％，冷藏放置，过滤，回收乙醇至无醇味，得清膏备用；

(5)将步骤(4)所得所得清膏与步骤(3)所得醇提液合并，浓缩至在60℃时测定相对密度为1.15-1.20的清膏，干燥，得干膏粉，备用；

步骤(5)所得干膏粉、步骤(2)所得挥发油与薄荷脑共同构成该中药组合物的活性成分。

本发明药物的剂型为胶囊剂、片剂、散剂、口服液、软胶囊、丸剂、酊剂、糖浆剂、栓剂、凝胶剂、喷雾剂或注射剂。

为使上述剂型能够实现，需在制备这些剂型时加入药学可接受的辅料，例如：填充剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、防腐剂、基质等。填充剂包括：淀粉、预胶化淀粉、乳糖、甘露醇、甲壳素、微晶纤维素、蔗糖等；崩解剂包括：淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠等；润滑剂包括：硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉、二氧化硅等；助悬剂包括：聚乙烯吡咯烷酮、微晶纤维素、蔗糖、琼脂、羟丙基甲基纤维素等；粘合剂包括，淀粉浆、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素等；甜味剂包括：糖精钠、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矫味剂包括：甜味剂及各种香精；防腐剂包括：尼泊金类、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸及其盐类、苯扎溴铵、醋酸氯乙定、桉叶油等；基质包括：PEG6000，PEG4000，虫蜡等(范碧亭《中药药剂学》，上海科学出版社.1997年12月第1版.各剂型记载的辅料)。

其中胶囊剂的制备方法，是由以下步骤制成：

(1)按照原料药重量比例称取中药材，净选；

(2)广藿香碎断，加5-8倍量水提取挥发油，提油时间4小时，收集挥发油，备用；提取液过滤后，残渣弃去，滤液备用；

(6)将步骤(5)所得干膏粉加入适当药学上可接受的辅料制粒；

(7)将薄荷脑、步骤(2)所得挥发油加入乙醇溶解，喷入步骤(6)所得颗粒，密闭，混匀，装入胶囊，即得。

其中颗粒剂的制备方法，是由以下步骤制成：

(1)按照原料药重量比例称取中药材，净选，酌情碎断；

(6)将步骤(5)所得干膏粉加入适当药学上可接受的辅料制粒；

(7)将薄荷脑、步骤(2)所得挥发油加入乙醇溶解，喷入步骤(6)所得颗粒，密闭，混匀，装袋，即得。

优选的颗粒剂的制备方法为：

(1)按照原料药重量比例称取中药材，净选，酌情碎断；

(2)广藿香碎断，加6倍量水提取挥发油，提油时间4小时，收集挥发油，备用；提取液过滤后，残渣弃去，滤液备用；

(3)连翘、麻黄、鱼腥草、大黄，用8倍量70％的乙醇提取2次，第一次2小时，第二次1.5小时，提取液合并过滤，回收乙醇，滤液备用；

(4)金银花、石膏、板蓝根、绵马贯众、甘草、红景天，加9倍量水煎煮至沸，加入苦杏仁、煎煮2次，第一次1.5小时，第二次1小时，提取液合并过滤，所得滤液与步骤(2)广藿香提油后的水滤液合并，浓缩成在60℃时测定相对密度为1.10-1.15的清膏，加95％乙醇，调节至醇浓度为70％，冷藏放置，过滤，回收乙醇至无醇味，得清膏滤液；

(5)将步骤(4)所得清膏滤液与步骤(3)所得醇提液合并，浓缩至在60℃时测定相对密度为1.25-1.35的稠膏，备用；

(6)将步骤(5)所得稠膏加入适当药学上可接受的辅料制粒；

本发明药物的其他剂型按比例称取原料药后，采用常规的制备方法制备，例如，范碧亭《中药药剂学》(上海科学出版社1997年12月第1版)记载的制备工艺，制成药剂学可接受的常规剂型。

本发明药物组合物通过广谱抗病毒、抗菌、消炎、有效的治疗手足口病。

实验例：

为证实本发明药物治疗手足口病的疗效，用按实施例4制得的颗粒剂(以下称本发明药物)，进行了以下试验研究：

1材料和方法

1.1细胞培养

人恶性横纹肌瘤细胞(RD-A)由中国疾病预防控制中心惠赠，含10％胎牛血清的DMEM培养液(Invitrogen公司)在37℃，5％CO₂以及饱和湿度环境中培养。

1.2本发明药物对RD-A细胞毒性的测定

细胞在96孔板长成单层后，将本发明药物配成11.48mg/ml的母液，然后按六个浓度稀释(稀释倍数分别为2，4，8，16，32，)，每孔加100μl。结合细胞病变或CCK8法，观察3-5天，药物设5个浓度进行测定，用Reed-Muench法求出对细胞无毒的最大浓度(TD₀)和半数中毒浓度(TD₅₀)。每浓度药液至少3管，重复试验3次。

1.3EV71病毒毒力测定

选择RD细胞用于病毒培养，加入10倍系列稀释的11个浓度的EV71病毒(来自中国疾病预防控制中心)培养液。适宜条件下培养后每天用倒置显微镜观察细胞病变(CPE)，用Reed-Muench法计算病毒半数感染剂量(TCID₅₀)，每浓度设4个复孔，重复实验确定EV71病毒的毒力。

1.4本发明药物对EV71的抑制作用

求出病毒的TCID₅₀和药物的TD₀后，在RD细胞模型上进行本发明药物抗EV71病毒活性筛选，适宜的培养液及培养条件培养。96孔板，细胞长成单层后，每孔加100μl(100TCID₅₀左右)病毒感染，吸附2小时后，倾出病毒。然后加入待测药物，从最大无毒浓度(TD₀)开始连续设7个浓度，每组4个孔。试验设病毒对照、细胞对照及阳性药物(利巴韦林，10mg/ml贮存液)对照。以病毒对照孔出现病变达75％以上，可终止试验。

倒置显微镜观察对细胞的致病变作用(CPE)，将给药孔与病毒对照孔进行比较。试验重复3次。

1.5用Reed-Muench法计算半数有效浓度(IC₅₀)及治疗指数(TI)TI＝半数中毒浓度(TD₅₀)/半数有效浓度(IC₅₀)，见表1、表2、表3、表4。

表1本发明药物对RD-A细胞的毒性

表2本发明药物对RD-A细胞的毒力测定

表3本发明药物体外对EV71病毒的抑制作用

^*计算所得本发明药物对EV71病毒抑制作用的半数有效浓度(IC50)为0.0786mg/ml；阳性药利巴韦林对EV71病毒抑制作用的半数有效浓度(IC50)为0.0625mg/ml。

表4本发明药物对RD-A细胞的毒性和对EV71病毒的抑制作用总表

药物	TD0(mg/ml)	TD50(mg/ml)	IC50(mg/ml)	TI值
					本发明药物	0.72	2.87	0.0786	36.51

2结果

2.1.Reed-Muench法计算得出本发明药物对RD-A细胞的最大无毒浓度(TD₀)为0.72mg/ml，半数中毒浓度(TD₅₀)为2.872mg/ml。

2.2.Reed-Muench法得出EV71病毒对RD-A细胞的TCID₅₀为10^-9。

2.3.Reed-Muench计算所得本发明药物对EV71病毒抑制作用的半数有效浓度(IC50)为0.0786mg/ml；治疗指数为36.51。

3结论

本发明药物在体外对RD-A细胞有明显抗EV71病毒的作用，可以有效治疗手足口病。

具体实施方式

实施例1：

原料药配方为：

连翘 255g 金银花 255g 板蓝根 255g 大黄 51g 广藿香85g

绵马贯众 255g 红景天 85g 薄荷脑 7.5g 蜜麻黄 85g

炒苦杏仁 85g 鱼腥草 255g 甘草 85g 石膏 255g

制备方法为：

(1)按照上述处方称取中药材，净选，酌情碎断；

(4)金银花、石膏、板蓝根、绵马贯众、甘草、红景天，加9倍量水煎煮至沸，加入苦杏仁煎煮2次，第一次1.5小时，第二次1小时，提取液合并过滤，所得滤液与步骤(2)广藿香提油后的滤液合并，浓缩成在60℃时测定相对密度为1.10-1.15的清膏，加乙醇，调节至醇浓度为70％，冷藏放置24小时，过滤，回收乙醇至无醇味，所得滤液与步骤(3)所得醇提液合并，浓缩至在60℃时测定相对密度为1.15-1.20的清膏，喷雾干燥，得干膏粉，备用；

(5)将步骤(4)所得干膏粉加入淀粉138克，用85％乙醇制粒；

(6)将薄荷脑、步骤(2)所得挥发油加入乙醇溶解，喷入步骤(5)所得颗粒，密闭，混匀，装入1000粒胶囊，即得。

实施例2：

原料药配方为：

连翘 300g 金银花 200g 板蓝根 300g 大黄 60g 广藿香 100g

绵马贯众 200g 红景天 60g 薄荷脑 5g 麻黄 100g

苦杏仁 60g 鱼腥草 300g 甘草 60g 石膏 300g

制备方法为：

(1)按照上述处方称取中药材，净选，酌情碎断；

(2)广藿香碎断，加5倍量水提取挥发油，提油时间4小时，收集挥发油，备用；提取液过滤后，残渣弃去，滤液备用；

(3)连翘、麻黄、鱼腥草、大黄，用6倍量50％的乙醇提取2次，第一次3小时，第二次1小时，提取液合并过滤，回收乙醇，滤液备用；

(4)金银花、石膏、板蓝根、绵马贯众、甘草、红景天，加7倍量水煎煮至沸，加入苦杏仁煎煮2次，第一次0.5小时，第二次2.5小时，提取液合并过滤，所得滤液与步骤(2)广藿香提油后的滤液合并，浓缩成在60℃时测定相对密度为1.10-1.15的清膏，加乙醇，调节至醇浓度为70％，冷藏放置24小时，过滤，回收乙醇至无醇味，所得滤液与步骤(3)所得醇提液合并，浓缩至在60℃时测定相对密度为1.15-1.20的清膏，喷雾干燥，得干膏粉，备用；

(5)将步骤(4)所得干膏粉加入淀粉134克，用85％乙醇制粒；

(6)将薄荷脑、步骤(2)所得挥发油加入乙醇溶解，喷入步骤(5)所得颗粒，按常规制剂方法制成片剂即得。

实施例3：

原料药配方为：

连翘 200g 金银花 300g 板蓝根 200g 大黄 60g 广藿香 60g

绵马贯众 300g 红景天 60g 薄荷脑 9g 麻黄 60g 苦杏仁 100g

鱼腥草 200g 甘草 100g 石膏 200g。

制备方法为：

(1)按照上述处方称取中药材，净选，酌情碎断；

(2)广藿香碎断，加10倍量水提取挥发油，提油时间4小时，收集挥发油，备用；提取液过滤后，残渣弃去，滤液备用；

(3)连翘、麻黄、鱼腥草、大黄，用10倍量90％的乙醇提取2次，第一次1小时，第二次3小时，提取液合并过滤，回收乙醇，滤液备用；

(4)金银花、石膏、板蓝根、绵马贯众、甘草、红景天，加11倍量水煎煮至沸，加入苦杏仁煎煮2次，第一次2.5小时，第二次0.5小时，提取液合并过滤，所得滤液与步骤(2)广藿香提油后的滤液合并，浓缩成在60℃时测定相对密度为1.10-1.15的清膏，加乙醇，调节至醇浓度为70％，冷藏放置24小时，过滤，回收乙醇至无醇味，所得滤液与步骤(3)所得醇提液合并，浓缩至在60℃时测定相对密度为1.15-1.20的清膏，喷雾干燥，得干膏粉，备用；

(5)将薄荷脑、步骤(2)所得挥发油加入乙醇溶解，喷入步骤(4)所得干膏粉，按常规制剂方法制成丸剂即得。

实施例4：

原料药配方为：

连翘 170g 金银花 170g 麻黄(炙) 57g 苦杏仁(炒)57g

石膏 170g 板蓝根 170g 绵马贯众 170g 鱼腥草 170g

广藿香 57g 大黄 34g 红景天 57g 薄荷脑 5.0g

甘草 57g

制备方法：

(一)提取工艺：

(1)按照上述处方量称取中药材，净选，酌情碎断；

(2)广藿香加6倍量水提取挥发油，提油时间4h，收集挥发油，出油率为0.33±0.05％，提取液过滤后备用，残渣弃去；

(3)连翘、炙麻黄、鱼腥草、大黄，用8倍量70％的乙醇提取2次，第一次2小时，第二次1.5小时，提取液过滤，滤液合并，回收乙醇至无醇味，备用；

(4)金银花、炒苦杏仁、石膏、板蓝根、绵马贯众、甘草、红景天，加9倍量水煎煮至沸，加入炒苦杏仁，煎煮2次，第一次1.5小时，第二次1小时，提取液过滤，滤液合并同时加入步骤(2)广藿香提油后的水溶液，浓缩成60℃测定相对密度为1.10-1.15清膏，加95％乙醇，边加边搅拌，至醇浓度70％，冷藏放置24小时，过滤，滤液回收乙醇至无醇味，与醇提液合并，浓缩至浓缩成60℃测定相对密度为1.25-1.35稠膏，备用；

(二)制剂工艺：

(5)制剂配方为：步骤(4)所得稠膏335.5g 薄荷脑5g

步骤(2)所得广藿香油0.2ml 糖粉342.5g 糊精514.0g

(6)制粒：将糖粉和糊精混合均匀，用稠膏作粘合剂制软材，14目筛网制粒，60-65℃烘干，10目筛网整粒；

(7)分装：筛出细粉适量，将薄荷脑、广藿香挥发油加入适量乙醇，溶解，喷入细粉中，混合均匀，并与颗粒混合均匀，密闭半小时，装袋，即得，以上处方可制成颗粒1000g。

Claims

1.一种中药组合物在制备治疗手足口病药物中的应用，其特征在于由下列重量份的原料药制成：

连翘200-300 金银花200-300 板蓝根200-300 大黄40-60

广藿香60-100 绵马贯众200-300 红景天60-100 薄荷脑5-9

麻黄60-100 苦杏仁60-100 鱼腥草200-300 甘草60-100

石膏200-300，所述手足口病为肠道病毒71型引起的手足口病。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于由下列重量份的原料药制成：

连翘200 金银花300 板蓝根200 大黄60 广藿香60

绵马贯众300 红景天60 薄荷脑9 麻黄60 苦杏仁100

鱼腥草200 甘草100 石膏200。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于由下列重量份的原料药制成：

连翘300 金银花200 板蓝根300 大黄60 广藿香100

绵马贯众200 红景天60 薄荷脑5 麻黄100 苦杏仁60

鱼腥草300 甘草60 石膏300。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于由下列重量份的原料药制成：

连翘255 金银花255 板蓝根255 大黄51 广藿香85

绵马贯众255 红景天85 薄荷脑7.5 麻黄85 炒苦杏仁85

鱼腥草255 甘草85 石膏255。

5.根据权利要求1-4任一项所述的应用，其特征在于所述中药组合物的活性成分由以下步骤制成：

(1)按照原料药重量比例称取中药材，净选；

(4)金银花、石膏、板蓝根、绵马贯众、甘草、红景天，加7-11 倍量水煎煮至沸，加入苦杏仁，煎煮2次，每次0.5-2.5小时，提取液合并过滤，所得滤液与步骤(2)广藿香提油后的滤液合并，浓缩成在60℃时测定相对密度为1.10-1.15的清膏，加入乙醇，调解至醇浓度为70％，冷藏放置，过滤，回收乙醇至无醇味，得清膏备用；

(5)将步骤(4)所得清膏与步骤(3)所得醇提液合并，浓缩至在60℃时测定相对密度为1.15-1.20的清膏，干燥，得干膏粉，备用；

6.根据权利要求1-4任一项所述的应用，其特征在于所述药物剂型为胶囊剂、片剂、散剂、颗粒剂、口服液、丸剂、酊剂、糖浆剂、栓剂、凝胶剂、喷雾剂或注射剂。

7.根据权利要求6所述药物胶囊剂的制备方法，其特征在于是由以下步骤制成：

(1)按照原料药重量比例称取中药材，净选；

(6)将步骤(5)所得干膏粉加入适当药学上可接受的辅料制粒；

8.根据权利要求6所述药物颗粒剂的制备方法，其特征在于是由以下步骤制成：

(1)按照原料药重量比例称取中药材，净选，酌情碎断；

(6)将步骤(5)所得干膏粉加入适当药学上可接受的辅料制粒；

9.根据权利要求6所述药物颗粒剂的制备方法，其特征在于是由以下步骤制成：

(1)按照原料药重量比例称取中药材，净选，酌情碎断；

(6)将步骤(5)所得稠膏加入适当药学上可接受的辅料制粒；

10.根据权利要求1-4任一项所述的应用，其特征在于制备抗肠道病毒71型药物中的应用。