CN102872374B

CN102872374B - 辅助肿瘤化疗的中药组合物

Info

Publication number: CN102872374B
Application number: CN2012104139974A
Authority: CN
Inventors: 李晓冰; 谢小龙; 童柱子
Original assignee: Henan University of Traditional Chinese Medicine HUTCM
Current assignee: Henan University of Traditional Chinese Medicine HUTCM
Priority date: 2012-10-24
Filing date: 2012-10-24
Publication date: 2013-12-11
Anticipated expiration: 2032-10-24
Also published as: CN102872374A

Abstract

本发明涉及辅助肿瘤化疗的中药组合物，可有效解决肿瘤患者化疗后普遍出现骨髓抑制、免疫功能低下的问题，其解决的技术方案是，该中药组合物是由重量计的：黄芪20-40g、丹参15-25g、白术12-20g、白花蛇舌草10-20g、薏苡仁20-35g、败酱草15-30g、生蒲黄9-12g、八月札9-15g、鸡内金20-35g和炮穿山甲6-12g制成，本发明在改善化疗机体骨髓抑制，提高化疗患者机体免疫力方面，疗效肯定，是辅助肿瘤化疗的药物上的创新。

Description

辅助肿瘤化疗的中药组合物

技术领域

本发明涉及医药，特别是一种辅助肿瘤化疗的中药组合物。

背景技术

恶性肿瘤严重威胁着人类的生命健康，世界各地恶性肿瘤发病率及死亡率一直呈上升趋势，在我国肿瘤死亡人数分别居城市及农村居民死因的第1位和第2位。寻找和研发有效的抗肿瘤药物，是保障人类生命健康的需要，具有重大经济和社会效益。

现代医学恶性肿瘤的治疗有手术、放疗及化疗，而化疗以合成药物为主，放化疗在杀灭肿瘤细胞的同时,对正常组织细胞也有较大的损害,而且放化疗所产生的严重副作用使病人遭受极大痛苦。主要表现在骨髓抑制；消化道反应和免疫功能低下。因此，研究既能提高化疗药物的疗效，又能减轻其毒副作用的药物显得十分重要，在此方面，中医药具有不可替代的、独特的优势。

目前，对肿瘤起减毒增效的中药制剂主要以扶正固本为原则选药组方，疗效确切。然而，循证医学研究表明，化疗后，肿瘤患者普遍出现骨髓抑制、免疫功能低下的临床体征，因此，辅助肿瘤化疗的药物的改进是目前亟需解决的问题。

发明内容

针对上述情况，为解决现有技术之缺陷，本发明之目的是提供一种辅助肿瘤化疗的中药组合物，可有效解决肿瘤患者化疗后普遍出现骨髓抑制、免疫功能低下的问题。

本发明解决的技术方案是，该中药组合物是由重量计的：黄芪20-40g、丹参15-25g、白术12-20g、白花蛇舌草10-20g、薏苡仁20-35g、败酱草15-30g、生蒲黄9-12g、八月札9-15g、鸡内金20-35g和炮穿山甲6-12g制成，其中，将黄芪、丹参、白术、白花蛇舌草、薏苡仁、败酱草、生蒲黄、八月札、鸡内金和炮穿山甲混合在一起，用蒸馏水浸泡1小时后，加黄芪、丹参、白术、白花蛇舌草、薏苡仁、败酱草、生蒲黄、八月札、鸡内金、炮穿山甲4-6倍重量的水或体积浓度为70%的乙醇煎煮2次，每次70分钟，合并2次煎煮液，过滤，浓缩至60℃时相对密度为1.16的流浸膏，即得。

采用常规制备工艺，本发明中药组合物在制备辅助肿瘤治疗的片剂、颗粒剂、胶囊剂、丸剂、口服液、糖浆剂任何一种药物中的应用。

本发明在扶正固本黄芪、白术、薏苡仁、鸡内金等方药基础上，添加活血化淤祛痰湿中药丹参、炮穿山甲、生蒲黄、败酱草，在改善化疗机体骨髓抑制，提高化疗患者机体免疫力方面，疗效肯定，是辅助肿瘤化疗的药物上的创新。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明的具体实施方式作进一步详细说明。

实施例1

该中药组合物是由重量计的：黄芪20g、丹参15g、白术12g、白花蛇舌草10g、薏苡仁20g、败酱草15g、生蒲黄9g、八月札9g、鸡内金20g和炮穿山甲6g制成，其中，将黄芪、丹参、白术、白花蛇舌草、薏苡仁、败酱草、生蒲黄、八月札、鸡内金和炮穿山甲混合在一起，用蒸馏水浸泡1小时后，加黄芪、丹参、白术、白花蛇舌草、薏苡仁、败酱草、生蒲黄、八月札、鸡内金、炮穿山甲4-6倍重量的水或体积浓度为70%的乙醇煎煮2次，每次70分钟，合并2次煎煮液，过滤，浓缩至60℃时相对密度为1.16的流浸膏，即得。

实施例2

该中药组合物是由重量计的：黄芪30g、丹参20g、白术16g、白花蛇舌草15g、薏苡仁27g、败酱草17g、生蒲黄10g、八月札12g、鸡内金27g和炮穿山甲9g制成，其中，将黄芪、丹参、白术、白花蛇舌草、薏苡仁、败酱草、生蒲黄、八月札、鸡内金和炮穿山甲混合在一起，用蒸馏水浸泡1小时后，加黄芪、丹参、白术、白花蛇舌草、薏苡仁、败酱草、生蒲黄、八月札、鸡内金、炮穿山甲4-6倍重量的水或体积浓度为70%的乙醇煎煮2次，每次70分钟，合并2次煎煮液，过滤，浓缩至60℃时相对密度为1.16的流浸膏，即得。

实施例3

该中药组合物是由重量计的：黄芪40g、丹参25g、白术20g、白花蛇舌草20g、薏苡仁35g、败酱草30g、生蒲黄12g、八月札15g、鸡内金35g和炮穿山甲12g制成，其中，将黄芪、丹参、白术、白花蛇舌草、薏苡仁、败酱草、生蒲黄、八月札、鸡内金和炮穿山甲混合在一起，用蒸馏水浸泡1小时后，加黄芪、丹参、白术、白花蛇舌草、薏苡仁、败酱草、生蒲黄、八月札、鸡内金、炮穿山甲4-6倍重量的水或体积浓度为70%的乙醇煎煮2次，每次70分钟，合并2次煎煮液，过滤，浓缩至60℃时相对密度为1.16的流浸膏，即得。

以上所述仅为本发明的最佳实施案例，对本发明而言仅仅是说明性的，而非限制性的。本专业技术人员理解，在本发明权利要求所限定的范围内可对其进行一些修改，但都将落入本发明的保护范围内。

一、本发明中药制剂临床试验资料如下：

1、资料与方法

1.1入选标准：

(1)经病理或细胞学确诊的恶性实体瘤； (2)一般行为状态(kamofsky performance sta—tus，KPS)评分≥50分； (3)预计生存期I>5个月；(4)80 L≤Hb≤110 g／L；(5)年龄≥18岁；(6) 预计有完成治疗及研究所要求的经济条件。

排除标准：(1)白血病、骨髓瘤、淋巴瘤等造血系统肿瘤患者；(2)未控制的高血压；(3)预计生存期<5个月；(4)并发慢性感染或炎症；(5)使用激素者；(6)14 d内输过血或7 d内进行过手术的患者。

1.2 一般资料：

选择2007年7月—2009年7月收治的符合入组条件的恶性实体瘤患者，主要是肺癌、胃癌、结肠癌、乳腺癌112例，入组后按1：1的比例将患者按照简单随机化的方法随机分为治疗组和对照组，见表1。

表1 治疗组和对照组临床资料的比较

1.3治疗方法

对照组：采用TA方案化疗：紫杉醇175mg/m²，静滴；阿霉素50mg/m²，静注。21天为1周期，2个周期为1个疗程。治疗组：在对照组治疗的基础上，本发明中药组合物按生药浓度0.68-1.22g/ml水煎浓缩液200ml口服，早晚各一次。2组均于1个疗程结束时评定疗效。

1.4疗效标准

根据病情进行血、尿、便常规化验和特异性指标化验，x线拍片、B超、CT等检查，观察临床症状，如血红蛋白、血小板、红细胞、白细胞、T淋巴细胞亚群、体重、咳嗽、进食、疼痛、出血、体温、呼吸、心率、胸水、肿瘤大小等，结果见表2。

表2 两组患者临床总疗效比较

1.5结论

由上述可以清楚的看出，本发明中药组合物优于对照组，有效用于辅助肿瘤化疗药物中的应用，具有实际的临床意义。

二、本发明中药制剂药理学实验如下：

建立荷小鼠动物模型，观察本发明中药制剂对肿瘤抑制率、淋巴细胞增殖、巨噬细胞吞噬功能、NO、TNF-α、血常规变化及造血祖细胞集落生成能力的影响，以此探讨本发明中药制剂的肿瘤化疗辅助作用及其机制，具体通过以下实验进行。

1.材料与方法

1.1 小鼠及肿瘤细胞

雄性Balb/c小鼠（6-8周，重20.0±2.0g）由河南医学动物实验中心提供[豫医动管（证）字第0038号]。S180细胞系，由中国中医科学院中药研究所药理室提供。

1.2药品与试剂

药品为本发明组合物，制成高、中、低三种不同浓度水煎剂。

试剂为注射用环磷酰胺(cyclophosphamide，CTX)，江苏恒瑞医药股份有限公司产品，国药准字H32020857。

1.3 动物分组及处理

实验分为生理盐水组、环磷酰胺组、本发明中药制剂高剂量组（TCM-H）、中剂量组（TCM-M）、低剂量组（TCM-L）以及不同浓度中药制剂加环磷酰胺组，每组10只。将S180腹水瘤小鼠乳白色腹水，用生理盐水稀释至2×10⁶个/mL且活细胞数大于95%，以0.2 mL接种于小鼠右腋皮下，接种肿瘤细胞第二天，不同浓度中药制剂（10，20，40g/kg）0.2ml灌胃，每天一次，连续7天。环磷酰胺组：注射用环磷酰胺按预实验结果10 mg/(kg·d)，每天1次，共7天。

1.4脾淋巴细胞的制备

取出脾脏放入盛有少量PBS液的培养皿中，用5mL注射器针芯研磨脾脏，移入离心管中，吸管吹打数次，300目尼龙布过滤，260×g离心5min收集细胞，2 mL红细胞裂解液裂解红细胞，用PBS液洗3遍。悬浮于RPMI 1640完全培养基中，实验待用。

1.5 检测指标

1.5.1 抑瘤率测定

实验结束，剥离肿瘤和脾脏，称重。肿瘤抑制率=[（生理盐水组平均肿瘤重量-治疗组平均肿瘤重量）]/生理盐水组平均肿瘤重量×100。

1.5.2 淋巴细胞增殖实验测定

调整脾淋巴细胞5×10⁶/ml接种于96孔细胞培养板，另设一组加ConA(终质量浓度为5.0μg/mL)，在饱和湿度5% CO2、37℃条件下，培养44 h，每孔加入20μLMTT溶液(5 mg/mL)，避光培养4小时，吸弃上清液，每孔加入150 μL二甲基亚砜，于酶标仪上测定波长为570 nm时的吸光度值。

1.5.3巨噬细胞吞噬功能测定

10ml冷磷酸盐缓冲液冲洗小鼠腹膜腔，收集腹膜渗出淋巴细胞，720×g，40℃离心10分钟，预冷D-Hanks液冲洗一次，96孔板每孔100ul（5×10⁶/ml）制备细胞悬液，3h后细胞贴壁，吸弃细胞上清液，各孔加入0.075%中性红（100ul/孔），孵育1h,预热D-Hanks液洗涤细胞3次(pH 7.2)，各孔加入100ul裂解液，完全混合均匀，于酶标仪上测定波长为540 nm时的吸光度值。

1.5.4 NO测定

如1.5.3描述制备腹膜渗出细胞，依照每孔1×10⁶接种于48孔板，巨噬细胞粘附于细胞培养板底部，37℃ 孵育1小时，预热D-Hanks液清洗非贴壁细胞，贴壁巨噬细胞37℃孵育48小时，收集培养上清液，细胞培养上清与等量Griess液混合，室温孵育10分钟，用NaNO₂制作标准曲线，540 nm检测NO浓度。

1.5.5 TNF-α检测

小鼠眼眶取血，600×g 离心15 min，收集动物血清，按照试剂盒说明书检测TNF-α含量。

1.5.6 血常规变化情况

于化疗后7天各组小鼠全部经目内眦眼底取血，检测血常规。

1.5.7 造血祖细胞集落生成能力检测

第七天处死小鼠，消毒后于无菌环境分离小鼠股骨，用培养液冲打骨髓细胞，参照甲基纤维素法，分别用 03534 培养基和03334 培养基培养骨髓有核细胞 ( CFU-GM ) 体系和爆式红系集落形成单位( BFU-E) 培养体系，参照试剂盒说明书，将骨髓细胞悬液和培养基以相应比例分别加入到 24 孔板，每孔 0. 5 mL，于 37 ℃、饱和湿度、5%CO2培养箱中连续培养。第7天观察计数 CFU-GM，多于 50 个细胞为一个集落;计数BFU-E，大于 50 个细胞为一个集落。

1.6 统计分析

实验结果皆以

表示，采用SPSS15.0统计软件包进行统计学分析。采用单因素方差分析（ANOVA），组间两两比较，采用LSD法检验，P＜0.05为差异有显著性。

2 结果

2.1 本发明中药制剂单独使用与环磷酰胺联合使用对S180肿瘤生长的抑制作用

中药制剂不同剂量组及中药制剂加CTX组脾指数较生理盐水组显著升高，差异有统计学意义(P＜0.05)。与生理盐水组相比，各用药组瘤重明显减轻，CTX组瘤重与生理盐水组相比有极显著差异（P＜0.01），中药制剂各剂量组与生理盐水组相比瘤重减轻，有统计学意义。CTX抑瘤率达到51.2%，中药制剂高剂量组抑瘤率达到40.7%。环磷酰胺加中药制剂高剂量组抑瘤率达到65.3%，见表3。

表3中药制剂单独使用与环磷酰胺联合使用对S180肿瘤生长的抑制作用

*P＜0.05, **P＜0.01, vs 生理盐水组; ^#P＜0.05, vs CTX组.^##P＜0.01, vs CTX组

2.2 本发明中药制剂单独使用与环磷酰胺联合使用对脾淋巴细胞增殖的影响

中药制剂中高剂量组的脾淋巴细胞增殖能力高于生理盐水组(P＜0.01)，不管有无ConA干预，中药制剂各剂量加CTX组与CTX组相比，脾淋巴细胞增殖能力显著增强，差异有统计学意义，见表4。

表4中药制剂单独使用与环磷酰胺联合使用对S180荷瘤小鼠淋巴细胞增殖作用的影响

2.3 本发明中药制剂单独使用与环磷酰胺联合使用对巨噬细胞功能的影响

与生理盐水组比较，中药制剂各剂量组巨噬细胞吞噬能力、TNF-α分泌水平显著提高，差异有统计学意义。中药制剂中高剂量组NO浓度明显增强，差异有极显著意义（P＜0.01）。

与CTX组比较，中药制剂高剂量加CTX组巨噬细胞吞噬能力、NO浓度和TNF-α分泌水平显著增强（P＜0.01），见表5。

表5 中药制剂单独使用与环磷酰胺联合使用对巨噬细胞功能的影响

*P＜0.05, **P＜0.01, vs 生理盐水组; #P＜0.05, vs CTX组. ##P＜0.01, vs CTX组

2.4 本发明中药制剂单独使用与环磷酰胺联合使用对血常规的影响

与环磷酰胺组比较，中药制剂各剂量组及中药制剂中、高剂量加环磷酰胺组均能显著提高WBC数，差异具有统计学意义；中药制剂各剂量加环磷酰胺组明显提高HB水平和PLT数量，差异有显著意义。提示本中药制剂可显著提高化疗后WBC、HB、PLT水平，见表6。

表6 中药制剂单独使用与环磷酰胺联合使用对血常规的影响

2.5 本发明中药制剂单独使用与环磷酰胺联合使用对造血祖细胞集落形成的影响

与环磷酰胺组比较，中药制剂低、中剂量组能显著升高CFU-GM，有显著统计学差异（P＜0.05），中药制剂高剂量组能极显著升高CFU-GM（P＜0.01），中药中、高制剂加环磷酰胺组明显提高CFU-GM数，差异有统计学意义；中药制剂各剂量组及中药制剂各剂量加环磷酰胺组能显著升高BFU-E数，显示了本中药制剂可显著提高化疗后造血祖细胞集落形成数量，见表7。

表7中药制剂单独使用与环磷酰胺联合使用对造血祖细胞集落形成的影响

#P＜0.05, vs CTX组. ##P＜0.01, vs CTX组

本发明中药组合物具有辅助治疗的功效，在改善化疗机体骨髓抑制，提高化疗患者机体免疫力方面，疗效肯定，有益于肿瘤的治疗，是辅助肿瘤化疗的药物上的创新，具有实际的临床意义和统计学上的意义。

Claims

1.一种辅助肿瘤化疗的中药组合物，其特征在于，该中药组合物是由重量计的：黄芪20-40g、丹参15-25g、白术12-20g、白花蛇舌草10-20g、薏苡仁20-35g、败酱草15-30g、生蒲黄9-12g、八月札9-15g、鸡内金20-35g和炮穿山甲6-12g制成，其中，将黄芪、丹参、白术、白花蛇舌草、薏苡仁、败酱草、生蒲黄、八月札、鸡内金和炮穿山甲混合在一起，用蒸馏水浸泡1小时后，加黄芪、丹参、白术、白花蛇舌草、薏苡仁、败酱草、生蒲黄、八月札、鸡内金、炮穿山甲4-6倍重量的水或体积浓度为70%的乙醇煎煮2次，每次70分钟，合并2次煎煮液，过滤，浓缩至60℃时相对密度为1.16的流浸膏，即得。

2.根据权利要求1所述的辅助肿瘤化疗的中药组合物，其特征在于，该中药组合物是由重量计的：黄芪20g、丹参15g、白术12g、白花蛇舌草10g、薏苡仁20g、败酱草15g、生蒲黄9g、八月札9g、鸡内金20g和炮穿山甲6g制成，其中，将黄芪、丹参、白术、白花蛇舌草、薏苡仁、败酱草、生蒲黄、八月札、鸡内金和炮穿山甲混合在一起，用蒸馏水浸泡1小时后，加黄芪、丹参、白术、白花蛇舌草、薏苡仁、败酱草、生蒲黄、八月札、鸡内金、炮穿山甲4-6倍重量的水或体积浓度为70%的乙醇煎煮2次，每次70分钟，合并2次煎煮液，过滤，浓缩至60℃时相对密度为1.16的流浸膏，即得。

3.根据权利要求1所述的辅助肿瘤化疗的中药组合物，其特征在于，该中药组合物是由重量计的：黄芪30g、丹参20g、白术16g、白花蛇舌草15g、薏苡仁27g、败酱草17g、生蒲黄10g、八月札12g、鸡内金27g和炮穿山甲9g制成，其中，将黄芪、丹参、白术、白花蛇舌草、薏苡仁、败酱草、生蒲黄、八月札、鸡内金和炮穿山甲混合在一起，用蒸馏水浸泡1小时后，加黄芪、丹参、白术、白花蛇舌草、薏苡仁、败酱草、生蒲黄、八月札、鸡内金、炮穿山甲4-6倍重量的水或体积浓度为70%的乙醇煎煮2次，每次70分钟，合并2次煎煮液，过滤，浓缩至60℃时相对密度为1.16的流浸膏，即得。

4.根据权利要求1所述的辅助肿瘤化疗的中药组合物，其特征在于，该中药组合物是由重量计的：黄芪40g、丹参25g、白术20g、白花蛇舌草20g、薏苡仁35g、败酱草30g、生蒲黄12g、八月札15g、鸡内金35g和炮穿山甲12g制成，其中，将黄芪、丹参、白术、白花蛇舌草、薏苡仁、败酱草、生蒲黄、八月札、鸡内金和炮穿山甲混合在一起，用蒸馏水浸泡1小时后，加黄芪、丹参、白术、白花蛇舌草、薏苡仁、败酱草、生蒲黄、八月札、鸡内金、炮穿山甲4-6倍重量的水或体积浓度为70%的乙醇煎煮2次，每次70分钟，合并2次煎煮液，过滤，浓缩至60℃时相对密度为1.16的流浸膏，即得。

5.权利要求1或2-4任何一项所述的辅助肿瘤化疗的中药组合物在制备辅助肿瘤治疗的片剂、颗粒剂、胶囊剂、丸剂、口服液、糖浆剂任何一种药物中的应用。