CN102812950B

CN102812950B - 一种鸡精液稀释液及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN102812950B
Application number: CN2012103290492A
Authority: CN
Inventors: 赵振华; 黎寿丰; 薛龙岗; 黄华云; 李春苗; 武子寅; 温彦涛
Original assignee: Jiangsu Institute Poultry Sciences
Current assignee: Jiangsu Institute Poultry Sciences
Priority date: 2012-09-07
Filing date: 2012-09-07
Publication date: 2013-09-18
Anticipated expiration: 2032-09-07
Also published as: CN102812950A

Abstract

一种鸡精液稀释液及其制备方法和应用，属于动物繁殖技术领域，用于鸡精液稀释后常温保存以及人工授精。鸡精液稀释液，以灭菌蒸馏水为溶剂，含有果糖、柠檬酸、谷氨酸钠、氯化钾、磷酸氢二钾、Tris、牛血清白蛋白、VB₁₂、链霉素和青霉素。在无菌条件下，将果糖、柠檬酸、谷氨酸钠、氯化钾、磷酸氢二钾、Tris、牛血清白蛋白、VB₁₂溶解于少量灭菌蒸馏水中，溶解后加入青霉素和链霉素，之后加入灭菌蒸馏水混合均匀，得到鸡精液稀释液，于4℃保存。将上述鸡精液稀释液预热至37℃，之后与鸡精液进行混合；鸡精液与鸡精液稀释液的质量比为1:1-1:2。本发明具有制备简单方便，配制简单，取材方便，成本价格低廉，易于推广的优点。

Description

一种鸡精液稀释液及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及一种鸡精液稀释液，属于动物繁殖技术领域，用于鸡精液稀释后常温保存以及人工授精。

背景技术

随着现代化养禽业的快速发展，家禽养殖的规模化和集约化程度越来越高，家禽的人工授精也越来越重要。在我国，鸡的立体式笼养技术和人工授精技术互为因果，给以鸡为主体的家禽养殖业的发展提供了广阔空间。对于生产种蛋的母鸡而言，一般每5d就要授精1次，1年要授精73次，2011年我国出栏肉鸡约90亿只，祖代蛋种鸡的平均存栏量超过50万套，父母代雏鸡销售量超过2000万套，商品代蛋鸡平均存栏量维持在14亿只左右，可知我国每年接受人工授精技术处理的母鸡约有100亿只次。

鸡人工授精技术是现代育种和生产中必不可少的手段，其主要优越性是加速良种化进程；提高优秀种鸡的利用率；减少种公鸡饲养量而节约饲养成本；利于防止疾病的相互传播等。由于家禽精子的密度大且采精量很少，稀释后输精可最大限度地利用优秀种公鸡的精液，更能节约饲养成本，可提高经济效益。

虽然国内许多单位和学者对鸡精液及稀释液进行了相关研究，取得了一定的进展，目前针对鸡精液常温保存液主要有贝尔茨维尔家禽精液稀释液(BPSE)、Lake’s保存液配方和Brown液，国内仅有北京家禽稀释液（BJJX）, 但由于所研究鸡的品种、饲养环境等方面的差异，鸡的精液特性也有所不同，研制出的稀释液有的使用时效果不理想，有的试剂价格较高。因此研制出相应的有效可靠，且价格低廉、易于推广应用的新型高效种公鸡精液稀释液，促进养鸡业的规模化发展势在必行。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种鸡精液稀释液及其制备和应用，用于种公鸡精液的稀释和保存，具有制备简单方便，配制简单，取材方便，成本价格低廉，易于推广的优点，经该稀释液稀释后的精液保存时间延长，且能够在更宽的温度范围内保存。

为解决上述技术问题，本发明鸡精液稀释液，以灭菌蒸馏水为溶剂，含有果糖、柠檬酸、谷氨酸钠、氯化钾、磷酸氢二钾、Tris、牛血清白蛋白、维生素B₁₂、链霉素和青霉素，鸡精液稀释液中各组分的浓度为：果糖10 g/L、柠檬酸0.4 g/L、谷氨酸钠4 g/L、氯化钾1g/L、磷酸氢二钾8g/L、Tris4 g/L、牛血清白蛋白3 g/L、维生素B₁₂ 0.8 g/L、青霉素100IU/mL、链霉素0.1mg/mL；该鸡精液稀释液pH值在6.8-7.2之间，渗透压300-400mOs/kg。

制备上述鸡精液稀释液的方法，在无菌条件下，按上述配方称取果糖、柠檬酸、谷氨酸钠、氯化钾、磷酸氢二钾、Tris、牛血清白蛋白、维生素B₁₂，加入到少量灭菌蒸馏水中直至溶解，溶解后加入上述配方量的青霉素和链霉素，之后加入灭菌蒸馏水混合均匀，得到鸡精液稀释液，该鸡精液稀释液于4℃保存。

上述鸡精液稀释液的应用，将上述鸡精液稀释液预热至37℃，之后与鸡精液进行混合；鸡精液与鸡精液稀释液的质量比为1:1-1:2。

鸡精液稀释液保存精子后活力测定：

按实施方法制备和稀释的鸡精液稀释液，检测25℃下精子存活时间、精子活力、精子畸形率。对精子存活时间、精子活力的检测方法如下：鸡精液稀释后立即在37℃条件下进行活力评定。评定时，用微量移液器吸取一滴精液于载玻片上，加上盖玻片，置于显微镜下观察。选择三个视野以上，统计其中呈直线运动的精子数，评定精子活力。稀释后的精液于25℃水浴条件下保存，每0.5h进行活力评定。本发明中使用的鸡精液稀释液对刚采集的鸡精液进行稀释后于25℃条件下保存，观察该稀释液对鸡精子存活时间精子质量的影响。结果表明：本发明鸡精液稀释液进行体外保存时，能有效延长鸡精子的存活时间，在体外保存4h后仍有一定的活力。采用本发明稀释液和精液原液进行对比试验，两者最终受精率无显著差异。

本发明首次把VB₁₂和牛血清白蛋白联合加入到了精液稀释液中，有利于提高精子活力、降低精子畸形率。本发明能有效延长液态条件下鸡精子的存活时间，有利于鸡人工授精技术的开展，加速鸡选种选育的进程。

具体实施方式

实施例1

一种鸡精液稀释液，以灭菌蒸馏水为溶剂，含有果糖、柠檬酸、谷氨酸钠、氯化钾、磷酸氢二钾、Tris、牛血清白蛋白、维生素B₁₂、链霉素和青霉素，上述组分的浓度为：果糖10 g/L、柠檬酸0.4 g/L、谷氨酸钠4 g/L、氯化钾1g/L、磷酸氢二钾8g/L、Tris4 g/L、牛血清白蛋白3 g/L、维生素B₁₂ 0.8 g/L、青霉素100IU/mL、链霉素0.1mg/mL；该鸡精液稀释液pH值在6.8-7.2之间，渗透压300-400mOs/kg，见表1。

表1 鸡精液稀释液的配方

成分	浓度
		果糖	10 g/L
柠檬酸	0.4 g/L
		谷氨酸钠	4 g/L
氯化钾	1 g/L
		磷酸氢二钾	9 g/L
Tris	0.6 g/L
		牛血清白蛋白	3 g/L
维生素B₁₂	0.8 g/L
		青霉素	100IU/mL
链霉素	0.1mg/mL.

制备上述鸡精液稀释液的方法，在无菌条件下，按上述配方称取果糖、柠檬酸、谷氨酸钠、氯化钾、磷酸氢二钾、Tris、牛血清白蛋白、维生素B₁₂加入到少量灭菌蒸馏水中直至溶解，溶解后加入上述配方量的青霉素和链霉素，之后加入灭菌蒸馏水混合均匀，得到鸡精液稀释液，于4℃保存。

实施例2

称取10g果糖，柠檬酸0.4 g，谷氨酸钠4g，氯化钾1 g、磷酸氢二钾8g， Tris4 g，牛血清白蛋白3 g, 0.8 g维生素B₁₂溶于少量灭菌蒸馏水中，溶解后将其转移至1000毫升容量瓶内，并加入青霉素和链霉素，至青霉素终浓度100IU/mL、链霉素终浓度0.1mg/mL。所有制备过程均在无菌条件下进行。4℃条件保存待用，使用时将稀释液预热至37℃，按精液比稀释液1:1～2比例与鸡精液混合。

实施例3

选用体格健壮、性欲旺盛，经过采精训练后的公鸡进行采精。根据稀释液的试验操作，采用本发明鸡精液稀释液和精液原液进行对比试验。采集训练良好的种公鸡进行采精，获得混精后，用本发明鸡精液稀释液进行稀释，稀释比为稀释液：精液=1:1。于25℃条件下保存，母鸡进行人工授精，采用翻肛法进行输精操作，输精量为20～25μL。输精过程在1h内完成。重复试验3次。结果表明：利用本发明鸡精液稀释液对鸡精液进行稀释输精后，母鸡的受精率为91.71%，而采用原液的受精率为92.47%，两者无显著差异。

经过以上分析，本发明鸡精液稀释液在成分和制作上均较简单方便，利于鸡精液的短期保存，在生产中可进行应用推广。

Claims

1. 一种鸡精液稀释液，其特征在于，以灭菌蒸馏水为溶剂，含有果糖、柠檬酸、谷氨酸钠、氯化钾、磷酸氢二钾、Tris、牛血清白蛋白、维生素B₁₂、链霉素和青霉素，鸡精液稀释液中各组分的浓度为：果糖10 g/L、柠檬酸0.4 g/L、谷氨酸钠4 g/L、氯化钾1g/L、磷酸氢二钾8g/L、Tris4 g/L、牛血清白蛋白3 g/L、维生素B₁₂ 0.8 g/L、青霉素100IU/mL、链霉素0.1mg/mL；该鸡精液稀释液pH值在6.8-7.2之间，渗透压300-400mOs/kg。

2. 一种制备权利要求1所述的鸡精液稀释液的方法，其特征在于，在无菌条件下，将所述果糖、柠檬酸、谷氨酸钠、氯化钾、磷酸氢二钾、Tris、牛血清白蛋白、维生素B₁₂加入到少量灭菌蒸馏水中直至溶解，溶解后加入青霉素和链霉素，之后加入灭菌蒸馏水混合均匀，得到鸡精液稀释液，该鸡精液稀释液于4℃保存。

3. 权利要求1所述的鸡精液稀释液的应用，其特征在于，将权利要求1所述的鸡精液稀释液预热至37℃，之后与鸡精液进行混合；鸡精液与鸡精液稀释液的质量比为1:1-1:2。