CN107251892A - 一种适用于热带地区的鸡精液稀释液、制备及其应用方法 - Google Patents

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周汉林
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Abstract

本发明公开一种适用于热带地区的鸡精液稀释液及其制备方法。所述的鸡精液稀释液主要成分为：10‐15g/L果糖、8‐10g/L氯化钠、10‐15g/L谷氨酸钠、8‐10g/L柠檬酸钠、2‐4g/L Tris乙磺酸、2‐4g/L无水醋酸钠、0.5‐1g/L氯化镁、8‐10g/L维生素C、1‐2g/L维生素E、300000‐500000U/L超氧化物歧化酶和300000‐500000U/L过氧化氢酶。所述的鸡精液稀释液添加的维生素C、维生素E、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶，用于缓解高温应激环境对鸡精液的不利影响，通过增强鸡精液的抗氧化性能起到保护精子的效果。本发明的鸡精液稀释液和现有的鸡精液稀释液相比，能更好适应热区高温湿热的气候环境，适用于稀释后立即输精，也适用于稀释后的短期保存。

Description

一种适用于热带地区的鸡精液稀释液、制备及其应用方法
技术领域
本发明涉及一种适用于热带地区的鸡精液稀释液，属于家禽繁殖领域，用于鸡精液人工授精和短期保存。
背景技术
随着笼养鸡的推广普及，种鸡的人工授精已成为现代养禽生产中必不可少的技术手段，对提高优秀种公鸡的利用率、提高授精率、节省种鸡饲料、控制疾病传播等均有重要意义。种鸡的射精量少，通常人工采精只能采到0.5ml左右的精液，但精子密度很大，可达到1.7-3.5×109个/ml，因此，需要通过对鸡精液进行稀释以扩大其体积，增加授精母鸡数。而且经过稀释后的精液有利于精子的保存、精子寿命延长和运输，如CN 104396941 A、CN103843759 A、CN 105287045 A、CN 104336006 A分别公开了一种鸡精液稀释液。尽管鸡精液稀释能通过及时补充营养物质、调节渗透压和电解质的平衡达到延长精子保存时间的效果，但鸡精子在体外仍很容易失去受精能力，原因是在鸡人工采精的过程中，泄殖腔腺体分泌的各种成份混入精液之中，造成精子活动加快，从而导致受精能力的快速降低或丧失，尤其是在高温湿热的气候环境下，精子代谢运动加强，精子的受精能力降低更为显著。因此，研发一种适用于热带地区的鸡精液稀释液及其制备方法，在延长鸡精液保存时间的同时，能缓解环境应急对鸡精液造成的不利影响，将极大限度的提高热区饲养条件下种鸡人工受精的受精率。
发明内容
本发明的目的是提供一种适用于热带地区的鸡精液稀释液及其制备方法。
本发明是通过以下技术方案实现的：一种适用于热带地区的鸡精液稀释液，所述精液稀释液成分包括：果糖10-15g/L、氯化钠8-10g/L、谷氨酸钠10-15g/L、柠檬酸钠8-10g/L、Tris乙磺酸2-4g/L、无水乙酸钠2-4g/L、氯化镁0.5-1g/L、维生素C 8-10g/L、维生素E 1-2g/L、超氧化物歧化酶300000-500000U/L和过氧化氢酶300000-500000U/L。
进一步的，所述精液稀释液的成分包括：果糖12.6g/L、氯化钠9g/L、谷氨酸钠13.5g/L、柠檬酸钠8.9g/L、Tris乙磺酸2g/L、无水乙酸钠3.3g/L、氯化镁0.5g/L、维生素C10g/L、维生素E 1g/L、超氧化物歧化酶500000U/L和过氧化氢酶350000U/L。
进一步的，所述精液稀释液还包括：800000-1000000U/L青霉素和1-2g/L的链霉素。
进一步的，所述精液稀释液还包括：1000000U/L青霉素和1g/L的链霉素。
进一步的，所述制备方法的步骤如下：
(1)无菌条件下，向850mL蒸馏水中加入果糖10-15g、氯化钠8-10g、谷氨酸钠10-15g、柠檬酸钠8-10g、Tris乙磺酸2-4g、无水乙酸钠2-4g和氯化镁0.5-1g，充分溶解并混合均匀，冷却后调节pH为6.5-7.0，定容至1L，经0.22μm孔径无菌滤器过滤，2-5℃保存备用；
(2)在种鸡采精前0.5-1h，无菌条件下，将步骤(1)得到的稀释液加入青霉素800000-1000000U/L、链霉素1-2g/L、维生素C 8-10g/L的、维生素E 1-2g/L、超氧化物歧化酶300000-500000U/L和过氧化氢酶300000-500000U/L，超声混匀，获得所述适用于热带地区的鸡精液稀释液，36℃-38℃预温待用；
(3)种鸡采精后，所述步骤(2)适用于热带地区的鸡精液稀释液，先按照精液与稀释液体积比1:1的比例对鸡精液进行第一次稀释，3-5min后，再根据输精母鸡的数量需要按照体积比1：(1至5)的比例进行第二次稀释；
(4)所述步骤(3)得到的稀释后的鸡精液可用于立即输精，输精量0.1-0.2ml；也可短期保存于17℃的避光环境12-24h。
进一步的，步骤(1)稀释液pH为7.0，保存温度为2-5℃，保存时间为3-5天。
进一步的，所述步骤(2)稀释液现配现用效果最佳，使用时经37℃预热；不用时可2-5℃保存24-48h。
进一步的，所述步骤(3)第一次稀释是将稀释液缓慢倒入鸡精液中，并充分混匀；第二次稀释同样是将稀释液缓慢倒入精液。
进一步的，所述步骤(4)用于立即输精的稀释精液输精量为0.1-0.2ml。
进一步的，所述步骤(4)用于短期保存的稀释精液在避光环境17℃保存不超过24h。
采用上述技术方案后，与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明的适用于热带地区的鸡精液稀释液，能更好适应热区高温湿热的气候环境，原因在于添加的维生素C、维生素E、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶，显著增强鸡精液的抗氧化性能，通过参与氧化还原反应，清除精子代谢过程中产生的氧自由基，起到保护精子的效果，维持精子活率，缓解高温应急环境对鸡精液的不利影响。本发明的鸡精液稀释液在热带地区进行鸡的人工受精，比现有的鸡精液稀释液抗氧化性能显著增强，提高精子活率和受精率。本发明的鸡精液稀释液可适用于稀释后立即输精，也适用于稀释后的短期保存。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步描述，但本发明实施方式不局限于此。
实施例
一种适用于热带地区的鸡精液稀释液。主要成分包括：果糖12.6g/L、氯化钠9g/L、谷氨酸钠13.5g/L、柠檬酸钠8.9g/L、Tris乙磺酸2g/L、无水乙酸钠3.3g/L、氯化镁0.5g/L、维生素C 10g/L的、维生素E 1g/L、超氧化物歧化酶500000U/L、过氧化氢酶350000U/L、1000000U/L青霉素和1g/L的链霉素。所述鸡精液稀释液pH为7.0。
上述鸡精液稀释液的制备方法：
(1)无菌条件下，向850mL蒸馏水中加入果糖12.6g、氯化钠9g、谷氨酸钠13.5g、柠檬酸钠8.9g、Tris乙磺酸2g、无水乙酸钠3.3g、氯化镁0.5g，可适当加热溶解并混合均匀，冷却后调节pH为6.5-7.0，定容至1L，经0.22μm孔径无菌滤器过滤，4℃保存备用；
(2)在种鸡采精前0.5h，无菌条件下，将步骤(1)得到的稀释液加入青霉素1000000U/L、链霉素1g/L、维生素C 10g/L、维生素E 1g/L、超氧化物歧化酶500000U/L和过氧化氢酶350000U/L，超声混匀，40℃预温待用；
(3)在种鸡采精后，所述步骤(2)的鸡精液稀释液，先按照精液与稀释液体积比1:1的比例将稀释液缓慢倒入精液中对鸡精液进行第一次稀释；5min后，再按照精液与稀释液体积比1:2的比例将稀释液缓慢倒入精液中进行第二次稀释。
上述精液稀释液的应用方法：
上述得到的稀释后的鸡精液可立即输精，输精量0.1-0.2ml滴入母鸡泄殖腔内。
上述得到的稀释后的鸡精液也可短期保存于17℃的避光环境12-24h。
对比例
一种鸡精液稀释液。主要成分包括：果糖12.6g/L、氯化钠9g/L、谷氨酸钠13.5g/L、柠檬酸钠8.9g/L、Tris乙磺酸2g/L、无水乙酸钠3.3g/L、氯化镁0.5g/L、青霉素1000000U/L和链霉素1g/L。所述鸡精液稀释液pH为7.0。
对比例鸡精液稀释液的制备方法：
(1)无菌条件下，向850mL蒸馏水中加入果糖12.6g、氯化钠9g、谷氨酸钠13.5g、柠檬酸钠8.9g、Tris乙磺酸2g、无水乙酸钠3.3g、氯化镁0.5g，可适当加热溶解并混合均匀，冷却后调节pH为6.5-7.0，定容至1L，经0.22μm孔径无菌滤器过滤，4℃保存备用。
(2)在种鸡采精前0.5h，无菌条件下，将步骤(1)得到的稀释液加入青霉素1000000U/L和链霉素1g/L，超声混匀，40℃预温待用。
(3)在种鸡采精后，所述步骤(2)的鸡精液稀释液，先按照精液与稀释液体积比1:1的比例将稀释液缓慢倒入精液中对鸡精液进行第一次稀释；5min后，再按照精液与稀释液体积比1:2的比例将稀释液缓慢倒入精液中进行第二次稀释。
对比例精液稀释液的应用方法：
稀释后的鸡精液立即输精，输精量0.1-0.2ml滴入母鸡泄殖腔内。
稀释后的鸡精液短期保存于17℃的避光环境12-24h。
本发明所述适用于热带地区的鸡精液稀释液实施例和对比例效果
试验地点在海南儋州，环境温度30℃、相对湿度94％，实施例和对比例选用300-320日龄的产蛋黎凤鸡母鸡各10只，采集同一只种公鸡的精液，分成两份按照实施例和对比例稀释方法制备，分两次给母鸡输精，一次是即稀释处理完后检查活率并立即输精，输精量0.1-0.2ml/只，另一次在室温环境下避光保存24小时后输精，并检查活率，每只母鸡收集种蛋约4～6个。两次输精所收集的种蛋同一时间通过“照蛋”的方法检测受精率，结果见表1。
表1实施例和对比例受精率和精子活率
从表1可以，实施例添加生素C 10g/L、维生素E 1g/L、超氧化物歧化酶500000U/L和过氧化氢酶350000U/L后，黎凤鸡精液经稀释立即输精受精率提高，稀释后保存24h精子活率和受精率提高。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种适用于热带地区的鸡精液稀释液，其特征在于，所述精液稀释液成分包括：果糖10-15g/L、氯化钠8-10g/L、谷氨酸钠10-15g/L、柠檬酸钠8-10g/L、Tris乙磺酸2-4g/L、无水乙酸钠2-4g/L、氯化镁0.5-1g/L、维生素C 8-10g/L、维生素E 1-2g/L、超氧化物歧化酶300000-500000U/L和过氧化氢酶300000-500000U/L。
2.根据权利要求1所述的一种适用于热带地区的鸡精液稀释液，其特征在于，所述精液稀释液的成分包括：果糖12.6g/L、氯化钠9g/L、谷氨酸钠13.5g/L、柠檬酸钠8.9g/L、Tris乙磺酸2g/L、无水乙酸钠3.3g/L、氯化镁0.5g/L、维生素C 10g/L、维生素E 1g/L、超氧化物歧化酶500000U/L和过氧化氢酶350000U/L。
3.根据权利要求1所述的一种适用于热带地区的鸡精液稀释液，其特征在于，所述精液稀释液还包括：800000-1000000U/L青霉素和1-2g/L的链霉素。
4.根据权利要求2所述的一种适用于热带地区的鸡精液稀释液，其特征在于，所述精液稀释液还包括：1000000U/L青霉素和1g/L的链霉素。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的适用于热带地区的鸡精液稀释液的制备方法，其特征在于，所述制备方法的步骤如下：
(1)无菌条件下，向850mL蒸馏水中加入果糖10-15g、氯化钠8-10g、谷氨酸钠10-15g、柠檬酸钠8-10g、Tris乙磺酸2-4g、无水乙酸钠2-4g和氯化镁0.5-1g，充分溶解并混合均匀，冷却后调节pH为6.5-7.0，定容至1L，经0.22μm孔径无菌滤器过滤，2-5℃保存备用；
(2)在种鸡采精前0.5-1h，无菌条件下，将步骤(1)得到的稀释液加入青霉素800000-1000000U/L、链霉素1-2g/L、维生素C 8-10g/L的、维生素E 1-2g/L、超氧化物歧化酶300000-500000U/L和过氧化氢酶300000-500000U/L，超声混匀，获得所述适用于热带地区的鸡精液稀释液，36℃-38℃预温待用；
(3)种鸡采精后，所述步骤(2)适用于热带地区的鸡精液稀释液，先按照精液与稀释液体积比1:1的比例对鸡精液进行第一次稀释，3-5min后，再根据输精母鸡的数量需要按照体积比1：(1至5)的比例进行第二次稀释；
(4)所述步骤(3)得到的稀释后的鸡精液可用于立即输精，输精量0.1-0.2ml；也可短期保存于17℃的避光环境12-24h。
6.根据权利要求5所述的适用于热带地区的鸡精液稀释液的制备方法，其特征在于，步骤(1)稀释液pH为7.0，保存温度为2-5℃，保存时间为3-5天。
7.根据权利要求5所述的适用于热带地区的鸡精液稀释液的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)稀释液现配现用效果最佳，使用时经37℃预热；不用时可2-5℃保存24-48h。
8.根据权利要求5所述的适用于热带地区的鸡精液稀释液的应用方法，其特征在于，所述步骤(3)第一次稀释是将稀释液缓慢倒入鸡精液中，并充分混匀；第二次稀释同样是将稀释液缓慢倒入精液。
9.根据权利要求5所述的适用于热带地区的鸡精液稀释液的应用方法，其特征在于，所述步骤(4)用于立即输精的稀释精液输精量为0.1-0.2ml。
10.根据权利要求5所述的适用于热带地区的鸡精液稀释液的应用方法，其特征在于，所述步骤(4)用于短期保存的稀释精液在避光环境17℃保存不超过24h。
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