CN102791264B - 用于预防或治疗糖尿病的油脂组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种安全性高,即使连续服用也不用担心副作用的对糖尿病的预防或治疗有效的油脂组合物。本发明的用于预防或治疗糖尿病的油脂组合物,其特征为:含有三酰甘油酯作为有效成分,该三酰甘油酯在分子内含有1个或者2个中链脂肪酸残基,并且,含有碳原子数6~10的中链脂肪酸和碳原子数16~24的长链脂肪酸作为结构脂肪酸。
Description
技术领域
本发明涉及用于预防或治疗糖尿病的油脂组合物,详细而言,涉及以某种特定的三酰甘油酯作为有效成分的用于预防或治疗糖尿病的油脂组合物。
背景技术
糖尿病大致分为Ⅰ型糖尿病(胰岛素依赖型糖尿病)和Ⅱ型糖尿病(非胰岛素依赖型糖尿病)。日本的大部分糖尿病患者罹患的是Ⅱ型糖尿病,是由于胰岛素分泌量降低的胰岛素分泌不全症状或胰岛素降低血糖的作用减弱的胰岛素抵抗(胰岛素功能不全)症状发生恶化而引起发病。这些症状与遗传因素、偏食、摄食过多、运动不足、压力等环境因素有很大关系。
近年来,Ⅱ型糖尿病的患者人数正在增加,据悉,包括被称作边缘性糖尿病的糖尿病预备军在内,人数已经达到了2000万人。因此,不单是对糖尿病患者的照顾,对防止糖尿病预备军向糖尿病转移也成为了重要的课题。
一般情况下,Ⅱ型糖尿病的治疗要在饮食治疗法和运动治疗法的基础上进行药物治疗。日本的Ⅱ型糖尿病的药物治疗法多采用能促进胰岛素分泌的磺酰脲类药物(SU剂)。这是因为日本人的胰岛素分泌能力比欧美人的低。此外,在胰岛素抵抗症状中,采用吡格列酮等噻唑烷类药物来治疗。
但是,服用SU剂会产生低血糖、瘙痒、出疹、体重増加、胰岛β-细胞功能衰竭等副作用。此外,肝病、肾机能不全的患者禁止服用噻唑烷类药剂,这类药物会产生浮肿、体重增加等副作用。糖尿病的药物治疗法必须长时间持续进行,因此需要开发出即使持续服用也不必担心副作用的抗糖尿病药。
对于这种抗糖尿病药物,迄今为止,有将从白甘薯块根的皮部分得到的提取液作为有效成分的胰岛素分泌促进剂(专利文献1)、以及将醋酸、β-伴大豆球蛋白以及γ-氨基丁酸分别作为有效成分的胰岛素抵抗改善剂(专利文献2~4)的报告。
专利文献1:专利第3677007号公报
专利文献2:日本专利特开2002-193797号公报
专利文献3:WO2004/087199号公报
专利文献4:日本专利特开2008-74734号公报
发明内容
本发明是鉴于上述情况而完成的,其目的在于提供安全性高,即使连续服用也不用担心副作用的用于预防或治疗糖尿病的油脂组合物以及含有该油脂组合物的食品。
本发明人为了解决上述课题进行了反复深入研究,结果发现如果使用将在分子内含有某种特定碳原子数的中链脂肪酸和长链脂肪酸作为结构脂肪酸的三酰甘油酯来作为有效成分的油脂组合物,能够解决上述课题,从而完成了本发明。
本发明具体提供以下内容。
(1)一种用于预防或者治疗糖尿病的油脂组合物,其特征为:含有三酰甘油酯作为有效成分,该三酰甘油酯在分子内含有1个或者2个中链脂肪酸残基,并且,含有碳原子数6~10的中链脂肪酸和碳原子数16~24的长链脂肪酸作为结构脂肪酸。
(2)如上述(1)所述的油脂组合物,上述三酰甘油酯的结构脂肪酸由碳原子数6~10的中链脂肪酸和碳原子数16~24的长链脂肪酸构成。
(3)如上述(1)或者(2)所述的油脂组合物,上述中链脂肪酸为碳原子数8和/或10的饱和脂肪酸。
(4)含有上述(1)~(3)中任一项所述的油脂组合物的食品。
本发明的油脂组合物具有胰岛素分泌促进作用和胰岛素抵抗改善作用,对伴随着胰岛素分泌量降低的胰岛素分泌不全症状或者胰岛素作用降低的胰岛素抵抗症状的糖尿病的预防或者治疗有效。此外,本发明的油脂组合物,其有效成分为三酰甘油酯,安全性高,不用担心副作用,故可安心地连续服用。
附图说明
图1为MLCT的给药试验中,血浆胰岛素浓度的测量结果示意图。
图2为MCT的给药试验中,血浆胰岛素浓度的测量结果示意图。
图3为MCT+LCT的给药试验中,血浆胰岛素浓度的测量结果示意图。
具体实施方式
以下对本发明的具体实施方式进行详细说明,本发明不受以下实施方式的任何限定,在本发明目的的范围内,可加以适当变更而实施。
本发明的油脂组合物用于预防或者治疗糖尿病,含有三酰甘油酯作为有效成分。作为本发明油脂组合物的有效成分的三酰甘油酯,在分子内含有1个或者2个中链脂肪酸残基,并且含有碳原子数6~10的中链脂肪酸和碳原子数16~24的长链脂肪酸作为结构脂肪酸。即,作为三酰甘油酯的形态,包括在1分子的三酰甘油酯中,作为结构脂肪酸仅存在中链脂肪酸的中链脂肪酸三酰甘油酯(以下简称MCT)、仅存在长链脂肪酸的长链脂肪酸三酰甘油酯(以下简称LCT)、以及混合存在中链脂肪酸和长链脂肪酸的中·长链脂肪酸三酰甘油酯(以下简称M·LCT)。本发明的油脂组合物的特征在于,在1分子的三酰甘油酯中,含有M·LCT作为有效成分,该M·LCT含有碳原子数6~10的中链脂肪酸和碳原子数16~24的长链脂肪酸来作为结构脂肪酸。
本发明的油脂组合物中,除了含有作为有效成分的上述M·LCT以外,也可以含有上述MCT和/或LCT。应予说明,本说明书中,将这种三酰甘油酯称作中长链脂肪酸三酰甘油酯(以下简称MLCT),应当与在分子内含有1个或者2个中链脂肪酸残基、混合存在作为结构脂肪酸的中链脂肪酸和长链脂肪酸的三酰甘油酯M·LCT区别表示。
有效成分三酰甘油酯,含有碳原子数6~10的中链脂肪酸和碳原子数16~24的长链脂肪酸,优选由碳原子数6~10的中链脂肪酸和碳原子数16~24的长链脂肪酸构成。作为碳原子数6~10的中链脂肪酸,可列举正己酸、正庚酸、正辛酸、正壬酸以及正癸酸,优选碳原子数为偶数的饱和脂肪酸,更加优选碳原子数为8和/或10的饱和脂肪酸(正辛酸和/或正癸酸)。中链脂肪酸可通过将椰子油或棕榈仁油等水解而得到。
作为碳原子数16~24的长链脂肪酸,可列举棕榈酸、硬脂酸、花生酸、山萮酸、二十四烷酸等长链饱和脂肪酸;棕榈油酸、油酸、亚油酸、亚麻酸、γ-亚麻酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸等长链不饱和脂肪酸。长链脂肪酸可通过榨取榨油原料,对精制而成的大豆油、菜子油、玉米油、米糠油、芝麻油、棉籽油、葵花籽油、红花油、亚麻籽油、紫苏油、橄榄油等水解而得到。
本发明的油脂组合物的有效成分三酰甘油酯含有上述中链脂肪酸和上述长链脂肪酸作为结构脂肪酸,这些脂肪酸的结合位置没有特别限定。
三酰甘油酯的制造方法没有特别限定,例如,可列举以往公知的酯交换反应或者酯化反应。作为酯交换反应,例如,可列举使用甲醇钠等无机催化剂的化学酯交换反应、使用脂肪酶等借助酶的酯交换反应。在本发明中,采用哪种反应都可以。此外,酯交换反应没有特别限定,选择性酯交换反应或者非选择性酯交换反应皆可。
作为酯化反应,例如可列举使用甘油和脂肪酸的酯化反应、使用甘油和脂肪酸酯的酯化反应、使用甘油和油脂的酯化反应等。本发明中采用哪种反应都可以。
在本发明的油脂组合物中,在有效成分三酰甘油酯的全部结构脂肪酸中,上述中链脂肪酸的比例优选为15~40质量%,更优选为20~35质量%。如果在上述范围内,则能更有效地发挥胰岛素分泌促进作用和胰岛素抵抗改善作用。应予说明,作为确认上述中链脂肪酸所占比例的方法,例如,可列举从本发明的油脂组合物中对上述三酰甘油酯进行分子蒸馏,通过柱型色层分离法等分离后,对结构脂肪酸进行甲酯化,再通过气体色谱法进行分析的方法。
在不损害本发明效果的范围内,为进一步提高保存稳定性和制备适应性(調理適性),本发明的油脂组合物可添加公知的乳化剂。具体的,可列举聚甘油脂肪酸酯、蔗糖脂肪酸酯、失水山梨糖醇脂肪酸酯、聚山梨酯、缩合甘油三蓖麻油酸酯脂肪酸酯、单甘油脂肪酸酯等的合成乳化剂、或大豆卵磷脂、卵黄卵磷脂、大豆溶血卵磷脂、卵黄溶血卵磷脂、酶处理卵黄、皂苷、植物固醇类、乳脂肪球膜等天然乳化剂。
本发明的油脂组合物对有必要提高胰岛素的分泌量或者有必要改善胰岛素抵抗的糖尿病患者或者身为预备军的包含人在内的动物有效。尤其适合预防或者治疗伴有胰岛素分泌量下降的胰岛素分泌不全或胰岛素作用降低的胰岛素抵抗性症状的Ⅱ型糖尿病。此处,预防指的是,例如,抑制、延迟发病等,治疗指的是,例如,延迟病情恶化、缓和、减轻、改善症状等。
本发明的油脂组合物中作为有效成分而含有的三酰甘油酯、以及作为其结构脂肪酸的中链脂肪酸和长链脂肪酸是在自然界中广泛存在的物质,此外,在可食用的天然产物中也含有。因此,本发明的油脂组合物安全性高,适于用作药品(包含动物用)、食品、饲料等。
糖尿病的药物治疗法必须长期连续进行,因此在用于药品的成分上,需要寻求即使连续服用也不用担心副作用的成分。本发明的油脂组合物安全性高,不用担心副作用,因含有三酰甘油酯作为有效成分,所以即使用于药品,也可以安心地持续服用。此外,由于本发明的油脂组合物的服用容易控制,因此适合用于在治疗Ⅱ型糖尿病时所采用的结合了饮食疗法和运动疗法的药物治疗法。
本发明的油脂组合物用作药品时,给药途径优选口服。这是因为本发明油脂组合物的有效成分三酰甘油酯,其大部分经由肠道(小肠)的粘膜被体内吸收。适于口服的制剂,例如可列举胶囊剂、片剂、丸剂、散剂、细粒剂、颗粒剂、液体剂、糖浆剂等。本发明的油脂组合物,优选含有有效成分三酰甘油酯和药理上以及制药上可容许的添加剂的药品组合物形态的制剂。作为药理上和制药上可容许的添加剂,例如可列举葡萄糖、乳糖、结晶纤维素、淀粉等赋形剂、崩解剂、结合剂、包衣剂、色素、稀释剂等,通常可使用在制药领域中常用的且不会与有效成分三酰甘油酯发生反应的物质。
如上所述,本发明的油脂组合物安全性高,连续服用也不用担心会有副作用,因此通过与现有药物组合使用,可降低该现有药物的用量,降低它们的副作用。与其他药物组合使用时,可以以复合药物的形式添加在同一药品组合物中,也可以分别添加在不同药品组合物中。
使用本发明油脂组合物的药品的给药量可根据患者的症状、预防或治疗、年龄、体重、给药方法、给药时间等条件,适当选择。例如,但以治疗人(成人60kg)的糖尿病为目的时,有效剂量一般为有效成分三酰甘油酯200~1000mg/kg/日,该有效剂量分一次或分数服用即可,可根据给药时间等在该范围内进行适当调整。
可通过将本发明的油脂组合物填充加工在软胶囊里,作为例如健康食品、营养辅助食物等食品进行服用。另外,本发明的油脂组合物可以保持原样或者将其加工成粉末油脂、液状乳化油脂等以后直接食用,或者可以进一步将其用于一般食品经加工间接食用。
作为能够使用本发明的油脂组合物而制成的一般食品,只要是使用油脂的加工食品即可,并没有特别的限定,例如可列举面包、蛋糕、小甜饼干、饼干、面包圈、松饼、烤饼、巧克力、软糖、点心、掼奶油、冰淇淋等面包·点心类,果汁饮料、营养饮料、运动饮料等饮料类,汤类,调味汁、沙司、蛋黄酱、黄油、人造黄油、调制黄油等调味加工食物,油脂涂抹食品、起酥油、曲奇饼干(bakery mix)、炒菜用油、煎炸用油、煎炸食品、加工肉制品、冷冻食品、面、速食品、流质食品、吞咽食品等。
为制造糖尿病患者或者其预备军所食用的食品而使用本发明的油脂组合物时,例如,若为成人(体重60kg),考虑到配合食品的种类、其他食用食品中所包含的成分等,可按照有效成分三酰甘油酯的摄取量为200~1000mg/kg体重/日的方式进行配合,也可根据服药时间等在该范围内进行适当调整。
[实施例]
以下,通过实施例对本发明进行更详细的说明,但本发明不受这些说明的任何限定。
[试验例1]胰岛素分泌促进效果的研究(1)
使用进行糖负荷试验的大鼠,以LCT为对照,对本发明的油脂组合物(MLCT)的血浆胰岛素分泌促进效果进行研究。
<制造例1>试料1的制造方法
在10ml 40%的葡萄糖(D(+)-Glucose,和光純薬社制)溶液中,添加2gLCT(商品名:日清キヤノ一ラ油,日清オイリオグル一プ社制)和200mg牛血清白蛋白(SIGMA社制),在冰上将所得溶液一边冷却一边进行超声波处理(两组5分钟,合计10分钟),得到试料1。对照用LCT(商品名:日清キヤノ一ラ油,日清オイリオグル一プ社制)的脂肪酸组成如表1所示。
【表1】
<制造例2>试料2的制造方法
将MCT(商品名:O.D.O,结构脂肪酸:正辛酸/正癸酸=3/1,日清オイリオグル一プ社制)和LCT(商品名:日清キヤノ一ラ油,日清オイリオグル一プ社制)以14:86(质量比)的比例混合得到混合油。在所得混合油中添加相对于上述混合油0.1质量%的脂肪酶粉末后,在60℃的温度下搅拌15小时,使之进行酯交换反应。接着,从反应的生成物中滤除脂肪酶粉末,将滤液水洗、干燥后,进行脱色、除臭,得到MCT与LCT的酯交换油(MLCT(1))。然后,在10ml 40%的葡萄糖(D(+)-Glucose,和光純薬社制)溶液中,添加2g上述MLCT(1)(商品名:日清キヤノ一ラ油,日清オイリオグル一プ社制)和200mg牛血清白蛋白(SIGMA社制),在冰上将所得溶液一边冷却一边进行超声波处理(两组5分钟,合计10分钟),得到试料2。
制造例2所得的MLCT的三酰甘油酯组成以及脂肪酸组成分别在表2以及表3中表示。应予说明,三酰甘油酯的组成通过使用了ジ一エルサイエンス社制的Silicone GS-1柱的气体色谱法来进行测定,脂肪酸的组成根据“基准油脂分析试验法(1996)”来进行测定。
【表2】
3M0L:分子内的中链脂肪酸残基为3,长链脂肪酸残基为0
2M1L:分子内的中链脂肪酸残基为2,长链脂肪酸残基为1
1M2L:分子内的中链脂肪酸残基为1,长链脂肪酸残基为2
0M3L:分子内的中链脂肪酸残基为0,长链脂肪酸残基为3
【表3】
试验采用7周龄的SD系雄性大鼠(从日本SLC公司购入)。将这些大鼠(19只)驯化饲养一周后,在8周龄以及9周龄时给予试料1以及试料2,用交叉法进行糖负荷试验。即,若要在同一个体上比较MLCT(1)的效果,采用在最初的糖负荷试验后设置1周的Wash-Out期,再进行第2回的糖负荷试验的交叉法。饲养期间,在温度23±1℃、湿度50±10%、12小时明暗循环周期(8:00~20:00照明)的环境下,在不锈钢制的网箱中单独饲养。让其自由食用水以及固体饲料(商品名:PicoLab Rodent Diet 20 5053,日本SLC公司制)。试验前一天让其从17:00开始禁食,试验当日从10:00开始给予饲料。
试验分两组进行,分别为在进行糖负荷试验的同时给予LCT的“LCT给药试验(试料1给药试验)”、和在进行糖负荷试验的同时给予MLCT(1)的“MLCT(1)给药试验(试料2给药试验)”。使用灌胃针经口给予大鼠试料1和2。每1g体重的大鼠给药量为6μl。应予说明,最终的给药量为每1kg体重的大鼠,分别给予2g以及1g的糖质以及脂质。
然后,给予前以及给予20分钟后,从大鼠的尾静脉处进行采血,测量血浆胰岛素浓度(ng/ml)。应予说明,用市售的试剂盒(商品名:Rat Insulin ELISAkit,Mercodia公司制),采用ELISA法进行血浆胰岛素浓度的测量。试验结果如图1(A)所示。应予说明,MLCT(1)给药试验中的血浆胰岛素浓度增加量,为LCT给药试验中的血浆胰岛素浓度增加量的平均值为100时的相对值(%),以相对值的平均值±标准误差的形式表示。试验组之间通过Student t-test检验法进行显著性差异检定,显著性水平不足5%判定为具有显著性差异。
如图1(A)所示,MLCT(1)给药试验的血浆胰岛素浓度增加量,与LCT给药试验相比,显著性增高(p<0.01)。由此可以表明,使用MCT与LCT的酯交换油(MLCT),能促进胰岛素的分泌。应予说明,LCT给药试验的血浆胰岛素浓度增加量的平均值(绝对值)为0.86±0.10ng/ml,MLCT(1)给药试验的血浆胰岛素浓度增加量的平均值(绝对值)为1.15±0.10ng/ml。
[试验例2]胰岛素分泌促进效果的研究(2)
使用进行糖负荷试验的大鼠,以LCT为对照,对含有与试验例1不同的三酰甘油酯组成的本发明的油脂组合物(MLCT)的血浆胰岛素分泌促进效果进行研究。
<制造例3>试料3的制造方法
将MCT(商品名:スコレ一64G,结构脂肪酸:正辛酸/正癸酸=3/2,日清オイリオグル一プ社制)与LCT(商品名:日清コ一ン油,日清オイリオグル一プ社制)以30:70(质量比)的比例混合,得到混合油。对得到的混合油,通过与制造例2相同的方法进行酯交换反应、脱色以及除臭处理,得到MCT与LCT的酯交换油(MLCT(2))。然后,在10ml 40%的葡萄糖(D(+)-Glucose,和光純薬社制)溶液中,添加2g上述MLCT(2)(商品名:日清キヤノ一ラ油,日清オイリオグル一プ社制)和200mg牛血清白蛋白(SIGMA社制),在冰上将所得溶液一边冷却一边进行超声波处理(两组5分钟,合计10分钟),得到试料3。
在制造例3中得到的MLCT的三酰甘油酯组成以及脂肪酸组成分别在表4以及表5中表示。用与上述相同的方法进行测定。
【表4】
3M0L:分子内的中链脂肪酸残基为3,长链脂肪酸残基为0
2M1L:分子内的中链脂肪酸残基为2,长链脂肪酸残基为1
1M2L:分子内的中链脂肪酸残基为1,长链脂肪酸残基为2
0M3L:分子内的中链脂肪酸残基为0,长链脂肪酸残基为3
【表5】
试验采用7周龄的SD系雄性大鼠(从日本SLC公司购入)。将这些大鼠(19只)驯化饲养一周后,在8周龄以及9周龄时给予试料1以及试料3,用交叉法进行糖负荷试验。饲养条件与试验例1相同。
试验分两组进行,分别为在进行糖负荷试验的同时给予LCT的“LCT给药试验(试料1给药试验)”、和在进行糖负荷试验的同时给予MLCT(2)的“MLCT(2)给药试验(试料3给药试验)”。使用灌胃针经口给予大鼠试料1以及3。每1g体重的大鼠给药量为6μl。应予说明,最终的给药量为每1kg体重的大鼠,分别给予2g以及1g的糖质以及脂质。
然后,在给予前以及给予20分钟后,从大鼠的尾静脉处进行采血,用与试验例1相同的方法测量血浆胰岛素浓度(ng/ml)。试验结果如图1(B)所示。应予说明,MLCT(2)给药试验中的血浆胰岛素浓度增加量,为LCT给药试验中的血浆胰岛素浓度增加量的平均值为100时的相对值(%),以相对值的平均值±标准误差的形式表示。通过Student t-test检定方法进行试验之间的显著性差异检定,显著性水平不足5%判定为具有显著性差异。
如图1(B)所示,MLCT(2)给药试验的血浆胰岛素浓度增加量,与LCT给药试验相比较,显著性增高(p<0.05)。由此可以表明,使用MCT与LCT的酯交换油(MLCT),能促进胰岛素的分泌。应予说明,LCT给药试验的血浆胰岛素浓度增加量的平均值(绝对值)为1.25±0.10ng/ml,MLCT(2)给药试验的血浆胰岛素浓度增加量的平均值(绝对值)为1.50±0.14ng/ml。
[试验例3]胰岛素分泌促进效果的研究(3)
使用进行糖负荷试验的大鼠,以LCT为对照,对MCT的血浆胰岛素分泌促进效果进行研究。
<制造例4>试料4的制造方法
在10ml 40%的葡萄糖(D(+)-Glucose,和光純薬社制)溶液中,添加2gMCT(商品名:O.D.O,结构脂肪酸:正辛酸/正癸酸=3/1,日清オイリオグル一プ社制)和200mg牛血清白蛋白(SIGMA社制),在冰上将所得溶液一边冷却一边进行超声波处理(两组5分钟,合计10分钟),得到试料4。
试验采用7周龄的SD系雄性大鼠(从日本SLC公司购入)。将这些大鼠(18只)驯化饲养一周后,在8周龄以及9周龄时给予试料1以及试料4,用交叉法进行糖负荷试验。饲养条件与试验例1相同。
试验分两组进行,分别为在进行糖负荷试验的同时给予LCT的“LCT给药试验(试料1给药试验)”和在进行糖负荷试验的同时给予MCT的“MCT给药试验(试料4给药试验)”。使用灌胃针经口给予大鼠试料1以及4。每1g体重的大鼠给药量为6μl。应予说明,最终的给药量为每1kg体重的大鼠,分别给予2g以及1g的糖质以及脂质。
然后,给予前以及给予20分钟后,从大鼠的尾静脉处进行采血,用与试验例1相同的方法测量血浆胰岛素浓度(ng/ml)。试验结果如图2所示。应予说明,MCT给药试验中的血浆胰岛素浓度增加量,为LCT给药试验中的血浆胰岛素浓度增加量的平均值为100时的相对值(%),以相对值的平均值±标准误差的形式表示。试验之间的显著性差异通过Student t-test检验法进行检定,显著性水平不足5%判定为具有显著性差异。
如图2所示,MCT给药试验的血浆胰岛素浓度增加量,与LCT给药试验的血浆胰岛素浓度增加量之间,不存在显著性差异。应予说明,LCT给药试验的血浆胰岛素浓度增加量的平均值(绝对值)为1.27±0.12ng/ml,MCT给药试验的血浆胰岛素浓度增加量的平均值(绝对值)为1.34±0.08ng/ml。
[试验例4]胰岛素分泌促进效果的研究(4)
使用进行糖负荷试验的大鼠,以LCT为对照,对MCT与LCT的混合油(MCT+LCT)的血浆胰岛素分泌促进效果进行研究。
<制造例5>试料5的制造方法
将MCT(商品名:O.D.O,结构脂肪酸:正辛酸/正癸酸=3/1,日清オイリオグル一プ社制)和LCT(商品名:日清キヤノ一ラ油,日清オイリオグル一プ社制)以14:86(质量比)的比例混合,得到MCT与LCT的混合油(MCT+LCT)。然后,在10ml 40%的葡萄糖(D(+)-Glucose,和光純薬社制)溶液中,添加2g上述混合油和200mg牛血清白蛋白(SIGMA社制),在冰上将所得溶液一边冷却一边进行超声波处理(两组5分钟,合计10分钟),得到试料5。
试验采用7周龄的SD系雄性大鼠(从日本SLC公司购入)。将这些大鼠(14只)驯化饲养一周后,在8周龄以及9周龄时,给予试料1以及试料5,用交叉法进行糖负荷试验。饲养条件与试验例1相同。
试验分两组进行,分别为在进行糖负荷试验的同时给予LCT的“LCT给药试验(试料1给药试验)”、和在进行糖负荷试验的同时给予MCT与LCT的混合油的“MCT+LCT给药试验(试料5给药试验)”。使用灌胃针经口给予大鼠试料1以及5。每1g体重的大鼠给药量为6μl。应予说明,最终的给药量为每1kg体重的大鼠,分别给予2g以及1g的糖质以及脂质。
然后,在给予前以及给予20分钟后,从大鼠的尾静脉处进行采血,用与试验例1相同的方法测量血浆胰岛素浓度(ng/ml)。试验结果如图3所示。应予说明,MCT+LCT给药试验中的血浆胰岛素浓度增加量,为LCT给药试验中的血浆胰岛素浓度增加量的平均值为100时的相对值(%),以相对值的平均值±标准误差的形式表示。试验之间的显著性差异通过Student t-test检验法进行检定,显著性水平不足5%判定为具有显著性差异。
如图3所示,MCT+LCT给药试验的血浆胰岛素浓度增加量,与LCT给药试验的血浆胰岛素浓度增加量之间,不存在显著性差异。应予说明,LCT给药试验的血浆胰岛素浓度增加量的平均值(绝对值)为1.28±0.18ng/ml,MCT+LCT给药试验的血浆胰岛素浓度增加量的平均值(绝对值)为1.25±0.18ng/ml。
以上试验例1~4的结果表明,MCT与LCT的酯交换油(MLCT)所表现出的血浆胰岛素分泌促进效果,是由MLCT所含的三酰甘油酯中的分子内具有1个或2个中链脂肪酸残基的三酰甘油酯所引起的。
[试验例5]胰岛素抵抗改善效果的研究
采用因长期摄取高脂肪食物而产生胰岛素抵抗症状的模型动物,以LCT为对照,对本发明的油脂组合物(MLCT)的胰岛素抵抗改善效果进行研究。
<制造例6>油脂组合物的制造方法
将MCT(商品名:O.D.O,结构脂肪酸:正辛酸/正癸酸=3/1,日清オイリオグル一プ社制)和LCT(商品名:日清キヤノ一ラ油,日清オイリオグル一プ社制)以14:86(质量比)的比例混合,得到混合油。在所得混合油中添加相对于上述混合油0.1质量%的脂肪酶粉末以后,在60℃的温度下搅拌15小时,使之进行酯交换反应。接下来,从反应的生成物中滤除脂肪酶粉末,将滤液水洗、干燥后,进行脱色、除臭,得到本发明的油脂组合物MCT与LCT的酯交换油(MLCT)。
制造例6中所得MLCT的三酰甘油酯组成以及脂肪酸组成分别如表6以及表7所示。采用与上述相同的方法进行测定。
【表6】
3M0L:分子内的中链脂肪酸残基为3,长链脂肪酸残基为0
2M1L:分子内的中链脂肪酸残基为2,长链脂肪酸残基为1
1M2L:分子内的中链脂肪酸残基为1,长链脂肪酸残基为2
0M3L:分子内的中链脂肪酸残基为0,长链脂肪酸残基为3
【表7】
<制造例7>试验饲料的制造方法
试验饲料以配合AIN93标准食物为基准,使用作为油脂的LCT(商品名:日清キヤノ一ラ油,日清オイリオグル一プ社制)或者制造例6中所得MLCT设计而成。试验饲料的组成如表8所示。首先,混合油脂(LCT或者MLCT)以外的各成分,再将油脂进行混合,均一化后得到试验饲料(LCT食物、MLCT食物)。
【表8】
试验采用胰岛素抵抗性模型大鼠(参考文献:Han et al,Diabetes,46,p1761-p1767,1997)。即,采用Sprague-Dawley系雄性大鼠(从日本SLC社购入),在4周龄~12周龄时,通过让它们摄入如表9所示组成的高脂肪饲料,使其产生胰岛素抵抗性症状。饲养期间,在温度23±1℃、湿度50±10%、12小时明暗循环周期(8:00~20:00照明)的环境下,在不锈钢制的网箱中单独饲养。让其自由摄取水以及高脂肪饲料。
【表9】
*:商品名“日清キヤノ一ラ油”,日清オイリオグル一プ社制
上述30只胰岛素抵抗性模型大鼠,按照体重、血糖值、以及血浆胰岛素浓度平均的方式分为两组(每组各15只),即:分别为食用LCT食物的“LCT食物摄食组(对照组)”、和食用MLCT食物的“MLCT食物摄食组”。应予说明,采用グルコ一ス C2 テストワコ一(和光純薬工業社制)测量血糖值,采用Ratinsulin ELISA试剂盒(Mercodia社制)测量胰岛素浓度,对各大鼠的尾静脉血进行分析。
分组完成后,在温度23±1℃、湿度50±10%、12小时明暗循环周期(8:00~20:00照明)的环境下,在不锈钢制的网箱中单独饲养。让其自由食用水以及试验饲料。
本研究中,为确认胰岛素抵抗性的改善效果,让胰岛素抵抗性模型大鼠食用试验饲料6周后,进行口服糖负荷试验,对糖负荷后的血糖值以及血浆胰岛素浓度的经时变化进行解析。即,对禁食一晚(16小时)的大鼠,按每1kg体重经口给予1.5g葡萄糖,在给予前、给予30分钟后、60分钟后、120分钟后从大鼠的尾静脉处采血,测量血糖值以及胰岛素浓度。应予说明,采用グルコ一スC2テストワコ一(和光純薬工業社制)测量血糖值,采用Rat insulin ELISA试剂盒(Mercodia社制)测量胰岛素浓度。从基于测量值制成的血糖值以及胰岛素浓度的经时变化曲线图,计算出曲线下面积(Area under the Curve:AUC),将该计算出的值分别作为糖负荷后的血糖值以及血浆胰岛素浓度的变化量。然后,计算出各组变化量的平均值±标准误差,用Student t-test检验法对各组间的显著性差异进行检定,显著性水平不足5%判定为具有显著性差异。结果如表10所示。
【表10】
**在统计学上与LCT食物摄食组之间具有显著性差异(p<0.01)
如表10所示,血糖值AUC在LCT食物摄食组与MLCT食物摄食组之间不存在显著差异,但MLCT食物摄食组的胰岛素浓度AUC与LCT食物摄食组相比,有显著性降低。即,MLCT食物摄食组分泌的胰岛素比LCT食物摄食组少,却能维持与LCT食物摄食组相同的血糖值,可以认为通过摄入MLCT,能改善胰岛素抵抗性。
业界认为肥胖尤其是内脏脂肪的蓄积,导致来自脂肪细胞的具有胰岛素敏感性促进作用的脂联素(adiponectin)不能正常分泌,是产生胰岛素抵抗性症状的原因之一(Kadowaki et al,J Clin Invest,116,p1784-p1792,2006)。因此,对伴随着大鼠胰岛素抵抗改善的脂联素的分泌量、以及内脏脂肪量的变化进行研究。
对食用试验饲料6周后且进行口服糖负荷试验之前的上述大鼠进行血浆脂联素浓度的测量。即,在即将给予大鼠葡萄糖前,进行尾静脉采血,对所得血液以3000rpm进行10分钟的离心分离,取上清液的血浆。血浆中的脂联素浓度采用ELISA法(小鼠/大鼠脂联素ELISA试剂盒,大塚製薬社制)进行测量。然后,计算出就各组测量值的平均值±标准误差,用Student t-test检验法对各组间的显著性差异进行检定,显著性水平不足5%判定为具有显著性差异。结果如表11所示。
【表11】
*在统计学上与LCT食物摄食组之间具有显著性差异(p<0.05)
如表11所示,MLCT食物摄食组与LCT食物摄食组相比,血浆脂联素浓度显著升高。由此可知,MLCT食物摄食组通过食用MLCT,可以恢复脂联素的分泌,并且由于脂联素的胰岛素敏感性的促进作用,使胰岛素抵抗性得到改善。
接下来,对进行了上述口服糖负荷试验后的上述大鼠进行内脏脂肪量、体重增加量以及试验饲料食用量的测量。将口服糖负荷试验后食用了2天试验饲料的大鼠在乙醚麻醉下放血处死。摘除副睾丸脂肪、肾周围脂肪以及肠间膜脂肪,测量各部分重量,分别作为副睾丸脂肪量、肾周围脂肪量、肠间膜脂肪量。此外,以副睾丸脂肪量、肾周围脂肪量、肠间膜脂肪量的总脂肪量作为内脏脂肪量。测量每个大鼠在开始给予试验饲料时的体重和解剖之前的体重,两者的差值便是体重增加量。测量每个大鼠在饲养期间所食用的试验饲料的总量,除以饲养天数,算出每天平均食用量便是试验饲料食用量。然后,计算出各组变化量的平均值±标准误差,用Student t-test检验法对各组间的显著性差异进行检定,显著性水平不足5%判定为具有显著性差异。内脏脂肪量的测量结果如表12所示,体重增加量以及试验饲料食用量的测量结果如表13所示。
【表12】
*在统计学上与LCT食物摄食组之间具有显著性差异(p<0.05)
【表13】
如表12所示,内脏脂肪量在LCT食物摄食组与MLCT食物摄食组之间不存在显著性差异,但与LCT食物摄食组相比,MLCT食物摄食组的肠间膜脂肪量显著降低。因此,可以认为MLCT有助于脂联素分泌的恢复。应予说明,如表13所示,LCT食物摄食组以及MLCT食物摄食组的体重增加量程度相同,未发现因试验饲料不同而导致食用量或成长的不同。
产业上的可利用性
本发明的油脂组合物对糖尿病患者中出现的胰岛素分泌不全或胰岛素抵抗性等症状的改善有效,可以利用到用于糖尿病的医疗或食品领域。
Claims (5)
1.一种用于预防或治疗糖尿病的油脂组合物,其特征在于:含有三酰甘油酯作为有效成分,该三酰甘油酯在分子内含有1个或者2个中链脂肪酸残基,
并且,该三酰甘油酯含有碳原子数6~10的中链脂肪酸和碳原子数16~24的长链脂肪酸作为结构脂肪酸。
2.如权利要求1所述的油脂组合物,其中,所述三酰甘油酯的结构脂肪酸由碳原子数6~10的中链脂肪酸和碳原子数16~24的长链脂肪酸构成。
3.如权利要求1或2所述的油脂组合物,其中,所述中链脂肪酸为碳原子数为8和/或10的饱和脂肪酸。
4.一种食品,其含有如权利要求1~3中任1项所述的油脂组合物。
5.一种油脂组合物的用途,该用途用于制造预防或治疗糖尿病的药品,其中,所述油脂组合物含有三酰甘油酯作为有效成分,该三酰甘油酯在分子内含有1个或者2个中链脂肪酸残基,并且,该三酰甘油酯含有碳原子数6~10的中链脂肪酸和碳原子数16~24的长链脂肪酸作为结构脂肪酸。
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