CN102772469B - 一种预防或治疗老年性痴呆的药物组合物 - Google Patents
一种预防或治疗老年性痴呆的药物组合物 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供了一种预防或治疗老年痴呆功能的药物组合物。具体而言,本发明提供了一种药物组合物是由刺五加提取物、红景天提取物组成,并将其用于预防或治疗老年痴呆。本发明还提供该药物组合物的制备方法,生产工艺简单;本发明提供的药物组合物服用剂量小,使用方便,副作用小。
Description
技术领域
本发明涉及中药药物组合物领域,具体地说涉及一种用于预防或治疗老年痴呆症的药物组合物。
背景技术
老年痴呆可分为阿尔茨海默病(AD)和血管性痴呆及两者并存的混合型痴呆症,发生于老年期及老年前期的一种原发性退行性脑病,是一种持续性高级神经功能活动障碍,在临床表现为认知和记忆功能不断恶化,日常生活能力进行性减退,并有各种神经精神症状和行为障碍等症状。老年痴呆症是发病率比较高的疾病,世界卫生组织的资料表明,目前全球患老年痴呆症的老年人大约有2000万,可见老年痴呆已经威胁人类晚年健康,降低晚年生活质量,同时给社会和家庭带来了严重的经济负担和沉重的精神压力,随着世界向老龄社会迈进的步伐不断加快,预计到2020年,全球老年痴呆症患者将超过3000万人。因此开发治疗老年痴呆的药物受到中西方医学工作者的高度重视。
目前,治疗老年性痴呆症的药物主要为乙酰胆碱酯酶(AchE)抑制剂、抗免疫炎症、钙离子拮抗剂、抗氧化剂等药物,美国食品药品管理局已批准上市的药物如多奈哌齐、加兰他敏、尼莫地平、盐酸美金刚等,这些药物只能暂时缓解患者认识功能减退,但不能延缓疾病发展,而且上述有些药物具有严重的肝、肾毒性等不良反应,有些药物价格昂贵,患者及其家属难以承受,所以仍需要开发良好疗效,毒副作用小,且价格适宜的新药物。近年来,国内外专家学者开始关注中药与天然药物,并尝试进行治疗老年痴呆的研究。现代中医学认为,老年痴呆是一种以本虚标实为特征的老年常见疾病,其本虚主要在于肾精不足,髓海亏虚,清阳不升;肾亏是老年痴呆的发病根本,五脏不足与老年痴呆发病关系密切,因此多用补肾益精法治疗。
《中草药大全》记载:刺五加具有益气健脾,补肾安神。用于脾肾阳虚,体虚乏力,食欲不振,腰膝酸痛,失眠多梦;《本草纲目》记载:红景天滋补、强身作用是“已知补益药中罕见的”,因而誉之为“东方神草”、“黄金植物”。中国专利CN1528387A公开了红景天提取物用于治疗老年痴呆,但是其仅仅研究了不同提取方法获得的红景天提取物治疗老年性痴呆的效果;CN101810656A公开了经特定的提取方法获得特定的刺五加提取物用于防治老年痴呆,但是对刺五加提取物的纯度要求很高。目前,中药用来治疗老年痴呆的药物多为大处方,组分十分复杂如CN101269174A、CN101229293A、CN1266707A、CN1181966A、CN1478498A等,因此,寻找组分简单、疗效确切的中药处方变得十分重要。
发明内容
本发明需要解决的技术问题之一是提供一种组分简单、疗效确切的治疗或预防老年性痴呆的药物组合物。
为了解决上述技术问题,本发明采取了以下技术方案:
本发明一方面提供了一种预防和/或治疗老年性痴呆的药物组合物,其特征在于由以下重量配比的组分组成:刺五加提取物1~4份,红景天提取物1~4份;优选为刺五加提取物1~3份,红景天提取物1~3份;更优选为刺五加1份,红景天1份。
其中所述的刺五加提取物的制备方法为取刺五加生药粉,加6~10倍体积的水煎煮提取3次,过滤,合并滤液,减压浓缩、干燥,得到刺五加提取物;所述的红景天提取物的制备方法为取红景天生药粉,用4~8倍体积的50~75%乙醇提取3次,过滤,合并滤液,减压浓缩,过D140大孔树脂,用30~95%乙醇洗脱,减压浓缩、干燥,得到红景天提取物。
其中所述的老年性痴呆为阿尔茨海默病或遗传性老年痴呆。
本发明另一方面还提供了上述药物组合物在制备改善认知记忆功能障碍的药物中的用途。
本发明再一方面提供了上述药物组合物与药学上可接受的载体或赋形剂组成药物制剂;其中所述的药物制剂为胶囊、片剂、颗粒剂。
本发明与现有技术相比其优势在于:
1、本发明中首次提出用刺五加提取物和红景天提取物进行组合用于治疗或预防老年痴呆,二者之间具有协调增效作用,疗效确切明显。
2、该药物组合物生产工艺简单、服用剂量小、使用方便、副作用小、价格低廉。
具体实施方式
以下实施例是对本发明的进一步解释,并不能作为对本发明保护范围的进一步限制。
实施例1药物组合物的制备
1、刺五加提取物制备
取刺五加生药粉,加水煎煮提取3次,第一次加8倍体积水煎煮2小时过滤,第二次加8倍体积水煎煮2小时过滤,第三次加8倍体积水煎煮2小时过滤,合并滤液,减压浓缩、干燥,得到刺五加提取物。
2、红景天提取物的制备
取红景天原生药粉,加70%(v/v)乙醇加热回流提取3次,第1次加8倍量70%乙醇,提取2小时;第2次加6倍量70%的乙醇,提取1小时,第3次加4倍量70%的乙醇,提取1小时,合并3次提取药液,滤过,滤液减压浓缩至相对密度为1.20(55-70℃),过D140大孔树脂,用60%乙醇洗脱,减压浓缩、干燥,得到红景天提取物。
3、药物组合物的制备
取1、2制备的刺五加提取物和红景天提取物分别按重量比1∶4、1∶3、1∶1、3∶1或4∶1的比例混合均匀后即得相应质量配比的药物组合物。
实施例2药物组合物的制备
1、刺五加提取物制备
取刺五加生药粉,加水煎煮提取,第一次加6-10倍体积水煎煮1-3小时过滤,第二次加6-10倍体积水煎煮1-3小时过滤,第三次加6-10倍体积水煎煮0-3小时过滤,合并滤液,减压浓缩、干燥,得到刺五加提取物。
2、红景天提取物的制备
取红景天原生药粉,加50-75%(v/v)乙醇加热回流提取,第1次加4-8倍量50-75%乙醇,提取1-3小时;第2次加4-8倍量50-75%的乙醇,提取1-2小时,第3次加4-8倍量50-75%的乙醇,提取0-2小时,合并提取药液,滤过,滤液减压浓缩至相对密度为1.10-1.20(55-70℃),过大孔树脂,用30-95%乙醇洗脱,减压浓缩、干燥,得到红景天提取物。
3、药物组合物的制备
取1、2制备的刺五加提取物和红景天提取物分别按重量比1∶4、1∶3、1∶1、3∶1或4∶1的比例混合均匀后即得相应质量配比的药物组合物。
实施例3制备刺五加提取物与红景天提取物药物组合物胶囊
取药物组合物100g,淀粉50g,β环糊精100g混匀,制粒过筛,干燥后装入胶囊制成药物组合物胶囊剂。
实施例4制备刺五加提取物与红景天提取物药物组合物片剂
取药物组合物100g,淀粉50g,β环糊精100g混匀,制粒过筛,干燥后压片制成药物组合物片剂。
实施例5制备刺五加提取物与红景天提取物药物组合物颗粒剂
取药物组合物100g,β环糊精300g,蔗糖50g混匀,制粒,干燥,整粒混合即得药物组合物颗粒剂。
实施例6药物组合物对AchE的体外活性的影响
1、试验方法
采用DTNB法测定乙酰胆碱酯酶活性,采用药物组合物A(刺五加提取物∶红景天提取物质量配比为1∶1)、药物组合物B(刺五加提取物∶红景天提取物质量配比为1∶3)、药物组合物C(刺五加提取物∶红景天提取物质量配比为3∶1),取药物组合物A、B、C分别溶解后稀释成不同浓度(50ug/ml、25ug/ml、12.5ug/ml、6.25ug/ml、3.12ug/ml、1.56ug/ml、0.78ug/ml、0.39ug/ml、0.195ug/ml、0.098ug/ml、0.049ug/ml)的待测液,采用200μL总反应体积,其中底物(硫代乙酰胆碱)、酶溶液(乙酰胆碱酯酶)、显色剂(DTNB)浓度(体积)依次为:3.75×10-5mM(25μL)、0.0055U(25μL)、3.75×10-5mM(125μL),反应时间为60min,反应温度为37℃,反应终止于410nm测定OD值。
2、试验结果(表1)
表1各个药物体外AchE抑制作用的影响(IC50)
注:IC50表示仰制率为50%时药物浓度
表1结果表明,各组药物在一定浓度内对AchE均有抑制作用,药物组合物抑制作用明显优于单味用药,其中药物组合物A(刺五加提取物∶红景天提取物质量配比为1∶1)效果更优。
实施例7药物组合物对β-分泌酶的体外活性影响
1、试验方法
采用荧光测定法,称取药物组合物A(刺五加提取物∶红景天提取物质量配比为1∶1)、药物组合物B(刺五加提取物∶红景天提取物质量配比为1∶3)、药物组合物C(刺五加提取物∶红景天提取物质量配比为3∶1)溶解后稀释成不同浓度(50ug/ml、25ug/ml、12.5ug/ml、6.25ug/ml、3.12ug/ml、1.56ug/ml、0.78ug/ml、0.39ug/ml、0.195ug/ml、0.098ug/ml、0.049ug/ml)的待测液,采用100μL总反应体积,反应体系中(每孔)底物(BACE1)、酶(β-分泌酶)溶液量分别为:50μM(10μl)、0.1U/μL(15μL),样品稀释采用DMSO,反应时间为120min,反应温度为室温,采用激发光320nm,发射光405nm为最佳检测波长对荧光值进行检测。
2、试验结果(表2)
表2各个药物对β-分泌酶抑制作用的影响(IC50)
注:IC50表示抑制率为50%时药物浓度
表2结果表明,各组药物一定浓度内对β-分泌酶有抑制作用,药物组合物抑制作用明显优于单味用药,其中药物组合物A(刺五加提取物∶红景天提取物质量配比为1∶1)对β-分泌酶有抑制效果更优。
实施例8本发明药物组合对APPswe老年痴呆转基因小鼠的影响
1、试验方法
给药方法:取APPswe老年痴呆转基因小鼠,雌雄各半,试验前用小鼠跳台仪筛选出合格小鼠(小鼠在通电的平板上能找到并跳上安全平台),随机分为7组,APPswe阳性对照组(模型组)、石杉碱甲片(河南太龙药业股份有限公司,批号:09503,规格:0.3mg/片)组、组合物A组(刺五加提取物∶红景天提取物质量配比为1∶1)、组合物B组(刺五加提取物∶红景天提取物质量配比为1∶3)、组合物C组(刺五加提取物∶红景天提取物质量配比为3∶1)、刺五加提取物组、红景天提取物组,另设APPswe阴性对照组(未患老年痴呆APPswe正常小鼠),每组10只。各组均采用灌胃给药,石杉碱甲片组给予剂量为0.067mg/kg,其余给药组给药剂量为300mg/kg,APPswe阴性对照组和APPswe阳性对照组给予0.5%CMC,每日1次,给药体积为0.2ml/10g,连续30天,用于小鼠跳台检测。用同等方法分组给药,连续灌胃30天用于水迷宫行为学检测。
APPswe小鼠跳台检测:各组APPswe小鼠于末次给药后采用小鼠跳台仪进行行为学测试,在测定前一天对各组小鼠用跳台仪进行训练(小鼠在通电的平板上能找到并跳上安全平台),第二天先将小鼠放在通电平台上,测定小鼠找到并跳上平台所需时间(潜伏期)。
APPswe小鼠水迷宫定航行为学检测:各组APPswe小鼠在给药第25~29天进行水迷宫训练,每天训练2次,入池位置为站台所对象限以及所邻象限,于象限边1/2弧度处将小鼠头朝池壁放入水中,设置120s为最大潜伏时间,120s后将自动停止记录,如果动物找到并爬上站台后,让其停留20s,如果动物入水后120s未找到站台者,将其引导至站台,放置20s引导其学习与记忆。于第30天给药1h进行水迷宫测试,各组均采用定航的实验作为量化指标观察大鼠学习记忆能力。
2、试验结果
2.1药物组合物对APPswe老年痴呆转基因小鼠跳台试验潜伏期的影响(结果见表3)
表3各给药组对APPswe老年痴呆转基因小鼠跳台仪潜伏期的影响
注:与阳性对照组比较,*P<0.05,**P<0.01;与刺五加提取物组比较,#P<0.05,##P<0.01;与红景天提取物组比较,^P<0.05,^^P<0.01。
表3结果表明,刺五加提取物、红景天提取物及其组合物A、组合物B、组合物C、石杉碱甲片给药30天明显缩短痴呆APPswe小鼠跳到安全平台的潜伏期提高痴呆小鼠的记忆能力。药物组合物改善痴呆小鼠记忆能力的作用明显优于刺五加提取物、红景天提取物单味给药,并且药物组合物A与刺五加提取物、红景天提取物单味给药组比较具有显著性差异。
2.2药物组合物对APPswe小鼠水迷宫试验潜伏期的影响(结果见表4)
注:与阳性对照组比较,*P<0.05,**P<0.01。
表4结果表明,刺五加提取物、红景天提取物及其组合物A、组合物B、组合物C、石杉碱甲片给药30天明显缩短痴呆APPswe小鼠找到站台的潜伏期改善痴呆小鼠的记忆能力。药物组合物组改善痴呆小鼠记忆能力的作用明显优于刺五加提取物、红景天提取物单味给药组,并且药物组合物A与刺五加提取物、红景天提取物单味给药组比较具有显著性差异。
实施例9本发明药物组合对Aβ1-42致大鼠痴呆模型的影响
1、试验方法
给药方法:选取健康,筛选合格的SD大鼠,雌雄各半,按体重随机分别设立正常对照组组,假手术组,模型组,石杉碱甲片组,药物组合A组(刺五加提取物∶红景天提取物质量配比为1∶1),药物组合B组(刺五加提取物∶红景天提取物质量配比为1∶3),药物组合C组(刺五加提取物∶红景天提取物质量配比为3∶1),刺五加提取物组,红景天提取物组,共9组,每组12只。其中正常对照组,假手术组,模型对照组灌胃给予0.5%CMC,给药组给予相应的药物,石杉碱甲片组给药剂量为0.045mg/kg,其余给药组给药剂量为300mg/kg,给药体积均为1ml//100g,每日1次,药物均用0.5%CMC溶媒配制。
AD模型建立:各组大鼠连续灌胃给药6周后,大鼠用水合氯醛(300mg/kg)腹腔注射麻醉后,固定于脑立体定位仪上,颅顶正中切开暴露至颅骨,根据大鼠颅脑立体定位图谱,对基底前脑立体定位(位置:前囟后3.8mm,中线旁开2.5mm,深度3.0mm),用牙科钻钻开颅骨,模型对照组和给药组用5ul微型进样器注射针4-5min内缓慢注入10mg/ml的Aβ1-42液5ul,予以留针3min。假手术组注入等体积生理盐水,注射完毕后以牙托粉封闭针孔,缝合皮肤,正常对照组不做任何处理。术后给予青霉素4×104U/d,连续3d。
行为学检测试验:待AD造模4天后采用水迷宫进行其行为学训练,每天训练2次,于第七天进行水迷宫测试,记录相关实验成绩,水迷宫由圆形水池、黑色站台和记录系统组成,将水池沿两中线分为四象,每日将大鼠头朝池壁从2个不同入水点分别放入水池,站台置于一象限中央,站台隐藏于水面下1cm,实验过程保持站台位置不变自动摄像系统将记录大鼠寻找到站台的时间(逃避潜伏期)和游泳路径(总路程),设置120s为最大潜伏时间,120s后将自动停止记录。训练中如果大鼠在120s内找到站台,让其在站台上停留20s,如果动物未找到站台,将其放在站台上使其停留20s,20s后将其从平台上拿下,休息一分钟后再次开始训练。第7日开始将平台转移到二象限,记录动物入水后找到迁移后的平台的逃避潜伏期和搜索路径,计算在原来平台位置所逗留的时间和路径占潜伏期和总搜索路径百分比。各组均采用定航的实验作为量化指标反应大鼠学习记忆能力。
2、试验结果
注:与模型对照组比较,*P<0.05,**P<0.01;与刺五加提取物比较,#P<0.05,##P<0.01;与红景天提取物组比较,^P<0.05,^^P<0.01;与石杉碱甲片组比较,△P<0.05,△△P<0.01。
注:与模型对照组比较,**P<0.01;与刺五加提取物比较,##P<0.01;与红景天提取物组比较,,^P<0.05,^^P<0.01;与石杉碱甲片组比较,△P<0.05,△△P<0.01。
结果由表5和表6表明:经过大鼠水迷宫定航及空间探索试验,刺五加、红景天及其药物组合物、石杉碱甲片均能缩短AD模型大鼠的逃避潜伏时间和搜索路程,同时可以增加AD模型大鼠在原站台所在象限搜索时间和路程占总时间和路程的比,并且药物组合物A组的作用明显优于石杉碱甲片和同等剂量单味用药组。
实施例10本发明药物组合对AlCl3致小鼠痴呆学习记忆的影响
1、试验方法
给药方法:取KM小鼠,雌雄各半,试验前采用小鼠跳台仪筛选出合格小鼠(小鼠在通电的平板上能找到并跳上安全平台),分别设立正常对照组组,模型对照组,石杉碱甲片组,药物组合A组(刺五加提取物∶红景天提取物质量配比为1∶1),药物组合B组(刺五加提取物∶红景天提取物质量配比为1∶3),药物组合C组(刺五加提取物∶红景天提取物质量配比为3∶1),刺五加提取物组,红景天提取物组,共8组,每组14只。正常对照每天灌胃给予蒸馏水,其余各组每天上午灌胃给AlCl3,剂量为200mg/kg,连续49天;给药组,从AlCl3灌胃第7天起上午给予AlCl3灌胃外,每日下午给予相应的药物,石杉碱甲片组给予剂量为0.067mg/kg,其余给药组给药剂量为300mg/kg,每日1次,连续42天。AlCl3、药物灌胃体积均为0.2mL/10g体重。
行为学检测试验:上述各组小鼠在灌胃给药21天、28天、35天、42天时采用小鼠跳台仪测定其行为学,各试验组小鼠于测定前一天采用小鼠跳台仪进行训练(小鼠在通电的平板上能找到并跳上安全平台),第二天首先将小鼠放在通电平台上,测定小鼠找到并跳上平台所需时间(潜伏期时间)。测定参数:电压=28v,时间=1min,不刺激时间L=1s,连续刺激时间为2s。
2、试验结果
表7各组药物对AlCl3致AD模型小鼠跳台试验潜伏时间的影响
注:与模型组比较:*P<0.05,**P<0.01;与刺五加提取物比较:#P<0.05,##P<0.01;与红景天提取物比较:^P<0.05,^^P<0.01;与石杉碱甲片组比较:△P<0.05,△△P<0.01。
表7结果表明,经过AlCl3致小鼠痴呆跳台试验,刺五加提取物、红景天提取物及其组合物A、组合物B、组合物C、石杉碱甲片明显缩短痴呆小鼠跳到安全平台的潜伏期提高痴呆小鼠的记忆能力。在给药第21、28、35、42天,药物组合物组改善痴呆小鼠记忆能力的作用明显优于刺五加提取物、红景天提取物单味给药组和石杉碱甲片组,并且药物组合物A与刺五加提取物、红景天提取物单味给药组比较具有显著性差异;在给药第28、35、42天时,药物组合物A与石杉碱甲片比较具有显著性差异,在给药第35、42天时,药物组合物B与石杉碱甲片、刺五加提取物、红景天提取物比较也具有显著性差异。
Claims (9)
1.一种预防或治疗老年性痴呆的药物组合物,其特征在于由以下重量配比的组分组成:刺五加提取物1~3份,红景天提取物1~3份。
2.根据权利要求1所述的药物组合物,其特征在于:所述药物组合物由以下重量配比的组分组成:刺五加提取物1份,红景天提取物1份。
3.根据权利要求1~2任一项所述的药物组合物,其特征在于:所述的刺五加提取物的制备方法为取刺五加生药粉,加6~10倍体积的水煎煮提取3次,过滤,合并滤液,减压浓缩、干燥,得到刺五加提取物。
4.根据权利要求1~2任一项所述的药物组合物,其特征在于:所述的红景天提取物的制备方法为取红景天生药粉,用4~8倍体积的50~75%乙醇提取3次,过滤,合并滤液,减压浓缩,过D140大孔树脂,用30~95%乙醇洗脱,减压浓缩、干燥,得到红景天提取物。
5.根据权利要求1~2任一项所述的药物组合物,其特征在于所述的刺五加提取物的制备方法为取刺五加生药粉,加水煎煮提取3次,第一次加8倍体积水煎煮2小时过滤,第二次加8倍体积水煎煮2小时过滤,第三次加8倍体积水煎煮2小时过滤,合并滤液,减压浓缩、干燥,得到刺五加提取物;所述的红景天提取物的制备方法为取红景天生药粉,提取3次,第1次加8倍量70%乙醇,提取2小时;第2次加6倍量70%的乙醇,提取1小时,第3次加4倍量70%的乙醇,提取1小时,合并3次提取药液,滤过,滤液减压浓缩至相对密度为1.20,过D140大孔树脂,用30~95%乙醇洗脱,减压浓缩、干燥,得到红景天提取物。
6.根据权利要求1-2任一项所述的药物组合物,其特征在于所述的老年性痴呆为阿尔茨海默病或遗传性老年痴呆。
7.权利要求1-2的药物组合物在制备改善认知记忆功能障碍的药物中的用途。
8.权利要求1-2的药物组合物与药学上可接受的载体或赋形剂组成药物制剂。
9.根据权利要求8所述的药物制剂,其特征在于所述的药物制剂为胶囊、片剂、颗粒剂。
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